專利名稱：：抑制腫瘤生長的含苯并咪唑衍生物的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明是抑制癌癥和腫瘤(包括白血病)在哺乳動物(特別是人和溫血動物)中生長的藥物組合物。它也是有效的抗病毒劑，可用于治療病毒感染。此組合物包含苯并咪唑衍生物。
背景技術(shù)：
：癌癥是動物和人的主要死因。癌癥的確切病因不明，但是很多研究者已證明某些活動如吸煙或暴露于致癌劑與某些類型癌癥和腫瘤的發(fā)病率之間的聯(lián)系。很多類型化療劑已證明對癌癥和腫瘤細(xì)胞有效，但并非所有類型的癌癥和腫瘤對這些化療劑產(chǎn)生反應(yīng)。不幸的是這些藥物很多也損傷正常細(xì)胞。這些化療劑的確切作用機制并非總是明了的。盡管癌癥治療領(lǐng)域有所進(jìn)展，但迄今領(lǐng)先的治療是手術(shù)、放射和化學(xué)治療及骨髓移植?；瘜W(xué)治療被認(rèn)為是對付已轉(zhuǎn)移的癌癥或特別有侵襲性的癌癥的。這樣的殺細(xì)胞劑或細(xì)胞抑制劑對生長指數(shù)高的癌癥即其細(xì)胞迅速分裂的癌癥作用最好。迄今，激素(特別是雌激素、孕酮和睪酮)、多種微生物產(chǎn)生的一些抗生素、烷化劑和抗代謝劑形成了腫瘤學(xué)家可利用的藥物的主體。對癌癥和腫瘤細(xì)胞有特異性而不影響正常細(xì)胞的理想的細(xì)胞毒劑將是特別令人滿意的。不幸的是，并未發(fā)現(xiàn)這樣的細(xì)胞毒劑，人們使用的是針對分裂特別快的細(xì)胞(腫瘤和正常細(xì)胞)的藥物。顯然，因?qū)δ[瘤細(xì)胞有獨特特異性而針對腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)的開發(fā)將是一個突破點?；蛘撸瑢δ[瘤細(xì)胞有細(xì)胞毒性而對正常細(xì)胞顯示較弱的效應(yīng)的物質(zhì)將是令人滿意的。因此，本發(fā)明的目的是提供有效抑制哺乳動物腫瘤和癌生長而對正常細(xì)胞作用小或無作用的藥物組合物。更具體地說，本發(fā)明的目的是提供包含本文所限定的藥物載體和苯并咪唑衍生物的抗癌藥物組合物及治療這些癌癥的方法。因?qū)Π籽〖?xì)胞有獨特的特異性而針對白血病細(xì)胞的物質(zhì)的開發(fā)也將是一個突破點。或者，對白血病細(xì)胞有細(xì)胞毒性而對正常細(xì)胞顯示較弱的效應(yīng)的物質(zhì)將是令人滿意的。因此，本發(fā)明的目的是提供有效治療白血病而對正常血細(xì)胞作用小或無作用的藥物組合物。更具體地說，本發(fā)明的目的是提供包含本文所限定的藥物載體和苯并咪唑衍生物的組合物及治療白血病的方法。據(jù)信，苯并咪唑組合物與化療劑合并使用可減少癌癥和腫瘤(包括白血病)的生長。本發(fā)明者發(fā)現(xiàn)苯并咪唑在制止癌、腫瘤、病毒或細(xì)菌的生長上特別有效。這些苯并咪唑和有效損傷腫瘤的其它化療劑的合并使用是新穎的治療方法。更具體地說，本發(fā)明的目的是提供包含本文所限定的藥物載體、苯并咪唑衍生物和化療劑的抗癌藥物組合物及治療這些癌癥的方法。這些組合物中可使用增效劑。苯并咪唑組合物對病毒也是有效的，可用于治療病毒感染。因此，本發(fā)明的另一個目的是提供治療諸如HIV、流感和鼻病毒的病毒感染的方法，其中苯并咪唑和增效劑合并使用。從下面的本發(fā)明詳細(xì)描述中，這些和其它的目的會變得明顯起來。發(fā)明概述治療哺乳動物特別是溫血動物和人的癌癥、腫瘤(包括白血病)的藥物組合物，包含藥物載體和有效量的選自下式所示化合物的抗癌化合物其中X為氫、鹵素、少于7個碳原子的烷基或少于7個碳原子的烷氧基；n為小于4的正整數(shù)；Y為氫、氯、硝基、甲基或乙基；R為氫或1-8個碳原子的烷基；R2為4-噻唑基、NHCOOR1，其中R1為少于7個碳原子的脂族烴，較佳為少于7個碳原子的烷基。通過口服、直腸內(nèi)、局部或胃腸外、靜脈或直接注射接近或進(jìn)入腫瘤給予有效量，這些組合物可用于抑制人體或動物體內(nèi)癌癥和其它腫瘤的生長。與對健康細(xì)胞有不利效應(yīng)的阿霉素相比，這些組合物不明顯影響健康細(xì)胞。治療哺乳動物特別是溫血動物和人的藥物組合物，包含藥物載體和有效量的化療劑和上述苯并咪唑衍生物。在此組合物中也可使用增效劑。較佳的組分為其中R為1-8個碳原子的烷基，R2選擇4-噻唑基、NHCOOR1，其中R1為甲基、乙基或異丙基，及與有機或無機酸的藥學(xué)上可接受的無毒的酸加成鹽。最佳的化合物為2-(4-噻唑基)苯并咪唑、(丁基氨基甲酰)-2-苯并咪唑氨基甲酸甲酯和2-甲氧基羰基氨基-苯并咪唑以及Y為氯的化合物。發(fā)明的詳述A.定義本文中，術(shù)語“包含”表示各種成分可合用于本發(fā)明的藥物組合物。因此，術(shù)語“主要由…組成”和“由…組成”包含在術(shù)語“包含”中。本文中，“藥學(xué)上可接受的”成分是適用于人和/或動物而無過度不良反應(yīng)(如毒性、刺激和變態(tài)反應(yīng))即有合理的效益/風(fēng)險比的物質(zhì)。本文中，術(shù)語“安全有效量”指按本發(fā)明的方式使用時足以獲得需要的治療反應(yīng)而無過度不良反應(yīng)(如毒性、刺激和變態(tài)反應(yīng))即有合理的效益/風(fēng)險比的成分的量。顯然，具體的“安全有效量”因各種因素而異，如受治療的特殊病情、患者的身體條件、受治療的哺乳動物的種類、療程、同時進(jìn)行的治療的種類(如果有的話)、所應(yīng)用的具體制劑和化合物或其衍生物的結(jié)構(gòu)。本文中，“藥物加成鹽”是抗癌化合物與有機或無機酸的鹽。較佳的這些酸加成鹽為氯化物、溴化物、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、磺酸鹽、甲酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、蘋果酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、抗壞血酸鹽等。本文中，“藥物載體”是用于將抗癌劑傳送給動物或人的藥學(xué)上可接受的溶劑、懸浮劑或賦形劑(包括脂質(zhì)體)。載體可以是液體或固體，是按腦中計劃的給藥方式而選擇的。本文中，“癌癥”指哺乳動物出現(xiàn)的所有類型的癌或贅生物或惡性腫瘤(包括腫瘤和白血病)。癌癥包括侵襲正常健康細(xì)胞的那些惡性疾病。白血病包括在哺乳動物中出現(xiàn)的侵襲正常健康血細(xì)胞和產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓的那些疾病。本文中，“抗癌化合物”是苯并咪唑類及其鹽。確切的苯并咪唑在下面詳細(xì)描述。較佳的物質(zhì)是BASF和Hoechst、DuPont和MSD-AgVet以″thiabendazole(噻苯達(dá)唑)″、″benomyl(苯菌靈)″和″carbendazim(多菌靈)″名稱出售的產(chǎn)品。本文中，“病毒”包括感染動物或哺乳動物(包括人)的病毒，病毒包括HIV、流感、脊髓灰質(zhì)炎病毒、皰疹、鼻病毒等。本文中，“化療劑”包括與DNA作用的藥物、抗代謝劑、與微管蛋白作用的藥物、激素類制劑和其它藥劑，如天冬酰胺酶或羥基脲。本文中，“增效劑”為曲普利啶及其順式異構(gòu)體或丙考達(dá)唑，它們與化療劑和苯并咪唑類合并使用。B.抗癌化合物抗癌化合物是因其抗真菌活性而為人所知的苯并咪唑衍生物。它們是用于防止和根除真菌的全身殺真菌劑?；衔锞哂腥缦陆Y(jié)構(gòu)其中X為氫、鹵素、少于7個碳原子的烷基或少于7個碳原子的烷氧基；n為小于4的正整數(shù)；Y為氫、氯、硝基、甲基或乙基；R為氫或1-8個碳原子的烷基；R2為4-噻唑基、NHCOOR1，其中R1為少于7個碳原子的脂族烴，較佳為少于7個碳原子的烷基。較佳的組成為其中R為1-8個碳原子的烷基，R2選自4-噻唑基、NHCOOR1，其中R1為甲基、乙基或異丙基，及與有機或無機酸的藥學(xué)上可接受的無毒的酸加成鹽。最佳的化合物為2-(4-噻唑基)苯并咪唑、(丁基氨基甲酰)-2-苯并咪唑氨基甲酸甲酯和2-甲氧基羰基氨基-苯并咪唑以及Y為氯、X為氫的化合物。這些化合物按1973年6月12日授予Adams等的美國專利No.3,738,995中描述的方法進(jìn)行制備。噻唑基衍生物按Brownetal.，J.Am.Chem.Soc.，83，1764(1961)和Grendaetal.，J.Org.Chem.，30，259(1965)所描述的方法進(jìn)行制備。據(jù)信，殺真菌劑(特別是全身性殺真菌劑)具有減小腫瘤或明顯減慢其生長的能力。全身性殺真菌劑具有在植物或動物全身轉(zhuǎn)運的能力。這是一種有用的屬性，但這不是對治療病毒感染、癌癥或腫瘤的有效化合物的基本要求。C.化療劑化療劑一般被分成與DNA-作用的藥物、抗代謝物、與微管蛋白作用的藥物、激素類藥和其他藥物如天冬酰胺酶或羥基脲等類。每類化療劑可根據(jù)化合物或活性的類型而被進(jìn)一步細(xì)分?？膳c本發(fā)明的抗癌劑或苯并咪唑類合并使用的化療劑包括所有這些類的成員。對于化療劑及其給藥方法的詳細(xì)論述，參見Dorr等，癌癥化療手冊(CancerChemotherapyHandbook)，2版，第15-34頁，Appleton&amp;Lange(Connecticut，1994)，該文獻(xiàn)在此引用作為參考。與DNA作用的藥物包括烷化劑，如順鉑、環(huán)磷酰胺、六甲蜜胺；DNA鏈斷裂劑，如博來霉素；嵌入型拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑，如放線菌素D和阿霉素；非嵌入型拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑，如依托泊甙和替尼泊甙；以及DNA小溝結(jié)合劑普卡霉素(Plcamydin)。烷化劑與細(xì)胞DNA、RNA和蛋白質(zhì)分子，以及與更小的氨基酸、谷胱甘肽及類似化學(xué)物質(zhì)形成共價的化學(xué)加合物。一般，這些烷化劑與細(xì)胞組分中的親核原子反應(yīng)，如在核酸、蛋白質(zhì)、氨基酸或谷胱甘肽中的氨基、羧基、磷酸根、巰基。這些烷化劑在癌癥治療中的機制和作用還不十分了解。典型的烷化劑包括氮芥類，如苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、氮芥(Mechlorethamine)、美法侖、烏拉莫司??；氮丙啶類如塞替派；甲磺酸酯類如白消安；亞硝脲類，如卡莫司汀、洛莫司汀、鏈佐星；鉑復(fù)合物類，如順鉑、卡鉑；生物還原烷化劑(alkylator)，如絲裂霉素和丙卡巴肼、達(dá)卡巴嗪和六甲蜜胺；DNA鏈斷裂劑包括博來霉素；DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑包括下列類型嵌入劑，如安吖啶、放線菌素D、柔紅霉素、阿霉素、伊達(dá)比星和米托蒽醌；非嵌入劑，如依托泊甙和替尼泊甙。DNA小溝結(jié)合劑是普卡霉素?？勾x物通過兩種主要機制中的一種或另一種而干擾核酸的產(chǎn)生。某些藥物可抑制DNA合成的直接前體脫氧核苷三磷酸的產(chǎn)生，從而抑制DNA復(fù)制。某些化合物與嘌呤或嘧啶足夠相象，從而可在核苷酸組成代謝途徑中代替它們。隨后，這些類似物可代替正常的組分而進(jìn)入DNA和RNA?？捎糜诒景l(fā)明的抗代謝物包括葉酸拮抗劑，如氨甲蝶呤和三甲曲沙；嘧啶拮抗劑，如氟尿嘧啶、氟脫氧尿苷、CB3717、阿扎胞苷、阿糖胞苷、和氟尿苷；嘌呤拮抗劑包括巰嘌呤、6-硫鳥嘌呤、氟達(dá)拉濱、噴司他??；糖修飾的類似物包括Cyctrabine、氟達(dá)拉濱；核糖核苷酸還原酶抑制劑包括羥基脲。與微管蛋白作用的藥物通過結(jié)合于微管蛋白(一種可聚合形成細(xì)胞微管的蛋白質(zhì))的特異位點而起作用。微管是關(guān)鍵的細(xì)胞結(jié)構(gòu)單元。當(dāng)藥物結(jié)合于該蛋白質(zhì)時，細(xì)胞不能形成微管。與微管蛋白作用的藥物包括長春新堿和長春堿(兩者都是生物堿)，以及紫杉醇。激素類藥也可用于治療癌癥和腫瘤。它們可用于激素敏感性腫瘤，并且通常是從天然來源衍生。它們包括雌激素、結(jié)合雌激素和炔雌醇和己烯雌酚、氯烯雌醚和Idenestrol；孕激素類，如己酸羥孕酮、甲羥孕酮和甲地孕酮；雄激素類，如睪酮、丙酸睪酮、氟甲睪酮、甲睪酮；腎上腺皮質(zhì)類甾醇類衍生自天然的腎上腺皮質(zhì)醇或氫化可的松。可以使用它們，因為它們有消炎的優(yōu)點而且某些能夠抑制有絲分裂并抑制DNA合成。這些化合物包括潑尼松、地塞米松、甲潑尼龍和潑尼松龍。促黃體生成激素釋放激素類藥或促性腺激素釋放激素拮抗劑，主要被用于治療前列腺癌。其中包括乙酸亮丙瑞林和乙酸戈舍瑞林。它們抑止睪丸生物合成類固醇?？辜に仡愃幇勾萍に貏┤缢舴?Tamosifen)；抗雄激素劑如氟他胺；和抗腎上腺劑如米托坦和氨魯米特。羥基脲似乎主要通過抑制核糖核苷酸還原酶而起作用。天冬酰胺酶是一種將天冬酰胺轉(zhuǎn)變成無功能的天冬氨酸從而阻斷腫瘤中蛋白質(zhì)合成的酶。D.增效劑“增效劑”可以是任何這樣的物質(zhì)，它能提高或增加藥物組合物的效力和/或是免疫抑制劑。一種這樣的增效劑是曲普利啶及其順式異構(gòu)體，它們可與化療劑以及苯并咪唑合并使用。曲普利啶在US5,114,951(1992)中有描述。另一種增效劑是丙考達(dá)唑，1H-苯并咪唑-2-丙酸；[β-(2-苯并咪唑)丙酸；2-(2-羧乙基)苯并咪唑；丙帕唑(propazol)]。丙考達(dá)唑是一種針對病毒和細(xì)菌感染的非特異的活性免疫保護(hù)劑，它可與此處所述的組合物一起使用。它僅與苯并咪唑類一起或與苯并咪唑類和化療劑合并使用，在治療癌癥、腫瘤、白血病和病毒感染中是有效的。丙酸及其鹽和酯也可與此處所述的藥物組合物一起使用。增效劑還改善苯并咪唑化合物在治療病毒和其它感染時的效能。它們可以安全有效量與這些抗癌劑合用。這些聯(lián)合使用可經(jīng)口服給藥、直腸內(nèi)給藥、局部給藥或胃腸外給藥法投藥給患者或動物?？寡趸S生素如抗壞血酸、β-胡蘿卜素、維生素A和維生素E可與本發(fā)明組合物一起投藥。E.劑量任何合適的劑量都可用于本發(fā)明方法?；衔锖洼d體的類型以及數(shù)量可以很不相同，這取決于溫血動物或人的種類、體重和待治療的癌癥或腫瘤?；焺┡c苯并咪唑類的用量范圍和比例決定于化療劑和待治療癌癥的類型。一般，合適的劑量是約2-400毫克(mg)/千克(kg)體重。較佳地，使用約15-150毫克/千克體重。對于化療劑，從約0.5毫克/公斤體重至約400毫克/公斤體重的較低劑量是可接受的。一般，給人的劑量低于給小溫血動物如小鼠的劑量。劑量單位包括一種化合物，或者該化合物與其他化合物或其他抑制癌癥的化合物形成的混合物。劑量單位還可含有稀釋劑、填充劑(extender)、載體等。劑量單位可為固體或凝膠形式，如丸劑、片劑、膠囊劑、脂質(zhì)體等，或者是液體形式，它們適合口服給藥、直腸給藥、局部給藥、靜脈內(nèi)給藥或腸胃外給藥，或者注射在腫瘤部位或其周圍，或骨髓中或其周圍。F.釋藥劑型抗癌化合物和化療劑一般與藥物上可接受的載體混合。載體可以是固體、液體或脂質(zhì)體，一般根據(jù)所用的給藥方式而選擇類型?；钚运幬锟梢砸云瑒┗蚰z囊、脂質(zhì)體形式，或作為附聚的粉末，或者以液體形式一起給藥。固體載體的例子包括乳糖、蔗糖、明膠和瓊脂。膠囊或片劑可以容易地制備，并且便于吞咽或咀嚼；其他的固體形式包括顆粒和疏松粉末(bulkpowder)。片劑可含有適當(dāng)?shù)恼澈蟿?、潤滑劑、稀釋劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑、流動誘導(dǎo)劑(flow-inducingagent)和助熔劑(meltingagent)。液體劑型的例子包括在水、藥物上可接受的脂肪和油、醇或其他有機溶劑(包括酯)中的溶液或懸浮液、乳劑、酏劑、糖漿、用非泡騰顆粒再生的溶液和/或懸浮液、以及用泡騰顆粒再生的泡騰制劑。這樣的液體劑型可含有，例如，適當(dāng)?shù)娜軇?、防腐劑、乳化劑、懸浮劑、稀釋劑、甜味劑、增稠劑和助熔劑。口服劑型可任意含有調(diào)味劑和著色劑。腸胃外和靜脈內(nèi)給藥的劑型還可含有礦物質(zhì)和其他物質(zhì)，以便使它們與注射或所選的釋藥系統(tǒng)類型相配伍?？捎糜谂渲票景l(fā)明口服劑型的、具體的藥物上可接受的載體和賦形劑的例子，在美國專利No.3,903,297(1975年9月2日授予Robert)中有描述。用于制造本發(fā)明的有用劑型的技術(shù)和組合物，在下列文獻(xiàn)中有描述7種現(xiàn)代制劑(7ModernPharmaceutics).第9和10章(Banker&amp;Rhodes編，1979)；Lieberman等，藥物劑型片劑(PharmaceuticalDosageFormsTablets)(1981)；和Ansel，藥物劑型導(dǎo)論(IntroductiontoPharmaceuticalDosageForms)2版(1976)。G.治療方法治療方法可以是，在治療具體的待治療癌癥或腫瘤類型時任何適當(dāng)?shù)挠行У姆椒?。治療可以是口服給藥、直腸給藥、局部給藥、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、或者注射在腫瘤部位或其周圍。施用有效量藥物的方法還取決于待治療的腫瘤。據(jù)信，通過與合適的載體、另外的抑制癌癥的化合物或方便給藥的稀釋劑一起配制，通過靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)施用苯并咪唑化合物的腸胃外治療方法，是將化合物施用于溫血動物的優(yōu)選方法。治療病毒感染的方法也可以是口服給藥、直腸給藥、局部給藥、腸胃外給藥或靜脈內(nèi)給藥。確切的時間和劑量將取決于待治療的病毒類型以及所需的血液中濃度。同樣的這些全身用殺真菌劑可單獨或與其它殺真菌劑一起和化療劑合用?？膳c這些物質(zhì)合用的其它殺真菌劑包括1H-1，2，4-三唑衍生物如氟康唑、丙康唑(propiconazole)，及N-氯苯基硫代甲氨酸化合物。諸如N-膦酰甘氨酸衍生物的除草劑如草甘膦也可與苯并咪唑類合用。下列實施例是闡述性的，并不意味著對本發(fā)明的限制。實施例1結(jié)腸、乳房和肺腫瘤細(xì)胞試驗進(jìn)行下列的細(xì)胞培養(yǎng)試驗，以測試苯并咪唑化合物對人結(jié)腸、乳房和肺腫瘤細(xì)胞的毒性。通過MTT(溴化3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基四唑鎓)還原觀察，測試細(xì)胞的存活。MTT測試是熟知的測定細(xì)胞活力的方法。在添加10％胎牛血清的Eagle最小必需培養(yǎng)基中，培養(yǎng)結(jié)腸瘤細(xì)胞(HT29，來自美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC))和乳房細(xì)胞(MX1，來自ATCC的細(xì)胞系)。在添加10％胎牛血清的HamF12培養(yǎng)基中培養(yǎng)肺瘤細(xì)胞(A549，來自ATCC的細(xì)胞系)。將腫瘤細(xì)胞進(jìn)行傳代，并以所需的細(xì)胞密度接種于培養(yǎng)瓶中。將培養(yǎng)基傾析掉，用磷酸鹽緩沖的鹽水(PBS)洗滌細(xì)胞層2次。在接種于瓶中之前，細(xì)胞用胰蛋白酶消化并被研制(triturated)。除非另有說明，培養(yǎng)物在37±1℃，于空氣含5±1％二氧化碳的潮濕氛圍中溫育。溫育培養(yǎng)物，直至鋪滿50-80％。當(dāng)培養(yǎng)瓶是亞鋪滿狀態(tài)時，對細(xì)胞進(jìn)行繼代培養(yǎng)。從培養(yǎng)瓶中吸去培養(yǎng)基，用PBS淋洗細(xì)胞片2次。然后，將胰蛋白酶溶液加至每個培養(yǎng)瓶中，覆蓋細(xì)胞層。在30-60秒后除去胰蛋白酶溶液，然后培養(yǎng)瓶在室溫下溫育2-6分鐘。當(dāng)90％細(xì)胞被分離(dislodged)后，加入生長培養(yǎng)基。通過研制而取出細(xì)胞，然后轉(zhuǎn)移至滅菌離心管中。測定懸浮液中的細(xì)胞濃度，并通過適當(dāng)?shù)南♂尗@得5000細(xì)胞/毫升的密度。細(xì)胞在96孔生物檢定板上的指定孔中進(jìn)行繼代培養(yǎng)(200微升細(xì)胞懸液/孔)。在所有的其余孔中加入PBS以維持濕度。板被溫育過夜，然后用供試物處理。每種稀釋液用100微升處理4個培養(yǎng)孔，來測試每種劑量的供試物。那些被指定為溶劑對照的孔，接受另外的100微升甲醇對照物；陰性對照孔接受另外的100微升處理培養(yǎng)基。在其余不加供試物或培養(yǎng)基處理的孔中加入PBS。然后培養(yǎng)板再溫育約5天。在5天溫育結(jié)束時，每個劑量組通過顯微鏡檢查來評估毒性。在處理培養(yǎng)基中制備0.5毫克/毫升的MTT稀釋液，然后經(jīng)0.45微米濾器過濾而去除不溶的晶體。從生物檢定板的孔傾析掉培養(yǎng)基。然后馬上將2000微升經(jīng)過濾的MTT溶液加至所有的測試孔中，但2個未處理的空白測試孔除外。這2個空白孔接受200微升處理培養(yǎng)基。培養(yǎng)板再返回培養(yǎng)箱約3小時。在溫育后，傾析掉含MTT的培養(yǎng)基。將過量的培養(yǎng)基加至每個孔中，在室溫下振搖培養(yǎng)板約2小時。用MolecularDevices(MenloPark，CA)VMax板讀數(shù)器測定每個孔在550納米的吸光度(OD550)。計算溶劑對照孔、各供試物稀釋液孔以及各空白孔和陽性對照孔的平均OD550。從溶劑對照孔和供試物孔的OD550平均值中分別減去空白孔的平均OD550，從而得到相應(yīng)的平均OD550。劑量反應(yīng)曲線被制成半對數(shù)圖，其中縱坐標(biāo)為％對照(線性)，而橫坐標(biāo)為供試物濃度(對數(shù))。從各供試物的曲線內(nèi)插得出EC50。對于以甲醇給予的供試物，制作各自的反應(yīng)曲線以便對甲醇數(shù)據(jù)進(jìn)行校正。阿霉素被用作陽性對照。在所有的例子中，它比任何供試物毒性高1或2個對數(shù)單位。阿霉素是目前使用的較強的藥物中的一種，而且它的副作用也很大。其他相當(dāng)有效的化療劑的峰血漿濃度可以比阿霉素的濃度高10-50倍。EC50是一半細(xì)胞被殺滅時的濃度。表1</tables>在正常的健康細(xì)胞中，獲得下列數(shù)據(jù)。顯然，苯菌靈(benomyl)和多菌靈(carbendazim)對正常健康細(xì)胞的毒性比阿霉素低得多。表2</tables>在用肺瘤細(xì)胞(A-549)、乳房瘤細(xì)胞(MCF-7)和結(jié)腸瘤細(xì)胞(HT-29)進(jìn)行的相應(yīng)研究中，全身性殺真菌劑噻苯達(dá)唑能有效地殺滅這些細(xì)胞。表3總結(jié)了這些結(jié)果。表3</tables>這些實驗表明這些組合物殺滅腫瘤細(xì)胞是有效的。實施例2隨機選擇小鼠并分組進(jìn)行處理。5組感染白血病。給患病動物投藥5天，停2天再投藥5天，然后停藥3天，再投藥5天停藥2天。這種不規(guī)則的給藥停藥方式不是一種理想的方式，但結(jié)果表明了多菌靈TM的肯定的效果。1組小鼠用癌得星TM(環(huán)磷酰胺，2-〔雙(2-氯乙基)-氨基-1-氧代-2-氮雜-5-oxophosphoridin)處理，1個對照組給予canola油，3組用不同水平的多菌靈TM((丁基氨基甲酰)-2-苯并咪唑-氨基甲酸甲酯)處理。還用1個對照組不作處理。多菌靈TM的3個劑量水平為4000mg/kg，2500mg/kg和1000mg/kg。癌得星TM的劑量為125mg/kg。8天后，未處理組少了1只小鼠，至第10天死了8只小鼠，第11天10只小鼠全部死亡。癌得星TM組小鼠存活了21天以上。較高劑量的多菌靈TM組有1只小鼠第14天死亡，第15、16和17天各死亡2只，第20、21和22天各死亡1只。這組的平均天數(shù)為17.3。中間劑量組有2只小鼠第14天死亡，4只第15天死亡，1只第16天死亡，2只第19天死亡，1只第21天死亡。這組的平均天數(shù)為16.50。最低劑量組各有2只小鼠在第12、13、14和15天死亡，各1只在第16和17天死亡。這組的平均天數(shù)為14.1。權(quán)利要求1.治療癌癥、腫瘤或病毒感染的藥物組合物，包含安全有效量的下式所示化合物或其藥學(xué)上可接受的無機或酸加成鹽其中X為氫、鹵素、少于7個碳原子的烷基或少于7個碳原子的烷氧基；n為小于4的正整數(shù)；Y為氫、氯、硝基、甲基或乙基；R為氫或1-8個碳原子的烷基；R2為4-噻唑基或NHCOOR1，其中R1為少于7個碳原子的脂族烴。2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，進(jìn)一步包含安全有效量的化療劑。3.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，進(jìn)一步包含安全有效量的增效劑。4.藥物組合物及其藥學(xué)上可接受的無機或有機酸加成鹽，其中R為氫或1-8個碳原子的烷基；R2為4-噻唑基、NHCOOR1，其中R1為甲基、乙基或異丙基。5.如權(quán)利要求1、2、3或4所述的藥物組合物，其中所述苯并咪唑選自2-(4-噻唑基)苯并咪唑、(丁基氨基甲酰)-2-苯并咪唑氨基甲酸甲酯和2-甲氧基羰基氨基苯并咪唑，6.如權(quán)利要求5所述的用于抑制癌生長的藥物組合物，其中所述化療劑選自與DNA作用的藥物、抗代謝物、微管蛋白作用的藥物、激素類藥、天冬酰胺酶或羥基脲、天冬酰胺酶、羥基脲、順鉑、環(huán)磷酰胺、六甲蜜胺、博來霉素、放線菌素D、阿霉素、依托泊甙、替尼泊甙、普卡霉素、氨甲蝶呤、氟尿嘧啶、氟脫氧尿苷、CB3717、阿扎胞苷、阿糖胞苷、氟尿苷、巰嘌呤、6-硫鳥嘌呤、氟達(dá)拉濱、噴司他丁、Cyctrabine和氟達(dá)拉濱。7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其中所述的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽選自氯化物、溴化物、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、磺酸鹽、甲酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、蘋果酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、抗壞血酸鹽及其混合物，且其中Y為氯。8.治療溫血哺乳動物癌癥的方法，其特征在于投與約2mk/kg體重至約400mg/kg體重的如權(quán)利要求1、2、3、4、5、6或7所述的藥物組合物。9.如權(quán)利要求8所述的方法，其中所述苯并咪唑經(jīng)口服給藥或腸內(nèi)、靜脈內(nèi)、胃腸外給藥，或注射于腫瘤。10.治療動物或人的癌癥或病毒感染的單位劑量藥物組合物，包含下式所示苯并咪唑或其藥學(xué)上可接受的鹽其中X為氫、鹵素、少于7個碳原子的烷基或少于7個碳原子的烷氧基；n為小于4的正整數(shù)；Y為氫、氯、硝基、甲基或乙基；R為氫或1-8個碳原子的烷基；R2為4-噻唑基、NHCOOR1，其中R1為少于7個碳原子的脂族烴。11.如權(quán)利要求10所述的單位劑量藥物組合物，進(jìn)一步包含化療劑。12.如權(quán)利要求10或11所述的單位劑量藥物組合物，進(jìn)一步包含增效劑。13.如權(quán)利要求21所述的單位劑量藥物組合物，其中所述苯并咪唑選自2-(4-噻唑基)苯并咪唑、(丁基氨基甲酰)-2-苯并咪唑氨基甲酸甲酯和2-甲氧基羰基氨基苯并咪唑及其藥學(xué)上可接受的鹽。14.如權(quán)利要求10、11或12所述的單位劑量藥物組合物，其中所述載體選自乳糖、蔗糖、明膠和瓊脂、水溶液、乳劑、懸浮液和從非泡騰和泡騰制劑再生的溶液和懸浮液。15.如權(quán)利要求13所述的單位劑量藥物組合物，其中所述單位劑量組合物包含選自下組的物質(zhì)之一及其混合物，這些物質(zhì)是懸浮劑、稀釋劑、增甜劑、矯味劑、著色劑、防腐劑、乳化劑和色素。16.治療病毒感染的方法，其特征在于投與安全有效量的下式所示化合物或其藥學(xué)上可接受的有機或無機酸加成鹽其中X為氫、鹵素、少于7個碳原子的烷基或少于7個碳原子的烷氧基；n為小于4的正整數(shù)；Y為氫、氯、硝基、甲基或乙基；R為氫或1-8個碳原子的烷基；R2為4-噻唑基、NHCOOR1，其中R1為少于7個碳原子的脂族烴。16.治療惡性腫瘤的方法，其特征在于投與安全有效量的殺真菌劑。17.抑制腫瘤生長的方法，其特征在于投與安全有效量的殺真菌劑。全文摘要本發(fā)明揭示了用于治療哺乳動物白血病的藥物組合物。所用的殺真菌劑為式(Ⅰ)所示苯并咪唑衍生物或其藥學(xué)上可接受的無機或有機酸加成鹽:其中X為氫、鹵素、少于7個碳原子的烷基或少于7個碳原子的烷氧基;n為小于4的正整數(shù);Y為氫、氯、硝基、甲基或乙基;R為氫或1—8個碳原子的烷基;R文檔編號A61K45/00GK1181010SQ96193251公開日1998年5月6日申請日期1996年4月11日優(yōu)先權(quán)日1995年4月12日發(fā)明者J·B·薩姆登申請人:普羅克特和甘保爾公司