專利名稱：治療皰疹病毒感染的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通過向有需要的對(duì)象給藥以主要由有效量的雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽組成的活性成分，在該對(duì)象體內(nèi)抑制皰疹病毒活性的方法。
背景技術(shù)：
皰疹病毒包括一大類的雙鏈脫氧核糖核酸病毒。皰疹病毒種類可以基于許多生物學(xué)特性(如宿主范圍和嗜性，病毒生命周期，以及病毒持久性和潛伏期)被分成三個(gè)亞族(gp，a，3，和Y)。八種皰疹病毒，單純性皰疹病毒I型和2型(HSV-1和HSV-2)，水痘帶狀皰疹病毒(VZV)，人類巨細(xì)胞病毒(HCMV) ,Epstein-Barr病毒(EBV)，和人類皰疹病毒6，7，以及8 (HHV-6，HHV-7，和HHV-8)已被證實(shí)可感染人類。在這些皰疹病毒之中，通常已知的兩種病毒是單純性皰疹病毒I型和2型，稱為 HSVl和HSV2及水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)。HSVl引起口面病痕，通常被稱為發(fā)熱性皰疹或感冒瘡。這些病痕最常出現(xiàn)在嘴唇上，但也可能出現(xiàn)在面部，口腔的粘膜內(nèi)，眼和鼻中，以及間或出現(xiàn)在手的主干上。口的感染被稱為口唇皰疹，也叫感冒瘡(發(fā)熱性皰疹)。面部的其它部分也可以受影響，其感染被稱為面部單純性皰疹。該感染還可以出現(xiàn)在身體的其它部分上。約30%的美國人口遭受HSVl的復(fù)發(fā)事件。HSV2比HSVl不常見，其引起生殖器損害。相反，在約30%的病例中生殖器皰疹由HSVl引起。水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)引起水痘(varicella)，通常被稱為水痘(chickenpox),和帶狀皰疫(herpes zoster),通常被稱為帶狀皰疫(shingles)。帶狀皰疫侵襲皮膚和神經(jīng)，其特征是沿某些神經(jīng)片段顯現(xiàn)的成群小水泡或病痕。這些病痕最常見于背上，并且之前在受侵襲位點(diǎn)可以先有鈍痛?！┮粋€(gè)體已經(jīng)感染上皰疫病毒，該病毒其后將保持潛伏于體內(nèi)。在潛伏狀態(tài)時(shí)，該病毒位于神經(jīng)中樞內(nèi)的神經(jīng)節(jié)中?；谔囟ǖ拇碳ぃ缌鞲懈腥?，其它呼吸障礙，腸胃感染，壓力，疲勞，月經(jīng)，懷孕，過敏，日光，或發(fā)熱，該潛伏病毒可以被激活并從神經(jīng)節(jié)沿明確限定的神經(jīng)路徑行進(jìn)至皮膚表面，并在該處繁衍和引起病狀。阿昔洛韋，化學(xué)名無環(huán)鳥苷，是鳥嘌呤核苷類似物抗病毒藥物，其靶標(biāo)為病毒編碼的DNA聚合酶。阿昔洛韋主要被用來治療單純性皰疹病毒感染，而且以及帶狀皰疹(shingles)的治療。阿昔洛韋被用于減少疼痛,并在具有水痘(chicken pox),帶狀皰疫，以及首次或復(fù)發(fā)生殖器皰疹的人中加快瘡或水泡的愈合。阿昔洛韋屬于稱為合成核苷類似物的抗病毒藥。其通過阻止皰疹病毒在體內(nèi)的傳播起作用。阿昔洛韋不會(huì)治愈生殖器皰疹，且不可阻止生殖器皰疹傳播至他人。阿昔洛韋難溶于水，并且生物利用度低。而且需要相對(duì)長的恢復(fù)時(shí)間(即，患者恢復(fù)基本需要多于2周時(shí)間)和高處方費(fèi)用，這使其對(duì)于患者不具有吸引力。利多卡因，2- ( 二乙基氨基)-N- (2，6- 二甲基苯基)-乙酰胺，一種外用麻醉劑，已知其作為靜脈注射溶液可治療室性心動(dòng)過速(心臟的心律不齊)。利多卡因也廣泛地被用 作血管收縮劑，在外用應(yīng)用或氣霧劑(如減少鼻充血的鼻氣霧劑)中減少區(qū)域血流。此外，已知利多卡因在減少(后皰疹性神經(jīng)痛(PHN)，帶狀皰疹導(dǎo)致的神經(jīng)損傷疼痛(帶狀皰疹和后皰疹性神經(jīng)痛)以及相似的神經(jīng)病中具有治療作用。利多卡因堿為自由脂溶性。其不溶于水，因此不宜用于水懸浮液，需要乙醇或者類似物以獲得液體溶液。然而，其鹽形式，利多卡因鹽酸鹽，極易溶于水和醇。因此，利多卡因鹽酸鹽基本為用于制備注射溶液的形式。雙氯芬酸為2- (2，6- 二氯-苯胺基)-苯基-乙酸，已知其可作為抗風(fēng)濕劑用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。雙氯芬酸屬于乙酸類NSAID (非留體抗炎藥)。雙氯芬酸在諸如關(guān)節(jié)炎或急性損傷的病癥中被用于減少炎癥，并作為止疼藥減少疼痛。由于其在水中溶解度相對(duì)較低，雙氯芬酸的含水注射溶液難以實(shí)現(xiàn)。需要有效的治療皰疹病毒感染和抑制病毒活性的方法。該方法不使用多種藥物，并具有最小化的副作用。
發(fā)明簡述本發(fā)明涉及在對(duì)象體內(nèi)抑制皰疹病毒活性的方法。該方法包括向有需要的該對(duì)象給藥以基本由有效量的雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽組成的活性成分。本方法只需要單獨(dú)活性化合物，即雙氯芬酸，來治療皰疹病毒感染。本方法不需要使用多種藥物。本發(fā)明適于抑制皰疹病毒的活性，包括單純性皰疹病毒I型(HSV-I)，單純性皰疹病毒2型，水痘-帶狀皰疹病毒，和其組合。


圖I 顯示了(a) 5%lidofenac 和 5% 阿昔洛韋，(b) 5% 阿昔洛韋，和(c) 5%lidofenac對(duì)于病痕數(shù)，病痕面積和病毒滴度的抑制作用。圖2比較了 Iidofenac (1%，3%，和5%)，雙氯芬酸(5%)，利多卡因(5%)，和阿昔洛韋(5%)對(duì)于病毒滴度的抑制作用。發(fā)明的詳細(xì)說明本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了抑制皰疹病毒活性的有效方法。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽單獨(dú)作為活性化合物具有抗皰疹病毒作用，并且在動(dòng)物中測試時(shí)足以減少皰疹病毒滴度。不需要另外的活性化合物，如阿昔洛韋或利多卡因，來抑制皰疹病毒活性。通過使用單一藥物，本方法可最小化由多種藥物引起的副作用，增加患者的順應(yīng)性，并提供經(jīng)濟(jì)利益。本發(fā)明涉及在對(duì)象體內(nèi)抑制皰疹病毒活性的方法。該方法包括確定遭受皰疹病毒感染的對(duì)象，并向該對(duì)象給藥以基本由有效量的雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽組成的活性成分，由此抑制該病毒活性。此處使用的“藥學(xué)上可接受的鹽”是保持該母化合物的期望的生物活性，且不另加不希望的毒理學(xué)作用的鹽。該藥學(xué)上可接受的鹽可以用金屬或有機(jī)反離子形成，包括但不限于，堿金屬鹽(如鈉或鉀)；堿土金屬鹽(如鎂或鈣)；和銨或四烷基銨鹽，即NX4+(其中X為Cl_4)。本申請(qǐng)所使用的“藥學(xué)上可接受的鹽”不包括鹽形式的另一活性化合物。此處使用的“有效量”指有效減少和抑制病毒活性的量。該病毒活性可以通過病毒滴度，病痕數(shù)，和/或病痕面積測量。雙氯芬酸的有效量約為1-10%，優(yōu)選2-8%，或3-7%,或 4-6%。
本方法抑制皰疹病毒的活性，包括單純性皰疹病毒I型(HSV-I)，單純性皰疹病毒2型，水痘-帶狀皰疹病毒，和其組合。本方法將有效量的雙氯芬酸或其鹽外用給藥至對(duì)象的受染區(qū)域。優(yōu)選的雙氯芬酸是雙氯芬酸鈉或雙氯芬酸鉀，更優(yōu)選雙氯芬酸鈉。有效量的雙氯芬酸約為1_10%，優(yōu)選2-8%，3-8%，3-7%，或4-6%(w/w)。例如，有效量的雙氯芬酸約為5%(w/w)。受染區(qū)域通常是該對(duì)象的外部組織。在雙氯芬酸治療后，總病痕數(shù)，病痕尺寸，和病毒滴度被降低。此申請(qǐng)中使用的“約”指所列舉值的±10%。本發(fā)明也提供藥物組合物，其包括一種或多種藥學(xué)上可接受的載體和活性化合物雙氯芬酸，或其藥學(xué)上可接受的鹽。該藥物組合物中該活性化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 一般含量為約1_10%，或2-8%，或3-8%，或3-7%，或4-6%(w/w)。例如，該藥物組合物中的活性化合物約為1，3，或5%。該藥學(xué)上可接受的載體可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員用常規(guī)的標(biāo)準(zhǔn)選擇。藥學(xué)上可接受的載體包括，但不限于，非基于水的溶液，懸浮液，乳液，微乳狀液，膠束溶液，凝膠，和油膏。該藥學(xué)上可接受的載體也可以包含組分，所述組分包括但不限于，鹽水和水電解質(zhì)溶液；離子和非離子滲透劑，如氯化鈉，氯化鉀，丙三醇，和右旋糖；PH調(diào)節(jié)劑和緩沖劑，如氫氧化物，水合氫離子，磷酸鹽，檸檬酸鹽，醋酸鹽，和硼酸鹽的鹽；抗氧化劑，如亞硫酸氫鹽，亞硫酸鹽，偏亞硫酸氫鹽，硫代硫酸鹽，抗壞血酸，乙酰半胱氨酸，半胱氨酸，谷胱甘肽，丁基羥基苯甲醚，丁基羥基甲苯，生育酚，和抗壞血酰棕櫚酸酯的鹽，酸和/或堿；表面活性劑，如卵磷脂，磷脂，包括但不限于膽堿磷脂，磷酯酰乙醇胺和磷脂酰肌醇；泊洛沙姆和ploxamines,聚山梨酸酯,如聚山梨酸酯80,聚山梨酸酯60,和聚山梨酸酯20,聚醚,如聚乙二醇和聚丙二醇；聚乙烯，如聚乙烯醇和聚維酮；纖維素衍生物，如甲基纖維素，羥基丙基纖維素，羥乙基纖維素，羧甲基纖維素和羥丙基甲基纖維素和它們的鹽；石油衍生物，如礦物油和白礦脂；脂肪，如羊毛蠟，花生油，棕櫚油，大豆油；甘油單_，雙-和三酯；丙烯酸聚合物，如羧聚乙烯凝膠，和多糖，如右旋糖酐，和氨基多糖，如透明質(zhì)酸鈉。這種藥學(xué)上可接受的載體可以用眾所周知的防腐劑抗細(xì)菌污染保存，其包括，但不限于，苯扎氯銨，乙二胺四乙酸及其鹽，氯化芐乙胺，雙氯苯雙胍己燒，三氯叔丁醇，對(duì)羥基苯甲酸甲酯，硫柳萊，和苯基乙醇，或可以被配制為非保存制劑，用于單獨(dú)或多個(gè)用途。包括該活性化合物的外用配方可以為凝膠，乳劑，洗液，液體，乳液，油膏，噴霧，溶液和懸浮液形式。在一個(gè)實(shí)施方式中，該活性化合物被合并入任何可接受的載體，包括液體，乳劑，凝膠，洗液或其它類型的可以通過外用施用遞送至受感染區(qū)域的懸浮液。在另一實(shí)施方式中，該藥物組合物的劑型可以為片劑，膠囊，顆粒，微粒，粉末，糖漿，栓劑，注射液，或者類似物。上述藥物組合物可以用常規(guī)方法制備。本發(fā)明的藥物組合物可以通過系統(tǒng)給藥的任何接受模式施用，包括外用的，口服的，胃腸外的(如靜脈注射，肌內(nèi)注射，皮下或直腸)，以及其它系統(tǒng)給藥途徑。該活性化合物首先到達(dá)血漿，然后分布進(jìn)入靶組織。該組合物的劑量可以根據(jù)感染的程度以及每一患者的個(gè)別反應(yīng)變化。外用給藥是對(duì)于本發(fā)明的優(yōu)選給藥途徑。在優(yōu)選實(shí)施方式中，該組合物被外用施加在受感染區(qū)域上，并揉入其中。外用施加該組合物至少一天一或二次，或每天3至5次。一般而言，該外用組合物包括約1_10%，優(yōu)選約 2-6%, 2-10%, 3-7%, 3-8%, 3-10%, 4-6%, 4-7%,或 4-8%(w/w)的該活性化合物。例如，該外用組合物包括約3%或5%(w/w)的該活性化合物。根據(jù)受感染區(qū)域，通常每劑量0.01-10g，優(yōu)選0. 05-5g的該外用組合物被施加于該個(gè)體?？傮w上，該活性化合物以l_500mg，優(yōu)選
2.5-250mg/劑量被外用施加至個(gè)體。例如，每cm2的病痕面積被施加0. 05g的5%雙氯芬酸鈉(2.5mg)。該活性化合物透過皮膚并被遞送至不適位點(diǎn)。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解各種各樣的遞送機(jī)制均適用于本發(fā)明。以下實(shí)施例進(jìn)一步示范本發(fā)明，其不應(yīng)被解釋為限制本發(fā)明的范圍至其所述的特定步驟。
實(shí)施例
實(shí)施例I.乳劑配方的制備由以下步驟制備乳劑載體土 [活性成分]:I.油相的制備將混合容器浸在熱水浴(80±2° C)中。將[阿昔洛韋，50g]羥苯甲酸甲酯(Ig)，對(duì)羥苯甲酸丙酯(Ig)，鯨蠟醇^Og),單硬脂酸山梨糖醇酐酯60 (12g)，硬脂酸(steric acid) (20g),合成鯨臘(50g), 二甲基聚娃氧燒(30g),和三甘油辛-癸酸酯(miglyol)812(70g)加入該混合容器并攪拌至混合完全。用150目網(wǎng)過濾該混合物一次以去除顆粒。2.水相的制備將另一混合容器浸在熱水浴(80±2° C)中。將[雙氯芬酸鈉鹽，50g][雙氯芬酸利多卡因鹽，10g, 30g,或50g]聚山梨酸酯60(36g),丙二醇(160g),梓檬酸鈉(IOg)，和充分的使總重量達(dá)到IOOOg的純水加入該混合容器并攪拌至混合完全。用150目網(wǎng)過濾該混合物一次以去除顆粒。3.乳化將油相轉(zhuǎn)移入真空壓力35-40毫米汞柱的蒸汽夾套箱中。用Homo-Mixer (25-35Hz)以恒定的攪拌的速度持續(xù)25分鐘將該水相緩慢加入該蒸汽夾套箱。4.前一步驟得到的乳化液在緩慢攪拌的條件下冷卻至30° C，以獲得乳劑劑型的外用配方。實(shí)施例2.在動(dòng)物身上測試不同的化合物目標(biāo)在皰疹動(dòng)物模型上測試⑴AD0-1，ADO-2, AD0-3，和AD0-4 ；⑵1%VD099乳劑，3%VD099乳劑，5%VD099乳劑和它們的安慰劑；(3) VG099乳劑(雙氯芬酸鈉，50mg (RA009))，VD099乳劑(雙氯芬酸，利多卡因鹽50mg(RA052))，VA099乳劑(利多卡因，50mg (RA001))和它們的安慰劑乳劑的作用。該乳劑配方土活性成分根據(jù)實(shí)施例I制備。測試化合物組IAD0-1 :5%阿昔洛韋(50mg/g)加5%雙氯芬酸利多卡因鹽(Lidofenac50mg/g)AD0-2 :5% 阿昔洛韋(50mg/g)AD0-3 :5% 雙氯芬酸利多卡因鹽(Lidofenac 50mg/g)AD0-4 :載體。組II1%VD099 乳劑雙氯芬酸，利多卡因鹽(Lidofenac 10mg/g, RA032)；
VD099安慰劑乳劑(RA035安慰劑)；3%VD099 乳劑雙氯芬酸，利多卡因鹽(Lidofenac 30mg/g, RA033)；VD099安慰劑乳劑(RA036安慰劑);5%VD099 乳劑雙氯芬酸,利多卡因鹽(Lidofenac 50mg/g, RA034)；VD099安慰劑乳劑(RA037安慰劑)。組III1%VD099 乳劑雙氯芬酸,利多卡因鹽(Lidofenac 10mg/g, RA032)；VD099安慰劑乳劑(RA035安慰劑); 3%VD099 乳劑雙氯芬酸，利多卡因鹽(Lidofenac 30mg/g, RA033)；VD099安慰劑乳劑(RA036安慰劑);5%VG099 乳劑雙氯芬酸鈉，50mg/g (RA009)，安慰劑乳劑(RA010)；5%VD099 乳劑雙氯芬酸，利多卡因鹽(Lidofenac 50mg/g, RA052)，安慰劑乳劑(RA053)；5%VA099 乳劑利多卡因，50mg/g (RA001)，安慰劑乳劑(RA003)。該化合物不用時(shí)以室溫被保持于黑暗中。用5%ACV/PEG (Zovirax油膏)作為實(shí)驗(yàn)中的對(duì)照。動(dòng)物接種此實(shí)驗(yàn)中使用Hartley遠(yuǎn)系雜交白變種豚鼠。將HSV-1病毒原料(0. 035ml)施加于每一區(qū)域，并通過六尖彈簧負(fù)荷接種器具(艉針，Pan Ray Division, Ormont Drug,英格伍德，新澤西)的十次活化在適宜的間隔位點(diǎn)引入。接種日為第0天。在第1，2和3天按4x/天施加約250mg的測試藥物。用于5%ACV/PEG(Zovirax油膏)的劑量方案從我們的標(biāo)準(zhǔn)劑量方案，即第1，2和3天5x/天降低至第1，2和3天4x/天，以匹配組I的方案。對(duì)組II和組III，對(duì)5%ACV/PEG(Zovirax油膏)的劑量方案采用我們的標(biāo)準(zhǔn)劑量方案，即第1，2和3天5x/天，用作實(shí)驗(yàn)對(duì)照。在第4天，用Nair處理該動(dòng)物背上的位點(diǎn)以去除動(dòng)物背部重新生長的毛發(fā)。對(duì)動(dòng)物的病痕計(jì)數(shù)，并對(duì)動(dòng)物拍照，隨后用于測量病痕尺寸。處死這些動(dòng)物并從不同的區(qū)域移除全部厚度的皮膚。將來自每一處理區(qū)域的長方形皮膚放入冰浴中的15ml具有2%乳牛血清(FBS)的組織培養(yǎng)介質(zhì)。然后在Stomacher 80Biomaster實(shí)驗(yàn)室混合器(Seward公司)中勻化該樣品。通過離心作用使細(xì)胞碎片成粒，并收集上清液且冷凍于-70° C，直至通過VER076細(xì)胞(腎，非洲綠猴，ATCC CRL#1587)中的斑塊形成分析感染性。皮膚刺激性在未感染的Hartley遠(yuǎn)系雜交白變種豚鼠上，在第1，2和3天，每天我們以Ix/ 天，2x/ 天，4x/天和 5x/ 天的劑量方案測試 7 (l)ADO-l, AD0-2，AD0-3，和 AD0-4 ；
(2)1%VD099乳劑，3%VD099乳劑，5%VD099乳劑和它們的安慰劑；(3) VG099乳劑(雙氯芬酸鈉，50mg (RA009))，VD099乳劑(雙氯芬酸，利多卡因鹽50mg (RA052))，VA099乳劑(利多卡因，50mg (RA001))和它們的安慰劑乳劑的皮膚刺激性。該乳劑配方土活性成分為根據(jù)實(shí)施例I制備。組I :AD0_1，ADO-2, AD0-3，和 ADO-4由于用 于在受感染動(dòng)物中測試的化合物AD0-1，-2和-3不夠用，該5x/天的劑量
方案被較早停止。所有化合物，包括載體，在2x/天和4x/天的劑量方案下均有為中等刺激性。但決定采用4x/天的劑量方案。組II : 1%VD099乳劑3%VD099乳劑，5%VD099乳劑和它們的安慰劑所有化合物，包括安慰劑，在兩種三劑量方案下均為中等至強(qiáng)烈刺激性。和贊助者相關(guān)，我們決定以2x/天的劑量方案使用最有效的化合物，5%VD099,以及其安慰劑。即使在該劑量方案下，我們也意識(shí)到該5%VD099及其載體所引起的皮膚刺激性可能阻止我們?cè)诘?天觀察病痕來對(duì)其計(jì)算和測量。事實(shí)就是如此。組III VG099乳劑(雙氯芬酸鈉，5%(RA009))，VD099乳劑(雙氯芬酸，利多卡因鹽50mg(RA052))，VA099乳劑(利多卡因，50mg (RA001))和它們的安慰劑乳劑VG099乳劑和VD099乳劑，包括它們的安慰劑，在全部三種劑量方案下均為中等至強(qiáng)烈刺激性。第1，2和3天VA099乳劑在Ix和2x/天時(shí)為輕微刺激性，在4x/天時(shí)為中等至強(qiáng)烈刺激性。1%VD099乳劑，3%VD099乳劑，和它們的安慰劑乳劑在全部三種劑量方案中均為中等至強(qiáng)烈刺激性。我們決定使用2x/天劑量方案。即使在該劑量方案下，我們也意識(shí)到這些化合物和它們的載體所引起的皮膚的刺激性可能會(huì)妨礙我們?cè)诘?天觀察病痕來對(duì)其計(jì)算和測量。事實(shí)就是如此。在第4天，對(duì)受感染動(dòng)物的皮膚刺激性妨礙了我們對(duì)效力的評(píng)價(jià)對(duì)于1%VD099，12個(gè)藥物/安慰劑乳劑配對(duì)中的3個(gè)；對(duì)于3%VD099，12個(gè)藥物/安慰劑乳劑配對(duì)中的6個(gè)；對(duì)于VG099，12個(gè)藥物/安慰劑乳劑配對(duì)中的11個(gè)；對(duì)于VD099，12個(gè)藥物/安慰劑乳劑配對(duì)中的8個(gè)；對(duì)于VA099，12個(gè)藥物/安慰劑乳劑配對(duì)中的7個(gè)；結(jié)果組I測試了十個(gè)活性vs.載體配對(duì)。HSV-I感染加重由活性化合物，包括載體所引起的刺激性，使第4天難以看見病痕，以對(duì)其計(jì)數(shù)。此模型有時(shí)候發(fā)生這種情況，并且難以預(yù)知。該刺激性也使得從第4天的照片測量病痕很難。由于這些困難，病痕數(shù)和總病痕面積的比較數(shù)字被減小，并降低了 “n”足夠大至實(shí)現(xiàn)顯著性的幾率。在人類中可以良好耐受的化合物通?？赡軐?duì)我們的模型中的動(dòng)物是刺激性的，使的我們的模型中的皮膚刺激性可能不能預(yù)測在人類中的皮膚刺激性。表I顯示了分析結(jié)果(InStat.V3, GraphPad軟件公司)，實(shí)驗(yàn)的顯著性水平為p^O. 05。當(dāng)和該載體(AD0-4)對(duì)比時(shí)，AD0-1實(shí)現(xiàn)了統(tǒng)計(jì)上有顯著意義的病痕數(shù)的減少(26%)和全部病痕面積的減少(47%)。其顯示了減少病毒滴度的傾向。
當(dāng)和該載體(AD0-4)對(duì)比時(shí)，AD0-2實(shí)現(xiàn)了統(tǒng)計(jì)上有顯著意義的全部病痕面積的減少(26%)和病毒滴度的減少(51%)。其顯示了減少病痕數(shù)的傾向。當(dāng)和該載體(AD0-4)對(duì)比時(shí)，AD0-3僅實(shí)現(xiàn)了統(tǒng)計(jì)上有顯著意義的病毒滴度的減少(86%)。由于AD0-3看來在受感染的動(dòng)物中刺激性最大，病痕數(shù)和總病痕面積的結(jié)果或其結(jié)果的缺失需要將在這一點(diǎn)上理解。當(dāng)和其載體對(duì)比時(shí)，5%ACV/PEG實(shí)現(xiàn)了總病痕面積的顯著減少。對(duì)我們的模型，這些5%ACV/PEG的結(jié)果不是典型的，但我們一般在第1，2和3天使用5x/天的劑量方案。我們通常看到總病痕面積和病毒滴度的顯著減少，這一結(jié)果將和AD0-2極為接近。組II
1%VD099，3%VD099，5%VD099和它們各自的載體對(duì)動(dòng)物的皮膚均為中等至強(qiáng)烈刺激性。和贊助者有關(guān)，并且為了保存資源，我們決定使用最有效的化合物，5%VD099和其安慰齊U，劑量方案為在第1，2和3天2x/天。HSV-I感染加重由受測試的化合物，包括載體所引起的刺激性，使第4天難以看見病痕，以對(duì)其計(jì)數(shù)。此模型中有時(shí)候發(fā)生這種情況。該刺激性也使得從第4天拍攝的照片測量病痕很難。由于這些困難，病痕數(shù)和總病痕面積的比較數(shù)字被減小，并降低了“n”足夠大至實(shí)現(xiàn)顯著性的幾率。表II顯示了分析結(jié)果(InStat. V3, GraphPad軟件公司)，實(shí)驗(yàn)的顯著性水平為p^O. 05。當(dāng)和其安慰劑對(duì)比，5%VD099實(shí)現(xiàn)了統(tǒng)計(jì)上有顯著意義的23%的病痕數(shù)減少，統(tǒng)計(jì)上有顯著意義的26%的總病痕面積減少，和統(tǒng)計(jì)上有顯著意義的52%的病毒滴度減少。當(dāng)和其載體對(duì)比時(shí)，5%ACV/PEG實(shí)現(xiàn)了病痕數(shù)，10% ;總病痕面積，33%和病毒滴度，79%的顯著減少。5%ACV/PEG的這些結(jié)果對(duì)于我們的模型的是典型的。它們也反映了我們看到的對(duì)于真正的抗病毒藥在我們的模型中的總體效力模式病毒滴度的減少大于總病痕面積的減少，總病痕面積的減少大于病痕數(shù)的減少。(病毒滴度減少 > 總病痕面積減少 > 病痕數(shù)減少。)組III1%VD099, 3%VD099, VG099, VD099, VA099和它們各自的載體對(duì)于動(dòng)物的皮膚均為中
等至強(qiáng)烈刺激性。HSV-I感染加重由受測試的化合物，包括它們的載體所引起的刺激性，使第4天難以看見病痕，以對(duì)其計(jì)數(shù)。此模型中有時(shí)候發(fā)生這種情況。該刺激性也使得從第4天拍攝的照片測量病痕很難。由于這些困難，病痕數(shù)和總病痕面積的比較數(shù)字被減小，并降低了 “n”足夠大至實(shí)現(xiàn)顯著性，或者甚至做統(tǒng)計(jì)測試的幾率，。表III顯不了分析結(jié)果(InStat. V3, GraphPad軟件公司)，實(shí)驗(yàn)的顯著性水平為p^O. 05。最顯著的結(jié)果為，當(dāng)和其安慰劑乳劑對(duì)比時(shí)，VG099實(shí)現(xiàn)了統(tǒng)計(jì)上有顯著意義的93%的病毒滴度減少。當(dāng)和其載體對(duì)比時(shí)，5%ACV/PEG實(shí)現(xiàn)了總病痕面積，27%和病毒滴度，71%的顯著減少。5%ACV/PEG的這些結(jié)果對(duì)于我們的模型的是典型的。它們也反映了我們看到的對(duì)于真正的抗病毒藥在我們的模型中的總體效力模式病毒滴度的減少大于總病痕面積的減少，總病痕面積的減少大于病痕數(shù)的減少。(病毒滴度減少 > 總病痕面積減少 > 病痕數(shù)減少。)結(jié)果總結(jié)組IADO-3, 5%lidofenac 實(shí)現(xiàn)了 86% 的病毒滴度減少。AD0-1,阿昔洛韋和lidofenac的組合,沒有實(shí)現(xiàn)和lidofenac —樣的病毒滴度減少。不過，AD0-1實(shí)現(xiàn)了較少的但顯著的病痕數(shù)和總病痕面積的減少。組II在我們模型中的全部三種效力測量中，5%VD099(RA034)，5%lidofenac實(shí)現(xiàn)了適度的但顯著的結(jié)果。5%VD099及其載體對(duì)于動(dòng)物皮膚也具有程度相當(dāng)?shù)拇碳ば?。組IIIVG099(RA009)，雙氯芬酸鈉，50mg/g(5%w/w)，在我們的模型中實(shí)現(xiàn)了 93%的病毒滴度減少。VG099和其安慰劑乳劑對(duì)于動(dòng)物皮膚也具有程度相當(dāng)?shù)拇碳ば?，其妨礙我們?cè)u(píng)價(jià)該化合物可能已經(jīng)產(chǎn)生對(duì)于減少病痕數(shù)和總病痕面積的效果。這些結(jié)果也顯示于圖I和2。圖I顯示(a)5%lidofenac和5%阿昔洛韋，(b) 5%阿昔洛韋，和(c)5%lidofenaC對(duì)病痕數(shù)，病痕面積和病毒滴度的抑制效果。由于有三個(gè)5%lidofenac的數(shù)據(jù)點(diǎn)，該圖表中的5%lidofenac的數(shù)據(jù)代表該3組數(shù)據(jù)的平均值。圖I顯示5%阿昔洛韋加5%lidofenaC具有對(duì)病痕數(shù)和病痕面積的最高抑制作用，5%lidofenaC顯示出對(duì)病毒滴度的最高抑制作用。圖2比較了 lidofenac (1%，3%，和5%)，雙氯芬酸(5%)，利多卡因(5%)，和阿昔洛韋(5%)對(duì)于病毒滴度的抑制作用。lidofenac(l%，3%，和5%)顯示出對(duì)病毒滴度的抑制效果的 劑量反應(yīng)。5%雙氯芬酸顯示出對(duì)病毒滴度的很好的抑制效果。5%利多卡因?qū)Σ《镜味戎挥行∫种菩Ч?br> 權(quán)利要求
1.在對(duì)象中抑制皰疹病毒活性的方法，包括 確定遭受皰疹病毒感染的對(duì)象，和 向該對(duì)象外用給藥以基本由有效量的雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽組成的活性成分， 由此抑制該病毒活性。
2.如權(quán)利要求I所述的方法，其中該皰疹病毒選自，單純性皰疹病毒I型(HSV-I)，單純性皰疹病毒2型，水痘-帶狀皰疹病毒，和其組合。
3.如權(quán)利要求I所述的方法，其中該雙氯芬酸被外用給藥至該對(duì)象的外部組織上的病痕。
4.如權(quán)利要求I所述的方法，其中該雙氯芬酸的有效量約為3-5%(w/w)。
5.如權(quán)利要求I所述的方法，其中雙氯芬酸的有效量約為5%(w/w)。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過向有需要的對(duì)象給藥以主要由有效量的雙氯芬酸(例如，3-7%w/w)或其藥學(xué)上可接受的鹽組成的活性成分，在該對(duì)象體內(nèi)抑制皰疹病毒活性的方法。
文檔編號(hào)A61P31/22GK102711747SQ201080058636
公開日2012年10月3日 申請(qǐng)日期2010年10月21日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月21日
發(fā)明者李芳全, 謝慧玲 申請(qǐng)人:卡爾斯巴德技術(shù)公司, 永信藥品工業(yè)股份有限公司