專利名稱：一種小鼠結(jié)腸肌電生理活動測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)療評價及檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體地說涉及一種鼠結(jié)腸肌電生理活動測定方法及用途。
背景技術(shù)：
隨著人們生活水平的提高、工作節(jié)奏的加快，便秘的發(fā)病率逐年上升。便秘作為ー種常見的臨床癥狀，目前確切病因不明。據(jù)研究顯示，便秘患者結(jié)腸推進性收縮波數(shù)目減少，收縮幅度減低，導(dǎo)致糞便在結(jié)腸通過減慢。由于結(jié)腸在有效地促使糞便排出體外方面具有重要作用，因此便秘常被認為是結(jié)腸動力異常所致。結(jié)腸的肌電動作電位產(chǎn)生于慢波之上，與平滑肌收縮相一致，是推進性運動的主 要動力，因而結(jié)腸肌電活動作為ー項客觀的電生理指標，可間接反映結(jié)腸動力狀況。記錄肌電活動是目前結(jié)腸動力研究的重要方法之一。目前在大鼠身上的電極埋植技術(shù)已有公開文獻報道，但該技術(shù)在小鼠動物身上均難以實現(xiàn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種鼠結(jié)腸肌電生理活動的測定方法及用途。本發(fā)明公開了ー種測定鼠結(jié)腸肌電生理活動的方法，包括如下步驟
a)取鼠，麻酔，使其仰臥于手術(shù)臺上；
b)消毒，沿下腹正中縱行切開腹部，顯露回盲部，于距盲腸1-1.5cm的結(jié)腸處安置一對銅絲電極；
c)導(dǎo)線經(jīng)切ロ引出接肌電信號記錄儀。其中所述的鼠為小鼠。其中步驟b)中，銅絲的直徑為0. 25-0. 5cm。其中步驟b)中，兩銅絲電極相距0. 5cm。其中步驟b)中，將銅絲電極插入漿肌層內(nèi)。其中步驟c)中，肌電信號記錄儀的靈敏度參數(shù)選擇時間常數(shù)為0. 001s，増益放大倍數(shù)為250-500，高頻濾波為15-30HZ。其中步驟C)中，肌電信號記錄儀為BL-410、BL-420、BL-420F等BL-410系列生物機能實驗系統(tǒng)。本發(fā)明的另一目的是提供基于便秘小鼠動物模型的藥物篩選平臺，即結(jié)腸肌電活動測定方法在便秘小鼠模型中的應(yīng)用。便秘為臨床常見癥狀，發(fā)病率高，常以排便間隔延長、大便干結(jié)、大便艱澀不暢為主要表現(xiàn)。因其病因不明確，臨床療效欠佳，本發(fā)明通過建立小鼠便秘模型，觀察其結(jié)腸肌電生理變化情況，分析便秘小鼠結(jié)腸肌電生理電活變化與便秘的內(nèi)在聯(lián)系，從而探討可能發(fā)生便秘的機制，為其臨床防治便秘提供理論依據(jù)。
本發(fā)明首次成功將結(jié)腸肌電生理活動測定方法應(yīng)用于便秘小鼠，該測定方法材料易得，簡單易行，重復(fù)性好，成功率高，對研究對象損失輕微，適用于小鼠等小動，可客觀地反映小鼠不同生理狀態(tài)下結(jié)腸肌電活動的變化，為系統(tǒng)研究結(jié)腸運動機理及為便秘的防治提供了有力的工具。


圖I對照組小鼠結(jié)腸肌電圖。圖2便秘組小鼠結(jié)腸肌電圖。
具體實施例方式材料與方法
I材料
實驗動物健康昆明小鼠，體重在20g 28g之間，雌雄各半。
試劑復(fù)方地芬諾酯片為江蘇平光制藥有限責(zé)任公司產(chǎn)品(批號0805221,2. 5g/片)，曙紅Y為上海永葉生物科技有限公司(CAS號17372-87-1)。
導(dǎo)線銅絲，直徑為0. 25mm。
儀器BL-410生物機能實驗系統(tǒng)。2 方法
2.I藥物給予方法 灌胃給藥。
2.2結(jié)腸肌電活動參數(shù)分析
將每組的記錄結(jié)果以3min作為ー個時間段的頻率和振幅的均值、標準差及變異系數(shù)進行比較。
慢波頻率變異系數(shù)(％)=慢波頻率標準差/慢波頻率均值X 100%
慢波振幅變異系數(shù)(％)=慢波振幅標準差/慢波振幅均值X 100%
2.3統(tǒng)計學(xué)處理
數(shù)據(jù)以土s表示，采用Excel2007軟件進行t檢驗。實施例I便秘小鼠模型的建立
I. I分組取小鼠20只，雌雄兼用，稱重后隨機分成2組，對照組，便秘組，每組10只。I. 2藥劑的配制取2片復(fù)方地芬諾酯片加蒸餾水5ml配成混懸液。取2g曙紅加IOml蒸餾水配成混懸液。I. 3建模試驗前24h停食給水，便秘組按10mg/kg復(fù)方地芬諾酯混懸液灌胃復(fù)制便秘模型。對照組則給水和淀粉的混懸液替代。每天記錄小鼠糞便粒數(shù)、糞便的形態(tài)及小鼠的體重，井根據(jù)糞便及體重變化適當(dāng)增減給藥劑量。飼養(yǎng)時間為30天。2.實驗指標建模30min后各組按10mg/kg曙紅混懸液對小鼠進行灌胃。灌胃后小鼠首粒紅便的時間，糞便的性狀、粒數(shù)。3.結(jié)果便秘組小鼠的糞便較對照組小鼠的糞便細小、干硬。便秘組及蘆薈組小鼠6h內(nèi)排便的粒數(shù)較對照組明顯減少，首粒紅便排出的時間長(見表I)。表I小鼠排便情況的測定(f±0
權(quán)利要求
1.一種用于測定鼠結(jié)腸肌電生理活動的方法，包括如下步驟 a)取鼠，麻酔，使其仰臥于手術(shù)臺上； b)消毒，沿下腹正中縱行切開腹部，顯露回盲部，于距盲腸1-1.5cm的結(jié)腸處安置一對銅絲電極； c)導(dǎo)線經(jīng)切ロ引出接肌電信號記錄儀。
2.權(quán)利要求I所述的測定方法，其中鼠為小鼠。
3.權(quán)利要求I所述的測定方法，步驟b)中，銅絲的直徑為0.25-0.5cm。
4.權(quán)利要求I所述的測定方法，步驟b)中，兩銅絲電極相距0.5cm。
5.權(quán)利要求I所述的測定方法，步驟b)中，將銅絲電極插入漿肌層內(nèi)。
6.權(quán)利要求I所述的測定方法，步驟c)中，肌電信號記錄儀的靈敏度參數(shù)選擇時間常數(shù)為0. 001s，增益放大倍數(shù)為250-500，高頻濾波為15-30HZ。
7.權(quán)利要求I所述的測定方法，步驟c)中，肌電信號記錄儀為BL-410、BL-420、BL-420F等BL-410系列生物機能實驗系統(tǒng)。
8.權(quán)利要求I所述的測定方法，在便秘小鼠模型結(jié)腸肌電活動測定中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種鼠結(jié)腸肌電生理活動的測定方法及用途。方法用復(fù)方地芬諾酯混懸液對小鼠進行灌胃建立便秘模型，后選用醫(yī)用縫合針，銅絲制作成銅絲電極，測定其結(jié)腸的肌電生理活動變化。結(jié)果與對照組相比，便秘組小鼠的結(jié)腸慢波頻率、頻率變異系數(shù)、振幅、振幅變異系數(shù)有極顯著差異P<0.01。結(jié)論此小鼠結(jié)腸肌電生理活動的測定方法具有以下優(yōu)點1、該測定方法材料易得，簡單易行，重復(fù)性好，成功率高，2、對研究對象損傷輕微，適用于小鼠等小動物，3、該測定方法可客觀地反映小鼠不同生理狀態(tài)下結(jié)腸肌電活動的變化，4、本發(fā)明為系統(tǒng)研究結(jié)腸運動機理及為便秘的防治提供了有力的工具。
文檔編號A61B5/0488GK102727195SQ20121017088
公開日2012年10月17日 申請日期2012年5月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月29日
發(fā)明者余意, 侯軟玲, 劉曉麗, 盧智敏, 姜洪波, 安娜, 宋亭亭, 宦楠楠, 徐磊, 李多多, 杜愛林, 楊俊 , 沈慧, 洪淵, 譚軍, 趙東海, 路承彪, 連陽陽, 郭永臣 申請人:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院