專利名稱：一種青檀纖維的分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種青檀纖維的分離方法，屬于生物細(xì)胞分離技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
植物纖維(plant fiber)是廣泛分布在種子植物中的一種厚壁組織，它的細(xì)胞細(xì)長(zhǎng)，兩端尖銳，具有較厚的次生壁，壁上常有單紋孔，成熟時(shí)一般沒有活的原生質(zhì)體。植物纖維在植物體中主要起機(jī)械支持作用。在植物莖桿中，如苧麻、大麻、亞麻和黃麻的草本莖，具特別發(fā)達(dá)的韌皮纖維束，可用來制作各種紡織品；在一些植物的木本莖中，韌度纖維也很發(fā)達(dá)，它們是制造特種紙張的優(yōu)良原料，如青檀、桑樹、構(gòu)樹等。青檀枝干的韌度纖維是制作宣紙的主要原料，以2 3年生嫩枝為適用原料。采用文獻(xiàn)提及的硝酸法(10%鉻酸和10%硝酸體積比為1 1)(高慧，徐斌，邵卓平.青檀樹皮的化學(xué)組成與細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)[J].經(jīng)濟(jì)林研究，2007，25G)J8-33)來分離青檀2 3年生莖皮纖維，顯微鏡下觀察纖維大部分破碎、斷裂，無法得到完整的纖維細(xì)胞。硝酸法 (10%鉻酸和10%硝酸體積比為1 1)常用來分離木材纖維(李正理.植物制片技術(shù)[M]. 北京科學(xué)出版社.1978.)，青檀纖維主要為韌皮纖維，因此該方法并不適用。傳統(tǒng)檀皮制漿采用堿法，但由于檀皮中色素、多糖類物質(zhì)(如膠、植物粘液、淀粉、 果膠質(zhì)、多乳糖)的含量較高，會(huì)增加堿法制漿時(shí)藥品的消耗。而采用果膠酶溶液處理，可用少量的果膠酶分解大量的多糖類物質(zhì)，從而減少堿法制漿時(shí)化學(xué)藥品的消耗，減輕對(duì)環(huán)境的污染。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的問題是提供一種青檀纖維分離的方法，經(jīng)本發(fā)明處理的青檀纖維能完整地離散，適合批量生產(chǎn)。本發(fā)明提供的技術(shù)方案是一種青檀纖維的分離方法，將2 3年生青檀莖皮放入 PH 4.5 (士0.5)的果膠酶溶液中，溫度35 (士5) °C，浸泡時(shí)間為3 (士0.5)小時(shí)；然后將經(jīng)過酶處理的青檀莖皮用蒸餾水沖洗后，置于0.6 % NaOH (0.6mg/100mL)中在80-85 °〇溫度下煮25 (士5) min，取出用蒸餾水洗凈，青檀纖維可分離成完整的纖維細(xì)胞。上述的果膠酶溶液的最優(yōu)濃度為1594.6 (士 100) U/mg，其中果膠酶用pH 4. 5 (士0.5)的鹽酸緩沖液溶解，二者用量比為10 (士 l)mg 3 (士 l)mL。經(jīng)本發(fā)明處理的青檀莖皮能分離成完整、清晰的纖維細(xì)胞，可為造紙?zhí)峁﹥?yōu)質(zhì)的原料，批量生產(chǎn)可大大減少制漿時(shí)堿的用量，減少化學(xué)藥品的消耗，既節(jié)約成本，又減輕了對(duì)環(huán)境的污染。


圖1為本發(fā)明實(shí)施例1處理得到的青檀纖維的顯微照片。圖2為本發(fā)明實(shí)施例2處理得到的青檀纖維的顯微照片。
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圖3為本發(fā)明實(shí)施例3處理得到的青檀纖維的顯微照片。
具體實(shí)施例方式制作方法如下
1.試劑的配制果膠酶溶液配制
將10 (士 l)mg果膠酶加3 (士 l)mL pH 4.5 (士0.5)的鹽酸溶液混合得到果膠酶溶液。溶液的配制
將0.6 mg NaOH溶于少量蒸餾水中并定容到100 mL，得到NaOH染液。取材將2 3年生青檀枝條剪成3 cm長(zhǎng)的短棒，環(huán)剝莖皮，再將莖皮剪成2 mmX20 mm的小片段，放入冰箱冷凍層中備用。.離析將莖皮片段放入配制好的pH4.5( 士0.5)的果膠酶溶液中，溫度保持在 35 (士5) °C，浸泡時(shí)間為3 (士0.5)小時(shí)。沖洗和熱煮將酶處理后的莖皮片段用蒸餾水沖洗，然后置于0. 6% NaOH溶液中， 保持80-85°C溫度，熱煮25 ( 士5) min ；取出用蒸餾水沖凈。鏡檢將處理后的青檀纖維經(jīng)離心、固定、染色等步驟后，在顯微鏡下放大100倍進(jìn)行鏡檢，可檢測(cè)到分離完整的纖維細(xì)胞。
實(shí)施例1 將2年生青檀莖皮剪切為2 mmX 20 mm小片，取5片放入pH 4. 0的果膠酶溶液中，果膠酶溶液濃度為1494. 6 U/mg，溫度30 °C，浸泡時(shí)間為2. 5小時(shí)；然后將酶處理后的莖皮片段用蒸餾水沖洗后置于0.6% NaOH溶液中，保持80-85°C溫度，熱煮25 min ；取出用蒸餾水沖凈，放入潔凈的青霉素瓶中，加入2 mL蒸餾水，用粗玻棒平壓至離碎，倒入10 mL離心管中，3500 r/min離心5 min，小心棄上清液，沉淀用1 mL蒸餾水沖溶；混勻后用滴管取1滴，涂布于玻片上，在酒精燈上干燥固定；然后滴10 %的番紅染色10 min，用蒸餾水沖洗后鏡檢。重復(fù)5次，即共取5滴檢測(cè)。鏡檢放大倍數(shù)100倍，顯微鏡下(參見圖1)觀察結(jié)果顯示，經(jīng)本發(fā)明處理后的青檀莖皮纖維可分離為完整的纖維細(xì)胞。本樣品共檢測(cè)到纖維細(xì)胞101個(gè)，平均長(zhǎng)度2. 641 mm,平均寬度14. 63um。圖1為本樣品部分纖維細(xì)胞。
實(shí)施例2 將2年生青檀莖皮剪切為2 mmX20 mm小片，取5片放入pH 4. 5的果膠酶溶液中，果膠酶溶液濃度為1594. 6 U/mg，溫度35 °C，浸泡時(shí)間為3小時(shí)；然后將酶處理后的莖皮片段用蒸餾水沖洗后置于0.6% NaOH溶液中，保持80-85°C溫度，熱煮25 min ；取出用蒸餾水沖凈，放入潔凈的青霉素瓶中，加入2 mL蒸餾水，用粗玻棒平壓至離碎，倒入10 mL 離心管中，3500 r/min離心5 min，小心棄上清液，沉淀用1 mL蒸餾水沖溶；混勻后用滴管取1滴，涂布于玻片上，在酒精燈上干燥固定；然后滴10 %的番紅染色10 min，用蒸餾水沖洗后鏡檢。重復(fù)5次，即共取5滴檢測(cè)。鏡檢放大倍數(shù)100倍，顯微鏡下(參見圖2)觀察結(jié)果顯示，經(jīng)本發(fā)明處理后的青檀莖皮纖維可分離為完整的纖維細(xì)胞。本樣品共檢測(cè)纖維細(xì)胞107個(gè)，平均長(zhǎng)度2. 682mm，平均寬度15. 12um。圖2為本樣品部分纖維細(xì)胞。實(shí)施例3:將3年生青檀莖皮剪切為2 mmX20 mm小片，取5片放入pH 5. 0的果膠酶溶液中，果膠酶溶液濃度為1694. 6 U/mg，溫度40 °C，浸泡時(shí)間為3. 5小時(shí)；然后將酶處理后的莖皮片段用蒸餾水沖洗后置于0.6% NaOH溶液中，保持80-85°C溫度，熱煮25 min ；取出用蒸餾水沖凈，放入潔凈的青霉素瓶中，加入2 mL蒸餾水，用粗玻棒平壓至離碎，倒入10 mL離心管中，3500 r/min離心5 min，小心棄上清液，沉淀用1 mL蒸餾水沖溶；混勻后用滴管取1滴，涂布于玻片上，在酒精燈上干燥固定；然后滴10 %的番紅染色10 min，用蒸餾水沖洗后鏡檢。重復(fù)5次，即共取5滴檢測(cè)。鏡檢放大倍數(shù)100倍，顯微鏡下(參見圖3)觀察結(jié)果顯示，經(jīng)本發(fā)明處理后的青檀莖皮纖維可分離為完整的纖維細(xì)胞。本樣品共檢測(cè)纖維細(xì)胞119個(gè)，平均長(zhǎng)度2. 653mm，平均寬度15um。圖3為本樣品部分纖維細(xì)胞。
權(quán)利要求
1.一種青檀纖維的分離方法，將2 3年生青檀莖皮片段放入PH 4. 5士0. 5的果膠酶溶液中，溫度35 士5°C，浸泡時(shí)間為3士0. 5小時(shí)；然后將經(jīng)過酶處理的青檀莖皮用蒸餾水沖洗后，置于濃度為每百毫升0.6毫克的NaOH中在80-85 ！溫度下煮25 士5min，取出用蒸餾水洗凈，青檀莖皮纖維可分離為完整的纖維細(xì)胞。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于果膠酶溶液的濃度為1594.6士 100 U/mg, 其中果膠酶用PH 4. 5士0. 5的鹽酸緩沖液溶解，果膠酶與鹽酸緩沖液得用量比為9 Ilmg 2 4mL。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種青檀纖維的分離方法，將2-3年生青檀莖皮放入pH4.5±0.5的果膠酶溶液中，溫度35±5℃，浸泡時(shí)間為3±0.5小時(shí)；然后將經(jīng)過酶處理的青檀莖皮用蒸餾水沖洗后，置于0.6%NaOH中在80-85℃溫度下煮25±5min，取出用蒸餾水洗凈，青檀纖維可分離成完整的纖維細(xì)胞。經(jīng)本發(fā)明處理的青檀莖皮能分離成完整、清晰的纖維細(xì)胞，可為造紙?zhí)峁﹥?yōu)質(zhì)的原料，批量生產(chǎn)可大大減少制漿時(shí)堿的用量，減少化學(xué)藥品的消耗，既節(jié)約成本，又減輕了對(duì)環(huán)境的污染。
文檔編號(hào)D21C5/00GK102212975SQ201110086658
公開日2011年10月12日 申請(qǐng)日期2011年4月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月7日
發(fā)明者李建華, 汪殿蓓 申請(qǐng)人:孝感學(xué)院