專利名稱：一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)療器械及其制備技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法。
背景技術(shù)：
現(xiàn)代醫(yī)療理論證明:傷口的愈合過程是一個連續(xù)的動態(tài)過程，是細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與細(xì)胞基質(zhì)以及與可溶性介質(zhì)間相互作用的過程。從醫(yī)用敷料的發(fā)展來看，隨著“濕法療法”理論和實踐得到普及，濕性敷料在世界醫(yī)療衛(wèi)生領(lǐng)域得到日益重視。而“濕法療法”的應(yīng)用會使傷口處于一個溫暖且潮濕的環(huán)境，在這種環(huán)境下細(xì)菌在傷口的繁殖很快，使傷口成為病區(qū)內(nèi)交叉感染的一個重要來源。為了控制傷口上的細(xì)菌并且防止它們的擴(kuò)散，需要在醫(yī)用敷料中加入抗菌物質(zhì)，制成濕性抗菌敷料。細(xì)菌纖維素是由葡萄糖以β -1, 4-糖苷鏈連接而成的高分子化合物，作為一種優(yōu)良的生物材料，具有其獨特的物理、化學(xué)性能:BC具有天然的三維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)；高抗張強(qiáng)度和彈性模量；高親水性，良好的透氣、吸水、透水性能，非凡的持水性和高濕強(qiáng)度。另外，大量研究表明細(xì)菌纖維素具有良好的體內(nèi)、體外生物相容性和良好的生物可降解性，這使得細(xì)菌纖維素本身可以應(yīng)用于生物醫(yī)用領(lǐng)域。國外采用單純的細(xì)菌纖維素作為敷料已有報道，并且已經(jīng)產(chǎn)業(yè)化用于臨床。因此，以細(xì)菌纖維素作為敷料的基體材料，利用細(xì)菌纖維素本身的吸水性能，可以在保證生物安全性的基礎(chǔ)上持續(xù)有效的吸收傷口滲出液及代謝產(chǎn)物。細(xì)菌纖維素用于傷口敷料領(lǐng)域有很好的發(fā)展前景，它為傷口提供了濕潤的環(huán)境以促進(jìn)傷口更好地愈合。但是細(xì)菌纖維素本身沒有抗菌，需要添加抗菌物質(zhì)才能使其具備抗菌敷料的功能。本專利采用殼聚糖作為抗菌物質(zhì)，殼聚糖具有一定的抗菌性能，良好的生物相容性，已被證明能夠安全有效的應(yīng)用于傷口敷料產(chǎn)品。本專利制備的殼聚糖納米纖維成網(wǎng)絡(luò)狀均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面，纖維間的通透性不會影響敷料要求的吸水性能和透氣性能。并且殼聚糖納米 纖維的“納米效應(yīng)”可以在提高抗菌效果的同時促進(jìn)傷口細(xì)胞的增殖，加快傷口愈合的速度。另外，在細(xì)菌纖維素的實際使用過程中為了進(jìn)一步提高細(xì)菌纖維素的性能，往往與其他材料復(fù)合得到細(xì)菌纖維素復(fù)合材料。現(xiàn)有的復(fù)合方法往往會破壞細(xì)菌纖維素本身的三維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致復(fù)合后的材料由于細(xì)菌纖維素結(jié)構(gòu)的破壞造成一些性能的下降，如:力學(xué)強(qiáng)度、吸水性能、透氣性能等。這些性能的破壞會使細(xì)菌纖維素材料在敷料領(lǐng)域的應(yīng)用受到限制。因此，為了得的具有抗菌功效的細(xì)菌纖維素抗菌敷料，同時保持細(xì)菌纖維素原有的三維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，本專利分別采用原位發(fā)酵法和靜電紡絲法制備細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料。首先，采用原位發(fā)酵法，將細(xì)菌纖維素與無紡布或織造布復(fù)合得到細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材；然后采用靜電紡絲法，將細(xì)菌纖維素/無紡布或織造布膜材與殼聚糖纖維復(fù)合得到細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料。制備過程中保持了細(xì)菌纖維素原有的三維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，從而使該敷料具有抗菌、阻菌、保濕及可縫合性能。可治愈慢性不愈性創(chuàng)傷、壓急性難治性創(chuàng)傷，燒傷以及大面積軟組織缺損和/或感染。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開了一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法。涉及一種醫(yī)療器械及其制備技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明制備過程簡單易行、操作方便、成本低，制備的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料具有抗菌、阻菌、保濕及可縫合性能。可作治愈慢性不愈性創(chuàng)傷、壓急性難治性創(chuàng)傷，燒傷以及大面積軟組織缺損和/或感染。本發(fā)明公開了一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法。包括，第一步:選取能分泌細(xì)菌纖維素的菌株活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為10 95%的種子醪液均勻滴加在經(jīng)滅菌處理的無紡布或織造布上，加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)12 48h。然后補加發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)3 6d后取出發(fā)酵產(chǎn)物。發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)純化處理,得到細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材。第二步:將分子量為5 30萬的殼聚糖溶解于有機(jī)溶劑中，制備重量百分比為0.1 10%的均勻殼聚糖紡絲溶液，采用靜電紡絲法將殼聚糖溶液從噴絲頭射出，射出的殼聚糖溶液細(xì)流噴射到含有重量百分比為50 90%的無水乙醇和/或水的細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材上，經(jīng)后處理，得到細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料。作為優(yōu)選的技術(shù)方案:
其中，如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，所述的無紡布或織造布的制備原材料可以是滌綸、錦綸、粘膠纖維、脫脂棉纖維、腈綸等。本專利的制備過程中，細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布可以顯著提高敷料的力學(xué)強(qiáng)度，賦予敷料可縫合性，延長了敷料的使用時間；同時提高的敷料的阻菌性能。如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，所述的復(fù)合方法為:將菌株濃度為10 95%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在無菌無紡布或織造布表面，5 IOmin后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基。其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為5 20mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為25 35°C，時間為12 48h。將活化好的菌株制備成種子醪液，按照一定的濃度把種子醪液均勻滴加在無菌無紡布或織造布的表面，待種子醪液完全浸潤無紡布或織造布后加入少量的培養(yǎng)基。經(jīng)過短時間的培養(yǎng)，菌株在無紡布或織造布的纖維空隙里發(fā)酵生成少量的細(xì)菌纖維素，得到細(xì)菌纖維素與無紡布或織造布初步復(fù)合的膜材。如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，所述的補加發(fā)酵培養(yǎng)基，其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為20 50mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為30 40°C，培養(yǎng)時間為3 6d。如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，所述的細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材，其上層為細(xì)菌纖維素膜，下層為無紡布或織造布，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與細(xì)菌纖維素膜相連的細(xì)菌纖維素纖維。如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，所述的殼聚糖有機(jī)溶劑為醋酸水溶液和/或三 氟乙酸。在制備殼聚糖紡絲溶液時，可選用一種或兩種上述溶劑作為混合溶劑，在機(jī)械攪拌作用下使殼聚糖溶解。一般溶解溫度為室溫，也可適當(dāng)升溫加熱以加快聚合物溶解速率。
如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，所述的細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材固定在接收板或旋轉(zhuǎn)滾筒上，與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連，且細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)為靜電紡絲時的接收面。細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材為含有導(dǎo)電溶液的濕態(tài)膜片，可將其平鋪在接收裝置上，也可將其包裹在旋轉(zhuǎn)滾筒表面。在靜電紡絲時，噴絲針頭與靜電發(fā)生器的正極相連，細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連，且細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)為靜電紡絲時的接收面。在針頭與細(xì)菌纖維素膜之間產(chǎn)生電場，殼聚糖溶液細(xì)流在電場力的作用下均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面。同時殼聚糖溶液細(xì)流與細(xì)菌纖維素內(nèi)的溶液相互作用，殼聚糖溶劑擴(kuò)散入細(xì)菌纖維素所含的溶液中，促進(jìn)殼聚糖纖維成形。
如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，所述的靜電紡絲制備的殼聚糖纖維直徑為100 IOOOnm之間，纖維成網(wǎng)絡(luò)狀均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)。如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，所述的靜電紡絲得到的復(fù)合材料經(jīng)30 70°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，除去多余溶劑。然后經(jīng)壓水處理得到含水重量百分比為30 50%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:采用原位發(fā)酵法和靜電紡絲法，制備了具有抗菌功效的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料，同時保持了細(xì)菌纖維素原有的三維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。本發(fā)明顯著提高了敷料的力學(xué)強(qiáng)度，賦予敷料可縫合性，延長了敷料的使用時間；同時提高了敷料的阻菌性能。本發(fā)明制備過程簡單易行、操作方便、成本低，可作治愈慢性不愈性創(chuàng)傷、壓急性難治性創(chuàng)傷，燒傷以及大面積軟組織缺損和/或感染。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。實施例1:
(I)選取木醋桿菌活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為10%的種子醪液均勻滴加在經(jīng)滅菌處理的滌綸無紡布或織造布上，5min后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基。其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為5mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為25°C，時間為48h。然后補加發(fā)酵培養(yǎng)基，其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為20mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為30°C，培養(yǎng)時間為6d。發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)純化處理，得到細(xì)菌纖維素復(fù)合滌綸無紡布或織造布膜材。其上層為細(xì)菌纖維素膜，下層為無紡布或織造布，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與細(xì)菌纖維素膜相連的細(xì)菌纖維素纖維。(2)將分子量為5萬的殼聚糖溶解于醋酸水溶液中，制備重量百分比為0.1%的均勻殼聚糖紡絲溶液。將細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材固定在接收板上，與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連，且細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)為靜電紡絲時的接收面。采用靜電紡絲法將殼聚糖溶液從噴絲頭射出，射出的殼聚糖溶液細(xì)流噴射到含有重量百分比為90%的無水乙醇的細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材上，得到纖維直徑為IOOnm的殼聚糖纖維狀均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)。靜電紡絲得到復(fù)合材料經(jīng)30°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水重量百分比為50%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料。實施例2:
(I)選取木醋桿菌活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為30%的種子醪液均勻滴加在經(jīng)滅菌處理的錦綸無紡布或織造布上，6min后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基。其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為8mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為28°C，時間為40h。然后補加發(fā)酵培養(yǎng)基，其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為25mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為32°C，培養(yǎng)時間為6d。發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)純化處理，得到細(xì)菌纖維素復(fù)合錦綸無紡布或織造布膜材。其上層為細(xì)菌纖維素膜，下層為無紡布或織造布，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與細(xì)菌纖維素膜相連的細(xì)菌纖維素纖維。(2)將分子量為10萬的殼聚糖溶解于醋酸水溶液中，制備重量百分比為4%的均勻殼聚糖紡絲溶液。將細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材固定在旋轉(zhuǎn)滾筒上，與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連，且細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)為靜電紡絲時的接收面。采用靜電紡絲法將殼聚糖溶液從噴絲頭射出，射出的殼聚糖溶液細(xì)流噴射到含水重量百分比為60%的細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材上，得到纖維直徑為400nm的殼聚糖纖維狀均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)。靜電紡絲得到復(fù)合材料經(jīng)40°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水重量百分比為40%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料。實施例3:
(I)選取木醋桿菌活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為60%的種子醪液均勻滴加在經(jīng)滅菌處理的粘膠纖維無紡布或織造布上，7min后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基。其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為10mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為30°C，時間為32h。然后補加發(fā)酵培養(yǎng)基,其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為30mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為34°C，培養(yǎng)時間為5d。發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)純化處理，得到細(xì)菌纖維素復(fù)合粘膠纖維無紡布或織造布膜材。其上層為細(xì)菌纖維素膜，下層為無紡布或織造布，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與細(xì)菌纖維素膜相連的細(xì)菌纖維素纖維。(2)將分子量為15萬的殼聚糖溶解于醋酸水溶液中，制備重量百分比為6%的均勻殼聚糖紡絲溶液。將細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材固定在接收板上，與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連，且細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)為靜電紡絲時的接收面。采用靜電紡絲法將殼聚糖溶液從噴絲頭射出，射出的殼聚糖溶液細(xì)流噴射到含乙醇水溶液重量百分比為70%的細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材上，得到纖維直徑為500nm的殼聚糖纖維狀均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)。靜電紡絲得到復(fù)合材料經(jīng)50°C高溫處理， 二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水重量百分比為30%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料。實施例4:(I)選取木醋桿菌活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為75%的種子醪液均勻滴加在經(jīng)滅菌處理的脫脂棉纖維無紡布或織造布上，Smin后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基。其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為15_，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為32°C，時間為24h。然后補加發(fā)酵培養(yǎng)基,其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為40mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為36°C，培養(yǎng)時間為4d。發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)純化處理，得到細(xì)菌纖維素復(fù)合脫脂棉纖維無紡布或織造布膜材。其上層為細(xì)菌纖維素膜，下層為無紡布或織造布，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與細(xì)菌纖維素膜相連的細(xì)菌纖維素纖維。(2)將分子量為20萬的殼聚糖溶解于三氟乙酸溶劑中，制備重量百分比為8%的均勻殼聚糖紡絲溶液。將細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材固定在旋轉(zhuǎn)滾筒上，與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連，且細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)為靜電紡絲時的接收面。采用靜電紡絲法將殼聚糖溶液從噴絲頭射出，射出的殼聚糖溶液細(xì)流噴射到含乙醇水溶液重量百分比為50%的細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材上，得到纖維直徑為SOOnm的殼聚糖纖維狀均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)。靜電紡絲得到復(fù)合材料經(jīng)60°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水重量百分比為50%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料。實施例5:
(I)選取木醋桿菌活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為95%的種子醪液均勻滴加在經(jīng)滅菌處理的腈綸無紡布或織造布上，IOmin后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基。其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為20mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為35°C，時間為12h。然后補加發(fā)酵培養(yǎng)基，其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為50mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為40°C，培養(yǎng)時間為3d。發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)純化處理，得到細(xì)菌纖維素復(fù)合腈綸無紡布或織造布膜材。其上層為細(xì)菌纖維素膜，下層為無紡布或織造布，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與細(xì)菌纖維素膜相連的細(xì)菌纖維素纖維。(2)將分子量為30萬的殼聚糖溶解于醋酸水溶液和三氟乙酸混合溶劑中，制備重量百分比為10%的均勻殼聚糖紡絲溶液。將細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材固定在旋轉(zhuǎn)滾筒上，與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連，且細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)為靜電紡絲時的接收面。采用靜電紡絲法將殼聚糖溶液從噴絲頭射出，射出的殼聚糖溶液細(xì)流噴射到含水重量百分比為80%的細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材上，得到纖維直徑為1OOOnm的殼聚糖纖維狀均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)。靜電紡絲得到復(fù)合材料經(jīng)70°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水重量百分比為40%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料。
權(quán)利要求
1.一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，其特征是: 第一步:選取能分泌細(xì)菌纖維素的菌株活化制備成種子醪液，然后將菌株濃度為10 95%的種子醪液均勻滴加在經(jīng)滅菌處理的無紡布或織造布上，加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)12 48h，然后補加發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)3 6d后取出發(fā)酵產(chǎn)物，發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)純化處理，得到細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材； 第二步:將分子量為5 30萬的殼聚糖溶解于有機(jī)溶劑中，制備重量百分比為0.1 10%的均勻殼聚糖紡絲溶液，采用靜電紡絲法將殼聚糖溶液從噴絲頭射出，射出的殼聚糖溶液細(xì)流噴射到含有重量百分比為50 90%的無水乙醇和/或水的細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材上，經(jīng)后處理，得到細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料。
2.如權(quán)利要求1，一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，其特征是:所述的無紡布或織造布的制備原材料可以是滌綸、錦綸、粘膠纖維、脫脂棉纖維或腈綸。
3.如權(quán)利要求1，一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，其特征是:將菌株濃度為10 95%的種子醪液以點陣方式均勻滴加在無菌無紡布或織造布表面，5 IOmin后加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基，其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為5 20mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為25 35°C，時間為12 48h。
4.如權(quán)利要求1，一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，其特征是:補加的發(fā)酵培養(yǎng)基，其中發(fā)酵培養(yǎng)基加入量控制在培養(yǎng)基液面到培養(yǎng)容器底面距離為20 50mm，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為30 40°C，培養(yǎng)時間為3 6d。
5.如權(quán)利要求1，一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，其特征是:細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材，其上層為細(xì)菌纖維素膜，下層為無紡布或織造布，且無紡布或織造布的纖維空隙里存在與細(xì)菌纖維素膜相連的細(xì)菌纖維素纖維。
6.如權(quán)利要求1，一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，其特征是:所述的殼聚糖有機(jī)溶劑為醋酸水溶液和/或三氟乙酸。
7.如權(quán)利要求1，一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，其特征是:細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材固定在接收板或旋轉(zhuǎn)滾筒上，與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連，且細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)為靜電紡絲時的接收面。
8.如權(quán)利要求1，一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，其特征是:靜電紡絲制備的殼聚糖纖維直徑為100 IOOOnm之間，纖維成網(wǎng)絡(luò)狀均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材的上層(細(xì)菌纖維素膜)。
9.如權(quán)利要求1，一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法，其特征是:靜電紡絲得到復(fù)合材料經(jīng)30 70°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，除去多余溶劑，然后經(jīng)壓水處理得到含水重量百分比為30 50%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料的制備方法。涉及一種醫(yī)療器械及其制備技術(shù)領(lǐng)域。包括，將菌株活化制備的種子醪液滴加在無紡布或織造布上，加入少量發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)12～48h。然后補加發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)3～6d后取出發(fā)酵產(chǎn)物。發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)純化處理，得到細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材。采用靜電紡絲法將殼聚糖溶液從噴絲頭射出，射出的殼聚糖溶液細(xì)流噴射到含有無水乙醇和/或水的細(xì)菌纖維素復(fù)合無紡布或織造布膜材上，經(jīng)后處理得到細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性抗菌敷料。本發(fā)明制備過程簡單易行、操作方便、成本低，制備的濕性抗菌敷料可治愈慢性不愈性創(chuàng)傷、壓急性難治性創(chuàng)傷，燒傷以及大面積軟組織缺損和/或感染。
文檔編號A61L15/44GK103120803SQ201210588020
公開日2013年5月29日 申請日期2012年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月29日
發(fā)明者鐘春燕, 其他發(fā)明人請求不公開姓名 申請人:鐘春燕