專利名稱：治療血吸蟲病的藥物及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特指一種治療血吸蟲病的藥物及其制造方法。
眾所周知血吸蟲病是嚴(yán)重危害人類健康的寄生蟲病，在世界上許多國家都有流行，目前常用治療血吸蟲病的藥物大體分為兩類第一類是吡喹酮，化學(xué)名稱為2-(環(huán)己甲酰基)-1，2，3，6，7，11b-六氫-4H-吡嗪并[2，1-a]異喹啉-4-酮，其制造方法包括如下5個(gè)步驟1、將異喹啉與苯甲酰氯及氰化鈉反應(yīng)，生成氰基苯甲酰二氫異喹啉；2、接著在加熱加壓下，用鎳催化加氫反應(yīng)，再經(jīng)分子重排，生成1-苯甲酰氨甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉；3、再與氯乙酰氯縮合反應(yīng)，生成1-苯甲酰氨甲基-2一氯乙酰基-1，2，3，4-四氫異喹啉；4、再于加熱及叔丁醇鉀存在下進(jìn)行環(huán)化反應(yīng)，生成2-苯甲酰-1，2，3，6，7，11b-六氫-4H-吡嗪并[2，1-a]異喹啉-4-酮；5、接著在磷酸液中水解，再用環(huán)己甲酰氯進(jìn)行?；磻?yīng)，生成吡喹酮；主要缺陷是合成路線較長(zhǎng)，工藝十分復(fù)雜，價(jià)格昂貴。
第二類是酒石酸銻鉀，對(duì)殺滅血吸蟲有效，但毒性較大，小鼠試驗(yàn)，口服半致死量LD500.6g/kg，腹腔注射半致死量LD5052mg/kg，靜脈注射半致死量LD5065mg/kg。
針對(duì)上述缺陷，本發(fā)明人經(jīng)過長(zhǎng)期的研究和實(shí)踐，創(chuàng)造出本發(fā)明的技術(shù)方案。
本發(fā)明的目的在于提供一種治療血吸蟲病的藥物及其制造方法，用簡(jiǎn)便的方法合成了一種對(duì)殺滅血吸蟲和抑制肝內(nèi)蟲卵肉芽腫形成具有特效的N-磷酰化氨基酸或其鹽藥物，克服現(xiàn)有技術(shù)的弊端，達(dá)到制造容易、成本低廉、療效顯著和降低毒副作用的目的。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的一種治療血吸蟲病的藥物，其特征在于該藥物由下述成份和配比組成(重量份數(shù))N-磷?；被峄蚱潲} 0.5-5賦形劑 0-100潤(rùn)滑劑 0-2調(diào)味劑 0-1NaCl 0-10該N-磷酰化氨基酸或其鹽的通式為
其中R1、R2為H或含有1-7個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基或芳基或鹽基；AA為氨基酸殘基；R3為H或鹽基。
該R1、R2為相同或不同的烷基或芳基，包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基、己基、庚基、苯基、芐基。
該AA包括天然的氨基酸殘基、D-構(gòu)型的氨基酸殘基或DL-構(gòu)型的氨基酸殘基。
該R、R2或R3的鹽基包括下述成份的鹽鉀、鈉、鈣、鎂、鋅或乙二胺、乙醇胺、乙二醇胺、氨基葡萄糖。
該賦形劑包括淀粉、纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈉、乳糖。
該潤(rùn)滑劑包括滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、聚乙二醇。
該調(diào)味劑包括香味劑、甜味劑、果味劑。
其制造方法包括合成N-磷?；被峄蚱潲}，再按配比與賦形劑、潤(rùn)滑劑、調(diào)味劑或NaCl進(jìn)行組配和成型，具體步驟如下
(一)合成N-磷?；被峄蚱潲}用氨基酸或其酯與二烷基亞磷酸酯在水、醇，有機(jī)堿及四氯化碳存在條件下，溫度-20～50℃，時(shí)間2-12小時(shí)，反應(yīng)合成N-磷?；被幔偻ㄟ^柱層析法或重結(jié)晶法精制，制成高純度的N-磷酰化氨基酸，或?qū)⑵渑c無機(jī)或有機(jī)堿反應(yīng)制成N-磷酰化氨基酸鹽；(二)與賦形劑、潤(rùn)滑劑、調(diào)味劑進(jìn)行組配制成片劑或膠囊劑，按下述的配比進(jìn)行組配(重量份數(shù))N-磷酰化氨基酸或其鹽 0.5-5賦形劑 0-100潤(rùn)滑劑 0-2調(diào)味劑 0-1將上述組合物混合均勻后，用壓片機(jī)按常規(guī)制成片劑，或裝入膠囊中制成膠囊劑，該膠囊劑可不加調(diào)味劑；(三)與NaCl進(jìn)行組配制成注射針劑將N-磷酰化氨基酸或其鹽0.5-5份與NaCl 0-10份進(jìn)行混配或加入蒸餾水?dāng)嚢枞芙膺^濾，在滅菌條件下將混配劑或?yàn)V液裝入安瓶中制成本發(fā)明的注射針劑或凍干劑。
該有機(jī)堿包括三乙胺、吡啶、二異丙基乙基胺、N-甲基嗎啉。
本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)是1、本發(fā)明的藥物具有殺滅血吸蟲和抑制肝肉蟲卵肉芽腫形成的顯著療效及毒性較低的優(yōu)點(diǎn)。
2、本發(fā)明的藥物制造方法簡(jiǎn)單，成本低廉，適合廣泛推廣應(yīng)用。
下面結(jié)合較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說明。
實(shí)施例1本發(fā)明的治療血吸蟲病的片劑藥物成份和配比為
N-(O，O)-二正丁基磷酰脯氨酸 10毫克賦形劑玉米淀粉 50毫克乳糖 187毫克潤(rùn)滑劑硬脂酸鎂 3毫克調(diào)味劑蔗糖 0.1毫克其制造方法如下(一)合成N-(O，O)-二正丁基磷酰脯氨酸在200ml反應(yīng)瓶中，加入4.6gL-脯氨酸、20ml水、40ml三乙胺和20ml乙醇，冰鹽浴冷卻下滴加9ml二正丁基亞磷酸酯與20ml四氯化碳的混合液，室溫反應(yīng)2小時(shí)。加入100ml水，減壓蒸餾除去有機(jī)溶劑。水溶液用乙醚和乙酸乙酯各洗滌2次，在冰鹽浴冷卻下用1N鹽酸調(diào)PH至3。用乙酸乙酯60ml萃取三次，合并萃取液，用飽和氯化鈉溶液60ml洗滌3次，用無水硫酸鎂干燥。減壓蒸餾除去有機(jī)溶劑，殘余物用乙酸乙酯-石油醚重結(jié)晶，制得10g白色固體N-(O，O)-二正丁基磷酰脯氨酸。
(二)進(jìn)行組配制成片劑；按上述配比將N-(O，O)-二正丁基磷酰脯氨酸、玉米淀粉、乳糖、硬脂酸鎂和蔗糖混合均勻、過篩，用壓片機(jī)壓制成每片重250mg的片劑，每片中含活性成份N-(O，O)-二正丁基磷酰脯氨酸10mg。
實(shí)施例2本發(fā)明的治療血吸蟲病的膠囊劑藥物的成份和配比為Nα，Nε-二(O，O)-二異丙基磷酰賴氨酸鈉10毫克賦形劑纖維素衍生物 188毫克潤(rùn)滑劑硬脂酸鈣 2毫克制造方法(一)合成Nα，Nε-二(O，O)-二異丙基磷酰賴氨酸鈉
在200ml反應(yīng)瓶中，加入5克L-賴氨酸、20ml水、40ml二甲基嗎啉和20ml乙醇，以冰鹽浴冷卻下滴加10ml二異丙基磷酰氯與20ml四氯化碳的混合液，反應(yīng)3小時(shí)，加水100ml減壓蒸餾除去有機(jī)溶劑，水溶劑用乙醚和乙酸乙酯各洗滌2次，用HCl調(diào)PH3，再用實(shí)施例l相同的方法萃取、洗滌、干燥、蒸餾和提純，制成Nα，Nε-二(O，O)-二異丙基磷酰賴氨酸，再與等當(dāng)量的NaOH反應(yīng)，制成Nα，Nε-二(O，O)-二異丙基磷酰賴氨酸鈉。
(二)進(jìn)行組配制成膠囊劑按上述配比將Nα，Nε-二(O，O)-二異丙基磷酰賴氨酸鈉、纖維素衍生物和硬脂酸鈣混合均勻，過篩，裝入硬明膠膠囊中，每個(gè)膠囊重200mg，含活性成份Nα，Nε-二(O，O)-二異丙基磷酰賴氨酸鈉10mg。
實(shí)施例3本發(fā)明的治療血吸蟲病的注射針劑藥物的成份和配方為N-(O，O-二乙基)-磷酰酪氨酸 2毫克氯化鈉 10毫克制造方法如下(一)合成N-(O，O-二乙基)-磷酰酪氨酸選用二乙基磷酰氯與D-酪氨酸為原料，用與實(shí)施例1相同的方法合成N-(O，O-二乙基)-磷酰酪氨酸。
(二)進(jìn)行組配制成注射針劑按上述配比將N-二乙基磷酰酪氨酸2毫克，氯化鈉10毫克混均，在無毒條件下裝入安瓶?jī)?nèi)，制成注射凍干劑，含活性成份N-(O，O-二乙基)-磷酰酪氨酸2mg，使用時(shí)注入蒸餾水。當(dāng)然也可以制作時(shí)，注入蒸餾水，再裝入安瓶?jī)?nèi)，制成2ml的針劑。
實(shí)施例4本發(fā)明的治療血吸蟲病的藥物的動(dòng)物試驗(yàn)應(yīng)用效果。
用本發(fā)明的治療血吸蟲病的藥物對(duì)小鼠進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)，其試驗(yàn)方法和效果如下一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物BALB/c健康雌性小鼠由上?？茖W(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，體重18±2g，共30只，隨機(jī)均分為3組。每鼠按常規(guī)法經(jīng)皮膚感染日本血吸蟲尾蚴30±2條。
二、動(dòng)物給藥小鼠感染血吸蟲后4周，組I給本發(fā)明的藥物有效成份6mg/天，均為腹腔注射，連續(xù)10天；組II給常用藥物吡喹酮每天30mg/kg，口服3天，用作藥物治療對(duì)照；組III給生理鹽水作為感染對(duì)照。
三、動(dòng)物解剖用藥后3周(相當(dāng)于感染后7周)，剖殺小鼠，從胸主動(dòng)脈灌注取蟲，取左葉肝，0.5g用于蟲卵計(jì)數(shù)余置于10％福爾馬林溶液，固定24小時(shí)后，制備5μg厚度的連續(xù)石蠟切片，H-E染色，光鏡下觀察，測(cè)量單個(gè)蟲卵肉芽腫直徑(μm)，并計(jì)算其平均面積(μm2)和體積(μm2)。
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果感染小鼠用藥后3周剖殺后的觀察結(jié)果，詳見表1及表2。
表1 本發(fā)明的藥物對(duì)日本血吸蟲感染小鼠體內(nèi)成蟲和蟲卵檢獲數(shù)的影響
*計(jì)算每克肝組織內(nèi)的蟲卵數(shù)(EPG)從表1試驗(yàn)結(jié)果表明連續(xù)給藥10天后，本發(fā)明的藥物取得顯著的治療效果1、本發(fā)明的藥物組I與未給藥組III的小鼠比較成蟲計(jì)數(shù)減小49.33％，即減小一半；肝內(nèi)蟲卵數(shù)減小72.29％，即減小近2/3。
2、本發(fā)明的藥物組I與目前常用的吡喹酮組II比較具有相同的殺血吸蟲的成蟲和蟲卵的功效。
表2 本發(fā)明的藥物對(duì)感染日本血吸蟲小鼠肝內(nèi)蟲卵肉芽腫的影響
注表中數(shù)據(jù)均為30個(gè)肉芽腫數(shù)的平均值。
從表2試驗(yàn)結(jié)果表明連續(xù)給藥10天后，本發(fā)明的藥物取得顯著的治療效果1、本發(fā)明的藥物組I與注射生理鹽水的組III比較，肝內(nèi)蟲卵肉芽腫的平均直徑減小86.48μm，減小率為33.23％；肝內(nèi)蟲卵肉芽腫的平均面積減小30.4μm2減小率為55.13％；肝肉蟲卵肉芽腫的平均體積減小68.37μm3、減小率為69.79％。
2、本發(fā)明的藥物組I與常用藥物吡喹酮組II比較，肝內(nèi)蟲卵肉芽腫的平均直徑減小20.63μm，減小率為7.92％；肝內(nèi)蟲卵肉芽腫的平均面積減小6.31μm2減小率為11.44％；肝肉蟲卵肉芽腫的平均體積減小12.5μm3、減小率為12.79％。
證明本發(fā)明的藥物對(duì)肝內(nèi)血吸蟲卵肉芽腫的療效優(yōu)于常用藥物吡喹酮。
實(shí)施例5本發(fā)明的藥物對(duì)小鼠的急性毒性實(shí)驗(yàn)本發(fā)明的藥物對(duì)小鼠的急性毒性實(shí)驗(yàn)，委托北京醫(yī)科大學(xué)測(cè)試，采用口服灌胃和腹腔注射兩種途徑，各分成5組，每組10只小鼠，劑量從高至低，根據(jù)給藥7天內(nèi)各組小鼠死亡率，按簡(jiǎn)化機(jī)率法計(jì)算LD50。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3和表4。
表3 小鼠口服本發(fā)明的藥物急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
用簡(jiǎn)化機(jī)率法計(jì)算LD50＝21.82g/kg，(具體推算略)表4 小鼠腹腔注射本發(fā)明的藥物急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果。<t
用簡(jiǎn)化機(jī)率法計(jì)算LD50＝4.184g/kg，(具體推算略)從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明本發(fā)明的藥物毒性較小。
實(shí)施例6本發(fā)明的藥物臨床應(yīng)用實(shí)驗(yàn)，選自愿試用本發(fā)明藥物的血吸蟲病患者5人，口服本發(fā)明實(shí)施例1的片劑藥物，每次10mg/kg，每日三次，從服藥后，每天檢驗(yàn)排便中的蟲卵，實(shí)驗(yàn)前均為陽性，測(cè)定排便中蟲卵轉(zhuǎn)為陰性的開始時(shí)間，見表4表4
從上述試用結(jié)果表明本發(fā)明的藥物對(duì)治療血吸蟲病具有顯著療效。
權(quán)利要求
1.一種治療血吸蟲病的藥物，其特征在于該藥物由下述成份和配比組成(重量份數(shù))N-磷酰化氨基酸或其鹽 0.5-5賦形劑 0-100潤(rùn)滑劑 0-2調(diào)味劑 0-1NaCl 0-10該N-磷?；被峄蚱潲}的通式為
其中R1、R2為H或含有1-7個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基或芳基或鹽基；AA為氨基酸殘基；R3為H或鹽基。
2.如權(quán)利要求1所述的治療血吸蟲病的藥物，其特征在于該R1、R2為相同或不同的烷基或芳基，包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基、己基、庚基、苯基、芐基。
3.如權(quán)利要求1所述的治療血吸蟲病的藥物，其特征在于該AA包括天然的氨基酸殘基、D-構(gòu)型的氨基酸殘基或DL-構(gòu)型的氨基酸殘基。
4.如權(quán)利要求1所述的治療血吸蟲病的藥物，其特征在于該R1、R2或R3的鹽基包括下述成份的鹽鉀、鈉、鈣、鎂、鋅或乙二胺、乙醇胺、乙二醇胺、氨基葡萄糖。
5.如權(quán)利要求1所述的治療血吸蟲病的藥物，其特征在于該賦形劑包括淀粉、纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈉、乳糖。
6.如權(quán)利要求1所述的治療血吸蟲病的藥物，其特征在于該潤(rùn)滑劑包括滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、聚乙二醇。
7.如權(quán)利要求1所述的治療血吸蟲病的藥物，其特征在于該調(diào)味劑包括香味劑、甜味劑、果味劑。
8.一種治療血吸蟲病的藥物的制造方法，其特征在于該制造方法包括合成N-磷?；被峄蚱潲}，再按配比與賦形劑、潤(rùn)滑劑、調(diào)味劑或NaCl進(jìn)行組配和成型，具體步驟如下(一)合成N-磷?；被峄蚱潲}用氨基酸或其酯與二烷基亞磷酸酯在水、醇，有機(jī)堿及四氯化碳存在條件下，溫度-20～50℃，時(shí)間2-12小時(shí)，反應(yīng)合成N-磷?；被?，再通過柱層析法或重結(jié)晶法精制，制成高純度的N-磷?；被?，或?qū)⑵渑c無機(jī)或有機(jī)堿反應(yīng)制成N-磷酰化氨基酸鹽；(二)與賦形劑、潤(rùn)滑劑、調(diào)味劑進(jìn)行組配制成片劑或膠囊劑，按下述的配比進(jìn)行組配(重量份數(shù))N-磷?；被峄蚱潲} 0.5-5賦形劑0-100潤(rùn)滑劑0-2調(diào)味劑0-1將上述組合物混合均勻后，用壓片機(jī)按常規(guī)制成片劑，或裝入膠囊中制成膠囊劑，該膠囊劑可不加調(diào)味劑；(三)與NaCl進(jìn)行組配制成注射針劑將N-磷酰化氨基酸或其鹽0.5-5份與NaCl 0-10份進(jìn)行混配或加入蒸餾水?dāng)嚢枞芙膺^濾，在滅菌條件下將混配劑或?yàn)V液裝入安瓶中制成本發(fā)明的注射針劑和凍干劑。
9.如權(quán)利要求8所述的制造方法，其特征在于該有機(jī)堿包括三乙胺、吡啶、二異丙基乙基胺、N-甲基嗎啉。
全文摘要
一種治療血吸蟲病的藥物,其特征在于該藥物由下述成分和配比組成(重量份數(shù)):N－磷酰化氨基酸或其鹽0.5—5、賦形劑0—100、潤(rùn)滑劑0—2、調(diào)味劑0—1、NaCl0—10。本發(fā)明的藥物具有殺滅吸收蟲和抑制肝內(nèi)蟲卵肉芽腫形成的顯著療效及毒性較低的優(yōu)點(diǎn),且制造方法簡(jiǎn)單,成本低廉,適合廣泛推廣應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K9/48GK1262929SQ9910067
公開日2000年8月16日 申請(qǐng)日期1999年2月12日 優(yōu)先權(quán)日1999年2月12日
發(fā)明者趙玉芬, 曹勝利, 李艷梅, 麻遠(yuǎn) 申請(qǐng)人:清華大學(xué)