專利名稱：清胃黃連片的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及中藥的檢測方法，尤其是一種清胃黃連片的質(zhì)量 控制方法。
背景技術(shù)：
清胃黃連片的主要成分和含量如下黃連62. 5g 石膏 62. 5g 桔梗 62. 5g甘草31.25g 知母 62. 5g 玄參 62. 5g地黃 62. 5g 牡丹皮 62. 5g 天花粉 62. 5g連翹62. 5g 桅子 156. 25g 黃柏 156. 25g黃芩156. 25g 赤芍 62. 5g制備方法以上十四味，石膏31. 25g粉碎成細(xì)粉，過篩，備用。黃芩提取黃芩素，備 用。其余石膏等十二味加水煎煮二次，每次2小時，合并以上煎液，濃縮至適量，將濃縮液繼 續(xù)濃縮成稠膏，加入石膏、黃芩素細(xì)粉及輔料適量，混勻，制成顆粒，干燥；或?qū)饪s液噴霧 干燥成干膏粉，加入石膏、黃芩素細(xì)粉及輔料適量，混勻，制成顆粒。壓制成1000片，包衣， 即得，其中糖衣片基片每片重0. 32g，薄膜衣片每片重0. 33g。功能與主治清胃瀉火，解毒消腫。用于口舌生瘡，齒齦、咽喉腫痛。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，提供一種能夠定性檢測藥物成分的 清胃黃連片的質(zhì)量控制方法，本方法具有檢測手段簡單、檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確的特點。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的一種清胃黃連片的質(zhì)量控制方法，其方法的步驟是(1)以鹽酸小檗堿為對品，采用薄層色譜法鑒別清胃黃連片中的黃連成分；(2)以菝葜皂苷元為對照品，采用薄層色譜法鑒別清胃黃連片中的知母成分；(3)采用高效液相色譜法測定清胃黃連片中的鹽酸小檗堿含量。而且，還包括桅子苷的薄層色譜鑒別和黃芩苷的薄層色譜鑒別。而且，所述黃連的薄層色譜鑒別的方法為①供試品溶液的制備取清胃黃連片樣品，去包衣，研細(xì)，加甲醇，加熱回流，濾過， 濾液蒸干，甲醇定容，作為供試品溶液；②對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇制成0. 5mg/ml的溶液， 即得；對照藥材溶液的制備取黃連對照藥材50mg，按上述供試品溶液制備方法制成對照藥 材溶液；③薄層色譜條件及結(jié)果吸取上述三種溶液各1 μ 1分別點于同一硅膠G板上，以 正丁醇乙酸水=7 1 2為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，檢 視供試品色譜中在與對照品、對照藥材色譜相應(yīng)位置上是否顯相同顏色的熒光斑點，確定供試品中是否含有黃連成分。而且，所述知母的薄層色譜鑒別的方法為

①供試品溶液的制備取清胃黃連片樣品，去包衣，研細(xì)，加乙醚，加熱回流，濾過， 棄去濾液，殘渣揮盡乙醚，加乙醇，加熱回流，放冷，濾過，濾液加鹽酸2ml，繼續(xù)回流1小時， 再置水浴上濃縮至5ml，加水，用甲苯振搖提取，分取甲苯層，用氫氧化鈉溶液IOml洗滌 一次，再用水洗滌3次，每次10ml，分取甲苯層，蒸干，殘渣加甲苯Iml使溶解，作為供試品溶 液；②對照品溶液的制備取菝葜皂苷元對照品，加甲苯制成每Iml含Img的溶液，作 為對照品溶液；③薄層色譜條件及結(jié)果吸取對照品溶液、供試品溶液各4μ 1，分別點于同一以 羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯丙酮=9 1為展開劑，展開，取出， 晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰，檢視供試品色譜中在與對照品色 譜相應(yīng)的位置上是否顯相同顏色的斑點，確定供試品中是否含有知母成分。而且，所述鹽酸小檗堿的含量測定的方法為①色譜條件以0. 05mol/L，磷酸二氫鈉乙腈=70 30為流動相，檢測波長為 345nm，柱溫:30°C ；②對照品溶液的制備精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量，加50%乙醇溶解，制成 Iml中含30 μ g的溶液，即得；③供試品溶液的制備取清胃黃連片樣品，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，精密稱取 0. 4g，置具塞錐形瓶中，加50 %乙醇，密塞，超聲處理，放冷，再稱定重量，用50 %乙醇補(bǔ)足 減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；④檢測及結(jié)果分別精密吸取對照品、供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測 定，即得，檢測其色譜圖，經(jīng)過分析，本品含鹽酸小檗堿每片不得少于1.2mg/片，其中每片 重 0. 32g。而且，所述桅子苷的薄層色譜鑒別的方法為①供試品溶液的制備取清胃黃連片樣品，去包衣，研細(xì)，加甲醇，超聲處理，濾過， 濾液濃縮至近干，加甲醇使溶解，作為供試品溶液；②對照品溶液的制備取桅子苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對 照品溶液；③薄層色譜條件及結(jié)果吸取供試品溶液、陰性樣品溶液各4μ1，對照品溶液 2 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇冰醋酸水=7 1 2為展開劑，展開， 取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰，檢視供試品色譜中在與對照 品色譜相應(yīng)的位置上是否顯相同顏色的斑點，確定供試品中是否含有桅子苷成分。而且，所述黃芩苷的薄層色譜鑒別的方法為①供試品溶液的制備同桅子鑒別項下供試品的制備方法；②對照品溶液的制備取黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對 照品溶液；③薄層色譜條件及結(jié)果吸取供試液，陰性樣品溶液各4μ 1，及對照品溶液2μ 1， 分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇冰醋酸水=7 1 2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵乙醇溶液，檢視供試品色譜中在與對照品色譜相應(yīng)的位置上是否顯 相同顏色的斑點，確定供試品中是否含有黃芩苷成分。本發(fā)明的優(yōu)點和積極效果是由于原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中沒有相應(yīng)的控制標(biāo)準(zhǔn)，本發(fā)明中進(jìn)行了黃連和知母進(jìn)行了薄層 鑒別試驗，篩選出重現(xiàn)性好、專屬性強(qiáng)、斑點顯色清晰、結(jié)果易判斷的方法納入標(biāo)準(zhǔn)中，并且 進(jìn)行了桅子和黃芩的薄層色譜檢測的復(fù)核，修訂后的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，提高了藥品的質(zhì)量控制，使 藥品的定性和定量檢測更加準(zhǔn)確，質(zhì)量更加容易控制。


圖1為本發(fā)明黃連薄層色譜鑒別的色譜圖，從左至右依次為1鹽酸小檗堿對照 品，2黃連對照藥材，3清胃黃連片樣品(批號為0511491)，4清胃黃連片樣品(批號為 0512514)，5清胃黃連片樣品(批號為0601522)，6清胃黃連片黃連陰性樣品；圖2為本發(fā)明桅子薄層色譜鑒別色譜圖，從左至右依次為1桅子苷對照品，2清 胃黃連片樣品(批號為0511491)，3清胃黃連片樣品(批號為0512514)，4清胃黃連片樣品 (批號為0601522)，5清胃黃連片桅子陰性樣品； 圖3為本發(fā)明黃芩薄層色譜鑒別色譜圖，從左至右依次為1黃芩苷對照品，2清 胃黃連片樣品(批號為0511491)，3清胃黃連片樣品(批號為0512514)，4清胃黃連片樣品 (批號為0601522)，5清胃黃連片黃芩陰性樣品；圖4為本發(fā)明知母薄層色譜鑒別色譜圖，從左至右依次為1菝葜皂苷元對照品，2 清胃黃連片樣品(批號為0511491)，3清胃黃連片樣品(批號為0512514)，4清胃黃連片樣 品(批號為0601522)，5清胃黃連片知母陰性樣品；圖5為本發(fā)明鹽酸小檗堿陰性樣品色譜圖；圖6為本發(fā)明鹽酸小檗堿對照品溶液色譜圖；圖7為本發(fā)明鹽酸小檗堿檢測中樣品色譜圖。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例，對本發(fā)明進(jìn)一步說明，下述實施例是說明性的，不是限定性的， 不能以下述實施例來限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。一種清胃黃連片的質(zhì)量控制方法，其方法的步驟是(1)黃連的薄層色譜鑒別①供試品溶液的制備取清胃黃連片樣品5片，去包衣，研細(xì)，加20ml甲醇，加熱回 流15分鐘，濾過，濾液蒸干，甲醇定容至5ml，作為供試品溶液。②對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇制成0. 5mg/ml的溶液， 即得；對照藥材溶液的制備取黃連對照藥材50mg，按上述供試品溶液制備方法制成對照藥 材溶液；。③陰性樣品溶液的制備按處方配比，取除去黃連、黃柏的其他味藥材，按原藥制 備工藝制成樣品，再按上述供試品溶液制備方法制得陰性樣品溶液。(因黃柏藥材中也含有 鹽酸小檗堿，故陰性樣品中未加入黃柏，以免有干擾)；④薄層色譜條件及結(jié)果照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取上述四種溶 液各Ιμ 分別點于同一硅膠G板上，以正丁醇乙酸水=7 1 2為展 開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照品、對照藥材色 譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光斑點。陰性樣品無干擾，見圖1。(2)桅子苷的薄層色譜鑒別(復(fù)核原方法)①供試品溶液的制備取清胃黃連片樣品5片，去包衣，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處 理30分鐘，濾過，濾液濃縮至近干，加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。②對照品溶液的制備取桅子苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對 照品溶液。③陰性樣品溶液的制備按處方配比，取除去桅子的其他味藥材，按原藥制備工藝 制成樣品，再按上述供試品溶液制備方法制得陰性樣品溶液。④薄層色譜條件及結(jié)果照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸 取供試品溶液、陰性樣品溶液各4 μ 1，對照品溶液2 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以 正丁醇冰醋酸水=7 1 2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱 風(fēng)吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。 陰性樣品無干擾，見圖2(3)黃芩苷的薄層色譜鑒別(復(fù)核原方法)①供試品溶液的制備同桅子鑒別項下供試品的制備方法。②對照品溶液的制備取黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對 照品溶液。③陰性樣品溶液的制備按處方配比，取除去黃芩的其他味藥材，按原藥制備工藝 制成樣品，再按上述供試品溶液制備方法制得陰性樣品溶液。④薄層色譜條件及結(jié)果照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸 取供試液，陰性樣品溶液各4 μ 1，及對照品溶液2 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正 丁醇冰醋酸水=7 1 2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵乙醇溶液。供 試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾，見圖3。(4)知母的薄層色譜鑒別①供試品溶液的制備取清胃黃連片樣品10片，去包衣，研細(xì)，加乙醚40ml，加熱 回流15分鐘，濾過，棄去濾液，殘渣揮盡乙醚，加乙醇40ml，加熱回流1小時，放冷，濾過，濾 液加鹽酸2ml，繼續(xù)回流1小時，再置水浴上濃縮至5ml，加水10ml，用甲苯20ml振搖提取， 分取甲苯層，用氫氧化鈉溶液IOml洗滌一次，再用水洗滌3次，每次10ml，分取甲苯層， 蒸干，殘渣加甲苯Iml使溶解，作為供試品溶液。②對照品溶液的制備取菝葜皂苷元對照品，加甲苯制成每Iml含Img的溶液，作 為對照品溶液。③陰性樣品溶液的制備按處方配比，取除去知母的其他味藥材，按原藥制備工藝 制成樣品，再按上述供試品溶液制備方法制得陰性樣品溶液。④薄層色譜條件及結(jié)果照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VI B)試驗， 吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液各4μ 1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘 合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯丙酮=9 1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草 醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾，結(jié)果見圖4。(因試劑苯的毒性較大，本方法將苯均改為甲 苯)(5)黃連、黃柏中鹽酸小檗堿的含量測定①色譜條件和色譜柱YMC-PackODS-A C18 柱(150 X 4. 6mm, 5 μ m)，以 0. 05mol/L磷酸二氫鈉(pH = 3)乙腈=70 30為流動相，檢測波長為345nm，柱溫30°C， 理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計算應(yīng)不低于3000。②對照品溶液的制備精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量，加50%乙醇溶解，制成 Iml中含30 μ g的溶液，即得，結(jié)果見圖7。③供試品溶液的制備取清胃黃連片樣品20片(除去包衣)，精密稱定，研細(xì)，精 密稱取0. 4g，置具塞錐形瓶中，加50 %乙醇50ml，密塞，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重 量，用50%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得，結(jié)果見圖7。④陰性樣品溶液的制備按處方配比，取除去黃連、黃柏的其他味藥材，按原藥制 備工藝制成樣品，再按上述供試品溶液制備方法制得陰性樣品溶液，結(jié)果見圖5。 ⑤檢測及結(jié)果分別精密吸取對照品、陰性樣品溶液、供試品溶液各10μ 1，注入 液相色譜儀，測定，即得，檢測其色譜圖，經(jīng)過10批樣品的分析，得到每片樣品中鹽酸小檗 堿的含量在1. 41-1. 92mg之間，10批樣品中的鹽酸小檗堿的含量平均值為1. 76mg/片，其含 量限度定為1.76X70%= 1.2mg/片，即本品每片(每片重0. 32g)含黃連、黃柏以鹽酸小 檗堿的含量計，不得少于1. 2mg。本品含鹽酸小檗堿每片(每片重0. 32g)不得少于1. 2mg/ 片。
權(quán)利要求
1.一種清胃黃連片的質(zhì)量控制方法，其特征在于其方法的步驟是(1)以鹽酸小檗堿為對品，采用薄層色譜法鑒別清胃黃連片中的黃連成分；(2)以菝葜皂苷元為對照品，采用薄層色譜法鑒別清胃黃連片中的知母成分；(3)采用高效液相色譜法測定清胃黃連片中的鹽酸小檗堿含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的清胃黃連片的質(zhì)量控制方法，其特征在于還包括桅子苷的 薄層色譜鑒別和黃芩苷的薄層色譜鑒別。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的清胃黃連片的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述黃連的薄層 色譜鑒別的方法為①供試品溶液的制備取清胃黃連片樣品，去包衣，研細(xì)，加甲醇，加熱回流，濾過，濾液 蒸干，甲醇定容，作為供試品溶液；②對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇制成0.5mg/ml的溶液，即得； 對照藥材溶液的制備取黃連對照藥材50mg，按上述供試品溶液制備方法制成對照藥材溶 液；③薄層色譜條件及結(jié)果吸取上述三種溶液各1μ1分別點于同一硅膠G板上，以正丁 醇乙酸水=7 1 2為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，檢視供 試品色譜中在與對照品、對照藥材色譜相應(yīng)位置上是否顯相同顏色的熒光斑點，確定供試 品中是否含有黃連成分。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的清胃黃連片的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述知母的薄層 色譜鑒別的方法為①供試品溶液的制備取清胃黃連片樣品，去包衣，研細(xì)，加乙醚，加熱回流，濾過，棄去 濾液，殘渣揮盡乙醚，加乙醇，加熱回流，放冷，濾過，濾液加鹽酸anl，繼續(xù)回流1小時，再置 水浴上濃縮至5ml，加水，用甲苯振搖提取，分取甲苯層，用1 %氫氧化鈉溶液IOml洗滌一 次，再用水洗滌3次，每次10ml，分取甲苯層，蒸干，殘渣加甲苯Iml使溶解，作為供試品溶 液；②對照品溶液的制備取菝葜皂苷元對照品，加甲苯制成每Iml含Img的溶液，作為對 照品溶液；③薄層色譜條件及結(jié)果吸取對照品溶液、供試品溶液各4μ1，分別點于同一以羧甲 基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯丙酮=9 1為展開劑，展開，取出，晾 干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰，檢視供試品色譜中在與對照品色譜 相應(yīng)的位置上是否顯相同顏色的斑點，確定供試品中是否含有知母成分。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的清胃黃連片的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述鹽酸小檗堿 的含量測定的方法為①色譜條件以0.05mol/L，磷酸二氫鈉乙腈=70 30為流動相，檢測波長為 345nm，柱溫:30°C ；②對照品溶液的制備精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量，加50%乙醇溶解，制成Iml中 含30 μ g的溶液，即得；③供試品溶液的制備取清胃黃連片樣品，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，精密稱取0.4g， 置具塞錐形瓶中，加50%乙醇，密塞，超聲處理，放冷，再稱定重量，用50%乙醇補(bǔ)足減失的 重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；④檢測及結(jié)果分別精密吸取對照品、供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定， 即得，檢測其色譜圖，經(jīng)過分析，本品含鹽酸小檗堿每片不得少于l.ang/片，其中每片重 0. 32go
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的清胃黃連片的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述桅子苷的薄 層色譜鑒別的方法為①供試品溶液的制備取清胃黃連片樣品，去包衣，研細(xì)，加甲醇，超聲處理，濾過，濾液 濃縮至近干，加甲醇使溶解，作為供試品溶液；②對照品溶液的制備取桅子苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品 溶液；③薄層色譜條件及結(jié)果吸取供試品溶液、陰性樣品溶液各4μ 1，對照品溶液2 μ 1，分 別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇冰醋酸水=7 1 2為展開劑，展開，取出，晾 干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰，檢視供試品色譜中在與對照品色譜 相應(yīng)的位置上是否顯相同顏色的斑點，確定供試品中是否含有桅子苷成分。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的清胃黃連片的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述黃芩苷的薄 層色譜鑒別的方法為①供試品溶液的制備同桅子鑒別項下供試品的制備方法；②對照品溶液的制備取黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品 溶液；③薄層色譜條件及結(jié)果吸取供試液，陰性樣品溶液各4μ1，及對照品溶液2μ 1，分別 點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇冰醋酸水=7 1 2為展開劑，展開，取出，晾 干，噴以2%三氯化鐵乙醇溶液，檢視供試品色譜中在與對照品色譜相應(yīng)的位置上是否顯相 同顏色的斑點，確定供試品中是否含有黃芩苷成分。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種清胃黃連片的質(zhì)量控制方法，步驟是采用薄層色譜法，鑒別清胃黃連片處方中是否含黃連、知母、梔子苷和黃芩苷成分，采用高效液相色譜法測定清胃黃連片中的鹽酸小檗堿含量。由于原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中沒有相應(yīng)的控制標(biāo)準(zhǔn)，本發(fā)明中進(jìn)行了黃連和知母進(jìn)行了薄層鑒別試驗，篩選出重現(xiàn)性好、專屬性強(qiáng)、斑點顯色清晰、結(jié)果易判斷的方法納入標(biāo)準(zhǔn)中，并且進(jìn)行了梔子和黃芩的薄層色譜檢測的復(fù)核，修訂后的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，提高了藥品的質(zhì)量控制，使藥品的定性和定量檢測更加準(zhǔn)確，質(zhì)量更加容易控制。
文檔編號A61K33/06GK102139039SQ20101010490
公開日2011年8月3日 申請日期2010年2月3日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月3日
發(fā)明者李欣, 李菁, 王宏, 郭秀霞, 陳玉杰 申請人:天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司隆順榕制藥廠