一種特異靶向her2蛋白的多肽的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種特異靶向HER2(人表皮生長因子受體2)蛋白的多肽，所述多肽如以下通式1所示：X1X2X3X4X5X6X7RX8YWX9X10X11X12X13X14X15X16X17RX18X19X20X21YX22；本發(fā)明還涉及一種編碼多肽的核苷酸序列，以及表達(dá)該多肽的表達(dá)載體及宿主細(xì)胞；本發(fā)明還涉及了該多肽、其形成的二價(jià)體或多價(jià)體及其作為靶向多肽與能殺傷癌細(xì)胞的制劑和顯像制劑形成的藥物組合物及其用途，本發(fā)明的多肽能對HER2陽性細(xì)胞起靶向作用，選擇性強(qiáng)，且本發(fā)明涉及的肽可以采用化學(xué)合成的方法制備得到，純度高，分子量小，特異性強(qiáng)，無免疫原性，安全可靠。
【專利說明】—種特異靶向HER2蛋白的多肽

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種多肽，尤其涉及一種特異靶向HER2蛋白的多肽和由該肽所衍生的且能與HER2蛋白結(jié)合的產(chǎn)品及上述多肽或其衍生的產(chǎn)品在制備靶向HER2抗腫瘤藥物或顯像制劑中的用途。

【背景技術(shù)】
[0002]癌癥是全球一個(gè)主要死亡原因，數(shù)據(jù)顯示:2012年全球新增約1410萬例癌癥病例，癌癥死亡人數(shù)達(dá)820萬，與之相比，2008年的數(shù)據(jù)分別為1270萬和760萬。世界范圍內(nèi)診斷的最常見癌癥依次為肺癌(180萬，13% )、乳腺癌(170萬，11.9% )和結(jié)直腸癌(140萬,9.7% ),最主要致死癌癥為肺癌(160萬，19.4% )、肝癌(80萬,9.1% )和胃癌(70萬，
8.8% ) ο
[0003]國際癌癥研究機(jī)構(gòu)根據(jù)現(xiàn)有數(shù)據(jù)預(yù)計(jì)，由于全球人口增長和老齡化，到2025年前，全球每年新增癌癥病例數(shù)將高達(dá)1930萬例。2012年，全球總數(shù)的一半以上癌癥新增病例和癌癥死亡人數(shù)發(fā)生在欠發(fā)達(dá)地區(qū)，分別為56.8%和64.9%，而這些比例將在2025年進(jìn)一步增加。
[0004]目前惡性腫瘤的治療方法主要有手術(shù)治療、化療、放療三種，其中化療是近年來在腫瘤治療中進(jìn)步最快的治療方法。但是化療藥物在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，也殺傷了人體正常細(xì)胞，毒副作用大。因此，靶向抗腫瘤藥物及分子探針研究勢在必行。
[0005]癌癥靶向治療成功的前提是找準(zhǔn)治療的靶點(diǎn)。HER2 (人表皮生長因子受體2，又名ErbB2)蛋白，是一個(gè)185 kDa的跨膜糖蛋白受體酪氨酸激酶，定位于細(xì)胞膜，具有胞外配體結(jié)合區(qū)，單跨膜區(qū)和胞內(nèi)酪氨酸激酶活性區(qū)。HER2參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，激活后引起磷酸化激酶級聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞生長和分化。乳腺癌、卵巢癌，胃癌和子宮等多種腫瘤中都有HER2的過度表達(dá)。HER2已經(jīng)成為治療癌癥的重要靶標(biāo)。
[0006]多肽易于大量合成，分子量小，組織滲透性強(qiáng)，同時(shí)可防止網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的非特異性攝取。此外，多肽可被化學(xué)改性以改變其親和力、電荷、疏水性、穩(wěn)定性和溶解性，可通過反復(fù)的優(yōu)化修改在體內(nèi)使用。在腫瘤靶向療法中，多肽類藥物及診斷探針顯示出很強(qiáng)的優(yōu)越性，是抗體的一種有吸引力的替代物。在應(yīng)用方面，多肽與放射性核素的配合，可作為探針應(yīng)用于分子成像；一些天然存在的多肽已被用作輸送劑；生殖激素的肽和它們的衍生物可用于腫瘤靶向治療。因此高效率發(fā)現(xiàn)有價(jià)值的活性多肽已成為癌癥診斷與治療面臨的重要任務(wù)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的在于提供一種多肽，特別是一種特異靶向HER2蛋白的多肽、和由該肽所衍生的且能與HER2蛋白結(jié)合的產(chǎn)品及上述多肽或其衍生產(chǎn)品在制備靶向HER2抗腫瘤藥物或顯像制劑中的用途。
[0008]為達(dá)到此發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
[0009]第一方面，本發(fā)明提供了一種靶向HER2蛋白的肽，其氨基酸序列通式I為:
[0010]X1X2X3X4X5X6X7Rx8Yffx9X10X11X12X13X14X15Xi6Xi7RXi8Xi9X2OX2IYX22 ；
[0011]上述肽鏈中單字母符號代表的氨基酸殘基定義如下:R為精氨酸，Y為賴氨酸，W為色氨酸，X1^22為可變的氨基酸殘基。
[0012]作為優(yōu)選技術(shù)方案，X1是酰胺類氨基酸或酸性氨基酸殘基，優(yōu)選為天冬酰胺或天冬氨酸；x2是堿性氨基酸殘基，優(yōu)選為賴氨酸或精氨酸；x3是芳香類氨基酸殘基，優(yōu)選為苯丙氨酸、色氨酸或酪氨酸-J4是極性氨基酸殘基，優(yōu)選為天冬酰胺或精氨酸；x5是堿性氨基酸殘基，優(yōu)選為賴氨酸或精氨酸；x6是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；x7是含硫氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甲硫氨酸或亮氨酸；x8是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；x9是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；xi(l是脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為丙氨酸或亮氨酸；Xn是脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為亮氨酸或異亮氨酸；x12是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；x13是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；x14是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸-J15是酰胺類氨基酸或酸性氨基酸殘基，優(yōu)選為天冬酰胺或天冬氨酸；x16是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；X17是堿性氨基酸殘基，優(yōu)選為賴氨酸或精氨酸；x18是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；x19是脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為異亮氨酸或亮氨酸；χ2。是含硫氨基酸或堿性氨基酸殘基，優(yōu)選為甲硫氨酸或精氨酸；x21是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；x22是脂肪族氨基酸或極性氨基酸殘基，優(yōu)選為亮氨酸、精氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸。
[0013]作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明所述肽的氨基酸序列為SEQ ID N0.1或SEQ ID N0.2所示。
[0014]第二方面，本發(fā)明還提供了一種DNA片段，其包含編碼上述本發(fā)明通式I的肽的氨基酸序列。
[0015]作為優(yōu)選技術(shù)方案，所述DNA片段包含編碼上述本發(fā)明SEQ ID N0.1或SEQ IDN0.2的肽的氨基酸序列。
[0016]第三方面，本發(fā)明還提供了一種表達(dá)載體，包括至少一個(gè)拷貝的編碼氨基酸序列為通式I所示肽的本發(fā)明第二方面所述的DNA片段。
[0017]作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明的表達(dá)載體，包括至少一個(gè)拷貝的編碼氨基酸序列為SEQ ID N0.1或SEQ ID N0.2所示肽的本發(fā)明第二方面所述的DNA片段。
[0018]第四方面，本發(fā)明還提供了一種原核或真核宿主細(xì)胞，該宿主細(xì)胞含有如本發(fā)明第三方面所述的表達(dá)載體。
[0019]第五方面，本發(fā)明還提供了一種二價(jià)體或多價(jià)體，由本發(fā)明第一方面的通式I所述肽及SEQ ID N0.1或SEQ ID N0.2所述肽組裝而成。
[0020]如上所述的二價(jià)體或多價(jià)體是具有靶向HER2陽性的腫瘤細(xì)胞的特性。
[0021]作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明的二價(jià)體或多價(jià)體是通過連接分子共價(jià)連接形成或通過與多聚體混合，非共價(jià)連接形成的。
[0022]優(yōu)選地，所述多聚體為聚乙二醇(PEG)或環(huán)糊精。
[0023]第六方面，本發(fā)明還進(jìn)一步提供了一種藥物組合物，包括本發(fā)明第一方面的氨基酸序列為通式I所述肽、SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2所述的肽或所述肽的二價(jià)體或多價(jià)體作為靶向多肽，和能殺傷癌細(xì)胞的制劑。
[0024]作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明所述肽、二價(jià)體或多價(jià)體作為靶向多肽，與能殺傷癌細(xì)胞的制劑相綴合或混合。
[0025]優(yōu)選地，所述的制劑為能殺傷癌細(xì)胞的化學(xué)藥物、生物藥物、納米藥物、放射性藥物、光熱治療或光動(dòng)力治療藥物或包裹這些藥物的載體中的任意一種；
[0026]進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的制劑為烷化劑、抗代謝藥物、抗腫瘤天然藥物、抗腫瘤抗生素、激素及金屬絡(luò)合物或腫瘤放射靶向標(biāo)記物中的任意一種。
[0027]進(jìn)一步優(yōu)選地，所述載體為納米材料，脂質(zhì)體或油性化合物中的任意一種，或者由多種油性化合物所組成的混合物。
[0028]本發(fā)明采用將通式1、SEQ ID N0.1或SEQ ID N0.2所述肽、及所述肽的二價(jià)體或多價(jià)體和納米材料、脂質(zhì)體等高分子材料綴合，本發(fā)明涉及的肽、二價(jià)體或多價(jià)體可以使綴合后生成的化合物在機(jī)體內(nèi)更穩(wěn)定地被運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞。本發(fā)明涉及的肽、二價(jià)體或多價(jià)體也可以和油性化合物或多種油性化合物的混合物相混合，本發(fā)明涉及的肽也可以使所得到的混合物在機(jī)體內(nèi)更穩(wěn)定地被運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞。
[0029]第七方面，本發(fā)明還進(jìn)一步提供了另外一種藥物組合物，所述藥物組合物包括本發(fā)明第一方面的氨基酸序列為通式I所述肽、SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2所述的肽或所述肽的二價(jià)體或多價(jià)體；和顯像制劑。
[0030]優(yōu)選地，所述肽、二價(jià)體或多價(jià)體與顯像制劑相綴合或混合。
[0031]優(yōu)選地，所述的顯像制劑為放射性核素、放射性核素標(biāo)記物或分子影像制劑中的任意一種。
[0032]第八方面，本發(fā)明還提供了本發(fā)明第一方面的氨基酸序列為通式I所述肽、SEQ IDN0.USEQ ID N0.2所述的肽或所述肽的二價(jià)體或多價(jià)體在制備用于治療、預(yù)防或診斷癌癥的藥物或顯像制劑中的用途。
[0033]作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明所述癌癥為HER2過表達(dá)的癌癥。
[0034]優(yōu)選地，所述癌癥為乳腺癌、肺癌、胃癌、肝癌、結(jié)腸癌、直腸癌、食管癌、白血病、膀胱癌、子宮頸癌
[0035]本發(fā)明的肽具有靶向HER2蛋白的作用，可以作為靶頭增加藥物或載有藥物的載體如納米材料、脂質(zhì)體等在HER2陽性細(xì)胞中的含量，再添加藥學(xué)上可接受的輔料或佐劑制成新型的更有效的靶向抗癌藥物。
[0036]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果:
[0037]本發(fā)明涉及的肽能對HER2陽性細(xì)胞起靶向作用，選擇性強(qiáng)，且本發(fā)明涉及的肽可以采用化學(xué)合成的方法制備得到，純度高，分子量小，特異性強(qiáng)，無免疫原性，安全可靠。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0038]圖1為流式細(xì)胞學(xué)方法檢測異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的SEQ ID N0.USEQ IDN0.2及抗體分別對人HER2陽性乳腺癌細(xì)胞(SKBR3細(xì)胞系)的結(jié)合作用；
[0039]其中A為對照組，B為抗HER2抗體，C為SEQ ID N0.1，D為SEQ ID N0.2，E為結(jié)合率直方圖。
[0040]圖2為流式細(xì)胞學(xué)方法檢測FITC標(biāo)記的SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2及抗體分別對人HER2陰性乳腺癌細(xì)胞(MCF-7細(xì)胞系)的結(jié)合作用；
[0041]其中A為對照組，B為抗HER2抗體，C為SEQ ID N0.1，D為SEQ ID N0.2。
[0042]圖3為流式細(xì)胞學(xué)方法檢測FITC標(biāo)記的SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2及抗體分別對人HER2陰性胚腎正常細(xì)胞(293A細(xì)胞系)的結(jié)合作用；
[0043]其中A為對照組，B為抗HER2抗體，C為SEQ ID N0.1，D為SEQ ID N0.2。
[0044]圖4為免疫熒光方法檢測FITC標(biāo)記的SEQ ID N0.USEQ ID N0.2分別對人HER2陽性乳腺癌細(xì)胞(SKBR3細(xì)胞系)的結(jié)合作用；
[0045]其中，細(xì)胞核用hochest試劑染色；A_D是SEQ ID N0.1多肽和hochest處理過的細(xì)胞，其中A為SEQ ID N0.1多肽的結(jié)合位點(diǎn)，主要存在于細(xì)胞膜，B為細(xì)胞核，C為明視野整個(gè)細(xì)胞，D為A-C的疊合圖；E-H是SEQ ID N0.2多肽和hochest處理過的細(xì)胞，其中E為SEQ ID N0.2多肽的結(jié)合位點(diǎn)，主要存在于細(xì)胞膜，F(xiàn)為細(xì)胞核，G為明視野整個(gè)細(xì)胞，H為E-G的疊合圖。
[0046]圖5為免疫熒光方法檢測FITC標(biāo)記的SEQ ID N0.USEQ ID N0.2分別對人HER2陰性乳腺癌細(xì)胞(MCF-7細(xì)胞系)的結(jié)合作用；
[0047]其中，細(xì)胞核用hochest試劑染色；A_D是SEQ ID N0.1多肽和hochest處理過的細(xì)胞，其中A為SEQ ID N0.1多肽的結(jié)合位點(diǎn)，B為細(xì)胞核，C為明視野整個(gè)細(xì)胞，D為A-C的疊合圖；E-H是SEQ ID N0.2多肽和hochest處理過的細(xì)胞，其中E為SEQ ID N0.2多肽的結(jié)合位點(diǎn)，F(xiàn)為細(xì)胞核，G為明視野整個(gè)細(xì)胞，H為E-G的疊合圖。
[0048]圖6為免疫熒光方法檢測FITC標(biāo)記的SEQ ID N0.USEQ ID N0.2分別對人HER2陰性胚腎正常細(xì)胞(293A細(xì)胞系)的結(jié)合作用；
[0049]其中，細(xì)胞核用hochest試劑染色；A_D是SEQ ID N0.1多肽和hochest處理過的細(xì)胞，其中A為SEQ ID N0.1多肽的結(jié)合位點(diǎn)，B為細(xì)胞核，C為明視野整個(gè)細(xì)胞，D為A-C的疊合圖；E-H是SEQ ID N0.2多肽和hochest處理過的細(xì)胞，其中E為SEQ ID N0.2多肽的結(jié)合位點(diǎn)，F(xiàn)為細(xì)胞核，G為明視野整個(gè)細(xì)胞，H為E-G的疊合圖。
[0050]圖7為表面等離子共振(SPR)方法檢測SEQ ID N0.1 (A)、SEQ ID N0.2 (B)分別對不同濃度的人HER2蛋白的結(jié)合作用。
[0051]氨基酸序列:
[0052]SEQ ID N0.1:NKFNKGMRGYffGALGGGNGKRGIRGYD
[0053]SEQ ID N0.2 =NKFNKGMRGYffGALGGGNGKRGIMGYD

【具體實(shí)施方式】
[0054]下面結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步描述本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，所述實(shí)施例僅是意圖舉例說明本發(fā)明，而不是意圖限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明的范圍由后附的權(quán)利要求具體限定。
[0055]實(shí)施例1本發(fā)明多肽的合成
[0056]I)實(shí)驗(yàn)儀器與材料
[0057]二甲基甲酰胺(DMF)，哌啶，樹脂，二氯甲烷(DCM)，茚三酮反應(yīng)試劑(茚三酮，維C，苯酚)，四甲基脲六氟磷酸鹽(HBTU)，六氫吡啶(哌啶)，三異丙基硅烷TIS，乙二硫醇(EDT)，無水乙醚，三氟乙酸(TFA)，N-甲基嗎啉(NMM)，甲醇，各種氨基酸，多肽固相合成管。
[0058]2)溶液配制
[0059]脫保護(hù)溶劑——六氫吡啶:DMF = I:4
[0060]反應(yīng)液-NMM:DMF = I:24
[0061]裂解液-TFA(92.5% ) ,TIS(2.5% )、EDT(2.5% ) ,H20(2.5% )
[0062]茚三酮測試液-茚三酮:維C:苯酚=1:1:1
[0063]3)實(shí)驗(yàn)步驟
[0064]稱量樹脂并投入到多肽固相合成管(以下簡稱反應(yīng)器)中，加入適量的DMF溶脹半小時(shí)以上。抽掉DMF，用脫保護(hù)液進(jìn)行Fmoc去保護(hù)反應(yīng)，置于搖床上10分鐘。抽掉去保護(hù)液，用DMF、DCM洗滌3次，從反應(yīng)器中取少量樹脂(約5~1mg)于試管中，用乙醇洗滌2次，茚三酮法檢測并記錄顏色，準(zhǔn)備投料，進(jìn)入氨基酸縮合反應(yīng)。分別按照SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2肽的氨基酸序列順序取相應(yīng)氨基酸、HBTU(氨基酸:HBTU = 1:1)，用反應(yīng)液溶解，投入到反應(yīng)器中，攪拌反應(yīng)。1-2小時(shí)后，從反應(yīng)器中取少量樹脂于試管中，用乙醇洗滌2次，茚三酮法檢測。抽掉反應(yīng)器中的液體，用DMF、DCM各洗滌2次，得到第一個(gè)氨基酸縮合后的肽樹脂。對所得肽樹脂重復(fù)進(jìn)行以上“Fmoc去保護(hù)——氨基酸縮合”反應(yīng)步驟，至最后一個(gè)氨基酸反應(yīng)完畢，得到序列號為SEQ ID N0.1和SEQ ID N0.2的肽。反應(yīng)完畢后，DMF、DCM各洗滌樹脂2-3次，甲醇洗兩次，繼續(xù)抽干15-20分鐘。反應(yīng)器中取出合成完的部分肽樹脂，在室溫下于裂解液(裂解液先冰浴20分鐘)中裂解兩小時(shí)。將樹脂過濾后，于旋蒸儀蒸干，用無水乙醚(冰浴)洗3次。粗肽使用制備型反相HPLC純化，使用HPLC檢測純度>90%。所得到的純肽使用質(zhì)譜(MS, eLectrospray)鑒定。
[0065]至最后一個(gè)肽合成后，取出部分肽樹脂加異硫氰酸熒光素(FITC)熒光標(biāo)記。先將Fmoc-e-Acp-OH按氨基酸偶聯(lián)方法鏈接在多肽上，再取適量HBTU與FITC溶于熒光偶聯(lián)溶劑中，3— 5小時(shí)后，茚三酮測溶液測試。標(biāo)記成功后采用上述同樣的方法進(jìn)行裂解、純化與鑒定。
[0066]SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2肽的有關(guān)理化性狀如表1所示。
[0067]表1
[0068]

【權(quán)利要求】
1.一種特異靶向HER2蛋白的肽，其特征在于，其通式為: X1X2X3X4X5X6X7Rx8Yffx9XlOx11Xi2Xi3Xi4Xi5Xi6Xi7RXi8Xi9X2OX2IYX22 其中，R為精氨酸，Y為賴氨酸，W為色氨酸，X1^22為可變的氨基酸殘基； 優(yōu)選地，X1是酰胺類氨基酸或酸性氨基酸殘基，優(yōu)選為天冬酰胺或天冬氨酸；X2是堿性氨基酸殘基，優(yōu)選為賴氨酸或精氨酸；X3是芳香類氨基酸殘基，優(yōu)選為苯丙氨酸、色氨酸或酪氨酸-J4是極性氨基酸殘基，優(yōu)選為天冬酰胺或精氨酸；X5是堿性氨基酸殘基，優(yōu)選為賴氨酸或精氨酸；X6是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；X7是含硫氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甲硫氨酸或亮氨酸；X8是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；X9是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸A1。是脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為丙氨酸或亮氨酸A11是脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為亮氨酸或異亮氨酸；x12是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；x13是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；x14是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；x15是酰胺類氨基酸或酸性氨基酸殘基，優(yōu)選為天冬酰胺或天冬氨酸；x16是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；χ17是堿性氨基酸殘基，優(yōu)選為賴氨酸或精氨酸；x18是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；x19是脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為異亮氨酸或亮氨酸；x2。是含硫氨基酸或堿性氨基酸殘基，優(yōu)選為甲硫氨酸或精氨酸；x21是極性氨基酸或脂肪族氨基酸殘基，優(yōu)選為甘氨酸或丙氨酸；x22是脂肪族氨基酸或極性氨基酸殘基，優(yōu)選為亮氨酸、精氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肽，其特征在于，所述肽的氨基酸序列為SEQIDN0.1或SEQID N0.2 所示。
3.—種DNA片段，其特征在于，其包含編碼權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述肽的核苷酸序列。
4.一種表達(dá)載體,其特征在于,所述表達(dá)載體含有至少一個(gè)拷貝的如權(quán)利要求3所述的DNA片段。
5.一種宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞含有權(quán)利要求4所述的表達(dá)載體。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的肽形成的二價(jià)體或多價(jià)體，其特征在于，所述的二價(jià)體或多價(jià)體具有靶向HER2陽性腫瘤細(xì)胞的特性； 優(yōu)選地，所述的二價(jià)體或多價(jià)體是通過連接分子共價(jià)連接形成的； 優(yōu)選地，所述的二價(jià)體或多價(jià)體是通過與多聚體混合，非共價(jià)連接形成的； 優(yōu)選地，所述多聚體為聚乙二醇(PEG)或環(huán)糊精。
7.—種藥物組合物，其特征在于， 所述藥物組合物包括權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的肽和能殺傷癌細(xì)胞的制劑； 優(yōu)選地，所述藥物組合物包括權(quán)利要求6所述的二價(jià)體或多價(jià)體和能殺傷癌細(xì)胞的制劑； 優(yōu)選地，所述肽、二價(jià)體或多價(jià)體作為靶向多肽，與能殺傷癌細(xì)胞的制劑相綴合或混合； 優(yōu)選地，所述的制劑為能殺傷癌細(xì)胞的化學(xué)藥物、生物藥物、納米藥物、放射性藥物、光熱治療或光動(dòng)力治療藥物或包裹這些藥物的載體中的任意一種； 進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的制劑為烷化劑、抗代謝藥物、抗腫瘤天然藥物、抗腫瘤抗生素、激素、金屬絡(luò)合物或腫瘤放射靶向標(biāo)記物中的任意一種； 進(jìn)一步優(yōu)選地，所述載體為納米材料，脂質(zhì)體或油性化合物中的任意一種，或者由多種油性化合物所組成的混合物。
8.—種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包括權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的肽和顯像制劑； 優(yōu)選地，所述藥物組合物包括權(quán)利要求6所述的二價(jià)體或多價(jià)體和顯像制劑； 優(yōu)選地，所述肽、二價(jià)體或多價(jià)體與顯像制劑相綴合或混合； 優(yōu)選地，所述的顯像制劑為放射性核素、放射性核素標(biāo)記物或分子影像制劑中的任意一種。
9.權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)或6所述的肽、二價(jià)體或多價(jià)體在制備用于治療、預(yù)防或診斷癌癥的藥物或顯像制劑中的用途。
10.根據(jù)權(quán)利要求 9所述的用途，其特征在于，所述癌癥為HER2過表達(dá)的癌癥； 優(yōu)選地，所述癌癥為乳腺癌、肺癌、胃癌、肝癌、結(jié)腸癌、直腸癌、食管癌、白血病、膀胱癌、子宮頸癌或鼻咽癌中的任意一種。
【文檔編號】A61P35/00GK104130315SQ201410359780
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2014年7月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月25日
【發(fā)明者】耿令令, 方巧君, 胡志遠(yuǎn), 連文璽, 楊小亮 申請人:國家納米科學(xué)中心