用于增強免疫力的石金錢龜提取物、其制劑及制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于增強免疫力的石金錢龜提取物，它是將石金錢龜?shù)凝斎夂妄敿追謩e用水和乙醇進行提取，龜肉提取液和龜甲提取液分別濃縮、干燥后，按0.5-3∶1的比例混合制成的。本發(fā)明還公開了該提取物的制備方法和含有該提取物的制劑，以及該制劑的制備方法。所制得的石金錢龜提取物具有顯著的增強免疫力的作用，由該提取物制得的膠囊劑含藥量大，性質(zhì)穩(wěn)定，在正常室溫條件下可貯存兩年，不吸潮，不變質(zhì)，口感好，服藥順應(yīng)性佳，患者在服藥時和服藥后不會感覺到難受的腥味。
【專利說明】用于增強免疫力的石金錢龜提取物、其制劑及制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種用于增強免疫力的石金錢龜提取物，本發(fā)明還涉及該提取物的制 備方法和由該提取物制成的制劑。

【背景技術(shù)】
[0002] 免疫是指機體接觸"抗原性異物"或"異己成分"的一種特異性生理反應(yīng)，它是機 體在進化過程中獲得的"識別自身、排斥異己"的一種重要生理功能。免疫系統(tǒng)對維持機體 正常生理功能具有重要意義。免疫功能低下，會對機體健康產(chǎn)生極為不利的影響，使多種傳 染病、非傳染病的發(fā)病率和死亡率提高，其中引人關(guān)注的有惡性癌癥、糖尿病等。造成機體 免疫下降的原因有多種，諸如營養(yǎng)失衡、精神或心理因素、年齡增大、慢性疾病、藥物、應(yīng)激、 內(nèi)分泌失調(diào)和遺傳因素等。
[0003] 免疫調(diào)節(jié)藥物或功能食品主要用于機體免疫功能障礙的疾病，如可增強由于腫 瘤、衰老、慢性病毒感染（肝炎、艾滋病等）造成的免疫功能低下，或抑制器官移植后排斥反 應(yīng)及自身免疫性疾病時某些不正常的免疫反應(yīng)。
[0004] 石金錢龜，學(xué)名黃喉擬水龜（Mauremys mutica Cantor)，兩廣俗稱石龜，分類上隸 屬龜鱉目、龜科、擬水龜屬。國內(nèi)主要分布于江浙、安徽、兩廣、海南、福建及臺灣，國外分布 于越南。石金錢龜是一種食藥兼用的龜類，具有觀賞價值及較高的營養(yǎng)價值和多種醫(yī)療保 健功能，民間有可治療癌癥之說，其增強免疫力和抗腫瘤功效備受人們關(guān)注，中國古代書籍 如"神農(nóng)本草"、"山海經(jīng)"和"本草綱目"都有關(guān)于龜類作為藥材的記載。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的第一個目的是提供一種石金錢龜提取物。
[0006] 本發(fā)明的第二個目的是提供一種該提取物的制備方法。
[0007] 本發(fā)明的第三個目的是提供一種由該提取物制成的制劑。
[0008] 本發(fā)明的第四個目的是提供一種該制劑的制備方法。
[0009] -種用于增強免疫力的石金錢龜提取物，它是將石金錢龜?shù)凝斎夂妄敿追謩e用水 和乙醇進行提取，龜肉提取液和龜甲提取液分別濃縮、干燥后，按0.5-3 : 1的比例混合制 成的。
[0010] 本發(fā)明的石金錢龜提取物對小鼠的免疫損傷起到恢復(fù)作用，可增加免疫低下小鼠 的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、以及單核-巨噬細胞的吞噬指數(shù)，說明本發(fā)明提取物對免疫低下小 鼠的胸腺、脾臟有保護作用，能促進免疫低下小鼠巨噬細胞吞噬功能的恢復(fù)。
[0011] 該提取物的制備方法包括以下步驟：
[0012] 1)龜肉的提?。喝↓斎?，加水煎煮提取1-3次，每次1-3小時，提取液合并后減壓 濃縮，冷凍干燥，得凝膠狀的龜肉提取物；
[0013] 2)龜甲的提取：取龜甲，用質(zhì)量濃度為30-80%的乙醇溶液回流提取1-3次，每次 1-3小時，提取液合并后減壓濃縮，冷凍干燥，得凝膠狀的龜甲提取物；
[0014] 3)將龜肉提取物與龜甲提取物按0.5-3 : 1的比例均勻混合，即得。
[0015] 優(yōu)選的制備方法是：
[0016] 1)龜肉的提?。喝↓斎?，加水煎煮提取3次，第一次和第二次2小時，第三次1.5小 時，提取液合并后減壓濃縮，冷凍干燥，得凝膠狀的龜肉提取物；
[0017] 2)龜甲的提?。喝↓敿?，先用質(zhì)量濃度為50%的乙醇溶液回流提取2. 5小時，再用 質(zhì)量濃度為80%的乙醇溶液回流提取2小時，提取液合并后減壓濃縮，冷凍干燥，得凝膠狀 的龜甲提取物；
[0018] 3)將龜肉提取物與龜甲提取物按2 : 1的比例均勻混合，即得。
[0019] 本發(fā)明進一步提供了一種用于增強免疫力的膠囊劑，該膠囊劑含有所述的石金錢 龜提取物，所述膠囊劑的內(nèi)容物由下述重量百分比的成分組成：
[0020] 石金錢龜提取物 5-60% 淀粉 15-40% 微粉硅膠 10-30% β -環(huán)糊精 5-20%
[0021] 羥丙基甲基纖維素 2-10% 香精 0. 1-1%。
[0022] 優(yōu)選的，所述膠囊劑的內(nèi)容物由下述重量百分比的成分組成：
[0023] 石金錢龜提取物 40% 淀粉 29.5% 微粉硅膠 10% β -環(huán)糊精 15% 羥丙基甲基纖維素 5% 香精 0.5%。
[0024] -種制備所述膠囊劑的方法，包括以下步驟：
[0025] 1)取β _環(huán)糊精，加水，加熱至70-8CTC，制成β -環(huán)糊精飽和溶液；
[0026] 2)將石金錢龜提取物溶于β -環(huán)糊精飽和溶液中，在70_80°C下攪拌0. 5-1小時， 然后將溫度降至〇_5°C，使石金錢龜提取物和β-環(huán)糊精從溶液中析出；
[0027] 3)將析出的沉淀過濾，干燥，粉碎成細粉，與淀粉、微粉硅膠混勻后制粒；
[0028] 4)將羥丙基甲基纖維素制成質(zhì)量濃度為0. 5-1. 5%的溶液，將顆粒用羥丙基甲基 纖維素溶液包衣，干燥后與香精混勻，最后用膠囊填充。
[0029] 本發(fā)明中所涉及的回流提取、減壓濃縮、冷凍干燥、制粒、包衣等方法均為本領(lǐng)域 的常規(guī)操作方法。
[0030] 由于石金錢龜提取物具有強烈的刺鼻腥味，難以直接服用，即使是制成膠囊劑，藥 物在胃內(nèi)崩散后仍會迅速散發(fā)出強烈腥味，導(dǎo)致患者難以接受，服藥順應(yīng)性極差。另外，由 于石金錢龜提取物含有大量的蛋白、氨基酸、多肽等物質(zhì)，導(dǎo)致穩(wěn)定性很差，極易吸潮、變 質(zhì)。因此，本發(fā)明在制備膠囊時，通過加入特殊的輔料和采用特殊的工藝，較好地解決了以 上問題。首先，將石金錢龜提取物與β_環(huán)糊精飽和溶液進行攪拌，使石金錢龜提取物中的 腥味物質(zhì)和小分子脂溶性成分被包合于β -環(huán)糊精的筒狀結(jié)構(gòu)中，從而達到掩味和提高穩(wěn) 定性的作用；其次，由于微粉硅膠具有極其蓬松的結(jié)構(gòu)，分子之間具有巨大的空隙，其比表 面積在70_400m/g之間，具有極強的吸附能力，在本發(fā)明中可用于防止吸潮并吸附揮發(fā)性 的腥味成分；再次，本發(fā)明還采用了薄膜包衣技術(shù)，將顆粒薄膜包衣后進一步提高了其穩(wěn)定 性并掩蓋了不良氣味；最后，本發(fā)明還加入了香精矯味。
[0031] 本發(fā)明的有益效果是：所制得的石金錢龜提取物具有顯著的增強免疫力的效果， 而且效果高于其它的龜類提取物。由該提取物制得的膠囊劑含藥量大，性質(zhì)穩(wěn)定，在正常室 溫條件下可貯存兩年，不吸潮，不變質(zhì)，口感好，服藥順應(yīng)性佳，患者在服藥時和服藥后不會 感覺到難受的腥味。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0032] 圖1是石金錢龜提取物對正常小鼠體重的影響（i ±S，η = 10)。
[0033] 圖2是石金錢龜提取物對免疫低下小鼠體重的影響（孓士S, η = 10,與模型組 比較，* 表示 P〈〇. 05, ** 表示 P〈0. 01)。

【具體實施方式】
[0034] 下面結(jié)合附圖和具體實施例對本發(fā)明做進一步說明。
[0035] 實施例1石金錢龜提取物的制備和主要成分檢測
[0036] 1、石金錢龜提取物制備：取多年生石金錢龜于40°C水中15min，促使龜排尿；取 出龜，放入l〇〇°C水中熱燙，至使龜完全死亡，外甲皮松；趁熱剝除外層黑甲及四肢和頭部 外皮，沿上下甲板線撬開龜甲，盡量不破壞其內(nèi)臟；沿甲邊緣剔開皮肉，去除內(nèi)臟，肉與甲分 裝，做好標記，內(nèi)臟及外層黑甲與四肢外皮去除不要；將肉切成小塊，洗去血污，于冰箱中冷 藏，貼標簽；將龜甲掰成小塊，洗凈，常溫封存。
[0037] 1.1龜肉的提?。?br> [0038] 將龜肉置于蒸煮鍋內(nèi)，加入適量蒸餾水，熬制2h，在熬制過程中，控制水溫不爆沸 但一直均勻沸騰，水量淹沒龜肉，至湯汁呈白色（微黃）濃稠；將湯汁趁熱抽濾；抽濾后 的殘渣繼續(xù)加蒸餾水煮制，熬2h至湯汁濃稠，再次抽濾；抽濾后的殘渣第三次熬制1. 5h 至湯汁較濃，再次抽濾。將三次的抽濾液混合，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾濃縮，蒸餾溫度 50_55°C，至基本無冷凝液滴下，將濃縮物倒入塑料杯中，保鮮膜封口置于4°C冷藏，得龜肉 總提取物，并盛于塑料燒杯中凍存，冷凍干燥，提取物凍成塊狀凝膠。
[0039] 1.2龜甲的提?。?br> [0040] 將龜甲盡量掰碎，洗凈置于1000ml圓底燒瓶，加入500ml50%的乙醇，接冷凝管回 流煮制2. 5h ;第一次煮出液趁熱抽濾，得第一次濃縮液；龜甲中加入80%乙醇，繼續(xù)提取 2h;將兩次提取液合并，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾濃縮，得龜甲提取物，并盛于塑料燒杯中 凍存，冷凍干燥，凍成凝膠狀。
[0041] 1. 3石金錢龜提取物制備
[0042] 石金錢龜提取物按龜肉提取物：龜甲提取物=2 :1比例混合均勻制得。
[0043] 2、石金錢龜提取物主要成分分析
[0044] 2. 1龜肉、龜甲提取物干燥樣品的水分含量測定
[0045] 利用紅外高溫照射，使龜肉或者龜甲提取物中的水分蒸發(fā)，從而計算樣品中的水 分含量。結(jié)果見表1。
[0046] 表1龜甲、龜肉提取物干燥樣品的水分含量（, η = 3)
[0047]

【權(quán)利要求】
1. 一種用于增強免疫力的石金錢龜提取物，其特征在于：它是將石金錢龜?shù)凝斎夂妄?甲分別用水和乙醇進行提取，龜肉提取液和龜甲提取液分別濃縮、干燥后，按0.5-3 : 1的 比例混合制成的。
2. -種用于增強免疫力的石金錢龜提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟： 1) 龜肉的提?。喝↓斎?，加水煎煮提取1-3次，每次1-3小時，提取液合并后減壓濃縮， 冷凍干燥，得凝膠狀的龜肉提取物； 2) 龜甲的提?。喝↓敿?，用質(zhì)量濃度為30-80%的乙醇溶液回流提取1-3次，每次1-3 小時，提取液合并后減壓濃縮，冷凍干燥，得凝膠狀的龜甲提取物； 3) 將龜肉提取物與龜甲提取物按0.5-3 : 1的比例均勻混合，即得。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述用于增強免疫力的石金錢龜提取物的制備方法，其特征在于包 括以下步驟： 1) 龜肉的提取：取龜肉，加水煎煮提取3次，第一次和第二次2小時，第三次1. 5小時， 提取液合并后減壓濃縮，冷凍干燥，得凝膠狀的龜肉提取物； 2) 龜甲的提取：取龜甲，先用質(zhì)量濃度為50%的乙醇溶液回流提取2. 5小時，再用質(zhì)量 濃度為80%的乙醇溶液回流提取2小時，提取液合并后減壓濃縮，冷凍干燥，得凝膠狀的龜 甲提取物； 3) 將龜肉提取物與龜甲提取物按2 : 1的比例均勻混合，即得。
4. 一種用于增強免疫力的膠囊劑，其特征在于含有權(quán)利要求1所述的石金錢龜提取 物，所述膠囊劑的內(nèi)容物由下述重量百分比的成分組成： 石金錢龜提取物 5-60% 淀粉 15-40% 微粉硅膠 10-30% β -環(huán)糊精 5-20% 羥丙基甲基纖維素 2-10% 香精 0. 1-1%。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述用于增強免疫力的膠囊劑，其特征在于所述膠囊劑的內(nèi)容物由 下述重量百分比的成分組成： 石金錢龜提取物 40% 淀粉 29. 5% 微粉硅膠 10% β -環(huán)糊精 15% 羥丙基甲基纖維素 5% 香精 0.5%。
6. -種制備權(quán)利要求4所述膠囊劑的方法，其特征在于包括以下步驟： 1) 取β _環(huán)糊精，加水，加熱至70_80°C，制成β -環(huán)糊精飽和溶液； 2) 將石金錢龜提取物溶于β-環(huán)糊精飽和溶液中，在70-80°C下攪拌0.5-1小時，然后 將溫度降至〇_5°C，使石金錢龜提取物和β-環(huán)糊精從溶液中析出； 3) 將析出的沉淀過濾，干燥，粉碎成細粉，與淀粉、微粉硅膠混勻后制粒； 4) 將羥丙基甲基纖維素制成質(zhì)量濃度為0. 5-1. 5%的溶液，將顆粒用羥丙基甲基纖維 素溶液包衣，干燥后與香精混勻，最后用膠囊填充。
【文檔編號】A61K35/56GK104107193SQ201410298446
【公開日】2014年10月22日 申請日期:2014年6月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月26日
【發(fā)明者】張久亮 申請人:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)