吐魯番錦雞兒提取物及其制備方法和應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明涉及中藥技術(shù)領(lǐng)域，是一種吐魯番錦雞兒提取物及其制備方法和應(yīng)用，該吐魯番錦雞兒提取物按下述方法得到：將吐魯番錦雞兒原料粉碎后用乙醇進(jìn)行熱提得乙醇提取液再進(jìn)行濃縮得總浸膏，將總浸膏溶水后上樣大孔吸附樹(shù)脂，先用水洗脫，再用乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫部分的物質(zhì)，濃縮干燥后得到。本發(fā)明首次公開(kāi)了吐魯番錦雞兒提取物具有顯著抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活性，能顯著降低類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎者血清中的關(guān)鍵促炎細(xì)胞因子水平并升高抗炎因子水平，有效緩解風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的炎癥反應(yīng)，說(shuō)明對(duì)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型有較好的治療作用，并且本發(fā)明為純中藥，無(wú)激素，毒副作用小，因此可以安全的用于制備抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物或食品。
【專利說(shuō)明】
吐魯番錦雞兒提取物及其制備方法和應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及中藥技術(shù)領(lǐng)域，是一種吐魯番錦雞兒提取物及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA)是當(dāng)前危害人類健康的最重要疾病之一，被稱為"不死的癌 癥"。RA是一種W多關(guān)節(jié)受累、滑膜炎癥、骨與軟骨破壞等為主要特征的慢性全身性自身免 疫炎性疾病，其發(fā)病機(jī)理至今尚未完全闡明，普遍認(rèn)為與遺傳、感染和免疫調(diào)節(jié)等因素素亂 密切相關(guān)（Imboden JB. The immunopatho邑enesis of rheumatoid arthritis .Annu Rev Pathol Mech Dis 2009,4:417-434.)。我國(guó)RA的患病率約0.3%至0.4%，約有400萬(wàn)患者， 病程5年10年的致殘率為60%，晚期90 %患者喪失社會(huì)勞動(dòng)力和生活自理能力，是成人勞動(dòng) 力喪失的主要原因之一（Dai SM,化η XH,Zhao DB，aii YQ,Liu Y，Meng JM.Prevalence of rheumatic symptoms.rheumatoid arthritis.ankylosing spondylitis ,and gout in Shanghai，CMna:a COPCO畑 study.J 化eumatol 2003,30:2245-2251.)，因此造成了很多 家庭問(wèn)題W及巨大的社會(huì)負(fù)擔(dān)。現(xiàn)行治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的方法主要有外科手術(shù)治療、化 學(xué)藥物治療和細(xì)胞因子類生物制劑的治療。一般認(rèn)為外科手術(shù)只適用于晚期崎形病例，且 費(fèi)用昂貴，對(duì)機(jī)體創(chuàng)傷較大;化學(xué)藥物如非醬體抗炎藥、抗風(fēng)濕藥和糖皮質(zhì)激素等的長(zhǎng)期應(yīng) 用會(huì)引起胃腸道不適、骨髓抑制、肝損傷、高血壓等嚴(yán)重的不良反應(yīng);生物制劑在干預(yù)病變 細(xì)胞的同時(shí)，對(duì)正常細(xì)胞也同樣會(huì)產(chǎn)生一定的作用，干擾機(jī)體的固有免疫和適應(yīng)性免疫，從 而產(chǎn)生較大的毒性和破壞機(jī)體防御作用的風(fēng)險(xiǎn)（1.張義浜，劉志敏，熊凌霜.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎 發(fā)病機(jī)制及其治療方法研究進(jìn)展.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2005，21 (增刊）：88-94.2. Doan T,Massarotti E. Rheumatoid Arthritis : An Overview of New and Emerging Therapies.J Clin Pharmacol 2005,45:751-762.)。因此，尋求高效低毒的防治RA的藥物 仍是世界醫(yī)學(xué)界面臨的一項(xiàng)艱巨任務(wù)和難題。
[0003] 吐魯番錦雞兒C^iragana turfanensiS為豆科(Xeguminosae)錦雞兒屬（Caragana 化br.)植物，產(chǎn)新疆(伊準(zhǔn)地區(qū)、塔里木盆地、吐魯番盆地），生于海拔2100米的山坡、河流階 地、峭壁(潘蘭，賈新岳，石明輝，賈曉光，力瓦衣下?買合蘇提，鄭承劍，陳剛.新疆產(chǎn)四種錦 雞兒的民族植物學(xué)調(diào)查.中國(guó)現(xiàn)代中藥，2013，7:578-579.)。吐魯番錦雞兒的根具有活血、 桂風(fēng)、利尿、消腫的功效（中國(guó)藥材公司.《中國(guó)中藥資源志要》，科學(xué)出版社，1994,559.)，但 有關(guān)吐魯番錦雞兒化學(xué)成分及藥理作用未見(jiàn)報(bào)道，并且至今也未見(jiàn)吐魯番錦雞兒提取物用 于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎方面的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明提供了一種吐魯番錦雞兒提取物及其制備方法和應(yīng)用，克服了上述現(xiàn)有技 術(shù)之不足，其能有效解決現(xiàn)行治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的方法副作用大W及至今也未見(jiàn)吐魯番 錦雞兒提取物用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎方面的報(bào)道的問(wèn)題。
[0005] 本發(fā)明的技術(shù)方案之一是通過(guò)W下措施來(lái)實(shí)現(xiàn)的：一種吐魯番錦雞兒提取物，按 下述方法得到：第一步，將干燥的吐魯番錦雞兒原料粉碎后，投入提取罐，用體積濃度為 40 %至90 %的乙醇溶液在溫度為70°C至90°C條件下加熱回流提取2次至3次，每次提取時(shí)乙 醇溶液的用量為乙醇溶液與粉碎后的吐魯番錦雞兒原料質(zhì)量的體積質(zhì)量比為8至10,每次 提取時(shí)間為1小時(shí)至2小時(shí)，合并每次提取的提取液得到乙醇混提液，將乙醇混提液濃縮至 含水量不大于10%，得吐魯番錦雞兒總浸膏;第二步，按水與總浸膏的體積質(zhì)量比為1.5至3 的比例將吐魯番錦雞兒總浸膏溶于水得到混合液，將混合液上樣大孔吸附樹(shù)脂，上樣后，先 用體積為混合液體積2倍至4倍的水洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，再用體積為混合液體積3倍至5倍 的體積濃度為30 %至80 %的乙醇溶液洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集30 %至80 %乙醇洗脫部分 的物質(zhì)，將其濃縮干燥至含水量不大于10%，即得本發(fā)明的吐魯番錦雞兒提取物。
[0006] 下面是對(duì)上述發(fā)明技術(shù)方案之一的進(jìn)一步優(yōu)化或/和改進(jìn)：
[0007] 上述大孔吸附樹(shù)脂為AB-8大孔吸附樹(shù)脂或D-101大孔吸附樹(shù)脂或ZTC-1大孔吸附 樹(shù)脂或HPD-100大孔吸附樹(shù)脂或DA201大孔吸附樹(shù)脂。
[000引上述第一步中用乙醇加熱回流提取的溫度為80°C。
[0009] 上述加熱回流提取時(shí)所用的乙醇溶液的體積濃度為80%。
[0010] 本發(fā)明的技術(shù)方案之二是通過(guò)W下措施來(lái)實(shí)現(xiàn)的：一種吐魯番錦雞兒提取物的制 備方法，按下述步驟進(jìn)行:第一步，將干燥的吐魯番錦雞兒原料粉碎后，投入提取罐，用體積 濃度為40%至90%的乙醇溶液在溫度為70°C至90°C條件下加熱回流提取2次至3次，每次提 取時(shí)乙醇溶液的用量為乙醇溶液與粉碎后的吐魯番錦雞兒原料質(zhì)量的體積質(zhì)量比為8至 10,每次提取時(shí)間為1小時(shí)至2小時(shí)，合并每次提取的提取液得到乙醇混提液，將乙醇混提液 濃縮至含水量不大于10%，得吐魯番錦雞兒總浸膏;第二步，按水與總浸膏的體積質(zhì)量比為 1.5至3的比例將吐魯番錦雞兒總浸膏溶于水得到混合液，將混合液上樣大孔吸附樹(shù)脂，上 樣后，先用體積為混合液體積2倍至4倍的水洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，再用體積為混合液體積3 倍至5倍的體積濃度為30%至80%的乙醇溶液洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集30%至80%乙醇 洗脫部分的物質(zhì)，將其濃縮干燥至含水量不大于10%，即得本發(fā)明的吐魯番錦雞兒提取物。
[0011] 下面是對(duì)上述發(fā)明技術(shù)方案之二的進(jìn)一步優(yōu)化或/和改進(jìn)：
[0012] 上述所述的大孔吸附樹(shù)脂為AB-8大孔吸附樹(shù)脂或D-101大孔吸附樹(shù)脂或ZTC-1大 孔吸附樹(shù)脂或HPD-100大孔吸附樹(shù)脂或DA201大孔吸附樹(shù)脂。
[0013] 上述第一步中用乙醇加熱回流提取的溫度為80°C。
[0014] 上述加熱回流提取時(shí)所用的乙醇溶液的體積濃度為80%。
[0015] 本發(fā)明的技術(shù)方案之Ξ是通過(guò)W下措施來(lái)實(shí)現(xiàn)的：一種吐魯番錦雞兒提取物作為 制備治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明首次公開(kāi)了吐魯番錦雞兒提取物具有顯著抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活性，能顯著 降低類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎者血清中的關(guān)鍵促炎細(xì)胞因子水平并升高抗炎因子水平，可有效緩解 風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的炎癥反應(yīng)，說(shuō)明吐魯番錦雞兒提取物對(duì)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型有較好的治療作 用，并且本發(fā)明為純中藥，無(wú)激素，毒副作用小，因此可W安全的用于制備抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié) 炎藥物或食品。
【附圖說(shuō)明】
[0017] 圖1為本發(fā)明中吐魯番錦雞兒提取物對(duì)Cn型膠原誘導(dǎo)RA模型大鼠血清中細(xì)胞因 子水平的影響(mean±SD，n = 10) (*vs模型組，p<0.05;**vs模型組，p<0.01);
【具體實(shí)施方式】
[0018] 本發(fā)明不受下述實(shí)施例的限制，可根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案與實(shí)際情況來(lái)確定具體 的實(shí)施方式。本發(fā)明中所提到各種化學(xué)試劑和化學(xué)用品如無(wú)特殊說(shuō)明，均為現(xiàn)技術(shù)中公知 公用的化學(xué)試劑和化學(xué)用品;本發(fā)明中的百分?jǐn)?shù)如沒(méi)有特殊說(shuō)明，均為質(zhì)量百分?jǐn)?shù);本發(fā)明 中的水如沒(méi)有特殊說(shuō)明，為自來(lái)水或純凈水;本發(fā)明中的溶液若沒(méi)有特殊說(shuō)明，均為溶劑為 水的水溶液，例如，鹽酸溶液即為鹽酸水溶液。本實(shí)施例所用的吐魯番錦雞兒Caragana turfanensis為豆科(Xeguminosae)錦雞兒屬（Caragana化131·.)植物，植物采集于新疆烏恰 縣，曬干備用，作為本發(fā)明中的吐魯番錦雞兒原料;本發(fā)明中的體積質(zhì)量比的標(biāo)準(zhǔn)為2升配 比一公斤的固體物質(zhì)。
[0019] 下面結(jié)合實(shí)施例及附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述：
[0020] 實(shí)施例1，該吐魯番錦雞兒提取物按下述制備方法得到：第一步，將干燥的吐魯番 錦雞兒原料粉碎后，投入提取罐，用體積濃度為40 %至90 %的乙醇溶液在溫度為70°C至90 °C條件下加熱回流提取2次至3次，每次提取時(shí)乙醇溶液的用量為乙醇溶液與粉碎后的吐魯 番錦雞兒原料質(zhì)量的體積質(zhì)量比為8至10,每次提取時(shí)間為1小時(shí)至2小時(shí)，合并每次提取的 提取液得到乙醇混提液，將乙醇混提液濃縮至含水量不大于10%，得吐魯番錦雞兒總浸膏； 第二步，按水與總浸膏的體積質(zhì)量比為1.5至3的比例將吐魯番錦雞兒總浸膏溶于水得到混 合液，將混合液上樣大孔吸附樹(shù)脂，上樣后，先用體積為混合液體積2倍至4倍的水洗脫大孔 吸附樹(shù)脂柱，再用體積為混合液體積3倍至5倍的體積濃度為30 %至80 %的乙醇溶液洗脫大 孔吸附樹(shù)脂柱，收集30%至80%乙醇洗脫部分的物質(zhì)，將其濃縮干燥至含水量不大于10%， 即得本發(fā)明的吐魯番錦雞兒提取物。按照本實(shí)施例能夠方便快捷的得到錦雞兒提取物，且 操作簡(jiǎn)單;并且，本發(fā)明中的原料取吐魯番錦雞兒的全株或花或葉或根或莖均可，來(lái)源多樣 化，取材方便。
[0021] 實(shí)施例2,作為實(shí)施例1的優(yōu)化，大孔吸附樹(shù)脂為AB-8大孔吸附樹(shù)脂或D-101大孔吸 附樹(shù)脂或ZTC-1大孔吸附樹(shù)脂或HPD-100大孔吸附樹(shù)脂或DA201大孔吸附樹(shù)脂，運(yùn)些大孔吸 附樹(shù)脂均為現(xiàn)有技術(shù)中的大孔吸附樹(shù)脂，獲得途徑方便。，
[0022] 實(shí)施例3,作為上述實(shí)施例的優(yōu)化，第一步中用乙醇加熱回流提取的溫度為80°C。 80°C進(jìn)行乙醇熱提具有較好的加熱回流提取效果。
[0023] 實(shí)施例4,作為上述實(shí)施例的優(yōu)化，加熱回流提取時(shí)所用的乙醇溶液的體積濃度為 80%。采用該體積濃度的乙醇溶液具有較好的提取效果。
[0024] 實(shí)施例5,該吐魯番錦雞兒提取物按下述制備方法得到：第一步，將干燥的吐魯番 錦雞兒原料粉碎后，投入提取罐，用體積濃度為80%的乙醇溶液在溫度為80°C條件下加熱 回流提取3次，每次提取時(shí)乙醇溶液的用量為乙醇溶液與粉碎后的吐魯番錦雞兒原料質(zhì)量 的體積質(zhì)量比為10,每次提取時(shí)間為2小時(shí)，合并每次提取的提取液得到乙醇混提液，將乙 醇混提液濃縮至含水量不大于10%，得吐魯番錦雞兒總浸膏;第二步，按水與總浸膏的體積 質(zhì)量比為2的比例將吐魯番錦雞兒總浸膏溶于水得到混合液，將混合液上樣大孔吸附樹(shù)脂， 上樣后，先用體積為混合液體積3倍的水洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，再用體積為混合液體積5倍 的體積濃度為30 %至80 %的乙醇溶液洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集50 %至80 %乙醇洗脫部分 的物質(zhì)，將其濃縮干燥至含水量不大于10%，即得本發(fā)明的吐魯番錦雞兒提取物。本實(shí)施例 為具體的實(shí)施例，具有較好的提取效果。
[0025] 實(shí)施例6,根據(jù)上述實(shí)施例得到的吐魯番錦雞兒提取物作為制備治療類風(fēng)濕性關(guān) 節(jié)炎藥物的應(yīng)用。
[0026] 吐魯番錦雞兒提取物的抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)
[0027] 1、實(shí)驗(yàn)材料
[00%]取體重為140g至180g的成年雄性SD大鼠（常州卡文斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供)60 只；
[00巧]大鼠血清TNF-a、比-1β等化ISA試劑盒（eBioscience Technology公司）；
[0030] 主要儀器：足趾容積測(cè)量?jī)x（ZH-ZZY，安徽正華生物儀器設(shè)備有限公司）、酶標(biāo)儀 (Thermo MK3,美國(guó)熱電公司）、離屯、機(jī)(Xabo化ge 400R,胎raeus公司）、電子天平（FA110A 型，上海精密科學(xué)儀器有限公司）；
[0031] 雞Π 型膠原khicken type II collagen，Cn)，SIGMA公司，合肥博美生物科技有 限責(zé)任公司分裝，批號(hào):JC9301;
[0032] 醋酸:上海申博化工有限公司，批號(hào)1310101;
[0033] 弗氏完全佐劑（Complete Freund's Adjuvant,CFA):批號(hào)：SLBJ2845V，SIGMA;
[0034] 弗氏不完全佐劑（Incomplete Freund's Adjuvant, IFA):批號(hào)：SLBG5293V， SIGMAο
[00巧]3、實(shí)驗(yàn)造模及給藥
[0036] 取SD大鼠，首次免疫，將雞Π 型膠原(Cn型膠原)溶于O.lmmol/L醋酸中得到Cn醋 酸溶液，在4°C下攬拌溶解，濃度為4mg/ml，置4°C冰箱中過(guò)夜；
[0037] 將含4mg/ml結(jié)核分枝桿菌H37RA的弗氏完全佐劑(CFA)與cn醋酸溶液等體積混 勻、充分乳化，制成cn乳化劑；
[0038] 實(shí)驗(yàn)當(dāng)天(0天），除正常組（10只SD大鼠）外，剩余每只大鼠于其尾根部皮內(nèi)注射C Π 乳化劑10化L(含C Π 20化g/200g大鼠）進(jìn)行致敏造模；
[0039] 21天后W相同劑量的cn乳化劑于尾根部進(jìn)行再次免疫，此次cn乳化劑中的佐劑 用弗氏不完全佐劑(IFA)代替；
[0040] 大約在實(shí)驗(yàn)第29天，造模大鼠足趾關(guān)節(jié)出現(xiàn)紅腫或紅腫等關(guān)節(jié)炎癥狀。
[0041] 分組:實(shí)驗(yàn)第31d將造模的SD大鼠隨機(jī)分為模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組 和地塞米松組，還有沒(méi)有進(jìn)行造模的10只SD大鼠為正常組，每組10只動(dòng)物。給藥體積為2ml/ 200g;每天灌胃給藥一次，共給予30次。
[0042] 給藥:將按本發(fā)明上述實(shí)施例得到的吐魯番錦雞兒作為受試藥品；
[0043] 低劑量組每天灌胃受試藥品一次，共給藥30次，每次給藥120mg/kg;
[0044] 中劑量組每天灌胃受試藥品一次，共給藥30次，每次給藥240mg/kg;
[0045] 高劑量組每天灌胃受試藥品一次，共給藥30次，每次給藥480mg/kg;
[0046] 地塞米松組每天灌胃地塞米松一次，共給藥30次，每次給藥0.05mg/kg;;
[0047] 正常組每天灌胃鹽水一次；
[004引4、觀察指標(biāo)
[0049 ] (1)對(duì)SD大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度進(jìn)行關(guān)節(jié)炎指數(shù)評(píng)分，每3天評(píng)分一次。
[0050] (2)在實(shí)驗(yàn)結(jié)束次日，大鼠尾部靜脈取血，置冰浴30min后，W2000r/min離屯、 15min，取上清，用化ISA法測(cè)定兩組大鼠血清中mmp-3，mmp-9，化-1β，化-6，化-8,化-17A， TNF-a，比-1〇水平，按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。
[0化1] 5、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0052] 采用SPSS17.0對(duì)兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行兩樣本t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P<0.05時(shí)認(rèn)為差異有統(tǒng) 計(jì)學(xué)意義。
[0053] (1)大鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)評(píng)分
[0054] 如表1所示，低劑量組、中劑量組、高劑量組的SD大鼠從給藥第4天開(kāi)始至實(shí)驗(yàn)結(jié)束 的足關(guān)節(jié)炎指數(shù)明顯低于模型組(9<0.05或八0.01)，陽(yáng)性對(duì)照藥地塞米松組從給藥第4天 開(kāi)始至實(shí)驗(yàn)結(jié)束的足關(guān)節(jié)炎指數(shù)明顯低于模型組(P<〇.01)。給藥第28天，低劑量組、中劑量 組、高劑量組足關(guān)節(jié)炎指數(shù)分別為〇.4±0.5、0.8±0.6、1.1±0.7，模型組足關(guān)節(jié)炎指數(shù)為 4.5±0.7,可W看出吐魯番錦雞兒提取物可顯著降低II型膠原誘導(dǎo)的RA大鼠足關(guān)節(jié)炎指 數(shù)，與模型組相比存在顯著性差異，與陽(yáng)性對(duì)照組(地塞米松組)相比效果相當(dāng)，且高劑量組 足關(guān)節(jié)炎指數(shù)明顯好于陽(yáng)性對(duì)照組(地塞米松組），說(shuō)明吐魯番錦雞兒提取物對(duì)大鼠類風(fēng)濕 性關(guān)節(jié)炎模型有較好的治療作用。
[0055] (2)血清學(xué)指標(biāo)
[0化6] 圖1中A為mmp-3，B為mmp-9，C為化-ie，D為比-6，E為化-8，F(xiàn)為化-10，G為化-17A，H 為T(mén)NF; NG:正常組、MG:模型組、PG:陽(yáng)性對(duì)照組(地塞米松組）、LCG:低劑量組、MCG:中劑量 組、HCG:高劑量組。
[0化7] 如圖1所示，模型組SD大鼠血清中mmp-3、mmp-9、比-1β、比-6、比-8、化-10、比-17A、 TNF-a的水平分別為12.273pg/mL、2.247pg/mL、540.976pg/mL、279.218pg/mL、69.448pg/ mL、21.963pg/mL、24.918pg/mL、148.640pg/mL。
[0化引與模型組比較，受試藥物化FGZ各劑量組動(dòng)物的血清炎癥因子mmp-3，mmp-9,化-I β，比-6,比-8,化-17A，TNF-a表達(dá)水平明顯下降；比-10表達(dá)水平升高。其中試驗(yàn)結(jié)束時(shí)低劑 量組血清炎癥因子水平為mmp-3為7.153pg/mL、mmp-9為1.430pg/mL、化-1β為367.23化邑/ 1^、化-6為172.5219旨/1^、比-8為51.12化旨/血、化-10為36.4389旨/1^、比-174為16.812口邑/ mL、TNF-a為101.286pg/mL，各劑量組與陽(yáng)性對(duì)照組(地塞米松組)相比效果相當(dāng)，且高劑量 組足關(guān)節(jié)炎指數(shù)明顯好于陽(yáng)性對(duì)照組(地塞米松組），說(shuō)明吐魯番錦雞兒提取物灌胃給藥能 顯著降低類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型血清中的關(guān)鍵促炎細(xì)胞因子水平并升高抗炎因子水平， 可有效緩解RA大鼠的炎癥反應(yīng)。
[0059] 鑒于上述藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果，能夠有效說(shuō)明根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例得到的吐魯番錦雞兒提 取物具有顯著抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活性，因此可用于制備抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物或食品。
[0060] W上技術(shù)特征構(gòu)成了本發(fā)明的實(shí)施例，其具有較強(qiáng)的適應(yīng)性和實(shí)施效果，可根據(jù) 實(shí)際需要增減非必要的技術(shù)特征，來(lái)滿足不同情況的需求。
[0061]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種吐魯番錦雞兒提取物，其特征在于按下述方法得到:第一步，將干燥的吐魯番錦 雞兒原料粉碎后，投入提取罐，用體積濃度為40%至90%的乙醇溶液在溫度為70 °C至90 °C條 件下加熱回流提取2次至3次，每次提取時(shí)乙醇溶液的用量為乙醇溶液與粉碎后的吐魯番錦 雞兒原料質(zhì)量的體積質(zhì)量比為8至10,每次提取時(shí)間為1小時(shí)至2小時(shí)，合并每次提取的提取 液得到乙醇混提液，將乙醇混提液濃縮至含水量不大于10%，得吐魯番錦雞兒總浸膏；第二 步，按水與總浸膏的體積質(zhì)量比為1.5至3的比例將吐魯番錦雞兒總浸膏溶于水得到混合 液，將混合液上樣大孔吸附樹(shù)脂，上樣后，先用體積為混合液體積2倍至4倍的水洗脫大孔吸 附樹(shù)脂柱，再用體積為混合液體積3倍至5倍的體積濃度為30%至80%的乙醇溶液洗脫大孔吸 附樹(shù)脂柱，收集30%至80%乙醇洗脫部分的物質(zhì)，將其濃縮干燥至含水量不大于10%，即得本 發(fā)明的吐魯番錦雞兒提取物。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的吐魯番錦雞兒提取物，其特征在于大孔吸附樹(shù)脂為AB-8大孔 吸附樹(shù)脂或D-101大孔吸附樹(shù)脂或ZTC-1大孔吸附樹(shù)脂或HPD-100大孔吸附樹(shù)脂或DA201大 孔吸附樹(shù)脂。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的吐魯番錦雞兒提取物，其特征在于第一步中用乙醇加熱回 流提取的溫度為80°C。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的吐魯番錦雞兒提取物，其特征在于加熱回流提取時(shí)所 用的乙醇溶液的體積濃度為80%。5. -種根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4所述的吐魯番錦雞兒提取物的制備方法，其特征在于 按下述步驟進(jìn)行:第一步，將干燥的吐魯番錦雞兒原料粉碎后，投入提取罐，用體積濃度為 40%至90%的乙醇溶液在溫度為70 °C至90 °C條件下加熱回流提取2次至3次，每次提取時(shí)乙醇 溶液的用量為乙醇溶液與粉碎后的吐魯番錦雞兒原料質(zhì)量的體積質(zhì)量比為8至10,每次提 取時(shí)間為1小時(shí)至2小時(shí)，合并每次提取的提取液得到乙醇混提液，將乙醇混提液濃縮至含 水量不大于10%，得吐魯番錦雞兒總浸膏;第二步，按水與總浸膏的體積質(zhì)量比為1.5至3的 比例將吐魯番錦雞兒總浸膏溶于水得到混合液，將混合液上樣大孔吸附樹(shù)脂，上樣后，先用 體積為混合液體積2倍至4倍的水洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，再用體積為混合液體積3倍至5倍的 體積濃度為30%至80%的乙醇溶液洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集30%至80%乙醇洗脫部分的物 質(zhì)，將其濃縮干燥至含水量不大于10%，即得本發(fā)明的吐魯番錦雞兒提取物。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的吐魯番錦雞兒提取物的制備方法，其特征在于大孔吸附樹(shù)脂 為AB-8大孔吸附樹(shù)脂或D-101大孔吸附樹(shù)脂或ZTC-1大孔吸附樹(shù)脂或HPD-100大孔吸附樹(shù)脂 或DA201大孔吸附樹(shù)脂。7. 根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的吐魯番錦雞兒提取物的制備方法，其特征在于第一步中用 乙醇加熱回流提取的溫度為80°C。8. 根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的吐魯番錦雞兒提取物的制備方法，其特征在于加熱回流提 取時(shí)所用的乙醇溶液的體積濃度為80%。9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的吐魯番錦雞兒提取物的制備方法，其特征在于加熱回流提取 時(shí)所用的乙醇溶液的體積濃度為80%。10. -種根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4所述的吐魯番錦雞兒提取物作為制備治療類風(fēng)濕性 關(guān)節(jié)炎藥物的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K36/48GK105998155SQ201610458363
【公開(kāi)日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年6月22日
【發(fā)明人】潘蘭, 賈曉光, 賈新岳, 鄭承劍, 江紅南, 賈月梅, 力瓦衣丁·買合蘇提
【申請(qǐng)人】新疆維吾爾自治區(qū)中藥民族藥研究所