專利名稱：一種制備蘭嶼樫木總皂苷的方法
技術領域：
本發(fā)明屬于中藥化學領域，涉及一種制備蘭嶼樫木總皂苷的方法。
背景技術：
蘭ill與裡木系棟科(Meliaceae)植物蘭ill與裡木應cumingianum DC.,產自臺灣蘭_，分布于菲律賓，其化學成分主要為三職阜苷類，如蘭_樫木苷K (Cumingianoside K)、蘭_裡木苷 P (Cumingianoside )、蘭_裡木苷 M (Cumingianoside ]\0、蘭_裡木苷L(Cumingianoside L)、蘭_樫木苷Q(Cumingianoside Q)等,均具有顯著的生理活性,呈現一定的細胞毒活性。目前，對蘭嶼樫木的開發(fā)和利用嚴重不足，另外，還未見大量制備蘭嶼樫木皂苷的方法報道。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種制備蘭嶼樫木總皂苷的方法，
為實現上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案
一種制備蘭嶼樫木總皂苷的方法，其特征在于包括以下步驟
(I)取蘭嶼樫木葉50°C左右烘干粉碎，得到原料粉末，然后微波輻射條件下用有機溶劑提取；(2)對提取液減壓濃縮回收溶劑后加水成懸浮液，加入大孔樹脂吸附，先用水或10-20%的乙醇溶液洗去雜質，再用55-70%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫液；(3)洗脫液加入超濾膜系統(tǒng)超濾，透過液再加入納濾膜系統(tǒng)納濾，濃縮液加適量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷層；(4)將二氯甲烷層加氧化鋁拌樣，裝入氧化鋁層析柱，70-95%乙醇洗脫，收集3-8倍柱體積量的洗脫液，減壓回收乙醇至盡，放置過夜，將沉淀物濾出干燥得到白色粉末，即是蘭嶼樫木總皂苷。步驟(I)中所述有機溶劑為乙醇、甲醇或丙酮溶液。步驟(2)中所述大孔吸附樹脂選自AB-8、D4020、D101、D103、HP20中的一種。步驟(3)中所述的超濾膜可選管式或中空有機膜，截留分子量為3000-10000 ;所述的納濾膜可選管式或中空有機膜，截留分子量不大于500。采用本發(fā)明方法制備蘭嶼樫木總皂苷，操作簡單，環(huán)境污染小、設備投入小，有利于大生產操作。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例I :
將蘭嶼樫木葉50°C左右烘干粉碎過20目篩，得到蘭嶼樫木葉粉末，取5kg加入60%乙醇溶液微波輻射條件下提取30min，過濾，提取2次，將提取液合并減壓濃縮回收溶劑后加適量水制成懸浮液，過D4020大孔樹脂吸附，先用少量水洗脫至洗脫液不渾濁，棄去，再用60%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，洗脫液加入截留分子量5000的中空纖維素超濾膜系統(tǒng)超濾，進口壓力控制O. 6MPa，常溫過濾，加適量水透析，透過液再加入截留分子量500中空纖維素納濾膜系統(tǒng)納濾，濃縮液加適量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷層；(4)將二氯甲烷層加氧化鋁拌樣，裝入氧化鋁層析柱，70%乙醇洗脫，收集3倍柱體積量的洗脫液，減壓回收乙醇至盡，放置過夜，將沉淀物濾出干燥得到白色粉末，即是蘭嶼樫木總皂苷5. 2g，總皂苷含量為83%。實施例2
將蘭嶼樫木葉50°C左右烘干粉碎過20目篩，得到蘭嶼樫木葉粉末，取5kg加入70%甲醇溶液微波輻射條件下提取30min，過濾，提取2次，將提取液合并減壓濃縮回收溶劑后加適量水制成懸浮液，過AB-8大孔樹脂吸附，先用少量水洗脫至洗脫液不渾濁，棄去，再用60%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，洗脫液加入截留分子量6000的中空纖維素超濾膜系統(tǒng)超濾，進口壓力控制O. 5MPa，常溫過濾，加適量水透析，透過液再加入截留分子量500管式纖維素納濾膜系統(tǒng)納濾，濃縮液加適量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷層；(4)將二氯甲烷層加氧化鋁拌樣，裝入氧化鋁層析柱，75%乙醇洗脫，收集5倍柱體積量的洗脫液，減壓回收乙醇至盡，放置過夜，將沉淀物濾出干燥得到白色粉末，即是蘭嶼樫木總皂苷5. 4g，總皂苷含量為84%。實施例3:
將蘭嶼樫木葉50°C左右烘干粉碎過20目篩，得到蘭嶼樫木葉粉末，取5kg加入50%丙酮溶液微波輻射條件下提取30min，過濾，提取2次，將提取液合并減壓濃縮回收溶劑后加適量水制成懸浮液，過DlOl大孔樹脂吸附，先用少量20%乙醇洗脫至洗脫液不渾濁，棄去，再用55%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，洗脫液加入截留分子量10000的管式纖維素超濾膜系統(tǒng)超濾，進口壓力控制O. 8MPa，常溫過濾，加適量水透析，透過液再加入截留分子量500管式纖維素納濾膜系統(tǒng)納濾，濃縮液加適量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷層；(4)將二氯甲烷層加氧化鋁拌樣，裝入氧化鋁層析柱，80%乙醇洗脫，收集8倍柱體積量的洗脫液，減壓回收乙醇至盡，放置過夜，將沉淀物濾出干燥得到白色粉末，即是蘭嶼樫木總皂苷5. lg，總皂苷含量為82%。實施例4:
將蘭嶼樫木葉50°C左右烘干粉碎過20目篩，得到蘭嶼樫木葉粉末，取5kg加入75%丙酮溶液微波輻射條件下提取30min，過濾，提取2次，將提取液合并減壓濃縮回收溶劑后加適量水制成懸浮液，過D103大孔樹脂吸附，先用少量15%乙醇洗脫至洗脫液不渾濁，棄去，再用70%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，洗脫液加入截留分子量8000的管式纖維素超濾膜系統(tǒng)超濾，進口壓力控制O. 7MPa，常溫過濾，加適量水透析，透過液再加入截留分子量500中空纖維素納濾膜系統(tǒng)納濾，濃縮液加適量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷層；(4)將二氯甲烷層加氧化鋁拌樣，裝入氧化鋁層析柱，95%乙醇洗脫，收集6倍柱體積量的洗脫液，減壓回收乙醇至盡，放置過夜，將沉淀物濾出干燥得到白色粉末，即是蘭嶼樫木總皂苷4. Sg，總皂苷含量為87%。實施例5:
將蘭嶼樫木葉50°C左右烘干粉碎過20目篩，得到蘭嶼樫木葉粉末，取5kg加入80%乙醇溶液微波輻射條件下提取30min，過濾，提取2次，將提取液合并減壓濃縮回收溶劑后加適量水制成懸浮液，過HP20大孔樹脂吸附，先用少量10%乙醇洗脫至洗脫液不渾濁，棄去，再用65%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，洗脫液加入截留分子量3000的中空纖維素超濾膜系統(tǒng)超濾，進口壓力控制O. 4MPa，常溫過濾，加適量水透析，透過液再加入截留分子量500中空纖維素納濾膜系統(tǒng)納濾，濃縮液加適量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷層；(4)將二氯甲烷層加氧化鋁拌樣，裝入氧化鋁層析柱，85%乙醇洗脫，收集4倍柱體積量的洗脫液，減壓回收乙醇至盡，放置過夜，將沉淀物濾出干燥得到白色粉末，即是蘭嶼樫木總皂苷5. 0g，總皂苷含量為85%
權利要求
1.一種制備蘭嶼樫木總皂苷的方法，其特征在于包括以下步驟(1)取蘭嶼樫木葉50°C左右烘干粉碎，得到原料粉末，然后微波輻射條件下用有機溶劑提??；(2)對提取液減壓濃縮回收溶劑后加水成懸浮液，加入大孔樹脂吸附，先用水或10-20%的乙醇溶液洗去雜質，再用55-70%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫液；(3)洗脫液加入超濾膜系統(tǒng)超濾，透過液再加入納濾膜系統(tǒng)納濾，濃縮液加適量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷層；(4)將二氯甲烷層加氧化鋁拌樣，裝入氧化鋁層析柱，70-95%乙醇洗脫，收集3-8倍柱體積量的洗脫液，減壓回收乙醇至盡，放置過夜，將沉淀物濾出干燥得到白色粉末，即是蘭嶼樫木總皂苷。
2.如權利要求I所述的一種制備蘭嶼樫木總皂苷的方法，其特征在于步驟(I)中所述有機溶劑為乙醇、甲醇或丙酮溶液。
3.如權利要求I所述的一種制備蘭嶼樫木總皂苷的方法，其特征在于步驟(2)中所述大孔吸附樹脂選自AB-8、D4020、D101、D103、HP20中的一種。
4.如權利要求I所述的一種制備蘭嶼樫木總皂苷的方法，其特征在于步驟(3)中所述的超濾膜可選管式或中空有機膜，截留分子量為3000-10000 ;所述的納濾膜可選管式或中空有機膜，截留分子量不大于500。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種制備蘭嶼樫木總皂苷的方法，該制備方法包括以下步驟首先對蘭嶼樫木葉預處理，然后微波輻射條件下有機溶劑提取，對提取液減壓濃縮、柱層析分離純化得到白色粉末，即是蘭嶼樫木總皂苷。本發(fā)明的優(yōu)點是簡便易行，收率高，同時實施本發(fā)明可開發(fā)蘭嶼樫木的利用價值。
文檔編號A61K36/58GK102626442SQ20121012086
公開日2012年8月8日 申請日期2012年4月24日 優(yōu)先權日2012年4月24日
發(fā)明者劉東鋒, 郭琴 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司