一種復(fù)合微生物除臭劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種復(fù)合微生物除臭劑及其制備方法，每毫升該除臭劑包括光合細菌，活菌數(shù)為1.3~7.5×108CFU；芽孢桿菌，活菌數(shù)為0.9～7.8×108CFU；酵母菌，活菌數(shù)為1.02～1.92×108CFU；硝化細菌，活菌數(shù)為1～10×108CFU；硫化細菌，活菌數(shù)為1~6×108CFU；黑霉菌，活菌數(shù)為4.8~13.5×108CFU；黃霉菌，活菌數(shù)為4.8～11.7×108CFU。本發(fā)明中的菌群獲得基本來源于垃圾，并經(jīng)垃圾滲透液馴化，能作用于垃圾及垃圾產(chǎn)生的滲透液，從來源切斷了垃圾中的臭氣。通過有益菌群對垃圾中惡臭污染物的分解及降解，既消除了垃圾惡臭，又產(chǎn)生了很多有益代謝產(chǎn)物及酶類。
【專利說明】一種復(fù)合微生物除臭劑及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于環(huán)保【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種處理城市生活垃圾臭味的微生物菌群及 其制備工藝。

【背景技術(shù)】
[0002] 臭氣污染是垃圾及填埋場最直觀的污染之一，也是最難處理的污染。目前，大部分 垃圾處理場都是將垃圾處理廠建在遠離市區(qū)的地方，讓臭味自然散發(fā)。垃圾中臭氣來源主 要有：1、垃圾降解直接產(chǎn)生并散播的惡臭氣體；2、垃圾滲濾液散發(fā)的惡臭等。而針對垃圾 的臭氣污染來源，一般采取的措施有：1)填埋前（轉(zhuǎn)運站或在填埋區(qū)）噴灑除臭劑，能減少 臭味，并防止蚊蟲孳生，并能改善垃圾降解過程。2)填埋過程中，注意壓實并及時用粘土覆 蓋（每天），可以防止臭氣散發(fā)。但無論是哪一種處理處置方法，似乎都無法避免"臭氣"擾 民這一難題，從垃圾處理環(huán)節(jié)方面來看，臭氣處理工作必不可少。
[0003] 噴灑除臭劑大多使用的是化學(xué)藥物，使用化學(xué)產(chǎn)品可掩蓋臭味，卻不能改變臭味 的生成或阻止其散發(fā)，同時還造成環(huán)境的二次污染。垃圾集中處理場中對垃圾的處理，一般 采用垃圾填埋或者垃圾焚燒處理。垃圾填埋，占用土地資源，同時也影響周邊環(huán)境和水源； 垃圾焚燒，耗費人力和能源，增加二氧化碳排放，有害微粒塵埃也污染環(huán)境。這兩種方式都 不是生活垃圾的節(jié)能減排的好方式。
[0004] 近年來也出現(xiàn)不少利用微生物除臭劑除臭的方式，由于有益菌的篩選、優(yōu)化、組 配、共生和發(fā)酵、工藝上的不足，在抑制有害微生物和除臭功效上不夠顯著和快速，并沒得 到廣泛應(yīng)用。因此，針對生活垃圾的惡臭，抑制有害腐生菌和有害致病菌，需要篩選出一種 環(huán)境友好菌群，能高效降解惡臭氣體，并且成本低，效率高，適應(yīng)性廣，同時節(jié)能環(huán)保。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的就是為了解決上述問題，利用微生物制劑除臭技術(shù)，篩選高效降解 臭氣的環(huán)境友好型菌種，研發(fā)高效降解惡臭氣體、適于工程化應(yīng)用的復(fù)合菌劑，消除生活垃 圾產(chǎn)生的惡臭，給后續(xù)垃圾的綜合利用提供有益菌群代謝產(chǎn)物，低成本，高效率，適應(yīng)性廣， 同時節(jié)能環(huán)保。
[0006] 為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
[0007] -種復(fù)合微生物除臭劑，每毫升該復(fù)合微生物除臭劑包括如下菌種：光合細菌， 活菌數(shù)為1. 3?7. 5XIO8CFU;芽孢桿菌，活菌數(shù)為0. 9?7. 8XIO8CFU;酵母菌，活菌數(shù) 為1. 02?I. 92XIO8CFU;硝化細菌，活菌數(shù)為1?IOXIO8CFU;硫化細菌，活菌數(shù)為1? 6XIO8CFU;黑霉菌，活菌數(shù)為4. 8?13. 5XIO8CFU;黃霉菌，活菌數(shù)為4. 8?11. 7XIO8CFUo
[0008] 優(yōu)選的，一種復(fù)合微生物除臭劑，每毫升該復(fù)合微生物除臭劑包括如下菌種： 光合細菌，活菌數(shù)為I. 3XIO8CFU;芽孢桿菌，活菌數(shù)為I. 17XIO8CFU;酵母菌，活菌數(shù)為 1. 73XIO8CFU;硝化細菌，活菌數(shù)為I. 6XIO8CFU;硫化細菌，活菌數(shù)為I. 7XIO8CFU;黑霉 菌，活菌數(shù)為6. 3XIO8CFU;黃霉菌，活菌數(shù)為6. 24X108CFU。
[0009] 該復(fù)合微生物除臭劑，是由經(jīng)從污水，垃圾等中篩選出的多種微生物，再經(jīng)過垃圾 滲出液馴化、培養(yǎng)后復(fù)配而成的。作為多種微生物共存的一種生物體復(fù)合制劑，因已通過垃 圾浸出液的馴化，所以能在垃圾上迅速生長繁殖，快速分解臭源有機物，同時依靠相互間共 生增殖及協(xié)同作用，代謝出抗氧化物質(zhì)，形成穩(wěn)定而復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)，抑制有害微生物的生 長繁殖，抑制含硫、氮等惡臭物質(zhì)產(chǎn)生的臭味，從而達到凈化環(huán)境、除臭的目的。
[0010] 該復(fù)合微生物除臭劑從廢水或垃圾中選取，并且經(jīng)過垃圾浸出液的馴化，在處理 垃圾上有一定的針對性，該混合菌液為自然混合狀態(tài)，深棕色液體。所述復(fù)合微生物除臭劑 的密度為lg/cm3。 toon] 所述復(fù)合微生物除臭劑的制備方法，其特征是，包括如下步驟：
[0012] (1)菌種的富集、分離：從污水中富集分離出光合細菌、硝化細菌和硫化細菌，從 垃圾中富集分離出黑霉菌和黃霉菌，從土壤中富集分離出芽孢桿菌；
[0013] (2)菌株的擴大培養(yǎng)：將以上獲得的菌株和酵母菌分別進行垃圾滲出液馴化、培 養(yǎng)后，獲得種子菌液，其中光合細菌菌液活菌數(shù)為IX109CFU/mL，芽孢桿菌菌液活菌數(shù)為 9X108CFU/mL，酵母菌菌液活菌數(shù)為2X109CFU/mL，硝化細菌菌液活菌數(shù)為4X108CFU/mL， 硫化細菌菌液活菌數(shù)為5X108CFU/mL，黑霉菌菌液活菌數(shù)為9X109CFU/mL，黃霉菌菌液活 菌數(shù)為 9XIO9CFUAiL;
[0014] (3)將獲得的種子菌液按按體積分數(shù)比光合細菌13?15份；芽孢桿菌9?13份； 酵母菌17?24份；硝化細菌10?25份；硫化細菌10?15份；黑霉菌8?15份；黃霉菌 8?13份混合即可得到復(fù)合微生物除臭劑。
[0015] 所述光合細菌富集、分離方法的步驟是：從污水中采集泥土于含有光合細菌富集 培養(yǎng)基的無菌三角瓶中，置于光照培養(yǎng)箱中30°c培養(yǎng)，隨時觀察。當(dāng)培養(yǎng)液變?yōu)榧t色時，取 紅色液體于平板培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)，反復(fù)挑選出單菌落即為獲得的光合細菌菌株。
[0016] 將挑選的光合細菌菌株接種到液體培養(yǎng)基上，該液體培養(yǎng)基按照下述重量百分比 配制：碳酸鈉0. 2 %，乙酸鈉0. 3 %，酵母膏0. 2 %，磷酸二氫鉀0. 05 %，氯化銨0. 1 %，食鹽 0. 1 %，六水氯化鎂0. 02%，垃圾滲透液10 %，余量為蒸餾水，pH為6?8 ;接種后于28? 35°C、光照條件下培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)48?72h。該配方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達IX109CFU/mL。
[0017] 所述芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌，富集、分離方法為從土壤表層5-l〇Cm下稱取肥土 5g放入含有45ml水的三角瓶中，混勻，然后將此瓶用小火加熱至懸濁液沸騰，維持15min。 室溫后吸取上層液0.Iml加入到含有4. 5ml無菌水的試管中，制成1:100濃度的懸液，然后 吸取懸液滴加到牛肉湯蛋白胨培養(yǎng)基平板上，用涂布棒均勻涂布，并將培養(yǎng)基倒置于37°C 恒溫培養(yǎng)1-2天。從分離的平板上挑取單菌落中部分菌體，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上劃線 純化，反復(fù)挑選出單菌落即為獲得的芽孢桿菌菌株。
[0018] 將挑選的芽孢桿菌菌種接種到液體培養(yǎng)基上，該液體培養(yǎng)基按照下述重量百分比 配制：葡萄糖1 %，蛋白胨1 %，酵母膏0. 5%，食鹽0. 5%，垃圾滲透液10%，余量為蒸餾水， pH為6?8 ;接種后于37°C，160r/min的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)36?72h。該配方生產(chǎn)的 活菌數(shù)可達9X108CFU/mL。
[0019] 直接將市售的酵母菌菌種接種到馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基上，馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基用以下 配方配制：200g馬鈴薯的浸出液，IOg鹿糖，垃圾滲透液IOOmL,蒸饋水900mL，pH自然；接種 后于30?37°C，120r/min的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)24?72h。該配方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達 2X109CFU/mL。
[0020] 所述硝化細菌為亞硝酸細菌，富集、分離方法為，從污水處理廠的活性污泥中采 樣，于含有亞硝化細菌富集培養(yǎng)基的無菌三角瓶中，混勻，28°C培養(yǎng)，3-7天后傳代培養(yǎng)，經(jīng) 6次富集培養(yǎng)后，每隔3-5天持續(xù)供給6%的硫酸銨溶液2ml。用涂布方法吸取亞硝化細菌 富集營養(yǎng)液于分離培養(yǎng)基上，于28-30°C培養(yǎng)15-20天，反復(fù)挑選出單菌落即為獲得的亞硝 化細菌。
[0021] 將挑選的硝化細菌菌種接種到培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基按照下述重量百分比配制：葡萄 糖 0.5%，（NH4)2SO4 0.2%，NaCl0.2%，F(xiàn)eSO4 0.04%，K2HPO4 0.1%，MgSO4 0.05%，垃圾 滲透液10%，余量為蒸餾水，pH值7. 1?7. 4 ;接種后于25?35°C，150r/min的震蕩培養(yǎng) 箱中擴大培養(yǎng)36?96h。該配方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達4X108CFU/mL。
[0022] 所述硫化細菌富集、分離方法為，污水中活性污泥IOml接種于裝有IOOml滅菌后 的自養(yǎng)脫硫細菌培養(yǎng)基中，30°C，150rpm的條件下培養(yǎng)，每三天進行傳代，每隔1天向培養(yǎng) 基中補加Na2S，以淘汰不能利用S2^的微生物。15-30天的富集后，將發(fā)酵液經(jīng)梯度稀釋后 分別涂布培養(yǎng)基平板上，30°C倒置培養(yǎng)，等平板長出單菌落后，挑取典型單菌落進行重復(fù)平 板劃線，直至得到單一菌株。
[0023] 將挑選的硫化細菌菌種接種到馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基用Na2HPO4 3. 0g， KH2P042.0g，（NH4)2SO4 2. 0g，Na2CO3I. 0g，MgCl2O.lg，F(xiàn)eCl3 0.03g，CaCl2 0.03g，MnCl2 0. 03g，Na2S2O3 15. 0g，垃圾滲透液IOOmL,蒸饋水900mL配制。其中配制成溶液后Na2S2O3最 后加入，pH自然；接種后于30?37°C，140r/min的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)24?72h。該配 方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達5XIO8CFUAiL。
[0024] 所述黑霉菌富集、分離方法為，將垃圾場中的垃圾于室溫放置2-3天，長出霉菌后 用劃線法挑選綠色菌株接種到含有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的平板上，培養(yǎng)3-7天后，挑選出 黑色的菌落重新接種到含有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的平板上，于28-30°C培養(yǎng)5-7天，重復(fù)平 板劃線直到挑選出單菌落即為獲得的黑霉菌。
[0025] 將挑選的黑霉菌菌種接種到馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基用200g馬鈴薯提取 浸出液，IOg葡萄糖，垃圾滲透液IOOmL,蒸餾水900mL配制，pH自然；接種后于30?37°C， 120r/min的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)24?72h。該配方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達9X109CFU/mL。
[0026] 黃霉菌的富集、分離方法為，將垃圾場中的垃圾于室溫放置2-3天，長出霉菌后用 劃線法挑選黃色菌株接種到含有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的平板上，培養(yǎng)3-7天后，挑選出黃 色的菌落重新接種到含有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的平板上，于28-30°C培養(yǎng)5-7天，重復(fù)平板 劃線直到挑選出單菌落即為獲得的黃霉菌。
[0027] 將挑選的黃霉菌菌種接種到馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基用200g馬鈴薯提取浸 出液，IOg葡萄糖，垃圾滲透液IOOmL,蒸餾水900mL配制，pH自然；接種后于30?37°C， 120r/min的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)24?72h。該配方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達9X109CFU/mL。
[0028] 將上述獲得擴大培養(yǎng)后的的種子菌株按體積配比混合即得用于垃圾除臭的復(fù)合 微生物除臭劑，所述體積配比為：光合細菌13?15份；芽孢桿菌9?13份；酵母菌17? 24份；硝化細菌10?25份；硫化細菌10?15份；黑霉菌8?15份；黃霉菌8?13份。
[0029] 使用方法：將所述用于垃圾除臭的復(fù)合微生物除臭劑混合到生活垃圾中，復(fù)合微 生物除臭劑與垃圾的質(zhì)量比例為〇. 1:1〇〇?50:100。
[0030] 本發(fā)明的有益效果是：光合細菌的菌體能以垃圾中的有機酸、氨基酸、氨和糖類等 有機物和硫化氫作為供氧體，通過光合磷酸化獲得能量，在光照條件下可直接利用降解有 機質(zhì)和硫化氫并使自身得以增殖，同時凈化了垃圾滲透液?？莶菅挎邨U菌可以產(chǎn)生各種有 益的酶類，這些酶對生活垃圾中的有機物有一定分解作用，并能對垃圾滲透液也有一定的 凈化。本發(fā)明中的酵母菌能分解利用環(huán)境中的糖類、硫化氫、氨氣等，代謝過程中產(chǎn)生的酸 性物質(zhì)，可有效抑制有害微生物、致病菌生長并具有抑制有機物急劇腐敗分解，并且酵母菌 體可作為其他配合菌的營養(yǎng)物質(zhì)，有利于復(fù)合菌群的快速增殖。硝化細菌為自養(yǎng)需氧型細 菌，以二氧化碳為碳源，通過代謝將氨或銨鹽氧化成硝酸鹽。而垃圾中臭氣成分之一就有 氨。垃圾中的臭氣成分還有硫化氫，而硫化細菌就是可以脫硫的菌群。本發(fā)明中的黑霉菌 在自然界分布很廣，用途廣泛，其淀粉酶活性很強，具有極強的脂肪分解功能。黃霉菌能分 泌淀粉酶及氧化酶等，可使淀粉轉(zhuǎn)化為糖而作菌群培養(yǎng)的基質(zhì)，促使多酚類化合物發(fā)生氧 化作用。
[0031] 本發(fā)明中的菌群獲得基本來源于垃圾，并經(jīng)垃圾滲透液馴化，能作用于垃圾及垃 圾產(chǎn)生的滲透液，從來源切斷了垃圾中的臭氣。本菌群來源廣泛，獲得成本低，但作用巨大。 通過有益菌群對垃圾中惡臭污染物的分解及降解，既消除了垃圾惡臭，又產(chǎn)生了很多有益 代謝產(chǎn)物及酶類，對后續(xù)垃圾的處理有一定優(yōu)勢。

【具體實施方式】
[0032] 實施例1
[0033] -種復(fù)合微生物除臭劑，每毫升該復(fù)合微生物除臭劑包括如下菌種：光合細菌，活 菌數(shù)為1.3XIO8CFU;芽孢桿菌，活菌數(shù)為1. 17XIO8CFU;酵母菌，活菌數(shù)為1.73XIO8CFU; 硝化細菌，活菌數(shù)為I. 6XIO8CFU;硫化細菌，活菌數(shù)為I. 7XIO8CFU;黑霉菌，活菌數(shù)為 6. 3XIO8CFU;黃霉菌，活菌數(shù)為6. 24X108CFU。所述復(fù)合微生物除臭劑為深棕色液體。 [0034] 上述復(fù)合微生物除臭劑的制備方法，其特征是，包括如下步驟：
[0035] 1.菌種的富集、分離
[0036] 光合細菌的富集分離方法：從溝渠的污水處采集5g泥土放入含有45ml水的三角 瓶中，混勻。靜止一段時間吸取上清〇.Iml于含有光合細菌富集培養(yǎng)基的無菌三角瓶中，置 于光照培養(yǎng)箱中30°C培養(yǎng)，隨時觀察。當(dāng)培養(yǎng)液變?yōu)榧t色時，用接種環(huán)取紅色液體于平板培 養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)，反復(fù)挑選出單菌落即為獲得的光合細菌菌株。
[0037] 枯草芽孢桿菌的富集分離方法：從土壤表層8cm下稱取肥土 5g放入含有45ml水 的三角瓶中，混勻，然后將此瓶用小火加熱至懸濁液沸騰，維持15min。室溫后吸取上層液 0.Iml加入到含有4. 5ml無菌水的試管中，制成1:100濃度的懸液，然后吸取懸液滴加到牛 肉湯蛋白胨培養(yǎng)基平板上，用涂布棒均勻涂布，并將培養(yǎng)基倒置于37°C恒溫培養(yǎng)2天。從分 離的平板上挑取單菌落中部分菌體，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上劃線純化，反復(fù)挑選出單菌 落即為獲得的芽孢桿菌菌株。
[0038] 亞硝酸細菌，其富集分離方法：從污水處理廠的活性污泥中采樣，于含有亞硝化細 菌富集培養(yǎng)基的無菌三角瓶中，混勻，28°C培養(yǎng)，5天后傳代培養(yǎng)，經(jīng)6次富集培養(yǎng)后，每隔3 天持續(xù)供給6 %的硫酸銨溶液2ml。用涂布方法吸取亞硝化細菌富集營養(yǎng)液于分離培養(yǎng)基 上，于28°C培養(yǎng)15天，反復(fù)挑選出單菌落即為獲得的亞硝化細菌。
[0039] 硫化細菌富集分離方法為，活性污泥IOml接種于裝有IOOml滅菌后的自養(yǎng)脫硫細 菌培養(yǎng)基中，30°C，150rpm的條件下培養(yǎng)，每三天進行傳代，每隔1天向培養(yǎng)基中補加Na2S, 以淘汰不能利用S2^的微生物。30天的富集后，將發(fā)酵液經(jīng)梯度稀釋后分別涂布培養(yǎng)基平 板上，30°C倒置培養(yǎng)，等平板長出單菌落后，挑取典型單菌落進行重復(fù)平板劃線，直至得到 單一菌株。
[0040] 黑霉菌富集分離方法為，將垃圾場中的垃圾于室溫放置3天，長出霉菌后用劃線 法挑選綠色菌株接種到含有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的平板上，培養(yǎng)7天后，挑選出黑色的菌 落重新接種到含有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的平板上，于28°C培養(yǎng)7天，重復(fù)平板劃線直到挑 選出單菌落即為獲得的黑霉菌。
[0041] 黃霉菌富集分離方法為，將垃圾場中的垃圾于室溫放置2-3天，長出霉菌后用劃 線法挑選黃色菌株接種到含有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的平板上，培養(yǎng)7天后，挑選出黃色的 菌落重新接種到含有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的平板上，于28-30°C培養(yǎng)7天，重復(fù)平板劃線直 到挑選出單菌落即為獲得的黃霉菌。
[0042] 2.菌株的擴大培養(yǎng)
[0043] 將以上獲得的菌株和酵母菌分別單獨擴大高密度培養(yǎng)，獲得大量的種子菌株。
[0044] 將挑選的光合細菌菌種接種到液體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基用碳酸鈉2. 0g，乙酸鈉 3. 〇g，酵母膏2. 0g，磷酸二氫鉀0. 5g，氯化銨I. 0g，食鹽I. 0g，六水氯化鎂0. 2g，垃圾滲透 液lOOmL，蒸餾水900mL配制，pH為7 ;接種后于30°C，光照條件下培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)48? 72h。得到的光合細菌菌液活菌數(shù)為lX109CFU/mL。
[0045] 將挑選的芽孢桿菌菌種接種到液體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基用葡糖糖1%，蛋白胨1%， 酵母膏0. 5%，食鹽0. 5%，垃圾滲透液10%，剩余用蒸餾水，pH為7 ;接種后于37°C，160r/ min的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)36?72h。得到的芽孢桿菌菌液活菌數(shù)為9X108CFU/mL。
[0046] 將市售的酵母菌菌種接種到馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基用200g馬鈴薯的浸出 液，IOg鹿糖，垃圾滲透液IOOmL,蒸饋水900mL配制，pH自然；接種后于37°C，120r/min的 震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)24?72h。得到的酵母菌菌液活菌數(shù)為2X109CFU/mL。
[0047] 將挑選的硝化細菌菌種接種到培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基為葡萄糖5.0g，（NH4)2SO4 2.0g， NaC12. 0g，F(xiàn)eSO4 0· 4g，K2HPO4I. 0g，MgSO4 0· 5g，垃圾滲透液lOOmL，蒸餾水 900mL配制，pH 值7.I;接種后于35°C，150r/min的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)36?96h。得到的硝化細菌菌 液活菌數(shù)為4X108CFU/mL。
[0048] 將挑選的硫化細菌菌種接種到馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基用Na2HPO4 3. 0g， KH2P042.0g，（NH4)2SO4 2. 0g，Na2CO3I. 0g，MgCl2O.lg，F(xiàn)eCl3 0.03g，CaCl2 0.03g，MnCl2 0. 03g，Na2S2O3 15. 0g，垃圾滲透液IOOmL,蒸饋水900mL配制。其中配制成溶液后Na2S2O3最 后加入，pH自然；接種后于37°C，140r/min的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)24?72h。得到的硫 化細菌菌液活菌數(shù)為5X108CFU/mL。
[0049] 將挑選的黑霉菌菌種接種到馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基用20%的馬鈴薯浸出 液，IOg葡萄糖，垃圾滲透液IOOmL,蒸饋水900mL配制，pH自然；接種后于30°C，120r/min 的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)24?72h。得到的黑霉菌菌液活菌數(shù)為9X109CFU/mL。
[0050] 將挑選的黃霉菌菌種接種到馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基用200的馬鈴薯浸出 液，IOg葡萄糖，垃圾滲透液IOOmL,蒸饋水900mL配制，pH自然；接種后于30°C，120r/min 的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)24?72h。得到的黃霉菌菌液活菌數(shù)為9X 109CFU/mL。
[0051] 3.菌種的混合配比
[0052] 將獲得的種子菌株按光合細菌13份，芽孢桿菌13份，酵母菌17份，硝化細菌16 份，硫化細菌15份，黑霉菌13份，黃霉菌13份的體積配比進行混合，按復(fù)合微生物與垃圾 的質(zhì)量比例為1:10投放到生活垃圾中，可迅速降解垃圾中的有機物，特別是能從根本上減 少垃圾中的臭味來源。
[0053] 實施例2
[0054] 由經(jīng)從污水、垃圾中篩選出的多種微生物制成的復(fù)合微生物除臭劑，經(jīng)過垃圾滲 出液馴化、培養(yǎng)后復(fù)配而成的。用于處理城市生活垃圾的臭氣，有抑制有害微生物生長繁 殖，抑制含硫、氮等惡臭物質(zhì)產(chǎn)生的臭味，從而達到凈化環(huán)境、除臭的目的。復(fù)合微生物除臭 劑采用實施例1中方案配比而成，取500mL混合噴灑到IOkg垃圾上，并分別檢測投加相同 量的水及投加復(fù)合微生物除臭劑，同期對照檢測投加等量市售除臭劑20h后的垃圾上的氨 氣指標、硫化氫指標；重復(fù)試驗3次，觀察結(jié)果穩(wěn)定性。
[0055] 表1氨氣、硫化氫指標
[0056]

【權(quán)利要求】
1. 一種復(fù)合微生物除臭劑，其特征是，每毫升該復(fù)合微生物除臭劑包括如下菌種：光 合細菌，活菌數(shù)為1. 3~7. 5X 108CFU ;芽孢桿菌，活菌數(shù)為0. 9?7. 8X 108CFU ;酵母菌，活 菌數(shù)為1. 02?1. 92X 108CFU ;硝化細菌，活菌數(shù)為1?10X 108CFU ;硫化細菌，活菌數(shù)為 1?6 X 108CFU ;黑霉菌，活菌數(shù)為4. 8?13. 5 X 108CFU ;黃霉菌，活菌數(shù)為4. 8?11. 7 X 108CFU。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物除臭劑，其特征是：每毫升該復(fù)合微生物除臭 劑包括如下菌種：光合細菌，活菌數(shù)為1. 3X 108CFU ;芽孢桿菌，活菌數(shù)為1. 17X 108CFU ; 酵母菌，活菌數(shù)為1. 73X 108CFU ;硝化細菌，活菌數(shù)為1. 6X 108CFU ;硫化細菌，活菌數(shù)為 1. 7X108CFU ;黑霉菌，活菌數(shù)為6. 3X108CFU ;黃霉菌，活菌數(shù)為6. 24X 108CFU。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物除臭劑的制備方法，其特征是，包括如下步驟： (1) 菌種的富集、分離：從污水中富集分離出光合細菌、硝化細菌和硫化細菌，從垃圾中 富集分離出黑霉菌和黃霉菌，從土壤中富集分離出芽孢桿菌； (2) 菌株的擴大培養(yǎng)：將以上獲得的菌株和酵母菌分別進行垃圾滲出液馴化、培養(yǎng) 后，獲得種子菌液，其中光合細菌菌液活菌數(shù)為IX 109CFU /mL，芽孢桿菌菌液活菌數(shù)為9 X108CFU /mL，酵母菌菌液活菌數(shù)為1 X108CFU /mL，硝化細菌菌液活菌數(shù)為4 X108CFU / mL，硫化細菌菌液活菌數(shù)為5X108CFU /mL，黑霉菌菌液活菌數(shù)為1X109CFU /mL，黃霉菌菌 液活菌數(shù)為1 X 109CFU /mL ; (3) 將獲得的種子菌液按按體積分數(shù)比光合細菌13?15份；芽孢桿菌9?13份； 酵母菌17?24份；硝化細菌10?25份；硫化細菌10?15份；黑霉菌8?15份； 黃霉菌8?13份混合即可得到復(fù)合微生物除臭劑。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的復(fù)合微生物除臭劑的制備方法，其特征是，所述光合細菌富 集、分離方法的步驟是：從污水處采集泥土于含有光合細菌富集培養(yǎng)基的無菌三角瓶中，置 于光照培養(yǎng)箱中30°C培養(yǎng)，隨時觀察；當(dāng)培養(yǎng)液變?yōu)榧t色時，取紅色液體于平板培養(yǎng)基上 劃線培養(yǎng)，反復(fù)挑選出單菌落即為獲得的光合細菌菌株； 所述光合細菌擴大培養(yǎng)的步驟是：將挑選的光合細菌菌株接種到液體培養(yǎng)基上，該液 體培養(yǎng)基按照下述重量百分比配制：碳酸鈉0. 2%，乙酸鈉0. 3%，酵母膏0. 2%，磷酸二氫鉀 0. 05%，氯化銨0. 1%，食鹽0. 1%，六水氯化鎂0. 02%，垃圾滲透液10%，余量為蒸餾水，pH為 6?8 ;，接種后于28?35°C，光照條件下培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)48?72h，該配方生產(chǎn)的活菌 數(shù)可達 1X109CFU /mL。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的復(fù)合微生物除臭劑的制備方法，其特征是，所述芽孢桿菌為 枯草芽孢桿菌，富集、分離方法為從土壤表層5-10cm下稱取肥土 5g放入含有45ml水的三 角瓶中，混勻，然后將此瓶用小火加熱至懸濁液沸騰，維持15min ;室溫后吸取上層液0. lml 加入到含有4. 5ml無菌水的試管中，制成1:100濃度的懸液，然后吸取懸液滴加到牛肉湯蛋 白胨培養(yǎng)基平板上，用涂布棒均勻涂布，并將培養(yǎng)基倒置于37°C恒溫培養(yǎng)1-2天；從分離的 平板上挑取單菌落中部分菌體，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上劃線純化，反復(fù)挑選出單菌落即 為獲得的芽孢桿菌菌株； 所述芽孢桿菌擴大培養(yǎng)的步驟是：將挑選的芽孢桿菌菌種接種到液體培養(yǎng)基上，該液 體培養(yǎng)基按照下述重量百分比配制：葡萄糖1%，蛋白胨1%，酵母膏0. 5%，食鹽0. 5%，垃圾滲 透液10%，余量為蒸餾水，pH為6?8 ;，接種后于37°C，160r/min的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培 養(yǎng)36?72h，該配方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達9 X 108CFU /mL。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的復(fù)合微生物除臭劑的制備方法，其特征是，直接將市售的酵 母菌菌種接種到馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基上，馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基用以下配方配制：200g馬鈴薯的 浸出液，l〇g蔗糖，垃圾滲透液l〇〇mL，蒸餾水900mL ;接種后于30?37°C，120r/min的震蕩 培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)24?72h，該配方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達1 X 108CFU /mL。
7. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的復(fù)合微生物除臭劑的制備方法，其特征是，所述硝化細菌 為亞硝酸細菌，富集、分離方法為，從污水中的活性污泥中采樣，于含有亞硝化細菌富集培 養(yǎng)基的無菌三角瓶中，混勻，28°C培養(yǎng)，3-7天后傳代培養(yǎng)，經(jīng)6次富集培養(yǎng)后，每隔3-5天 持續(xù)供給6%的硫酸銨溶液2ml，用涂布方法吸取亞硝化細菌富集營養(yǎng)液于分離培養(yǎng)基上， 28-30°C培養(yǎng)15-20天，反復(fù)挑選出單菌落即為獲得的亞硝化細菌； 所述硝化細菌擴大培養(yǎng)的步驟是：將挑選的硝化細菌菌種接種到培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基按 照下述重量百分比配制：葡萄糖 〇? 5%，（NH4)2S04 0? 2%，NaCl 0? 2%，F(xiàn)eS04 0? 04%，K2HP04 0. l%，MgS040 . 05%，垃圾滲透液10%，余量為蒸餾水，pH值7. 1?7. 4 ;接種后于25?35°C， 150r/min的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)36?96h，該配方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達4 X 108CFU /mL。
8. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的復(fù)合微生物除臭劑的制備方法，其特征是，所述硫化細菌富 集、分離方法為，污水處理廠活性污泥l(xiāng)〇ml接種于裝有100ml滅菌后的自養(yǎng)脫硫細菌培 養(yǎng)基中，30°C，150rpm的條件下培養(yǎng)，每三天進行傳代，每隔1天向培養(yǎng)基中補加Na2S，以 淘汰不能利用S2_的微生物，15-30天的富集后，將發(fā)酵液經(jīng)梯度稀釋后分別涂布培養(yǎng)基平 板上，30°C倒置培養(yǎng)，等平板長出單菌落后，挑取典型單菌落進行重復(fù)平板劃線，直至得到 單一菌株； 所述硫化細菌擴大培養(yǎng)的步驟是：將挑選的硫化細菌菌種接種到馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基 上，培養(yǎng)基用 Na2HP04 3. 0 g，KH2P04 2. 0g，（NH4) 2S04 2. 0g，Na2C03 1. 0g，MgCl2 0? lg，F(xiàn)eCl3 0. 03g，CaCl2 0. 03g，MnCl2 0. 03g，Na2S203 15. 0g，垃圾滲透液 100mL，蒸餾水 900mL 配制；其 中配制成溶液后Na2S203最后加入；接種后于30?37 C，140r/min的震湯培養(yǎng)箱中擴大培 養(yǎng)24?72h，該配方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達5X108CFU /mL。
9. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的復(fù)合微生物除臭劑的制備方法，其特征是，所述黑霉菌富集、 分離方法為，將垃圾場中的垃圾于室溫放置2-3天，長出霉菌后用劃線法挑選綠色菌株接 種到含有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的平板上，培養(yǎng)3-7天后，挑選出黑色的菌落重新接種到含 有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的平板上，于28-30°C培養(yǎng)5-7天，重復(fù)平板劃線直到挑選出單菌落 即為獲得的黑霉菌； 所述黑霉菌擴大培養(yǎng)的步驟是：將挑選的黑霉菌菌種接種到馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基上， 培養(yǎng)基用200g的馬鈴薯提取其浸出液，10g葡萄糖，垃圾滲透液100mL，蒸餾水900mL配制； 接種量為5%?10%，接種后于30?37°C，120r/min的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)24?72h，該 配方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達1 X109CFU/mL。
10. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的復(fù)合微生物除臭劑的制備方法，其特征是，所述黃霉菌的 富集、分離方法為，將垃圾場中的垃圾于室溫放置2-3天，長出霉菌后用劃線法挑選黃色菌 株接種到含有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的平板上，培養(yǎng)3-7天后，挑選出黃色的菌落重新接種 到含有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的平板上，于28-30°C培養(yǎng)5-7天，重復(fù)平板劃線直到挑選出單 菌落即為獲得的黃霉菌； 所述黃霉菌擴大培養(yǎng)的步驟是：將挑選的黃霉菌菌種接種到馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基上，培 養(yǎng)基用200g的馬鈴薯提取其浸出液，lOg葡萄糖，垃圾滲透液lOOmL，蒸餾水900mL配制；接 種量為5%?10%，接種后于30?37°C，120r/min的震蕩培養(yǎng)箱中擴大培養(yǎng)24?72h，該配 方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達1 X109CFU/mL。
【文檔編號】A61L101/52GK104399098SQ201410623509
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年11月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月6日
【發(fā)明者】安良梅 申請人:臨沂清宇環(huán)境資源工程設(shè)備有限公司