本發(fā)明涉及具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物及其制備方法，更具體地，涉及具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物及其制備方法，其中，將高粱莖和葉粉碎后，獲得高粱粉末，提供通過用腸道細(xì)菌和乳桿菌接種和發(fā)酵所述高粱粉末而獲得的發(fā)酵材料，從而除去細(xì)胞中的自由基并阻止脂質(zhì)過氧化、脂氧合酶和透明質(zhì)酸酶的活性。此外，本發(fā)明涉及包含具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高梁發(fā)酵產(chǎn)物的化妝料組合物及其制備方法，通過提供含有高粱發(fā)酵產(chǎn)物的化妝料組合物用于改善皮膚的炎癥、過敏和特應(yīng)性皮膚并防止皮膚刺激物的副作用。
背景技術(shù)：
：1950年代中期，d.harman提出了一種自由基理論，最近引起學(xué)術(shù)界和相關(guān)工業(yè)的關(guān)注。由于數(shù)種原因，自由基存在于人體內(nèi)。自由基導(dǎo)致細(xì)胞的破壞、真皮層中結(jié)締組織的切割或交聯(lián)，從而導(dǎo)致諸如皺紋形成、皮膚癌、細(xì)胞破壞、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎和痤瘡等各種問題。自由基的產(chǎn)生由白血細(xì)胞吞噬、線粒體中atp生產(chǎn)過程中的電子傳遞系統(tǒng)、髓過氧化物(mpo)功能、紫外線、煙霧、正常代謝過程、應(yīng)激、污染物、細(xì)菌等引起。人體具有超氧化物歧化酶(sod)、過氧化氫酶、維生素e、維生素c和泛酚等抗氧化劑(自由基清除劑)。然而，抗氧化系統(tǒng)會開始逐漸由年齡、污染、紫外線和應(yīng)激所破壞。因此，抗氧化劑體系失效，自由基會逐漸增加。自由基破壞真皮結(jié)締組織如膠原蛋白、彈性蛋白和透明質(zhì)酸，由此在皮膚的某些區(qū)域引起沉陷現(xiàn)象(皺紋)，并且，自由基通過氧化細(xì)胞膜的脂質(zhì)部分導(dǎo)致細(xì)胞的破壞現(xiàn)象，從而引起皮膚痤瘡和皮膚癌等疾病。此外，自由基可能在形成黑色素期間參與自氧化(多巴醌黑色素)，從而引起黑斑病、雀斑和皺紋(journalofkoreasocietyofcosmetics，vol.23，no.1，75-132)。炎癥是一種生理反應(yīng)，用于保護(hù)活體免受有害環(huán)境的侵害，例如細(xì)菌和物理損傷等異物的入侵。炎癥現(xiàn)象引起了數(shù)種多形核粒細(xì)胞(pmn)和免疫物質(zhì)的大量增加。這些細(xì)胞可以通過分泌炎癥細(xì)胞產(chǎn)物如各種類型的蛋白水解酶和細(xì)胞分裂素來進(jìn)行治愈和防御。酶，諸如彈性蛋白酶、透明質(zhì)酸酶和脂氧合酶作為在炎癥期間產(chǎn)生的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)分解酶是眾所周知的。同時，上述酶的功能有時會對鄰近的組織細(xì)胞和非細(xì)胞成分產(chǎn)生損傷甚至對其有害。因此，炎癥在適當(dāng)?shù)臈l件下會被恢復(fù)到正常功能，然而，當(dāng)刺激炎癥的刺激物不消失或不斷產(chǎn)生時，結(jié)果是引起慢性炎癥，這會對組織造成更嚴(yán)重的損傷。因此，細(xì)胞和結(jié)締組織被過度炎癥引起的蛋白水解酶損傷，對結(jié)締組織的損傷降低了皮膚的彈性，引起皺紋。此外，所述損傷對細(xì)胞的再生和增殖產(chǎn)生負(fù)面影響，從而導(dǎo)致皮膚老化加快。此外，皮膚的炎癥以局部紅斑和腫脹為特性。當(dāng)所述損傷變得更大時，通過由成纖維細(xì)胞增殖和結(jié)締組織蛋白的積聚引起的瘢痕組織會在分散步驟中恢復(fù)為正常組織。然而，當(dāng)組織受到嚴(yán)重?fù)p傷和炎癥持續(xù)時，將組織恢復(fù)到正常的組織結(jié)構(gòu)和功能變得更加困難。通過使用花生四烯酸的方法，也產(chǎn)生刺激白細(xì)胞隨炎癥遷移的介質(zhì)。該路徑包括通過環(huán)氧合酶的方法和脂氧合酶的方法，并且由酶產(chǎn)生的白三烯和前列腺素作為炎癥誘導(dǎo)因子。因此，脂氧合酶和環(huán)氧合酶的抑制劑可以顯示出作為抑制炎性誘導(dǎo)物質(zhì)的產(chǎn)生、抑制細(xì)胞膜破壞以及由炎癥期間產(chǎn)生的活性氧引起的脂質(zhì)過氧化作用的物質(zhì)的抗炎作用。此外，由過度炎癥產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶得到抑制，以保護(hù)可能被蛋白酶和脂肪酶損傷的細(xì)胞，進(jìn)而抑制皮膚老化。此外，特應(yīng)性皮膚主要發(fā)生在嬰兒期，所以稱為“出生熱”。特應(yīng)性皮膚主要是由于死亡的皮膚細(xì)胞層內(nèi)的神經(jīng)酰胺含量降低而產(chǎn)生的。當(dāng)死亡的皮膚細(xì)胞層的保濕功能降低時，皮膚變干，容易產(chǎn)生死亡的皮膚細(xì)胞，當(dāng)皮膚屏障功能降低時，刺激誘導(dǎo)物質(zhì)侵入死亡的皮膚細(xì)胞層引起刺激，當(dāng)難以侵入正常皮膚的抗原蛋白質(zhì)侵入時，會產(chǎn)生皮膚過敏等，從而能引起難以忍受的瘙癢癥狀。因此，超過90％的特應(yīng)性患者感染葡萄球菌，其中，由于患者因難以忍受瘙癢而撓傷，患者有時被細(xì)菌感染，然而，根據(jù)最近的報告，細(xì)菌的外毒素誘導(dǎo)刺激身體免疫系統(tǒng)的化學(xué)物質(zhì)而引起過敏，從而使特應(yīng)性皮膚惡化。也就是說，細(xì)菌本身就是一種過敏原。眾所周知，目前特應(yīng)性皮膚由四個原因引起。首先是遺傳因素。由于作為保護(hù)皮膚的皮膚保護(hù)層的細(xì)胞膜的磷脂以及作為形成細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的必需脂肪酸的γ-亞油酸(gla)這一粘合物質(zhì)的狀態(tài)不足，皮膚保護(hù)層不能硬化，皮膚表面的水分容易失去，易于由外部刺激引起過敏。第二個原因是由環(huán)境因素引起。隨著現(xiàn)代人的居住環(huán)境發(fā)生變化，公寓的生活得到普及，生活環(huán)境變?yōu)楦稍餇顟B(tài)，特應(yīng)性皮膚在世界各地越來越多。因此，保水能力下降，皮膚保護(hù)功能喪失，皮膚甚至對于少量的刺激物也會敏感地反應(yīng)，從而產(chǎn)生過敏。第三個原因是由活性氧引起。過氧化物脂質(zhì)是由活性氧產(chǎn)生，導(dǎo)致特應(yīng)性皮膚。作為第四個原因，特應(yīng)性皮膚是由細(xì)菌、病毒和真菌的感染引起的。據(jù)報道，這些原因是以組合方式相關(guān)的(dermatology，韓國皮膚病學(xué)協(xié)會出版委員會，ryomoongak.p.co，1992)。例如，關(guān)于抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚的相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)，韓國專利公開號10-1051077公開了2-哌嗪基-4,5-二取代-1,3-噻唑衍生物、其制備方法、由含有其作為活性成分的spc活性誘導(dǎo)的抗炎癥治療劑。具體地說，上述專利文件的公開內(nèi)容涉及與炎癥相關(guān)的疾病的治療劑，對于由含有2-哌嗪基-4,5-二取代-1,3-噻唑衍生物或由其分離的光學(xué)異構(gòu)體作為活性成分的spc受體的活性引起的其它疾病、瘙癢或皮膚感染引起的特應(yīng)性皮炎有效。上述相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)的優(yōu)點在于大量生產(chǎn)是可能的并且是便宜的。然而，上述相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)是通過人工有機(jī)合成來制造化合物，因而存在因合成時的穩(wěn)定性低而難以獲得實質(zhì)效果的問題，并且化合物造成因人而異的副作用。因此，為了降低該技術(shù)的副作用，需要包含對有機(jī)合成化合物以外的、人體副作用較少的天然提取物的組合物。作為解決上述問題的相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)，韓國專利公開號10-1262813公開了一種組合物，其包含苦木提取物作為預(yù)防和治療特應(yīng)性皮炎或過敏性皮膚病的活性成分。更具體地，通過使用回流提取器濃縮所述苦木提取物并冷凍干燥該濃縮物，獲得苦木提取物。相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)涉及通過提取天然提取物而獲得的組合物，其優(yōu)點在于其比通過有機(jī)合成提取的治療劑具有更少的副作用，活性成分的破壞最小化。然而，通過使用回流提取器提取的方式存在因使用高能量而增加成本、降低穩(wěn)定性的問題，并且，因為在高溫下進(jìn)行提取，由于成分變性引起對特應(yīng)性皮炎或過敏性皮膚疾病的效果降低。因此，為了降低技術(shù)的副作用，需要通過發(fā)酵進(jìn)行提取，同時盡量減少能量損失和提取成分的變性，而不是在高溫下加熱的方式。作為解決上述問題的相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)，韓國專利公開號10-1403523公開了一種制備主要含有發(fā)酵發(fā)芽谷物的發(fā)酵化妝品的方法。具體地，上述專利文件的公開內(nèi)容提供了通過研磨機(jī)粉碎顆粒，將纖維素酶植入谷物并發(fā)酵所述谷物而獲得的發(fā)酵化妝品。由于相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)是通過將谷物(糙米、綠豆、黑芝麻、高粱、薏仁、黑豆和小黑豆)發(fā)芽，植入植物乳桿菌并在室溫的溫度條件下發(fā)酵而實現(xiàn)，因此，其優(yōu)點在于，沒有能量損失、沒有因成分變性引起的穩(wěn)定性降低和損失。然而，它的缺點在于發(fā)酵需要花費太多時間，并且不能實現(xiàn)抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用。因此，需要減少谷物發(fā)酵時間的方法，同時也需要具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的天然提取物。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明是為了解決上述問題而提出的，其目的在于提供具有抗炎、抗過敏、特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物及其制備方法，所述方法包括：通過將高粱莖(高粱秸稈)和葉粉碎，獲得粉末形式的高粱，通過使用酸對所獲得的高粱粉末進(jìn)行水解，通過使用中和劑調(diào)節(jié)ph值，對拉烏爾(raoultella)菌株或明串珠菌(leuconostoc)菌株進(jìn)行接種和發(fā)酵，以獲得高粱發(fā)酵產(chǎn)物，從而縮短發(fā)酵時間，并具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用。另外，本發(fā)明提供含有高粱發(fā)酵產(chǎn)物的化妝料組合物，本發(fā)明的目的在于提供一種含有高粱發(fā)酵產(chǎn)物的化妝料組合物，其具有用于細(xì)胞內(nèi)自由基清除作用、脂質(zhì)過氧化反應(yīng)抑制作用、透明質(zhì)酸酶活性抑制作用、脂氧合酶活性抑制作用的抗炎、抗過敏和特異性皮膚改善作用。本發(fā)明提供了具有消炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物，其中，將高粱粉碎，酸水解，中和，并使用腸道細(xì)菌或乳桿菌進(jìn)行發(fā)酵。另外，本發(fā)明提供一種制備具有抗炎、抗過敏、特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物的方法，所述方法包括如下步驟：通過將高粱粉碎，獲得高粱粉末(s10)；通過酸水解所述高粱粉末，獲得高粱溶液(s20)；通過在所述高粱溶液中加入中和劑調(diào)節(jié)ph(s30)；使用用于發(fā)酵的腸道細(xì)菌或乳桿菌接種所述調(diào)節(jié)ph后的高粱溶液之后，獲得高粱發(fā)酵產(chǎn)物(s40)；以及通過滅菌、過濾和冷凍干燥所述高粱發(fā)酵產(chǎn)物，獲得高粱發(fā)酵粉末(s50)。此外，本發(fā)明提供含有具有抗炎、抗過敏、特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物的化妝料組合物。如上所述，根據(jù)本發(fā)明，制備具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物的方法包括：通過將高粱莖(高粱秸稈)和葉粉碎，獲得粉末形式的高粱；通過使用酸對所獲得的高粱粉末進(jìn)行水解；通過加入中和劑調(diào)節(jié)ph；以及對拉烏爾(raoultella)菌株或明串珠菌(leuconostoc)菌株進(jìn)行接種和發(fā)酵，以提供高粱發(fā)酵產(chǎn)物，使得可以除去細(xì)胞中的自由基，同時可以抑制脂質(zhì)過氧化、透明質(zhì)酸酶活性和脂氧合酶活性。此外，根據(jù)本發(fā)明，含有具有抗炎、抗過敏、特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物的化妝料組合物可以改善皮膚的炎癥、過敏和特應(yīng)性皮膚，并且可以防止皮膚刺激物的副作用。附圖說明圖1是表示本發(fā)明的具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法的流程圖。具體實施方式通過對各種天然材料進(jìn)行調(diào)研以發(fā)現(xiàn)具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的基礎(chǔ)材料，本發(fā)明已經(jīng)發(fā)現(xiàn)高粱發(fā)酵產(chǎn)物具有非常優(yōu)異的效果，例如抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用，通過使用該發(fā)酵產(chǎn)物同時解決產(chǎn)品的穩(wěn)定性和安全性。此外，還發(fā)現(xiàn)在實驗結(jié)果中，高粱發(fā)酵產(chǎn)物與預(yù)定濃度或更高濃度的化妝料組合物混合并直接施用于人皮膚上，皮膚狀態(tài)明顯得到改善。以下，對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。本發(fā)明提供了具有消炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物，其中，將高粱粉碎，酸水解，中和，并使用腸道細(xì)菌或乳桿菌發(fā)酵。高粱(sorghumbicolor)是單子葉禾本科植物的一年生植物，由于耐旱性強(qiáng)，在貧瘠和干燥的土壤中生長，作為亞洲和非洲的重要食物來源而被栽培，在韓國也被作為食物來源與水稻、大麥、小麥和玉米一起而被栽培。高梁有各種各樣的種類，根據(jù)用途分為食用高梁、糖用高梁和帚用高梁等(chang等，2005)。帚用高梁在穗上沒有莖節(jié)，連接穗體(pod)的莖桿長度為20厘米至30厘米，果實具有即使是脫粒也很難剝開的厚殼，因此果實只能作為種子使用。作為民間療法，帚用高梁已經(jīng)被用于各種癥狀，如改善食欲、促進(jìn)消化、維持體溫、保護(hù)胃腸道和解毒。已知高粱含有大量的活性成分，例如膳食纖維、酚類化合物和單寧，然而，紅高粱具有不包括單寧的特征。酚類化合物主要包括類黃酮、酚酸和花青素，其中大多數(shù)被稱為黃酮類化合物(ryuhs,kimj,kimhs.2006.enhancingeffectofsorghumbicolorl.moench(sorghum,susu)extractsonmousespleenandmacrophagecellactivation.j.koreandiet.assoc.19:176-182.)(chaeky,hongjs.2006.qualitycharacteristicsofsulgiddukwithdifferentamountsofwaxysorghumflour.koreanjfoodcookerysci22:363-369.,changhg,parkys.2005.effectsofwaxyandnormalsorghumfloursonspongecakeproperties.foodengprog9:199-207.)(kimko,kimhs,ryuhs.2006.effectofsorghumbicolorl.moench(sorghum,su-su)waterextractsonmouseimmunecellactivation.jkoreandietassoc12:82-88.)。盡管可以使用高粱的各個部位，但優(yōu)選使用莖或葉。將高粱粉碎，酸水解，中和，得到具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的活性成分，使用腸道細(xì)菌或乳桿菌發(fā)酵，得到高粱發(fā)酵產(chǎn)物。也就是說，本發(fā)明的高粱發(fā)酵產(chǎn)物具有除去細(xì)胞中的自由基并抑制脂質(zhì)過氧化、脂氧合酶和透明質(zhì)酸酶的活性的優(yōu)異效果。將參照附圖描述使用高粱制備高粱發(fā)酵產(chǎn)物的方法。圖1是表示本發(fā)明的具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵制品的制備方法的流程圖。將參照附圖描述本發(fā)明的優(yōu)選實施例。本發(fā)明的具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法優(yōu)選包括以下步驟，但不限于此。本發(fā)明包括通過在粉碎機(jī)中將高粱粉碎，獲得高粱粉末(s10)；通過酸水解所述高粱粉末，獲得高粱溶液(s20)；通過向所述高粱溶液中加入中和劑，調(diào)節(jié)ph(s30)；使用腸道細(xì)菌或乳桿菌接種所述調(diào)節(jié)ph值后的高梁溶液之后，使所述接種后的溶液發(fā)酵，獲得高粱發(fā)酵產(chǎn)物(s40)；以及通過對所述高粱發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行滅菌，過濾和冷凍干燥，獲得高粱發(fā)酵粉末(s50)。本發(fā)明的制備方法將對于每個步驟分別進(jìn)行描述。實施通過將粉碎機(jī)中的高粱粉碎獲得高梁粉末的步驟s10。將高粱在陰涼處干燥，以2500rpm至3500rpm的轉(zhuǎn)速在粉碎機(jī)中將其粉碎，其中，優(yōu)選的粉碎后的高粱粒徑為約0.1μm-35μm。此外，粉碎高粱期間，當(dāng)粉碎機(jī)的轉(zhuǎn)速為2500rpm以下時，由于高粱粘在另一高粱上，高粱幾乎不被粉碎；當(dāng)粉碎機(jī)的轉(zhuǎn)速為3500rpm以上時，由于能量成本的增加、噪音以及高粱與粉碎機(jī)之間的摩擦，高粱的活性成分被破壞。實施通過酸水解所述高粱粉末獲得所述高粱溶液的步驟s20。通過選擇硫酸、鹽酸、硝酸、乙酸、甲酸和磷酸中的至少一種，可以將步驟s10中得到的高粱粉末進(jìn)行酸水解，其中，更優(yōu)選使用硫酸、硝酸或鹽酸進(jìn)行酸水解，最優(yōu)選地，可以使用硫酸進(jìn)行酸水解。根據(jù)本發(fā)明，硫酸從0.1％-3.0％(v/v)的稀硫酸制備，并且加入稀硫酸后，將步驟s10中獲得的高粱粉末在100℃-130℃進(jìn)行15-60分鐘的熱處理。優(yōu)選使用0.5-2.0％(v/v)的稀硫酸進(jìn)行20-40分鐘的熱處理。將所得產(chǎn)物保持在室溫，并使用離心或膜過濾器分離以獲得固相和高粱溶液。實施通過將中和劑添加到所述高粱溶液中調(diào)節(jié)ph的步驟s30。通過選擇碳酸鈣(caco3)、氫氧化鈉(naoh)、碳酸鈉(na2co3)和氫氧化鈣(ca(oh)2)中的至少一種中和所述高粱溶液，優(yōu)選地，通過加入碳酸鈣將ph值調(diào)節(jié)至5.0至7.0。實施使用腸道細(xì)菌或乳桿菌接種所述調(diào)節(jié)ph后的高粱溶液之后，得到發(fā)酵的高粱發(fā)酵產(chǎn)物的步驟s40。通過使用0.1μm-0.5μm的膜過濾器過濾步驟s30中獲得的提取物，經(jīng)過預(yù)培養(yǎng)活性增加的腸道細(xì)菌或乳桿菌進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)使得具有0.9的od570值，然后，將其接種到高粱懸浮液中，使其成為相對于總重量為1重量％至5重量％(v/v)的濃度。此外，優(yōu)選單獨使用或混合使用腸道細(xì)菌和乳桿菌。優(yōu)選地，腸道細(xì)菌(拉烏爾菌)可以包括選自以下的至少一種菌株：解鳥氨酸拉烏爾菌(raoultellaornitholytica)、植生拉烏爾菌(raoultellaplanticola)和土生拉烏爾菌(raoultellaterrigena)。優(yōu)選地，乳桿菌(明串珠菌屬)包括選自下列乳桿菌的至少一種菌株：肉色明串珠菌(leaconostoccarnosum)、嗜檸檬酸明串珠菌(leuconostoccitreum)、leuconostocdurionis、欺詐明串珠菌(leuconostocfallax)、leuconostocficulneum、leuconostocfructosum、leuconostocgarlicum、leuconostocgasicomitatum、冷明串珠菌(leuconostocgelidum)、仁海明串珠菌(leuconostocinhae)、泡菜明串珠菌(leuconostockimchii)、乳酸明串珠菌(leuconostoclactis)、腸膜明串珠菌(leuconostocmesenteroides)、leuconostocpseudoficulneum和假腸膜明串珠菌(leaconostocpseudomesenteroides)。在30℃-37℃的培養(yǎng)溫度、ph4.0-6.0、攪拌速度150rpm-220rpm的條件下，通過使用10l的發(fā)酵罐培養(yǎng)24小時-48小時，得到高粱發(fā)酵產(chǎn)物。實施通過對高粱發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行滅菌，過濾和冷凍干燥獲得高粱發(fā)酵粉末的步驟s50。所述發(fā)酵溶液進(jìn)行滅菌(121℃、15分鐘、1.5個大氣壓)以防止步驟s40中獲得的發(fā)酵產(chǎn)物被進(jìn)一步發(fā)酵。將乙醇加入滅菌的高粱發(fā)酵產(chǎn)物中以防止發(fā)酵微生物進(jìn)一步增殖，將濃度調(diào)節(jié)至乙醇水溶液最終濃度為30％(v/v)，并將高粱發(fā)酵產(chǎn)物在沸水中進(jìn)行熱提取，所述熱提取在裝配有冷凝器的提取器中、于70℃-90℃的范圍內(nèi)進(jìn)行2至5次，每次進(jìn)行3小時。所提取的高粱發(fā)酵產(chǎn)物通過100-500目的過濾器進(jìn)行過濾，并用advantec5過濾器和watmangf/c150mm過濾器在30℃-60℃的溫度下過濾兩次，最后僅針對高粱發(fā)酵液進(jìn)行精確過濾。此外，通過使用減壓濃縮器將在50℃濃縮后的濃縮物冷凍干燥，從而獲得干燥粉末。根據(jù)本發(fā)明，具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物可以改善皮膚的炎癥、過敏和特應(yīng)性皮膚，不會對皮膚有毒性，可施用于敏感皮膚，并且即使長期使用時也不會產(chǎn)生皮膚副作用，因此，所述高粱發(fā)酵產(chǎn)物可用于各種化妝料組合物中。此外，根據(jù)本發(fā)明，含有具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物的化妝料組合物具有優(yōu)異的抗炎和皮膚改善效果，例如細(xì)胞內(nèi)自由基清除作用、抑制脂質(zhì)過氧化、透明質(zhì)酸酶活性和脂氧合酶活性的抑制，所述化妝料組合物是安全的，因為在皮膚刺激試驗中沒有副作用，并且是由于生產(chǎn)成本低而易于使用的化妝品材料。因此，它是具有優(yōu)異的功能性、安全性、低成本和容易使用的優(yōu)異的化妝料組合物。也就是說，高粱發(fā)酵化妝料組合物對于配方?jīng)]有特別限制，例如可以配制為化妝水(cosmeticwater)、爽膚水(toner)、乳液(lotion)、面霜、粉底、精華素、凝膠、面膜、乳液型紫外線阻隔霜、乳劑型粉底、乳液型隔離霜(emulsiontypemakeupbase)、油餅型粉底(oilcaketypefoundation)、干濕兩用粉餅(two-waycake)、粉餅(powderpact)或按摩膏的形式；優(yōu)選地，可以配制為爽膚水、營養(yǎng)乳液、營養(yǎng)霜、按摩膏、精華素、面膜等的形式。用于抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物可以作為液相以0.1重量％至30重量％的量加入到所述化妝料組合物中，按照干重0.001％至5％、優(yōu)選0.01％至5％的量添加到化妝料組合物中，同時，通過使用裝備有冷凝器的蒸餾裝置循環(huán)利用蒸發(fā)出的溶劑。以下，通過本發(fā)明的實施方式、對比例、實驗例，對本發(fā)明的結(jié)構(gòu)和效果進(jìn)行詳細(xì)說明，但本發(fā)明不限于此。實施例1制備根據(jù)本發(fā)明的高粱發(fā)酵提取物和高粱粉末的方法(溶劑-水)用流水清洗高粱葉或莖，以去除異物，在通風(fēng)陰涼處干燥。將粉碎機(jī)中粉碎的1kg粉末加入到10l制備成2％(v/v)硫酸濃度的稀硫酸，在121℃進(jìn)行30分鐘的熱處理，冷卻，在室溫下保持，在其中加入碳酸鈣(caco3)，調(diào)節(jié)至ph5.5，并使用離心機(jī)離心分離，從而制備得到用于發(fā)酵的預(yù)處理溶液。將10l預(yù)處理溶液引入到20l的發(fā)酵罐，用300ml培養(yǎng)液接種，所述培養(yǎng)液通過預(yù)培養(yǎng)解鳥氨酸拉烏爾菌使其od570值為0.9，在培養(yǎng)溫度30℃-37℃、ph4.0-6.0、攪拌速度150-220rpm、培養(yǎng)時間48小時的條件下進(jìn)行發(fā)酵。發(fā)酵結(jié)束后，對發(fā)酵溶液進(jìn)行滅菌(121℃、15分鐘、1.5個大氣壓)以防止發(fā)酵溶液被進(jìn)一步發(fā)酵。水作為溶劑加入到經(jīng)滅菌的高粱發(fā)酵產(chǎn)物中以防止發(fā)酵微生物進(jìn)一步增殖，將高粱發(fā)酵產(chǎn)物在沸水中進(jìn)行熱提取，所述熱提取在裝配有冷凝器的提取器中、于70℃-90℃的范圍內(nèi)進(jìn)行2至5次，每次進(jìn)行3小時。所述提取物通過300目的過濾器進(jìn)行過濾，并使用advantec5過濾器和watmangf/c150mm過濾器在50℃的溫度下過濾兩次，最后僅針對0.1μm或更小的所述發(fā)酵提取物進(jìn)行精確過濾。此外，通過使用減壓濃縮器，在50℃濃縮該濃縮物，冷凍干燥，由此獲得97.1克干粉。實施例2制備根據(jù)本發(fā)明的高粱發(fā)酵提取物和高粱粉末的方法(溶劑-30％(v/v)乙醇)采用30％(v/v)乙醇作為溶劑，以與實施例1相同的方式進(jìn)行提取、濃縮和冷凍干燥，得到105.1g干粉。實施例3制備根據(jù)本發(fā)明的高粱發(fā)酵提取物和高粱粉末的方法(溶劑-50％(v/v)的乙醇)采用50％(v/v)乙醇作為溶劑，以與實施例1相同的方式進(jìn)行提取、濃縮和冷凍干燥，得到103.9g干粉。實施例4制備根據(jù)本發(fā)明的高粱發(fā)酵提取物和高粱粉末的方法(溶劑-70％(v/v)乙醇)采用70％(v/v)乙醇作為溶劑，以與實施例1相同的方式進(jìn)行提取、濃縮和冷凍干燥，得到102.7g干粉。對比例1制備根據(jù)本發(fā)明的高粱提取物和高粱粉末的方法(溶劑-水)用流水清洗高粱葉或莖，以除去異物，在透氣陰涼處干燥。然后，將20kg水加入到處于粉碎機(jī)中的1kg粉碎粉末中，使用裝配有冷凝器的提取器進(jìn)行提取，提取條件為：在80℃熱水中加熱5小時，通過300目的過濾器在熱的溫度下過濾以從藥材中分離提取物，密封以防止污染，在室溫下放置3天，使用advantec5過濾器和watmangf/c150mm過濾器對沉淀過濾兩次，使用減壓濃縮器在50℃進(jìn)行濃縮，冷凍干燥，得到干重71.2g。對比例2制備根據(jù)本發(fā)明的高粱提取物和高粱粉末的方法(溶劑-30％(v/v)乙醇)采用30％(v/v)乙醇作為溶劑，以與對比例1相同的方式進(jìn)行提取、濃縮和冷凍干燥，得到干重82.6g。對比例3制備根據(jù)本發(fā)明的高粱提取物和高粱粉末的方法(溶劑-乙醇50％(v/v))采用50％(v/v)乙醇作為溶劑，以與對比例1相同的方式進(jìn)行提取、濃縮和冷凍干燥，得到干重78.3g。對比例4制備根據(jù)本發(fā)明的高粱提取物和高粱粉末的方法(溶劑-乙醇70％(v/v))采用70％(v/v)乙醇作為溶劑，以與對比例1相同的方式進(jìn)行提取、濃縮和冷凍干燥，得到干重77.5g。制備實施例1含有根據(jù)本發(fā)明的具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物的化妝水的配制品以下是包含實施例2的高粱葉和莖發(fā)酵產(chǎn)物粉末的化妝料的化妝水(皮膚乳液)的配方例。表1編號原材料含量(重量％)1高粱發(fā)酵粉末(實施例2)1.02甘油3.03丁二醇2.04丙二醇2.05聚氧乙烯氫化蓖麻油1.06乙醇10.07三乙醇胺0.18防腐劑少量9著色劑少量10香料少量11純凈水余量制備方法將編號為2、3、4和8的物料順序加入編號為11的物料中，攪拌并溶解，通過在約60℃加熱，將編號為5的物料溶解，將編號為10的物料加入并溶解，然后將其加入到編號為11的物料中。最后，將編號為1、6、7和9的物料加入，充分?jǐn)嚢?，老化。制備實施?含有根據(jù)本發(fā)明的具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物的營養(yǎng)乳液的配制品表2示出包含實施例2的高粱葉和莖發(fā)酵產(chǎn)物粉末的化妝料的營養(yǎng)乳液的配方例。表2制備方法將編號為10、11、13和16的物料在80℃-85℃之間的溫度下加熱，同時混合和攪拌，將其加入到制備單元，啟動乳化器，將編號為2、3、4、5、6、7、8、9和12的物料在80℃-85℃之間的溫度加熱的同時溶解，乳化。乳化結(jié)束后，在使用攪拌器攪拌該乳液的同時，冷卻至50℃后，將編號為15的物料加入所述乳液中，冷卻至40℃后，將編號為14的物料加入所述乳液中，冷卻至35℃后，將編號為1的物料加入所述乳液中，冷卻至25℃，老化。制備實施例3含有根據(jù)本發(fā)明的具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物的營養(yǎng)霜的配制品表3示出了包含實施例2的高粱葉和莖發(fā)酵產(chǎn)物粉末的化妝料的營養(yǎng)霜的配方例。表3編號原材料含量(重量％)1高粱發(fā)酵粉末(實施例2)1.02硬脂酸2.03鯨蠟醇2.04單硬脂酸甘油酯2.05聚氧乙烯失水山梨醇單硬脂酸酯0.56失水山梨醇倍半油酸酯0.57單硬脂酸甘油酯/硬脂酸甘油酯/聚氧乙烯硬脂酸酯1.08蠟1.09液體石蠟4.010角鯊?fù)?.011辛酸/癸酸甘油三酯4.012羧乙烯基聚合物0.313丁二醇5.014甘油3.015三乙醇胺0.516純凈水余量制備方法將編號為12、13、14和16的物料在80℃-85℃之間的溫度下加熱，同時混合和攪拌，將其加入到制備單元，將編號為2、3、4、5、6、7、8、9、10和11的物料在80℃-85℃之間的溫度加熱的同時溶解。然后，在攪拌的同時加入編號為15的物料，將其加入到制備單元。乳化結(jié)束后，在使用攪拌器攪拌該乳液的同時，將其冷卻至35℃，將編號為1的物料加入所述乳液中，冷卻至25℃，老化。制備實施例4含有根據(jù)本發(fā)明的具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物的精華素的配制品表4示出包含實施例2的高粱葉和莖發(fā)酵產(chǎn)物粉末的化妝料的精華素的配方例。表4編號原材料含量(重量％)1高粱發(fā)酵粉末(實施例2)1.02谷甾醇1.73聚甘油-2-油酸酯1.54神經(jīng)酰胺0.75硬脂醇聚醚-41.26膽固醇1.57磷酸二鯨蠟酯0.48濃縮甘油5.09澳洲堅果油15.010羧乙烯基聚合物0.211黃原膠0.212防腐劑少量13香料少量14純凈水余量制備方法將編號為2、3、4、5和6的物料恒溫均質(zhì)，并稱之為非離子兩親脂質(zhì)。所述非離子兩親脂質(zhì)與編號為1、7、8和14的物料混合，恒溫均質(zhì)，通過微流化裝置，然后向其中緩慢地加入編號為9的物料，恒溫均質(zhì)，再次通過微流化裝置，向其中加入編號為10、11、12和13的物料，分散，穩(wěn)定化，老化。實驗例1對細(xì)胞無毒性和細(xì)胞增殖效果的評價就實施例1-4中制備的發(fā)酵干粉以及對比例1-4制備的提取粉末，測量使用細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞增殖的效果。1)實驗方法細(xì)胞毒性和增殖實驗在以下方案中實施。按照5,000個細(xì)胞/孔，將培養(yǎng)中的細(xì)胞(成纖維細(xì)胞和3t3細(xì)胞)分配在96孔微量板中，并在恒溫室中培養(yǎng)30分鐘，基于25、50、100、200(μg/ml)的濃度給予樣品并培養(yǎng)72小時。另外，給予噻唑啉藍(lán)，另外培養(yǎng)4小時。棄去所有的培養(yǎng)物，在微量板的每個孔中加入反應(yīng)終止溶液，攪拌5分鐘，然后測定570nm的吸光度。作為對照組，以加入的樣品量同樣的量給予10％胎牛血清(fbs)，同時在細(xì)胞生長的最佳條件下培養(yǎng)。通過設(shè)定對照組的細(xì)胞增殖為100％，計算樣品加入實驗組的細(xì)胞增殖率。2)實驗結(jié)果細(xì)胞增殖作用由等式1計算，結(jié)果示于下表5中。等式1：細(xì)胞增殖率(％)＝(在提取處理時吸光度-對照組的吸光度)×100/對照組的吸光度表5本實驗測定以確定高粱發(fā)酵粉末(實施例1-4)和高粱提取粉末(對比例1-4)的細(xì)胞毒性和增殖。如表5所示，設(shè)定最佳細(xì)胞生長條件下的細(xì)胞增殖為100％時，高粱提取粉末(對比例1-4)具有非常微弱的細(xì)胞增殖效果，然而，高粱發(fā)酵粉末(實施例1-4)的細(xì)胞增殖效果非常優(yōu)異。實驗例2自由基清除作用效果的評價就實施例1-4制備的發(fā)酵干粉和對比例1-4制備的提取粉末測量自由基清除效果。1)實驗方法該實驗是通過使用dpph(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)方法(參見blois.m.s.nature181，1190，1958)進(jìn)行，dpph和槲皮素是sigma公司的產(chǎn)品。相對于0.2mm的dpph甲醇溶液，測量具有不同濃度(5、10、20、50和100μg/ml)的實施例1-4和對比例1-4在517nm處的吸光度，其中，代替每個樣品，將純凈水用作空白試驗。清除活性(sc50)表示將自由基的濃度減少50％所需的濃度，其代表具有較低數(shù)值的sc50使得自由基清除活性優(yōu)異。通過使用等式2計算自由基清除效果，并將結(jié)果記載在下表6中。等式2：自由基清除效果(％)＝100-{各樣品的反應(yīng)吸光度×100/對照組的反應(yīng)吸光度}2)實驗結(jié)果表6如表6所示，實施例1-4中的高粱發(fā)酵粉末的自由基50％清除濃度(sc50)是34.45、18.45、27.21和32.28μg/ml，而對比例1-4中的高粱提取粉末的自由基50％清除濃度(sc50)是44.70、42.29、45.33和50.24μg/ml，這表示實施例1-4的高粱發(fā)酵粉末的自由基清除效果顯著優(yōu)于對比例1-4的高粱提取粉末的自由基清除效果。實驗例3脂質(zhì)過氧化抑制效果的評價就實施例1-4制備的發(fā)酵干粉和對比例1-4制備的提取粉末測量脂質(zhì)過氧化抑制效果，其中，綠茶提取物被用于對比物質(zhì)。1)實驗方法0.1％亞麻酸溶解于8％月桂基硫酸鈉水溶液中，取3.9ml，向其中加入0.1ml不同濃度(100、300、500、700、1000和1500μg/ml)的樣品，向其上照射紫外線，取1ml，在其中加入1.5ml的0.8％的tba水溶液和1.5ml20％乙酸(ph3.5)，通過在沸水中加熱1小時，冷卻，在其中加入1ml純凈水和5ml正丁醇:吡啶(15:1)，振蕩，離心分離，取正丁醇層，測量在532nm處的吸光度，其中，在空白試樣中沒有加入所述樣品。抑制濃度(ic50)表示使脂質(zhì)過氧化的活性降低50％所需的濃度，其代表具有較低數(shù)值的ic50使得脂質(zhì)過氧化活性的抑制效果優(yōu)異。通過使用等式3計算脂質(zhì)過氧化作用，并將結(jié)果記載在下表7中。等式3：脂質(zhì)過氧化抑制效果的評價(％)＝100-{各樣品的反應(yīng)吸光度×100/對照組的反應(yīng)吸光度}2)實驗結(jié)果表7如表7所示，實施例1-4中的高粱發(fā)酵粉末的脂質(zhì)過氧化作用50％抑制濃度(ic50)為495.47、279.79、383.84和420.36μg/ml，這顯著優(yōu)于對比例1-4的高梁提取粉末以及綠茶提取粉末的脂質(zhì)過氧化50％抑制濃度(ic50)，其為636.45、581.86、567.32、715.68和737.33μg/ml。實驗例4脂氧合酶活性抑制效果的評價就實施例1-4制備的發(fā)酵干粉和對比例1-4制備的提取粉末測量脂氧合酶的抑制效果。1)實驗方法該實驗是通過使用tbas方法進(jìn)行，實驗中使用的亞油酸、脂氧合酶、硫代巴比妥酸和槲皮素是sigma公司的產(chǎn)品。各種濃度(10、30、50和100μg/ml)的實施例1-4的高粱發(fā)酵粉末和對比例1-4的高梁提取粉末以及作為對比物質(zhì)的0.05ml槲皮素加入1ml的1mm的亞油酸中，向其中給予0.95ml的脂氧合酶，充分?jǐn)嚢瑁蛊湓?5℃反應(yīng)10分鐘，向其中給予0.5ml三氯乙酸，向其中加入1ml硫代巴比妥酸，加熱10分鐘，并在冰水中冷卻2-3分鐘，從而完成該反應(yīng)。將2ml丁醇加入到完成所述反應(yīng)的反應(yīng)溶液中，并以4,000×g離心分離5分鐘，由此在535nm處測定吸光度，其中，代替每個樣品，將純凈水用作空白試驗。抑制濃度(ic50)表示脂氧合酶的活性降低50％所需的濃度，其代表具有較低數(shù)值的ic50使得脂肪氧合酶活性的抑制效果優(yōu)異。通過使用等式4計算脂肪氧合酶活性的抑制效果，并將結(jié)果記載在下表8中。等式4：脂氧合酶活性的抑制效果(％)＝100-{各樣品的反應(yīng)吸光度×100/對照組的反應(yīng)吸光度}2)實驗結(jié)果表8如表8所示，實施例1-4中的高粱發(fā)酵粉末的脂氧合酶50％抑制濃度(ic50)為55.17、40.97、59.14和61.07μg/ml，這顯著優(yōu)于對比例1-4中的高粱提取粉末的脂氧合酶50％抑制濃度(ic50)，其為68.79、65.47、67.74、68.19μg/ml。實驗例5透明質(zhì)酸酶活性抑制效果的評價就實施例1-4制備的發(fā)酵干粉和對比例1-4制備的提取粉末測量透明質(zhì)酸酶活性的抑制效果。1)實驗方法使用摩根-埃爾森方法。透明質(zhì)酸酶的最終酶活性被設(shè)定為400nf單元/ml，ha的最終濃度被設(shè)定為0.4mg/ml。此外，透明質(zhì)酸酶活性是通過使用作為活性劑的復(fù)合48/80緩沖溶液(0.1mg/ml)，基于非活性型透明質(zhì)酸酶的活化步驟的抑制作用進(jìn)行測量。將樣品溶解在所述緩沖液中作為樣品溶液，代替該樣品溶液，將緩沖液用作對照組。此外，代替酶溶液，將緩沖液用作每個空白，并且將綠茶提取物用作對照組。抑制濃度(ic50)表示透明質(zhì)酸酶的活性降低50％所需的濃度，其代表具有較低數(shù)值的ic50使得透明質(zhì)酸酶的活性抑制效果優(yōu)異。通過使用等式5計算透明質(zhì)酸酶活性的抑制效果，并將結(jié)果記載在下表9中。等式5：透明質(zhì)酸酶活性的抑制效果(％)＝100-{各樣品的反應(yīng)吸光度×100/對照組的反應(yīng)吸光度}2)實驗結(jié)果表9如表9所示，實施例1-4中的高粱發(fā)酵粉末的透明質(zhì)酸酶50％抑制濃度為460.53、293.29、504.60和512.67μg/ml，這顯著優(yōu)于對比例1-4中的高粱提取粉末的透明質(zhì)酸酶50％抑制濃度，其為527.72、503.57、626.87和559.39μg/ml，作為對比物質(zhì)的綠茶提取粉末，透明質(zhì)酸酶50％抑制濃度為544.34μg/ml。實驗例6特應(yīng)性皮膚改善效果的評價就制備實施例3的化妝料，測量特應(yīng)性皮膚改善效果的臨床評價。為了評價制備實施例3的化妝料的特應(yīng)性皮膚改善效果，就15名患有特應(yīng)性皮炎、前往東方中醫(yī)診所和醫(yī)院接受治療的成人進(jìn)行如下實驗。試驗樣品根據(jù)雙盲試驗分成右側(cè)和左側(cè)，并施用于全身，盡可能禁止使用另一種可能會影響試驗樣品效果的保濕劑。通過使用計分特應(yīng)性皮炎(scorad)測量來評價從施用試驗樣品后1、2、3和4周后的效果，結(jié)果示于下表10中。1)評價標(biāo)準(zhǔn)①范圍標(biāo)準(zhǔn)：量＝皮膚損傷部分/100②強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)-紅斑(1/2/3)-水腫(1/2/3)-滲出(1/2/3)-皮膚剝落(1/2/3)-苔蘚樣硬化的程度(1/2/3)-干燥的程度(1/2/3)③主觀標(biāo)準(zhǔn)-瘙癢(1-10)-失眠(1-10)*scorad計算＝(范圍標(biāo)準(zhǔn)/5)+(強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)/7)+主觀標(biāo)準(zhǔn)表10在對比例5中，根據(jù)制備實施例3的配方例制造的營養(yǎng)霜，其中，通過加入純凈水而不是高粱發(fā)酵粉末來制造營養(yǎng)霜。如表10所示，在特應(yīng)性皮膚改善方面，含有制備實施例3的高粱發(fā)酵粉末(實施例2)的營養(yǎng)霜顯著優(yōu)于對比例5的營養(yǎng)霜。特別是，在第4周的結(jié)果中，制備實施例3的營養(yǎng)霜具有85％的特應(yīng)性皮膚改善作用，確認(rèn)制備實施例3的營養(yǎng)霜在可持續(xù)性方面優(yōu)于對比例5的營養(yǎng)霜。本發(fā)明的記載僅僅是用于具有抗炎、抗過敏和特應(yīng)性皮膚改善作用的高粱發(fā)酵產(chǎn)物，其制備方法及其化妝料組合物的實施例。然而，本發(fā)明不限于上述實施例，其可以以各種不同的形式來實施。提供實施例以完成本發(fā)明的公開，并將本發(fā)明的范圍清楚地教導(dǎo)給具有本領(lǐng)域普通知識的技術(shù)人員，因此，本發(fā)明將僅由權(quán)利要求書的范圍所限定。當(dāng)前第1頁12