專利名稱：寶華玉蘭種子提取物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中草藥提取物，特別是一種寶華玉蘭種子提取物；本發(fā)明還涉及前述寶華玉蘭種子提取物的用途。
背景技術(shù)：
寶華玉蘭(Magnolia zenii)是木蘭科木蘭屬的植物,為中國(guó)的特有植物。寶華玉蘭的聚合果圓柱形，長(zhǎng)6-14厘米，徑2-3厘米，瞢莢果圓形，有疣點(diǎn)狀凸起。種子寬倒卵圓形，長(zhǎng)寬約I厘米，外種皮紅色，內(nèi)種皮黑色。現(xiàn)有技術(shù)中，寶華玉蘭種子的用途未見相關(guān)報(bào)道
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新的具有醫(yī)藥用途的寶華玉蘭種子提取物。本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供上述寶華玉蘭種子提取物的用途。本發(fā)有所要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種寶華玉蘭種子提取物，其特點(diǎn)是該提取物以寶華玉蘭種子為原料，采用乙醇浸泡的方式提取得到。本發(fā)明所述的寶華玉蘭種子提取物技術(shù)方案中所述的乙醇的濃度優(yōu)選為95%。本發(fā)明所述的寶華玉蘭種子提取物技術(shù)方案中優(yōu)選為浸泡2-3次，為常溫浸泡，浸泡時(shí)間為為20-90天，合并浸取液，減壓濃縮成浸膏。本發(fā)明所述的寶華玉蘭種子提取物可以作為有效成份制備抗癌藥物。以下為發(fā)明人所做的寶華玉蘭種子提取物相關(guān)試驗(yàn)。一、實(shí)驗(yàn)藥物EESMZC制備
取寶華玉蘭種子，用95%乙醇浸泡3次，為常溫浸泡，第一次浸泡90天，第二次浸泡60天，第三次浸泡60天，合并浸取液，減壓濃縮成浸膏，即得寶華玉蘭種子乙醇總浸膏。寶華玉蘭種子乙醇總浸膏(Ethanol Extract from Seeds of Magnolia zenii Cheng)以下簡(jiǎn)稱為 EESMZC。二、ICR鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)證實(shí)EESMZC未呈現(xiàn)毒性
I、試驗(yàn)?zāi)康母鶕?jù)《化學(xué)藥物急性毒性試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求觀察EESMZC —次給予ICR小鼠后的急性毒性反應(yīng)和死亡情況。2、試驗(yàn)材料
受試樣品EESMZC，由淮海工學(xué)院提供、生理鹽水溶解、現(xiàn)配現(xiàn)用；
受試動(dòng)物來(lái)源、種系、品系ICR小鼠，購(gòu)自中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許叫證SCXK(軍)2007-004，合格證編號(hào)0008473 ;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證:SYXK (軍)2007-030。日齡35 — 56天，體重:18—22g，性另Ij :雌雄各半，動(dòng)物數(shù)每組10只，共180只。3、試驗(yàn)方法(I)給受試樣品途徑與體積本實(shí)驗(yàn)采用灌胃給藥，給藥體積為0. 4ml/10g。(2)組別與劑量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，進(jìn)行如下分組
以劑距 0.8 設(shè)置 8 個(gè)劑量，分別為 IOOOOmg / kg、8000mg / kg、6400mg / kg、5120mg / kg、4096 mg / kg、3277 mg / kg、2621 mg / kg、2097 mg / kg。(3)實(shí)驗(yàn)分組與觀察
試驗(yàn)時(shí)，隨機(jī)將動(dòng)物分為10組，每組10只，雌雄各半，給藥前動(dòng)物禁食12h，按體重灌胃給藥，給藥后即觀察小鼠的皮膚、眼、活動(dòng)、攝食、飲水、排便，呼吸變化及中毒表現(xiàn)和死亡情況共14 d，死亡動(dòng)物及時(shí)尸檢，存活小鼠14d后處死并尸檢；
4.統(tǒng)計(jì)處理應(yīng)用 SPSS (Staffstical Package for the Social Science) 17. 0 通過(guò)機(jī)率單位加權(quán)回歸法(Bliss法)計(jì)算LD50。試驗(yàn)結(jié)果各組別未出現(xiàn)死亡，受試樣品EESMZC無(wú)毒性?！とTT結(jié)果表明，EESMZC對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞NIH 3T3、人肝癌細(xì)胞H印G2、人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的體外生長(zhǎng)均可顯著抑制。(一)EESMZC (種子乙醇總浸膏)抗炎抗腫瘤活性試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康臏y(cè)試受試樣品對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞NIH 3T3、人肝癌細(xì)胞H印G-2、人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231體外增殖有無(wú)抑制作用及作用強(qiáng)度。受試樣品受試樣品地下總膏由淮海工學(xué)院提供，DMSO溶解，配制成400mg/ml的母液，_20°C保存?zhèn)溆茫?br> 對(duì)照藥物紫杉醇注射液；廠家太極集團(tuán)四川太極制藥有限公司；批號(hào)20090403。細(xì)胞株見表I :
表I :細(xì)胞株及培養(yǎng)條件
Complete grswth mediumAtmosphipr#
Oil line.............—..........."............—...........-T^mpsratiire ........................- - - —.............
__baif medhyii__Mrmi___air
小JT3 ^ DMEMihiRh glucose) CS 3 ^_ 95 _5e
入Jt.S鐘胸 HcpC.-_ KFM-1￠40_ CS ijX)_ 95%_5%
入MDA-MB-231 _ gMEMChighghcosrt CS 3”:_. 9 %_5
組別與劑量
陰性對(duì)照組；溶媒對(duì)照組(DMS0 0. 1%);陽(yáng)性對(duì)照組(Taxol 10ug/ml)
受試樣品組400ug/ml ；300ug/ml ；200ug/ml ； 100ug/ml ；75ug/ml ；50ug/ml ；25ug/ml ；12.5ug/ml ；6.25ug/ml
實(shí)驗(yàn)設(shè)備與試劑見表2
表2 :實(shí)驗(yàn)設(shè)備與儀器
權(quán)利要求
1.一種寶華玉蘭種子提取物，其特征在于該提取物以寶華玉蘭種子為原料，采用乙醇浸泡的方式提取得到。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的寶華玉蘭種子提取物，其特征在于所述的乙醇的濃度為95%。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的寶華玉蘭種子提取物，其特征在于浸泡2-3次，為常溫浸泡，浸泡時(shí)間為為20-90天，合并浸取液，減壓濃縮成浸膏。
4.權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)所述的寶華玉蘭種子提取物為有效成份制備抗癌藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明是一種寶華玉蘭種子提取物，該提取物以寶華玉蘭種子為原料，采用乙醇浸泡的方式提取得到。本發(fā)明寶華玉蘭種子提取物無(wú)毒性，經(jīng)MTT結(jié)果表明，EESMZC對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞NIH3T3、人肝癌細(xì)胞HepG2、人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的體外生長(zhǎng)均可顯著抑制。本發(fā)明寶華玉蘭種子提取物可以作為有效成份制備抗癌藥物。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102793748SQ20121014304
公開日2012年11月28日 申請(qǐng)日期2012年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月10日
發(fā)明者宋曉凱 申請(qǐng)人:淮海工學(xué)院