專利名稱：人類免疫缺陷性病毒感染的組合療法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及使用下述定義的產(chǎn)品R結(jié)合其它抗人類免疫缺陷性病毒即艾滋病毒(HIV)治療HIV感染的患者的方法。
稱為人類免疫缺陷性病毒(HIV)的反轉(zhuǎn)錄病毒是綜合性疾病，包括免疫系統(tǒng)的進(jìn)行性破壞(獲得性免疫缺陷綜合癥，艾滋病(AIDS))和中樞及外周神經(jīng)系統(tǒng)退化的病因?qū)W病原體，以前把這種病毒稱為LAV、HTL-III或ARV。該病毒特異性攻擊T-4輔助淋巴細(xì)胞(T-淋巴細(xì)胞的一個(gè)亞族，在保護(hù)人體免受感染疾病中起主要作用)，機(jī)會(huì)性感染如卡氏肺囊蟲和某些癌癥發(fā)病率的增加可以證明該亞族淋巴細(xì)胞的缺乏。更具體地說，該病毒進(jìn)入T-淋巴細(xì)胞，并且將病毒編碼DNA整合到宿主T-淋巴細(xì)胞的DNA中。只要感染的T-淋巴細(xì)胞保持為非感受態(tài)，該病毒就平靜地留在宿主細(xì)胞的DNA中，它不殺死細(xì)胞，但是損害它的功能。當(dāng)感染的T-細(xì)胞被激發(fā)如被特殊的抗原活化時(shí)，宿主DNA中的病毒DNA即被表達(dá)，并且產(chǎn)生新的病毒粒子，然后宿主T-淋巴細(xì)胞被殺死和溶解，釋放的新的病毒粒子能夠侵入并且殺死其它T-淋巴細(xì)胞。T-4淋巴細(xì)胞的損失是極度的，并且甚至比病毒直接殺死細(xì)胞所表現(xiàn)的還要迅速。這使某些研究者們假設(shè)，感染以某種方式切斷了T-4淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生。在任何情況下，正常的胸腺不再起作用，被殺死的T-淋巴細(xì)胞不能被恢復(fù)，使患者易于遭受隨后的感染。特別顯著的是最近對(duì)于10個(gè)月到42歲的死亡的艾滋病病人的胸腺的研究，發(fā)現(xiàn)艾滋病患者極度的胸腺退化比相同年齡的其它原因死亡的病人更為廣泛。
治愈艾滋病病人大概需要一種消除上述病毒的藥劑和使身體恢復(fù)被病毒殺死的T-淋巴細(xì)胞的其它藥劑。第一步是消滅患者的艾滋病病毒，這必須得到其它療法的支持，以便誘導(dǎo)免疫功能的恢復(fù)。目前對(duì)于巨噬細(xì)胞活化劑，干擾素誘導(dǎo)劑和淋巴激活素的研究使人失望，大概是因?yàn)樗鼈兊陌蠺-淋巴細(xì)胞沒有以足夠的數(shù)量存在。白細(xì)胞介素2能夠恢復(fù)非T-細(xì)胞(自然殺傷細(xì)胞)的一個(gè)亞族的功能，但是對(duì)其它嚴(yán)重缺陷的宿主不起作用?？梢圆扇「土业拇胧；謴?fù)免疫系統(tǒng)的一個(gè)可能的方法是從健康供體移植骨髓，但這是危險(xiǎn)的方法。它可能產(chǎn)生移植物對(duì)宿主的致死性排斥反應(yīng)，除非供體和患者是孿生的。
反轉(zhuǎn)錄病毒復(fù)制的一個(gè)共同特征是通過一種重要編碼的蛋白酶對(duì)前體多肽進(jìn)行廣泛的轉(zhuǎn)譯后處理，產(chǎn)生對(duì)病毒裝配和功能所需要的成熟生命蛋白質(zhì)。抑制這一過程可以防止正常感染病毒的生成。已經(jīng)證明，HIV編碼蛋白酶的遺傳學(xué)滅活可以產(chǎn)生未成熟的非感染病毒粒子。這個(gè)結(jié)果表明抑制HIV蛋白酶代表了一種治療艾滋病和預(yù)防或治療HIV感染的有生命力的方法。但是用HIV蛋白酶抑制劑給藥經(jīng)常會(huì)引起副反應(yīng)，包括惡心，腎石病，膽紅素增加或腸胃不適。
齊多夫定(AZT)是合成嘧啶類似物，它與胸苷的不同之處在于在脫氧核糖環(huán)的3′位有疊氮取代基而不是羥基。它最初作為抗癌劑提出，隨后發(fā)現(xiàn)能夠抑制Friend白血病病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)。在確定人類反轉(zhuǎn)錄病毒是艾滋病的病因?qū)W病原體不久，AZT即被發(fā)現(xiàn)具有在體外抗HIV的活性。AZT的選擇性是由于AZT-TP與RT優(yōu)先反應(yīng)。將AZT磷?；玫剿幕罨问紸ZT-TP是通過細(xì)胞酶完成的，AZT是細(xì)胞胸苷激酶的有效的底物，細(xì)胞胸苷激酶能夠在感染和未感染的細(xì)胞中將AZT轉(zhuǎn)變?yōu)锳ZT-MP。AZT-MP能夠在細(xì)胞中積累是因?yàn)樗拗骷?xì)胞胸苷酸酯激酶緩慢磷酸化為AZT-DP，這一步是AZT-TP形成的速率決定步驟。AZT-MP是一種競爭抑制劑或胸苷酸酯激酶，并且誘導(dǎo)dTMP向dTDP轉(zhuǎn)變，后者導(dǎo)致減少dTTP的形成。其它核苷類似物包括ddI，ddC和ddA通過如對(duì)于AZT所述的類似機(jī)理也具有抗HIV的活性。
但是，AZT較大的毒性在骨髓中，同時(shí)出現(xiàn)巨噬細(xì)胞貧血和通常發(fā)生的粒細(xì)胞減少，這些毒性作用的機(jī)理是不確定的。已報(bào)道有伴隨細(xì)胞過少骨髓的各類血細(xì)胞減少病的發(fā)生，缺少骨髓儲(chǔ)備的病人比骨髓儲(chǔ)備充分的病人有更大的毒性，僅次于機(jī)會(huì)性感染或維生素B12缺少的病人。也出現(xiàn)惡心，肌痛，失眠，發(fā)燒，皮疹，甲爪色素沉積和嚴(yán)重的頭痛。
產(chǎn)品R是二十世紀(jì)三十年代出現(xiàn)的抗病毒產(chǎn)品(R產(chǎn)品商標(biāo)為“Reticulose”，Advanced Viral Research Corp的商標(biāo))，雖然它最初被認(rèn)為是由蛋白胨、肽和核酸(下文完整定義)組成的產(chǎn)品，其準(zhǔn)確的組成還未確定。但是已經(jīng)證明產(chǎn)品R具有迅速抑制某些病毒性疾病過程的能力，它是無毒的，可以與組織液及血清混合，并且沒有過敏性。最近的研究證明，產(chǎn)品R也能夠刺激免疫系統(tǒng)和紅血細(xì)胞產(chǎn)生，表明產(chǎn)品R是免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)劑。
根據(jù)申請(qǐng)人所知，至今產(chǎn)品R沒有被使用，也沒有建議結(jié)合其它抗艾滋病藥物用于治療艾滋病患者。目前發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品R和其它用于治療HIV感染或艾滋病的抗病毒藥物結(jié)合使用對(duì)于艾滋病患者具有優(yōu)異的治療效果。
因此本發(fā)明的目的是通過用有效治療量的產(chǎn)品R和一種或多種用于治療艾滋病或HIV感染的抗病毒劑如核苷類似物對(duì)患者給藥，提供一種治療艾滋病或HIV感染的患者的方法。
本發(fā)明的另一目的是通過用有效治療量的產(chǎn)品R和一種或多種HIV蛋白酶抑制劑結(jié)合，提供一種治療艾滋病或HIV感染患者的方法。
按照本發(fā)明，對(duì)被確診的患者用每天每公斤體重約5微升到約40微升的有效治療量的產(chǎn)品R，以無菌注射制劑非腸道給藥進(jìn)行治療。
以下的詳細(xì)描述并且結(jié)合附圖
，使本發(fā)明的其它目的和特征變得更清楚。應(yīng)該認(rèn)為設(shè)計(jì)的附圖僅僅是為了說明本發(fā)明的目的，并沒有規(guī)定對(duì)于本發(fā)明的限制，并且參照附帶的權(quán)利要求書。
本文所用的產(chǎn)品R是按照以下兩種方法制備的產(chǎn)品。
制備產(chǎn)品R的方法I于3-7℃在合適的容器中，將約35.0g的酪蛋白，約17.1g牛蛋白胨，約22.0g核酸(RNA)，約3.25g牛血清白蛋白懸浮于USP注射用水約2.5升水中，溫和攪拌直到所有成分適當(dāng)濕潤。攪拌下小心加入約16.5g氫氧化鈉(試劑級(jí)，ACS)，繼續(xù)攪拌直到氫氧化鈉完全溶解。于9磅壓力及200-230F°下的高壓滅菌器中維持一段時(shí)間，直到RNA完全消化，例如約4小時(shí)。其后停止高壓滅菌器操作，將反應(yīng)瓶和其中的反應(yīng)物緩慢冷卻到室溫，于約3-8℃冷卻至少6小時(shí)，用2微米和0.45微米的過濾器，于低壓(1-6psi)下用惰性氣體如氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)過濾所得溶液，以類似方式將溶液再通過0.2微米致熱原保留過濾器過濾。所得濾液作為試樣測定總氮。進(jìn)行計(jì)算以確定添加到濾液中的冷卻的注射水的數(shù)量，得到氮含量約165-210mg/ml的稀釋的濾液，最終體積大約是5升。然后用濃鹽酸(試劑級(jí)，ACS)或1.0當(dāng)量的NaOH調(diào)節(jié)pH到約7.3-7.6的范圍，稀釋的溶液再于低壓及惰性氣體保護(hù)下通過0.2微米過濾器過濾，最終的濾液于惰性氣體的氣氛下裝入并且封閉于2ml的玻璃安瓿中，收集安瓿，于240F°及20-30磅壓力下進(jìn)行最后的高壓滅菌約30分鐘。在進(jìn)行滅菌操作過程后，將裝有R的安瓿冷卻并且洗滌。
對(duì)于pH，體積和分析校正值的所有的定量數(shù)據(jù)可加或減變化2.5％。
制備產(chǎn)品R的方法II于3-7℃在合適的容器中，將約35.0g的酪蛋白，約17.1g牛蛋白胨，約22.0g核酸(RNA)，約3.25g牛血清白蛋白懸浮于USP注射用水約2.5升水中，溫和攪拌直到所有成分適當(dāng)濕潤。攪拌下緩慢加入約11.75ml鹽酸(試劑級(jí)，ACS)，繼續(xù)攪拌直到鹽酸完全溶解。于9磅壓力及200-230F°高壓滅菌器中維持一段時(shí)間，直到RNA完全消化，例如約4小時(shí)。其后停止高壓滅菌器操作，將反應(yīng)瓶和其中的反應(yīng)物緩慢冷卻到室溫，于約3-8℃冷卻至少6小時(shí)，用2微米和0.45微米的過濾器，于低壓(1-6psi)用惰性氣體如氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)過濾所得溶液，以類似方式將溶液通過0.2微米致熱原保留過濾器過濾。所得濾液作為試樣測定總氮。進(jìn)行計(jì)算以確定添加到濾液中的冷卻的注射水的數(shù)量，得到氮含量約165-210mg/ml的稀釋的濾液，最終體積大約是5升。然后用濃鹽酸(試劑級(jí)，ACS)或35％(w/v)的NaOH調(diào)節(jié)pH到約7.3-7.6的范圍，稀釋的溶液于低壓及惰性氣體保護(hù)下再通過0.2微米過濾器過濾，最終的濾液于惰性氣體的氣氛下裝入并且封閉于2ml的玻璃安瓿中，收集安瓿，于240F°度及20-30磅壓力下進(jìn)行最后的高壓滅菌約30分鐘。在進(jìn)行滅菌操作過程后，將裝有R的安瓿冷卻并且洗滌。
對(duì)于pH，體積和分析校正值的所有的定量數(shù)據(jù)可加或減變化2.5％。
HIV蛋白酶抑制劑包括寡肽類似物如saquinavir(RocheLaboratories)，indinavir(Merck)或ritonavir(Abbott Laboratories)，它們?cè)赨SPNo.5,413,999和5,476,874中有詳細(xì)的描述，其內(nèi)容全部作為本文的參考。
除了HIV蛋白酶抑制劑以外，用于艾滋病或HIV感染結(jié)合治療法的抗病毒劑列于下表I中。
表I藥物名稱 制造商 適應(yīng)癥AL-721 Ethigen ARC，PGL(Los Angeles，CA)HIV陽性，艾滋病重組人β干擾素 Triton Biosciences 艾滋病，卡波濟(jì)肉瘤，
(Almeda，CA) ARCAcemannanCarrington Labs ARC(Irving，TX) (也參見免疫調(diào)節(jié)劑)Cytovene Syntex威脅視力的CMVGanciclovir (Palo Alto，CA) 外周CMV視網(wǎng)膜炎d4T Bristol-Myers 艾滋病，ARC二脫氫脫氧胸苷 (New York，NY)ddI Bristol-Myers 艾滋病，ARC二脫氫脫氧肌苷 (New York，NY)EL10 Elan Corp，PLCHIV 感染(Gainesville，GA)磷酰基甲酸三鈉鹽 Astra Pharm. CMV視網(wǎng)膜炎，Products，Inc.HIV感染，其它CMV感染(Westborough，MA)二脫氧胞苷 Hoffman-La Roche 艾滋病，ARCddC (Nutley，NJ)Novapren Novaferon Labs，Inc.，HIV抑制劑Akron，OH)Diapren，Inc.
(Roseville，MN，marketer)Peptide T八肽序列Peninsula Labs艾滋病(Belmont，CA)齊多夫定；AZTBurroughs 艾滋病，adv，ARCWellcome(Rsch.兒童艾滋病，Triangle Park，NC)卡波濟(jì)肉瘤，
無癥狀的HIV感染，不嚴(yán)重的HIV疾病，涉及神經(jīng)病變，結(jié)合其它治療方法利福霉素LM 427 Adria Labs ARC(Dublin，OH)Erbamont(Stamford，CT)硫酸葡聚糖 Ueno Fine Chem. 艾滋病，ARC，HIV陽性，Ind.Ltd. 無癥狀的HIV感染(Osaka，Japan)三唑核苷Viratek/INC 無癥狀的HIV陽性，(Ribavarin) (Costa Mesa，CA) LAS，ARCα-干擾素 Burroughs卡波濟(jì)肉瘤和反轉(zhuǎn)錄Wellcome(Rsch. 病毒結(jié)合HIVTriangle Paek，NC)無環(huán)鳥苷Burroughs艾滋病，ARC，Wellcome 無癥狀的HIV陽性，結(jié)合AZT能在免疫吸收柱上中 Advanced Bio-艾滋病，ARC和pH不穩(wěn)定的α-畸 therapy Concepts變干擾素的抗體 (Rockville，MD)L-697，661 Merck艾滋病，ARC，(Rahway，NJ) 無癥狀的HIV陽性，也結(jié)合AZTL-696，229 Merck 艾滋病，ARC(Rahway，NJ) 無癥狀的HIV陽性也結(jié)合AZTLamivudineGlaxo HIV(Research TrianglePark，NC)NevirapineRoxane HIV(Columbus，OH)應(yīng)該理解到產(chǎn)品R與抗病毒劑的組合范圍不限于上述表I所列或上述說明的范圍，原則上包括與任何治療艾滋病或HIV感染的患者所用的藥物組合物結(jié)合。
優(yōu)選的結(jié)合是將一種或多種HIV蛋白酶抑制劑或用于治療艾滋病或HIV感染的以核苷類似物形式的抗病毒劑如AZT，ddI，ddC和產(chǎn)品R并用或交替進(jìn)行治療。優(yōu)選首先用HIV蛋白酶抑制劑或用于治療艾滋病或HIV感染的抗病毒劑給藥，例如一周，迅速降低帶有的病毒，然后用R給藥，刺激免疫系統(tǒng)，消除HIV感染。對(duì)于機(jī)會(huì)感染的病情嚴(yán)重的患者，可以用產(chǎn)品R首先給藥刺激免疫系統(tǒng)，然后使用上述的抗病毒劑。
另外，用于治療艾滋病或HIV感染的兩種抗病毒劑如lamivudine和AZT可以和一種蛋白酶抑制劑如ritonavir首先同時(shí)給藥，直到不能檢測出病毒，然后用產(chǎn)品R給藥根除HIV感染。
或者產(chǎn)品R可以與兩種抗病毒劑如lamivudine和nevirapone，一種蛋白酶抑制劑如indinavir同時(shí)給藥。
對(duì)于HIV感染的患者，無論表現(xiàn)為艾滋病綜合癥或帶有HIV抗體或無癥狀的感染，以無菌注射制劑的形式，產(chǎn)品R的合適有效劑量范圍是每天每公斤體重約5至約40微升給藥，優(yōu)選的范圍是每天每公斤體重約10至約25微升，最優(yōu)選的是產(chǎn)品R以每天每公斤體重約30微升的劑量給藥大約一周，隨后以每天每公斤體重15微升給藥。所需劑量可以以適當(dāng)?shù)拈g隔分兩次、三次或多次的小劑量給藥，一般是一天中以相等的間隔給藥，優(yōu)選以日劑量一次給藥。
根據(jù)普通患者的癥狀和疾病的嚴(yán)重程度，本領(lǐng)域熟練的技術(shù)人員很容易確定與產(chǎn)品R同時(shí)給藥的抗病毒劑或HIV蛋白酶抑制劑的劑量。
產(chǎn)品R可以以任何合適的注射方式給藥，包括但不限于靜脈的，腹膜內(nèi)的，皮下的，肌內(nèi)的，真皮下的注射等。目前優(yōu)選的給藥方式是肌內(nèi)注射。應(yīng)該了解優(yōu)選的給藥方式隨著例如病情和患者的年齡可以改變。
當(dāng)產(chǎn)品R可能作為藥物制劑的一部分給藥時(shí)，優(yōu)選用它單獨(dú)給藥，當(dāng)然也可以在用一種或多種其它藥物獨(dú)立給藥的大約相同時(shí)間用它給藥。假如產(chǎn)品R是作為藥物制劑的一部分給藥，本發(fā)明的制劑包括至少如上述的一種給藥成分，并且?guī)в幸环N或多種可接受的載體和任選的其它治療成分。一種或多種載體在與制劑的其它成分匹配的意義上必須是“可接受的”，并且對(duì)于受體是無害的。
藥物制劑可以方便地裝入單劑量或多劑量容器中，例如封閉的安瓿或小瓶中。
因此，當(dāng)使用其優(yōu)選的實(shí)施方案，并且說明并描述和指出了本發(fā)明的新的基本特征時(shí)，應(yīng)該明白在不脫離本發(fā)明精神的情況下，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以進(jìn)行形式上的各種忽略和代替及變化，以及詳細(xì)闡明方法及它們的操作。例如可以明顯地預(yù)期上述各種因素和/或方法步驟的所有結(jié)合(它們以實(shí)質(zhì)上相同的方式中執(zhí)行基本上相同的功能，以達(dá)到同樣的結(jié)果)都包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。因此預(yù)期本發(fā)明僅限定在如所附的權(quán)利要求書指出的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種治療HIV感染的患者的方法，其包括對(duì)所述患者施用有效治療量的以無菌注射制劑形式的產(chǎn)品R和至少一種用于治療艾滋病或HIV感染的抗病毒劑共同給藥。
2.一種治療HIV感染的患者的方法，其包括對(duì)所述患者施用有效治療量的以無菌注射制劑形式的產(chǎn)品R和至少一種用于治療艾滋病或HIV感染的核苷類似物共同給藥。
3.權(quán)利要求2的方法，其中有效治療量的產(chǎn)品R是每天每公斤體重施用約5至約40微升范圍的無菌注射制劑。
4.權(quán)利要求2的方法，其中有效治療量的產(chǎn)品R是每天每公斤體重施用約10至約25微升范圍的無菌注射制劑。
5.權(quán)利要求2的方法，其中有效治療量的產(chǎn)品R是每天每公斤體重施用約30微升的無菌注射制劑，給藥大約一周，隨后每天每公斤體重施用約15微升的無菌注射制劑給藥。
6.一種治療HIV感染的患者的方法，其包括對(duì)所述患者施用有效治療量的無菌注射制劑形式的產(chǎn)品R和至少一種HIV蛋白酶抑制劑共同給藥。
7.權(quán)利要求6的方法，其中有效治療量的產(chǎn)品R是每天每公斤體重施用約5至約40微升范圍的無菌注射制劑。
8.權(quán)利要求6的方法，其中有效治療量的產(chǎn)品R是每天每公斤體重施用約10至約25微升范圍的無菌注射制劑。
9.權(quán)利要求6的方法，其中有效治療量的產(chǎn)品R是每天每公斤體重施用約30微升的無菌注射制劑，給藥大約一周，隨后每天每公斤體重施用約15微升的無菌注射制劑給藥。
10.一種治療HIV感染的患者的方法，其包括對(duì)所述患者施用有效治療量的無菌注射制劑形式的產(chǎn)品R，至少一種用于治療艾滋病或HIV感染的抗病毒劑和至少一種HIV蛋白酶抑制劑共同給藥。
11.權(quán)利要求10的方法，其中所述抗病毒劑是AZT和lamivudine，所述HIV蛋白酶抑制劑是ritonavir。
12.權(quán)利要求10的方法，其中所述抗病毒劑是lamivudine和nevirapone，所述HIV蛋白酶抑制劑是indinavir。
全文摘要
本發(fā)明公開了治療艾滋病或HIV感染的患者的方法,該方法是用產(chǎn)品R,一種肽—核酸制劑,結(jié)合一種或多種用于治療艾滋病或HIV感染的抗病毒劑,包括HIV蛋白酶抑制劑和核苷類似物進(jìn)行非腸道給藥。
文檔編號(hào)A61P31/18GK1251996SQ98804155
公開日2000年5月3日 申請(qǐng)日期1998年4月15日 優(yōu)先權(quán)日1997年4月15日
發(fā)明者沙洛姆·Z·赫希曼 申請(qǐng)人:領(lǐng)先病毒研究公司