專利名稱：基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微的方法及其裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及熒光顯微技術(shù)，尤其是涉及基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃 描顯微的方法及其裝置。
背景技術(shù)：
熒光顯微技術(shù)已經(jīng)成為生命科學(xué)，尤其是細(xì)胞生物學(xué)研究的重要工具。 近年來，隨著生命科學(xué)的發(fā)展，對熒光顯微技術(shù)也提出了越來越高的要求， 激光技術(shù)、熒光探針標(biāo)記技術(shù)、新型熒光探測技術(shù)和成像手段的不斷發(fā)展， 成為推動(dòng)生命科學(xué)發(fā)展的重要?jiǎng)恿?。激光掃描共焦顯微和多光子激發(fā)熒光 顯微技術(shù)可用于實(shí)現(xiàn)生物樣品的高空間分辨三維成像。但它們共有的缺點(diǎn) 是要對樣品進(jìn)行逐點(diǎn)掃描，因此成像速度低，不利于活體測量。目前有多 種方法研究如何提高采集速度，例如增加熒光團(tuán)濃度或激發(fā)光強(qiáng)度等，但 這些受到所研究生物樣品的限制，過高的熒光團(tuán)濃度會千擾生物樣品的正 常功能，同時(shí)會對樣品產(chǎn)生毒性，因此不利于生物學(xué)研究。
近年來發(fā)展起來的多焦點(diǎn)多光子顯微技術(shù)(multifocal multiphoton microscopy,簡稱MMM)采用微透鏡陣列、Nipkow盤、分光鏡或衍射光 學(xué)元件(diffmctive optical element,簡稱DOE)等方法產(chǎn)生多個(gè)激發(fā)光點(diǎn)， 對樣品進(jìn)行多焦點(diǎn)并行激發(fā)，并對熒光信號同時(shí)探測，使成像速度得到顯 著提高，不但可以實(shí)現(xiàn)生物樣品的實(shí)時(shí)多光子激發(fā)顯微成像，還可以用眼 睛通過目鏡直接觀察。MMM技術(shù)是多光子激發(fā)熒光顯微向高速三維成像 發(fā)展的一個(gè)必然，這是因?yàn)樗谔岣叱上袼俣鹊耐瑫r(shí)，也提高了多光子激 發(fā)熒光顯微對光源光能的利用率。多光子激發(fā)熒光顯微技術(shù)所用光源一般 是超短脈沖鎖模激光器，如鈦寶石鎖模飛秒激光器，其所輸出激光脈沖的 寬度一般為lOOfs左右，重復(fù)頻率大約80MHz，平均功率l-2W。而實(shí)際 上，受樣品非線性損傷的限制，傳統(tǒng)的單點(diǎn)掃描多光子激發(fā)熒光顯微為了 達(dá)到足夠的光子數(shù)密度所需的光功率大約為3-10mW。因此，對光能的利 用率不足5%。而MMM技術(shù)將鈦寶石鎖模飛秒激光器發(fā)出的光脈沖分為 空間上分離的多個(gè)子光束，提高了光能的利用率，而且，這種并行的測量 過程并沒有顯著影響空間分辨率。目前，MMM技術(shù)已經(jīng)用于生物樣品的 熒光壽命三維成像以及活體細(xì)胞的動(dòng)態(tài)成像。
一般的激光掃描共焦顯微鏡， 一旦物鏡確定，其中間像面大小固定。
如果取樣像素?cái)?shù)量不變，只需通過改變振鏡掃描角度來控制掃描樣品的區(qū) 域，就可以按照不同的取樣精度和放大倍率對樣品進(jìn)行觀察，這是一種電
子放大。但是，在MMM技術(shù)中采用陣列點(diǎn)并行掃描實(shí)現(xiàn)多焦點(diǎn)顯微成像， 由于產(chǎn)生陣列點(diǎn)的光學(xué)元件如微透鏡陣列或DOE的光學(xué)特性參數(shù)是固定 的，同時(shí)中間光學(xué)系統(tǒng)一般也是不變的，因此，如果采用傳統(tǒng)的光柵型掃 描方式和圖像重構(gòu)方法，就使掃描系統(tǒng)只能在特定的系統(tǒng)參數(shù)下工作，如 特定的掃描區(qū)域、特定的分辨率、特定的物鏡等。迄今所發(fā)展的MMM系 統(tǒng)，都是針對固定的物鏡配置而設(shè)計(jì)的，為了避免相鄰光束之間產(chǎn)生串?dāng)_， 相鄰焦點(diǎn)間的距離一般在6-9pm。由于是陣列點(diǎn)掃描，MMM系統(tǒng)不可能 實(shí)現(xiàn)單點(diǎn)掃描系統(tǒng)中的電子放大，因此其視場范圍和分辨本領(lǐng)單一，限制 了它在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是彌補(bǔ)上述缺陷，提出一種基于固定光路 系統(tǒng)的變視場掃描顯微的方法以及一種基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯 微的裝置。
本發(fā)明的技術(shù)問題通過以下技術(shù)方案予以解決。
這種基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微方法的特點(diǎn)在于包括以下步
驟
(1 )使用擴(kuò)束系統(tǒng)對激光器輸出的高重復(fù)頻率超短脈沖激光束進(jìn)行均 勻擴(kuò)束，形成均勻激光束；
(2) 使用兩維空間離散系統(tǒng)對均勻激光束作兩維空間離散化處理，形 成MXN束子光束；.
(3) 使MXN子光束依次經(jīng)過準(zhǔn)直透鏡、掃描振鏡、反射鏡、雙色鏡、 熒光顯微鏡后聚焦到放置在樣品平臺上的樣品上，在樣品的預(yù)定區(qū)域上形 成熒光材料的兩維分布的多光子激發(fā)熒光；
(4) 熒光顯微鏡收集激發(fā)的熒光，依次經(jīng)過雙色鏡反射和聚焦透鏡聚 焦到圖像成像系統(tǒng)。
步驟(3)中通過樣品平臺在x-y平面的移動(dòng)實(shí)現(xiàn)成像視場的移動(dòng)，通 過樣品平臺在z方向的移動(dòng)，選擇不同的測量深度并實(shí)現(xiàn)對樣品的聚焦。 所述樣品平臺在x-y平面的移動(dòng)是以單元視場區(qū)域?yàn)椴介L的移動(dòng)。 步驟(3)中通過改變掃描振鏡掃描步長，獲得不同的空間分辨率。 所述MXN束子光束中，M>1， N>1。
所述激光器輸出的高重復(fù)頻率超短脈沖激光束的波長在700 nm -lOOOnm范圍內(nèi)、重復(fù)頻率在50MHz-500MHz范圍內(nèi)可調(diào)。
這種基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置，包括激光器、擴(kuò)束系 統(tǒng)、兩維空間離散系統(tǒng)、準(zhǔn)直透鏡、反射鏡、雙色鏡、熒光顯微鏡、樣品 平臺、聚焦透鏡和圖像成像系統(tǒng)，激光器發(fā)出的激光依次經(jīng)擴(kuò)束系統(tǒng)、兩 維空間離散系統(tǒng)、準(zhǔn)直透鏡、反射鏡、雙色鏡、熒光顯微鏡聚焦在設(shè)置在 樣品平臺上的樣品上，樣品上的熒光材料發(fā)出的熒光經(jīng)雙色鏡反射、聚焦 透鏡聚焦到圖像成像系統(tǒng)。
這種基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置的特點(diǎn)在于還包括設(shè) 置在準(zhǔn)直透鏡和反射鏡間的掃描振鏡；所述兩維空間離散系統(tǒng)對激光器發(fā) 出的激光束作兩維空間離散化處理，形成MXN束子光束并穿過準(zhǔn)直透鏡 后形成MXN束平行子光束；所述的掃描振鏡對MXN束平行子光束進(jìn)行步 進(jìn)掃描。
所述樣品平臺為微位移樣品平臺，所述微位移樣品平臺可以實(shí)現(xiàn)在x-y 平面的移動(dòng)和在z方向的移動(dòng)，所述掃描振鏡對MXN束平行子光束進(jìn)行 步長可變的步進(jìn)掃描。
所述激光器為高重復(fù)頻率超短脈沖激光器。 所述高重復(fù)頻率超短脈沖激光器為鈦寶石鎖模飛秒激光器。 所述兩維空間離散系統(tǒng)為微透鏡陣列、Nipkow盤、分光鏡、衍射光學(xué) 元件的一種。
所述經(jīng)過兩維空間離散系統(tǒng)形成的MXN束子光束的MXN個(gè)焦點(diǎn)在兩 維空間離散系統(tǒng)的焦平面上等距排列。
所述熒光顯微鏡為多光子激發(fā)共焦顯微鏡。
所述圖像成像系統(tǒng)為像增強(qiáng)型CCD相機(jī)，所述像增強(qiáng)型CCD相機(jī)包 括CCD相機(jī)和像增強(qiáng)器，CCD相機(jī)和像增強(qiáng)器之間通過光學(xué)透鏡或者光 錐實(shí)現(xiàn)光耦合。
所述圖像成像系統(tǒng)為像增強(qiáng)型CMOS相機(jī)，所述像增強(qiáng)型CMOS相 機(jī)包括CMOS相機(jī)和像增強(qiáng)器，CMOS相機(jī)和像增強(qiáng)器之間通過光學(xué)透鏡 或者光錐實(shí)現(xiàn)光耦合。
還包括設(shè)置在分色鏡和聚焦透鏡之間的光路中的反射濾光片。
本實(shí)用新型與現(xiàn)有技術(shù)對比的有益效果是
利用振鏡掃描和樣品臺跨越移動(dòng)相結(jié)合，通過改變振鏡的掃描步長和
掃描步數(shù)、通過樣品臺以單元視場區(qū)域?yàn)椴介L移動(dòng)被掃描的視場，實(shí)現(xiàn)大 視場、低分辨率與小視場、高分辨率的靈活轉(zhuǎn)換，滿足不同的生物醫(yī)學(xué)應(yīng) 用要求。


附圖是本發(fā)明具體實(shí)施方式
的測量裝置系統(tǒng)圖。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)吸的一種基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微方法，包括以下步
驟
(1) 使用鈦寶石鎖模飛秒激光器產(chǎn)生超短脈沖激光束，激光束的波長
允許變化范圍700-1000nm，重復(fù)頻率變化范圍50MHz-500MHz，但是每
一次工作時(shí)的工作頻率保持穩(wěn)定。
(2) 使用一對擴(kuò)束透鏡對激光器輸出的高重復(fù)頻率超短脈沖激光束進(jìn) 行均勻擴(kuò)束，形成均勻激光束。
(3) 使用微透鏡陣列組成的兩維空間離散系統(tǒng)對均勻激光束作兩維空 間離散化處理，形成MXN束子光束，該MXN束子光束為二維空間離散 分布，其中M〉1， N>1。
(4) 使MXN束子光束依次經(jīng)過準(zhǔn)直透鏡、掃描振鏡、反射鏡、雙色 鏡、熒光顯微鏡后聚焦到放置在樣品平臺上的樣品上，在樣品的預(yù)定區(qū)域 上形成熒光材料的兩維分布的多光子激發(fā)熒光。其中，通過準(zhǔn)直透鏡將M XN束子光束形成為MXN束平行子光束；通過掃描振鏡對MXN束平行子 光束進(jìn)行步進(jìn)掃描，并通過改變掃描振鏡掃描步長，獲得不同的掃描空間 分辨率；通過樣品平臺在x-y平面以單元視場區(qū)域?yàn)椴介L的移動(dòng)來實(shí)現(xiàn)對 樣品成像視場的移動(dòng)；通過樣品平臺在z方向的移動(dòng)，選擇不同的測量深 度并實(shí)現(xiàn)對樣品的聚焦。
(5) 熒光顯微鏡收集激發(fā)的熒光，依次經(jīng)過雙色鏡反射、反射濾光片 濾光和聚焦透鏡聚焦到與計(jì)算機(jī)連接的像增強(qiáng)型CCD相機(jī)。
在上述方法中，可以首先以較低的分辨率，即掃描振鏡使用較大的掃 描步長，較少的圖像采集幀數(shù)，并進(jìn)行快速掃描，獲得樣品低放大倍數(shù)或 低空間分辨率的圖像；并結(jié)合樣品臺的成像視場區(qū)域移動(dòng)，對樣品大范圍 低分辨率快速掃描，得到由各個(gè)單元掃描區(qū)域重構(gòu)圖像；再對所感興趣的 具體區(qū)域，移動(dòng)樣品臺至該區(qū)域，掃描振鏡使用較小的掃描步長，以高分 辨率對該區(qū)域進(jìn)行精細(xì)掃描。以上可以實(shí)現(xiàn)大視場、低分辨率與小視場、 高分辨率的靈活轉(zhuǎn)換，滿足不同的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用要求。
如附圖所示的一種基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微的裝置，包括
鈦寶石鎖模飛秒激光器101、由擴(kuò)束透鏡102和103組成的擴(kuò)束系統(tǒng)、微 透鏡陣列104、準(zhǔn)直透鏡106、掃描振鏡107、反射鏡108、雙色鏡109、 熒光顯微鏡110、發(fā)射濾光片114、管鏡115、像增強(qiáng)型CCD相機(jī)116、計(jì) 算機(jī)117和微位移樣品平臺113。其中，鈦寶石鎖模飛秒激光器101可產(chǎn) 生波長在700 nm -lOOOnm范圍內(nèi)、重復(fù)頻率在50MHz-500MHz范圍內(nèi)可 調(diào)的激光束；微透鏡陣列104組成兩維空間離散系統(tǒng)，當(dāng)然該兩維空間離 散系統(tǒng)也可以由Nipkow盤、分光鏡或衍射光學(xué)元件組成；熒光顯微鏡110 為多光子激發(fā)共焦顯微鏡，在700-1000nm光譜范圍內(nèi)都具有精密的空間 分辨率；像增強(qiáng)型CCD相機(jī)116和計(jì)算機(jī)117組成圖像成像系統(tǒng)，像增強(qiáng) 型CCD相機(jī)116包括CCD相機(jī)和像增強(qiáng)器，CCD相機(jī)和像增強(qiáng)器之間通 過光學(xué)透鏡或者光錐實(shí)現(xiàn)光耦合。
鈦寶石鎖模飛秒激光器101為高重復(fù)頻率超短光脈沖激光器，輸出重 復(fù)頻率為76MHz，脈沖寬度為120fs的超短脈沖。該激光脈沖經(jīng)一對擴(kuò)束 透鏡102和103對激光束進(jìn)行均勻擴(kuò)束，形成均勻激光束。微透鏡陣列104 將均勻激光束作兩維空間離散化處理，形成MXN個(gè)子光束并在其焦平面 105上聚焦，MXN個(gè)子光束的MXN個(gè)焦點(diǎn)在焦平面105上等距排列， MXN個(gè)子光束穿過準(zhǔn)直透鏡106后形成MXN個(gè)平行子光束。
MXN個(gè)平行子光束經(jīng)一對掃描振鏡107后由反射鏡108反射，再通 過雙色鏡109進(jìn)入倒置熒光顯微鏡IIO聚焦到樣品111上。包含有熒光材 料的樣品111被MXN個(gè)平行子光束照明，被照射的兩維分布的MXN個(gè) 子離散點(diǎn)同時(shí)發(fā)出熒光，在U2處產(chǎn)生兩維空間離散的熒光點(diǎn)陣列圖像。 樣品所發(fā)出的點(diǎn)陣列熒光被熒光顯微鏡110收集，經(jīng)過雙色鏡109反射， 再經(jīng)過發(fā)射濾光片114后被聚焦透鏡115成像到像增強(qiáng)型CCD相機(jī)116 上；通過像增強(qiáng)型CCD相機(jī)116和與其連接的計(jì)算機(jī)117，并經(jīng)過圖像的 軟件重構(gòu)和拼接，可以實(shí)時(shí)監(jiān)測和記錄樣品111的熒光發(fā)射信息。
通過高精度三維微位移樣品臺113在x-y平面，即垂直于附圖的平面， 對單元成像區(qū)域大幅度跨越移動(dòng)，可獲得大的成像視場。通過微位移樣品 臺113在z方向，即附圖中的上下方向的微位移，可以實(shí)現(xiàn)對樣品lll的 聚焦，并可選擇不同深度進(jìn)行熒光測量和成像。掃描振鏡107實(shí)現(xiàn)對樣品 111的二維離散點(diǎn)同時(shí)掃描，對每個(gè)單元視場區(qū)域，采用步長可變的步進(jìn)
掃描，實(shí)現(xiàn)空間分辨率隨采用不同的步長而改變的目的。
以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方式對本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說 明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說明。對于本發(fā)明所屬技術(shù) 領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若 干簡單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微方法，其特征在于，包括以下步驟(1)使用擴(kuò)束系統(tǒng)對激光器輸出的高重復(fù)頻率超短脈沖激光束進(jìn)行均勻擴(kuò)束，形成均勻激光束；(2)使用兩維空間離散系統(tǒng)對均勻激光束作兩維空間離散化處理，形成M×N束子光束；(3)使M×N子光束依次經(jīng)過準(zhǔn)直透鏡、掃描振鏡、反射鏡、雙色鏡、熒光顯微鏡后聚焦到放置在樣品平臺上的樣品上，在樣品的預(yù)定區(qū)域上形成熒光材料的兩維分布的多光子激發(fā)熒光；(4)熒光顯微鏡收集激發(fā)的熒光，依次經(jīng)過雙色鏡反射和聚焦透鏡聚焦到圖像成像系統(tǒng)。
2. 如權(quán)利要求1所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微方法，其 特征在于-步驟(3)中通過樣品平臺在x-y平面的移動(dòng)實(shí)現(xiàn)成像視場的移動(dòng)，通 過樣品平臺在z方向的移動(dòng)，選擇不同的測量深度并實(shí)現(xiàn)對樣品的聚焦。
3. 如權(quán)利要求2所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微方法，其 特征在于所述樣品平臺在x-y平面的移動(dòng)是以單元視場區(qū)域?yàn)椴介L的移動(dòng)。
4. 如權(quán)利要求3所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微方法，其 特征在于步驟(3)中通過改變掃描振鏡掃描步長和掃描步數(shù)，獲得不同的空間 分辨率。
5. 如權(quán)利要求1所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微方法，其特征在于所述MXN束子光束中，M>1， N>1。
6. 如權(quán)利要求1所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微方法，其特征在于所述激光器輸出的高重復(fù)頻率超短脈沖激光束的波長在700 nm -lOOOnm范圍內(nèi)、重復(fù)頻率在50MHz-500MHz范圍內(nèi)可調(diào)。
7. —種基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置，包括激光器、擴(kuò)束 系統(tǒng)、兩維空間離散系統(tǒng)、準(zhǔn)直透鏡、反射鏡、雙色鏡、熒光顯微鏡、樣 品平臺、聚焦透鏡和圖像成像系統(tǒng)，激光器發(fā)出的激光依次經(jīng)擴(kuò)束系統(tǒng)、 兩維空間離散系統(tǒng)、準(zhǔn)直透鏡、反射鏡、雙色鏡、熒光顯微鏡聚焦在設(shè)置 在樣品平臺上的樣品上，樣品上的熒光材料發(fā)出的熒光經(jīng)雙色鏡反射、聚 焦透鏡聚焦到圖像成像系統(tǒng)，其特征在于還包括設(shè)置在準(zhǔn)直透鏡和反射鏡間的掃描振鏡；所述兩維空間離散系 統(tǒng)對激光器發(fā)出的激光束作兩維空間離散化處理，形成MXN束子光束并 穿過準(zhǔn)直透鏡后形成MXN束平行子光束；所述掃描振鏡對MXN束平行子 光束進(jìn)行步進(jìn)掃描。
8. 如權(quán)利要求7所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置，其 特征在于所述樣品平臺為微位移樣品平臺，所述微位移樣品平臺可以實(shí)現(xiàn)在x-y 平面的移動(dòng)和在z方向的移動(dòng)；所述掃描振鏡對MXN束平行子光束進(jìn)行 步長可變的步進(jìn)掃描。
9. 如權(quán)利要求7所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置，其 特征在于所述激光器為高重復(fù)頻率超短脈沖激光器。
10. 如權(quán)利要求9所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置，其特征在于所述高重復(fù)頻率超短脈沖激光器為鈦寶石鎖模飛秒激光器。
11. 如權(quán)利要求7所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置，其特征在于所述兩維空間離散系統(tǒng)為微透鏡陣列、Nipkow盤、分光鏡、衍射光學(xué)元件的一種。
12. 如權(quán)利要求7所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置，其特征在于所述經(jīng)過兩維空間離散系統(tǒng)形成的MXN束子光束的MXN個(gè)焦點(diǎn)在兩 維空間離散系統(tǒng)的焦平面上等距排列。
13. 如權(quán)利要求7所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置，其特征在于所述熒光顯微鏡為多光子激發(fā)共焦顯微鏡。
14. 如權(quán)利要求7所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置，其特征在于 所述圖像成像系統(tǒng)包括像增強(qiáng)型CCD相機(jī)，所述像增強(qiáng)型CCD相機(jī) 包括CCD相機(jī)和像增強(qiáng)器，CCD相機(jī)和像增強(qiáng)器之間通過光學(xué)透鏡或者 光錐實(shí)現(xiàn)光耦合。
15. 如權(quán)利要求14所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置， 其特征在于所述圖像成像系統(tǒng)還包括與像增強(qiáng)型CCD相機(jī)相連接的計(jì)算機(jī)。
16. 如權(quán)利要求7所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置， 其特征在于所述圖像成像系統(tǒng)包括像增強(qiáng)型CMOS相機(jī)，所述像增強(qiáng)型CMOS 相機(jī)包括CMOS相機(jī)和像增強(qiáng)器，CMOS相機(jī)和像增強(qiáng)器之間通過光學(xué)透 鏡或者光錐實(shí)現(xiàn)光耦合。
17. 如權(quán)利要求16所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置， 其特征在于所述圖像成像系統(tǒng)還包括與像增強(qiáng)型CMOS相機(jī)相連接的計(jì)算機(jī)。
18. 如權(quán)利要求7所述的基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微裝置， 其特征在于還包括設(shè)置在分色鏡和聚焦透鏡之間的光路中的反射濾光片。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種基于固定光路系統(tǒng)的變視場掃描顯微方法及其裝置。首先使用擴(kuò)束系統(tǒng)對激光器輸出的激光束進(jìn)行均勻擴(kuò)束，形成均勻激光束；再使用兩維空間離散系統(tǒng)對均勻激光束作兩維空間離散化處理，形成M×N束子光束；使M×N子光束依次經(jīng)過準(zhǔn)直透鏡、掃描振鏡、反射鏡、雙色鏡、熒光顯微鏡后聚焦到樣品平臺的樣品上，在樣品上形成激發(fā)熒光；熒光顯微鏡收集激發(fā)的熒光，經(jīng)過雙色鏡反射和聚焦透鏡聚焦到圖像成像系統(tǒng)。利用振鏡掃描和樣品臺跨越移動(dòng)相結(jié)合，即通過改變振鏡的掃描步長和掃描步數(shù)、以單元視場區(qū)域?yàn)椴介L移動(dòng)樣品臺來改變被掃描的視場，實(shí)現(xiàn)大視場、低分辨率與小視場、高分辨率的靈活轉(zhuǎn)換，滿足不同的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用要求。
文檔編號G02B23/00GK101339129SQ20071007686
公開日2009年1月7日 申請日期2007年9月3日 優(yōu)先權(quán)日2007年9月3日
發(fā)明者劉立新, 屈軍樂, 林子揚(yáng), 牛憨笨, 磊 王 申請人:深圳大學(xué)