專(zhuān)利名稱(chēng)：一種苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物制劑，尤其是一種經(jīng)口服給藥用于治療消化道腫瘤的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其制備方法。
背景技術(shù)：
苦參堿是從豆科植物苦參iSophora flavescens Ait.)、豆科 植物廣豆根{Sophora subprosstratae')歲告豆子 iSophora alopecuroides L.)中提取分離得到的一種生物堿，屬于四環(huán)喹諾里西啶類(lèi)，具有顯著的抗腫瘤活性[1]。研究表明，其抗腫瘤活性的作用機(jī)制包括抑制腫瘤增殖、誘導(dǎo)腫瘤分化和凋亡、抑制腫瘤浸潤(rùn)和遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移、減輕腫瘤誘發(fā)的惡病質(zhì)和抑制腫瘤耐藥性、抑制端粒酶活性等。此外，苦參堿還具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解熱降溫，治療心血管疾病，抗動(dòng)脈粥樣硬化，免疫抑制的作用，抑制自身免疫反應(yīng)，治療肝臟疾病，抗病毒等多種藥理作用。新藥研究文獻(xiàn)報(bào)道，目前上市的苦參堿藥品劑型有栓劑、片劑、膠囊和注射液。就目前苦參堿普通口服制劑來(lái)說(shuō)，由于自身劑型大都存在藥效維持時(shí)間較短，需頻繁給藥，且血藥濃度波動(dòng)較大，毒副作用及并發(fā)癥較多，患者易產(chǎn)生耐藥性和藥物不良反應(yīng)，患者依從性低，藥物生物利用度低，臨床療效差等問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種可克服現(xiàn)有技術(shù)不足，經(jīng)口服給藥用于治療消化道腫瘤的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其制備方法。由本發(fā)明的方法可制備得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。本發(fā)明的制備方法為首先分別配制質(zhì)量/體積濃度為0. I 0. 3%的殼聚糖醋酸溶液，再在殼聚糖醋酸溶液中加入0. 3g 0. 7g的CaCl，攪拌使CaCl溶解，配制質(zhì)量/體積濃度為I. 5% 2. 5%的海藻酸鈉溶液，分別稱(chēng)取I. 25g I. 75g的苦參堿和0. 05g 0. 08g的Fe3O4納米粒，加至前述的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液,量取含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過(guò)5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，經(jīng)洗滌處理后，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。采用本發(fā)明的方法可制備出苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。本發(fā)明的制劑具有pH敏感性和磁靶向性，可使苦參堿在消化道內(nèi)不同pH環(huán)境部位，按PH梯度釋放藥物，并可在外加磁場(chǎng)的引導(dǎo)下，實(shí)現(xiàn)靶向定位釋藥特征，減少藥物不良反應(yīng)和毒副作用，提高藥物生物利用度，增強(qiáng)臨床治療效果。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明所述的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球是由主藥和藥用輔料組成。主藥苦參堿起到抗消化道腫瘤作用，藥用輔料是天然高分子材料殼聚糖和海藻酸鈉，交聯(lián)劑是CaCl2，磁性物質(zhì)是Fe3O4納米粒，溶劑是純化水。
本發(fā)明中的殼聚糖是一種天然氨基多糖甲殼素的脫乙酰化產(chǎn)物，含有自由的氨基基團(tuán)。其來(lái)源豐富，價(jià)格低廉，具有很好的生物相容性和生物降解性，生物黏附性和成膜性良好，無(wú)毒、無(wú)刺激、無(wú)過(guò)敏性，環(huán)境友好，不污染環(huán)境，已被廣泛用于醫(yī)藥、化工、食品和水質(zhì)處理等領(lǐng)域中。本發(fā)明中的海藻酸鈉是一種天然陰離子聚合物，具有生物相容和生物降解好的特點(diǎn)，其結(jié)構(gòu)中的羧基可以與殼聚糖分子中的氨基陽(yáng)離子發(fā)生離子反應(yīng)形成聚合電解質(zhì)復(fù)合物，該過(guò)程不涉及熱交聯(lián)過(guò)程中的高溫及化學(xué)交聯(lián)過(guò)程中的共價(jià)鍵形成，對(duì)包載物的性質(zhì)無(wú)影響，因此作為藥物、生物制品、疫苗及細(xì)胞的載體有著極大的優(yōu)越性。本發(fā)明中的Fe3O4納米粒作為磁性物質(zhì)，具有毒性低、易得、飽和磁化強(qiáng)度高等特 點(diǎn)，有利于苦參堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球在外加磁場(chǎng)誘導(dǎo)下，在消化道中的靶向定位，藥物釋放完畢后，自身可隨糞便排出體外，在體內(nèi)不會(huì)造成蓄積中毒或影響機(jī)體功能。本發(fā)明制備的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球擁有pH敏感性和磁靶向性雙重敏感的釋藥機(jī)制。首先，利用其PH敏感性，使苦參堿在胃、十二指腸，小腸，結(jié)腸等不同PH環(huán)境的消化道部位，按pH梯度釋放。此外，該凝膠小球內(nèi)含有Fe3O4納米粒，具有良好的磁響應(yīng)性，可利用外加磁場(chǎng)的誘導(dǎo)性能，將苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球定向轉(zhuǎn)運(yùn)至靶區(qū)，使藥物定位釋放，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)消化道腫瘤的靶向定位給藥，增加苦參堿在消化道腫瘤部位的藥物濃度，減少全身藥物水平，降低藥物毒副作用和不良反應(yīng)，提高藥物生物利用度，降低藥物服用次數(shù)和劑量，增強(qiáng)患者的依從性，提高藥物臨床治療效果。


圖I.實(shí)施例I所得的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的外觀形態(tài)圖，圖中a圖為濕苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球數(shù)碼照片；b圖為干燥苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球數(shù)碼照片；c圖為放大45倍數(shù)的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球掃描電鏡照片；d圖為放大800倍數(shù)的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球掃描電鏡照片。圖2.實(shí)施例I所得的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球紅外光譜圖。圖3.實(shí)施例I所得的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的X射線(xiàn)衍射譜圖。圖4.實(shí)施例I所得的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的磁滯曲線(xiàn)圖，圖中為苦參堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球；為純Fe3O4納米粒。圖5.實(shí)施例I所得的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環(huán)境中的溶脹度圖。圖6.實(shí)施例I所得的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環(huán)境中的苦參堿累積釋放曲線(xiàn)圖。
具體實(shí)施例方式下面是本發(fā)明的實(shí)施例，但本發(fā)明不僅限于實(shí)施例。實(shí)施例I :
I)稱(chēng)取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過(guò)夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱(chēng)取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱(chēng)取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過(guò)夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱(chēng)取苦參堿I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過(guò)5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小 球。實(shí)施例2
I)稱(chēng)取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過(guò)夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱(chēng)取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱(chēng)取海藻酸鈉0. 15g，均勻撒入IOml純化水中，放置過(guò)夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為I. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱(chēng)取苦參堿I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g,加至上述I. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過(guò)5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實(shí)施例3:
I)稱(chēng)取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過(guò)夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱(chēng)取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱(chēng)取海藻酸鈉0. 20g，均勻撒入IOml純化水中，放置過(guò)夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 0%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱(chēng)取苦參堿I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g，加至上述2. 0%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過(guò)5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實(shí)施例4 I)稱(chēng)取殼聚糖o. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過(guò)夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱(chēng)取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱(chēng)取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過(guò)夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。
4)分別稱(chēng)取苦參堿I. 25g、Fe3O4納米粒0. 06g,加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過(guò)5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實(shí)施例5:
I)稱(chēng)取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過(guò)夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱(chēng)取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱(chēng)取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過(guò)夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱(chēng)取苦參堿I. 25g、Fe3O4納米粒0. 08g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過(guò)5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實(shí)施例6
I)稱(chēng)取殼聚糖0. 02g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過(guò)夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 1%的殼聚糖溶液，備用。2)稱(chēng)取CaCl2O. 5g，加至上述0. 1%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱(chēng)取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過(guò)夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱(chēng)取苦參堿I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過(guò)5ml注射器滴加到上述20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實(shí)施例7:
I)稱(chēng)取殼聚糖0. 06g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過(guò)夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 3%的殼聚糖溶液，備用。2)稱(chēng)取CaCl2O. 5g，加至上述0. 3%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱(chēng)取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過(guò)夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱(chēng)取苦參堿I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g,加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過(guò)5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。
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實(shí)施例8
I)稱(chēng)取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過(guò)夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱(chēng)取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為I. 5%。3)稱(chēng)取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過(guò)夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱(chēng)取苦參堿I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g,加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過(guò)5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實(shí)施例9:
I)取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過(guò)夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱(chēng)取CaCl2O. 7g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為3. 5%。3)稱(chēng)取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過(guò)夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱(chēng)取苦參堿I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過(guò)5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實(shí)施例10
I)稱(chēng)取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過(guò)夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱(chēng)取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱(chēng)取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過(guò)夜，攪拌使完全溶解，得 到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱(chēng)取苦參堿I. 50g、Fe3O4納米粒0. 05g,加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過(guò)5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實(shí)施例11
I)稱(chēng)取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過(guò)夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱(chēng)取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱(chēng)取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過(guò)夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱(chēng)取苦參堿I. 75g、Fe3O4納米粒0. 05g,加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過(guò)5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球?？鄥ApH/磁雙重敏感性水凝膠小球的外觀形態(tài)觀察
分別稱(chēng)取濕和干燥后的實(shí)施例I所得的苦參堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球適量，于室溫條件下用肉眼和掃描電子顯微鏡(SEM)觀察苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的表面形態(tài)及微觀結(jié)構(gòu)。觀察前，所有的樣品需噴金處理，控制加速電壓為30 kV，放大倍數(shù)為40及800倍。從圖I可以看出，濕苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球呈球形，棕褐色，形態(tài)較規(guī)則，表面光滑，平均直徑為2. 5^4. Omm(a);室溫放置自然干燥后，仍保持其球形形態(tài)，但體積縮小，直徑約為2mm(b)。由圖I SEM圖片(c，d)可以看出，仍呈球形，形態(tài)較規(guī)貝U，該凝膠小球由于干燥后凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)脫水而表面變得較為粗糙，且具有孔溝和褶皺?？鄥ApH/磁雙重敏感性水凝膠小球的紅外光譜分析
分別稱(chēng)取殼聚糖、海藻酸鈉、苦參堿、施例I所得的空白PH/磁雙重敏感性水凝膠小球及苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球適量，研碎后與KBr細(xì)粉以I :100的比例混合，在瑪瑙乳缽中研磨至均勻，裝入壓片模具，均勻鋪布后，邊抽氣邊加壓，至壓強(qiáng)約20MPa時(shí)維持壓力5min，得到厚約Imm的透明KBr樣品片。將其置于紅外光譜儀的樣品光路中，錄制紅外光譜圖，比較殼聚糖、海藻酸鈉、苦參堿、空白PH/磁雙重敏感性水凝膠小球及苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的紅外光譜圖，結(jié)果見(jiàn)圖2。由圖2可見(jiàn)，殼聚糖的特征吸收峰位于3444、2877、1655、1598，1095和1033CHT1處。海藻酸鈉的特征吸收峰位于1626，1427和1029CHT1處。空白pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的紅外光譜中，殼聚糖和海藻酸鈉的特征吸收峰1419，1087和1032CHT1仍存在，說(shuō)明制備的水凝膠小球中含有二者的成分?？鄥A 紅外光譜圖中，特征吸收峰位于2929、1651、1440、1338，1252cm—1處。苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的紅外光譜圖中，出現(xiàn)了苦參堿的特征吸收峰，說(shuō)明苦參堿被成功載入苦 參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中?？鄥ApH/磁雙重敏感性水凝膠小球的X-衍射分析
分別稱(chēng)取殼聚糖、海藻酸鈉、苦參堿、Fe3O4納米粒、施例I所得的空白pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及苦參堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球適量，置瑪瑙乳缽中研磨粉碎，均勻鋪布后上機(jī)檢測(cè)，比較殼聚糖、海藻酸鈉、苦參堿、Fe3O4納米粒、空白pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及苦參堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球的晶形，選擇掃描角度2 0的范圍為10°、0°，結(jié)果見(jiàn)圖3。由圖3可見(jiàn)，苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球，其主要衍射峰的位置與空白PH/磁雙重敏感性水凝膠小球的衍射峰位置完全一致，苦參堿的部分衍射峰消失，并且殘留的部分苦參堿衍射峰強(qiáng)度發(fā)生了改變，表明大部分苦參堿被成功載入苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中，只有少量苦參堿可能黏附在苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球表面?？鄥ApH/磁雙重敏感性水凝膠小球的磁性能測(cè)定
分別稱(chēng)取Fe3O4納米粒及施例I所得的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球粉末適量，于室溫條件下用振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)(VSM)測(cè)定Fe3O4納米粒和苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的磁滯曲線(xiàn)，考察該凝膠小球的磁響應(yīng)特征。結(jié)果顯示Fe3O4納米粒具有較高的飽和磁化強(qiáng)度，可達(dá)到58. 57emu/g ;剩余磁化強(qiáng)度和矯頑力都為零，表現(xiàn)出典型的超順磁性，在體內(nèi)應(yīng)用時(shí)不會(huì)產(chǎn)生聚集?？鄥APH/磁雙重敏感性水凝膠小球的飽和磁化強(qiáng)度約為4emu/g，且矯頑力為零，該性質(zhì)可使磁性凝膠小球在體內(nèi)不會(huì)產(chǎn)生聚集，在磁場(chǎng)消失后又可以快速的重新分散。結(jié)果見(jiàn)圖4。由此可知，當(dāng)施例I所得的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球通過(guò)口服給藥，途徑胃腸道環(huán)境時(shí)，其釋藥行為可在胃腸道外加磁場(chǎng)的引導(dǎo)下，定位于腫瘤靶區(qū)，發(fā)揮定位釋放作用，使藥物濃集于病灶部位，降低了其他正常組織的中藥物濃度，減少了對(duì)正常組織的損害。從而可有效發(fā)揮該凝膠小球的磁敏感性藥物控釋作用，提高藥物生物利用度，增強(qiáng)臨床治療效果，同時(shí)也可減少藥物不良反和并發(fā)癥，降低藥物毒副作用，改善患者服藥的依從性?？鄥ApH/磁雙重敏感性水凝膠小球的溶脹性試驗(yàn)精密稱(chēng)取施例I所得的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球10mg，分別浸入IOmlpHl. 5的模擬胃液鹽酸溶液和pH 2. 5、pH 5. 0、pH 6. 8、pH 7. 4及pH 8. 0的系列磷酸鹽緩沖溶液中，溶脹介質(zhì)溫度為37±0. 5° C，在預(yù)定的時(shí)間取出，用濾紙吸干小球表面水分后稱(chēng)重，計(jì)算小球的溶脹度(SR)，考察苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在模擬胃液pHl. 5及不同PH值的磷酸鹽緩沖溶液環(huán) 境中的溶脹性能。按以下公式計(jì)算溶脹度=SR=(W-Wtl)ZX ；其中W為苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球溶脹后的總質(zhì)量(g) ,W0為干燥苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球溶脹前的質(zhì)量(g)。結(jié)果表明苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同PH值環(huán)境中溶脹度有明顯的差異。該凝膠小球在pHl. 5及pH2. 5磷酸鹽緩沖液中幾乎不溶脹；在PH6. 8、pH8. 0的的弱堿性緩沖溶液中，表現(xiàn)出較好的敏感性，90分鐘時(shí)達(dá)到最大溶脹度，分別為24. 0及22. 6。超過(guò)90分鐘后，小球逐漸開(kāi)始破裂，在圖中溶脹曲線(xiàn)有下降的趨勢(shì)。以上結(jié)果表明苦參堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球在人工胃液pH值條件下不易溶脹破裂，不利于藥物釋放，而在小腸、結(jié)腸位置具有很好的溶脹性，有利于藥物釋放，具有明顯的pH敏感性，即環(huán)境pH越低溶脹度越小，環(huán)境pH越高溶脹度越大。結(jié)果見(jiàn)圖5?？鄥ApH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環(huán)境中的釋放行為試驗(yàn)
按《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版二部附錄釋放度測(cè)定法中第一法規(guī)定進(jìn)行累積釋放度測(cè)定。稱(chēng)取施例I所得的苦參堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球50mg，精密稱(chēng)定，分別以pH2. 5、pH5. 0、pH6. 8、pH7. 4、pH8. 0的不同pH值磷酸鹽緩沖溶液500ml為溶出介質(zhì)，控制轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，溫度為37. 0±0. 5°C,依法測(cè)定，于0. 5、1、2、4、8、12、18、24小時(shí)，分別定點(diǎn)精密量取釋放介質(zhì)1ml，并同時(shí)補(bǔ)充相同溫度、相同體積的空白釋放介質(zhì)1ml，用0. 22iim微孔濾膜過(guò)濾，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液5 u 1，注入高效液相色譜儀(Agilent 1200型，美國(guó))，測(cè)定苦參堿在220nm波長(zhǎng)處的峰面積，并代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程計(jì)算累積釋放度，根據(jù)測(cè)定結(jié)果繪制累計(jì)釋放曲線(xiàn)。色譜條件為以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇
0.1%磷酸水溶液(70 :30，三乙胺調(diào)pH為6. 0)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm，流速為I. Oml/min，柱溫為30°C，進(jìn)樣量為5 yl，理論塔板數(shù)按苦參堿峰計(jì)不低于2000。藥物累積釋放度(%) = [Rt/L]X100，其中，Rt表示t時(shí)間內(nèi)的藥物累計(jì)釋放量，L表示最初載入的藥物總量。圖6為苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環(huán)境中的累積釋放曲線(xiàn)。如圖所示，苦參堿在不同pH值的磷酸鹽緩沖液中的釋放行為有明顯差異。在pH2. 5的酸性溶液中釋藥量較低，2小時(shí)釋放約26%，且該時(shí)間點(diǎn)后藥物釋放較慢，8小時(shí)僅釋放34. 90% ;而在pH6. 8的弱堿性溶液中釋藥量較大，2小時(shí)釋放77%左右，且釋藥較快，8小時(shí)釋放達(dá)97. 11%。以上結(jié)果表明該凝膠小球具有明顯的PH敏感性，這也與溶脹實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致，即環(huán)境pH越低，藥物釋放越少，環(huán)境pH越高，藥物釋放越多。結(jié)果見(jiàn)圖6。由此可知，當(dāng)施例I所得的苦參堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球通過(guò)口服給藥，途徑胃腸道環(huán)境時(shí)，其釋藥行為可隨胃腸道PH梯度變化，而產(chǎn)生不同的藥物釋放量。即環(huán)境PH越低，凝膠小球溶脹越小，藥物釋放就越少；環(huán)境PH越高，凝膠小球溶脹越大，藥物釋放就越多。從而可
有效發(fā)揮該凝膠小球的PH敏感性藥物控釋作用，提高藥物生物利用度，增強(qiáng)臨床治療效果，同時(shí)也可減少藥物不良反和并發(fā)癥，降低藥物毒副作用，改善患者服藥的依從性?？鄥ApH/磁雙重敏感性水凝膠小球釋放動(dòng)力學(xué)
采用peppas方程對(duì)施例I所得的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的釋放機(jī)制進(jìn)行探討。peppas方程為Mt/M°° = ktn ;Mt/M 表示藥物在某一時(shí)刻的累積釋放分?jǐn)?shù)(以％表示);t為釋放時(shí)間；k為速率常數(shù)；n為釋放參數(shù)，是表征peppas方程中釋放機(jī)制的特征參數(shù)，當(dāng)0. 43〈n〈0. 85時(shí)，藥物的釋放機(jī)制為非Fick擴(kuò)散，由藥物擴(kuò)散和骨架溶蝕共同作用；當(dāng)n〈0. 43時(shí)，為Fick擴(kuò)散；當(dāng)n>0. 85時(shí)，為骨架溶蝕機(jī)制。該水凝膠小球在pH2. 5環(huán)境中釋放度較小，而在PH5. (T8. 0的環(huán)境中釋放度較大，苦參堿從水凝膠小球中的釋放機(jī)制均為Fick擴(kuò)散。結(jié)果見(jiàn)表I。表I苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環(huán)境中的釋放機(jī)制
pHnkX 10r釋藥機(jī)制
2.50. 24752.29510.9303Fick 擴(kuò)散
5.00. 27274.58140.9977Fick 擴(kuò)散 6.8 0. 1129 7.2728 0.9906 Fick 擴(kuò)散 7.4 0.0907 7.8127 0.9894 Fick 擴(kuò)散
8.00.11267. 22100.9836Fick 擴(kuò)散。
權(quán)利要求
1.一種苦參堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球的制備方法，其特征在于首先分別配制質(zhì)量/體積濃度為O. I O. 3%的殼聚糖醋酸溶液，再在殼聚糖醋酸溶液中加入O. 3g O. 7g的CaCl，攪拌使CaCl溶解，配制質(zhì)量/體積濃度為I. 5% 2. 5%的海藻酸鈉溶液，分別稱(chēng)取I. 25g I. 75g的苦參堿和O. 05g O. 08g的Fe3O4納米粒，加至前述的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，量取含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過(guò)5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過(guò)濾，經(jīng)洗滌處理后，室溫放置自然干燥，得到苦參堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球。
2.權(quán)利要求I所述的方法制備的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種經(jīng)口服給藥用于治療消化道腫瘤的苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其制備方法。本發(fā)明的制備方法為在殼聚糖醋酸溶液中加入0.3g～0.7g的CaCl，攪拌使CaCl溶解，配制質(zhì)量/體積濃度為1.5%～2.5%的海藻酸鈉溶液，分別稱(chēng)取適量的苦參堿和適量的Fe3O4納米粒，加至前述的海藻酸鈉溶液中，得到含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，量取含苦參堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液滴加到的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)后過(guò)濾，經(jīng)洗滌處理后，室溫放置自然干燥，得到苦參堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。
文檔編號(hào)A61K47/36GK102727445SQ20121024285
公開(kāi)日2012年10月17日 申請(qǐng)日期2012年7月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月14日
發(fā)明者劉濤, 張玲玲, 李平, 李曉強(qiáng), 李玉民, 焦海勝 申請(qǐng)人:蘭州大學(xué)第二醫(yī)院