一種骨髓富集型微納材料及其應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料及其用途，其具備下述所有性質(zhì)：(1)表面為親水性，使其經(jīng)由靜脈注入到生物體內(nèi)并通過(guò)血液循環(huán)富集于骨髓中；(2)微納材料具有剛性，使其可以通過(guò)骨髓血竇的內(nèi)皮細(xì)胞間隙進(jìn)入骨髓中。其用途是在制備靶向富集于骨髓的藥物中的應(yīng)用。其制備方法簡(jiǎn)單快速，生物相容性好，在骨髓區(qū)域高度富集，有一定的停留時(shí)間又可以最終代謝出體外，作為一種骨靶向的藥物分子以及骨髓保護(hù)劑具有良好的應(yīng)用前景。
【專利說(shuō)明】
-種骨髓富集型微納材料及其應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物材料領(lǐng)域，具體設(shè)及一種骨髓富集型微納材料及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來(lái)癌癥的發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢(shì)，嚴(yán)重地威脅著人類的健康。手術(shù)、放 療和化療是目前治療癌癥的Ξ大傳統(tǒng)治療方法。目前60%-70%的腫瘤病人需要放化療，一 般手術(shù)后2到4周進(jìn)行合理的放化療可W及時(shí)殺滅"轉(zhuǎn)移灶"，有效抵制腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移， 而放化療能否堅(jiān)持的關(guān)鍵是骨髓造血細(xì)胞的保護(hù)。眾所周知，化療不僅會(huì)殺死癌細(xì)胞，正常 細(xì)胞也會(huì)受到損害，而且放療中使用的射線對(duì)于骨髓細(xì)胞的殺傷作用可能會(huì)對(duì)病人產(chǎn)生二 次傷害甚至于患上白血病等疾病。許多放化療均能引起不同程度的骨髓抑制，最初表現(xiàn)為 白細(xì)胞，血小板下降，隨著劑量的增加，嚴(yán)重時(shí)紅細(xì)胞和血紅蛋白均下降，甚至可能發(fā)生再 生障礙性貧血。會(huì)在殺傷癌細(xì)胞的同時(shí)損壞患者的骨髓細(xì)胞，造成二次傷害。
[0003] 傳統(tǒng)的可W祀向骨髓的藥物分子都是通過(guò)連接一些祀向基團(tuán)或者憐酸基團(tuán)等手 段來(lái)實(shí)現(xiàn)的，制備方法復(fù)雜，且如抗體等此類祀向分子價(jià)格較高，往往得到的祀向效果并不 理想并且時(shí)間緩慢。良好的骨髓祀向類藥物分子應(yīng)當(dāng)是可W迅速富集在骨髓區(qū)域中，對(duì)其 他臟器無(wú)明顯的毒副作用，在骨髓區(qū)域可W停留較長(zhǎng)時(shí)間發(fā)揮作用，最后可W代謝排出體 外。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的之一是提供一種骨髓富集型微納材料，其具有快速高效的骨髓富集 性質(zhì)。
[0005] 本發(fā)明所提供骨髓富集型微納材料是富勒締和/或金屬富勒締微納材料，通過(guò)靜 脈注射，可W快速高效的祀向富集于骨髓中。
[0006] 本發(fā)明所述的富勒締和/或金屬富勒締微納材料具備下述所有性質(zhì)：（1)表面為親 水性，使其能夠經(jīng)由靜脈注入到生物體內(nèi)并通過(guò)血液循環(huán)富集于骨髓中；（2)微納材料具有 剛性(即不易變形），使其可W通過(guò)骨髓血竇的內(nèi)皮細(xì)胞間隙進(jìn)入骨髓中。
[0007] 本發(fā)明所述的富勒締和/或金屬富勒締微納材料是由富勒締和/或金屬富勒締本 體材料經(jīng)水溶性修飾得到的，所述的富勒締和/或金屬富勒締微納材料是富勒締和/或金屬 富勒締水溶性衍生物。
[000引所述的富勒締和/或金屬富勒締微納材料的顆粒尺寸范圍為l-500nm，具體可為 140-200nm。
[0009] 本發(fā)明所述的富勒締和/或金屬富勒締本體材料既包括空屯、富勒締 C2n等，亦包括 內(nèi)嵌金屬富勒締，主要種類有臟〔2。易齡2。、嫩齡2。美卿〔2。、12〔2齡2。、125齡2。易0齡2。和啦八3- xN@C2n;其中，M、A均代表金屬元素，所述M、A均選自Sc、Y和銅系金屬元素化a-Lu)中的任意一 種;30《n《60;0《x《3。
[0010] 為了獲得具有剛性結(jié)構(gòu)的水溶性修飾的富勒締和/或金屬富勒締微納材料，有效 的途徑是通過(guò)在共價(jià)或非共價(jià)作用將非水溶性富勒締和/或金屬富勒締本體材料經(jīng)水溶性 修飾得到。常用的共價(jià)修飾可W通過(guò)在堿性條件下的固液反應(yīng)制備得到。例如，通過(guò)富勒締 和/或金屬富勒締固體粉末與出0姐堿性下反應(yīng)，即可制備徑基衍生物;通過(guò)富勒締和/或金 屬富勒締固體粉末與此化和氨反應(yīng)，可制備氨基衍生物，均能達(dá)到水溶性修飾的目的。非共 價(jià)鍵修飾方法可W使用常規(guī)水溶性載體，如脂質(zhì)體、聚合物膠束、蛋白等通過(guò)疏水-疏水相 互作用形成水溶性修飾的富勒締和/或金屬富勒締微納材料。上述修飾方法均可按照現(xiàn)有 技術(shù)公開(kāi)的方法進(jìn)行修飾。
[0011] 所述的水溶性修飾的富勒締和/或金屬富勒締微納材料具體可為在所述富勒締 和/或金屬富勒締本體材料表面修飾親水性官能團(tuán)徑基、氨基和簇基中的至少一種，或者， 通過(guò)疏水-疏水相互作用（非共價(jià)共價(jià)鍵)使所述富勒締和/或金屬富勒締本體材料與水溶 性載體(如:脂質(zhì)體、聚合物膠束、蛋白等)形成所述的水溶性富勒締和/或金屬富勒締微納 材料。
[0012] 所述水溶性載體為醫(yī)學(xué)中常用的藥物載體，具體可選自脂質(zhì)體、聚合物膠束和蛋 白中的至少一種。
[0013] 其中，所述聚合物膠束為聚乙丙交醋聚乙二醇(PEG-PLGA)、聚賴氨酸或殼聚糖。所 述蛋白為白蛋白或轉(zhuǎn)鐵蛋白。
[0014] 所述富勒締和/或金屬富勒締微納材料具體可為水溶性徑基化禮金屬富勒締 (GFNC、Gd@C82 (0H)η)或水溶性徑基化空屯、富勒締(C60 (0H)η)。
[0015] 本發(fā)明所述水溶性富勒締和/或金屬富勒締微納材料在水溶液中一般具有1- 500nm的尺寸，并且該微納材料具有一定的剛性(不易變形），使得微納材料經(jīng)血液循環(huán)易于 穿過(guò)骨髓血竇中內(nèi)皮細(xì)胞間的納米孔隙，能夠利用血管內(nèi)外壓力差即可快速地進(jìn)入骨髓 中。
[0016] 目前已報(bào)道的基于富勒締和/或金屬富勒締相關(guān)的親骨試劑大多需要借助結(jié)合憐 脂基團(tuán)祀向骨組織(PCT/US2001/013445; CN 200610011777)，制備流程繁瑣，聚集量低，時(shí) 間久。本發(fā)明借助微納材料與骨髓血竇內(nèi)皮細(xì)胞的特殊結(jié)構(gòu)性質(zhì)，無(wú)需進(jìn)一步衍生物，即可 實(shí)現(xiàn)在骨髓中的富集，而且可W代謝出生物體外。
[0017] 本發(fā)明所述的富勒締和/或金屬富勒締微納材料在制備祀向富集于骨髓的藥物或 藥物載體中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0018] 本發(fā)明的目的之二是提供一種將富勒締和/或金屬富勒締微納材料快速富集于骨 髓中的方法。
[0019] 本發(fā)明所提供的方法，包括如下步驟:通過(guò)靜脈注射富勒締和/或金屬富勒締微納 材料，經(jīng)血液循環(huán)，借助骨髓血竇中的特殊結(jié)構(gòu)（內(nèi)皮細(xì)胞間的納米孔隙），快速進(jìn)入骨髓， 并富集于骨髓處。
[0020] W水溶性禮徑基化金屬富勒締為例，靜脈注射小鼠體內(nèi)，分別于不同時(shí)間點(diǎn)脫頸 處死小鼠，取其臟器和骨組織，同時(shí)使用ICP-MS測(cè)定禮離子濃度和uil放射性標(biāo)記方法測(cè)試 其體內(nèi)代謝分布。兩種不同的方法均表明我們得到的藥物分子可W快速的富集在小鼠骨 中，并且通過(guò)進(jìn)一步的分析，我們發(fā)現(xiàn)，水溶性徑基化禮金屬富勒締在骨髓中的單位質(zhì)量含 量是骨質(zhì)的12倍之多，說(shuō)明其具有良好的骨髓祀向性。
[0021] 本發(fā)明中，W水溶性富勒締和/或金屬富勒締微納材料作為骨髓祀向劑，其能高效 快速地富集于骨髓中，并且具有良好的生物相容性，同時(shí)具有高效清除自由基的能力，可w 進(jìn)一步用于保護(hù)骨髓細(xì)胞。通過(guò)靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)后，可W在幾小時(shí)內(nèi)迅速富集于骨 髓中，在骨髓中的停留時(shí)間明顯高于在在其他器官中的時(shí)間，并且材料可W在生物體內(nèi)代 謝出去，對(duì)活體無(wú)明顯的毒副作用，因此是一種制備純化簡(jiǎn)單快速，生物相容性好，在骨髓 區(qū)域可W快速富集，作為一種骨髓保護(hù)劑或者骨疾病的治療平臺(tái)具有良好的應(yīng)用前景。
【附圖說(shuō)明】
[0022] 圖1為實(shí)施例1中制備的水溶性徑基化禮金屬富勒締粒徑分布圖。
[0023] 圖2為實(shí)施例2中制備的水溶性徑基化空屯、富勒締粒徑分布圖。
[0024] 圖3為實(shí)施例3中使用ICP-MS測(cè)定水溶性徑基化禮金屬富勒締在小鼠體內(nèi)代謝分 布圖。
[0025] 圖4為實(shí)施例3中使用1311標(biāo)記法測(cè)定水溶性徑基化禮金屬富勒締在小鼠體內(nèi)代 謝分布圖。
[0026] 圖5a-f為實(shí)施例4中水溶性徑基化禮金屬富勒締樣品和在不同時(shí)間點(diǎn)小鼠骨髓中 的電子探針譜圖。
[0027] 圖6為實(shí)施例5中注射水溶性徑基化禮金屬富勒締組和對(duì)照組小鼠臟器系數(shù)，均為 注射30d后的值。
[0028] 圖7為實(shí)施例5中注射水溶性徑基化禮金屬富勒締組和對(duì)照組小鼠體重變化。
[0029] 圖8為實(shí)施例5中注射水溶性徑基化禮金屬富勒締組小鼠血生化測(cè)試，均為注射 30d后的值。
[0030] 圖9為實(shí)施例5中注射水溶性徑基化空屯、富勒締組和對(duì)照組小鼠臟器系數(shù)，均為注 射30d后的值。
[0031 ]圖10為實(shí)施例5中注射水溶性徑基化空屯、富勒締組和對(duì)照組小鼠體重變化。
[0032] 圖11為實(shí)施例5中注射水溶性徑基化空屯、富勒締組小鼠血生化測(cè)試，均為注射30d 后的值。
【具體實(shí)施方式】
[0033] 下面通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的方法進(jìn)行說(shuō)明，但本發(fā)明并不局限于此。
[0034] 下述實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法;所述試劑和材料，如 無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑獲得。
[0035] 實(shí)施例1、制備水溶性禮金屬富勒締徑基衍生物-水溶性徑基化禮金屬富勒締：
[0036] 1)將1 OOmg Gd@C8個(gè)體粉末(購(gòu)買于廈口福納新材料科技有限公司）加入100ml的 單口瓶中，分別加入7ml體積分?jǐn)?shù)為30%的過(guò)氧化氨水溶液和3ml 2M的氨氧化鋼水溶液，油 浴加熱到70°C，反應(yīng)2-化。
[0037] 2)反應(yīng)后使用M.W. =3500透析袋除去小分子，使用電導(dǎo)率儀監(jiān)測(cè)直至透析完成， 濃縮得到的產(chǎn)物即可得到水溶性徑基化金屬富勒締，經(jīng)化S測(cè)定，其相應(yīng)的測(cè)試結(jié)果如圖1 所示，從圖1可得知:其在水溶液中的平均粒徑為140nm，粒徑分布均一。
[0038] 實(shí)施例2,制備水溶性空屯、富勒締徑基衍生物-水溶性徑基化金屬富勒締：
[0039] 1)將lOOmg C6個(gè)體粉末(購(gòu)買于廈口福納新材料科技有限公司）加入100ml的單口 瓶中，分別加入7ml體積分?jǐn)?shù)為30%的過(guò)氧化氨水溶液和3ml的2M的氨氧化鋼水溶液，油浴 加熱到70°C，反應(yīng)2-化。
[0040] 2)反應(yīng)后使用M.W. =3500透析袋除去小分子，使用電導(dǎo)率儀監(jiān)測(cè)直至透析完成， 濃縮得到的產(chǎn)物即可得到水溶性徑基化空屯、富勒締，經(jīng)化S測(cè)定，其相應(yīng)的測(cè)試結(jié)果如圖2 所示，從圖2可得知:其在水溶液中的平均粒徑為200nm，粒徑分布均一。
[0041] 實(shí)施例3、水溶性徑基化禮金屬富勒締在活體內(nèi)代謝分布情況：
[0042] 1)試驗(yàn)前處理：
[00創(chuàng)動(dòng)物模型：選用4-5周BALB/c小鼠，在右側(cè)大腿上接種106個(gè)小鼠肝癌細(xì)胞化22細(xì) 胞)（北京協(xié)和細(xì)胞庫(kù)提供)100μ1，接種5-7天后，腫瘤直徑達(dá)到5mm左右時(shí)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；
[0044] 2)試驗(yàn)：
[0045] 靜脈注射150化濃度為ImM的水溶性徑基化禮金屬富勒締，分別在注射后15min、 3〇111111，45111111，化、地、24}1、7(1、15(1和30(1后脫頸處死小鼠，并當(dāng)即解剖取小鼠的主要臟器 (屯、，肝，脾，肺，腎，腸，胃等）、小鼠大腦、腔骨和肌肉。將臟器、大腦和肌肉等部位取一部分 稱重，將腔骨稱重，之后用PBS將小鼠的腔骨骨髓沖洗出來(lái)，再次對(duì)腔骨稱重，算出骨髓的質(zhì) 量。將W上組織消解后，使用200nm濾膜進(jìn)行過(guò)濾；
[0046] 3) ICP-MS的測(cè)定禮離子濃度方法進(jìn)行測(cè)試：
[0047] 取lOOppb濃度的Gd3+標(biāo)準(zhǔn)溶液，配成0、30、50、100、200、300ppb的標(biāo)準(zhǔn)溶液樣品，作 為ICP-MS測(cè)試的標(biāo)樣，分別測(cè)得上述消解液中Gd3+的濃度，之后通過(guò)換算公式，換算出等質(zhì) 量的不同組織中禮離子的濃度。每組平行實(shí)驗(yàn)有6只小鼠，取平均值。
[0048] 測(cè)試結(jié)果如圖3所示，從圖3可得知：在Ih之內(nèi)水溶性徑基化禮金屬富勒締材料就 可W在骨中有明顯的富集效果，僅略低于肝臟部位的濃度，但是隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，在骨中禮 濃度可W持續(xù)在較高水平，而在30d之后，骨中材料濃度明顯降低，說(shuō)明其具有可代謝特性， 運(yùn)也與富勒締在活體水平可代謝是相符合的。
[0049] 實(shí)施例1中水溶性徑基化禮金屬富勒締在小鼠骨髓和骨質(zhì)中的相對(duì)含量如下表1 所示，從表1可得知:將骨質(zhì)和骨髓分離，分別測(cè)定水溶性徑基化禮金屬富勒締在小鼠骨髓 和骨質(zhì)的含量。在注射樣品24h后，骨髓中的禮含量為5.84±0.58ng/mg，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于在骨質(zhì)中 的含量(〇.45±0.044ng/mg)，進(jìn)一步說(shuō)明了材料具有在骨髓中祀向富集的特征。
[0050] 表1、水溶性徑基化禮金屬富勒締在小鼠骨髓和骨質(zhì)中的相對(duì)含量
[0化1 ]

[0052]實(shí)施例4、放射性標(biāo)記法測(cè)定水溶性徑基化禮金屬富勒締活體內(nèi)代謝分布情況： [0化3] 1)試驗(yàn)前處理：
[0054] 動(dòng)物模型：選用4-5周BALB/c小鼠，在右側(cè)大腿上接種106個(gè)小鼠肝癌細(xì)胞化22細(xì) 胞），接種5-7天后，腫瘤直徑達(dá)到5mm左右時(shí)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
[0化5] 2)艦標(biāo)：
[0化6]標(biāo)記條件：底物：~5mg/ml，1ml;抑=8，曲Ρ04/ΓΜ)Η; 1叫：5. OMBq，20μ1^;氯錠-T: 20μ L，3mg/mL反應(yīng)溫度：30°C ;反應(yīng)時(shí)間：3h ;終止劑：Na2S2〇日；標(biāo)記率：~80 % ;放化純度> 99%。
[0057] 3)1"1放射性標(biāo)記方法進(jìn)行測(cè)試：
[0058] 水溶性徑基化禮金屬富勒締表面存在的徑基可W與uil進(jìn)行置換反應(yīng)，通過(guò)uil發(fā) 射出的伽馬射線，可W用于高靈敏度檢測(cè)其在生物體內(nèi)的代謝行為。具體地，首先使用氯 胺-T水溶液（lOmg/mL)氧化37MBq的Na 1311溶液(體積比位2:5) lOmin后，加入待標(biāo)記樣品， 常溫下震蕩反應(yīng)化。反應(yīng)結(jié)束后，所得反應(yīng)液用S邱hadex G-25凝膠柱進(jìn)行分離純化，去除 無(wú)機(jī)鹽離子，即得放射性艦-131標(biāo)記樣品（放化純度>97%)。將50化活化后的溶液分別經(jīng) 尾靜脈注射于荷瘤鼠體內(nèi)，分別在注射1.化、4.0h、24h和4她后脫頸處死小鼠，解剖取出重 要組織器官（屯、、肝、脾、肺、腎、腫瘤、腦、骨、肉等)進(jìn)行伽馬計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)各器官中進(jìn)行標(biāo)記的 樣品含量。
[0059] 測(cè)試結(jié)果如圖4所示，從圖4可得知：和ICP離子濃度測(cè)試方法得到的結(jié)果類似，佐 證了水溶性徑基化禮金屬富勒締材料可W在骨中具有明顯的富集效果。同時(shí)，將小鼠骨髓 從腔骨中沖出，分別測(cè)量骨髓和骨質(zhì)的質(zhì)量W及伽馬計(jì)數(shù)的強(qiáng)度，從表2中可W看出，水溶 性徑基化禮金屬富勒締主要是富集在骨髓中。
[0060] 表2、水溶性徑基化禮金屬富勒締在小鼠骨髓和骨質(zhì)中的相對(duì)含量
[0061]
[0062] 實(shí)施例5、電子探針測(cè)定骨髓富集量：
[0063] 1)試驗(yàn)前處理：
[0064] 動(dòng)物模型：選用4-5周BALB/c小鼠，在右側(cè)大腿上接種106個(gè)小鼠肝癌細(xì)胞化22細(xì) 胞），接種5-7天后，腫瘤直徑達(dá)到5mm左右時(shí)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
[0065] 實(shí)驗(yàn)組：選用4-5周BALB/c小鼠，在右側(cè)大腿上接種106個(gè)小鼠肝癌細(xì)胞化22細(xì) 胞），接種5-7天后，腫瘤直徑達(dá)到5mm左右時(shí)，靜脈注射15化L濃度為9(K)ppb的水溶性徑基化 金屬富勒締。
[0066] 2)試驗(yàn)：
[0067] 小鼠實(shí)驗(yàn):靜脈注射15化L濃度為ImM的水溶性徑基化禮金屬富勒締，分別在注射 前，注射后0.化、化、4h和2地，將小鼠脫頸處死，并當(dāng)即解剖取小鼠雙側(cè)腔骨。立即用PBS將 小鼠的腔骨骨髓沖洗出來(lái)，并且均勻涂抹在導(dǎo)電膠表面，之后用電子探針儀器進(jìn)行禮元素 含量檢測(cè)。
[0068] 水溶性徑基化禮金屬富勒締樣品實(shí)驗(yàn):將水溶性徑基化禮金屬富勒締樣品水溶液 均勻涂抹在導(dǎo)電膠表面，待其干燥后，用電子探針儀器進(jìn)行測(cè)試。
[0069] 相應(yīng)的測(cè)試結(jié)果如圖5所示，從圖5a中可W看出，在2.04A的位置是水溶性徑基化 禮金屬富勒締中禮離子在電子探針實(shí)驗(yàn)中所處的位置，為接下來(lái)對(duì)于小鼠骨髓中禮離子含 量提供了參考。
[0070] 從圖5b中可W看出，打藥前，小鼠的骨髓中幾乎檢測(cè)不到禮離子的存在。在圖5c- 5f中，我們可W看到在打藥后，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，小鼠骨髓中所檢測(cè)出的禮含量也隨著增 加，分別為在0.化時(shí)為0.58% (質(zhì)量百分比，下同），在化時(shí)為1.33 %，在4h時(shí)為1.49%，W及 在24h時(shí)為2.2%。從電子探針的實(shí)驗(yàn)也進(jìn)一步佐證了我們的材料可W快速進(jìn)入并且富集在 小鼠的骨髓中。
[0071 ]實(shí)施例6、水溶性徑基化禮金屬富勒締在活體水平的毒性研究：
[0072] 水溶性徑基化禮金屬富勒締組:靜脈注射15化L濃度為ImM的水溶性徑基化禮金屬 富勒締，分別在注射后15111111、3〇111111，45111111，化、地、2地、7(1、15(1和30(1，取小鼠摘眼球眼眶取 血，置于5ml離屯、管中，于3500r、離屯、15min，將得到的血清轉(zhuǎn)移到20化L離屯、管中，在血生化 檢測(cè)儀中檢測(cè)小鼠的血生化指標(biāo)，ALT，ALP，AST，BUN，LDH等。觀察30d內(nèi)小鼠體重變化。
[0073] 對(duì)照組：與打藥組做相同的處理用W對(duì)比，用生理鹽水代替水溶性徑基化禮金屬 富勒締。
[0074] 相應(yīng)的測(cè)試結(jié)果如圖6、圖7和圖8所示，打藥組和對(duì)照組無(wú)論在小鼠體重還是短長(zhǎng) 期臟器系數(shù)都無(wú)明顯區(qū)別，說(shuō)明該材料的毒性較小，可W進(jìn)一步用于臨床研究；從圖8可得 知：明顯看出打藥組和對(duì)照組相比，肝腎功能沒(méi)有明顯降低，說(shuō)明其毒性較小，佐證了我們 的材料是安全無(wú)毒的。
[0075] 實(shí)施例7、水溶性徑基化空屯、富勒締在活體水平的毒性研究：
[0076] 水溶性徑基化空屯、富勒締組:靜脈注射15化L濃度為ImM的水溶性徑基化空屯、富勒 締，在注射后30d，取小鼠摘眼球眼眶取血，置于5ml離屯、管中，于3500r、離屯、15min，將得到 的血清轉(zhuǎn)移到20化L離屯、管中，在血生化檢測(cè)儀中檢測(cè)小鼠的血生化指標(biāo)，ALT，ALP，AST， BUN，LDH等。同時(shí)觀察30d內(nèi)小鼠體重變化。
[0077] 對(duì)照組：與打藥組做相同的處理用W對(duì)比，用生理鹽水代替水溶性徑基化空屯、富 勒締。
[0078] 相應(yīng)的測(cè)試結(jié)果如圖9、圖10和圖11所示，打藥組和對(duì)照組無(wú)論在小鼠體重還是短 長(zhǎng)期臟器系數(shù)都無(wú)明顯區(qū)別，說(shuō)明該材料的毒性較小，可W進(jìn)一步用于臨床研究;從圖11可 得知：明顯看出打藥組和對(duì)照組相比，肝腎功能沒(méi)有明顯降低，說(shuō)明其毒性較小，佐證了我 們的材料是安全無(wú)毒的。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料，具備下述所有性質(zhì)：（I)表面為親水性，使其 能夠經(jīng)由靜脈注入到生物體內(nèi)并通過(guò)血液循環(huán)富集于骨髓中；（2)微納材料具有剛性，不易 變形，使其可以通過(guò)骨髓血竇的內(nèi)皮細(xì)胞間隙進(jìn)入骨髓中。2. 如權(quán)利要求1所述的富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料，其特征在于:所述富勒烯和/ 或金屬富勒烯微納材料是由富勒烯和/或金屬富勒烯本體材料經(jīng)水溶性修飾得到的； 所述的富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料是富勒烯和/或金屬富勒烯水溶性衍生物。3. 如權(quán)利要求1或2所述的富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料，其特征在于:所述的富勒 稀和/或金屬富勒稀微納材料的顆粒尺寸范圍為l-500nm。4. 如權(quán)利要求2或3所述的富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料，其特征在于:所述富勒烯 和/或金屬富勒烯本體材料選自空心富勒烯C2 n、M@C2n、M2@C2n、MAOC2n、M 3N@C2n、M2C2@C2n、M 2S@ C2n、M20@C2r^PMxA3- xN@C2n中的任一種，其中，M和A均為金屬元素，所述M和A均選自Sc、Y和鑭系 金屬元素中的任意一種;3(Xn<60;(Xx<3。5. 如權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)所述的富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料，其特征在于:所 述水溶性修飾的富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料為在所述富勒烯和/或金屬富勒烯本體 材料表面修飾親水性官能團(tuán)羥基、氨基和羧基中的至少一種； 或者，通過(guò)疏水-疏水相互作用使所述富勒烯和/或金屬富勒烯本體材料與水溶性載體 形成所述的水溶性富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料。6. 如權(quán)利要求5所述的富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料，其特征在于:所述水溶性載 體選自脂質(zhì)體、聚合物膠束和蛋白中的至少一種，和/或，所述聚合物膠束為聚乙丙交酯聚 乙二醇、聚賴氨酸或殼聚糖;所述蛋白為白蛋白或轉(zhuǎn)鐵蛋白。7. 如權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料，其特征在于:所 述的富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料為水溶性羥基化釓金屬富勒烯或水溶性羥基化空心 富勒稀。8. 權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料在制備靶向富集于 骨髓的藥物或藥物載體中的應(yīng)用。9. 權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料富集于骨髓中的方 法，包括如下步驟:通過(guò)靜脈注射所述富勒烯和/或金屬富勒烯微納材料，經(jīng)血液循環(huán)，借助 骨髓血竇中的特殊結(jié)構(gòu)，進(jìn)入骨髓，并富集于骨髓處。
【文檔編號(hào)】A61K47/02GK105920608SQ201510671792
【公開(kāi)日】2016年9月7日
【申請(qǐng)日】2015年10月15日
【發(fā)明人】王春儒, 甄明明, 張瑩
【申請(qǐng)人】北京福納康生物技術(shù)有限公司, 中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所