專利名稱：腦保健營養(yǎng)品及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種保健營養(yǎng)品及其制造方法，具體地說，是一種從哺乳動物腦中提取有益于人腦功能發(fā)育、以及增強學習記憶功能的神經(jīng)節(jié)苷脂物質(zhì)，并結(jié)合后序加工配料而制成的保健營養(yǎng)品。
自古以來，人們便有以肉補肉、以腦補腦、以骨補骨、以肝補肝、……的習慣，自然，這是一種簡單、樸素的聯(lián)想，難以用科學的語言來闡明。然而，經(jīng)驗則使你相信其有科學道理的存在，例如以腦補腦的民間傳統(tǒng)作法，確有實效。有人覺得記憶力不好，便會想到去吃豬腦補一補，但是，究竟吃多少只豬腦才有效呢？答案自然是心中無數(shù)，然則，吃少了，自然難以見效，吃多了，肯定會倒胃口。經(jīng)驗的東西，只有使用現(xiàn)代科學技術(shù)才能揭開其真諦，才能合理地去處分它的用量、用法?？茖W研究表明，哺乳動物腦內(nèi)含有神經(jīng)節(jié)苷脂，它對腦功能的發(fā)育具有重要的作用，它是一類含N-乙酰神經(jīng)氨酸的膜糖脂，其化學結(jié)構(gòu)如

圖1所示，它在哺乳動物腦內(nèi)的含量較其它組織豐富，組成神經(jīng)節(jié)苷脂的脂成份占細胞膜脂總量的5-10%。但目前尚未見有此類提取物制成的保健營養(yǎng)品有報道。
本發(fā)明的目的是提供一種從哺乳動物腦中提取含神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖脂物質(zhì)制成的保健營養(yǎng)品的方法，以及由此方法制成的保健營養(yǎng)品，同時，還開發(fā)其保健用途。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案如下
1、對哺乳動物腦提取神經(jīng)節(jié)苷脂兼顧成本與純度；2、可食、無害有益。為此，本發(fā)明的方法是從哺乳動物腦中提取以含有神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖脂物質(zhì)，并對所提取的鞘糖脂物質(zhì)予以后序加工而制成保健營養(yǎng)品，即對所獲得的鞘糖脂物質(zhì)加上適當比例的糖、添加劑和飲用水，制成混合口服液，或?qū)λ崛〉那侍侵镔|(zhì)進行冷凍干燥，使之呈粉末狀，再加上適量的可食淀粉，制成膠囊或片劑。
本發(fā)明的優(yōu)點是1、原料易得，工藝簡單、合理，生產(chǎn)成本低，開創(chuàng)了從諸如牛、羊、豬腦中提取含有以神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖脂物質(zhì)制成可食的保健營養(yǎng)品的先例，特別是本發(fā)明實施了使所提取的鞘糖脂物質(zhì)可存留于食用酒精中，從而，克服了以往的生物提取方法中必須把提取物置留于有毒、有害的提取劑中的缺陷；2、本發(fā)明避開復(fù)雜的提取工藝，從而，明顯降低成本。在所提取的鞘糖脂物質(zhì)中，神經(jīng)節(jié)苷脂(GD1a、GT1b、GD1b和GM1)含量占總鞘糖脂總量的70%或70%以上，而從每公斤腦組織中至少可提取0.9克干基神經(jīng)節(jié)苷脂，即總收率α=0.9‰；3、本發(fā)明的保健營養(yǎng)品有明顯的促進腦生長發(fā)育、增強學習、記憶的作用，以及具有促進腦損傷后的恢復(fù)的功效。大量的動物實驗和人體的應(yīng)用的結(jié)果表明，功效十分顯著。
下面給出本發(fā)明的附圖及表格。
圖1為公知的四種腦神經(jīng)節(jié)苷脂的化學結(jié)構(gòu)式。圖中Ⅰ為葡萄糖；Ⅱ為半乳糖；Ⅲ為N-乙酰氨基半乳糖；
Ⅳ為半乳糖；Cer為神經(jīng)酰胺(鞘氨醇+R)；R為脂肪酸；A、B、C均為表示N-乙酰神經(jīng)氨酸(或唾液酸)；GM1為四糖基、單唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、A)；GD1a為四糖基、二唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、A、B)；GD1b為四糖基、二唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、A、C)；GT1b為四糖基、三唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、A、B、C)。
圖2為本發(fā)明使用的動物行為模型實驗的三等分迷宮結(jié)構(gòu)示意圖。
圖3為本發(fā)明使用的動物行為模型實驗梭穿箱結(jié)構(gòu)示意圖。
表1-表5分別為在不同條件下的動物服用本發(fā)明營養(yǎng)品后的學習、記憶功能增強的實驗數(shù)據(jù)表。
表6和表7分別為本發(fā)明營養(yǎng)品對人為動物腦發(fā)育障礙和腦損傷后恢復(fù)效果的實驗統(tǒng)計表。
表8-表25為本發(fā)明營養(yǎng)品的人體應(yīng)用效果的統(tǒng)計表。
下面我們給出本發(fā)明的一個較好實施例，并將對其予以詳細的描述，以便進一步給出本發(fā)明的技術(shù)細節(jié)，同時，結(jié)合圖2和圖3，以及表1-表25，進一步闡明本發(fā)明營養(yǎng)品在促進神經(jīng)生長發(fā)育、促進神經(jīng)損傷的恢復(fù)、以及在增強學習、記憶等方面的顯著效果。
本發(fā)明的制作方法，其步驟是1、先從哺乳動物，如豬、狗、牛、羊等的新鮮腦，或速凍保鮮期內(nèi)的儲存腦中提取含有以神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖酯物質(zhì)，2、接著，進行后序加工即制成本發(fā)明的保健營養(yǎng)品。本實施例以豬腦為原料，其詳細加工步驟如下原料豬腦，95%以上食用酒精，99.5%以上優(yōu)級品工業(yè)氯仿、蒸餾水等。
(1)、豬腦的選擇取新鮮豬腦或冷凍豬腦(冷凍豬腦的選取見下說明)250克用水漂洗，去除污血、碎骨及雜物，瀝干備用。冷凍豬腦的選取應(yīng)選用取腦時立即進行-20℃以下速凍的材料。
(2)、搗碎將250克備用豬腦加1020克蒸餾水、900ml氯仿(1350克)，再加食用酒精1800ml(1440克)混合，放入組織搗碎機內(nèi)搗碎，搗碎機轉(zhuǎn)速為15000轉(zhuǎn)/分，搗碎1分鐘，停機1分鐘連續(xù)3次。應(yīng)注意，搗碎時的溫度切勿超過25℃，天熱時需用水浴冷卻。
(3)、提取將腦組織搗碎液在容器中攪拌提取4小時，提取溫度不得超過30℃。
(4)粗分取提取液離心分離，3000xg，5℃左右30分鐘，除去沉淀(另行待處理)，取出含鞘糖脂物質(zhì)的上清液。
(5)、分層提純混合液應(yīng)充分靜止，自然沉降8小時，即分成上、下二層，下層為氯仿層，可分出另行處理回收氯仿，上層為含有鞘糖脂物質(zhì)的母液，每料約得1800ml。
(6)、濃縮在母液中加入適量消泡劑，例如米糠油，進行真空濃縮，以除去酒精、部分水和微量殘留氯仿，真空度可保持在-600mmHg左右，嚴格控制料液溫度在55℃以下，濃縮至400ml左右為止。
(7)、后序加工，完成本發(fā)明的保健營養(yǎng)品。
本實施例所提取的鞘糖脂物質(zhì)，其成份為神經(jīng)節(jié)苷脂-GD1a為29.58%、GT1b為18.01%、GD1b為13.93%和GM1為10.85%；其余的27.63%為其它組分的神經(jīng)節(jié)苷脂和鞘糖脂物質(zhì)。
本實施例的保健營養(yǎng)品分別制成口服液、口服膠囊和口服片劑，它們的構(gòu)成分述于后a、保健口服液包括食糖、添加劑、可飲水和含有以神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖脂物質(zhì)。該口服液的神經(jīng)節(jié)苷脂含量不低于每毫升0.5毫克。
b、保健口服膠囊包括食用淀粉和含以神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖脂粉末，裝置于膠囊中。
c、保健口服片劑包括食用淀粉和含以神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖脂粉末，被壓制成片狀。
上述產(chǎn)品，制作口服液時所用的鞘糖脂物質(zhì)是取用提取過程中未干的鞘糖脂物質(zhì)，即其后序加工是配料(加糖和添加劑)和包裝，采用棕色易拉瓶裝液，每瓶10毫升，至少含神經(jīng)節(jié)苷脂5毫克。而口服膠囊和片劑，其后序加工是對未干的神經(jīng)節(jié)苷脂進行冷凍干燥，制成干粉，再配料-加可食淀粉，并分別以膠囊裝粉和壓片裝瓶。每只膠囊或每片均含神經(jīng)節(jié)苷脂2.5毫克。
本發(fā)明保健營養(yǎng)品的應(yīng)用，有顯著的效果，請參見圖2和圖3，以及表1-表25。為了書寫的方便，下面我們均以M物質(zhì)代替本發(fā)明中的含神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖脂物質(zhì)。
甲動物實驗實驗方法一、動物行為模型本實驗采用了兩種測試學習、記憶的動物行為模型，即大鼠三等分迷宮的分辨學習模型，和小鼠的條件性主動回避反應(yīng)模型。這兩種動物模型均為目前國際上常用的方法，現(xiàn)簡要分述如下1、大鼠三等分迷宮分辨學習模型圖2為三等分迷宮的結(jié)構(gòu)示意圖。三支臂的底部由銅棒排列而成，可通電(約40V)。三支臂的頂端裝有一只指示燈，燈光示安全區(qū)，即燈亮的一臂不通電，其他兩臂均通電。安全區(qū)的方位按隨機表變換。在訓練開始前，大鼠在迷宮內(nèi)適應(yīng)一定時間，訓練開始后，給予電擊的同時其中有一支臂的指示燈開亮，如果大鼠跑向燈亮的一支臂，則為正確反應(yīng)，否則為錯誤反應(yīng)。重復(fù)以上步驟直至大鼠在10次測試中有9次正確反應(yīng)，作為學會的標準。以達到學會標準所需的訓練次數(shù)，作為學習能力高低的指標。
2、小鼠條件性主動回避反應(yīng)模型主動回避反應(yīng)實驗在穿梭箱內(nèi)進行，圖3為穿梭箱結(jié)構(gòu)的示意圖。穿梭箱底部由銅棒排列而成?？梢酝姟４┧笙浔环指魹槿齻€小室，A為安全區(qū)，不給予電擊，B室為電擊區(qū)，C為起始區(qū)，裝有信號燈。A室與B室間有一小門，小鼠可通過這一小門從B室跑向A室。B與C之間有隔板。在開始訓練前小鼠在箱內(nèi)適應(yīng)一段時間(約半小時或稍長)。訓練開始時將小鼠置于C室，用隔板擋住，信號燈亮作條件刺激，立即提起隔板，3-5秒后給予電擊，小鼠為逃避電擊跑向A室，經(jīng)多次訓練后，燈光亮后小鼠即能跑向A室而免遭電擊，此時條件性主動回避反應(yīng)已建立，10次測試中有9次出現(xiàn)條件性反應(yīng)即定為學會標準。達到學會標準所需的訓練次數(shù)作為學習能力高低的指標。
二、實驗動物和給藥途徑實驗中所用大鼠為中國科學院實驗動物中心供應(yīng)的SpragueDawley純種大鼠，體重為150-200g；所用小鼠為該中心供應(yīng)的昆明種小鼠，體重為20g左右。
給藥途徑均為口服，采用兩種方式，即用注射器注入口中或?qū)-物質(zhì)溶于飲水中飲用。
所有實驗均采用雙育法。實驗數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示，用t-檢驗進行統(tǒng)計處理，以P(概率)＜0.05定為顯著性差異。
實驗結(jié)果1、口腔注入M-物質(zhì)的結(jié)果-對大鼠分辨學習、記憶的作用實驗動物為20只純種S.D.雄性大鼠，隨機平均分為兩組M-組和對照組。M-組共10只動物，服用M-物質(zhì)7天，服用劑量為50mg/kg體重；對照組則注以等量的自來水，服用7天后開始行為實驗。實驗結(jié)果表明，服用M-物質(zhì)的大鼠學習能力較對照組為強，M-組達到學會標準所需的訓練次數(shù)為23.2±7，而對照組為28.9±3.3。P＜0.05，兩組間有顯著差異。具體數(shù)據(jù)見表1。
學會后停止訓練2周，2周后進行記憶保存的檢查。20次測試中的正確反應(yīng)率，M-組為87.6±6.5，接近2周前學會時的水平，而對照組為81.4±7.4。兩組相比，P＜0.05，有顯著差異。具體數(shù)據(jù)列于表2。
2、自然飲用M-物質(zhì)水溶液的結(jié)果-對小鼠條件性主動回避反應(yīng)的作用實驗動物為40只昆明種小鼠，雌雄兼有，隨機平均分為兩組M-組和對照組。M-組平均每只小鼠每天自然飲用1mg/4ml共服用2周即14天；對照組則飲用等量的自來水。40只小鼠分養(yǎng)在8只飼養(yǎng)籠內(nèi)，即每籠5只小鼠，每天喂5mgM-物質(zhì)。服用14天后開始進行行為實驗，實驗結(jié)果表明，M-物質(zhì)有很強的促進學習、記憶功能的作用。M-組小鼠達到學會標準所需的訓練次數(shù)為29.7±4.8，而對照組小鼠需38.5±3.7次，P＜0.001，差別非常顯著。具體數(shù)據(jù)列于表3。
學會后停止訓練，一個月后進行記憶保持的檢查，發(fā)現(xiàn)對照組小鼠的正確反應(yīng)率為48.5±9.6，略低于50%說明已經(jīng)遺忘；而M-組小鼠的正確反應(yīng)率為58.3±8.2%，接近60%，說明仍有一定程度的記憶保存。兩組間的差異十分顯著(P＜0.001)。具體數(shù)據(jù)列于表4。
3、M-物質(zhì)對老齡小鼠學習的增強作用實驗動物為老齡昆明種小鼠17只，體重為33-37g雌雄兼有，年齡在1年以上。隨機分組，M-組有9只老齡鼠，對照組為8只老齡鼠，劑量為50mg/kg，采用自然飲用M-物質(zhì)水溶液的方法，連續(xù)服用30天，對照組則飲用自來水。實驗結(jié)果表明，M-物質(zhì)對老齡小鼠的學習能力有明顯的增強作用。M-組老齡小鼠達到學會標準所需的訓練次數(shù)為44.6±1.3，而對照組需50.4±3.6，兩組進行比較，P＜0.005，有非常顯著的差異。具體數(shù)據(jù)列于表5。
4、M-物質(zhì)促進切斷海馬傘-穹窿小鼠腦功能的恢復(fù)。
切斷海馬傘-穹窿可使海馬內(nèi)的膽鹼能末梢變性，是造成學習能力低下的一種動物模型，為檢查M-物質(zhì)對腦損傷恢復(fù)的促進作用，我們利用了這種模型，實驗動物為21只昆明種小鼠，首先在麻醉下進行切斷海馬傘-穹窿的手術(shù)，手術(shù)后休息三天，再斷水一天，然后開始飲用M-物質(zhì)水溶液，劑量為50mg/kg(即1mg/只/天)，服用10天后進行行為訓練實驗，對照組也為手術(shù)動物，只飲用自來水。實驗結(jié)束后對切斷部位進行組織學檢查，以下提供的數(shù)據(jù)均為手術(shù)成功動物的結(jié)果。
M組共11只手術(shù)小鼠，達到學會標準所需的訓練次數(shù)為37.9±3.2接近未手術(shù)的正常小鼠達到學會標準所需的次數(shù)(38.5±3.7)；對照組共10只手術(shù)小鼠，達到學會標準所需的訓練次數(shù)為48.8±5.2，經(jīng)統(tǒng)計處理兩組間有非常顯著的差異，P＜0.001。具體數(shù)據(jù)列于表6。
5、M-物質(zhì)對胚胎期缺血性缺氧所造成的大鼠學習能力低下的改善作用(本實驗系委托上海腦研究所完成的)。
實驗動物為Wistar大鼠。用懷孕19天的母鼠經(jīng)無菌手術(shù)，結(jié)扎兩側(cè)子宮動脈15分鐘，造成胚胎缺氧，隨后讓母鼠自然分娩，四窩共獲28只胚胎期曾缺氧的幼鼠。產(chǎn)后18天斷奶后，每窩幼鼠對半分為兩組；M-組14只，每天服用M-物質(zhì)，劑量為50mg/kg；另一組為對照組也為14只幼鼠，服用自來水。服用一個月后即進行三等分迷宮分辨學習實驗。實驗結(jié)果表明，M-物質(zhì)能促進胚胎期缺氧幼鼠腦功能的正常發(fā)育，改善大鼠胚胎期缺氧所造成的分辨學習能力損傷的作用。M-組大鼠達到學會標準所需的訓練次數(shù)為41.86±11.55，而對照組大鼠需52.5±8.8。經(jīng)統(tǒng)計處理，兩組間有顯著性差異，P＜0.05。具體數(shù)據(jù)列于表7。
乙人體實驗測定人的記憶能力，主要是采用心理測量的方法。國際上通用的韋氏記憶量表在我國早已修訂。但是韋氏量表只有一套，無法用于給藥前后自身記憶能力的測定和比較研究。我們根據(jù)中科院心理研究所建立的，為全國心理學界所公認的臨床記憶量表。臨床記憶量表包含性質(zhì)和難度相同的甲、乙兩套量表，適用于藥物對人的記憶能力的作用的研究。此外，臨床記憶量表有利于測量借助語文的記憶能力和非語文的記憶能力，測定大腦兩半球的記憶能力，以及海馬的記憶能力。我們選用臨床記憶量表研究了M-物質(zhì)對老年人記憶能力的作用。結(jié)果表明，M-物質(zhì)能顯著提高老年人的記憶能力。
實驗方法一、實驗對象實驗對象為老年人，最大年齡為81歲，最小為60周歲。男女兼有，共40人。
二、臨床記憶量表臨床記憶量表由下列五方面的測試題組成，即指向記憶、聯(lián)想學習、圖象自由回憶、無意義圖形再認和人像特點聯(lián)想回憶。一次測試需完成五方面的測試題，測試結(jié)果為原始分。由原始分可以求得總的量表分，進而查得記憶商(MemoryQuotient,MQ)。MQ越高，說明記憶能力越強。根據(jù)五個分項的原始分還可求得年齡樣表分。年齡樣表分越高，說明記憶能力越好，它反映五個分項的記憶能力，便于給藥前后的深入比較研究。
三、給藥與測試
40名測試對象都先用甲套量表進行記憶能力的心理測量。然后根據(jù)MQ、年齡、性別和有無文化等情況將40名受試者隨機平均分為兩組一組為對照組，另一組為M-組。M-組每人每天口服M-物質(zhì)營養(yǎng)液一支(5mgM物質(zhì)/10ml營養(yǎng)液/支)，對照組每人每天口服空白無“M”物質(zhì)營養(yǎng)液(即安慰劑，10ml/支)。30天后，再用乙套量表檢測每名受試者的記憶能力。
四、數(shù)據(jù)處理測量所得的MQ和年齡樣分都表示為平均數(shù)±標準差(X±SD)。相關(guān)的數(shù)據(jù)間用Student'st-test進行差異的顯著性檢驗。
測試結(jié)果一、M-物質(zhì)營養(yǎng)液增強老年人記憶功能的作用服用M-物質(zhì)營養(yǎng)液一個月后，所得MQ值與其服用M-物質(zhì)營養(yǎng)液前所測量得的MQ相比，有極明顯的升高(表8，P＜0.001，n＝20)。與對照組(服安慰劑)相比，M-組的MQ值顯著高于對照組的MQ值(表9，P＜0.05，n=20)。對照組服用安慰劑前后的MQ值相差極小，無統(tǒng)計意義(表10，P＜0.05，n＝20)。結(jié)果表明，M-物質(zhì)可顯著增強老年人的記憶能力。
二、M-物質(zhì)營養(yǎng)液增強老年人記憶的單項分析結(jié)果為了進一步分析M-物質(zhì)對老年人記憶的增強作用，我們測定了各單項的年齡表分。服用M-物質(zhì)前后的年齡樣表分的自身對照表明，指向記憶增強極其顯著(表11，P＜0.001，n=20)；圖象自由回憶、無意義圖形再認和人像特點聯(lián)想回憶都有明顯增強(表12-14)；聯(lián)想學習雖有改善，但不明顯(表15)。M-組與服用安慰劑的對照組相比，指向記憶和無意義圖形再認的年齡樣表分顯著升高(表16-17)，而聯(lián)想學習、圖象自由回憶和人像特別聯(lián)想回憶的年齡樣表分雖有升高，但無顯著性差異(表18-20)。對照組服用安慰劑前后，單項的年齡樣表分沒有顯著性的變化(表21-25)。這些結(jié)果表明，M-物質(zhì)改善老年人記憶能力主要是通過改善指向記憶和無意義圖形再認的記憶能力而實現(xiàn)的。
以上我們看到對照組在服用安慰劑后MQ值(表10)升高極少，各項的年齡樣表分升高也很少(表21-25)。這些結(jié)果表明，安慰劑雖為溶解M-物質(zhì)的營養(yǎng)液，但對老年人的記憶能力沒有明顯的促進作用。此外，還說明，臨床記憶量表由于有甲、乙兩套量表，是研究藥物對記憶能力的作用的、科學的、理想的、心理測量工具。
服用M-物質(zhì)營養(yǎng)液后MQ升高極明顯(表8)。單項年齡樣表分也升高，其中四項有明顯差異(表11-14)。與對照組相比較，指向記憶和無意義圖形再認得到顯著改善(表16-17)。這些結(jié)果表明，M-物質(zhì)對老年人的記憶能力有明顯的增強作用。指向記憶是語文記憶，它借助于語言而記憶，對右利手人而言，指向記憶反映大腦左半球的記憶能力。無意義圖形再認是非語文的純圖形式的非語文記憶，它反映大腦右半球的記憶能力。因此，我們的結(jié)果提示，M-物質(zhì)對老年人大腦兩半球的記憶功能有明顯的改善作用。
此外，人像特點聯(lián)系回憶可以反映海馬的記憶能力。老年人服用M-物質(zhì)營養(yǎng)液后，人像特點聯(lián)系回憶的年齡樣表分升高明顯(表17，P＜0.05,n=20)。這一結(jié)果表明，M-物質(zhì)能夠改善海馬的記憶功能，這與我們在動物上所得到的研究結(jié)果一致。
丙毒性實驗和病理檢查結(jié)果一、毒性實驗結(jié)果急性毒性實驗的劑量為作用劑量(50mg/kg體重)的10倍(500mg/kg)，所用動物為昆明種小鼠。10倍作用劑量由于劑量太大注射的難度大，只成功地口腔灌注了兩只小鼠，沒有觀察到異常表現(xiàn)，存活48小時后處死，除胃內(nèi)有較多殘存物質(zhì)外，其它臟器無明顯異常。5倍作用劑量的結(jié)果如下在5只小鼠上成功地進行了實驗，用口腔注入法給藥，每只動物(按體重20g計算)一次注入5mgM-物質(zhì)。注射后沒有發(fā)現(xiàn)什么異常，飼養(yǎng)三天后處死進行病理檢查。
二、病理檢查結(jié)果1、服用M-物質(zhì)1個月后的病理檢查結(jié)果對兩只服用M-物質(zhì)1個月小鼠的心、肝、腎、肺、腦等臟器進行切片檢查。自大腦額葉中部取材亦未見神經(jīng)細胞變性或壞死。肝細胞結(jié)構(gòu)良好，未見損傷性改變。
2、急性毒性的病理檢查結(jié)果所用劑量為250ml/kg，為有效劑量的5倍，成活三天后取材，并用兩只正常未經(jīng)任何處理的小鼠作為對照以便比較。經(jīng)切片檢查表明，M-物質(zhì)大量服用不影響主要臟器，與對照小鼠的臟器比較，沒有明顯差別。
表1.表2.
No.M-組對照組No.M-組對照組1.25291.95952.11292.80803.18253.95854.21304.95705.22285.85856.24306.85757.29317.85.781.38.30248.80809.353610.1727平均數(shù)87.5981.41標準差6.537.42平均數(shù)23.228.8標準差7.023.35概率P<0.05概率P<0.05
表3.表4.
No.M-組對照組No.M-組對照組1.28331.45352.31382.70553.31383.55604.31434.65705.21365.55456.38366.60507.30437.55458.35418.45409.28429.556010.263910.656011.323611.603512.303612.704513.373113.553514.223714.754515.324115.505516.233516.654017.343717.555518.344518.504519.254019.554520.264320.6050平均數(shù)29.738.5平均數(shù)58.2548.5標準差4.803.69標準差8.169.61概率P<0.001概率P<0.001
表5.表6.
No.M-組對照組No.M-組對照組1.38451.42602.44492.35533.44493.39494.46564.33465.45485.36496.44546.40487.46497.38508.46538.37409.449.344610.4047平均數(shù)50.3844.5611.43標準差3.621.33平均數(shù)37.9148.8概率P<0.005標準差3.245.18概率P<0.001
表7.
No.M-組對照組1.25472.55583.37544.54395.51566.40597.48418.32609.504310.446611.475012.364213.515814.1662平均數(shù)41.8652.5標準差11.558.76概率P<0.05
表8.記憶商(MQ)表9.記憶商(MQ)(M-組自身對照)(M-組與對照組相比)No.服用前服用后No.M-組對照組1.1111121.1121402.971272.1271063.781283.1281134.1271364.1361015.1011025.102996.721186.1181177.1191167.116808.1111408.1401169.951239.12310110.9911910.11913611.11814511.14513312.10111712.1179113.10813413.13411514.11413214.13212115.10711515.1159216.11212516.12512717.9012617.1269018.11313718.13712119.9313319.13310420.589620.96130平均數(shù)101.2124.05平均數(shù)124.05111.65標準差16.96312,467標準差12.46716.891概率P<0.001概率P<0.05
表10.記憶商(MQ)表11.指向記憶(對照組自身對照)(M-組自身對照)No.服用前服用后No.服用前服用后1.1191401.22242.1091062.24203.1161133.18244.1071014.24305.111995.16266.1031176.12207.89807.18268.1191168.14269.1001019.91810.11013610.182611.13213311.182412.11611512.183213.11012113.92614.1139214.182415.11412715.123816.659016.242217.10212117.142818.11010418.222619.13213019.162420.949120.1422平均數(shù)108.55111.65平均數(shù)1725.3標準差14.7516.89標準差4.654.46概率P<0.05概率P<0.001
表12.圖象自由回憶表13.物意義圖形再認(M-組自身對照)(M-組自身對照)No.服用前服用后No.服用前服用后1.28291.24252.34282.24283.8353.18294.22334.26255.20275.12156.22196.0387.22207.22118.22288.21249.12229.212410.202210.161811.253311.183212.151912.202013.182813.243214.242514.123815.122815.203316.252616.193817.202517.152818.202118.203219.242619.192020.161720.016平均數(shù)20.4525.55平均數(shù)17.5526.3標準差5.945.00標準差7.077.94概率P<0.01概率P<0.005
表14.人像特點聯(lián)想回憶表15.聯(lián)想學習(M-組自身對照)(M-組自身對照)No.服用前服用后No.服用前服用后1.1861.21242.0192.38223.0223.32284.34264.33205.24145.30216.18226.13227.12197.21248.24248.37249.14209.142410.01410.202411.322411.302912.181812.273013.101713.192014.362614.292615.213815.143816.201616.252817.202617.182418.262818.263219.162319.202420.01820.1328平均數(shù)17.1522平均數(shù)2425.7標準差11.086.36標準差7.864.35概率P<0.05概率P>0.05
表16.指向記憶表17.無意義圖形再認(M-組與對照組比)(M-組與對照組比)No.M-組對照組No.M-組對照組1.24281.25302.20222.28243.24263.29224.30144.25255.26205.15156.20226.38257.26107.11198.26268.24289.18169.242110.262210.182611.243211.322312.322212.201813.262613.322214.241714.382215.382015.333116.221816.381517.282217.282518.261418.322319.242619.20620.221820.1624平均數(shù)25.321.05平均數(shù)26.321.7標準差4.465.40標準差7.945.58概率P<0.05概率P<0.05
表18.聯(lián)想學習表19.圖象自由回憶(M-組與對照組比)(M-組與對照組比)No.M-組對照組No.M-組對照組1.24201.29222.22202.28243.28293.35234.20134.33275.21115.27276.24326.19237.24227.20238.24268.28259.24279.221910.243410.221811.292711.332612.302912.192513.203013.282614.262014.251215.382315.283116.282116.261917.242817.252618.322818.211719.241619.263220.282120.1722平均數(shù)25.723.85平均數(shù)25.5523.35標準差4.356.19標準差5.004.74概率P>0.05概率P>0.05
表20.人像特點聯(lián)系回憶表21.指向記憶(M-組與對照組比)(對照組自身對照)No.M-組對照組No.服用前服用后1.16281.14282.19192.26223.22163.20264.26224.18145.14165.16206.22166.18227.1907.22108.24168.28269.20189.181610.142210.222211.343211.263212.182612.122213.172213.202614.261214.141715.382815.102016.161616.101817.262617.282218.282218.161419.232019.162620.18020.1418平均數(shù)2219.35平均數(shù)18.421.05標準差6.368.34標準差5.575.40概率P>0.05概率P>0.05
表22.聯(lián)想學習表23.圖象自由回憶(對照組自身對照)(對照組自身對照)No.服用前服用后No.服用前服用后1.12201.24222.21202.16243.38293.26234.24134.16275.26115.26276.31326.18237.26227.24238.26268.20259.25279.181910.243410.231811.322711.262612.282912.262513.243013.222614.142014.221215.222315.223116.02116.161917.202817.202618.312818.181719.221619.243220.212120.1822平均數(shù)23.3523.85平均數(shù)21.2523.35標準差8.086.19標準差3.604.74概率P>0.05概率P>0.05
表24.無意義圖形再認表25.人像特點聯(lián)系回憶(對照組自身對照)(對照組自身對照)No.服用前服用后No.服用前服用后1.25301.28282.23242.24193.0223.38164.29254.20225.20155.26166.21256.16167.15197.008.22188.26269.18229.201810.182610.272211.172311.383212.311812.182613.232213.222214.28614.141215.303115.302816.151516.141617.172517.182618.252318.222219.332219.162020.232420.140平均數(shù)21.6521.7平均數(shù)21.5519.35標準差7.395.58標準差8.768.34概率P>0.05概率P>0.0權(quán)利要求
1.一種口服腦保健營養(yǎng)品的制造方法，其特征在于先從哺乳動物腦中提取以含有神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖脂物質(zhì)，再予以后序加工。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于從哺乳動物腦中提取含有以神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖脂物質(zhì)的步驟依次如下a.清潔選用的動物腦，并瀝干成備用動物腦，b.對備用動物腦加入可飲水和氯仿再加入食用酒精，再予以搗碎，形成腦組織搗碎液，c.對腦組織搗碎液施以攪拌和提取，獲得提取液，d.對提取液予以離心粗分，除去沉淀，取出含鞘糖脂物質(zhì)的上清液，e.對上清液分層提純，去除氯仿層，取出含鞘糖脂物質(zhì)的母液，f.對母液加入消泡劑，進行真空濃縮，去除酒精、部分水份和微量殘留氯仿，制成可食主含神經(jīng)節(jié)苷脂的鞘糖脂溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的后序加工包括先對鞘糖脂溶液進行冷凍干燥，制成粉末，施行配料并包裝，或依次對鞘糖脂溶液予以配料、包裝。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法制成的保健口服營養(yǎng)液，包括食糖、添加劑和可飲水，其特征在于還有含以神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖脂溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述營養(yǎng)液，其特征在于所述的總鞘糖脂物質(zhì)中，其神經(jīng)節(jié)苷脂的含量在70%或70%以上。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述營養(yǎng)液，其特征在于其神經(jīng)節(jié)苷脂含量至少為每毫升0.5毫克。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法制成保健營養(yǎng)品，包括食用淀粉，其特征在于還有含以神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖脂粉末混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法制成的保健營養(yǎng)品的用途，其特征在于增強人腦的學習、記憶功能，促進人腦的正常發(fā)育和腦損傷后的恢復(fù)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于促進增強老年人的記憶功能，防止老年人的記憶力衰退。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于促進胚胎期缺氧后的腦正常發(fā)育和外傷性腦組織損傷的恢復(fù)。
全文摘要
一種腦保健營養(yǎng)品及其制造方法，系從哺乳動物腦中提取含有以神經(jīng)節(jié)苷脂為主的鞘糖脂物質(zhì)和預(yù)以后序加工而成的保健營養(yǎng)品。本發(fā)明的方法，由于M物質(zhì)能被提取于食用酒精中，因而確保無毒并且由于工藝流程簡單、合理、成本低，從而解決了實現(xiàn)制成可食保健營養(yǎng)品的關(guān)鍵問題。本發(fā)明營養(yǎng)品，對促進腦功能的生長、發(fā)育，增強學習、記憶功能，以及促進腦組織損傷后的恢復(fù)均有明顯功效。
文檔編號A61K35/30GK1101554SQ93112578
公開日1995年4月19日 申請日期1993年10月12日 優(yōu)先權(quán)日1993年10月12日
發(fā)明者梅鎮(zhèn)彤, 韓永根, 孫立群 申請人:中國科學院上海生理研究所, 上海徐匯區(qū)聯(lián)合化工研究所