一種細菌纖維素復(fù)合敷料的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種細菌纖維素復(fù)合敷料，其是將細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料在含抗菌素的水溶液中浸泡制得的，所述的細菌纖維素復(fù)合材料是通過下述方法制備，選取能分泌細菌纖維素的菌株活化制備成種子醪液，然后將種子醪液均勻滴加在經(jīng)滅菌處理的無紡布或織造布上，加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)12～48h，然后補加發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)3～6d后取出發(fā)酵產(chǎn)物，發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)純化處理后得到細菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布敷料。本發(fā)明工藝簡單，操作方便，可根據(jù)需要制備多種不同功效的細菌纖維素傷口敷料。
【專利說明】一種細菌纖維素復(fù)合敷料
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)療器械及其制備【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種細菌纖維素復(fù)合敷料。
【背景技術(shù)】
[0002]細菌纖維素是由葡萄糖以β -1, 4-糖苷鏈連接而成的高分子化合物，作為一種優(yōu)良的生物材料，具有其獨特的物理、化學性能:BC具有天然的三維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)；高抗張強度和彈性模量；高親水性，良好的透氣、吸水、透水性能，非凡的持水性和高濕強度。另外，大量研究表明細菌纖維素具有良好的體內(nèi)、體外生物相容性和良好的生物可降解性，這使得細菌纖維素本身可以應(yīng)用于生物醫(yī)用領(lǐng)域。國外采用單純的細菌纖維素作為敷料已有報道，并且已經(jīng)產(chǎn)業(yè)化用于臨床。因此，以細菌纖維素作為敷料的基體材料，利用細菌纖維素本身的吸水性能，可以在保證生物安全性的基礎(chǔ)上持續(xù)有效的吸收傷口滲出液及代謝產(chǎn)物。細菌纖維素的制備方法是本領(lǐng)域已知的，常用的菌種有醋酸菌屬(Acetobacter)、土壤桿菌屬(Agrobacterium)、根瘤菌屬(Rhizobium)和八疊球菌屬(Sarcina)等中的某些微生物，采用的培養(yǎng)基可以是任何能夠給上述微生物提供營養(yǎng)的培養(yǎng)基，既可以是天然的培養(yǎng)基，如椰子水培養(yǎng)基，也可以是人工合成的培養(yǎng)基，如用葡萄糖，蛋白胨，無機鹽和去離子水等配置而成的培養(yǎng)基；采用的發(fā)酵方法有靜態(tài)淺盤培養(yǎng)和動態(tài)培養(yǎng)。
[0003]在細菌纖維素的實際使用過程中為了進一步提高細菌纖維素的性能，往往與其他材料復(fù)合得到細菌纖維素復(fù)合材料。目前常用的細菌纖維素復(fù)合材料制備方法有兩種:一種是將細菌纖維素溶解于離子液體或其他溶劑中制成溶液，與另一種或多種聚合物溶液混合,經(jīng)過紡絲等加工方法制備細菌纖維素復(fù)合材料(如中國專利CN101613893B)。一種是采用浸潰方法在細菌纖維素中加入聚合物溶液或聚合物單體引發(fā)聚合，制備細菌纖維素復(fù)合材料(如中國專利CN102250378A、中國專利CN101274107A)。此外，細菌纖維素復(fù)合膜的制備常采用機械攪拌將細菌纖維素均質(zhì)成細菌纖維素懸液，再與聚合物混合制成復(fù)合膜(如中國專利CN101215388)。這些方法可以制得細菌纖維素復(fù)合材料，但在制備過程中往往會破壞細菌纖維素本身的三維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，導致復(fù)合后的材料由于細菌纖維素結(jié)構(gòu)的破壞造成一些性能的下降，如:力學強度、吸水性能、透氣性能等。
[0004]本發(fā)明采用原位發(fā)酵法，使細菌纖維素與無紡布或織造布原位發(fā)酵復(fù)合，并將得到的細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后在抗菌素溶液中浸泡制得細菌纖維素復(fù)合敷料。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明涉及一種細菌纖維素復(fù)合敷料，其是將細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后，在抗菌素溶液中浸泡制得的，所述的細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料是通過包括下述步驟的方法制備的:
1)制備種子醪液:選取能分泌細菌纖維素的菌株活化制備成種子醪液；
2)初步復(fù)合:將菌株濃度為10~95%的種子醪液均勻滴加在經(jīng)滅菌處理的無紡布或織造布上，加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)12~48h ；
3)進一步復(fù)合:補加發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)3~6d后取出發(fā)酵產(chǎn)物，發(fā)酵過程中每隔12~72h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布；
4)純化處理后，得到細菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布復(fù)合膜材。
[0006]其中所述的能分泌細菌纖維素的菌株是醋酸菌屬、根瘤菌屬、八疊球菌屬、假單胞菌屬、無色桿菌屬、產(chǎn)堿菌屬、氣桿菌屬或固氮菌屬中的一種或幾種。
[0007]其中，所述的無紡布或織造布的制備原材料可以是滌綸、錦綸、粘膠纖維、脫脂棉纖維、腈綸、聚乙交酯、聚乳酸、聚乳酸乙醇酸共聚物、殼聚糖等。
[0008]本發(fā)明中，無紡布或織造布原材料的選擇與細菌纖維素敷料在使用時的功效有關(guān)。一般來說細菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布可以提高敷料的力學強度；延長了敷料的使用時間；同時提高的敷料的阻菌性能，其中選擇不同原材料的無紡布或織造布區(qū)別在于:
1、由滌綸、錦綸、粘膠纖維、脫脂棉纖維和腈綸制備的無紡布或織造布可以顯著提高敷料的力學強度，使敷料在使用過程中具有較強的抗撕裂性能，能夠采用醫(yī)用縫線對敷料進行固定。[0009]2、由聚乙交酯、聚乳酸和聚乳酸乙醇酸共聚物制備的無紡布或織造布，由于聚乙交酯、聚乳酸和聚乳酸乙醇酸共聚物具有良好的生物相容性，提高了細菌纖維素敷料的生物安全性,并促進傷口的愈合速度。
[0010]3、由殼聚糖制備的無紡布或織造布，由于殼聚糖本身的抗菌性能，使細菌纖維素敷料具有了一定的抗菌性。
[0011]其中，無紡布或織造布的滅菌方法可以是高壓滅菌、輻照滅菌或環(huán)氧乙烷滅菌等。在細菌培養(yǎng)時必須保證所用的無紡布或織造布為無菌狀態(tài)，以避免培養(yǎng)過程中產(chǎn)生雜菌。在選擇滅菌方式時，應(yīng)選用對無紡布或織造布材料本身性能影響較小的滅菌方法。如聚乙交酯、聚乳酸、聚乳酸乙醇酸共聚物、殼聚糖等生物材料熔點較低，容易降解，一般采用輻照滅菌或環(huán)氧乙烷滅菌。
[0012]其中，所述的初步復(fù)合方法為:將菌株濃度為10~95%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在無菌無紡布或織造布表面，5~IOmin后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為5~20mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為25~35°C，時間為12 ~48h。
[0013]其中，所述的進一步復(fù)合方法為:補加發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為20~50mm，30~40°C發(fā)酵3~6d，每隔12~72h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布。
[0014]所得細菌纖維素復(fù)合材料由三層結(jié)構(gòu)組成，上層和下層為細菌纖維素膜，中間層為無紡布或織造布。通過控制發(fā)酵過程中的翻轉(zhuǎn)次數(shù)和時間可調(diào)整中間層(無紡布或織造布)在復(fù)合膜中的位置。且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與上、下層細菌纖維素膜相連的細菌纖維素纖維。
[0015]其中，所述的純化處理方法為，取出發(fā)酵產(chǎn)物，在30~100°C、質(zhì)量百分含量為I~8%的NaOH水溶液中浸泡3~6h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，以除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基。
[0016]其中，將得到的細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后，在抗菌素溶液中浸泡制成細菌纖維素復(fù)合敷料。
[0017]其中所述的抗菌素選自多粘菌素、四環(huán)素、桿菌肽、慶大霉素、紅霉素、碘、銀離子中的一種或多種。
[0018]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:采用原位發(fā)酵法，將細菌纖維素與無紡布或織造布復(fù)合，制備出細菌纖維素復(fù)合材料，將其作為醫(yī)用敷料，具有較高的力學強度；可以延長敷料的使用時間，提高敷料的阻菌性能。本發(fā)明工藝簡單，操作方便，可根據(jù)需要制備多種不同功效的細菌纖維素傷口敷料。
【具體實施方式】
[0019]下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。
[0020]實施例1:
將能分泌細菌纖維素的醋酸菌屬微生物木醋桿菌活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為10%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在經(jīng)高壓滅菌處理的無菌滌綸無紡布或織造布表面,5min后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基,使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為5mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為25°C，時間為48h。得到細菌纖維素與無紡布或織造布初步復(fù)合的膜材。在初步復(fù)合的膜材中補加發(fā)酵培養(yǎng)基，其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為20mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為30°C，每隔72h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布，發(fā)酵6d。取出發(fā)酵產(chǎn)物，在1 00°C、質(zhì)量百分含量為8%的NaOH水溶液中浸泡6h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，以除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基，得到細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料，其中無紡布或織造布在細菌纖維復(fù)合素敷料的中間層，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與上、下層細菌纖維素膜相連的細菌纖維素纖維。再將細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后，在多粘菌素溶液中浸泡30分鐘，取出即制得細菌纖維素復(fù)合敷料。
[0021]
實施例2:
將能分泌細菌纖維素的根瘤菌屬微生物菌種活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為15%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在經(jīng)高壓滅菌處理的無菌錦綸無紡布或織造布表面，6min后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為8mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為28°C，時間為40h。得到細菌纖維素與無紡布或織造布初步復(fù)合的膜材。在初步復(fù)合的膜材中補加發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為25mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為32°C，每隔60h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布，發(fā)酵6d。取出發(fā)酵產(chǎn)物，在90°C、質(zhì)量百分含量為7%的NaOH水溶液中浸泡3h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，以除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基，得到細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料，其中無紡布或織造布在細菌纖維復(fù)合素敷料的中間層，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與上、下層細菌纖維素膜相連的細菌纖維素纖維。再將細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后，在紅霉素溶液中浸泡45分鐘，取出即制得細菌纖維素復(fù)合敷料。
[0022]
實施例3:
將能分泌細菌纖維素的八疊球菌屬微生物菌種活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為35%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在經(jīng)高壓滅菌處理的無菌粘膠纖維無紡布或織造布表面，7min后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基,使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為10mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為30°C，時間為32h。得到細菌纖維素與無紡布或織造布初步復(fù)合的膜材。在初步復(fù)合的膜材中補加發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為30mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為34°C，每隔48h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布，發(fā)酵5d。取出發(fā)酵產(chǎn)物，在80°C、質(zhì)量百分含量為6%的NaOH水溶液中浸泡4h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，以除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基，得到細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料，其中無紡布或織造布在細菌纖維復(fù)合素敷料的中間層，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與上、下層細菌纖維素膜相連的細菌纖維素纖維。再將細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后，在四環(huán)素溶液中浸泡25分鐘，取出即制得細菌纖維素復(fù)合敷料。
[0023]
實施例4:
將能分泌細菌纖維素的假單胞菌屬微生物菌種活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為45%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在經(jīng)高壓滅菌處理的無菌脫脂棉纖維無紡布或織造布表面，8min后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為12mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為32°C，時間為24h，得到細菌纖維素與無紡布或織造布初步復(fù)合的膜材。在初步復(fù)合的`膜材中補加發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為35mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為36°C，每隔36h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布，發(fā)酵4d。取出發(fā)酵產(chǎn)物，在70°C、質(zhì)量百分含量為5%的NaOH水溶液中浸泡5h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，以除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基，得到細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料，其中無紡布或織造布在細菌纖維復(fù)合素敷料的中間層，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與上、下層細菌纖維素膜相連的細菌纖維素纖維。再將細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后，在桿菌肽溶液中浸泡60分鐘，取出即制得細菌纖維素復(fù)合敷料。
[0024]
實施例5:
將能分泌細菌纖維素的無色桿菌屬微生物菌種活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為55%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在經(jīng)輻照滅菌處理的無菌腈綸無紡布或織造布表面，9min后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為14_，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為35°C，時間為12h。得到細菌纖維素與無紡布或織造布初步復(fù)合的膜材。在初步復(fù)合的膜材中補加發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為40mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為38°C，每隔24h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布，發(fā)酵3d。取出發(fā)酵產(chǎn)物，在100°C、質(zhì)量百分含量為1%的NaOH水溶液中浸泡6h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，以除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基。得到細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料，其中無紡布或織造布在細菌纖維復(fù)合素敷料的中間層，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與上、下層細菌纖維素膜相連的細菌纖維素纖維。再將細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后，在慶大霉素溶液中浸泡60分鐘，取出即制得細菌纖維素復(fù)合敷料。
[0025]
實施例6:
將能分泌細菌纖維素的產(chǎn)堿菌屬微生物菌種活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為65%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在經(jīng)輻照滅菌處理的無菌聚乙交酯無紡布或織造布表面，IOmin后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為16_，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為35°C，時間為18h，得到細菌纖維素與無紡布或織造布初步復(fù)合的膜材。在初步復(fù)合的膜材中補加發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為45mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為40°C，每隔12h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布，發(fā)酵3d。取出發(fā)酵產(chǎn)物，在30°C、質(zhì)量百分含量為2%的NaOH水溶液浸泡6h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，以除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基，得到細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料，其中無紡布或織造布在細菌纖維復(fù)合素敷料的中間層，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與上、下層細菌纖維素膜相連的細菌纖維素纖維。再將細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后，在銀鹽溶液中浸泡70分鐘，取出即制得細菌纖維素復(fù)合敷料。
[0026]
實施例7:
將能分泌細菌纖維素的氣桿菌屬微生物菌種活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為75%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在經(jīng)輻照滅菌處理的無菌聚乳酸無紡布或織造布表面，9min后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為18_，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為32°C，時間為35h。得到細菌纖維素與無紡布或織造布初步復(fù)合的膜材。在初步復(fù)合的膜材中補加發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為50mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為38°C，每隔72h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布，發(fā)酵4d。取出發(fā)酵產(chǎn)物，在40°C、質(zhì)量百分含量為3%的NaOH水溶液中浸泡5h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，以除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基，得到細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料，其中無紡布或織造布在細菌纖維復(fù)合素敷料的中間層，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與上、下層細菌纖維素膜相連的細菌纖維素纖維。再將細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后，在桿菌肽和紅霉素的復(fù)合溶液中浸泡30分鐘，取出即制得細菌纖維素復(fù)合敷料。
[0027]
實施例8:
將能分泌細菌纖維素的固氮菌屬微生物菌種活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為85%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌處理的無菌聚乳酸乙醇酸共聚物無紡布或織造布表面，8min后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為20mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為30°C，時間為36h，得到細菌纖維素與無紡布或織造布初步復(fù)合的膜材。在初步復(fù)合的膜材中補加發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為35mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為34°C，每隔60h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布，發(fā)酵3d。取出發(fā)酵產(chǎn)物，在50°C、質(zhì)量百分含量為4%的NaOH水溶液中浸泡4h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，以除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基，得到細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料，其中無紡布或織造布在細菌纖維復(fù)合素敷料的中間層，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與上、下層細菌纖維素膜相連的細菌纖維素纖維。再將細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后，在紅霉素和慶大霉素的復(fù)合溶液中浸泡50分鐘，取出即制得細菌纖維素復(fù)合敷料。
[0028]
實施例9:
將能分泌細菌纖維素的醋酸菌屬微生物木醋桿菌活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為95%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌處理的無菌殼聚糖無紡布或織造布表面，7min后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為5mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為34°C，時間為48h，得到細菌纖維素與無紡布或織造布初步復(fù)合的膜材。在初步復(fù)合的膜材中補加發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為20mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為30°C，每隔72h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布，發(fā)酵5d。取出發(fā)酵產(chǎn)物，在60°C、質(zhì)量百分含量為5%的NaOH水溶液中浸泡3h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，以除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基，得到細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料，其中無紡布或織造布在細菌纖維復(fù)合素敷料的中間層，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與上、下層細菌纖維素膜相連的細菌纖維素纖維。再將細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后，在四環(huán)素和銀鹽復(fù)合溶液中浸泡20分鐘，取出即制得細菌纖維素復(fù)合敷料。
【權(quán)利要求】
1.一種細菌纖維素復(fù)合敷料，其特征是:該敷料是將細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料滅菌后在抗菌素溶液中浸泡制得的，其中所述的細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料是通過包括下述步驟的方法制備的: 制備種子醪液:選取能分泌細菌纖維素的菌株活化制備成種子醪液； 初步復(fù)合:將菌株濃度為10~95%的種子醪液均勻滴加在經(jīng)滅菌處理的無紡布或織造布上，加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)12~48h ； 進一步復(fù)合:補加發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)3~6d后取出發(fā)酵產(chǎn)物,發(fā)酵過程中每隔12~72h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布； 純化處理后，得到細菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布復(fù)合膜材。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細菌纖維素復(fù)合敷料，其特征是:制備細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料的步驟I)中所述的能分泌細菌纖維素的菌株是醋酸菌屬、根瘤菌屬、八疊球菌屬、假單胞菌屬、無色桿菌屬、產(chǎn)堿菌屬、氣桿菌屬或固氮菌屬中的一種或幾種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細菌纖維素復(fù)合敷料，其特征是:制備細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料的步驟2 )中所述的無紡布或織造布的制備原材料是滌綸、錦綸、粘膠纖維、脫脂棉纖維、腈綸、聚乙交酯、聚乳酸、聚乳酸乙醇酸共聚物或殼聚糖。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細菌纖維素復(fù)合敷料，其特征是:制備細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料的步驟2)中無紡布或織造布的滅菌方法是高壓滅菌、輻照滅菌或環(huán)氧乙烷滅菌。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細菌纖維素復(fù)合敷料，其特征是:制備細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料的步驟2)的初步復(fù)合具體為:將菌株濃度為10~95%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在無菌無紡布或織造布表面，5~IOmin后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為5~20mm,發(fā)酵培養(yǎng)溫度為25~35°C，時間為12~48h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細菌纖維素復(fù)合敷料，其特征是:制備細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料的步驟3)所述的進一步復(fù)合具體為:補加的發(fā)酵培養(yǎng)基，使發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為20~50mm，30~40°C發(fā)酵3~6d，每隔12~72h翻轉(zhuǎn)一次無紡布或織造布。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細菌纖維素復(fù)合敷料，其特征是:制備細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料的步驟4)所述的純化處理方法為，取出發(fā)酵產(chǎn)物，在30~100°C、質(zhì)量百分含量為I~8%的NaOH水溶液浸泡3~6h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細菌纖維素復(fù)合敷料，其特征是:其中所述的細菌纖維素與無紡布或織造布的復(fù)合材料中，無紡布或織造布在細菌纖維素復(fù)合敷料的中間層，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與上、下層細菌纖維素膜相連的細菌纖維素纖維。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細菌纖維素復(fù)合敷料，其特征是:所述的抗菌素選自多粘菌素、四環(huán)素、桿菌肽、慶大霉素、紅霉素、銀離子中的一種或多種。
【文檔編號】D06M16/00GK103480028SQ201210190717
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2012年6月12日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月12日
【發(fā)明者】鐘春燕 申請人:鐘春燕