一種4-苯胺喹唑啉類亞胺衍生物及其制備方法
【專利摘要】一種4-苯胺喹唑啉類亞胺衍生物，其特征在于，具有如下通式：本發(fā)明以靛紅為原料通過對靛紅進行硝化、開環(huán)等6步反應合成了4-苯胺喹唑啉類亞胺衍生物；通過MTT法測定了實施例化合物對A549、HepG2和SMMC7721三株腫瘤細胞體外增殖的抑制作用；結(jié)果表明此類化合物具有良好的體外抗腫瘤細胞活性作用，可以在制備抗癌藥中應用。
【專利說明】—種4-苯胺喹唑啉類亞胺衍生物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種4-苯胺喹唑啉類亞胺衍生物及其制備方法與其作為抗癌藥物的用途。
【背景技術(shù)】
[0002]表皮生長因子受體(EGFR)廣泛分布于哺乳動物的上皮細胞，是一種相對分子質(zhì)量約為170kD的跨膜糖蛋白。其前體為含有1210個氨基酸殘基的單一多肽鏈，其中24個氨基酸為信號肽段。經(jīng)翻譯加工切除信號肽的成熟EGFR有1186個氨基酸殘基。在結(jié)構(gòu)上可分為三部分:胞外配體結(jié)合區(qū)、疏水跨膜結(jié)構(gòu)域及細胞內(nèi)的激酶結(jié)構(gòu)域。胞外區(qū)由氨基端的621個氨基酸構(gòu)成，是配體結(jié)合區(qū)，對EGF具有高度親和力；跨膜區(qū)是由23個氨基酸殘基構(gòu)成螺旋狀結(jié)構(gòu)的疏水區(qū)，將受體固定于胞膜上；細胞內(nèi)部分由542個氨基酸殘基構(gòu)成，分為三個亞區(qū)。第一是近膜亞區(qū)(約50個氨基酸殘基);第二是由約250個氨基酸殘基構(gòu)成的酪氨酸激酶亞區(qū)，其中721位的酪氨酸殘基為ATP結(jié)合位點；第三是由位于碳端的229個氨基酸殘基構(gòu)成的碳端亞區(qū)，含有6個作為磷酸化位點的酪氨酸殘基，分別是992位、1045位、1068位、1086位、1148位和1173位。體外實驗表明，當完整細胞暴露于EGF時，1173位是主要的自磷酸化位點。
[0003]迄今發(fā)現(xiàn)的EGFR的配體有六種，EGFR是表皮生長因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFa)和雙調(diào) 節(jié)蛋白(amphireguin)的唯一受體。與其他HER家族共用的受體有β-細胞素(betacelluin)、肝素結(jié)合表皮生長因子(HB-EGF)及上皮調(diào)節(jié)素(EPR)。配體在細胞外與受體結(jié)合并引起構(gòu)象變化，但單個的跨膜α螺旋無法傳遞這種構(gòu)象變化，因此配體的結(jié)合導致受體二聚化形成同源或異源二聚體從而啟動胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導途徑。二聚體的形成激活了胞內(nèi)的酪氨酸激酶區(qū)，其結(jié)合一個ATP分子，促使碳端的自磷酸化位點發(fā)生磷酸化。自磷酸化的結(jié)果是激活了受體酪氨酸激酶活性，磷酸化的酪氨酸殘基可被含有SH2結(jié)構(gòu)域(Src同源結(jié)構(gòu)域)的胞內(nèi)信號蛋白識別并與之結(jié)合，由此啟動信號轉(zhuǎn)導。活化的EGFR可以結(jié)合多種在細胞質(zhì)中含有SH2結(jié)構(gòu)域的信號蛋白，其中一類是接頭蛋白，其本身并不具有酶活性，只是偶聯(lián)活化受體與其他信號分子，如GRB-2 (生長因子受體結(jié)合蛋白-2);另一類是在信號通路中有關(guān)的酶，如GAP (GTP酶活化蛋白)、PLC-y (磷酸酯酶C-y )、PI3K (3-磷脂酰肌醇激酶)、SyP (蛋白磷酸酯酶)及Src類的非受體酪氨酸蛋白激酶等。
[0004]可與活化的EGFR相互識別和結(jié)合的細胞內(nèi)的信號分子和結(jié)合蛋白很多，因此EGFR的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導途徑很復雜。現(xiàn)今研究的比較清楚地主要有兩條途徑，如所示分別是RAS-RAF-MEK-ERK/MAPK和PI3K-AKT_mT0R通路。通過信號轉(zhuǎn)導將細胞外信號通過一系列的磷酸化級聯(lián)反應傳遞進細胞核，從而調(diào)節(jié)細胞對外界的刺激反應、細胞增生、存活、黏附、遷移和分化等等。最后EGFR與配體復合物通過胞吞作用進入細胞，被降解或再循環(huán)到細胞表面，完成信號轉(zhuǎn)導。實驗及臨床研究發(fā)現(xiàn)，許多腫瘤的發(fā)生都與EGFR密切相關(guān)。如胃癌、肺癌、肝癌、頭頸部鱗癌、宮頸癌等等。其機制主要由以下三方面:一是EGFR發(fā)生突變，且一般發(fā)生在胞外配體結(jié)合區(qū)，出現(xiàn)了配體非依賴性的酪氨酸激酶活化；二是配體(如EGF)的過度產(chǎn)生從而使得EGFR信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)過度活化；三是EGFR的過度表達。
[0005]4-苯胺喹唑啉類化合物I位上的N原子以氫鍵與EGFR 769位的甲硫氨酸(Met)結(jié)合；3位上的N原子以水分子介導的氫鍵結(jié)合在EGFR 766位的蘇氨酸(Thr)殘基上；4位的苯胺取代基可以結(jié)合在EGFR激酶結(jié)構(gòu)域的疏水口袋中。在藥物代謝產(chǎn)物的毒性研究中發(fā)現(xiàn)亞胺可以和還原型谷胱甘肽(GSH)發(fā)生共價結(jié)合。很多含有酰胺基團的藥物進入體內(nèi)后會被細胞色素氧化酶P450 (CYP)氧化生成亞胺結(jié)構(gòu)，而此類代謝產(chǎn)物往往具有毒副作用。如解熱鎮(zhèn)痛藥撲熱息痛(對乙酰氨基苯酹)、硼替佐米(Bortezomib)及Ixazomib等。這些藥物經(jīng)P450氧化后的產(chǎn)物壽命比較短，為搞清這些代謝物，在體外實驗中人為使含有巰基的GSH與亞胺發(fā)生共價結(jié)合作用，然后通過液質(zhì)聯(lián)用儀(LC-MS)分析驗證。如下:
【權(quán)利要求】
1.一種4-苯胺喹唑啉類亞胺衍生物，其特征在于，具有如下化學通式:

2.一種制備上述4-苯胺喹唑啉類亞胺衍生物的方法，其特征在于，包括下列步驟組成: 步驟1，在裝有轉(zhuǎn)子、溫度計的三頸瓶中加入100mL濃硫酸，在低溫冷卻循環(huán)泵中冷卻至5°C以下，緩慢加入10.0Og靛紅，加完之后再加入6.0Og硝酸鈉，慢慢加入使反應溫度在5°C以下，加入完成后繼續(xù)低溫攪拌3h，待反應結(jié)束后將反應液倒入冰中，析出黃色固體，將黃色固體抽濾、水洗至中性，干燥得到5-硝基靛紅；其化學通式為:
3.權(quán)利要求1所述的4-苯胺喹唑啉類亞胺衍生物在制備抗癌藥物中的應用。
【文檔編號】A61K31/517GK103965121SQ201410224209
【公開日】2014年8月6日 申請日期:2014年5月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月26日
【發(fā)明者】劉建利, 王征, 王翠玲, 劉竹蘭, 張寧 申請人:西北大學