專利名稱:一種白蓮蒿總黃酮微波輔助提取方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及的是ー種白蓮蒿總黃酮微波輔助提取方法。
背景技術(shù):
白蓮蒿(Artemisia sacrorum Ledeb.),又名萬(wàn)年蒿、鐵桿蒿,系屬菊科(Compositae)蒿屬(Artemisia)半灌木狀草本植物,資源豐富,除高寒地區(qū)外,全國(guó)各地均有分布,常作為民間藥使用,具有清熱、解毒、祛風(fēng)、利濕之功效。近年來(lái)藥理實(shí)驗(yàn)證實(shí),白蓮蒿的こ醇提取物可降低四氯化碳、對(duì)こ酰氨基酚所致肝損傷的小鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶及TNF- α活性,減輕肝組織損傷,且對(duì)肝癌細(xì)胞H印G-2増殖有一定的抑制作用,有保肝護(hù)肝之功效[2]。白蓮蒿化學(xué)成分豐富,富含黃酮類化合物[3],該類化合物在自然界廣泛存在,具有保護(hù)肝損傷、抗腫瘤、抗菌、抗瘧原蟲、消炎和抗氧化等顯著的藥理活性,已受 到廣泛關(guān)注[4’5]。此外,黃酮類化合物還可抑制油脂及富含油脂食品的脂質(zhì)過(guò)氧化,具有天然抗氧化劑的作用,避免了人工合成抗氧化劑毒性和致癌性等缺陷[6],具有重要的開(kāi)發(fā)價(jià)值。因此,為了最大程度的獲得白蓮蒿中的黃酮類化合物,尋求合適的提取エ藝技術(shù)極其重要。但是迄今為止,有關(guān)白蓮蒿中黃酮類化合物提取エ藝的研究卻鮮有報(bào)道。微波輔助提取(Microwave-assistedExtraction Technique, MAE)作為一種新型的提取方法,具有省時(shí),提取率高,操作簡(jiǎn)便,溶劑消耗少、低污染等優(yōu)點(diǎn)[7’8],已被廣泛應(yīng)用于天然活性成分的提取。響應(yīng)面分析法(Response Surface methodology, RSM)是優(yōu)化エ藝參數(shù)的ー種有效統(tǒng)計(jì)方法,采用多元回歸方程來(lái)擬合因素與響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系,分析因素間的交互作用,進(jìn)而確定最優(yōu)エ藝參數(shù)。響應(yīng)面分析法因其設(shè)計(jì)合理、試驗(yàn)次數(shù)少和試驗(yàn)時(shí)間短,已被逐漸關(guān)注并應(yīng)用于エ藝優(yōu)化中[9],常用設(shè)計(jì)如Central CompositeDesign(CCD)、Box-Benhnken Design (BBD)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有的不足提供ー種白蓮蒿總黃酮微波輔助提取方法。本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種白蓮蒿總黃酮微波輔助提取方法,將白蓮蒿地上部分除去雜質(zhì)后、陰干、粉碎過(guò)40目篩,稱取粗粉置于三角瓶中,加石油醚浸泡過(guò)夜脫脂,傾去浸提液,于通風(fēng)櫥中揮去石油醚,晾干,保存于干燥處備用;采用こ醇水溶液進(jìn)行微波提取,提取時(shí)間2min、25倍液料比(単位mL/g)、こ醇水溶液體積濃度為40%、微波功率280W。本發(fā)明以こ醇水溶液為提取溶劑,通過(guò)單因素試驗(yàn)考察微波處理時(shí)間、液料比、こ醇體積分?jǐn)?shù)及微波功率四個(gè)因素對(duì)白蓮蒿總黃酮提取得率的影響,以此為基礎(chǔ),采用響應(yīng)面法優(yōu)化微波提取白蓮蒿總黃酮的エ藝參數(shù),以期為白蓮蒿資源的開(kāi)發(fā)與利用提供理論依據(jù)。
圖I時(shí)間對(duì)總黃酮提取得率的影響;圖2料液比對(duì)總黃酮提取得率的影響;圖3こ醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)總黃酮提取得率的影響;圖4微波功率對(duì)總黃酮提取得率的影響;圖5為兩因素交互作用對(duì)總黃酮提取得率影響的響應(yīng)曲面;
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合具體實(shí)施例,對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。 I材料與方法I. I材料與試劑白蓮蒿2010年9月下旬采自陜西省安塞縣;蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(純度彡98%):上海晶純?cè)噭┯邢薰?;DPPH· :Sigma公司;其它試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。I. 2主要儀器設(shè)備MG5017M微波爐(LG電器有限公司);752紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海光譜儀器有限公司);標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)篩(浙江上虞市金鼎標(biāo)準(zhǔn)篩具廠);RE_52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠);FW-200粉碎機(jī)(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)。I. 3試驗(yàn)方法I. 3. I蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品20. OOmg,經(jīng)30%こ醇溶解并定容至IOOmL,搖勻即得O. 20mg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液0,2. 0,4. 0,6. 0,8. O、10. OmL于具塞試管中,30%こ醇補(bǔ)充至12. 5mL,各加入5% NaNO2試液O. 7mL,混勻后靜置6min ;加入O. 7mL10% Al (NO3) 3溶液,搖勻后靜置6min ;加入4% NaOH溶液5mL,再加入30 %こ醇溶液定容至25mL,靜置10min,510nm下測(cè)定吸光度,得線性回歸方程A = 11.927C+0. 0004,R2 = I,式中A為吸光度、C(mg/mL)為質(zhì)量濃度。I. 3. 2提取エ藝流程白蓮蒿一去雜一陰干一粉碎一過(guò)篩一除脂一晾干一こ醇水溶液浸堤一微波輻射處理一過(guò)濾一濃縮一定容一總黃酮提取液。I. 3. 3樣品的預(yù)處理將白蓮蒿地上部分除去雜質(zhì)后、陰干、粉碎過(guò)40目篩,稱取IOOg粗粉置于IL三角瓶中,加500mL石油醚浸泡過(guò)夜脫脂,傾去浸提液,于通風(fēng)櫥中揮去石油醚,晾干,保存于干燥處備用。I. 3. 4白蓮蒿總黃酮的微波提取及含量計(jì)算準(zhǔn)確稱取白蓮蒿粗粉I. 0g,按一定的液料比加入こ醇水溶液,常溫下浸泡20min后,于設(shè)定功率和時(shí)間下進(jìn)行間歇式微波提取,考察提取時(shí)間(O 5min)、液料比(10 35倍(mL/g)、こ醇水溶液體積分?jǐn)?shù)(30% 60%,V/V)和微波功率(O 720W)對(duì)總黃酮提取得率的影響。冷卻提取液,抽濾,減壓濃縮,殘?jiān)?jīng)30%こ醇水溶液溶解并定容至IOOmL,搖
勻,測(cè)定總黃酮提取得率。計(jì)算公式如下
權(quán)利要求
1.一種白蓮蒿總黃酮微波輔助提取方法,其特征在于,將白蓮蒿地上部分除去雜質(zhì)后、陰干、粉碎過(guò)40目篩,稱取粗粉置于三角瓶中,加石油醚浸泡過(guò)夜脫脂,傾去浸提液,于通風(fēng)櫥中揮去石油醚,晾干,保存于干燥處備用;采用こ醇水溶液微波提取,提取時(shí)間2min、25倍液料比(単位mL/g)、こ醇水溶液體積濃度為40%、微波功率280W。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種白蓮蒿總黃酮微波輔助提取方法,將白蓮蒿地上部分除去雜質(zhì)后、陰干、粉碎過(guò)40目篩,稱取粗粉置于三角瓶中,加石油醚浸泡過(guò)夜脫脂,傾去浸提液,于通風(fēng)櫥中揮去石油醚,晾干,保存于干燥處備用;采用乙醇水溶液進(jìn)行微波提取,提取時(shí)間2min、25倍液料比(單位mL/g)、乙醇水溶液體積濃度為40%、微波功率280W。本發(fā)明以乙醇水溶液為提取溶劑,通過(guò)單因素試驗(yàn)考察微波處理時(shí)間、液料比、乙醇體積分?jǐn)?shù)及微波功率四個(gè)因素對(duì)白蓮蒿總黃酮提取得率的影響,以此為基礎(chǔ),采用響應(yīng)面法優(yōu)化微波提取白蓮蒿總黃酮的工藝參數(shù),以期為白蓮蒿資源的開(kāi)發(fā)與利用提供理論依據(jù)。
文檔編號(hào)A61P39/00GK102688271SQ20121015713
公開(kāi)日2012年9月26日 申請(qǐng)日期2012年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月18日
發(fā)明者梁宗鎖, 舒志明, 郝文芳, 黃靜 申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)