一種功能性白蕓豆多肽及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種功能性白蕓豆多肽及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明是以白蕓豆為原料，首先浸提得到白蕓豆清蛋白，清蛋白經(jīng)離心和超濾除雜后，再用酸性蛋白酶酶解，滅酶后離心取上清液；上清液經(jīng)超濾濃縮后，按一定比例加入異麥芽酮糖，攪拌均勻后真空或噴霧干燥得到多肽產(chǎn)品。該多肽產(chǎn)品具有較高的熱穩(wěn)定性和抑制α-淀粉酶活性的作用，可應(yīng)用于減肥及降血脂保健食品中。
【專利說(shuō)明】一種功能性白蕓豆多肽及其制備方法和應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及白蕓豆深加工，具體涉及功能性白蕓豆多肽及其制備方法，以及該功能性白蕓豆多肽在制備減肥和降血脂保健食品中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]白蕓豆，生物學(xué)名菜豆，蕓豆是一種高鉀低鈉食品，很適合于心臟病、動(dòng)脈硬化和忌鹽患者食用。白蕓?中蛋白質(zhì)含量19.9%~20.0*%，脂肪含量1.6%~2.1 %,碳水化合物含量37.6%~48.5%，Ca、Fe含量分別是雞肉的7倍和4倍，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高。目前關(guān)于蕓豆多肽的研究有王永剛等人的《蕓豆蛋白酶解工藝的研究》，該研究采用堿性蛋白酶制備出一種蕓豆抗氧化活性肽。王秋明的《白蕓豆多肽和氨基酸鮮味劑的研制》研究比較了以生熟豆渣用植物蛋白水解專用酶、木瓜蛋白酶、動(dòng)物蛋白水解復(fù)合酶和堿性蛋白酶制備多肽和氨基酸的產(chǎn)量和口感。近年來(lái)的研究表明，白蕓豆蛋白質(zhì)中含有一種天然的α-淀粉酶抑制劑，其分子量為36kDa左右，可以用于治療肥胖癥和糖尿病等，如楊明琰的《白蕓豆中α -淀粉酶抑制劑糖蛋白的提取純化、組成結(jié)構(gòu)及生物活性研究》和陳一昆等人的《蕓豆提取物α-淀粉酶抑制劑對(duì)SD大鼠的減肥效果研究》研究了 α-淀粉酶抑制劑的降糖、降脂和減肥作用。但是白蕓豆中α-淀粉酶抑制劑的熱穩(wěn)定性不高，如趙蓉的伯蕓豆中減肥藥物α -淀粉酶抑制劑的提純及其性質(zhì)研究》中指出α -淀粉酶抑制劑在85°C下加熱1min或在90°C加熱5min后就會(huì)失活，不利于工業(yè)化生產(chǎn)應(yīng)用。
[0003]本發(fā)明通過(guò)比較清蛋白經(jīng)不同蛋白酶酶解后的α-淀粉酶抑制活性及熱穩(wěn)定后發(fā)現(xiàn)，清蛋白經(jīng)酸性蛋白酶適度水解后所得多肽溶液具有較高的α-淀粉酶抑制活性和熱穩(wěn)定性，但是隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)其抑制活性會(huì)下降，因此要適度水解。通過(guò)比較不同糖和糖醇如麥芽糖、木糖醇、低聚異麥芽糖、海藻糖和異麥芽酮糖等加入白蕓豆多肽中的熱穩(wěn)定性后，發(fā)現(xiàn)加入異麥芽酮糖的多肽對(duì)α-淀粉酶的抑制活性最高。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種功能性白蕓豆多肽及其制備方法，以及該功能性白蕓豆多肽在制備減肥和降血脂保健食品中的應(yīng)用。
[0005]本發(fā)明提供的一種功能性白蕓豆多肽的制備方法，包括如下步驟:
[0006](I)將蕓豆粉按1: 10~20的比例與蒸餾水混合，用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至4.5~
5.5，在40~55°C水浴中浸提3~6h，然后離心收集上清液；
[0007](2)上清液用截留分子量為1000Da的超濾膜超濾，濾出灰分、糖分等小分子物質(zhì)，得到截留液；
[0008](3)調(diào)節(jié)截留液pH至2.5~4.5，在截留液中按每克蛋白加入0.05-0.2g酸性蛋白酶酶解0.5-2h，水解后滅酶，離心取上清液，用6000Da的超濾膜超濾，收集截留液；
[0009](4)將步驟⑶得到的截留液濃縮至含水分50%，得到白蕓豆多肽濃縮液；按質(zhì)量比70~86: 30~14加入多肽濃縮液和異麥芽酮糖，攪拌均勻，真空或噴霧干燥得到熱穩(wěn)定性較高的白蕓豆功能多肽。
[0010]所述的酸性蛋白酶為537酸性蛋白酶或3.350酸性蛋白酶。
[0011]上述方法制得的白蕓豆功能性多肽，具有對(duì)α -淀粉酶的抑制活性，可以在制備減肥和降血脂保健食品中應(yīng)用。
[0012]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)和效果:
[0013]1.用檸檬酸調(diào)pH至4.5-5.5下提取，有利于保持清蛋白的熱穩(wěn)定性，同時(shí)減少雜蛋白的溶出。
[0014]2.因?yàn)榘资|豆中α-淀粉酶抑制劑的分子量在36000Da左右，因此用截留分子量為1000Da的超濾膜超濾，可以分離出小分子雜質(zhì)，保留大分子清蛋白和α-淀粉酶抑制劑。
[0015]3.利用截留分子量為6000Da的超濾膜對(duì)白蕓豆多肽進(jìn)行超濾，收集截留液，可以獲得經(jīng)適度水解的清蛋白和α-淀粉酶抑制劑。研究過(guò)程中用3，5-二硝基水楊酸比色法測(cè)定不同分子量超濾膜截留多肽對(duì)α -淀粉酶的抑制活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，分子量大于6000Da的多肽混合物具有較高的α -淀粉酶抑制活性和較高的熱穩(wěn)定性(見表1)，有利于常規(guī)加熱或烹調(diào)加工。
[0016]4.清蛋白及加入異麥芽酮糖的清蛋白雖然對(duì)α-淀粉酶的抑制活性較高，但其熱穩(wěn)定性很低。而本發(fā)明的白蕓豆多肽中加入一定比例的異麥芽酮糖后，可以在其對(duì)α-淀粉酶的抑制活性降低不多的同時(shí)，較大程度的提高該多肽的熱穩(wěn)定性(見表3)。

【具體實(shí)施方式】
[0017]實(shí)施例1
[0018]取100g白蕓豆粉為原料，加入10L蒸餾水，用檸檬酸調(diào)節(jié)pH到5.0，45°C水浴中攪拌提取5h，然后3500rpm離心15min后收集上清液即為白蕓豆清蛋白。清蛋白用1000Da的超濾膜超濾后收集截留液部分。調(diào)節(jié)截留液的PH至3.0，按每克蛋白加入0.1g537酸性蛋白酶，在45°C水浴中分別酶解0.5、1、1.5、2和2.5h，之后水浴中滅酶，冷卻后離心取上清液，即為白蕓豆多肽。用3，5-二硝基水楊酸比色法測(cè)定不同酶解時(shí)間的白蕓豆多肽的α -淀粉酶抑制活性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明酶解0.5-2h的多肽對(duì)α -淀粉酶的抑制率較高，見表2。
[0019]多肽溶液用6000Da的超濾膜超濾后收集截留液，再將截留液濃縮至含水量為50%后，按質(zhì)量比為80:20的比例分別加入葡萄糖、海藻糖、低聚異麥芽糖、麥芽糖、木糖醇、異麥芽酮糖攪拌均勻。將各混合物在90°C下分別加熱5,10, 15min后冷卻,測(cè)定α -淀粉酶抑制活性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明加入異麥芽酮糖的多肽對(duì)α -淀粉酶的抑制活性最高，說(shuō)明熱穩(wěn)定性最好，見表3。
[0020]表1不同超濾膜截留分子的白蕓豆多肽的α -淀粉酶抑制活性
[0021]

【權(quán)利要求】
1.一種白蕓豆功能性多肽的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)將蕓豆粉按1: 10~20的比例與蒸餾水混合，用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至4.5~5.5，在40~55°C水浴中浸提3~6h，然后離心收集上清液； (2)上清液用截留分子量為1000Da的超濾膜超濾，濾出小分子物質(zhì)，得到截留液； (3)調(diào)節(jié)截留液pH至2.5~4.5，在截留液中按每克蛋白加入0.05-0.2g酸性蛋白酶酶解0.5-2h，水解后滅酶，離心取上清液，用6000Da的超濾膜超濾，收集截留液； (4)將步驟(3)得到的截留液濃縮至含水分50%，得到白蕓豆多肽濃縮液；按質(zhì)量比70~86: 30~14加入多肽濃縮液和異麥芽酮糖，攪拌均勻，真空或噴霧干燥得到熱穩(wěn)定性較高的白蕓豆功能多肽。
2.如權(quán)利要求1所述的一種白蕓豆功能性多肽的制備方法，其特征在于，所述的酸性蛋白酶為537酸性蛋白酶或 3.350酸性蛋白酶。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法制得的白蕓豆功能性多肽。
4.如權(quán)利要求3所述的白蕓豆功能性多肽在制備減肥和降血脂保健食品中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61P3/06GK104131057SQ201410352633
【公開日】2014年11月5日 申請(qǐng)日期:2014年7月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月23日
【發(fā)明者】王常青, 訾艷 申請(qǐng)人:山西大學(xué)