專利名稱：一種用于密度梯度離心分離單個核細胞的血袋的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及一種血袋，尤其是涉及一種用于密度梯度離心分離單個核細胞的
血袋
背景技術：
目前，科研院所和醫(yī)院所用的血袋包括血袋本體，血袋本體上部裝有數(shù)根封閉的短管，下部裝有一根帶針頭的長管，針頭帶有一次性針頭套，袋內(nèi)一般裝有28毫升的血液保存液，其含有枸櫞酸、枸櫞酸鈉、葡萄糖、磷酸二氫鈉、腺嘌呤等抗凝劑和血液營養(yǎng)劑，這種血袋主要用來儲存血庫中的血液和分離臍血干細胞等,保存血液的時間較長(約35天)。但是，在眾多科研院所和醫(yī)院里取血，很多時候是為了在數(shù)小時內(nèi)通過密度梯度離心的方法得到其中的單個核細胞，并進行進一步培養(yǎng)或分選。然而，現(xiàn)有的血袋存在以下缺陷(1)分離單個核細胞后續(xù)耗材多，制作成本高，易污染操作時，單個核細胞需要先將血液稀釋一倍后用密度梯度離心法離心才能得到，以IOOml血液為例，至少需要多用4根50ml離心管和2根移液管來稀釋血液并添加血液到Ficoll液平面上；(2)不適用于內(nèi)皮祖細胞的分離和培養(yǎng)，在臍血內(nèi)皮祖細胞培養(yǎng)時，如果用現(xiàn)有血袋中的枸櫞酸鈉抗凝，得到的內(nèi)皮祖細胞克隆不到肝素抗凝的十分之一；目前，試驗中需要用到肝素抗凝的臍血只能在50ml離心管中自行加肝素，以IOOml 血液為例，需要多加6根50ml離心管和2根移液管才能完成實驗；(3)取血易污染，現(xiàn)有血袋的注射針頭套通常是一次性的，護士取血操作后通常針頭套不能嚴密的套回去，極易造成污染；如果用離心管取血，護士操作繁瑣且難度大，操作時，需要護士用注射器抽血再打到離心管中；(3)容量小，目前所用抽取臍血血袋大部分容積在200ml，除去抗凝劑所占的體積，只能抽取約150ml臍血，沒有足夠的容積容納同體積的稀釋液；如果用離心管，所取的血液通常少于40ml，遠不能滿足在實驗室常見的CD34+的造血干細胞分選需要；(4)只有一個帶針頭的長管用于抽血，放血時則只能用碘酒消毒長管后剪去部分長管以防針頭部位可能的污染和避免長管和針頭的少量血凝塊。

實用新型內(nèi)容本實用新型所要解決的技術問題是，克服現(xiàn)有技術存在的上述缺陷，提供一種操作方便簡單，污染可能性低，容量大，使用過程耗材少的可用于密度梯度離心分離單個核細胞的血袋。本實用新型解決其技術問題所采用的技術方案是，一種用于密度梯度離心分離單個核細胞的血袋，包括血袋本體，所述血袋本體上部設有一個供懸掛的圓孔，所述血袋容積為280ml-320ml，所述血袋本體上部連有兩根均帶橡皮封口和螺旋蓋的短管，所述血袋本體下部連接有兩根均帶針頭的長管，所述長管上設有流體流動速度控制閥，所述針頭上設有可重復蓋緊的針帽；還設有外包裝袋，所述外包裝袋比血袋本體長28cm-32c ;外包裝袋上設有撕裂口。進一步,所述血袋本體容積優(yōu)選300ml。[0007]進一步，所述短管長度為1. 5cm-2. 5cm。進一步，所述短管長度優(yōu)選2cm。進一步,所述長管長度為lcm-1. 5cm。進一步，所述長管長度優(yōu)選1. 2m。進一步，所述外包裝袋比血袋本體長的長度優(yōu)選30cm。進一步，外包裝袋上的撕裂口距離封口 8 -1Ocm,以利于第二次熱合封閉。使用時，抽血前，在超凈臺中沿封口剪開外包裝袋，取出血袋本體，先擰開一短管的螺旋蓋，將肝素抗凝劑經(jīng)短管橡皮封口注入真空血袋本體內(nèi)，蓋上螺旋蓋，然后在超凈臺中將血袋的外包裝套上重新熱合封閉，并放入4°C下保存。抽血時，撕開外包裝袋，取出一長管，取下長管針頭針帽，打開流體流動速度控制閥閥門，利用真空和重力的作用抽血，取血完畢后，關閉流體流動速度控制閥閥門，針帽套回針頭上。抽血后，將取有血液的血袋放入實驗室超凈臺中，擰開另一短管螺旋蓋，將與血量同體積的磷酸緩沖液(PBS)或培養(yǎng)基經(jīng)短管橡皮封口用注射器注入血袋本體內(nèi)稀釋血液，然后擰緊短管螺旋蓋，將血袋中的液體混勻，再將裝有稀釋血液血袋本體上部的圓孔掛在超凈臺頂部的鉤子上，取下另一根長管針頭針帽，調(diào)節(jié)好流體流動速度控制閥，緩慢將稀釋后的血液從血袋本體內(nèi)經(jīng)長管從針頭口滴出，并滴到裝有Ficoll的離心管內(nèi)的Ficoll液平面上。每管離心管加入稀釋血液后，繼續(xù)密度梯度離心分離單個核細胞的過程。本實用新型使用操作簡便，容量大，感染可能性低，使用過程耗材少，節(jié)省操作時間。血袋本體上部連通有兩根帶有橡皮封口和螺旋蓋的短管，注入藥品或溶液后無需重新熱合封閉，且避免重復使用同一根短管而有感染的風險；血袋本體下方連通有兩根均帶針頭的長管，避免抽血和釋放稀釋`后的血液使用同一長管可能帶來的感染和針頭處常發(fā)生的少量血液凝固造成流通不暢的問題，也無需將抽血長管用碘酒消毒后剪斷，降低操作難度，節(jié)省操作時間；長管上設有流體流動速度控制閥，可控制血流速度，能用非常緩慢的速度放出稀釋后的血液，利于保持Ficoll與稀釋血液間清晰的液平面，這一點是后續(xù)密度梯度離心成功的前提；針頭上設有可重復蓋緊的針帽，避免抽血操作和血袋運輸過程中的污染；設有比血袋本體長28cm-32cm的外包袋，空余部分用于放管子和重新熱合封閉，可避免血液轉(zhuǎn)移操作過程中的污染。

圖1為本實用新型一實施例結(jié)構(gòu)示意圖。
以下結(jié)合附圖及本實施例對本實用新型作進一步說明。參照附圖1，本實施例包括血袋本體3，所述血袋本體3上部設有一個供懸掛的圓孔2，所述血袋本體3容積為300ml，所述血袋本體3上部連有兩根均帶橡皮封口和螺旋蓋的短管，所述血袋本體3下部連接有兩根均帶針頭的長管，所述長管上設有流體流動速度控制閥，所述針頭上設有可重復蓋緊的針帽，還包括帶外包裝袋，所述外包裝袋比血袋本體長 30cm。[0020]所述短管長度為2cm。所述長管長度為1.2m。使用時，抽血前，在超凈臺中沿封口剪開外包裝袋，取出血袋本體3，先擰開一短管
I11的螺旋蓋，將肝素抗凝劑經(jīng)短管I 11橡皮封口注入真空血袋本體3內(nèi)，蓋好螺旋蓋，然后在超凈臺中將血袋的外包裝套上重新熱合封閉，并放入4°C下保存。抽血時，撕開外包裝袋，取出長管I 41，取下長管I 41針頭I 61針帽，打開流體流動速度控制閥I 51閥門，利用真空和重力的作用抽血，取血完畢后，關閉流體流動速度控制閥I 51閥門，針帽套回針頭I 61上。抽血后，將 取有血液的血袋放入實驗室超凈臺中，擰開另一短管II 12螺旋蓋，將與血量同體積的培養(yǎng)基經(jīng)短管II 12橡皮封口用注射器注入血袋本體3內(nèi)稀釋血液，然后擰緊短管II 12螺旋蓋，將血袋中的液體混勻，再將裝有稀釋血液血袋本體3上部的圓孔2掛在超凈臺頂部的鉤子上，取下另一根長管II 42針頭II 62針帽，調(diào)節(jié)好流體流動速度控制閥
II52，緩慢將稀釋后的血液從血袋本體3內(nèi)經(jīng)長管II 42從針頭口滴出，并滴到裝有Ficoll的離心管內(nèi)的Ficoll液平面上。每管離心管加入稀釋血液后，繼續(xù)密度梯度離心分離單個核細胞的過程。
權(quán)利要求1.一種用于密度梯度離心分離單個核細胞的血袋，包括血袋本體，所述血袋本體上部設有一個供懸掛的圓孔，其特征在于，所述血袋容積為280ml-320ml，所述血袋本體上部連有兩根均帶橡皮封口和螺旋蓋的短管，所述血袋本體下部連接有兩根均帶針頭的長管，所述長管上設有流體流動速度控制閥，所述針頭上設有可重復蓋緊的針帽；還設有外包裝袋，所述外包裝袋比血袋本體長28cm-32cm ;外包裝袋上設有撕裂口。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于密度梯度離心分離單個核細胞的血袋，其特征在于，所述血袋本體容積為300ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于密度梯度離心分離單個核細胞的血袋，其特征在于，所述短管長度為1. 5-2. 5cm。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于密度梯度離心分離單個核細胞的血袋，其特征在于，所述短管長度為2. 0cm。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于密度梯度離心分離單個核細胞的血袋，其特征在于，所述長管長度為1. 0-1. 5m。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于密度梯度離心分離單個核細胞的血袋，其特征在于，所述長管長度為1. 2m。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于密度梯度離心分離單個核細胞的血袋，其特征在于，所述外包裝袋比血袋本體長的長度為30cm。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于密度梯度離心分離單個核細胞的血袋，其特征在于，外包裝袋上的撕裂口距離封口 8 - 10cm。
專利摘要一種用于密度梯度離心分離單個核細胞的血袋，包括血袋本體，所述血袋本體上部設有一個供懸掛的圓孔，所述血袋容積為280ml-320ml，所述血袋本體上部連有兩根均帶橡皮封口和螺旋蓋的短管，所述血袋本體下部連接有兩根均帶針頭的長管，所述長管上設有流體流動速度控制閥，所述針頭上設有可重復蓋緊的針帽，還包括外包裝袋，所述外包裝袋比血袋本體長28cm-32cm。本實用新型制造成本低，易操作，容量大，感染可能性低。
文檔編號A61J1/10GK202892429SQ20122058226
公開日2013年4月24日 申請日期2012年11月7日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月7日
發(fā)明者孫璇 申請人:中南大學