本發(fā)明涉及生物材料,尤其涉及一種基于脫細(xì)胞脂肪組織的光熱抗菌材料、制備方法及應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、組織缺損嚴(yán)重?fù)p害了患者的生活質(zhì)量和健康。近年來,因創(chuàng)傷、疾病及人口老齡化等原因?qū)е碌慕M織缺損患者逐年增加,已經(jīng)成為臨床上的一大難題。因此,臨床對組織修復(fù)材料需求巨大。組織缺損,富含大量的活性氧和炎癥介質(zhì),同時長伴有感染,這將嚴(yán)重阻礙的組織的修復(fù)重建。因此,要求組織修復(fù)材料兼具微環(huán)境調(diào)控能力和抗菌性能。目前,臨床上組織修復(fù)材料層出不窮,然而,組織修復(fù)材料的生物活性和局部微環(huán)境調(diào)控能力方面仍需進(jìn)一步改善。
2、目前針對相關(guān)技術(shù)中存在的組織修復(fù)材料不具備微環(huán)境調(diào)控能力、抗菌能力差等問題,尚未提出有效的解決方案。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足,提供一種基于脫細(xì)胞脂肪組織的光熱抗菌材料、制備方法及應(yīng)用,以解決相關(guān)技術(shù)中存在的組織修復(fù)材料不具備微環(huán)境調(diào)控能力、抗菌能力差等問題。
2、為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:
3、第一方面,提供基于脫細(xì)胞脂肪組織的光熱抗菌材料的制備方法,包括:
4、調(diào)節(jié)ph至弱堿性,將聚多巴胺修飾在脫細(xì)胞脂肪組織的表面,以獲得光熱抗菌材料。
5、在其中的一些實施例中,還包括:
6、將脫細(xì)胞脂肪組織溶解于去離子水,以獲得脫細(xì)胞脂肪組織溶液;
7、將聚多巴胺溶解于脫細(xì)胞脂肪組織溶液,以獲得混合溶液;
8、調(diào)節(jié)混合溶液的ph至弱堿性;
9、分離混合溶液,以獲得光熱抗菌材料。
10、在其中的一些實施例中,還包括:
11、將光熱抗菌材料溶解于去離子水,以獲得光熱抗菌材料溶液;
12、對光熱抗菌材料溶液進(jìn)行冷凍干燥,以獲得光熱抗菌支架。
13、在其中的一些實施例中,聚多巴胺與脫細(xì)胞脂肪組織的質(zhì)量比為0.05~1:1。
14、在其中的一些實施例中,調(diào)節(jié)ph至7~9。
15、在其中的一些實施例中,脫細(xì)胞脂肪組織溶液的濃度為1mg/ml~10mg/ml。
16、在其中的一些實施例中,混合溶液的聚多巴胺濃度為0.5mg/ml~4mg/ml。
17、在其中的一些實施例中,混合溶液的分離方法包括離心、抽濾、超濾。
18、在其中的一些實施例中,光熱抗菌材料溶液的濃度為0.5mg/ml~4mg/ml。
19、在其中的一些實施例中,包括:
20、(一)制備脫細(xì)胞脂肪組織
21、將動物源的脂肪組織在含有10mm?tris和5mm?edta的冷凍緩沖液中用三個循環(huán)冷凍解凍,其中,循環(huán)的溫度為-80℃~37℃;
22、使用pbs緩沖液沖洗脂肪組織三次;
23、使用酶消化溶液消化脂肪組織,其中,酶消化溶液由0.25%胰蛋白酶/0.02%edta組成;
24、在37℃的搖床上以1000rpm孵育過夜;
25、使用99.9%異丙醇對脂肪組織進(jìn)行12小時極性溶劑萃取以去除脂肪液體部分;
26、使用pbs緩沖液對脂肪組織漂洗三次,其中,pbs緩沖液的ph為7.4;
27、將脂肪組織在酶消化溶液中再次孵育4h;
28、使用pbs緩沖液對脂肪組織洗滌三次;
29、將脂肪組織在含有10mg/ml的dnase酶、10mg/mlrnase酶和2000u/ml脂肪酶的溶液中37℃下孵育6小時;
30、使用pbs緩沖液對脂肪組織漂洗三次;
31、將脂肪組織在99.9%異丙醇中再次處理8h,作為最終的極性溶劑萃取以充分去除脂肪,以得到脫細(xì)胞脂肪組織;
32、使用75%乙醇、pbs緩沖液分別對脫細(xì)胞脂肪組織洗滌三次;
33、使用乙酸溶解脫細(xì)胞脂肪組織,洗滌,調(diào)節(jié)ph值為7.4,然后并冷凍干燥,以獲得脫細(xì)胞脂肪組織;
34、(二)制備聚多巴胺修飾的脫細(xì)胞脂肪組織
35、將脫細(xì)胞脂肪組織置于無水乙醇,并使用去離子水洗滌三次,以獲得純凈的脫細(xì)胞脂肪組織;
36、將純凈的脫細(xì)胞脂肪組織溶于去離子水中,以獲得脫細(xì)胞脂肪組織溶液;
37、將聚多巴胺充分溶解于脫細(xì)胞脂肪組織溶液,以獲得混合溶液,其中,在混合溶液中,聚多巴胺的濃度為0.5mg/ml~4mg/ml;
38、使用tris緩沖液調(diào)節(jié)混合溶液的ph至7~9,并于室溫下劇烈攪拌1h;
39、(三)制備光熱抗菌材料
40、將混合溶液離心,并使用超純水洗滌三次,以獲得光熱抗菌材料。
41、在其中的一些實施例中,還包括:
42、(四)制備光熱抗菌支架
43、將光熱抗菌材料溶于去離子水中,以獲得光熱抗菌材料溶液,其中,光熱抗菌材料溶液的濃度為0.5mg/ml~4mg/ml;
44、將光熱抗菌材料溶液進(jìn)行冷凍干燥,以獲得光熱抗菌支架。
45、第二方面,提供一種基于脫細(xì)胞脂肪組織的光熱抗菌材料,由第一方面所述的制備方法制備而成,包括脫細(xì)胞脂肪組織和聚多巴胺。
46、在其中的一些實施例中,聚多巴胺與脫細(xì)胞脂肪組織的質(zhì)量比為0.05~1:1。
47、第三方面,提供一種如第一方面所述的的制備方法制備得到的光熱抗菌材料或如第二方面所述的光熱抗菌材料在制備生物修復(fù)材料的應(yīng)用。
48、本發(fā)明采用以上技術(shù)方案,與現(xiàn)有技術(shù)相比,具有如下技術(shù)效果:
49、本發(fā)明的一種基于脫細(xì)胞脂肪組織的光熱抗菌材料、制備方法及應(yīng)用,該光熱抗菌材料由天然成分組成,來源廣泛,具有優(yōu)異的生物相容性和活性;在激發(fā)光作用下,該光熱抗菌材料能夠?qū)崟r精準(zhǔn)調(diào)控局部微環(huán)境,促進(jìn)組織修復(fù);在激發(fā)光作用下,該光熱抗菌材料可以引起局部熱量,具有一定的抗菌性能。
1.一種基于脫細(xì)胞脂肪組織的光熱抗菌材料的制備方法,其特征在于,包括:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,還包括:
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,還包括:
4.根據(jù)權(quán)利要求1~3任一所述的制備方法,其特征在于,聚多巴胺與脫細(xì)胞脂肪組織的質(zhì)量比為0.05~1:1;和/或
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,脫細(xì)胞脂肪組織溶液的濃度為1mg/ml~10mg/ml;和/或
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于,光熱抗菌材料溶液的濃度為0.5mg/ml~4mg/ml。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,包括:
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法,其特征在于,還包括:
9.一種基于脫細(xì)胞脂肪組織的光熱抗菌材料,由權(quán)利要求1~7任一所述的制備方法制備而成,其特征在于,包括脫細(xì)胞脂肪組織和聚多巴胺。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的光熱抗菌材料,其特征在于,聚多巴胺與脫細(xì)胞脂肪組織的質(zhì)量比為0.05~1:1。
11.一種如權(quán)利要求1~7任一所述的制備方法制備得到的光熱抗菌材料或如權(quán)利要求8~9任一所述的光熱抗菌材料在制備生物修復(fù)材料的應(yīng)用。