專利名稱：19-降-維生素d化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物活性的維生素D化合物。更具體地，本發(fā)明涉及1α-羥基化維生素D化合物的19-降-類似物及其制備它們的一般方法。
維生素D的1α-羥基化代謝物(最重要的是1α，25-二羥基維生素D3和1α，25-二羥基維生素D2)被稱為動物和人的鈣體內(nèi)平衡的高效調(diào)節(jié)劑，它們在細(xì)胞分化中的活性最近也已被證實(shí)。因此已制備和試驗(yàn)了這些代謝物的許多結(jié)構(gòu)類似物，如具有不同側(cè)鏈結(jié)構(gòu)、不同羥基化形式、或不同立體化學(xué)的化合物。如此類似物的重要例子是1α-羥基維生素D3、1α-羥基維生素D2、1α，25-二羥基維生素D3的各種側(cè)鏈氟代衍生物，以及側(cè)鏈同系類似物。幾種已知的這些化合物在體內(nèi)或體外呈現(xiàn)高效活性，并具有有利的活性特點(diǎn)，因此用于或已提議用于治療各種疾病，如腎病性骨營養(yǎng)不良、抗維生素D佝僂病、骨質(zhì)疏松癥、牛皮癬和某些惡性腫瘤。
在此之前未知的一類1α-羥基化維生素D化合物是19-降-類似物，即所有維生素D系列所特有的環(huán)A的環(huán)外亞甲基(碳19)被去除，并用兩個(gè)氫原子取代的化合物。這些新類似物的結(jié)構(gòu)特征通過如下所示的通式Ⅰ表示
其中，X1和X2各選自氫和?；?，R表示維生素D型化合物的已知的任何特有側(cè)鏈。因此R可以是烷基、氫、羥烷基或氟代烷基，或R可以表示如下的側(cè)鏈
其中，R1表示氫、羥基或O-?；琑2和R3各選自烷基、羥烷基和氟代烷基，或它們一起表示基團(tuán)--(CH2)m--，其中m是2至5的整數(shù)，R4選自氫、羥基、氟、O-酰基、烷基、羥烷基和氟代烷基，R5選自氫、氟、烷基、羥烷基和氟代烷基，或R4和R5一起表示雙鍵連接的氧，R6和R7各選自氫、羥基、O-酰基、氟和烷基，或R6和R7一起表示一個(gè)碳-碳雙鍵，其中n是1至5的整數(shù)，側(cè)鏈的20、22或23位的任一位上的碳原子可被O、S或N原子所取代。
側(cè)鏈的特別重要例子為用如下的式(a)、(b)、(c)、(d)和(e)表示的結(jié)構(gòu)，即存在于25-羥基維生素D3(a);維生素D3(b);25-羥基維生素D2(c);維生素D2(d);和25-羥基維生素D2的C-24表異構(gòu)物(e)中的側(cè)鏈。
在本發(fā)明書及其諸權(quán)利要求中，術(shù)語“烷基”意指所有異構(gòu)形式的1至5個(gè)碳原子的烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、戊基等，術(shù)語“羥烷基“和“氟代烷基”分別指被一個(gè)或多個(gè)羥基或氟取代的烷基，術(shù)語“?；币鉃?至5個(gè)碳原子的脂族酰基，如甲酰基、乙酰基、丙?；?，或芳族?；绫郊柞；?、硝基苯甲?；螓u代苯甲?；?，術(shù)語“芳基”意指苯基-，或烷基-、硝基-或鹵素取代的苯基。
用一般的通用方法，以已知的維生素D化合物為起始原料便能制得具有上述基本結(jié)構(gòu)的1α-羥基-19-降-維生素D化合物。適宜的起始原料如一般結(jié)構(gòu)式Ⅱ的維生素D化合物
其中R為如上所定義的任一側(cè)鏈。作為起始原料的這些維生素D是一些已知化合物或是一些可用已知方法制備的化合物。
使用Deluca等人的方法(美國專利4，195，027)，將起始原料轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的1α-羥基-3，5-環(huán)維生素D衍生物，它具有如下一般結(jié)構(gòu)式Ⅲ，其中X表示氫，Q表示烷基，優(yōu)選甲基
在接著的步驟中，為防止1α-羥基的不需要的反應(yīng)，采用標(biāo)準(zhǔn)的?；椒?，如于室溫或略升溫(30-70℃)下用溶于吡啶中的酰酐或酰基鹵進(jìn)行處理，將羥基轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的?；苌?，即如上所述的化合物Ⅲ，其中X表示?；．?dāng)然這里說明了本發(fā)明的方法采用了?；Ｗo(hù)羥基官能團(tuán)，也可采用另外的標(biāo)準(zhǔn)的羥基保護(hù)基團(tuán)，如烷基甲硅烷基或烷氧基烷基。這樣的保護(hù)基團(tuán)在本領(lǐng)域內(nèi)是眾所周知的(如三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、叔-丁基二甲基甲硅烷基、或四氫呋喃基、甲氧基甲基)，它們的使用被認(rèn)為是本發(fā)明方法范圍內(nèi)實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)中的途徑的變化。
然后將上面得到的衍生物與四氧化鋨反應(yīng)制得10，19-二羥基類似物Ⅳ(其中X為?；?，用偏過碘酸鈉或類似的連二醇裂解劑(如四乙酸鉛)將此羥基類似物進(jìn)行二醇裂解得到10-氧代-中間體，它具有如下結(jié)構(gòu)式Ⅴ(其中X為?；?
按照Paaren等人介紹的方法〔J.Org.Chem.48，3819(1983)〕進(jìn)行該兩連續(xù)步驟。如果側(cè)鏈單元R帶有連二醇(如24、25-二羥基-或25，26-二羥基等)，當(dāng)然，在高碘酸鹽分裂反應(yīng)之前它們也需予以保護(hù)，如通過?；⒓坠柰榛蜃鳛楫悂啽苌?。
在大多數(shù)情況下，如上所述的1α-羥基基團(tuán)的酰化也將同時(shí)引起側(cè)鏈羥基官能團(tuán)的?；?dāng)然可適當(dāng)調(diào)節(jié)?；瘲l件(如升溫、采用較長的反應(yīng)時(shí)間)以確保完全保護(hù)側(cè)鏈連二醇基團(tuán)。
本方法的下一步包括將10-氧代-基團(tuán)還原為相應(yīng)的10-醇，它具有如下表示的結(jié)構(gòu)式Ⅵ(其中X為?；?，Y為羥基)，當(dāng)X是?；鶗r(shí)，該還原可方便地在大約0℃至大約室溫下，于有機(jī)溶劑中，用NaBH4或等當(dāng)量的氫化物還原劑有選擇性地將羰基還原而使酯官能團(tuán)不裂開下進(jìn)行。顯然，當(dāng)X是一個(gè)對于還原劑穩(wěn)定的羥基保護(hù)基團(tuán)時(shí)，也可以使用其他任何氫化物還原劑(如LiAlH4，或類似的試劑)。
在適宜的溶劑(如吡啶)中用烷基-或芳基磺酰鹵(如甲烷磺酰氯)處理10-羥基中間體得到相應(yīng)的10-O-烷基-或芳基磺酰基衍生物(具有上述結(jié)構(gòu)式Ⅵ的化合物，其中Y是烷基-SO2O-，或芳基-SO2O-)，然后在醚溶劑中，于0℃至該溶劑的沸騰溫度下用氫化鋁鋰或已知的類似物氫化烷基鋁鋰試劑直接還原此磺酸酯中間體以置換磺酸酯基團(tuán)得到10-脫氧衍生物，用上述結(jié)構(gòu)式Ⅵ表示，其中X和Y均為氫。如上述結(jié)構(gòu)式所示，在此還原步驟中，也可使前體化合物Ⅴ的1-O-酰基官能團(tuán)裂開產(chǎn)生游離的1α-羥基官能團(tuán)，當(dāng)然，正如本領(lǐng)域中所熟知的那樣，側(cè)鏈上的O-酰基保護(hù)基團(tuán)也可還原為相應(yīng)的游離醇官能團(tuán)。如果需要的話，C-1的羥基(或側(cè)鏈上的羥基)通過?；蚣坠柰榛虺擅言儆枰员Ｗo(hù)而得到相應(yīng)的?；⑼榛坠柰榛蛲檠趸榛苌?，但這樣的保護(hù)是不必要的。在此還原步驟中，可保留另外的羥基保護(hù)基團(tuán)，如烷基甲硅烷基或烷氧基烷基，但如需要的話，可用本領(lǐng)域中已知的標(biāo)準(zhǔn)方法在本方法的此步驟或以后的步驟中將其除去。
采用Deluca等人的條件(美國專利4，195，027和4，260，549)，在低分子量有機(jī)酸的存在下，將上述1α-羥基-10-脫氧環(huán)維生素D中間體加溶劑分解。當(dāng)在乙酸中進(jìn)行溶劑分解時(shí)，得到1α-羥基-19-降-維生素D3-乙酸酯和1α-羥基-19-降-維生素D1-乙酸酯(如下的化合物Ⅶ和Ⅷ)的混合物，當(dāng)用其他酸進(jìn)行溶劑分解時(shí)，得到類似的1-和3-?；a(chǎn)物。
然后在標(biāo)準(zhǔn)條件下直接將此混合物進(jìn)行堿性水解得到所需的上述結(jié)構(gòu)式Ⅰ的1α-羥基-19-降-維生素D化合物(其中X1和X2均為氫)。此外，也可將上述的單乙酸酯混合物進(jìn)行分離(如通過高壓液相色譜)，然后得到的1-乙酸酯和3-乙酸酯異構(gòu)體分別進(jìn)行水解，由兩者得到同一最終產(chǎn)物，即結(jié)構(gòu)式Ⅰ的1α-羥基-19-降-維生素D化合物。當(dāng)然也可按標(biāo)準(zhǔn)的方法，用任何所需的?；?，將分離出的結(jié)構(gòu)式Ⅶ或Ⅷ的單乙酸酯或游離的1，3-二羥基化合物再酰化，便得到上述結(jié)構(gòu)式Ⅰ的產(chǎn)物，其中X1和X2表示相同或不同的?；?br> 1α-羥基-19-降-維生素D化合物的生物活性本發(fā)明的新化合物有出乎意料的生物活性型式，即在促進(jìn)惡性細(xì)胞分化時(shí)表現(xiàn)出高效性，在鈣化骨組織中少或沒有活性。分別概括于表1和2中的由1α，25-二羥基-19-降-維生素D3(化合物1α)所得的生物測定結(jié)果說明了這一點(diǎn)。表1列出了已知活性代謝物1α，25-二羥基維生素D3和19-降類似物(Ⅰa)于培養(yǎng)物中將人白血病細(xì)胞(HL-60細(xì)胞)誘導(dǎo)分化為正常細(xì)胞(單核細(xì)胞)的活性的比較。采用三種標(biāo)準(zhǔn)的分化試驗(yàn)測定分化活性，在表1中縮寫為NBT(氮藍(lán)四唑還原)、NSE(無特異酯酶活性)和PHAGO(吞噬作用活性)。根據(jù)已知的方法，如Deluca等人(美國專利4，717，721)和Ostrem等人，(J.Biol.Chem、262，14164，1987)所給出的方法，進(jìn)行測定。對于每種測定，根據(jù)試驗(yàn)化合物的給定濃度，用已分化為正常細(xì)胞的HL-60細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)來表示試驗(yàn)化合物的分化活性。
概括于表1中的結(jié)果清楚地表明在促進(jìn)白血病細(xì)胞分化中新類似物1α，25-二羥基-19-降-維生素D3(Ⅰa)和1α，25-二羥基維生素D3一樣有效。1α，25-二羥基維生素D3濃度為1×10-7摩爾時(shí)在上述三種測定中均使接近90%的白血病細(xì)胞誘導(dǎo)分化，用19-降-類似物(Ⅰa)也達(dá)到同樣的分化度(即90、84和90%)。
表1HL-60細(xì)胞的分化作用1α，25-二羥基維生%被分化的細(xì)胞素D3(摩爾/升) (平均值±SEM)NBTNSEPHAGO1×10-786±2 89±1 87±31×10-860±2 60±3 64±21×10-933±2 31±2 34±11α，25-二羥基-19-降-維生素D3(Ⅰa)(摩爾/升)2×10-794±2 95±3 94±21×10-790±4 84±4 90±45×10-872±3 73±3 74±31×10-861±3 60±3 56±11×10-932±1 31±1 33±1
與前面的結(jié)果相反，新的19-降類似物(Ⅰa)在測量骨的鈣化的測定中不表現(xiàn)活性，而這種骨的鈣化活性是由維生素D化合物所激發(fā)的典型應(yīng)答。概括于表2中的有關(guān)數(shù)據(jù)表示1α，25-二羥基維生素D3和1α，25-二羥基-19-降-維生素D3(Ⅰa)化合物對鼠的骨鈣化活性對比的測定結(jié)果。此測定是根據(jù)Tanaka等人，Endocrinology92，417(1973)描述的方法進(jìn)行的。
列于表2中的結(jié)果表明1α，25-二羥基維生素D3具有預(yù)料的骨鈣化活性，其結(jié)果通過在各種劑量水平下百分骨灰和總灰量的增加來反映。相反，同維生素D-缺乏(-D)的對照組相比，19-降類似物Ⅰa在全部三種劑量水平下均未表現(xiàn)出活性。
表2鈣化活性化合物給藥量＊%灰總灰(mg)(微微摩爾/(平均值±SEM)(平均值±SEM)天/7天)-D(對照)019±0.823±1.21α，25-二羥32.523±0.534±1.6基維生素D365.0 26±0.7 36±1.1325.028±0.940±1.91α，25-二羥32.522±0.928±1.6基-19-降-65.019±1.528±3.4維生素D3(Ⅰa) 325.0 19±1.2 30±2.4
＊每一測定組包括6只鼠，接受所指定的試驗(yàn)化合物的量，以每天腹膜腔注射給藥，七天為一周期因此，新的19-降類似物表明具有選擇活性特性，它將在誘導(dǎo)惡性細(xì)胞分化中的高效性與非常低的或無骨鈣化活性結(jié)合在一起。因此這種新的結(jié)構(gòu)類型的化合物可用作治療惡性腫瘤的治療劑。由于維生素D化合物對于皮膚角化細(xì)胞的分化活性(Smith等人，J.Invest.Dermatol.86，709，1986;Smith等人，J.Am.Acad.Dermatol.19，516，1988)被認(rèn)為是成功治療牛皮癬的表征(Takamoto等，Calc.TissueInt.39，360，1986)，所以證明這類化合物可用于治療以使未分化的皮膚細(xì)胞增生為特征的這種和其他的皮膚病。這些化合物也可用于抑制甲狀旁腺組織，如在腎病中發(fā)現(xiàn)的繼發(fā)性甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)病例(Slatopolsky等人，J.Clin.Invest.74，2136，1984)。
為治療的目的，本發(fā)明的新化合物可用本領(lǐng)域內(nèi)已知的常規(guī)方法進(jìn)行配制，如用無毒溶劑配制成溶液，或用適宜的無毒溶劑或載體制成乳液、懸浮液或分散劑，或含固態(tài)載體的丸、片或膠囊。對于表面的應(yīng)用，最好將化合物配制成乳膏或軟膏或適宜于表面應(yīng)用的類似的載體。任何這類制劑也可含有藥物上可接受的并且無毒的其他賦形劑，如穩(wěn)定劑、抗氧化劑、粘合劑、著色劑或乳化劑或改味劑。
便于這些化合物給藥的方式可以是注射、或適宜的無菌溶液的靜脈輸注，或經(jīng)消化道口服、或以軟膏、洗液或適宜于透過皮膚斑的形式的表面給藥。為了治療惡性腫瘤疾病，給受治療者服用本發(fā)明化合物19-降-維生素D的劑量應(yīng)足以抑制惡性細(xì)胞的增生并能誘導(dǎo)它們分化為正常的單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞。同樣，為治療牛皮癬，本發(fā)明的化合物經(jīng)口服或表面給藥的量應(yīng)足以抑制未被分化的角化細(xì)胞的增生，在治療甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)時(shí)，服用的化合物的劑量應(yīng)足以抑制甲狀旁腺的活性，以使甲狀旁腺的激素水平達(dá)到正常的范圍。適宜劑量為每天1-500μg化合物，正如本領(lǐng)域內(nèi)眾所周知的那樣，應(yīng)根據(jù)被治療的疾病，其嚴(yán)重性、治療對象的反應(yīng)或病情對其加以調(diào)整。
通過下面的說明性實(shí)施例對本發(fā)明作更具體的說明，在這些實(shí)施例中，用羅馬數(shù)字和字母(即Ⅰa，Ⅰb，…，Ⅱa，Ⅱb，…等)指出的具體產(chǎn)物系指前面敘述中定義的具體結(jié)構(gòu)和側(cè)鏈的結(jié)合體。
實(shí)施例11α，25-二羥基-19-降-維生素D3(Ⅰa)的制備(a).1α，25-二羥基-3，5-環(huán)維生素D31-乙酸酯，6-甲基醚以25-羥基維生素D3(Ⅱa)為起始原料，按照已公開的方法(Deluca等人，美國專利4，195，027和Paaren等人，J.Org.Chem.45，3252(1980))制備已知的1α，25-二羥基-3，5-環(huán)維生素D3衍生物Ⅲa(X＝H)，然后在標(biāo)準(zhǔn)條件下，把此產(chǎn)物乙酰化得到相應(yīng)的1-乙酸酯衍生物Ⅲa(X＝Ac)。
(b).10，19-二氫-1α，10，19，25-四羥基-3，5-環(huán)維生素D31-乙酸酯，6-甲基醚(Ⅳa)按照Paaren等人(J.Org.Chem，48，3819(1983))描述的一般方法，用在吡啶中的略過量摩爾的四氧化鋨處理中間體Ⅲa(X＝Ac)得到10，19-二羥基化的衍生物Ⅳa。質(zhì)譜m/z(相對強(qiáng)度)，506(M+，1)，488(2)，474(40)，425(45)，396(15)，285(5)，229(30)，133(45)，59(80)，43(100)。
1H NMR(CDCl3)g 0.52(3H，s，18-CH3)，0.58(1H，m，3-H)，0.93(3H，d，J＝6.1Hz，21-CH3)，1.22(6H，s，26-CH3和27-CH3)，2.10(3H，s，COCH3)，3.25(3H，s，6-OCH3)，3.63(2H，m，19-CH2)，4.60(1H，d，J＝9.2Hz，6-H)，4.63(1H，dd，1β-H)，4.78(1H，d，J＝9.2Hz，7-H)。
(c)1α，25-二羥基-10-氧代-3，5-環(huán)-19-降-維生素D31-乙酸酯，6-甲基醚(Ⅴa)按照Paaren等人給出的方法(J.Org.Chem.48，3819，1983)用偏高碘酸鈉溶液處理10，19-二羥基化中間體Ⅳa得到10-氧代-環(huán)維生素D衍生物(Ⅴa，X＝Ac)。質(zhì)譜m/z(相對強(qiáng)度)442(M+-MeOH)(18)，424(8)，382(15)，364(35)，253(55)，225(25)，197(53)，155(85)，137(100)。1H NMR(CDCl3)δ0.58(3H，s，18-CH3)，0.93(3H，d，J＝6.6Hz，21-CH3)，1.22(6H，s，26-CH3和27-CH3)，2.15(s，3-OCOCH3)，3.30(3H，s，6-OCH3)，4.61(1H，d，J＝9.1Hz，6-H)，4.71(1H，d，J＝9.6Hz，7-H)，5.18(1H，m，1β-H)。
也已發(fā)現(xiàn)此二醇分裂反應(yīng)無需升溫，實(shí)際上該反應(yīng)一般最好在接近室溫下進(jìn)行。
(d).1α-乙酸基-10，25-二羥基-3，5-環(huán)-19-降-維生素D36-甲基醚(Ⅵa.，X＝Ac，Y＝OH)將10-氧代衍生物Ⅴa(X＝Ac)(2.2mg，4.6umol)溶解在0.5ml乙醇中，向此溶液中加入50ul(5.3umol)NaBH4溶液(由20mg NaBH4，4.5ml水和0.5mol0.01N NaOH溶液制備的)，在0℃下將該混合物攪拌約1.5小時(shí)，然后保持在0℃16小時(shí)。向此混合物中加入乙醚，有機(jī)相經(jīng)鹽水洗滌，MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)。粗品用硅膠色譜柱(15×1cm)純化，用乙酸乙酯和己烷的混合物洗脫此醇Ⅵa(X＝Ac，Y＝OH)得到1.4mg(3u mol)產(chǎn)物。質(zhì)譜m/z(相對強(qiáng)度)476(M+)(1)，444(85)，426(18)，384(30)，366(48)，351(21)，255(35)，237(48)，199(100)，139(51)，59(58)。
(e).1α，25-二羥基-19-降-維生素D3(Ⅰa，X1＝X2＝H)將10-醇(Ⅵa，X＝Ac，Y＝OH)(1.4mg)溶于100μl無水CH2Cl2和10μl(14μmol)三乙胺溶液〔由12mg(16μl)三乙胺溶于100μl無水CH2Cl2所制備〕中，接著在0℃下加入7μl(5.6μmol)甲磺酰氯溶液(9mg甲磺酰氯(6.1μl)溶于100μl無水CH2Cl2中)。在0℃下將該混合物攪拌2小時(shí)，用氬氣流除去溶劑，將殘余物(含化合物Ⅵa，X＝Ac，Y＝CH3SO2O-)溶于0.5ml無水四氫呋喃中。0℃下加入5mg LiAlH4并將混合物在0℃下保持16小時(shí)。過量的LiAlH4用濕乙醚分解，乙醚相用水洗滌，MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到19-降產(chǎn)物Ⅵa(X＝Y(jié)＝H)。
將該產(chǎn)物溶于0.5ml乙酸中并在55℃下攪拌20分鐘，冷卻此混合物，加入冰水，用乙醚萃取。乙醚相用冷的10%碳酸氫鈉溶液，鹽水洗滌，MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到預(yù)期的3-乙酸基-1α-羥基-和1α-乙酸基-3-羥基異構(gòu)體混合物，通過HPLC(Zorbax Sil柱，6.4×25cm，2-丙醇的己烷溶液)將其分離并純化，得到化合物Ⅶa和Ⅷa各約70μg。UV(EtOH中)λmax 242.5(OD 0.72)，251.5(OD 0.86)，260(OD 0.57)。
用同樣的方法，將19-降-1，25-二羥基維生素D3乙酸酯Ⅶa和Ⅷa進(jìn)行水解，將每一種單乙酸酯溶于0.5ml乙醚中，并加入0.5ml0.1N的KOH甲醇溶液。在氬氣氛下將混合物攪拌2小時(shí)，再加入乙醚，有機(jī)相用鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，將殘余物溶于2-丙醇和己烷(1∶1)的混合物中，通過Sep Pak柱，并用同樣的溶劑洗滌。蒸去溶劑，殘余物用HPLC(Zorbax Sil，6.4×25cm，10%2-丙醇的己烷溶液)純化。Ⅶa和Ⅷa的水解產(chǎn)物是相同的，得到66μgⅠa(X1＝X2＝H)。質(zhì)譜(m/z相對強(qiáng)度)404(M+)(100)，386(41)，371(20)，275(53)，245(51)，180(43)，135(72)，133(72)，95(82)，59(18)，C26H44O3的精確計(jì)算的分子量為404.3290，實(shí)驗(yàn)值為404.3272，1H NMR(CDCl3)δ0.52(3H，s，18-CH3)，0.92(3H，d，J＝6.9Hz，21-CH3)，1.21(6H，s，26-CH3和27-CH3)，4.02(1H，m，3α-H)，4.06(1H，m，1β-H)5.83(1H，d，J＝11.6Hz，7-H)，6.29(1H，d，J＝10.7Hz，6-H)，UV(EtOH中)，λmax243(OD 0.725)，251.5(OD 0.823)，261(OD 0.598)。
實(shí)施例21α-羥基-19-降-維生素D3(Ⅰb)的制備(a).以維生素D3(Ⅱb)為起始原料，采用實(shí)施例1a的條件，制得已知的1α-羥基-3，5-環(huán)維生素D31-乙酸酯，6-甲基醚化合物Ⅲb(X＝Ac)。
(b).使上面實(shí)施例2a中獲得的中間體Ⅲb(X＝Ac)經(jīng)過實(shí)施例1b的條件的處理，得到10，19-二氫-1α，10，19，-三羥基-3，5-環(huán)維生素D31-乙酸酯，6-甲基醚Ⅳb(X＝Ac)。
(c).按照上述實(shí)施例1c的方法，用偏高碘酸鈉處理中間體Ⅳb(X＝Ac)，得到1α-羥基-10-氧代-3，5-環(huán)-19-降-維生素D31-乙酸酯，6-甲基醚Ⅴb(X＝Ac)。
(d).在上述實(shí)施例1d的條件下，將10-氧代-中間體Ⅴb(X＝Ac)還原，得到1α-乙酸基-10-羥基-3，5-環(huán)-19-降-維生素D36-甲基醚Ⅵb(X＝Ac，Y＝OH)。
(e).按照上述實(shí)施例1e中所給出的方法處理中間體Ⅵb(X＝Ac，Y＝OH)，得到1α-羥基-19-降-維生素D3(Ⅰb，X1＝X2＝H)。
實(shí)施例31α，25-二羥基-19-降-維生素D3的制備(a).以25-羥基維生素D2(Ⅱc)為起始原料。在類似于實(shí)施例1a的實(shí)驗(yàn)條件下，制得1α，25-二羥基-3，5-環(huán)維生素D21-乙酸酯，6-甲基醚，化合物Ⅲc(X＝Ac)。
(b).使上面實(shí)施例3a中得到的中間體Ⅲc(X＝Ac)經(jīng)過實(shí)施例1b的反應(yīng)條件的處理，得到10，19-二氫-1α，10，19，25-四羥基-3，5-環(huán)維生素D21-乙酸酯，6-甲基醚，Ⅳc(X＝Ac)。
(c).按照上述實(shí)施例1c的一般方法，用偏高碘酸鈉處理中間體Ⅳc(X＝Ac)，得到1α，25-二羥基-10-氧代-3，5-環(huán)-19-降-維生素D21-乙酸酯，6-甲基醚Ⅴc(X＝Ac)。
(d).在類似于上述實(shí)施例1d的條件下，將10-氧代-中間體Ⅴc(X＝Ac)還原，得到1α-乙酸基-10，25-二羥基-3，5-環(huán)-19-降-維生素D2，6-甲基醚Ⅵc(X＝Ac，Y＝OH)。
(e)按照上述實(shí)施例1e的操作步驟處理中間體Ⅵc(X＝Ac，Y＝OH)，得到1α，25-二羥基-19-降-維生素D2(ⅠcX1＝X2＝H)。
實(shí)施例41α-羥基-19-降-維生素D2的制備
(a).以維生素D2(Ⅱd)為起始原料，采用實(shí)施例1a的條件，得到已知的1α-羥基-3，5-環(huán)維生素D21-乙酸酯，6-甲基醚，化合物Ⅲd(X＝Ac)。
(b).使上面實(shí)施例4a中得到的中間體Ⅲd(X＝Ac)經(jīng)過實(shí)施例1b的條件的處理，得到10，19-二氫-1α，10，19，-三羥基-3，5-環(huán)維生素D21-乙酸酯，6-甲基醚，Ⅳd(X＝Ac)。
(c).按照上述實(shí)施例1c的方法，用偏高碘酸鈉處理中間體Ⅳb(X＝Ac)，得到1α-羥基-10-氧代-3，5-環(huán)-19-降-維生素D21-乙酸酯，6-甲基醚，Ⅴd(X＝Ac)。
(d).在上述實(shí)施例1d的條件下，將10-氧代-中間體Ⅴd(X＝Ac)還原，得到1α-乙酸基-10-羥基-3，5-環(huán)-19-降-維生素D26-甲基醚，Ⅵd(X＝Ac，Y＝OH)。
(e)按照上述實(shí)施例1e中所給出的方法處理中間體Ⅵd(X＝Ac，Y＝OH)，得到1α-羥基-19-降-維生素D2(Ⅰd，X1＝X2＝H)。
權(quán)利要求
1.具有如下通式的化合物
其中，X1和X2各選自氫、酰基、烷基甲硅烷基和烷氧基烷基，R選自烷基、氫、羥烷基、氟代烷基，和具有如下通式的側(cè)鏈
其中，R1表示氫、羥基或O-酰基，R2和R3各選自烷基、羥烷基和氟代烷基，或它們一起表示基團(tuán)--(CH2)m--其中m是2至5的一個(gè)整數(shù)，R4選自氫、羥基、氟、O-酰基、烷基、羥烷基和氟代烷基，R5選自氫、氟、烷基、羥烷基和氟代烷基，或R4和R5一起表示雙鍵連接的氧，R6和R7各選自氫、羥基、O-酰基、氟和烷基，或R6和R7一起形成碳-碳雙鍵，其中n為1至5的一個(gè)整數(shù)，其中側(cè)鏈的20、22或23位中的任一位上的碳原子可被O、S或N原子所取代。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X1和X2表示氫，以及其中R1是羥基，R2和R3均選自甲基、三氟甲基、乙基和丙基，R6和R7均為氫，或一起形成碳-碳雙鍵，R4和R5是氫，n是整數(shù)1，2或3。
3.1α，25-二羥基-19-降-維生素D3。
4.1α-羥基-19-降-維生素D3。
5.1α，25-二羥基-19-降-維生素D2。
6.1α-羥基-19-降-維生素D2。
7.1α-羥基-19-降-24表-維生素D2。
8.1α，25-二羥基-19-降-24表-維生素D2。
9.具有如下通式的化合物
其中，R表示權(quán)利要求1中所定義的側(cè)鏈，Q表示烷基，X選自氫、?；?、烷基甲硅烷基和烷氧基烷基。
10.具有如下通式的化合物
其中，R為權(quán)利要求1中所定義的側(cè)鏈，Q表示烷基，X選自氫、酰基、烷基甲硅烷基和烷氧基烷基。
11.具有如下結(jié)構(gòu)的化合物
其中，R為權(quán)利要求1中所定義的側(cè)鏈，Q表示烷基，X選自氫、酰基、烷基甲硅烷基和烷氧基烷基，Y選自羥基、氫和被保護(hù)的羥基，其保護(hù)基團(tuán)是?；?、烷基甲硅烷基或烷氧基烷基。
12.一種誘導(dǎo)惡性細(xì)胞的細(xì)胞分化的方法，該方法包括將所述的細(xì)胞露置于其量足以誘導(dǎo)分化的至少一種權(quán)利要求1的化合物中。
13.權(quán)利要求12的方法，其中細(xì)胞為白血病細(xì)胞。
14.權(quán)利要求12的方法，其中將處于藥物上可接受的載體中的化合物經(jīng)口服給藥。
15.權(quán)利要求12的方法，其中將化合物經(jīng)腸胃外給藥。
16.權(quán)利要求12的方法，其中將化合物經(jīng)表面給藥。
17.一種治療哺乳動物增生的皮膚病的方法，該方法包括給所述的哺乳動物服用其量能有效地減輕所述疾病的至少一種權(quán)利要求1的化合物。
18.權(quán)利要求17的方法，其中疾病為牛皮癬。
19.權(quán)利要求17的方法，其中將化合物經(jīng)口服給藥。
20.權(quán)利要求17的方法，其中將化合物經(jīng)腸胃外給藥。
21.權(quán)利要求17的方法，其中將處于藥物上可接受的載體中的化合物經(jīng)表面給藥。
22.一種治療原發(fā)和繼發(fā)性甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)病的方法，該方法包括給患有這類疾病的病人服用其量足以抑制甲狀旁腺活性的至少一種權(quán)利要求1的化合物而抑制甲狀旁腺活性。
23.一種藥物組合物，它包括至少一種權(quán)利要求1的化合物以及藥物上可接受的賦形劑。
24.根據(jù)權(quán)利要求23的藥物組合物，其中化合物處于哺乳動物可食入并對其無毒的固態(tài)或液態(tài)載體中。
25.根據(jù)權(quán)利要求23的藥物組合物，其中化合物是1α，25-二羥基-19-降-維生素D3。
26.根據(jù)權(quán)利要求23的藥物組合物，其中化合物是1α-羥基-19-降-維生素D3。
27.根據(jù)權(quán)利要求23的藥物組合物，其中化合物是1α，25-二羥基-19-降-維生素D2。
28.根據(jù)權(quán)利要求23的藥物組合物，其中化合物是1α-羥基-19-降-維生素D2。
29.一種治療腫瘤病的方法，該方法包括給患有腫瘤病的病人服用至少一種權(quán)利要求1的化合物，其量應(yīng)足以誘導(dǎo)腫瘤病特有的惡性細(xì)胞分化為非惡性巨噬細(xì)胞。
30.權(quán)利要求29的方法，其中化合物是1α，25-二羥基-19-降-維生素D3。
31.權(quán)利要求29的方法，其中將化合物以單位劑量型經(jīng)口服給藥，化合物處于病人可食入并對病人無毒的固態(tài)或液態(tài)載體中。
32.權(quán)利要求31的方法，其中劑量型含約0.5μg至約50μg。
33.權(quán)利要求29的方法，其中服用的化合物的量每天約1μg至約500μg。
34.權(quán)利要求29的方法，其中將化合物經(jīng)表面給藥。
35.權(quán)利要求29的方法，其中將化合物經(jīng)腸胃外給藥。
全文摘要
本發(fā)明提供了一類新的維生素D的相關(guān)化合物，即1α-羥基-19-降-維生素D類似物，及其化學(xué)合成的一般方法。此類化合物具有抑制未被分化的細(xì)胞(包括惡性腫瘤細(xì)胞)的增生及誘導(dǎo)其分化的顯著的活性，因此提供了新的治療劑用于治療惡性腫瘤和其他以未被分化的細(xì)胞的增生為特征的的疾病。本發(fā)明還提供了治療用的制劑和治療方法。
文檔編號A61K31/59GK1046155SQ9010177
公開日1990年10月17日 申請日期1990年3月9日 優(yōu)先權(quán)日1989年3月9日
發(fā)明者赫克托·F·迪盧卡, 海因里希·K·施諾斯, 卡托·L·帕爾曼, 拉法爾·R·西辛斯基 申請人:威斯康星舊生研究基金會