專利名稱：一組用于治療抑郁癥的藥物組合物及制法的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一組包括以甘草、白芍為原料制成的用于治療抑郁癥的藥物組合物， 可將其作為藥物、營養(yǎng)劑和保健食品。本發(fā)明還涉及上述用于治療抑郁癥的藥物組合物的制備方法。
背景技術：
抑郁癥是一種常見的疾病。據(jù)統(tǒng)計在一般人口中大約有25%女性在其一生中經(jīng)歷 過抑郁癥，男性中約有10%左右經(jīng)歷過抑郁癥(張春興著《現(xiàn)代心理學》)。世界衛(wèi)生組織 提供的資料抑郁癥在全世界的發(fā)病率約為11 %，目前全球約有3. 4億精神抑郁患者，而且 這個數(shù)字仍成上升趨勢，調(diào)查發(fā)現(xiàn)在今后20年，抑郁癥將會上升為全球第二大常見疾病。目前國內(nèi)外市場上抗抑郁癥藥物中基本以百優(yōu)解、賽洛特、左洛復等5羥色胺再 攝取抑制劑(SSRIs)為主，其作用機理是通過調(diào)節(jié)人體單胺類神經(jīng)遞質(zhì)5羥色胺等成分含 量緩解抑郁癥狀。這類藥物都有不同程度的副作用，研究表明“這些藥品中含有的復安栓對 平衡人體機能有作用，但更多時候，它們還是無法讓患者平靜下來。，，近年來百優(yōu)解等抑郁 癥藥物是否有害已成為嚴重的社會問題，其中賽洛特更是早在1996年就被發(fā)現(xiàn)存在有安 全隱患，自2001年開始已陸續(xù)從市場上召回。2004年6月，美國紐約州總檢察長指控英國 葛蘭素史克公司為了獲取利潤，欺騙性隱瞞了服用賽洛特與“增加青少年自殺傾向及行為 的風險”之間有聯(lián)系的研究報告。在這種背景下，如何研發(fā)生產(chǎn)新一代副作用小又能有明顯 抗郁作用的藥物已成為全球醫(yī)藥界所關注的問題。
發(fā)明內(nèi)容
為了克服現(xiàn)有抗抑郁藥物的不足，發(fā)明人結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學和藥理學對傳統(tǒng)中藥治療 抑郁癥的病機和作用機理進行了研究，并在反復多次藥效、藥理學實驗的基礎上，提出本發(fā) 明，其目的在于提供包含白芍、甘草的一組能夠快速起效治療抑郁癥的藥物組合物(復方 植物藥)。這種藥物組合物的特點是組方簡單(只有兩味藥)，現(xiàn)代藥理學作用機理明確， 主要功效成分可以量化，因此質(zhì)量穩(wěn)定，療效明顯，安全性強，服用方便。白芍的主要有效 成分是芍藥甙，芍藥甙具有抑制ATP酶、升高AC活性增強胞漿內(nèi)cAMP含量的作用；甘草的 主要有效成分甘草酸、甘草香豆素等是cAMP磷酸二酯酶抑制劑。白芍與甘草組方，可以多 靶點激活腦區(qū)cAMP-PKA通路，促進CREB的磷酸化，使得抗抑郁功效得以增強。白芍、甘草 雖有一定程度的抗抑郁功能，但小鼠懸尾正交實驗結(jié)果證明本發(fā)明的藥物組合物在抗抑 郁的功效上，要明顯優(yōu)于單一的白芍、甘草，因此，本發(fā)明的藥物組合物較白芍、甘草在抗抑 郁上具有新穎性和創(chuàng)造性。另外，傳統(tǒng)中藥方劑芍甘湯也是僅用白芍、甘草兩味藥材組方， 但其適應癥并不包括抑郁癥，而且芍甘湯的組方配比及其制法也與本發(fā)明的藥物組合物不 同，因此，本發(fā)明的藥物組合物在組方、制法和適應癥上較芍甘湯也同樣具有新穎性和創(chuàng)造 性。本發(fā)明另一目的是提供上述藥物組合物的制備方法。
為了完成本發(fā)明的目的，特提出以下技術方案。本發(fā)明用甘草、白芍組方，其特征在于包括至少選自以下原料組方之一甘草5 100重量份白芍20 600重量份本發(fā)明的藥物組合物各組份的優(yōu)選重量配比為甘草10 60重量份白芍100 300重量份本發(fā)明的藥物組合物各組分的最佳重量配比為甘草15重量份白芍150重量份本發(fā)明還涉及一組能夠治療抑郁癥的藥物提取物組合物，該提取物組合物包括①將5 100重量份甘草破碎，水提醇沉，過濾，回收乙醇，濃縮干燥，得甘草提取 物；②將20 600重量份白芍破碎，用70%乙醇水溶液提取，回收乙醇，過濾得澄清 液，上大孔樹脂吸附柱純化，收集洗脫液，濃縮干燥，得白芍提取物；③將上述甘草提取物、白芍提取物混合粉碎，即得本發(fā)明藥物提取物組合物。上述藥物提取物組合物所用原料優(yōu)選為甘草15重量份，白芍150重量份。為了完成本發(fā)明的目的，還包括可以直接用0. 1 2重量份純度為10 98%的 甘草酸(或甘草次酸)和1. 2 12重量份純度為10 98%的芍藥甙組方，其優(yōu)選重量配 比 上述的藥物組合物及提取物組合物，是實現(xiàn)本發(fā)明目的的核心組方，在本發(fā)明公 開后，本領域的技術人員可以根據(jù)中醫(yī)理論或是相關現(xiàn)代藥理學理論，對上述藥物組合物 及提取物組合物進行常規(guī)的加減化裁。這種常規(guī)的加減化裁是本領域技術人員的一般性技 術活動，只要是在本發(fā)明藥物組合物及提取物組合物的配方基礎上所進行的一般性技術加 減，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。以上所述的藥物組合物和提取物組合物包括含有藥學上可接受的載體或添加劑， 可以加工為任何藥劑學上所公知的口服劑型(片劑、膠囊劑或是粉劑等)。本發(fā)明還包括涉及兩種制備以治療抑郁癥為主功效的藥物提取物組合物的方 法方法1①將甘草破碎，水提醇沉，過濾，回收乙醇，濃縮干燥，得甘草提取物；②將白芍破碎，用70 %乙醇溶液提取，上大孔樹脂吸附柱純化，收集洗脫液，濃縮 干燥，得白芍提取物；③將上述甘草提取物、白芍提取物混合粉碎，即得本發(fā)明藥物提取物組合物1。方法2
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直接將0. 1 2重量份純度為10 98%甘草酸(或甘草次酸)和1. 2 12重量 份純度為10 98%芍藥甙一起混合粉碎，即得本發(fā)明提取物組合物2，其優(yōu)選配比為甘草 酸(或甘草次酸)0. 4重量份芍藥甙3. 2重量份(1:8)。凡是使用本領域技術人員所公知的方法將本發(fā)明所述的各種原料進行提取，然后 混合粉碎制得本發(fā)明所述的藥物提取物組合物，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。本發(fā)明藥物組合物或提取物組合物的應用范圍可將其制成用于治療抑郁癥的植物藥制劑、保健食品或營養(yǎng)劑。
附圖1為本發(fā)明方法1的工藝流程附圖2本為發(fā)明方法2的工藝流程
具體實施例方式以下結(jié)合附圖1、附圖2和具體實施例進一步說明本發(fā)明。實施例1參見附圖1，將15公斤的甘草(符合《中華人民共和國藥典》規(guī)定)破碎，加水提 取3次，每次分別為2、2、1. 5小時，加水量為12、10、10倍提取液，回收提取液，至藥材提取 液為1 1.5，加乙醇至75%，冷置，過濾，回收乙醇，至相對密度為1.20-1. 30 (70°C)，70°C 減壓濃縮干燥，得3公斤甘草提取物(含10%的甘草酸)；將150公斤的白芍(符合《中華 人民共和國藥典》規(guī)定)破碎，用70%的乙醇水溶液加熱回流3次，3次的溶劑重量分別為 白芍的5倍、4倍、3倍，濃縮回收乙醇，稀釋膏至4倍體積，過濾得澄清液上ME-1型大孔樹 脂吸附柱，以1床體積/小時的流速吸附，先用4倍床體積的水沖洗，然后用2倍床體積的 10%乙醇沖洗，再用20%乙醇沖洗，收集第2、3、4、5個床體積的洗脫液，濃縮干燥，得4. 5公 斤白芍提取物(含53%的芍藥苷)；將上述步驟所得的兩種提取物混合粉碎，即得本發(fā)明藥 物提取物組合物1。實施例2參見附圖2，直接將純度為90%的3克甘草酸(或甘草次酸)與純度為90%的24 克芍藥甙混合粉碎，即得本發(fā)明藥物提取物組合物2。實施例3將1. 5公斤甘草與14公斤白芍混合后超微粉碎，即得本發(fā)明藥物組合物3。實驗例1一、實驗名稱實施例1B(白芍提取物)、G(甘草提取物)組方對小鼠懸尾不動時間的影響。二、實驗目的通過設計的正交實驗篩選具有抗抑郁作用的B、G優(yōu)選組合。三、實驗材料 1、實驗動物ICR小鼠，雄性，體重18_22g，由首都醫(yī)科大學試驗動物部提供。合格 證編號 scxk (京)2005-0006。 2、實驗藥物受試藥物B、G，北京歐納爾生物工程技術有限公司，批號080622，日服用量600mg;陽性藥物鹽酸氟西汀膠囊(百優(yōu)解)，禮來蘇州制藥有限公司，批號 A333341-070608，國藥準字 了20030017，日服用量，20mg/ 日。 3、實驗器材JZ型300g張力換能器(高碑店市新航積淀設備有限公司)，Medlab 生物信號采集處理系統(tǒng)(南京易美)
行優(yōu)選。
四、實驗方法
1、B、G組合的正交設計
采用正交試驗的方法，以小鼠懸尾不動時間為指標，對B藥和G藥的劑量和組合進 因素水平表，正交試驗表如下 表1因素水平表 表 2
根據(jù)因素水平表和正交試驗表，給藥方案如下表所示 表3給藥方案表
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2、分組給藥正常小鼠150只，按體重隨機分成10個組，每組15只，即給藥1-9組、陽性藥 鹽酸氟西汀膠囊(Y組，3.5mg/kg/d)，空白對照組(給藥9組相當于空白組)。各組均按 0. 2ml/10g體重給藥，連續(xù)給藥2天。3、測試方法以上各組均連續(xù)給藥2天，分別于第2天給藥后Ih進行實驗。將小鼠尾端(在距 尾尖2cm處)用膠布固定在IOOg張力換能器的連線上，使其呈倒懸狀態(tài)，頭部離實驗臺約 15cm,每次同時測試2只動物，相互之間用紙板隔開。換能器連接到Medlab生物信號采集 處理系統(tǒng)，適應2min后，記錄4min之內(nèi)的結(jié)果，將不動狀態(tài)換算成時間(s)。五、實驗結(jié)果表4小鼠懸尾實驗結(jié)果 表5 L9(34)正交試驗表 根據(jù)實驗結(jié)果，極差分析最佳條件為B1G1，即B藥SOmg與G藥40mg的配伍組合。 在正交表中，1組為最佳條件，在各給藥組中，給藥1組懸尾不動時間最短，且與空白對照組 相比有顯著性差異(P <0.01)。B1G2 (B藥80mg+G藥20mg)的配伍組合、B2G1 (B藥40mg+G藥40mg)的配伍組合， 亦能縮短小鼠懸尾不動時間，與空白對照組相比有顯著性差異(P < 0.01)。B1G3 (單獨B藥80m)、B3G1 (單獨G藥40mg)亦能縮短小鼠懸尾不動時間，與空白 對照組相比有明顯差異(P < 0. 05)。六、結(jié)論1.灌胃給藥2天，BlGl (白芍提取物SOmg+甘草提取物40mg)的配伍組合、B1G2(白 芍提取物80mg+甘草提取物20mg)的配伍組合，或B2G1 (白芍提取物40mg+甘草提取物40m) 的配伍組合，皆可明顯縮短小鼠懸尾不動時間(P < 0. 01，與空白組比較)，具有顯著的抗抑 郁作用。2.灌胃給藥2天，雖然單獨的白芍提取物、甘草提取物亦有療效(P <0.05，與空 白組比較)，但是白芍提取物與甘草提取物各優(yōu)化配比組合(B1G1、B1G2、B2G1)的抗抑郁療 效更明顯，也更穩(wěn)定。實驗例2實施例2對小鼠強迫游泳實驗的影響1. 1實驗動物
ICR小鼠，雄性，體重22.0士2g，二級，北京首都醫(yī)科大學實驗動物科學部提供。1. 2實驗藥品實施例2 北京歐納爾生物工程技術有限公司提供帕羅西汀(賽樂特)中美天津史克制藥有限公司產(chǎn)品1. 3實驗儀器GM222型電子溫度計，秒表。1. 4劑量設計實施例2大劑量為90mg/kg/d，中劑量為45mg/kg/d、小劑量為22. 5mg/kg/d。1. 5實驗方法及結(jié)果1.5. 1分組給藥將小鼠隨機分組，每組10只①實施例2大劑量組(gOmg^g—SPO，給藥2d)；②實 施例2中劑量組(45mg*kg"1, P0，給藥2d)；③實施例2小劑劑量組(22. Smg^kg"1, P0，給藥 2d)④陽性藥帕羅西汀組Gmg^g-SPO,給藥2d)1. 5. 2實驗方法將小鼠分別放入水深10cm，直徑14cm的玻璃缸中，水溫25°C，觀察5min記錄小鼠 在水中的累計不動時間。1.5.3統(tǒng)計學處理實驗數(shù)據(jù)用X±切表示，實驗結(jié)果用SPSS11. 5統(tǒng)計軟件進行方差分析。1. 5. 4實驗結(jié)果實驗結(jié)果見表1實施例1對小鼠強迫游泳實驗結(jié)果 與模型組比較*P < 0. 05**P < 0. 01結(jié)論根據(jù)以上實驗，可以看出本發(fā)明實施例1大、中劑量組和帕羅西汀組均可明顯縮 短小鼠強迫游泳累計不動時間，中劑量組和大劑量組與生理鹽水組(模型組)相比有顯著 性差異，從而可以推斷本發(fā)明實施例2具有抗實驗性抑郁功能。實驗例3實施例1對慢性應激大鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響1實驗材料1. 1實驗藥物受試藥物實施例1，由北京歐納爾生物工程技術有限公司提供。陽性藥鹽酸氟 西汀(Fluoxetine，Prozac百憂解)為禮來蘇州制藥有限公司提供(批號國藥準字 J20030017)。1.2實驗動物
Wistar雄性大鼠，體重220g 240g，由北京維通利華公司提供。所有動物提前一 周購入，常規(guī)飼養(yǎng)。1.3儀器與試劑去甲腎上腺素NE (Serva公司)，多巴胺DA (Fluka公司)，腎上腺素(E)、5_羥色胺 (5-HT)、5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)、3，4-二羥基苯乙酸(DOPAC)、3，4-二羥 芐胺(DHBA)(均為Sigma公司)，二正丁胺(上?；瘜W試劑采購站進口分裝)，B-8離子對 試劑(天津化學試劑二廠)，甲醇(優(yōu)級純，北京化工廠)，其它試劑均為國產(chǎn)分析純。2實驗方法2.1分組和給藥正常大鼠72只，24h禁水不禁食后，給予蔗糖水，測定Ih內(nèi)的消耗量。根據(jù)蔗 糖水消耗量隨機分成6個組，每組12只，即正常對照組、模型組、陽性藥百憂解組(3. 5mg/ kg/d)、實施例 1 高(100mg/kg/d)、實施例 1 中(50mg/kg/d)、實施例 1 低(25mg/kg/d)劑量 組。造模同時給藥，每日一次，連續(xù)給藥21天。各組均按1.0ml/100g體重給藥，每周稱一 次體重。2. 2 造模對照組大鼠群養(yǎng)，用藥組及模型組大鼠每籠單只飼養(yǎng)。參照文獻方法，用藥組(給 藥同時)及模型組大鼠接受21d各種不同的隨機應激，包括4°C冰水游泳(5min)、45°C熱烘 (5min)、夾尾(Imin)、潮濕飼養(yǎng)(潮濕墊料)、晝夜顛倒(24h)，禁食(24h)，禁水(24h)等刺激。2. 3樣品制備及檢測方法動物斷頭處死，迅速在冰上剝離大腦，取前額皮質(zhì)，稱重后置組織冷凍管中用液氮 快速冷凍后，放入-70°C冰箱保存至測定。根據(jù)腦組織的重量，加入預冷的0. Imo 1/L過氯酸(內(nèi)含0. 3mMEDTA 二鈉和0. 5mM 亞硫酸鈉)，2μ g/mLDHBA，超聲勻漿，IlOOOrpm離心lOmin，上清夜用于神經(jīng)遞質(zhì)測定。采用高效液相色譜-電化學檢測器系統(tǒng)(HPLC-ECD)進行測定，色譜條件為色譜 柱為4X 150mm，Nova_pakC18，5 μ m(大連色譜中心填裝)；流動相為50mM檸檬酸-乙酸鈉 緩沖液PH3. 5(內(nèi)含1. OmM B-8離子對試劑，1. 8mM二正丁胺，0. 3mMEDTA二鈉，4%甲醇)，流 速1. OmL/min，玻璃碳工作電極，檢測池電壓為+0. 75V ；3，4-二羥芐胺DHBA為內(nèi)標物，樣品 中各主要組分用內(nèi)標法進行定量。2. 4統(tǒng)計學處理實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)士標準差(I 士 S)表示，采用SPSS13. 0統(tǒng)計軟件，運用單因素方 差分析(one-way AN0VA)進行各組間比較，顯著性水平以0. 05和0. 01為標準。3實驗結(jié)果結(jié)果表明，連續(xù)給藥21天后，與空白組比較模型組大鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)去甲 腎上腺素、5-羥色胺含量降低(ρ < 0. 05)，與模型組相比實施例1中、高劑量組和陽性藥鹽 酸氟西汀組大鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素、5-羥色胺含量升高(P <0.05)；見表 1、表 2 ο表1實施例1對腦內(nèi)去甲腎上腺素的影響(I 土 S) 與模型組比較，*P< 0. 05，**P < 0. 01。表2實施例1對腦內(nèi)五羥色胺的影響(I ±S) 與模型組比較，*P< 0. 05，**P < 0. 01。4 結(jié)論實驗研究結(jié)果顯示慢性應激大鼠腦內(nèi)5_HT、NE含量明顯降低，本發(fā)明實施例1中、 高劑量組能明顯提高腦內(nèi)5-HT、NE含量，提示本發(fā)明藥物組合物可能是通過提升腦內(nèi)單胺 類神經(jīng)遞質(zhì)的表達起到抗抑郁作用。
權利要求
一組用于治療抑郁癥的藥物組合物，其特征在于包括至少選自以下原料組方之一甘草5～100重量份白芍20～600重量份
2.根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于各組分的優(yōu)選重量配比 甘草10 60重量份白芍100 300重量份
3.根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于各組分的最佳重量配比 甘草15重量份白芍150重量份
4.一組用于治療抑郁癥的藥物提取物組合物，其特征在于該提取物組合物包括①將5 100重量份甘草破碎，水提醇沉，過濾，回收乙醇，濃縮干燥，得甘草提取物；②將20 600重量份白芍破碎，用70%乙醇水溶液提取，回收乙醇，過濾得澄清液，上 大孔樹脂吸附柱純化，收集洗脫液，濃縮干燥，得白芍提取物；③將上述甘草提取物、白芍提取物混合粉碎，即得本發(fā)明藥物提取物組合物。 上述藥物提取物組合物所用原料優(yōu)選為甘草15重量份，白芍150重量份。
5.一組用于治療抑郁癥的藥物提取物組合物，其特征在于包括直接用0. 1 2重量份 純度為10 98%的甘草酸(或甘草次酸)和1. 2 12重量份純度為10 98%的芍藥甙 組方，其優(yōu)選重量配比 本發(fā)明公開后，只要是在本發(fā)明權利要求1 4基礎上根據(jù)公知的中醫(yī)理論或是相關 現(xiàn)代藥理學理論對藥物組方所進行的一般性技術加減，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
6.權利要求1 5所述的藥物組合物和提取物組合物包括含有藥學上可接受的載體或 添加劑，可以制成任何藥劑學上所公知的劑型(片劑、膠囊劑或是粉劑等)。
7.權利要求1 5所述的藥物組合物和提取物組合物可用來制成用于治療抑郁癥的藥 物、保健食品和營養(yǎng)劑。
8.一種制備權利要求4所述的藥物提取物組合物的方法，其特征包括以下步驟①將甘草破碎，水提醇沉，過濾，回收乙醇，濃縮干燥，得甘草提取物；②將白芍破碎，用70%乙醇溶液提取，上大孔樹脂吸附柱純化，收集洗脫液，濃縮干燥， 得白芍提取物；③將上述甘草提取物、白芍提取物混合粉碎，即得本發(fā)明藥物提取物組合物。
9.一種制備權利要求5所述的藥物提取物組合物的方法，其特征包括以下步驟直接 將0. 1 2重量份純度為10 98%的甘草酸(或甘草次酸)和1. 2 12重量份純度為 10 98%的芍藥甙一起混合粉碎，即得本發(fā)明提取物，其優(yōu)選配比為甘草酸(或甘草次 酸)0. 4重量份芍藥甙3. 2重量份。凡是使用本領域技術人員所公知的方法將本發(fā)明所述的各種原料進行提取，然后混合 粉碎制得本發(fā)明所述的提取物，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
全文摘要
本發(fā)明公開一組包括以甘草、白芍及其提取物為原料制成的用于治療抑郁癥的藥物組合物。本發(fā)明同時還公開有關上述藥物組合物的制備方法。實驗證明1、灌胃給藥2天，本發(fā)明藥物組合物即可明顯減少受試小鼠懸尾不動時間(P＜0.01)和強迫游泳累計不動時間(P＜0.05)，從而可以推斷本發(fā)明藥物組合物具有抗實驗性抑郁的功效。2、甘草和白芍兩種提取物的優(yōu)化配比組合，在抗抑郁功效性能上要明顯優(yōu)于甘草和白芍的單一提取物。3、慢性應激大鼠腦內(nèi)5-HT、NE含量明顯降低，本發(fā)明藥物組合物能明顯提高慢性應激大鼠腦內(nèi)5-HT、NE的含量，此可能是其發(fā)揮抗抑郁作用的機制之一。
文檔編號A61P25/24GK101890082SQ20091014333
公開日2010年11月24日 申請日期2009年5月21日 優(yōu)先權日2009年5月21日
發(fā)明者張作光 申請人:張作光