專利名稱：:具有鎮(zhèn)痛作用的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種具有鎮(zhèn)痛作用的藥物，具體講是一種以由烏頭堿類化合物中的附子靈為有效藥物成分制備而成的鎮(zhèn)痛藥物。技術(shù)背景附子為毛莨科植物烏頭(Aconit咖carmicgaeliDebx.)的側(cè)生子根，為傳統(tǒng)中藥中的大熱之藥，是古代溫劑中常用的回陽(yáng)救逆的藥物。由于其具有明顯的較強(qiáng)毒性，且用制劑量與中毒劑量接近，臨床上出現(xiàn)中毒和死亡現(xiàn)象屢有報(bào)道，因此已有大量有關(guān)對(duì)其生藥進(jìn)行炮制、方劑、化學(xué)、藥理、毒理和臨床等方面研究工作的報(bào)道，以期減少其毒性，增加療效，并不斷尋找其中具有藥效活性的高效低毒性化合物成分。張迪華等在《中草藥》1982:73(11)，1_4中曾報(bào)道，從白附片分離出包括下烏頭堿、中烏頭堿和苯甲酰中烏頭原堿等生物堿在內(nèi)的八個(gè)成分，并證明其可具有抗炎和抗心衰作用。關(guān)于烏頭類成分在鎮(zhèn)痛藥方面的應(yīng)用，張勇忠等人在《中草藥》2002:33(2)，106-109中報(bào)道了對(duì)由元胡、烏頭等4味中藥組成的"鎮(zhèn)痛湯"在治療癌癥中晚期疼痛方面的研究，證明可具有較好療效。對(duì)于單一附子靈成分的進(jìn)行提取、分離、含量和結(jié)構(gòu)鑒定等方面的研究也有報(bào)道，如陳洪超等在《天然產(chǎn)物研究與開發(fā)》(2003:15(4))關(guān)于"中壩鵝掌葉附子中的生物堿成分"中報(bào)道曾從中壩鵝掌葉附子的塊根中分離得到二萜類生物堿成分的附子靈fuziline，并報(bào)道了附子靈的理化特征。歐明等編《簡(jiǎn)明中藥成分手冊(cè)》，中國(guó)醫(yī)藥科技出版社P203-P204報(bào)道了藥材附子的有效成分及其它成分，其中有效成分為烏頭堿，同時(shí)還分離出下烏頭堿、附子靈等成分，目前尚無(wú)附子靈藥效、毒性的相關(guān)報(bào)道，也沒(méi)有將附子靈與其它烏頭類生物堿配伍制備成制劑的相關(guān)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容根據(jù)上述情況，本發(fā)明將提供一種以由附子植物提取分離的烏頭堿類化合物中的附子靈作為有效藥物成分的鎮(zhèn)痛藥物，能達(dá)到高效、低毒的滿意鎮(zhèn)痛效果。在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明還提供以附子靈與一個(gè)或多個(gè)其它形式的烏頭類成分配伍共同作為有效藥物成分的鎮(zhèn)痛藥物。本發(fā)明所說(shuō)的具有鎮(zhèn)痛作用的藥物，是以烏頭類成分為有效藥物成分，與藥物可以接受的輔料(或輔助成分)共同組成，其中有效藥物成分至少含有式(I)結(jié)構(gòu)的附子靈化合物。OCH.CI)確認(rèn)本該式(I)有效藥物成分可以按照目前已多有文獻(xiàn)報(bào)道的方法由藥用植物附子中提取、分離得到。在此基礎(chǔ)上，所說(shuō)的有效藥物成分還可以進(jìn)一步由上述的附子靈化合物與下烏頭堿(Hypaconitine)、中烏頭堿(Mesaconitine)禾口苯甲酉先中烏頭原堿(Benzoylmesaconine)等其它形式烏頭類生物堿成分的至少一種配伍共同組成。其中下烏頭堿、中烏頭堿和苯甲酰中烏頭原堿的結(jié)構(gòu)分別如式(II)、式(III)和式(IV)所示。這些成分同樣也可以按照目前已多有文獻(xiàn)報(bào)道的方法由藥用植物附子中提取、分離得到。(n)(m)(IV)本發(fā)明提供的該具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，是由下述重量配比的化合物制備而成的藥物制劑附子靈200-600份、苯甲酰中烏頭原堿0-600份、中烏頭堿0-3份、下烏頭堿0-6份。進(jìn)一步地附子靈200-600份、苯甲酰中烏頭原堿200-600份、中烏頭堿1_3份、下烏頭堿2-6份。更進(jìn)一步地優(yōu)選附子靈200份、苯甲酰中烏頭原堿200份、中烏頭堿3份、下烏頭堿6份?；蛴上率鲋亓颗浔鹊幕衔镏苽涠傻乃幬镏苿└阶屿`200-600份、中烏頭堿1-3份。優(yōu)選附子靈600份、中烏頭堿1份。5[0015]或由下述重量配比的化合物制備而成的藥物制劑附子靈100-300份、下烏頭堿1-3份。優(yōu)選附子靈100份、下烏頭堿3份?；蛴上率鲋亓颗浔鹊幕衔镏苽涠傻乃幬镏苿└阶屿`25-75份、苯甲酰中烏頭原堿25-75份。優(yōu)選附子靈25份、苯甲酰中烏頭原堿75份。所述的藥物制劑是口服制劑、外用制劑、注射劑。其中，所述的口服制劑是口服液、片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸。所述的外用制劑是藥用敷料、軟膏、栓劑、洗劑。以上述的單一附子靈化合物作為有效藥物成分，或是以附子靈與下烏頭堿、中烏頭堿和苯甲酰中烏頭原堿中的至少一種配伍共同作為有效約物成分，與藥物中允許使用和可以接受的其他輔料和/或添加成分混合，并按相應(yīng)的制藥方法加工，均可以制備成可供使用的相應(yīng)鎮(zhèn)痛制劑。例如，與口服制劑中可以被接受的崩解齊U、賦形齊U、潤(rùn)滑齊U、粘合齊IJ、填充劑等常用的輔料成分混合，并按相應(yīng)的常規(guī)工藝方法處理，即可制成為片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸、相應(yīng)的緩釋劑、控釋劑等固體制劑形式的口服藥物。按注射藥物制劑中允許使用的適當(dāng)溶劑和附加劑配伍及相應(yīng)的工藝操作處理后，可以制備成相應(yīng)的注射劑型藥物。與相應(yīng)的外用藥物分散劑、固化劑、穩(wěn)定劑等混合，可制備成相應(yīng)的包括軟膏、栓劑、洗劑及藥用敷料等常用的外用藥物。對(duì)上述各有效藥物成分進(jìn)行的毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示，附子靈化合物和苯甲酰中烏頭原堿的毒性相對(duì)最低，均未測(cè)出LD叨值，測(cè)出的最大耐受量均為1000毫克/千克體重；中烏頭堿的LD5。為6.41mg/kg，下烏頭堿的LD5。為12.8mg/kg，說(shuō)明附子靈使用的安全性。本發(fā)明藥物將附子靈與其它烏頭類生物堿配比，用量均在所述的安全范圍之內(nèi)，將附子靈單獨(dú)使用，藥效明確，且毒性低、安全性高；將附子靈與其它三類烏頭堿配伍，均能達(dá)到較好的協(xié)同增效作用，而且，配伍后的藥物組合物與藥效并不完成呈簡(jiǎn)單的量效線性關(guān)系，即用量越多，藥效越好，而是在一個(gè)特定的配比下，藥效最好。試驗(yàn)證明，按最佳配比配伍的藥物組合物，在用量較少的情況下，即可達(dá)到最好的藥效，毒性卻顯著降低?？傊景l(fā)明藥物組合物達(dá)到了高效、低毒的目的，為臨床提供了一種新的選擇。以下通過(guò)具體實(shí)施例的方式對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳述，但不應(yīng)理解為是對(duì)本發(fā)明的限制，凡基于上述發(fā)明思想作出的多種形式的修改、替換、變更均屬于本發(fā)明。具體實(shí)施方式實(shí)施例1:口服膠囊藥物膠囊藥物1的組成附子靈80份(重量，以下同)，淀粉200份。膠囊藥物2的組成附子靈80份，中烏頭堿0.4份，淀粉200份。制備方法分別將有效藥物成分按膠囊藥物的常規(guī)制劑方式粉碎并過(guò)篩，然后加入淀粉并與適量藥用乙醇混合，于搖擺制粒機(jī)上制粒，干燥，整粒后，用適量的硬脂酸鎂等潤(rùn)滑劑混合后，按所需藥物劑量充填膠囊。規(guī)格為0.2克/粒。實(shí)施例2:口服片劑藥物片劑藥物1的組成附子靈80份，淀粉200份。片劑藥物2的組成附子靈80份，下烏頭堿1.2份，淀粉200份。制備方法分別按實(shí)例1的方式制粒并干燥后過(guò)篩，加適量滑石粉模壓制片，再按常規(guī)包衣方式用由HPMC、丙二醇、鈦白粉、藥用乙醇和吐溫-80共同組成的包衣液對(duì)所壓制的藥片進(jìn)行包衣。規(guī)格為0.2克/片，成人一日用藥量1.2克。實(shí)施例3:口服顆粒劑止痛藥顆粒藥物1的組成附子靈60份，淀粉800份，糖粉200份。顆粒藥物2的組成附子靈80份，中烏頭堿0.13份，淀粉800份，糖粉200份。制備方法分別將附子靈等有效藥物成分按顆粒藥物的常規(guī)制劑方式粉碎并過(guò)篩，然后加入淀粉、糖粉和適量藥用乙醇混合均勻，于搖擺制粒機(jī)上制粒，干燥，整粒后，按所需藥物劑量分裝。規(guī)格為3克/袋。實(shí)施例4:口服止痛滴丸藥物組成附子靈450份，聚乙二醇400020份，藥用乙醇適量。制備方法按滴丸制劑的常規(guī)方式，分別將附子靈用藥用乙醇溶解，將聚乙二醇加熱熔融后，將二者混合，高速攪拌均勻后，滴入<5t:的二甲基硅油中，制成滴丸型藥物。規(guī)格為150毫克/粒。實(shí)施例5:止痛注射劑藥物注射藥物1組成附子靈40份，吐溫-805份，EDTA3份，注射用水加至1000份。注射藥物2組成附子靈5份，中烏頭堿0.05份，吐溫-805份，EDTA3份，注射用水加至1000份。制備方法分別將附子靈等有效藥物成分加入適量注射用水、吐溫-80、EDTA及常適量CMC-Na充分?jǐn)嚢璨⒊暡ɑ旌希钩浞秩芙夂?，再用注射用水稀釋定量，過(guò)濾，可用適量鹽酸調(diào)整pH4-9值至，用安瓿灌封。規(guī)格為5毫克/支。實(shí)施例6:外用止痛乳劑型軟膏軟膏藥物1的組成附子靈50份，十八醇100份，硬脂酸150份，十二烷基磺酸鈉10份，對(duì)羥基苯甲酸乙酯1份，純化水加至1，000，000份。軟膏藥物2的組成附子靈20份，下烏頭堿1份，十八醇100份，硬脂酸150份，十二烷基磺酸鈉10份，對(duì)羥基苯甲酸乙酯1份，純化水加至1，000，000份。制備方法分別將附子靈等有效藥物成分用適量藥用乙醇加熱溶解后過(guò)濾，再分別均與十八醇和硬脂酸混合并加熱攪拌均勻后保溫，為備用的油相物料。另將十二烷基硫酸鈉、對(duì)羥基苯甲酸乙酯和純化水加熱下攪拌均勻，與備用的油相物料混合并經(jīng)高速攪拌均勻后，冷卻、封裝即可。含量規(guī)格為2%。實(shí)施例7:止痛橡皮膏橡皮膏1的組成附子靈50份，橡膠基質(zhì)400份，松香400份，凡士林100份，羊毛脂50份，氧化鋅30份。橡皮膏2的組成附子靈100份，中烏頭堿0.5份，下烏頭堿1份，橡膠基質(zhì)400份，松香400份，凡士林100份，羊毛脂50份，氧化鋅30份。制備方法按橡皮膏的常規(guī)制備方法，分別將橡膠基質(zhì)壓膠和浸膠后，與附子靈等有效藥物成分及凡士林、羊毛脂、松香和氧化鋅等填充劑、分散劑輔料共同混合打膏和過(guò)濾，然后在貼敷載體上涂布膏料并回收溶劑，按需要大小切割并加襯后包裝。藥物的參考含量同實(shí)例5。實(shí)施例8:止痛氣霧劑氣霧劑藥物1的組成附子靈500份，二氯二氟甲烷7000份，藥用乙醇2500份，香味劑適量。氣霧劑藥物2的組成附子靈100份，苯甲酰中烏頭原堿2份，二氯二氟甲烷7000份，藥用乙醇2500份，香味劑適量。制備方法分別將附子靈等有效藥物成分加入藥用乙醇，根據(jù)需要還可加入適量的香味劑，混合均勻并過(guò)濾后，定量裝入耐壓容器，再按規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)充壓并注入經(jīng)微孔過(guò)濾后的二氯二氟甲烷，即成為止痛氣霧劑藥物。實(shí)施例9:止痛擦劑擦劑藥物1的組成附子靈400份，藥用乙醇300份，水加至1000份。擦劑藥物2的組成附子靈400份，中烏頭堿6份，下烏頭堿10份，苯甲酰中烏頭原堿300份，藥用乙醇300份，水加至1000份。制備方法分別將附子靈等有效藥物成分加入藥用乙醇混合均勻并過(guò)濾，再用蒸餾水調(diào)整至總量即得到可供使用的止痛擦劑藥物。實(shí)施例10:止痛洗劑洗劑藥物1的組成附子靈400份，藥用乙醇100份，水加至1000份。洗劑藥物2的組成附子靈400份，中烏頭堿90份，下烏頭堿80份，苯甲酰中烏頭原堿300份，藥用乙醇100份，水加至1000份。制備方法同實(shí)例9的止痛擦劑藥物。實(shí)施例11:止痛膜劑藥物膜劑藥物1的組成附子靈400份，聚乙烯醇30份，甘油100份，吐溫-8050份。膜劑藥物2的組成附子靈400份，中烏頭堿90份，苯甲酰中烏頭堿300份，聚乙烯醇30份，甘油100份，吐溫-8050份。制備方法將附子靈等有效藥物成分粉碎后，分別與甘油和吐溫-80攪拌混合均勻，再與由聚乙烯醇(PVA)制得的溶漿攪拌混合均勻，消泡后再與適量液體石蠟混合后制膜，干燥后即可。實(shí)施例12:止痛濕敷料止痛敷料1的藥物組成附子靈140份，藥用乙醇150份，純化水加至1，000份。止痛敷料2的藥物組成附子靈150份，下烏頭堿6份，苯甲酰中烏頭原堿100份，藥用乙醇150份，純化水加至1，000份。制備方法分別將有效藥物成分藥用乙醇溶解后用水定量稀釋，然后將醫(yī)用紗布在藥液中充分浸泡，取出帶藥液紗布封裝。以下通過(guò)毒理試驗(yàn)及藥效學(xué)試驗(yàn)證明本發(fā)明的有益效果。試驗(yàn)例1本發(fā)明附子靈的急性毒理試驗(yàn)試驗(yàn)測(cè)得昆明種小鼠一次灌胃給予藥物附子靈的最大耐受劑量為lg/kg。最大耐受劑量的測(cè)定1、試驗(yàn)材料[0079]1.1受試藥物藥物附子靈，白色結(jié)晶顆粒，由成都芝芝藥業(yè)有限公司提供。1.2試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，1822g，由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，一級(jí)動(dòng)物，合格證號(hào)川實(shí)動(dòng)管質(zhì)第67號(hào)；飼料購(gòu)于四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物自由飲水，飼養(yǎng)室溫度為21士2。C，相對(duì)濕度為5060%。2、試驗(yàn)方法將藥物附子靈結(jié)晶顆粒用蒸餾水超聲助懸后，配成濃度為0.5g/ml的混懸液(含1%的羧甲基纖維素鈉)，給禁食不禁水14小時(shí)的20只昆明種小鼠分別灌胃給予藥物附子靈的混懸液O.2ml/10g，立即觀察動(dòng)物反應(yīng)情況，連續(xù)觀察7天，記錄小鼠的行為活動(dòng)、皮毛光澤、飲食、體重和死亡情況。3、試驗(yàn)結(jié)果小鼠在灌胃后15分鐘4小時(shí)內(nèi)，大多數(shù)倦縮少動(dòng)、豎毛，4小時(shí)后行為、活動(dòng)、飲食均逐漸恢復(fù)正常。觀察期間，7日內(nèi)無(wú)一動(dòng)物死亡，動(dòng)物飲食、行為活動(dòng)正常，毛色光滑，體重增長(zhǎng)正常(實(shí)驗(yàn)前小鼠體重為18.7±0.7g，觀察7日后體重為25.4士2.0g)，7日后，處死小鼠尸檢，各臟器肉眼觀察未見明顯異常。故藥物附子靈一次灌胃的最大耐受劑劑量為lg/kg。4、結(jié)論昆明種小鼠一次灌胃給予藥物附子靈的最大耐受劑量為lg/kg。試驗(yàn)例2本發(fā)明附子靈與苯甲酰中烏頭原堿配伍的急性毒理試驗(yàn)試驗(yàn)測(cè)得昆明種小鼠灌胃給予藥物附子靈、苯甲酰中烏頭原堿，LD5。為1.384g/kg，95X的可信限為1.1921.605g/kg。半數(shù)致死量(LD5。)的測(cè)定1、試驗(yàn)材料1.1受試藥物及配制苯甲酰中烏頭原堿、附子靈，淡黃色粉末，由成都芝芝藥業(yè)有限公司提供。無(wú)水乙醇，分析純，成都科龍化工試劑廠，批號(hào)20040803。苯甲酰中烏頭原堿、附子靈各2.5g，加入4ml無(wú)水乙醇，經(jīng)42。C水浴加熱及超聲助溶后，加蒸餾水至40ml，配成125mg/ml的淡黃色溶液，按1:0.75等比稀釋配成93.7、70.3、52.7、39.6mg/ml—系列濃度的藥液備用。取lml無(wú)水乙醇，加蒸餾水至10ml配成10%的乙醇。1.2試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，1822g，由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，一級(jí)動(dòng)物，合格證號(hào)川實(shí)動(dòng)管質(zhì)第67號(hào)；飼料購(gòu)于四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物自由飲水，飼養(yǎng)室溫度為21士2。C，相對(duì)濕度為5060%。2、試驗(yàn)方法通過(guò)預(yù)試找出最大致死量為2.5g/kg，最小致死量為0.5g/kg。取禁食不禁水14小時(shí)的昆明種小鼠120只，隨機(jī)分成6組，每組20只，雌雄各半，由2.5g/kg開始，按l:0.75比例劑量遞減，分別給5組小鼠一次性灌胃給予不同濃度的藥物附子靈+苯甲酰中烏頭原堿，給藥體積均為0.2ml/10g，陰性對(duì)照以10%的乙醇代替，灌胃后立即觀察動(dòng)物反應(yīng)情，記錄小鼠出現(xiàn)的毒性反應(yīng)及死亡情況。3、試驗(yàn)結(jié)果陰性對(duì)照組小鼠給10%的乙醇后無(wú)明顯反應(yīng)，給藥組(附子靈、苯甲酰中烏頭原堿各50%)小鼠在灌胃后10分鐘4小時(shí)內(nèi)，隨劑量增加，出現(xiàn)程度遞增的倦縮少動(dòng)，豎毛，俯臥，昏厥性抽搐等反應(yīng)，并隨劑量增加，死亡動(dòng)物數(shù)逐漸增加。死亡小鼠經(jīng)解剖，主要臟器肉眼觀察未見明顯異常改變。未死亡小鼠一日后行為、活動(dòng)、飲食、皮毛光澤和體重增長(zhǎng)基本恢復(fù)正常。14日后，稱重，發(fā)現(xiàn)各組體重?zé)o明顯差別；處死小鼠，解剖，主要臟器肉眼觀察亦未見明顯異常改變。各劑量組小鼠死亡情況見表1。表1各劑量組小鼠死亡數(shù)組別<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>[0105]各劑量組死亡率按NDST軟件包中Bliss法計(jì)算得附子靈、苯甲酰中烏頭原堿各50%藥物的LD5。為1.384g/kg，95X的可信限為1.1921.605g/kg。4、結(jié)論藥物附子靈、苯甲酰中烏頭原堿毒性相對(duì)較低，昆明種小鼠灌胃給藥，LDs。為1.384g/kg(藥物附子靈、苯甲酰中烏頭原堿各占50X)，95X的可信限為1.1921.605g/kg。根據(jù)給藥后動(dòng)物反應(yīng)，估計(jì)該藥物可能損傷的靶器官為中樞神經(jīng)系統(tǒng)，自主神經(jīng)系統(tǒng)，呼吸系統(tǒng)等。在上述毒理試驗(yàn)測(cè)定的LD5。及最大耐受劑量下，將附子靈與其它烏頭堿類化合物配比，以達(dá)到高效低毒的目的。試驗(yàn)例3本發(fā)明附子靈、下烏頭堿、中烏頭堿和苯甲酰中烏頭原堿的藥效學(xué)試驗(yàn)1.扭體法小鼠鎮(zhèn)痛試驗(yàn)以體重1822克雌雄各半的昆明種小鼠為試驗(yàn)動(dòng)物，同樣飼喂條件下進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)藥物以附子靈為試驗(yàn)藥物，用蒸餾水分別配制成梯度含量為20、10、5和2.5mg/ml的試驗(yàn)用藥液。對(duì)照藥物A為將鹽酸哌替啶注射液(青海制藥廠，批號(hào)20020510)以生理鹽水稀釋成的含量為2mg/ml的藥液。對(duì)照藥物B為由腸溶阿司匹林片(南京白敬宇制藥廠，批號(hào)031016)經(jīng)研磨后以蒸餾水溶解得到的含量為10mg/ml藥液。隨機(jī)將試驗(yàn)小鼠按10只為一組分組，其中一組為空白對(duì)照組，按O.2ml/10g體重劑量灌胃給以蒸餾水；陽(yáng)性對(duì)照組A按40mg/kg體重(相當(dāng)于臨床用量20倍)劑量以腹腔注射給以對(duì)照藥物A;陽(yáng)性藥物對(duì)照組B按200mg/kg體重(相當(dāng)于臨床用量20倍)劑量灌胃給以對(duì)照藥物B;其余為按不同劑量梯度灌胃給以附子靈的試驗(yàn)藥物組。各灌胃給藥組的給藥容積均為0.2ml/10g體重。除對(duì)照藥物A組在給藥15分鐘后腹腔注射0.6%冰醋10酸(分析純，含量為99.5%，成都化學(xué)試劑廠生產(chǎn))溶液O.2ml/只外，其余各組均于給藥30分鐘后腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2ml/只，觀察記錄注射冰醋酸溶液后第520分鐘內(nèi)每只小鼠的扭體反應(yīng)(腹部后腿伸張，臀部抬高)次數(shù)，并對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算各試驗(yàn)組的扭體均數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)差與疼痛抑制率，用t檢驗(yàn)比較各給藥組與陰性對(duì)照組的組間差異。試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。[0116]表2扭體法小鼠鎮(zhèn)痛試驗(yàn)結(jié)果組別給制劑量(mg/kg)扭體數(shù)(X土SD)疼痛抑制率(%)空白對(duì)照組一34.3±8.0—鹽酸哌替啶40，AAA鵬.00阿司匹林2003.1±3.3卯.％附子靈組柳13.0土10.2'"62.1020014.7±10.8"57.1410023.6±7.931.205029.5±14.613.99注與空白組相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001注射冰醋酸后可引起小鼠較持久的疼痛剌激，小鼠反復(fù)出現(xiàn)腹部后腿伸張，臀部高起(扭體)反應(yīng)。表l的結(jié)果顯示，鹽酸哌替啶和阿司匹林兩對(duì)照藥物對(duì)冰醋酸所致小鼠扭體次數(shù)明顯下降(P〈0.001)，鎮(zhèn)痛作用非常明顯，其疼痛抑制率分別為100%和90.96%。附子靈試驗(yàn)藥物的400mg/kg和200mg/kg兩劑量組均能不同程度減少由冰醋酸所致的小鼠酒體反應(yīng)，具有較明顯的鎮(zhèn)痛作用，且呈劑量依賴性。對(duì)下烏頭堿、中烏頭堿和苯甲酰中烏頭原堿進(jìn)行同樣試驗(yàn)的結(jié)果如表3所示。表3扭體法小鼠鎮(zhèn)痛試驗(yàn)結(jié)果組別給制劑量(mg/kg)扭體數(shù)(X士SD)疼癇抑制率(％)空白對(duì)照組—39.3±13.8—鹽酸哌替啶40G土O100.00阿司匹林2003.1±3廣92.1142.8±4.592.88下烏頭堿23.6±10.9*39.9524.5±9.8*137.660.527.6±11.529.77219.3±10.0AA50.89中烏頭堿21.8±12.6AA44.530,520.0±9.6AA49.110.2533.6±1L514.5040020.4±12.9A*40.52苯甲酰中烏頭原堿20021.0±15.1A38.7810027.4±15.920.125027.2±12.220.70[0123]注與空白組相比，*P<0.05，"P<0.01，***P<0.001;[0124]AP<0.01;AP<0.05，"P<0.01。表3的結(jié)果顯示，對(duì)照藥物鹽酸哌替啶和阿司匹林兩組的鎮(zhèn)痛作用非常明顯，其疼痛抑制率分別為100%和92.11%。下烏頭堿成分中除0.5mg/kg劑量組外，其余各組均可有不同程度的較明顯鎮(zhèn)痛作用，并存在有一定的劑量依賴性；中烏頭堿成分中除O.25mg/kg組外，其余各組也均可有較明顯的鎮(zhèn)痛作用，其疼痛抑制率也存在有一定的劑量依賴性；苯甲酰中烏頭原堿中的400mg/kg和200mg/kg兩劑量組可具有較明顯的鎮(zhèn)痛作用，且對(duì)疼痛的抑制率同樣存在一定的劑量依賴性。[0126]2.熱板法小鼠鎮(zhèn)痛試驗(yàn)試驗(yàn)動(dòng)物及其分組，各試驗(yàn)藥物劑量梯度及給制劑量和給藥方法均分別與上述扭體法試驗(yàn)的方式相同，其中對(duì)照藥物組僅以鹽酸哌替啶作為對(duì)照藥物。將恒溫水浴溫度控制于55±0.5t:，取小鼠置于恒溫的鋁桶內(nèi)，記錄從放入至舔后足的時(shí)間(痛值閾)，連續(xù)測(cè)定兩次，兩次測(cè)定時(shí)間間隔5分鐘，取其平均值為該小鼠給藥前的痛閾值。選痛閾值在530秒內(nèi)的小鼠，按每組10只分組。各組試驗(yàn)動(dòng)物分別于給藥后15、30、60、90和120分鐘各測(cè)定小鼠痛閾值兩次，并計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)的平均痛閾值及痛閾值提高率。對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)作統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算各組痛閾值提高率及標(biāo)準(zhǔn)差，用t檢驗(yàn)比較各給藥組與陰性對(duì)照組的組間差異。試驗(yàn)過(guò)程中，小鼠在熱剌激下出現(xiàn)舔足、踢后腿、跳躍等疼痛反應(yīng)，選舔后足作為疼痛反應(yīng)指標(biāo)。試驗(yàn)結(jié)果如表4所示。表4熱板法小鼠鎮(zhèn)痛試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注與空白組相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001表4的結(jié)果顯示，附子靈藥物的大劑量給藥組在給藥后的15和30分鐘內(nèi)，中劑量組在給藥后的120分鐘，小劑量組在給藥后的30分鐘內(nèi)的痛閾值均明顯提高，表明對(duì)小鼠熱剌激的疼痛具有較明顯的鎮(zhèn)痛作用。對(duì)下烏頭堿、中烏頭堿和苯甲酰中烏頭原堿進(jìn)行同樣試驗(yàn)的結(jié)果如表5所示。表5熱板法小鼠鎮(zhèn)痛試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注與空白組相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001;AP<0.05，AAP<0.01;AP<0.05，"P<0.01。表5的結(jié)果顯示，下烏頭堿成分中的大劑量給藥組在所測(cè)各時(shí)間點(diǎn)處的痛閾值均明顯提高，并較對(duì)照藥物A鹽酸哌替啶的鎮(zhèn)痛效果維持時(shí)間長(zhǎng)，在2小時(shí)內(nèi)均有較明顯的鎮(zhèn)痛作用。試驗(yàn)例4附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿與下烏頭堿不同比例配伍的鎮(zhèn)痛作用試驗(yàn)試驗(yàn)證明，藥物附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿與下烏頭堿不同比例配伍組成的復(fù)方藥物均具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，在附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿與下烏頭堿配比比例為200:200:i:2、600:600:i:2、200:600:3:2、600:200:i:6和200:200:3:6中，以200:200:3:6的比例鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)，故附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿與下烏頭堿的鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)的最佳配比為200:200:3:6。[omo]—、試驗(yàn)材料1、試驗(yàn)藥品及配制苯甲酰中烏頭原堿，淡黃色粉末；附子靈、中烏頭堿，近白色粉末；下烏頭堿，白色結(jié)晶顆粒，由成都芝芝藥業(yè)有限公司提供。稱取附子靈、苯甲酰中烏頭原堿各250mg，加入2.5ml無(wú)水乙醇，經(jīng)42t:水浴加熱及超聲助溶后，加蒸餾水至25ml，配成含附子靈、苯甲酰中烏頭原堿各10mg/ml的溶液；稱取中烏頭堿1.25mg，加入2.5ml無(wú)水乙醇，經(jīng)42。C水浴加熱及超聲助溶后，加蒸餾水至25ml，配成含中烏頭堿0.05mg/ml的溶液；稱取下烏頭堿2.5mg，加入2.5ml無(wú)水乙醇，經(jīng)42。C水浴加熱及超聲助溶后，加蒸餾水至25ml，配成含下烏頭堿O.lmg/ml的溶液。按表6取不同體積的附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿、下烏頭堿溶液，配成含不同比例的附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿、下烏頭堿藥液，備用。[0143]表6附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿、下烏頭堿不同配比劑量組[0144]<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>阿司匹林腸溶片，白色，25mg/片，徐州恩華藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號(hào)20050312。取阿司匹林腸溶片4片，研磨，用蒸餾水至10ml，配成含阿司匹林10mg/ml的藥液備用。[0146]取1ml無(wú)水乙醇，加蒸餾水至10ml配成10%的乙醇。[0147]2、試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，1822g，由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，一級(jí)動(dòng)物，合格證號(hào)第10號(hào)；飼料購(gòu)于四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物自由飲水，觀察室溫度為21士2t:，相對(duì)濕度為5060%。[0149]3、試劑冰醋酸分析純，成都化學(xué)試劑廠，批號(hào)20050423。[0151]無(wú)水乙醇，分析純，成都科龍化工試劑廠，批號(hào)20050313。[0152]二、試驗(yàn)方法取昆明種小鼠70只，隨機(jī)分成7組，每組10只，雌雄各半，體重1822g。第1組為陰性對(duì)照組，灌胃給予10%的乙醇0.2ml/10g體重；第2組為陽(yáng)性對(duì)照組，灌胃給予阿司匹林200mg/kg(相當(dāng)于臨床用量的20倍)；第3、4、5、6、7組為藥物附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿、下烏頭堿的5個(gè)不同配比劑量組，分別灌胃給予附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿、下烏頭堿的5個(gè)不同配比藥液，各組給藥容積均為0.2ml/10g，于給藥后30分鐘腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2ml/只，觀察記錄注射醋酸溶液5分鐘后的10分鐘內(nèi)每只小鼠的扭體反應(yīng)(腹部后腿伸張，臀部高起)次數(shù)。對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)做統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算各劑量組扭體均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差及疼痛抑制率，用t檢驗(yàn)，比較各給藥組與陰性對(duì)照組的組間差異。疼痛抑制輛二空白組扭^l^gf體均數(shù)x腦空白組扭體均數(shù)三、試驗(yàn)結(jié)果注射醋酸后可引起小鼠較持久的疼痛剌激，小鼠反復(fù)出現(xiàn)腹部后腿伸張，臀部高起(扭體)反應(yīng)。阿司匹林陽(yáng)性對(duì)照組，對(duì)冰醋酸所致小鼠扭體次數(shù)明顯下降(P<0.001)，鎮(zhèn)痛作用非常明顯，其疼痛抑制率為88.0%。藥物附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿與下烏頭堿配比比例為200:200:i:2、600:600:i:2、200:600:3:2、600:200:i:6和200:200:3:6組成的復(fù)方藥物均有不同程度減少由醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)，小鼠扭體反應(yīng)數(shù)與陰性對(duì)照組相比，有顯著性差異，顯示較明顯的鎮(zhèn)痛作用，其疼痛抑制率分別為48.9%、43.8%、60.2%、54.5%和64.2%，結(jié)果見表7。從疼痛抑制率看，以附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿與下烏頭堿配比比例為200:200:3:6時(shí)，鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)?？梢哉J(rèn)為附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿與下烏頭堿鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)的最佳配比為200:200:3:6。表7藥物附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿、下烏頭堿不同配比對(duì)醋酸所致小鼠疼痛反應(yīng)的影響組方劑量(呵/kg)動(dòng)物數(shù)(只)g體數(shù)(:c士SO)疼痛抑制率(%)組別附子靈苯曱酰中烏頭原堿中烏頭堿下烏頭堿陰性對(duì)照一———1027.4±10.1一阿司匹林一一——103.3±3.2*"88.0①25250.1250.251014.0±9.4"48.9②37.537.50.0620.1251015.4±6—7"43.8③12.537.50.1880.1251010.9±8.0"*60.2④37.512.50.0620.3751012.5±7.2"54.4⑤12.512.50-1880.375109-8±6-4"*64.2注:t檢驗(yàn)，與陰性對(duì)照組相比，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001[0161]四、試驗(yàn)結(jié)論藥物附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿與下烏頭堿不同比例配伍組成的復(fù)方藥物均具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，從疼痛抑制率看，附子靈、苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿與下烏頭堿配比比例為200:200:i:2、600:600:i:2、200:600:3:2、600:200:i:6和200:200:3:6的組合物用量與藥效并沒(méi)有劑量依賴性；其中以200:200:3:6的比例鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)，該配比用量較少，鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)，達(dá)到高效低毒的目的。試驗(yàn)例5附子靈與中烏頭堿不同比例配伍的鎮(zhèn)痛作用試驗(yàn)試驗(yàn)證明，100mg/kg的附子靈及0.5mg/kg的中烏頭堿均有明顯的鎮(zhèn)痛作用，其疼痛抑制率分別為31.3%和62.6%。附子靈、中烏頭堿的600:1、200:1、200:3配比復(fù)方藥物也同樣具有顯著抑制醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)，其疼痛抑制率分別為86.0%、82.1%和65.4%，均高于100mg/kg的附子靈及0.5mg/kg的中烏頭堿。從疼痛抑制率可看出隨著附子靈的比例加大，鎮(zhèn)痛作用逐漸增強(qiáng)。在3個(gè)不同配比比例中，以附子靈、中烏頭堿配比比例為600:l時(shí)，鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)。故可認(rèn)為附子靈、中烏頭堿鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)的最佳配比為600:i?！⒃囼?yàn)材料1、試驗(yàn)藥品及配制附子靈、中烏頭堿，近白色粉末，由成都芝芝藥業(yè)有限公司提供。稱取附子靈250mg，加入2.5ml無(wú)水乙醇，經(jīng)42。C水浴加熱及超聲助溶后，加蒸餾水至25ml，配成含附子靈10mg/ml的溶液；稱取中烏頭堿1.25mg，加入2.5ml無(wú)水乙醇，經(jīng)42。C水浴加熱及超聲助溶后，加蒸餾水至25ml，配成含中烏頭堿0.05mg/ml的溶液。按表8取不同體積的附子靈、中烏頭堿溶液，配成含不同比例的附子靈、中烏頭堿藥液，備用。阿司匹林腸溶片，白色，25mg/片，徐州恩華藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號(hào)20050312。取阿司匹林腸溶片4片，研磨，用蒸餾水至10ml，配成含阿司匹林10mg/ml的藥液備用。[0169]取lml無(wú)水乙醇，加蒸餾水至10ml配成10%的乙醇。[0170]表8附子靈、中烏頭堿不同配比劑量組組別取樣體積(ml)組方劑量(術(shù)_vPk咖附子靈中烏頭堿蒸餾水附子靈中烏頭堿則力仁L例①2.5—2.5100—②—2.52.5—0-5③3.751.25—1500.25600:12.52.5—1000-5200-11.253-75—500.75200:32、試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，1822g，由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，一級(jí)動(dòng)物，合格證號(hào)第10號(hào)；飼料購(gòu)于四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物自由飲水，觀察室溫度為21士2t:，相對(duì)濕度為5060%。3、試劑冰醋酸分析純，成都化學(xué)試劑廠，批號(hào)20050423。無(wú)水乙醇，分析純，成都科龍化工試劑廠，批號(hào)20050313。二、試驗(yàn)方法取昆明種小鼠70只，隨機(jī)分成7組，每組10只，雌雄各半，體重1822g。第1組為陰性對(duì)照組，灌胃給予10%的乙醇0.2ml/10g體重；第2組為陽(yáng)性對(duì)照組，灌胃給予阿司匹林200mg/kg(相當(dāng)于臨床用量的20倍)；第3、4、5、6、7組為藥物附子靈、中烏頭堿及其3個(gè)不同配比劑量組，分別灌胃給予附子靈、中烏頭堿及其3個(gè)不同配比藥液，各組給藥容積均為0.2ml/10g，于給藥后30分鐘腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2ml/只，觀察記錄注射醋酸溶液5分鐘后的10分鐘內(nèi)每只小鼠的扭體反應(yīng)(腹部后腿伸張，臀部高起)次數(shù)。對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)做統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算各劑量組扭體均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差及疼痛抑制率，用t檢驗(yàn)，比較各給藥組與陰性對(duì)照組的組間差異。—空白組扭體次數(shù)-給藥組扭體次數(shù)疼痛抑制率(％)=工Mx100%空白組扭體次數(shù)三、試驗(yàn)結(jié)果注射醋酸后可引起小鼠較持久的疼痛剌激，小鼠反復(fù)出現(xiàn)腹部后腿伸張，臀部高起(扭體)反應(yīng)。阿司匹林陽(yáng)性對(duì)照組，對(duì)冰醋酸所致小鼠扭體次數(shù)明顯下降(P<0.001)，鎮(zhèn)痛作用非常明顯，其疼痛抑制率為82.7%。藥物附子靈100mg/kg及中烏頭堿0.5mg/kg劑量均有明顯減少由醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)，其疼痛抑制率分別為31.3%和62.6%。附子靈、中烏頭堿的600:i、200:i、200:3配比藥物也均有不同程度抑制醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)，其扭體數(shù)與陰性對(duì)照組相比，有顯著性差異，顯示較明顯的鎮(zhèn)痛作用；其疼痛抑制率分別為86.0%、82.1%和65.4%，結(jié)果見表9。從疼痛抑制率看，以附子靈、中烏頭堿配比比例為600:l時(shí)，鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)。可以認(rèn)為附子靈、中烏頭堿鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)的最佳配比為600:1。結(jié)果還可以看出，盡管100mg/kg的附子靈不及O.5mg/kg的中烏頭堿鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)，但在復(fù)方中，隨著附子靈的比例加大，鎮(zhèn)痛作用逐漸增強(qiáng)。表9藥物附子靈、中烏頭堿不同配比對(duì)醋酸所致小鼠疼痛反應(yīng)的影響16組別-組方劑盤(fflg/kg)動(dòng)物數(shù)扭體數(shù)(x土SD)疼痛抑制率(％)附子靈中烏頭堿(只)陰性對(duì)照一一17.9±6.0——阿司匹林—一103.0±3.3*'*82.7①100一1012.3±5.8'31.3②一0.5106.7±7.6**62.6③1500.25102.5±2.2"*86.0④1000.5103.2±4.5"*82.1500.75106.2±10.(T65-4注:t檢驗(yàn)，與陰性對(duì)照組相比，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001四、試驗(yàn)結(jié)論100mg/kg的附子靈及0.5mg/kg的中烏頭堿均有明顯的鎮(zhèn)痛作用，其疼痛抑制率分別為31.3%和62.6%。附子靈、中烏頭堿的600:1、200:1、200:3配比復(fù)方藥物也同樣具有顯著抑制醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)，其疼痛抑制率分別為86.0%、82.1%和65.4%，均高于100mg/kg的附子靈及0.5mg/kg的中烏頭堿。從疼痛抑制率可看出隨著附子靈的比例加大，鎮(zhèn)痛作用逐漸增強(qiáng)。3個(gè)不同配比比例的組合物總用量與藥效并沒(méi)有劑量依賴性，以附子靈、中烏頭堿配比比例為600:i時(shí)，鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)。比例為200:i時(shí)，用量較少，鎮(zhèn)痛作用較強(qiáng)，達(dá)到高效低毒的目的。試驗(yàn)例6附子靈與下烏頭堿不同比例配伍的鎮(zhèn)痛作用試驗(yàn)試驗(yàn)證明，100mg/kg的附子靈及l(fā)mg/kg的下烏頭堿均有明顯的鎮(zhèn)痛作用，其疼痛抑制率分別為31.3%和48.0%。附子靈、下烏頭堿的300:1、100:1、100:3配比復(fù)方藥物也同樣具有顯著抑制醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)，其疼痛抑制率分別為39.1%、55.3%和78.4%，其中100:1、100:3配比復(fù)方高于100mg/kg的附子靈及l(fā)mg/kg的下烏頭堿。從疼痛抑制率可看出隨著下烏頭堿的比例加大，鎮(zhèn)痛作用逐漸增強(qiáng)。在3個(gè)不同配比比例中，以附子靈、下烏頭堿配比比例為100:3時(shí)，鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)。故可認(rèn)為附子靈、下烏頭堿鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)的最佳配比為ioo:3。但此配比下的毒性也很強(qiáng)，說(shuō)明附子靈、下烏頭堿在藥效和毒性上，均存在著較強(qiáng)的協(xié)同作用。在實(shí)際應(yīng)用中，可以在不改變附子靈、下烏頭堿ioo:3的配比比例前提下，進(jìn)一步減少劑量，減少毒性反應(yīng)的發(fā)生?！?、試驗(yàn)材料1、試驗(yàn)藥品及配制附子靈，近白色粉末；下烏頭堿，白色結(jié)晶顆粒，由成都芝芝藥業(yè)有限公司提供。稱取附子靈250mg，加入2.5ml無(wú)水乙醇，經(jīng)42。C水浴加熱及超聲助溶后，加蒸餾水至25ml，配成含附子靈10mg/ml的溶液；稱取下烏頭堿2.5mg，加入2.5ml無(wú)水乙醇，經(jīng)42。C水浴加熱及超聲助溶后，加蒸餾水至25ml，配成含下烏頭堿0.lmg/ml的溶液。按表IO取不同體積的附子靈、下烏頭堿溶液，配成含不同比例的附子靈、下烏頭堿藥液，備用。表10附子靈、下烏頭堿不同配比劑量組取祥體積(mO組方劑量(fflg/kg)附子靈下烏頭堿蒸餾水附子靈下烏頭堿①2.5—2.5100—一②—2.52.5—1—③3.751.25—1500.5300:1④2.52.5一1001100--1⑤L253.75—501.5跳3阿司匹林腸溶片，白色，25mg/片，徐州恩華藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號(hào)20050312。取阿司匹林腸溶片4片，研磨，用蒸餾水至10ml，配成含阿司匹林10mg/ml的藥液備用。取lml無(wú)水乙醇，加蒸餾水至10ml配成10%的乙醇。2、試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，1822g，由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，一級(jí)動(dòng)物，合格證號(hào)第10號(hào)；飼料購(gòu)于四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物自由飲水，觀察室溫度為21士2t:，相對(duì)濕度為5060%。3、試劑冰醋酸分析純，成都化學(xué)試劑廠，批號(hào)20050423。無(wú)水乙醇，分析純，成都科龍化工試劑廠，批號(hào)20050313。二、試驗(yàn)方法取昆明種小鼠70只，隨機(jī)分成7組，每組10只，雌雄各半，體重1822g。第1組為陰性對(duì)照組，灌胃給予10%的乙醇0.2ml/10g體重；第2組為陽(yáng)性對(duì)照組，灌胃給予阿司匹林200mg/kg(相當(dāng)于臨床用量的20倍)；第3、4、5、6、7組為藥物附子靈、下烏頭堿及其3個(gè)不同配比劑量組，分別灌胃給予附子靈、下烏頭堿及其3個(gè)不同配比藥液，各組給藥容積均為0.2ml/10g，于給藥后30分鐘腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2ml/只，觀察記錄注射醋酸溶液5分鐘后的10分鐘內(nèi)每只小鼠的扭體反應(yīng)(腹部后腿伸張，臀部高起)次數(shù)。對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)做統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算各劑量組扭體均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差及疼痛抑制率，用t檢驗(yàn)，比較各給藥組與陰性對(duì)照組的組間差異。三、試驗(yàn)結(jié)果注射醋酸后可引起小鼠較持久的疼痛剌激，小鼠反復(fù)出現(xiàn)腹部后腿伸張，臀部高起(扭體)反應(yīng)。阿司匹林陽(yáng)性對(duì)照組，對(duì)冰醋酸所致小鼠扭體次數(shù)明顯下降(P<0.001)，鎮(zhèn)痛作用非常明顯，其疼痛抑制率為82.7%。藥物附子靈100mg/kg及下烏頭堿lmg/kg劑量均有明顯減少由醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)，其疼痛抑制率分別為31.3%和48.0%。附子靈、下烏頭堿的300:iuoo:iuoo:3配比劑量組也均有不同程度抑制醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)，其扭體數(shù)與陰性對(duì)照組相比，有顯著性差異，顯示較明顯的鎮(zhèn)痛作用；其疼痛抑制率分別為39.1%、55.3%和78.4%，結(jié)果見表11。從疼痛抑制率看，在復(fù)方中，隨著附子靈的比例加大，鎮(zhèn)痛作用逐漸增強(qiáng)。在3個(gè)不同配比劑量組中，以附子靈、下烏頭堿配比比例為IOO:3時(shí)，鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)。可以認(rèn)為附子靈、下烏頭堿鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)的最佳配比為ioo:3。但我們同時(shí)也證明附子靈、下烏頭堿的i00:3配比劑量組在給藥后出現(xiàn)的萎縮、呃逆樣反應(yīng)最重，其中有兩只在給藥后30min內(nèi)死亡，其數(shù)據(jù)為剩余8只所觀察的結(jié)果。從我們以前對(duì)附子靈、下烏頭堿的急性毒性實(shí)驗(yàn)的情況來(lái)看，附子靈的最大耐受量可達(dá)lg/kg，下烏頭堿的LD50為12.8mg/kg，95X的可信限為10.9314.99mg/kg，在8.19mg/kg時(shí)未出現(xiàn)小鼠死亡的情況，可以認(rèn)為，附子靈和下烏頭堿不僅在藥效上有協(xié)同作用，在毒性上，同樣存在較強(qiáng)的協(xié)同作用?？紤]到其毒性作用，在實(shí)際應(yīng)用中，可以在不改變附子靈、下烏頭堿100:3的配比比例前提下，進(jìn)一步減少劑量，減少毒性反應(yīng)的發(fā)生。表11藥物附子靈、下烏頭堿不同配比對(duì)醋酸所致小鼠疼痛反應(yīng)的影響組別.組方劑量(mg/kg)動(dòng)物數(shù)扭體數(shù)(S士SD)疼痛抑制率(％)附子靈下烏頭堿(只)陰性對(duì)照一—io17.9±6-0——阿司匹林一一103.1±3.3***82.7①100—1012.3±5.8*31.3②—1109.3士7.8'48.0③1500.51010.9±7.4*39.11001108.0±7.9"55.3501.5103.9±5.2"*78.4注:t檢驗(yàn)，與陰性對(duì)照組相比，*p<0.05，**p<0.01，**p<0.001※10只小鼠灌胃給予附子靈、下烏頭堿配比劑量⑤組后30min，死亡2只，此數(shù)據(jù)為剩余8只小鼠的觀察結(jié)果。四、試驗(yàn)結(jié)論100mg/kg的附子靈及l(fā)mg/kg的下烏頭堿均有明顯的鎮(zhèn)痛作用，其疼痛抑制率分別為31.3%和48.0%。附子靈、下烏頭堿的300:1、100:1、100:3配比復(fù)方藥物也同樣具有顯著抑制醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)，其疼痛抑制率分別為39.1%、55.3%和78.4%，其中IOO:1、100:3配比復(fù)方高于100mg/kg的附子靈及l(fā)mg/kg的下烏頭堿。從疼痛抑制率可看出隨著下烏頭堿的比例加大，鎮(zhèn)痛作用逐漸增強(qiáng)。在3個(gè)不同配比比例中，以附子靈、下烏頭堿配比比例為100:3時(shí)，鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)。故可認(rèn)為附子靈、下烏頭堿鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)的最佳配比為ioo:3。但此配比下的毒性也很強(qiáng)，說(shuō)明附子靈、下烏頭堿在藥效和毒性上，均存在著較強(qiáng)的協(xié)同作用。在實(shí)際應(yīng)用中，可以在不改變附子靈、下烏頭堿100:3的配比比例前提下，進(jìn)一步減少劑量，減少毒性反應(yīng)的發(fā)生。試驗(yàn)例7附子靈與苯甲酰中烏頭原堿不同比例配伍的鎮(zhèn)痛作用試驗(yàn)試驗(yàn)證明，100mg/kg的附子靈及苯甲酰中烏頭原堿均有明顯的鎮(zhèn)痛作用，其疼痛抑制率分別為31.3%和34.6%。附子靈、苯甲酰中烏頭原堿的75:25、50:50、25:75配比復(fù)方藥物也同樣具有顯著抑制醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)，其疼痛抑制率分別為39.7%、46.9%和50.3%，均高于100mg/kg的附子靈及苯甲酰中烏頭原堿。從疼痛抑制率可看出隨著苯甲酰中烏頭原堿的比例加大，鎮(zhèn)痛作用逐漸增強(qiáng)。在3個(gè)不同配比比例中，以附子靈、苯甲酰中烏頭原堿配比比例為25:75時(shí)，鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)。故可認(rèn)為附子靈、苯甲酰中烏頭原堿鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)的最佳配比為25:75。—、試驗(yàn)材料1、試驗(yàn)藥品及配制附子靈，近白色粉末；苯甲酰中烏頭原堿，淡黃色粉末，由成都芝芝藥業(yè)有限公司提供。稱取附子靈、苯甲酰中烏頭原堿各250mg，加入2.5ml無(wú)水乙醇，經(jīng)42。C水浴加熱及超聲助溶后，加蒸餾水至25ml，配成各含附子靈、苯甲酰中烏頭原堿10mg/ml的溶液，按表12取不同體積的附子靈、苯甲酰中烏頭原堿溶液，配成含不同比例的附子靈、苯甲酰中烏頭原堿藥液，備用。阿司匹林腸溶片，白色，25mg/片，徐州恩華藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號(hào)20050312。取阿司匹林腸溶片4片，研磨，用蒸餾水至10ml，配成含阿司匹林10mg/ml的藥液備用。取lml無(wú)水乙醇，加蒸餾水至10ml配成10%的乙醇。表12附子靈、苯甲酰中烏頭原堿不同配比劑量組組別取樣體積(ml)組方劑量(mg/kg)組方比例附子靈苯甲酰中烏頭原堿蒸餾水附子靈苯甲酰中烏頭原堿(%)①2.5—2.5100—一②—2.52.5一100一3.751.25—1505075:252.52.5一10010050:50⑤1.253.75一5015025:752、試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，1822g，由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，一級(jí)動(dòng)物，合格證號(hào)第10號(hào)；飼料購(gòu)于四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物自由飲水，觀察室溫度為21士2t:，相對(duì)濕度為5060%。3、試劑冰醋酸分析純，成都化學(xué)試劑廠，批號(hào)20050423。無(wú)水乙醇，分析純，成都科龍化工試劑廠，批號(hào)20050313。二、試驗(yàn)方法取昆明種小鼠70只，隨機(jī)分成7組，每組10只，雌雄各半，體重1822g。第1組為陰性對(duì)照組，灌胃給予10%的乙醇0.2ml/10g體重；第2組為陽(yáng)性對(duì)照組，灌胃給予阿司匹林200mg/kg(相當(dāng)于臨床用量的20倍)；第3、4、5、6、7組為藥物附子靈、苯甲酰中烏頭原堿及其3個(gè)不同配比劑量組，分別灌胃給予附子靈、苯甲酰中烏頭原堿及其3個(gè)不同配比藥物，各組給藥容積均為0.2ml/10g，于給藥后30分鐘腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2ml/只，觀察記錄注射醋酸溶液5分鐘后的IO分鐘內(nèi)每只小鼠的扭體反應(yīng)(腹部后腿伸張，臀部高起)次數(shù)。對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)做統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算各劑量組扭體均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差及疼痛抑制率，用t檢驗(yàn)，比較各給藥組與陰性對(duì)照組的組間差異。三、試驗(yàn)結(jié)果注射醋酸后可引起小鼠較持久的疼痛剌激，小鼠反復(fù)出現(xiàn)腹部后腿伸張，臀部高起(扭體)反應(yīng)。阿司匹林陽(yáng)性對(duì)照組，對(duì)冰醋酸所致小鼠扭體次數(shù)明顯下降(P<0.001)，鎮(zhèn)痛作用非常明顯，其疼痛抑制率為82.7X。藥物附子靈及苯甲酰中烏頭原堿100mg/kg劑量均有明顯減少由醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)，其疼痛抑制率分別為31.3%和34.6%。附子靈、苯甲酰中烏頭原堿的75:25、50:50、25:75配比劑量組也均有不同程度抑制醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)，其扭體數(shù)與陰性對(duì)照組相比，有顯著性差異，顯示較明顯的鎮(zhèn)痛作用；其疼痛抑制率分別為39.7%、46.9%和50.3%，均高于100mg/kg的附子靈和苯甲酰中烏頭原堿，結(jié)果見表13。從疼痛抑制率看，在復(fù)方中，隨著苯甲酰中烏頭原堿的比例加大，鎮(zhèn)痛作用逐漸增強(qiáng)。在3個(gè)不同配比劑量組中，以附子靈、苯甲酰中烏頭原堿配比比例為25:75時(shí)，鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)?？梢哉J(rèn)為附子靈、苯甲酰中烏頭原堿鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)的最佳配比為25:75。表13藥物附子靈、苯甲酰中烏頭原堿不同配比對(duì)醋酸所致小鼠疼痛反應(yīng)的影響組別-組方劑量(rag/kg)附子靈苯甲酰中烏頭原堿-動(dòng)物數(shù)(只)扭體數(shù)(X土SD)疼痛抑制率(％)陰性對(duì)照—一1017.9±6.0一阿司匹林—一103.1±3,3",82.7①100一1012.3±5.8*31.3②一1001011.7±7.2*34.6③150501010-8±8.4*39.7④100100109.5±6.7**46.9⑤50100108.9±6.廣50.3注:t檢驗(yàn)，與陰性對(duì)照組相比，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001四、試驗(yàn)結(jié)論100mg/kg的附子靈及苯甲酰中烏頭原堿均有明顯的鎮(zhèn)痛作用，其疼痛抑制率分別為31.3%和34.6%。附子靈、苯甲酰中烏頭原堿的75:25、50:50、25:75配比復(fù)方藥物也同樣具有顯著抑制醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)，其疼痛抑制率分別為39.7%、46.9%和50.3%，均高于100mg/kg的附子靈及苯甲酰中烏頭原堿。從疼痛抑制率可看出隨著苯甲酰中烏頭原堿的比例加大，鎮(zhèn)痛作用逐漸增強(qiáng)。在3個(gè)不同配比比例中，以附子靈、苯甲酰中烏頭原堿配比比例為25:75時(shí)，鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)。故可認(rèn)為附子靈、苯甲酰中烏頭原堿鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)的最佳配比為25:75。試驗(yàn)例8附子靈肌肉注射給藥的鎮(zhèn)痛作用試驗(yàn)試驗(yàn)證明，肌肉注射藥物附子靈100和25mg/kg劑量均有明顯的鎮(zhèn)痛作用，疼痛抑制率分別為93.9%和52.0%。相同劑量肌肉注射給藥鎮(zhèn)痛作用明顯強(qiáng)于灌胃給藥，但同時(shí)毒性反應(yīng)也重于灌胃給藥，說(shuō)明，在實(shí)際應(yīng)用中，附子靈肌肉注射給藥時(shí)，劑量應(yīng)比灌胃給藥低得多，才能避免毒性反應(yīng)的發(fā)生。—、試驗(yàn)材料1、試驗(yàn)藥品及配制附子靈，近白色粉末，由成都芝芝藥業(yè)有限公司提供。稱取附子靈125mg，加入1.25ml無(wú)水乙醇，經(jīng)42t:水浴加熱及超聲助溶后，加生理鹽水至25ml，配成含附子靈5mg/ml的溶液，取2.5ml，加生理鹽水到10ml，配成1.25mg/ml的溶液，備用。阿司匹林腸溶片，白色，25mg/片，徐州恩華藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號(hào)20050312。取阿司匹林腸溶片4片，研磨，用蒸餾水至10ml，配成含阿司匹林10mg/ml的藥液備用。取0.5ml無(wú)水乙醇，加生理鹽水至10ml配成5%的乙醇。2、試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，1822g，由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，一級(jí)動(dòng)物，合格21證號(hào)第10號(hào)；飼料購(gòu)于四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物自由飲水，觀察室溫度為21士2t:，相對(duì)濕度為5060%。3、試劑冰醋酸分析純，成都化學(xué)試劑廠，批號(hào)20050423。無(wú)水乙醇，分析純，成都科龍化工試劑廠，批號(hào)20050313。二、試驗(yàn)方法取昆明種小鼠50只，隨機(jī)分成5組，每組10只，雌雄各半，體重1822g。第1組為陰性對(duì)照組，腿部肌肉注射給予5%的乙醇0.2ml/10g體重；第2組為陽(yáng)性對(duì)照組，灌胃給予阿司匹林200mg/kg(相當(dāng)于臨床用量的20倍)；第3組灌胃給予5mg/ml的附子靈溶液，第4組肌肉注射給予5mg/ml的附子靈溶液，第5組肌肉注射給予1.25mg/ml的附子靈溶液，各組給藥容積均為0.2ml/10g，于給藥后30分鐘腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2ml/只，觀察記錄注射醋酸溶液5分鐘后的IO分鐘內(nèi)每只小鼠的扭體反應(yīng)(腹部后腿伸張，臀部高起)次數(shù)。對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)做統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算各劑量組扭體均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差及疼痛抑制率，用t檢驗(yàn)，比較各給藥組與陰性對(duì)照組的組間差異。三、試驗(yàn)結(jié)果注射醋酸后可引起小鼠較持久的疼痛剌激，小鼠反復(fù)出現(xiàn)腹部后腿伸張，臀部高起(扭體)反應(yīng)。阿司匹林陽(yáng)性對(duì)照組，對(duì)冰醋酸所致小鼠扭體次數(shù)明顯下降(P<0.001)，鎮(zhèn)痛作用非常明顯，其疼痛抑制率為81.6X。藥物附子靈肌肉注射和灌胃給予100mg/kg均能明顯減少醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)，疼痛抑制率分別為93.9%和36.1%。但肌肉注射鎮(zhèn)痛作用明顯強(qiáng)于灌胃給藥，即使肌肉注射25mg/kg劑量鎮(zhèn)痛作用也好于100mg/kg的灌胃給藥，其疼痛抑制率為52.0%，結(jié)果見表14。我們同時(shí)也證明，肌肉注射100mg/kg附子靈組小鼠出現(xiàn)萎縮、少動(dòng)的毒性反應(yīng)也較明顯，說(shuō)明在實(shí)際應(yīng)用中，附子靈肌肉注射給藥時(shí)，劑量應(yīng)比灌胃給藥低得多，才能避免毒性反應(yīng)的發(fā)生。表14藥物附子靈對(duì)醋酸所致小鼠疼痛反應(yīng)的影響組另lj劑量(rag/kg)給藥途徑動(dòng)物數(shù)(只)扭體數(shù)(X士SD)疼痛抑制率(％)陰性對(duì)照—im.1027-7±12.4——阿司匹林200ig.105.1±6,0*"81.6附子靈100ig-1017.7±7.4*36.1100i邁.101.7±2.6***93.925ira.1013.3±16.0*52.0注:t檢驗(yàn)，與陰性對(duì)照組相比，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001四、試驗(yàn)結(jié)論肌肉注射藥物附子靈100和25mg/kg劑量均有明顯的鎮(zhèn)痛作用，疼痛抑制率分別為93.9%和52.0%。相同劑量肌肉注射給藥鎮(zhèn)痛作用明顯強(qiáng)于灌胃給藥，但同時(shí)毒性反應(yīng)也重于灌胃給藥，說(shuō)明，在實(shí)際應(yīng)用中，附子靈肌肉注射給藥時(shí)，劑量應(yīng)比灌胃給藥低得多，才能避免毒性反應(yīng)的發(fā)生。試驗(yàn)例9附子靈皮膚給藥的鎮(zhèn)痛作用試驗(yàn)試驗(yàn)證明，藥物附子靈皮膚外用約800mg/kg劑量能明顯減少由醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)，疼痛抑制率為44.4%;400mg/kg劑量組盡管疼痛抑制率為36.1%，但小鼠扭體反應(yīng)數(shù)與陰性對(duì)照組相比，無(wú)顯著性差異，顯示鎮(zhèn)痛作用不明顯。結(jié)果表明，附子靈作皮膚外用發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用，所用劑量較高。表明附子靈的皮膚吸收效率不高，今后若能改進(jìn)賦形劑的添加，促進(jìn)附子靈的皮膚吸收，將有助于降低劑量，降低成本?！⒃囼?yàn)材料1、試驗(yàn)藥品及配制附子靈，近白色粉末，由成都芝芝藥業(yè)有限公司提供。稱取附子靈400mg，加入2.5ml乙醚溶解后，加入到2.lg醫(yī)藥凡士林中，充分混勻，37t:烘箱過(guò)夜揮去乙醚，制成含附子靈約16mg/g的凡士林膏，備用。阿司匹林腸溶片，白色，25mg/片，徐州恩華藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號(hào)20050312。取阿司匹林腸溶片4片，研磨，用蒸餾水至10ml，配成含阿司匹林10mg/ml的藥液，備用。取2g醫(yī)藥凡士林，加入2.5ml乙醚，充分混勻，37。C烘箱過(guò)夜揮去乙醚，制成陰性對(duì)照的凡士林膏，備用。2、試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，1822g，由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，一級(jí)動(dòng)物，合格證號(hào)第10號(hào)；飼料購(gòu)于四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物自由飲水，觀察室溫度為21士2t:，相對(duì)濕度為5060%。3、試劑乙醚，分析純，成都科龍化工試劑廠，批號(hào)20050407。硫化鈉分析純，成都化學(xué)試劑廠，批號(hào)20040921。冰醋酸分析純，成都化學(xué)試劑廠，批號(hào)20050423。醫(yī)藥凡士林武漢石油化工廠生產(chǎn)。二、試驗(yàn)方法取昆明種小鼠40只，隨機(jī)分成4組，每組10只，雌雄各半，體重1822g。給藥前一天，用剪刀粗略剪去小鼠背部毛后，用8%硫化鈉溶液脫毛，面積1.5cmX1.5cm。第1組為陰性對(duì)照組，在背部經(jīng)脫毛處理處皮膚均勻涂布陰性對(duì)照的凡士林膏0.lg/只，然后用一層紗布(1.5cmX1.5cm)輕輕覆蓋；第2組為陽(yáng)性對(duì)照組，灌胃給予阿司匹林200mg/kg(相當(dāng)于臨床用量的20倍)；第3組在背部經(jīng)脫毛處理處皮膚均勻涂布含16mg/g附子靈的藥膏0.lg/只；第4組涂布含16mg/g附子靈的藥膏0.05g/只。兩涂藥膏組也在涂藥后用一層紗布(1.5cmX1.5cm)輕輕覆蓋。除第2組在給藥后30分鐘腹腔注射0.6%冰醋酸溶液外，其余各組均在貼敷l.5小時(shí)后腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2ml/只，觀察記錄注射醋酸溶液5分鐘后的10分鐘內(nèi)每只小鼠的扭體反應(yīng)(腹部后腿伸張，臀部高起)次數(shù)。對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)做統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算各劑量組扭體均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差及疼痛抑制率，用t檢驗(yàn)，比較各給藥組與陰性對(duì)照組的組間差異?！?。。，。，*:，，《*,。/、空白組扭體次數(shù)-給藥組扭體次數(shù)，nAe/疼湘抑制率(％)=--^rr7~r~TTT^-xi00%空白組扭體次數(shù)三、試驗(yàn)結(jié)果注射醋酸后可引起小鼠較持久的疼痛剌激，小鼠反復(fù)出現(xiàn)腹部后腿伸張，臀部高起(扭體)反應(yīng)。阿司匹林陽(yáng)性對(duì)照組，對(duì)冰醋酸所致小鼠扭體次數(shù)明顯下降(P<0.001)，23鎮(zhèn)痛作用非常明顯，其疼痛抑制率為81.6%。藥物附子靈作為皮膚外用的嘗試，在約800mg/kg劑量時(shí)能明顯減少由醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)，疼痛抑制率為44.4%;400mg/kg劑量組盡管疼痛抑制率為36.1%，但小鼠扭體反應(yīng)數(shù)與陰性對(duì)照組相比，無(wú)顯著性差異，顯示鎮(zhèn)痛作用不明顯，結(jié)果見表15。結(jié)果表明，附子靈作皮膚外用發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用，所用劑量較高。表明在本實(shí)驗(yàn)中，附子靈的皮膚吸收效率不高，今后若能改進(jìn)賦形劑的添加，促進(jìn)附子靈的皮膚吸收，將有助于降低劑量，降低成本。表15藥物附子靈外用對(duì)醋酸所致小鼠疼痛反應(yīng)的影響組別劑量(nig/kg)給藥途徑動(dòng)物數(shù)(只)扭體數(shù)(5土SD)疼痛抑制率(％)陰性對(duì)照一一外用1027.7±12.4一阿司匹林200ig.105.1±6.(T'81.6附子靈約800外用1015.4±8.9*44.4約4001017.7±8.836.1注:t檢驗(yàn)，與陰性對(duì)照組相比，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001四、試驗(yàn)結(jié)論藥物附子靈皮膚外用約800mg/kg劑量能明顯減少由醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)，疼痛抑制率為44.4%;400mg/kg劑量組盡管疼痛抑制率為36.1%，但小鼠扭體反應(yīng)數(shù)與陰性對(duì)照組相比，無(wú)顯著性差異，顯示鎮(zhèn)痛作用不明顯。結(jié)果表明，附子靈作皮膚外用發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用，所用劑量較高。表明在本實(shí)驗(yàn)中，附子靈的皮膚吸收效率不高，今后若能改進(jìn)賦形劑的添加，使用先進(jìn)的透皮技術(shù)，促進(jìn)附子靈的皮膚吸收，將有助于降低劑量，降低成本?？傊?，本發(fā)明各化合物的用量均在安全范圍之內(nèi)，單獨(dú)使用附子靈藥效明顯，毒性低，附子靈與其它生物堿相互配伍使用均能達(dá)到較好的協(xié)同增效作用。而且，配伍后的藥物組合物與藥效并不呈簡(jiǎn)單的量效線性關(guān)系，而是在一個(gè)特定的配比下，用量較少，藥效最好，達(dá)到了高效、低毒的目的，為臨床提供了新的鎮(zhèn)痛作用藥物。權(quán)利要求具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，其特征在于它是由含有下述重量配比的化合物為有效藥物成分，加上藥物中可以接受的輔料制備而成的藥物制劑式(I)結(jié)構(gòu)的附子靈200-600份、苯甲酰中烏頭原堿0-600份、中烏頭堿0-3份、下烏頭堿0-6份，其中，所述苯甲酰中烏頭原堿、中烏頭堿、下烏頭堿不同時(shí)為零。F2005800202163C00011.tif2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的化合物為有效藥物成分制備而成的藥物制劑式(I)結(jié)構(gòu)的附子靈200-600份、苯甲酰中烏頭原堿200-600份、中烏頭堿1-3份、下烏頭堿2-6份。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的化合物為有效藥物成分制備而成的藥物制劑式(I)結(jié)構(gòu)的附子靈200份、苯甲酰中烏頭原堿200份、中烏頭堿3份、下烏頭堿6份。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的化合物為有效藥物成分制備而成的藥物制劑式(I)結(jié)構(gòu)的附子靈200-600份、中烏頭堿1-3份。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的化合物為有效藥物成分制備而成的藥物制劑式(I)結(jié)構(gòu)的附子靈600份、中烏頭堿1份。6.具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的化合物為有效藥物成分制備而成的藥物制劑式(I)結(jié)構(gòu)的附子靈100-300份、下烏頭堿1-3份。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的化合物為有效藥物成分制備而成的藥物制劑式(I)結(jié)構(gòu)的附子靈100份、下烏頭堿3份。8.具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的化合物為有效藥物成分制備而成的藥物制劑式(I)結(jié)構(gòu)的附子靈25-75份、苯甲酰中烏頭原堿25-75份，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的化合物為有效藥物成分制備而成的藥物制劑式(I)結(jié)構(gòu)的附子靈25份、苯甲酰中烏頭原堿75份。10.根據(jù)權(quán)利要求19任一項(xiàng)所述的具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，其特征在于所述的藥物制劑是口服制劑、外用制劑、注射劑。11.根據(jù)權(quán)利要求IO所述的具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，其特征在于所述的口服制劑是口服液、片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸。12.根據(jù)權(quán)利要求IO所述的具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，其特征在于所述的外用制劑是藥用敷料、軟膏、栓劑、洗劑。專利摘要具有鎮(zhèn)痛作用的藥物，以烏頭類成分為有效藥物成分，與藥物中可以接受的輔助成分共同組成，其中有效藥物成分至少含有式(I)結(jié)構(gòu)的附子靈化合物。其重量配比為附子靈200-600份、苯甲酰中烏頭原堿0-600份、中烏頭堿0-3份、下烏頭堿0-6份。該藥物具有理想的鎮(zhèn)痛功效和較低的毒性，可制成為常用的口服制劑、注射劑或包括洗劑、軟膏劑、栓劑及藥用敷料等在內(nèi)的外用型藥物。文檔編號(hào)A61K31/439GKCN101031298B發(fā)布類型授權(quán)專利申請(qǐng)?zhí)朇N200580020216公開日2010年5月5日申請(qǐng)日期2005年9月1日發(fā)明者王建生申請(qǐng)人:王建生導(dǎo)出引文BiBTeX,EndNote,RefMan專利引用(1),非專利引用(13),