美洲大蠊的新用途
【專利摘要】本發(fā)明提供了美洲大蠊或其提取物在制備治療不孕癥的藥物中的用途。本發(fā)明研究表明，美洲大蠊或其提取物能夠有效改善生殖內分泌功能，促進卵泡發(fā)育和排卵，對不孕癥有良好的治療作用，特別針對雄激素致不孕癥療效明確。
【專利說明】美洲大蠊的新用途

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及美洲大蠊的新用途。

【背景技術】
[0002] 不孕癥是指有正常規(guī)律的性生活、未采取避孕措施而兩年未妊娠者。隨著社會的 發(fā)展，生活節(jié)奏的加快和工作壓力的不斷增大，晚婚晚育、人工流產(chǎn)、性傳播疾病增加等因 素，不孕癥發(fā)病率呈明顯上升趨勢，約占生育年齡婦女的8%?17%。不孕癥是常見病、難 治病，在一定條件下還會轉化成婚姻問題及家庭問題。 [1]
[0003] 根據(jù)中國中西醫(yī)結合學會1991年擬訂的標準，凡婦女結婚后，或末次妊娠后，夫 婦性生活正常和男方生殖功能正常，同居1年以上未采取避孕措施而不能受孕者，稱為不 孕癥。世界衛(wèi)生組織的研究資料顯示，全球約有12%?16%的夫婦不育，病因中由卵巢功 能低下、內分泌失調所致的排卵障礙占31%?40% [2]，我國育齡婦女排卵障礙性不孕的發(fā) 生率約為15%?38. 6% [3]。不孕癥不僅影響到每個婚姻、家庭，而且同樣是世界性的生殖 建康問題。人類正在日益關注自身的生殖健康，每對健康的育齡婦女的生育權利和得到健 康的要求使不孕癥的研究正在逐漸成為一個緊迫和日益引起人們關注的問題，有效地防治 本病已成為今日醫(yī)學領域研究的重要課題。近年來，隨著醫(yī)學和輔助生殖技術的發(fā)展，女性 不孕癥的治療已發(fā)生較大的變化。
[0004] 早在兩千多年前，《素問·上古天真論》己有關于生殖生理的記載，歷代婦科醫(yī)籍 均有"無子"、"全不產(chǎn)"、"斷緒"、"絕嗣"的描述，并辟有專篇對不孕癥的治療進行討論。及 至近代，許多學者在中醫(yī)和中西醫(yī)結合治療女性不孕癥的臨床及基礎研究方面，進行了深 入的研究，并已取得了令人鼓舞的進展。腎為先天之本、元氣之根，主生殖、泌天癸。任主胞 脈，系于腎。因此不孕癥與腎的關系極為密切。
[0005] 西醫(yī)[4]認為正常排卵需下丘腦-垂體-卵巢性腺軸功能正常，任何環(huán)節(jié)功能失調， 或器質性病變，都可造成卵巢功能障礙導致無排卵。在治療上，一般以誘發(fā)單卵泡或少數(shù)卵 泡的發(fā)育為目的，采用枸櫞酸氯米芬（cc)、尿促激素（HMG)、絨促激素（HcG)、重組FsH、促性 腺激素釋放激素及其類似物進行超促排卵；針對甲狀腺功能、腎上腺功能紊亂施行對抗治 療，以及輔助生殖技術（ART)。但藥物治療存在促排卵率高、受孕率低，不良反應嚴重、用法 及劑量難以掌握等弊端；ART則因其價格高，成功率低，涉及社會道德等問題而不能被患者 接受。所以中藥的低毒性，高效性，標本兼治的優(yōu)勢體現(xiàn)了出來。
[0006] 美洲大蠊為昆蟲綱有翅亞綱蠊目蜚蠊科大蠊屬昆蟲昆蟲，俗稱"蟑螂"，其入藥始 載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，并把它列為中品，謂"味：咸、寒；治：血瘀癥堅寒熱、破積聚、咽喉閉
[5]"。目前還未見將美洲大蠊用于治療不孕癥的現(xiàn)代醫(yī)藥學研究。


【發(fā)明內容】

[0007] 本發(fā)明的目的在于提供一種美洲大蠊或其提取物的新用途。
[0008] 本發(fā)明提供了美洲大蠊或其提取物在制備治療不孕癥的藥物中的用途。
[0009] 進一步地，所述藥物是治療腎虛血瘀不孕癥的藥物。
[0010] 進一步地，所述藥物是治療雄激素致不孕癥的藥物。
[0011] 更進一步地，所述藥物是改善生殖內分泌功能的藥物。
[0012] 更進一步地，所述藥物是促進卵泡發(fā)育或/和排卵的藥物。
[0013] 本發(fā)明所述美洲大蠊提取物，滿足WS3-B-3674-2000(Z)中對"康復新液"的限定 標準即可，每Iml含總氨基酸不得低于0. 72mg，如市售康復新液。
[0014] 或者，滿足 WS3-B-3674_2〇00 (Z)中對"美洲大蠊 Perip leneta ameri Cana 干燥 蟲體的提取物"的限定標準亦可，按照干燥品計算，含總氨基酸不得少于7. 0%，如市售的康 復新。康復新液是由康復新液制備而成的溶液。另外，也可以使用目前常見的美洲大蠊提 取物制備方法進行制備，例如：
[0015] 取美洲大蠊，粉碎，70?90% v/v乙醇提取，合并提取液，回收乙醇后，加水混勻， 加熱攪拌，靜置，冷卻，使油脂充分上浮，取下清液，濃縮或干燥后即得美洲大蠊提取物。
[0016] 本發(fā)明【具體實施方式】中，所使用的藥物為經(jīng)胃腸道給藥制劑，例如使用顆粒劑、片 齊?、膠囊劑、丸劑、散劑、口服液或其他胃腸道給藥制劑。
[0017] 雖然本發(fā)明【具體實施方式】中選用經(jīng)胃腸道吸收制劑來體現(xiàn)藥物組合物的治療效 果，然而，這并不能用于限制本發(fā)明藥物組合物的給藥形式。結合現(xiàn)代分離純化技術或/和 制劑手段，本領域技術人員也可以將美洲大蠊或其提取物純化后，制備成透皮吸收制劑、夕卜 用洗劑、體內植入制劑、注射劑等其他給藥形式，從而增強藥物靶向性、提高藥效或避免不 必要的毒副反應。
[0018] 本發(fā)明所述藥物，是以美洲大蠊（如美洲大蠊藥粉）或美洲大蠊提取物為活性成 分，加上藥學上常用的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。
[0019] 本發(fā)明所述藥學上可接受的輔料，是指除活性成分以外包含在劑型中的物質，包 括但不僅限于填充劑（稀釋劑）、潤滑劑（助流劑或抗粘著劑）、分散劑、濕潤劑、粘合劑、調 節(jié)劑、增溶劑、抗氧劑、抑菌劑、乳化劑、崩解劑等。粘合劑包含糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨 醇、黃芪膠、纖維素及其衍生物（如微晶纖維素、羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素或羥丙甲基 纖維素等）、明膠漿、糖漿、淀粉漿或聚乙烯卩比咯烷酮等；填充劑包含乳糖、糖粉、糊精、淀粉 及其衍生物、纖維素及其衍生物、無機鈣鹽（如硫酸鈣、磷酸鈣、磷酸氫鈣、沉降碳酸鈣等）、 山梨醇或甘氨酸等；潤滑劑包含微粉硅膠、硬脂酸鎂、滑石粉、氫氧化鋁、硼酸、氫化植物油、 聚乙二醇等；崩解劑包含淀粉及其衍生物（如羧甲基淀粉鈉、淀粉乙醇酸鈉、預膠化淀粉、 改良淀粉、羥丙基淀粉、玉米淀粉等）、聚乙烯吡咯烷酮或微晶纖維素等；濕潤劑包含十二 烷基硫酸鈉、水或醇等；抗氧劑包含亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、二丁基苯酸等；抑 菌劑包含0. 5%苯酚、0. 3%甲酚、0. 5%三氯叔丁醇等；調節(jié)劑包含鹽酸、枸櫞酸、氫氧化鉀 (鈉）、枸櫞酸鈉及緩沖劑（包括磷酸二氧鈉和磷酸氫二鈉）等；乳化劑包含聚山梨酯-80、 沒酸山梨坦、普流羅尼克F-68,卵磷酯、豆磷脂等；增溶劑包含吐溫-80、膽汁、甘油等。
[0020] 所述藥學上可接受的輔助性成分，它具有一定生理活性，但該成分的加入不會改 變上述保健品或藥物組合物在疾病治療過程中的主導地位，而僅僅發(fā)揮輔助功效，這些輔 助功效僅僅是對該成分已知活性的利用，是醫(yī)藥領域慣用的輔助治療方式。
[0021] 本發(fā)明研究表明，美洲大蠊或其提取物能夠有效改善生殖內分泌功能，促進卵泡 發(fā)育和排卵，對不孕癥有良好的治療作用，特別針對雄激素致不孕癥療效明確。
[0022] 顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內容，按照本領域的普通技術知識和手段，在不脫離本發(fā) 明上述基本技術思想前提下，還可以做出其他多種形式的修改、替換或變更。
[0023] 以下通過具體實施例的形式，對本發(fā)明的上述內容再做進一步的詳細說明。但不 應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例。凡基于本發(fā)明上述內容所實現(xiàn) 的技術均屬于本發(fā)明的范圍。

【具體實施方式】
[0024] 本發(fā)明中所使用的康復新液，符合WS3-B-3674-2000 (Z)規(guī)定。
[0025] 實施例1藥效活性實驗
[0026] 1材料與方法
[0027] I. 1實驗材料
[0028] 1. 1. 1實驗動物
[0029] 選用擇期配種相同時期出生的雌性SD大鼠幼鼠80只，出生后由母鼠哺乳至22日 齡斷奶。由專人飼養(yǎng)。隨機分成正常組和實驗組，正常組為10只，實驗組70只。
[0030] 1.1. 2實驗藥品
[0031] 丙酸睪丸酮注射液：25mg/ml，天津金耀氨基酸有限公司，批號：0501081,購自成 都中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院。
[0032] I. 1. 3實驗器材
[0033] Iml注射器，消毒棉簽，普通玻片，醫(yī)用顯微鏡。
[0034] I. 1. 4染色試劑
[0035] 95%乙醇、75%乙醇、HarriS蘇木素、橘黃G、磷鎢酸、亮綠sF、伊紅y，碑士麥棕、磷 鎢酸、碳酸鋰。
[0036] 1. 2實驗條件
[0037] 室溫20°C左右，通風清潔，濕度55 士 5%，飼料，水分充足，安靜環(huán)境下分籠飼養(yǎng)。
[0038] 1. 3造模方法
[0039] I. 3. 1動物模型建立
[0040] 參照俞瑾等[6]實驗方法建立無排卵大鼠模型（即雄激素致不孕大鼠模型，ASR)。取 第9日齡雌性SD大鼠60只（實驗組），于頸背部皮下注射丙酸睪丸酮1.25mg/只（0.05mL/ 只）。至第70日齡陰道開口。同樣，取第9日齡雌性SD大鼠10只（正常組），于頸背部皮 下注射等量蒸餾水，至第70日齡陰道開口。實驗組及正常組均于第22日齡斷奶，利用自然 光照，室溫維持在20°C左右，同樣條件飼養(yǎng)，由專人喂養(yǎng)。
[0041] L 3. 2動物模型觀察方法
[0042] 實驗組大鼠第70日齡（大鼠體重約150g左右）時觀察陰道開口。肉眼觀察大鼠 陰道分泌物并連續(xù)行陰道細胞涂片10天（即2個性周期），95%酒精固定，巴氏染色，晾干， 封片，并置普通光學顯微鏡下觀察，了解大鼠陰道上皮有無性周期變化，正常組同樣連續(xù)陰 道涂片2個性周期，觀察其陰道上皮細胞有無性周期變化。
[0043] 1. 3. 3大鼠動情周期變化判定標準
[0044] 經(jīng)陰道脫落細胞涂片觀察到大鼠陰道上皮細胞呈現(xiàn)大量有核上皮細胞及少量角 化上皮細胞、布滿角化上皮細胞及少量有核上皮細胞、角化上皮細胞及白細胞、大量白細胞 及少量粘液的周期性變化，提示大鼠具有規(guī)律性的性周期變化[7]。
[0045] 1. 3. 4動物模型造模成功的判定
[0046] 實驗經(jīng)陰道脫落細胞涂片觀察到陰道上皮細胞持續(xù)為無核角化細胞，提示其無 性周期變化，造模成功。若涂片觀察到大鼠陰道上皮細胞呈現(xiàn)以上性周期變化，則剔除出實 驗組。
[0047] 2 結果
[0048] 2. 1癥狀觀察
[0049] 實驗組大鼠毛發(fā)枯槁、無光澤、脫落、耳色暗紅、爪尾部紫暗。肉眼觀察其陰道分泌 物干澀。正常組大鼠發(fā)育正常，無異常表現(xiàn)。
[0050] 2. 2涂片觀察
[0051] 經(jīng)涂片觀察，實驗組70只參與造模大鼠，其中60只無性周期變化，從涂片可看出 其細胞持續(xù)為無核角化細胞，保留備用，實驗組中參與造模的余10只有典型的或不典型的 性周期變化，剔除。將60只造模成功的大鼠保留備用。正常組10只注射蒸餾水，從涂片觀 察大鼠陰道脫落細胞全部具有規(guī)律性的性周期變化，保留備用。
[0052] 1.材料與方法
[0053] I. 1 動物
[0054] 造模成功的實驗組60只和正常組10只SD大鼠。
[0055] 1. 2藥物及試劑
[0056] 1. 2. 1 藥物
[0057] 1)美洲大蠊藥材打粉過篩；
[0058] 2)康復新液M1204182湖南中南科倫藥業(yè)有限公司。
[0059] 3)克羅米酚（cc) :50mg/粒，上海衡山藥業(yè)有限公司，批號：120801，
[0060] L 2. 2 試劑
[0061] IGFBP - ImRNA原位雜交試劑盒士德生物工程有限公司。
[0062] IGFBP - 3mRNA原位雜交試劑盒士德生物工程有限公司。
[0063] 4 %多聚甲醛固定液等。
[0064] 1. 3 儀器
[0065] 手術器械5套，移液槍3把，離心機，EP管若干，電子天平，普通玻片，醫(yī)用顯微鏡
[0066] 1. 4 方法
[0067] 1. 4. 1實驗條件
[0068] 室溫20°C左右，濕度65±5%，通風，清潔，飼料、給水充足，安靜。動物分籠飼養(yǎng)。 實驗室環(huán)境符合普通級動物實驗室要求。
[0069] I. 4. 2分組方法
[0070] 按隨機數(shù)字表法將60只實驗組大鼠分為模型組、陽性藥組、康復新液組、美洲大 蠊藥材低劑量組、美洲大蠊藥材中劑量組、美洲大蠊藥材高劑量組每組各10只，及正常組 10只。
[0071] 1.4. 3給藥方法
[0072] 模型動物分組完成后，從80日齡起，分別如下給藥。美洲大蠊成人每日IOg藥 材計算，美洲大蠊打粉過篩，用羧甲基纖維素鈉溶液溶解低劑量組配為〇. lg/ml，中劑量為 0. 2g/ml，高劑量為0.4g/ml，康復新液按lml/lOOg大鼠劑量灌胃，克羅米酚（cc) (4. 5mg/ (kg · d))灌胃。連續(xù)灌胃四周后檢測指標。
[0073] 1. 5標本采集和指標檢測
[0074] 1. 5. 1陰道脫落細胞檢查
[0075] 給藥第4周起每日上午定時用消毒棉簽取大鼠陰道脫落細胞做涂片，連續(xù)1個性 周期。95%酒精固定，巴氏染色，晾干，封片，置普通光學顯微鏡下觀察。
[0076] 1.5. 2大鼠卵巢稱重
[0077] 各組連續(xù)灌胃28天后皆斷頭處死，剖開腹腔，取出雙側卵巢，去掉周圍脂肪組織， 將卵巢迅速置電子天平稱重。卵巢形態(tài)及卵巢IGFBP-lmRNA，IGFBP-3mRNA指標檢測。將取 出的一側卵巢，剝離周圍的脂肪組織后放入4%多聚甲醛中固定，送檢。將取出的另一側卵 巢，剝離周圍的脂肪組織后用4%多聚甲醛固定、送檢。
[0078] 1. 6統(tǒng)計學方法
[0079] 計數(shù)資料周x2檢驗，等級資料用秩和檢驗，計量資料用方差分析，組間比較用LSD 檢驗，所有運算均用SPSS12. 0統(tǒng)計軟件經(jīng)計算機處理。
[0080] 2 結果
[0081] 2. 1美洲大蠊對大鼠卵巢的影響。
[0082] 2. I. 1大鼠陰道脫落細胞涂片觀察，經(jīng)普通光學顯微鏡觀察，陰道脫落細胞涂片原 呈持續(xù)角化狀態(tài)的陰道上皮細胞開始出現(xiàn)動情周期變化。各組出現(xiàn)動情周期的例數(shù)及排卵 率的比較結果，見表1
[0083] 表1給藥后對ASR動情周期及排卵率的影響

【權利要求】
1. 美洲大蠊或其提取物在制備治療不孕癥的藥物中的用途。
2. 根據(jù)權利要求1所述的用途，其特征在于：所述藥物是治療腎虛血瘀不孕癥的藥物。
3. 根據(jù)權利要求1所述的用途，其特征在于：所述藥物是治療雄激素致不孕癥的藥物。
4. 根據(jù)權利要求1?3任意一項所述的用途，其特征在于：所述藥物是改善生殖內分 泌功能的藥物。
5. 根據(jù)權利要求1?3任意一項所述的用途，其特征在于：所述藥物是促進卵泡發(fā)育 或/和排卵的藥物。
6. 根據(jù)權利要求1?5任意一項所述的用途，其特征在于：所述美洲大蠊提取物，每 lml含總氨基酸不得低于0. 72mg。
7. 根據(jù)權利要求6所述的用途，其特征在于：所述美洲大蠊提取物為康復新液。
8. 根據(jù)權利要求1?6任意一項所述的用途，其特征在于：所述美洲大蠊提取物，按照 干燥品計算，含總氨基酸不得少于7. 0%。
9. 根據(jù)權利要求8所述的用途，其特征在于：所述美洲大蠊提取物為康復新。
10. 根據(jù)權利要求1?5任意一項所述的用途，其特征在于：所述藥物是由美洲大蠊的 藥粉為活性成分制備而成的制劑。
【文檔編號】A61K35/64GK104367593SQ201410344715
【公開日】2015年2月25日 申請日期:2014年7月18日 優(yōu)先權日:2013年8月13日
【發(fā)明者】蘇柘僮, 鄒俊波 申請人:成都百草和濟科技有限公司