專利名稱：制備隱形眼鏡狀的羊膜敷料的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于制備治療眼表疾病的隱形眼鏡狀的羊膜敷料的方法，其不需 要使用縫合或粘附材料。
背景技術(shù)：
羊膜是厚度為0. 02至0. 5mm的位于胎盤內(nèi)表面中的膜，其具有上皮細胞、基底膜、 致密層、成纖維細胞層和海綿層的堆疊式結(jié)構(gòu)。羊膜是無血管的并且不表達組織相容性的 抗原，因此在其移植后不發(fā)生免疫排斥(Akle CA等，Lancet, 2 :1003-5(1981) ；Dua HS等， Br. J. Ophthalmol. ,83 :748-52 (1999))。由于羊膜的基底膜由IV型膠原蛋白、層粘連蛋白 和α6/β4整合蛋白組成，并且其間隙組織由I型膠原蛋白、III型膠原蛋白、透明質(zhì)酸、纖 連蛋白和α 5/β 1整合蛋白組成，因此羊膜可有助于細胞的分裂和遷移。在眼科學(xué)中，De Rotth在1940年首次報道了使用羊膜治療結(jié)膜組織損傷(De Rotth Α.，Arch. Ophthalmol. ,23 :525-5 (1940))。在 1993 年，Batle 禾口 Perdomo 再次提 出 了使用羊膜作為結(jié)膜替代物(Batle JF, Perdomo FJ, Ophthalmol. , 100 :107(1993))。 Kim和Tseng后來在1995年指出，在上皮細胞去除和角膜緣片層切除術(shù)(limbal lamella keratectomy)后，羊膜有助于兔子的角膜表面重建(Kim JC和Tseng SC, Cornea, 14 473-84(1995))。已經(jīng)報道了羊膜有助于角膜和結(jié)膜的上皮的再形成并抑制炎癥，因此其移植在治 療伴有炎癥的疾病中有效，例如臨床試驗中的頑固性角膜上皮缺損和潰瘍。羊膜作為基底 膜，其負責(zé)維持角膜和結(jié)膜細胞生長以及保持其特性，因此，它有助于上皮細胞的遷移，加 強基底上皮細胞的附著力，促進上皮分化和防止上皮細胞凋亡以促進在傷口愈合處的上皮 再生。進一步地，通過粘附在炎性細胞上防止其滲透，羊膜具有抗炎活性?；谘蚰さ倪@種 特性，其已用于治療各種眼表疾病，諸如角膜潰瘍、翼狀胬肉、瞼球粘連和化學(xué)灼傷。而且， 據(jù)報道羊膜包含參與傷口愈合的各種生長因子，例如EGF、TGF-a、KGF、HGF、bFGF、TGF-β 1 和TGF-β 2，而且在從羊膜上清除上皮細胞層后這些生長因子保持完整(Noriko Koizumi 等，Current Eye Research，卷20，第3期，173-177 (2000))。盡管羊膜作為生物移植材料 通過普通方法制備，該方法去除了可能引起炎癥和免疫反應(yīng)的同源細胞和異源細胞，然而 由于完整生長因子的存在，它在傷口愈合中的有效性得以保持。因此，羊膜是有效和安全的 生物移植材料。為了治療角膜上皮缺損，需要為上皮細胞連續(xù)供氧，從而保持角膜上皮細胞含有 充足的水分，以及去除引起上皮細胞摩擦的特異性因子。如果滿足這種條件且基底膜沒有 缺損，則上皮細胞可以增殖。但是，除了使用羊膜方法外的常規(guī)方法不能滿足所述條件。由 于羊膜本身具有充足的高含水量，其移植不影響角膜表面的水分并且能防止眼睛遭受眨眼 引起的機械摩擦損傷。進一步地，羊膜顯示出比由合成聚合物材料制作的治療鏡更高的氧 滲透性，這有益于角膜上皮細胞的重建。為了將羊膜應(yīng)用于治療眼表疾病，必需進行需要高度精細的外科技術(shù)和較長手術(shù)時間的10-0尼龍縫合，這經(jīng)常產(chǎn)生副作用，諸如縫線膿腫、形成肉芽腫瘤和組織壞死以及 當(dāng)去除縫合時患者的不適。為了解決所述問題，美國專利號7，494，802中公開了一種將羊膜固定至支撐物上 的方法，而且由其得到的產(chǎn)品商品化為I^rokera^^BioTissue，USA)。用來在眼科手術(shù)后使 用的ftOkera 由硬質(zhì)聚碳酸酯制備而且通過使用0型環(huán)將羊膜固定在其上部具有15_16mm 孔的主體上而制備。但是，使用I^rokera 可引起下述問題i)羊膜不覆蓋角膜突出的外周 圍區(qū)域；ii)羊膜可能通由于眨眼而移位；iii)在上皮細胞長出之前羊膜的一部分可能由 于眨眼被損壞；和iv)硬質(zhì)材料刺激眼睛。為了解決這些與支撐物使用有關(guān)的問題，本發(fā)明人開發(fā)出一種制備隱形眼鏡狀的 羊膜敷料的方法，其不使用任何支撐物而將羊膜固定于眼睛上。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的目的是提供一種制備隱形眼鏡狀的羊膜敷料的方法。本發(fā)明的另一個目的是提供一種由本發(fā)明的方法制備的隱形眼鏡狀的羊膜敷料。一方面，本發(fā)明提供了一種用于制備隱形眼鏡狀的羊膜敷料的方法，其包括(a)將羊膜與包含圓柱形部分和位于圓柱形部分上部的凸出部分的模的凸出部分 接觸，使得羊膜的外周圍繞圓柱形部分垂下(drape)；(b)將環(huán)放置在覆蓋凸出部分的羊膜上并將環(huán)固定至圓柱形部分的側(cè)面上；(c)交聯(lián)羊膜；和(d)沿著模的凸出部分和圓柱形部分之間的邊界切割羊膜，以獲得隱形眼鏡狀的 羊膜敷料。另一方面，本發(fā)明還提供了一種通過本發(fā)明的方法制備的隱形眼鏡狀的羊膜敷 料。通過本發(fā)明的方法制備的隱形眼鏡狀的羊膜敷料能夠解決與縫合羊膜有關(guān)的問 題，例如高度精細的外科縫合技術(shù)，較長的手術(shù)時間、縫線膿腫、肉芽腫瘤形成、組織壞死和 患者不適；以及與支撐物的使用有關(guān)的問題，例如，由于眨眼去除了支撐物，支撐物遭到破 壞，以及造成不適，并因此對治療眼表疾病是有用的。


當(dāng)將下述描述與附圖結(jié)合時，本發(fā)明的上述和其它目的和特征將變得顯而易見， 附圖分別示出了圖1 根據(jù)本發(fā)明用于制備隱形眼鏡狀的羊膜敷料的模的橫截面示意圖；圖2 根據(jù)本發(fā)明用于制備隱形眼鏡狀的羊膜敷料的0型環(huán)的透視圖；圖3 羊膜和模的復(fù)合體的頂透視圖；圖4 使用車床用以獲得本發(fā)明的隱形眼鏡狀的羊膜敷料的旋轉(zhuǎn)和切割操作；圖5 通過根據(jù)本發(fā)明的方法制備的隱形眼鏡狀的羊膜敷料的兩幅照片；圖6 在敷料中心具有用于獲取影像的孔的隱形眼鏡狀的羊膜敷料的頂透視圖；圖7 在敷料中心具有用于獲取影像的孔的隱形眼鏡狀的羊膜敷料的兩幅照片；圖8 各種隱形眼鏡狀的羊膜敷料的頂透視圖，其每一個為獲得影像在敷料中心具有多個孔；圖9 本發(fā)明的隱形眼鏡狀的羊膜敷料的照片，其每一個在敷料中心具有用于獲 取影像的各種形狀的孔；圖10 水合具有交聯(lián)或不具有交聯(lián)的羊膜敷料的結(jié)果；圖11 使用六亞甲基二異氰酸酯(HMDI)將由牛的羊膜制備的各種羊膜敷料移植 到動物中的結(jié)果；圖12 分別用人羊膜、無細胞牛羊膜和治療鏡作為對照治療角膜上皮引起燒傷的 兔子后，評價角膜混濁程度；圖13 分別用人羊膜、無細胞牛羊膜和治療鏡作為對照治療角膜上皮引起燒傷的 兔子后在實質(zhì)層角膜中的炎性細胞的照片；
具體實施例下面將詳細描述本發(fā)明。除非另有規(guī)定，本文使用的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有如本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技 術(shù)人員通常所理解的相同含義。而且，本文提及的所有文件以參閱的方式全文并入于此。本文所使用的術(shù)語“羊膜敷料”是指由羊膜制成的醫(yī)療器材，并且特別表示為治療 眼表疾病而與角膜接觸的醫(yī)療器材。同樣，本文所使用的術(shù)語“隱形眼鏡狀的羊膜敷料”是 指具有與隱形眼鏡類似的硬度而且可以以與標準隱形眼鏡完全相同的方式與角膜接觸而 使用，而不使用縫合或粘附材料的敷料。該術(shù)語可以與術(shù)語“羊膜隱形眼鏡”互換使用。本發(fā)明提供了一種制備隱形眼鏡狀的羊膜敷料的方法，其包括(a)將羊膜與模 的凸出部分接觸，模包括圓柱形部分和位于圓柱形部分上部的凸出部分，使得膜的外周圍 繞圓柱形部分垂下；(b)將環(huán)放置在覆蓋凸出部分的羊膜上并將環(huán)固定至圓柱形部分的側(cè) 面上；(c)交聯(lián)羊膜；和(d)沿著模的凸出部分和圓柱形部分之間的邊界切割羊膜，以獲得 隱形眼鏡狀的羊膜敷料。本發(fā)明方法的步驟(a)包括將羊膜與模的凸出部分接觸，模包括圓柱形部分和位 于圓柱形部分上部的凸出部分，使得羊膜的外周圍繞圓柱形部分垂下。模包括圓柱形部分和凸出部分，并且為了成形為隱形眼鏡狀優(yōu)選地具有適當(dāng)?shù)闹?徑和基弧。具體而言，圓柱形部分優(yōu)選地具有8至22mm的直徑并且凸出部分優(yōu)選地具有 6. 0至10. Omm的基弧。模還可以包括支撐用于接觸和緊固羊膜的固定在圓柱形部分下部上 的環(huán)的支撐部分，或者與支撐部底表面的中間連接的手柄部分。作為本發(fā)明的示例，可使用 圖1所例示的模。制作模的材料可以從由丙烯酸樹脂、縮醛樹脂、聚四氟乙烯(Teflon)、不 銹鋼和鈦組成的組中選擇，但是其不局限本發(fā)明的范圍。羊膜可以來源于哺乳動物，優(yōu)選來源于人或者牛。羊膜可以預(yù)先清洗或預(yù)處理以 去除其細胞。羊膜可以用本領(lǐng)域已知的方法清洗(參見Kim JC和Tseng SC, Cornea, 14 473-84(1995))，并且用本領(lǐng)域已知的合適溶液預(yù)處理以去除可以引起發(fā)炎和免疫反應(yīng)的 其細胞。在步驟(a)中使用的羊膜在低溫條件下儲存?zhèn)溆?。使用的羊膜?shù)量可以根據(jù)羊膜的厚度、強度和透明度而改變。通常，使用一層羊 膜。但是可將至少兩層重疊的羊膜放置在模的凸出部分上以獲得期望的羊膜敷料強度。同 樣，為了解決由羊膜自身的不透明引起的獲取影像(vision)的困難，所述方法還可包括在步驟(a)之后，在羊膜的中間形成具有直徑1至7mm的圓孔或者形成至少兩個孔，優(yōu)選地為 多個孔，每一個具有100至1，000 μ m的直徑。為了減輕由孔導(dǎo)致的不平坦表面所產(chǎn)生的疼 痛或異物感，至少還可在現(xiàn)有的膜上放置一個羊膜以形成多層羊膜。本方法的步驟(b)包括將環(huán)放置在覆蓋凸出部分的羊膜上并將環(huán)固定至圓柱形 部分的側(cè)面上。環(huán)(或“0型環(huán)”)用于將羊膜與模接觸并將羊膜固定在模上，并且為了與模的圓 柱形部分配合優(yōu)選制成具有適合的直徑。制作環(huán)的材料可以從由丙烯酸樹脂、縮醛樹脂、聚 四氟乙烯(Teflon)、聚氨酯、橡膠、硅橡膠和全氟彈性體組成的組中選擇，但是，其不限制本 發(fā)明的范圍?？梢杂帽绢I(lǐng)域已知的各種干燥過程干燥固定在模上的羊膜，例如，自然干燥， 冷凍干燥和真空干燥。本發(fā)明方法的步驟(C)包括交聯(lián)羊膜。當(dāng)將步驟(b)中所獲得的干燥的羊膜進行水合時，其無法保持隱形眼鏡狀并恢復(fù) 到原始的無形狀的軟膜。因此，為了防止這種情況，羊膜應(yīng)經(jīng)過交聯(lián)過程?？梢酝ㄟ^物理或 化學(xué)交聯(lián)處理進行交聯(lián)。物理交聯(lián)處理包括UV照射和脫氫熱(dehydrothermal)處理。UV 照射處理優(yōu)選通過用波長為2M至305nm的UV照射羊膜10至240分鐘而進行并且脫氫熱 處理可以通過將羊膜在溫度為90至105°C置于最多IOOmTorr的真空條件下60分鐘至72 小時而進行。化學(xué)交聯(lián)處理可通過將羊膜浸入從由碳化二亞胺、1-乙基-3- (3- 二甲氨基丙 基)碳化二亞胺(EDC或EDAC)、戊二醛、甲醛、六亞甲基二異氰酸酯(HMDI)、葡萄聚糖和葡 萄糖組成的組中選擇的溶液中而進行。本方法的步驟(d)包括沿著模的凸出部分和圓柱形部分之間的邊界切割羊膜，以 獲得隱形眼鏡狀的羊膜敷料。為了獲得隱形眼鏡狀的羊膜敷料，使用車床和激光器沿著模的凸出部分和圓柱形 部分之間的邊界旋轉(zhuǎn)并切割羊膜(圖4)。進一步地，在步驟(d)之后，可將上述步驟所獲得的羊膜敷料用Y-射線照射或電 子束輻照消毒。同樣，本發(fā)明提供了由根據(jù)本發(fā)明的方法制備的用于治療眼表疾病的隱形眼鏡狀 的羊膜敷料。下面的實施例用于說明本發(fā)明而非限制其范圍。實施例1 羊膜的制備(1-1)人羊膜的制備將人羊膜通過Kim和Tseng的論文所公開的方法(Kim JC和Tseng SC, Cornea, 14:473-84(1995))進行處理。從實施剖腹產(chǎn)術(shù)的孕婦的胎盤上分離羊膜。孕婦已預(yù)先進 行了 B型和C型病毒性肝炎、HIV和梅毒篩選，而且只使用那些母血血清學(xué)結(jié)果呈陰性的胎 盤。將因此得到的羊膜依次用滅菌鹽水溶液和次氯酸鈉清洗幾次，并用純凈水反復(fù)清洗。所 得到的膜在低溫條件下O 8°C )儲存?zhèn)溆谩?1-2)牛羊膜的制備將牛羊膜通過下面的步驟處理。分娩后得到牛的胎盤，并且從其中分離出羊膜并 用鹽溶液清洗幾次以去除碎片和血跡。得到的羊膜用滅菌鹽水溶液和次氯酸鈉清洗。使 用刮刀去除羊膜的基質(zhì)層并用消毒鹽水溶液和純凈水反復(fù)清洗。得到的膜在低溫條件下0 8°C)儲存直至使用。(1-3)處理羊膜以去除炎性和免疫物質(zhì)為了防止炎性和免疫反應(yīng)，通過下面的步驟處理(1-1)和(1-2)中得到的每一個 羊膜。將人或牛的羊膜在低溫條件下儲存于消毒鹽水溶液中。將500cm2的分離的羊膜浸 入IL的95%乙醇中并冷藏過夜以去除其中的脂質(zhì)成分。將羊膜浸泡在IL的純凈水中并在 10分鐘內(nèi)清洗三次。然后使用刮刀去除羊膜的基質(zhì)層。得到的羊膜在低溫條件下被儲存在 IL的70%乙醇中一整天，以使病毒失去活性并浸入IL含有0. 2% EDTA和0. 9%氯化鈉的 乙二胺四乙酸(EDTA)/氯化鈉溶液(pHll)中。將得到的混合物以150rpm攪拌1小時以除 去可溶的堿性雜質(zhì)。其后，將得到的羊膜浸入含有0. 05%胰蛋白酶、0. 02% EDTA和0. 9% 氯化鈉的胰蛋白酶/EDTA/氯化鈉溶液(pH 7.4)中并且將得到的混合物在37°C進行酶反應(yīng) 1小時。將因此得到的羊膜浸泡在IL的70%乙醇中并將得到的混合物以150rpm攪拌1小 時以去除殘余脂質(zhì)。得到的羊膜依次用堿溶液(PH 11)浸泡，以150rpm攪拌1小時，用含 有0. 2% EDTA的酸溶液(pH 2)浸泡并以150rpm攪拌1小時，以使羊膜處于腫脹狀態(tài)，然后 用IL份的純凈水以150rpm在30分鐘內(nèi)清洗三次。得到的膜在低溫條件下O 8°C )儲 存?zhèn)溆?。實施? 模和環(huán)的制備如圖1和2所示所制造的用于形成隱形眼鏡狀的羊膜的模和用于將羊膜與模接觸 的環(huán)(或“0型環(huán)”)。模由具有14mm直徑的圓柱形部分、具有8. 4至8. 8mm基弧的凸出部 分、支撐部分和手柄部分組成。支撐部分包括支撐用于接觸和緊固羊膜的環(huán)的支撐物，并且 手柄部分具有連接至支撐部分底表面中間的圓柱形狀。模由縮醛樹脂制成。制造圖2的0 型環(huán)，以適合具有特定基弧的各個模。0型環(huán)由Tefl0n(14. Imm內(nèi)部直徑)或全氟彈性體 (12mm內(nèi)部直徑)制成。實施例3 羊膜的準備為了使(1-1)至(1-3)中獲得的羊膜具有隱形眼鏡狀，使羊膜與實施例2中獲得 的隱形眼鏡狀的模接觸，然后用0型環(huán)固定在模上。具體地，將羊膜切割至模的尺寸，然后使其上皮細胞層面朝下地與模的凸出部分 接觸(圖1)。在羊膜重疊的情況下，重疊最后一層羊膜使得其上皮細胞層朝外。隨后將0 型環(huán)(圖幻放置在羊膜或重疊的羊膜上以完全覆蓋模，然后在超凈臺中自然干燥、冷凍干 燥或真空干燥。干燥羊膜的頂透視圖(包括模)如圖3所示。實施例4 羊膜隱形眼鏡狀的固定(4-1)使用物理交聯(lián)處理固定形狀如果將實施例3中獲得的干燥羊膜進行水合，則其不能保持隱形眼鏡狀并恢復(fù)到 最初的平柔軟的平面薄膜。為了防止這種情況，將模、0型環(huán)和實施例3中獲得的羊膜的 復(fù)合體經(jīng)過物理交聯(lián)步驟。具體地，在95°C、100°C或105°C的溫度下，將復(fù)合體置入最多 IOOmTorr的真空中48至72小時。(4-2)使用化學(xué)交聯(lián)處理固定形狀為了達到比通過實施例G-1)的物理交聯(lián)處理所實現(xiàn)的更有效的交聯(lián)，通過使用 HMDI作為交聯(lián)劑進行化學(xué)交聯(lián)處理。特別地，將實施例3中獲得的復(fù)合體浸入含有0. 2% HMDI的甲醇溶液中30分鐘至12小時，用甲醇洗掉殘余的HMDI，并在超凈臺中干燥。作為該溶液的替代，可以分別使用含有0. 1 3% HMDI的0. 9%的鹽水溶液、乙醇(10 100% ) 或甲醇(10 100% )，或含有0. 1 5% Tween 80或iTritonX-IOO的0.9%的鹽水溶液。實施例5 羊膜的切割、清洗和消毒為了從實施例4中獲得的模、0型環(huán)和羊膜的復(fù)合體中分離出隱形眼鏡狀的羊膜， 將復(fù)合體與車床的轉(zhuǎn)子結(jié)合，從而以高速旋轉(zhuǎn)并用精度為1/100 l/1000mm的金剛石切削 刃進行切割，如圖4所示。所得到的隱形眼鏡狀的羊膜用Tween 80溶液或Triton X-100 溶液(0. 1 5%)清洗，用鹽水溶液反復(fù)清洗，并用已過濾三次的純凈水清洗以完全去除殘 余的交聯(lián)劑。隨后，為了作為敷料使用，將羊膜干燥、密封、包裝并用Y-射線以10 25kGy 照射或電子束輻照消毒。因此獲得了如圖5所示的隱形眼鏡狀的羊膜敷料。例6 用于獲得影像的孔的形成盡管羊膜本身是透明的，然而由于其不透明難于看穿羊膜的重疊層。因此，將實施 例3中獲得的羊膜用車床或CO2激光器打孔(GC111 ；EO Technics, South Korea)使其中間 形成具有1至7mm直徑的孔(圖6和圖7)。進一步地，不是形成一個孔，而是在羊膜的中間 形成具有大約100至1，000 μ m直徑的多個孔以獲得影像(圖8和圖9)。也可以用綠光激光器和UV激光器替代(X)2激光器。同時，打孔的羊膜敷料在打孔部分可能具有不平坦的表面，因此羊膜敷料的使用 可能在眨眼時刺激眼瞼的內(nèi)表面使眼睛產(chǎn)生疼痛或異物感。因此，在打孔后可以在其上重 疊另一個羊膜以減輕刺激。實驗例1 羊膜敷料的交聯(lián)效果為了研究實施例4中交聯(lián)處理后的形狀固定效果，將實施例3中獲得的羊膜在化 學(xué)交聯(lián)處理后切割(試驗組)和未經(jīng)化學(xué)交聯(lián)處理切割(對照組)，分別進行下面的步驟。 將試驗組和和對照組在室溫下浸入鹽水溶液中30分鐘，然后觀察其形狀。如圖10所示，證 實了對照組經(jīng)過水合作用失去其隱形眼鏡形狀，而試驗組盡管經(jīng)過水合作用仍保持了其隱 形眼鏡狀。因此，發(fā)現(xiàn)羊膜敷料的隱形眼鏡狀可以通過交聯(lián)作用有效地保留。實驗例2 羊膜中生長因子的定量測定為了確定羊膜中生長因子的存在和其數(shù)量，通過酶聯(lián)免疫吸附法對在人和牛之間 具有交聯(lián)反應(yīng)的各種生長因子中的bFGF和KGF進行定量分析(ELISA ；R&D system, USA)。 實施例(1-1)和(1-2)中獲得的人羊膜、牛羊膜和無細胞牛羊膜用作實驗樣品。樣品經(jīng)過冷 凍干燥并在冷凍研磨機(Spex，USA)中研磨成粉末。將60mg的各個粉末樣品加入到含有2mL 磷酸鹽緩沖鹽水(PBS ；pH7. 4)的試管中并且在低溫條件下通過高速攪拌器以10，OOOrpm以 1分鐘為間隔提取生長因子五次。在4°C，以13，OOOrpm離心分離20分鐘后，收集上層清液， 通過酶聯(lián)免疫試劑盒(ELISA kit)測定生長因子的量?；谕ㄟ^蛋白質(zhì)定量測定(bradford assay)所測定的總蛋白質(zhì)量，計算提取的每一種生長因子的量。所測定的生長因子的含量 如下面的表1所示。表 權(quán)利要求
1.一種制備隱形眼鏡狀的羊膜敷料的方法，其包括(a)將羊膜與包含圓柱形部分和位于所述圓柱形部分上部的凸出部分的模的凸出部分 接觸，使得所述膜的外周圍繞所述圓柱形部分垂下；(b)將環(huán)放置在覆蓋所述凸出部分的羊膜上并將所述環(huán)固定至所述圓柱形部分的側(cè)面上；(c)交聯(lián)所述羊膜；和(d)沿著所述模的所述凸出部分和圓柱形部分之間的邊界切割所述羊膜，以獲得隱形 眼鏡狀的羊膜敷料。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述圓柱形部分的直徑為8至22mm并且所述凸出 部分的基弧為6. 0至10. 0mm。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述模由選自下組的材料制得丙烯酸樹脂、縮醛 樹脂、聚四氟乙烯(Teflon)、不銹鋼和鈦。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述模還包括支撐置于所述圓柱形部分側(cè)面上的 環(huán)的支撐部分。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述羊膜來自于人或牛。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，對所述羊膜進行預(yù)清洗或預(yù)處理以去除其細胞。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，將羊膜的至少兩個重疊層放置在所述模的凸出部 分上。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述環(huán)由選自下組的材料制得丙烯酸樹脂、縮醛 樹脂、聚四氟乙烯(Teflon)、聚氨酯、橡膠、硅橡膠和全氟彈性體。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，通過UV照射或脫氫熱處理進行所述交聯(lián)。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，通過將所述羊膜浸入選自碳化二亞胺、1-乙 基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺(EDC或EDAC)、戊二醛、甲醛、六亞甲基二異氰酸酯 (HMDI)、葡萄聚糖和葡萄糖的溶液中進行所述交聯(lián)。
11.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，通過使用車床和激光器實施切割。
12.如權(quán)利要求1所述的方法，其還包括步驟(d)之后的通過Y-射線照射而消毒所述 羊膜敷料的步驟。
13.如權(quán)利要求1所述的方法，其還包括在步驟(a)之后在所述羊膜中間形成直徑為1 至7mm的圓孔或至少形成兩個每個直徑為100至1000 μ m的孔。
14.如權(quán)利要求13所述的方法，其還包括在形成所述孔之后放置至少一層羊膜以與所 獲得的處理過的膜重疊。
15.一種通過根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法制備的用于治療眼表疾病的隱形眼鏡狀的羊 膜敷料。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制備隱形眼鏡狀的羊膜敷料的方法和由此制備的用于治療眼表疾病的隱形眼鏡狀的羊膜敷料，其不需使用縫合或粘附材料。本發(fā)明的隱形眼鏡狀的羊膜敷料能夠解決與縫合羊膜有關(guān)的問題，例如，高精細的外科縫合技術(shù)、較長的手術(shù)時間、縫線膿腫、形成肉芽腫瘤、組織壞死和患者不適；以及與支撐物的使用有關(guān)的問題，例如，由于眨眼去除了支撐物、支撐物遭到破壞和引起不適。
文檔編號A61F9/00GK102138841SQ201110035429
公開日2011年8月3日 申請日期2011年2月1日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月3日
發(fā)明者丁三炫, 全然婌, 朱址熏, 李性春, 李鐘源, 梁恩敬, 洪鐘明, 白光一, 金在燦, 金成胞 申請人:韓國百朗德株式會社