透骨草在抑制畜禽大腸桿菌對抗菌藥的耐藥性上的應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及透骨草在抑制畜禽大腸桿菌對抗菌藥的耐藥性上的應用，將透骨草與治療畜禽大腸桿菌感染的抗菌藥按照3-30:5-200的重量比例混合，得到含透骨草的復方藥物，將該復方藥物按照0.1-7g/kg飼料的添加量添加到畜禽飼料中進行飼喂，連續(xù)使用3-7天。本發(fā)明能夠有效逆轉細菌對抗菌藥的耐藥性，從而提高抗菌藥的治療效果，大幅降低用藥成本和藥物殘留，為養(yǎng)殖戶創(chuàng)造更高的經濟效益，且保障人類的食品安全。
【專利說明】透骨草在抑制畜禽大腸桿菌對抗菌藥的耐藥性上的應用【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于畜禽大腸桿菌感染治療【技術領域】，尤其涉及透骨草在抑制畜禽大腸桿菌對抗菌藥的耐藥性上的應用。
【背景技術】
[0002]大腸桿菌是常見的條件致病菌，也是常發(fā)的一種疾病，它可原發(fā)引起雞急性敗血癥、腹膜炎、肝炎、肺炎、腸炎等多部位嚴重感染，亦可繼發(fā)或混發(fā)于病毒病，給養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經濟損失。阿莫西林、氨芐西林、頭孢噻呋、頭孢曲松、阿莫西林/克拉維酸、氨芐西林/舒巴坦等內酰胺環(huán)類抗生素是防治該病的常用的重要藥物，隨著養(yǎng)殖規(guī)模集約化程度愈來愈大，用藥愈來愈泛濫，其耐藥菌株愈來愈多，關于大腸桿菌耐藥性的報道也較多。研究證實，耐藥的主要機制之一是產生內酰胺酶，尤其是超廣譜內酰胺酶(Extended-Spectrum^ -lactamase, ESBLs),該酶能較強和快速地水解β-內酰胺環(huán),使這類抗生素喪失抗菌活性。ESBLs是β -內酰胺酶的最主要酶型，它不僅對頭孢三代和氨曲南耐藥，而且對氨基糖苷類、喹諾酮類和磺胺類呈交叉耐藥，僅對碳青霉烯類、頭霉烯類藥物敏感。許多文獻已經報道大腸桿菌的多重耐藥性與產生ESBLs有密切關系，國內外對之較為關注。發(fā)明人最近開展了食品動物源致病菌ESBLs的檢測、提取、酶對抗生素的水解率及舒巴坦、他唑巴坦以及中藥的抑酶保護作用等研究，對部分ESBLs大腸桿菌的藥敏試驗表明，其多重耐藥率明顯高于非ESBLs菌株。另外，結果還表明產ESBLs菌株不僅對頭孢噻呋等第三代頭孢菌素嚴重耐藥，而且亦對氟喹諾酮類、氨基糖苷類和磺胺類、磷霉素等多種抗菌藥耐藥,呈嚴重的多重耐藥。發(fā)明人在產ESBLs菌株中分離到耐磷霉素產fosA3耐藥基因的大腸桿菌，更加強了細菌的耐藥性。大腸桿菌的耐藥性造成養(yǎng)殖戶用藥成本增加，治療療程延長,畜禽死亡率增加,給生產帶來較大經濟損失,并且增加畜禽藥物殘留風險。

【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術問題是將透骨草應用于抑制畜禽大腸桿菌對抗菌藥的耐藥性，較快地殺死細菌，克服抗菌藥治療由于耐藥性問題造成的療效差、用量大、殘留高和成本高的缺陷。
[0004]為解決以上技術問題，本發(fā)明采用以下技術方案:將透骨草應用于抑制畜禽大腸桿菌對抗菌藥的耐藥性。
[0005]抗菌藥為β -內酰胺類、氟喹諾酮類、氨基糖苷類、卡巴氧類、多肽類、酰胺醇類或鹽酸沃尼妙林中的一種。
[0006]內酰胺類抗菌藥為阿莫西林、頭孢曲松鈉或頭孢噻呋鈉；氟喹諾酮類抗菌藥為諾氟沙星；氨基糖苷類抗菌藥為阿米卡星；卡巴氧類抗菌藥為痢菌凈；酰胺醇類為氟苯尼考；多肽類抗菌藥為粘桿菌素。
[0007] 針對目前畜禽大腸桿菌感染存在的耐藥性問題，發(fā)明人利用廣西特色中藥透骨草與抗菌藥組成復方藥物應用于畜禽大腸桿菌感染的疾病防治。研究證明，抗菌藥中加入透骨草后，能夠逆轉細菌對抗菌藥的耐藥性，從而提高抗菌藥的治療效果。按常規(guī)方法將該復方藥物制成散劑、片劑、口服液或顆粒劑，按照0.l_7g主藥/kg飼料的添加量添加到畜禽飼料中進行飼喂，可大幅降低用藥成本和藥物殘留，為養(yǎng)殖戶創(chuàng)造更高的經濟效益，同時也確保了食品安全。
【具體實施方式】
[0008]一、透骨草對抗菌藥的耐藥逆轉作用研究
[0009]抗菌藥本身具有治療大腸桿菌的效果，但由于產ESBLs耐藥基因的大腸桿菌具有較強的耐藥性，致使抗菌藥在正常的使用劑量情況下并未表現(xiàn)出較好的治療效果。
[0010]為了驗證透骨草對抗菌藥的耐藥逆轉作用，在96孔板上采用微量試管二倍稀釋法，先測定了抗菌藥對產ESBLs和fosA3耐藥基因的大腸桿菌株的最小抑菌濃度和透骨草對產ESBLs和fosA3耐藥基因大腸桿菌株的亞抑菌濃度，然后在培養(yǎng)基中加入亞抑菌濃度的透骨草再次使用微量試管二倍稀釋法培養(yǎng)測定抗菌藥的最小抑菌濃度；利用連續(xù)傳代法在加有同樣亞抑菌濃度透骨草和同樣濃度抗菌藥的培養(yǎng)基中對產ESBLs和fosA3耐藥基因大腸桿菌株進行傳代培養(yǎng)，直至觀測到的抗菌藥最小抑菌濃度與傳代前相比變小4倍以上，即可判斷為透骨草對抗菌藥具有耐藥逆轉作用。試驗結果統(tǒng)計如表1所示:
[0011]表1亞抑菌濃度(0.25g/mL)透骨草傳代引起產ESBLs和fosA3大腸桿菌西藥MIC的變化(mg/mL)。
[0012]
【權利要求】
1.透骨草在抑制畜禽大腸桿菌對抗菌藥的耐藥性上的應用。
2.根據(jù)權利要求1所述的透骨草在抑制畜禽大腸桿菌對抗菌藥的耐藥性上的應用，其特征在于，所述的抗菌藥為β_內酰胺類抗菌藥、氟喹諾酮類抗菌藥、氨基糖苷類抗菌藥、卡巴氧類抗菌藥、多肽類抗菌藥、酰胺醇類抗菌藥或鹽酸沃尼妙林中的一種。
3.根據(jù)權利要求 2所述的透骨草在抑制畜禽大腸桿菌對抗菌藥的耐藥性上的應用，其特征在于，所述的內酰胺類抗菌藥為阿莫西林，氟喹諾酮類抗菌藥為諾氟沙星，氨基糖苷類抗菌藥為阿米卡星，卡巴氧類抗菌藥為痢菌凈，酰胺醇類為氟苯尼考，多肽類為粘桿菌素。
【文檔編號】A61K36/47GK103893244SQ201410150114
【公開日】2014年7月2日 申請日期:2014年4月15日 優(yōu)先權日:2014年4月15日
【發(fā)明者】司紅彬, 嚴寒, 夏娟, 蔣利和, 楊武寧, 劉增援, 王秋華, 孫燕杰, 宋劍武, 鄭艷青 申請人:廣西大學