專利名稱：美蘭預(yù)防齲病的新作用及其應(yīng)用的制作方法
美蘭預(yù)防齲病的新作用及其應(yīng)用摶術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明涉及一種解毒劑----美蘭預(yù)防齲病的新作用。本發(fā)明還涉及 美蘭的這些預(yù)防齲病的新作用在防齲制劑(包括牙膏、漱口劑、口香糖、防齲涂膜和窩溝封 閉劑)領(lǐng)域中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
美蘭(methylene blue，又稱亞甲基藍(lán))是一種解毒劑，常作為氰化 物和硝酸鹽的解毒藥物；也可作為消毒劑，用于皮膚或口腔粘膜消毒。Wilson等(Wilson M，Gibson M，Strahan D et al. A Preliminary evaluation of the useof a redox agent in the treatment of chronic periodontitis. J Periodont Res, 1992 ；27 (5) :522-527) 報道在慢性牙周炎患者的牙周袋內(nèi)應(yīng)用美蘭，可以達(dá)到減少牙周可疑致病菌、治療牙周炎 的目的。這方面的治療技術(shù)獲得英國專利(專利號220對42)，并在美國、日本和歐洲得到 專利的使用權(quán)。但是，美蘭對于齲病預(yù)防作用的研究，目前還未見報道。變形鏈球菌作為口腔主要致齲菌，其致齲特性是基于其利用糖的產(chǎn)酸能力，耐酸 能力以及對堅硬牙齒表面的附著能力。變形鏈球菌粘附于牙齒表面，形成菌斑，在菌斑環(huán) 境中產(chǎn)生有機(jī)酸并保持菌斑環(huán)境較高的酸濃度，酸使得牙釉質(zhì)發(fā)生脫礦破壞，導(dǎo)致齲病發(fā) 生，同時在酸性環(huán)境中，變形鏈球菌能夠生長良好，并進(jìn)行正常的生化代謝活動。目前，文獻(xiàn) 報道美蘭對變形鏈球菌的生長和產(chǎn)酸以及對體外人工菌斑的產(chǎn)酸具有抑制作用(王成龍 等。美蘭抑制變形鏈球菌產(chǎn)酸的實(shí)驗(yàn)研究。臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志，2000 ;16(4) :202-203;王 成龍。美蘭對體外菌斑糖代謝模型產(chǎn)酸代謝的抑制作用。實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志，2001 ；17(5) 419—421)。發(fā)明內(nèi)容我們根據(jù)文獻(xiàn)報道美蘭對變形鏈球菌的生長和產(chǎn)酸以及對體外人工 菌斑的產(chǎn)酸具有抑制作用，分析美蘭抑制變形球菌的生長和減少變形球菌的產(chǎn)酸的作用機(jī) 理生物體的正常生長和繁殖需要大量還原性物質(zhì)的參與，如NADH和NADPH，這些還原性 物質(zhì)在生物體的合成代謝中起重要作用，而生物體的正常代謝過程中以可產(chǎn)成大量的NADH 和NADPH，能夠滿足其合成代謝的要求，生物體的生長繁殖能夠順利進(jìn)行，美蘭作為需氧脫 氫酶類的人工受氫體，它取代了氧的作用，使得生物體代謝過程中產(chǎn)生的電子(或者說氫 離子)，不能傳遞給氧，而傳遞給了美蘭。這樣，一方面，生物體的氧化作用不能順利進(jìn)行， 也就沒有足夠的能量產(chǎn)生，生物體的生長和繁殖必然受到抑制，另一方面，雖然氧化作用不 能順利進(jìn)行，但需氧脫氫酶類催化的反應(yīng)卻仍然繼續(xù)進(jìn)行，這就意味著有大量的還原性物 質(zhì)被消耗，生物體合成代謝由于缺少“原材料”，其生長受到抑制。另外，還原性物質(zhì)被消耗 (如NADH)，也將影響生物體的其它代謝活動(如糖代謝)，缺乏NADH，生物體糖代謝不能順 利進(jìn)行，特別是糖酵解過程，因此酸的產(chǎn)生也將受到抑制。通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)美蘭對由變形鏈 球菌引起的Spraague-Dawley大鼠的齲病發(fā)生具有明顯的抑制作用，目的是尋找預(yù)防齲病 的新途徑。本發(fā)明的美蘭預(yù)防齲病的新作用完全不同于上述美蘭治療牙周病的作用。本發(fā)明的目的是提供美蘭預(yù)防齲病的新作用。本發(fā)明的另一目的是提供美蘭預(yù)防齲病的新作用在防齲制劑(包括牙膏、漱口 劑、口香糖、防齲涂膜和窩溝封閉劑)領(lǐng)域中的用途。本發(fā)明的美蘭預(yù)防齲病的新作用具體表現(xiàn)為美蘭對由變形鏈球菌引起的Spraague-Dawley大鼠的齲病發(fā)生具有明顯的抑制作用。傳統(tǒng)上，人們使用殺菌、抑菌劑預(yù)防齲病的發(fā)生，效果并不理想。我們根據(jù)美蘭是 需氧脫氫酶類的人工受氫體，能夠阻斷生物體的氧化過程的作用，直接阻斷致齲菌的產(chǎn)酸 代謝，從根本上消除了齲病發(fā)生的病因，這就為齲病這一臨床常見病和多發(fā)病的預(yù)防找到 新的出路。本發(fā)明對研制新型防齲制劑具有重要意義，并具有廣泛的應(yīng)用價值及廣闊的市場 前景。另外，美蘭作為顯色劑也有潛在的應(yīng)用價值，如可用于窩溝封閉劑的顯色或生產(chǎn)彩色牙膏等。


圖1是美蘭抑制Spraague-Dawley大鼠齲病發(fā)生的Keyes齲齒記分結(jié)^ ο具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。t施例、_S對由奪形鏈球菌引走己的&raague-Dawlev大鼠齲病發(fā)牛的作用1、實(shí)驗(yàn)方法將大鼠隨機(jī)分為三組，每組12只(雌雄各半)。均于出生后21d斷奶，記錄體重， 21-23d鼠齡期間給予含有廣譜抗生素(氨芐青霉素0. 5g/瓶X2瓶、氯霉素0. 25g/瓶X4 瓶、羧芐青霉素0. 25g/粒X4粒)的致齲飼料2000#，用量為lg/kg飼料。24-_27d鼠齡期 間，連續(xù)4d于大鼠口腔內(nèi)接種變形鏈球菌。自28d起各組分別用2.5X10_4g/L美蘭溶液， 0. 2%氟化鈉水溶液，蒸餾水處理大鼠取仰臥位，將藥物用鈍針頭注射器注入0. 3ml于大 鼠牙面及口腔，維持15s，每天處理1次，處理后30min內(nèi)禁飲、禁食。連續(xù)處理60d。89d鼠 齡時，記錄體重，麻醉大鼠(肌肉注射861合劑，0. 75mg/kg體重)，處死大鼠，取頌骨標(biāo)本， 根據(jù)Keyes經(jīng)典評分法，將齲病進(jìn)展劃分為釉質(zhì)層(E級)、牙本質(zhì)淺層(Ds)、牙本質(zhì)中層 (Dm)及牙本質(zhì)深層(Dx)四個級別對鼠磨牙齲進(jìn)行記分。2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計分析，三組相差非常顯著(P < 0. 01)。E級齲損美蘭組與蒸餾水相差非常 顯著(P < 0. 01)；與氟化鈉組無顯著差異(P > 0. 05)。Ds級齲損美蘭組與蒸餾水相差十 分顯著(P < 0. 01)；與氟化鈉組沒有統(tǒng)計意義上的差別(P > 0. 05)。Dm級齲損僅見于蒸 餾水組，美蘭組及氟化鈉組均未發(fā)生。Dx級齲損在三組中均未出現(xiàn)。參見附圖1。權(quán)利要求
1.美蘭預(yù)防齲齒的新作用，其特征在于美蘭對齲病的發(fā)生具有抑制作用。
2.權(quán)利要求1所述的美蘭預(yù)防齲齒的新作用在制備以美蘭為有效成分的防齲制劑中 的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及美蘭預(yù)防齲齒的新作用。本發(fā)明的美蘭預(yù)防齲齒的新作用可用于制備以美蘭為有效成分的防齲制劑。
文檔編號A61K8/49GK102038686SQ200910208279
公開日2011年5月4日 申請日期2009年10月22日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月22日
發(fā)明者劉洪臣, 李振鋼, 王成龍 申請人:中國人民解放軍總醫(yī)院