專利名稱：一種從大興安嶺野生杜香里提純精油和熊果酸的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種從大興安嶺野生杜香里提取杜香精油和熊果酸的方法，特別是涉及一種利用超臨界二氧化碳萃取并與分子蒸餾技術(shù)藕聯(lián)，超聲波提取、再結(jié)合柱層析的方法，分別得到精油、熊果酸二種成分的方法。
背景技術(shù)：
杜香，是杜鵑花科杜香屬常綠小灌木，高達(dá)50厘米以上，多分枝，枝較細(xì)，葉質(zhì)稍厚，密而互生，有強(qiáng)烈香味，狹線性，長(zhǎng)2-4厘米，寬1. 5-3毫米。杜香耐陰，且喜水濕，對(duì)土壤要求不高，常生于河谷或苔蘚沼澤地，成片生長(zhǎng)成群落。該種主要分布于北半球溫帶或寒溫帶地區(qū)，在我國(guó)分布于東北，集中分布于大興安嶺地區(qū)落葉松林和落葉松白樺針闊混交林， 資源十分豐富。
杜香不同部位化學(xué)成分種類含量有差別，我國(guó)對(duì)杜香這一野生植物資源的研究起步較晚，至目前僅限于對(duì)用水蒸汽蒸餾法取得的揮發(fā)性成分的研究。從目前的研究結(jié)果，杜香油可用于香料工業(yè)。
國(guó)內(nèi)一般用水蒸氣蒸餾法萃取精油，存在著操作溫度高，熱敏物質(zhì)易分解，產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定等缺點(diǎn)，本發(fā)明的不同之處在于采用超臨界二氧化碳萃取并與分子蒸餾技術(shù)藕聯(lián)，超聲波提取、再結(jié)合柱層析的方法，分別得到精油、熊果酸二種成分的方法。本發(fā)明原料利用度高，它的意義不僅在于綜合利用當(dāng)?shù)匾吧Y源，開發(fā)新產(chǎn)品，而且也對(duì)充分利用類似的林下資源提供了參考依據(jù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)
本發(fā)明主要采用超臨界二氧化碳萃取技術(shù)，再與分子蒸餾藕聯(lián)，得到提純精油；提取渣用超聲波提取再用柱層析純化，得到高純度熊果酸。本發(fā)明同時(shí)得到精油和熊果酸兩種產(chǎn)品，且純度高，無(wú)溶劑化學(xué)殘留。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是
一種采用超臨界二氧化碳萃取并與分子蒸餾技術(shù)藕聯(lián)，超聲波提取再結(jié)合柱層析，分別得到精油、熊果酸二種成分的方法，其步驟如下
(I)杜香葉粉碎至40-60目，采用超臨界二氧化碳萃取，在一定溫度和壓力下，以l-2L/h的CO2流量，萃取4-6h，回收CO2，得到精油粗品；
(2)用刮膜式分子蒸餾器，采用兩級(jí)分離，一級(jí)蒸餾在進(jìn)料速度l_1.5ml/min、 200-300r/min刮膜轉(zhuǎn)速下以一定壓力蒸餾，蒸餾溫度為90_95°C ;二級(jí)蒸餾在進(jìn)料速度1.2-2. 0ml/min、250-360r/min刮膜轉(zhuǎn)速下以一定壓力蒸餾，蒸餾溫度為100_105°C，除去精油異味，進(jìn)一步提純精油。采用GC-MS分析，精油相對(duì)含量為75%以上；
(3)提取后渣子加入一定體積濃度的乙醇，超聲波提取，超聲頻率50-70KHZ，料液比1: 10-15，超聲時(shí)間30-50min，薄層層析檢測(cè)分析， 收集得到熊果酸提取液；
(4)回收乙醇，初步濃縮，得熊果酸浸膏，溶于丁醇，上200-300目硅膠柱層析，對(duì)提取物進(jìn)行純化；
(5)先用石油醚除去殘余脂類等雜質(zhì)；再用甲醇-丙酮以一定比例做為洗脫液洗脫，洗脫液用薄層層析跟蹤監(jiān)測(cè)(以95%熊果酸為對(duì)照品對(duì)照)；
(6)收集洗脫液濃縮，真空干燥，得到含量為98%以上的熊果酸成品。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1 :一種采用超臨界二氧化碳萃取并與分子蒸餾技術(shù)藕聯(lián)，超聲波提取再結(jié)合柱層析，分別得到精油、熊果酸二種成分的方法，其步驟如下
(I) IOOOg杜香葉粉碎至40目，采用超臨界二氧化碳萃取，萃取壓力lOMpa，在 40°C，時(shí)間4h，CO2流量為lL/h，回收CO2，得到精油粗品；
(2)用刮膜式分子蒸餾器，采用兩級(jí)分離，一級(jí)蒸餾壓力3帕，在lml/min進(jìn)料速度、刮膜轉(zhuǎn)速200r/min蒸餾，蒸餾溫度為90°C ;二級(jí)蒸餾壓力8帕，在1. 2ml/min進(jìn)料速度、刮膜轉(zhuǎn)速250r/min蒸餾，蒸餾溫度為100°C，除去精油異味，進(jìn)一步提純，收集精油，采用GC-MS分析，相對(duì)含量為75. 3% ；
(3)提取后渣子加入體積比80%乙醇，超聲波提取，超聲頻率50KHZ，料液比 I 10，超聲時(shí)間50min，薄層層析檢測(cè)分析，收集得到熊果酸提取液；
(4)回收乙醇，初步濃縮，得熊果酸浸膏，溶于丁醇，上200-300目硅膠柱層析，對(duì)提取物進(jìn)行純化；
(5)洗脫先用石油醚除去殘余脂類等雜質(zhì)；用甲醇-丙酮10 :1做為洗脫液洗脫，洗脫液用薄層層析跟蹤監(jiān)測(cè)(以95%熊果酸為對(duì)照品對(duì)照)；
(6)收集洗脫液濃縮，真空干燥，得到含量為98. 2%的熊果酸成品。
實(shí)施案例2 :—種采用超臨界二氧化碳萃取并與分子蒸餾技術(shù)藕聯(lián)，超聲波提取再結(jié)合柱層析，分別得到精油、熊果酸二種成分的方法，其步驟如下
(I) IOOOg杜香葉粉碎至40目，采用超臨界二氧化碳萃取，在45 °C，萃取壓力 12Mpa，時(shí)間5h，CO2流量為1. 5L/h，回收CO2，得到精油粗品；
(2)用刮膜式分子蒸餾器，采用兩級(jí)分離，一級(jí)蒸餾壓力5帕，在1. 2ml/min進(jìn)料速度、刮膜轉(zhuǎn)速280r/min蒸餾，蒸餾溫度為95°C ;二級(jí)蒸餾壓力9帕，在1. 5ml/min進(jìn)料速度、刮膜轉(zhuǎn)速300r/min蒸餾，蒸餾溫度為105°C，除去精油異味，進(jìn)一步提純，收集精油，采用GC-MS分析，相對(duì)含量為73. 8% ；
(3)提取后渣子加入體積比90%乙醇，超聲波提取，超聲頻率60KHZ，料液比 I 12，超聲時(shí)間40min，薄層層析檢測(cè)分析，收集得到熊果酸提取液；
(4)回收乙醇，初步濃縮，得熊果酸浸膏，溶于丁醇，上200-300目硅膠柱層析，對(duì)提取物進(jìn)行純化；
(5)洗脫先用石油醚除去殘余脂類等雜質(zhì)；再用甲醇-丙酮9 I做為洗脫液洗脫，洗脫液用薄層層析跟蹤監(jiān)測(cè)(以95%熊果酸為對(duì)照品對(duì)照)；
(6)收集洗脫液濃縮，真空干燥，得到含量為98. 73%的熊果酸成品。
實(shí)施案例3 :—種采用超臨界二氧化碳萃取并與分子蒸餾技術(shù)藕聯(lián)，超聲波提取再結(jié)合柱層析，分別得到精油、熊果酸二種成分的方法，其步驟如下
(I) IOOOg杜香葉粉碎至60目，采用超臨界二氧化碳萃取，在45°C，萃取壓力 15Mpa，時(shí)間6h，CO2流量為2L/h，回收CO2，得到精油粗品；
(2)用刮膜式分子蒸餾器，采用兩級(jí)分離，一級(jí)蒸餾壓力6帕，在1. 5ml/min進(jìn)料速度、刮膜轉(zhuǎn)速300r/min蒸餾，蒸餾溫度為95°C ;二級(jí)蒸餾壓力10帕，在2. Oml/min進(jìn)料速度、刮膜轉(zhuǎn)速360r/min蒸餾，蒸餾溫度為100°C，除去精油異味，進(jìn)一步提純，收集精油，采用GC-MS分析，相對(duì)含量為77. 4% ；
(3)提取后渣子加入體積比95%乙醇，超聲波提取，超聲頻率70KHZ，料液比 I 15，超聲時(shí)間30min，薄層層析檢測(cè)分析，收集得到熊果酸提取液；
(4)回收乙醇，初步濃縮，得熊果酸浸膏，溶于丁醇，上200-300目硅膠柱層析，對(duì)提取物進(jìn)行純化；
(5)洗脫先用石油醚，除去殘余脂類等雜質(zhì)；用甲醇-丙酮8 I做為洗脫液洗脫，洗脫液用薄層層析跟蹤監(jiān)測(cè)(以95%熊果酸為對(duì)照品對(duì)照)；
(6)收集洗脫液濃縮，`真空干燥，得到含量為98. 5%的熊果酸成品。
權(quán)利要求
1.一種采用超臨界二氧化碳萃取并與分子蒸餾技術(shù)藕聯(lián)，超聲波提取再結(jié)合柱層析，分別得到精油、熊果酸二種成分的方法，其步驟如下 (1)杜香葉粉碎至40-60目，采用超臨界二氧化碳萃取，在一定溫度和壓力下，以1-2L/h的CO2流量，萃取4-6h，回收CO2，得到精油粗品； (2)用刮膜式分子蒸餾器，采用兩級(jí)分離，一級(jí)蒸餾在進(jìn)料速度l_1.5ml/min、200-300r/min刮膜轉(zhuǎn)速下蒸餾，蒸餾溫度為90-95°C ;二級(jí)蒸餾在進(jìn)料速度1. 2-2. Oml/min、250-360r/min刮膜轉(zhuǎn)速下蒸餾，蒸餾溫度為100_105°C，除去精油異味，進(jìn)一步提純精油，采用GC-MS分析，精油相對(duì)含量為65%以上； (3)提取后渣子加入一定體積濃度乙醇，超聲波提取，超聲頻率50-70KHZ，料液比I 10-15，超聲時(shí)間30-50min，薄層層析檢測(cè)分析，收集得到熊果酸提取液； (4)回收乙醇，初步濃縮，得熊果酸浸膏，溶于丁醇，上200-300目硅膠柱層析，對(duì)提取物進(jìn)行純化， (5)先用石油醚除去殘余脂類等雜質(zhì)；再用甲醇-丙酮以一定比例做為洗脫液洗脫，洗脫液用薄層層析跟蹤監(jiān)測(cè)(以95%熊果酸為對(duì)照品對(duì)照)； (6)收集洗脫液濃縮，真空干燥，得到含量為98%以上的熊果酸成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的采用超臨界二氧化碳萃取并與分子蒸餾技術(shù)藕聯(lián)，超聲波提取再結(jié)合柱層析，分別得到精油、熊果酸二種成分的方法，其特征是所述的步驟(I)中，超臨界二氧化碳萃取溫度為40-45°C，萃取壓力10-15Mpa。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的采用超臨界二氧化碳萃取并與分子蒸餾技術(shù)藕聯(lián)，超聲波提取再結(jié)合柱層析，分別得到精油、熊果酸二種成分的方法，其特征是所述的步驟(2)中，一級(jí)蒸餾壓力為3-5帕，二級(jí)蒸餾壓力8-10帕。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的采用超臨界二氧化碳萃取并與分子蒸餾技術(shù)藕聯(lián)，超聲波提取再結(jié)合柱層析，分別得到精油、熊果酸二種成分的方法，其特征是所述的步驟(3)中，有機(jī)溶劑乙醇體積濃度為80-95%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的采用超臨界二氧化碳萃取并與分子蒸餾技術(shù)藕聯(lián)，超聲波提取再結(jié)合柱層析，分別得到精油、熊果酸二種成分的方法，其特征是所述的步驟(5)中，洗脫溶劑甲醇-丙酮比例為8-10 I。
全文摘要
本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是1.超臨界CO2萃取技術(shù)，萃取過程系統(tǒng)密閉，避免小分子易揮發(fā)油的破壞，整個(gè)精油萃取在接近室溫條件下進(jìn)行，活性損失極少。2.運(yùn)用分子蒸餾技術(shù)純化精油，操作溫度遠(yuǎn)低于物質(zhì)常壓下沸點(diǎn)溫度，且加熱時(shí)間非常短，不會(huì)對(duì)物質(zhì)本身造成破壞，精油分離純化程度及產(chǎn)品收率高。3.采用超聲波提取，有效成分受熱時(shí)間降低、生物活性高；硅膠柱層析純化技術(shù)，使熊果酸的純度進(jìn)一步提高，簡(jiǎn)單易操作，生產(chǎn)成本大大降低。本發(fā)明大大降低了萃取時(shí)間，提高了萃取速度，同時(shí)純化效果明顯，有效成分含量高，可以同時(shí)得到精油和熊果酸兩種產(chǎn)品，且精油相對(duì)含量達(dá)到77.4％，熊果酸純度提高到98.73％。
文檔編號(hào)C11B9/02GK103045371SQ20121059553
公開日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2012年12月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月13日
發(fā)明者張亞紅, 姚德坤, 姚德利, 萬(wàn)莉 申請(qǐng)人:大興安嶺林格貝有機(jī)食品有限責(zé)任公司