專利名稱：：蘇木在制備抗ptca術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種中藥的新應(yīng)用，特別涉及蘇木在制備防治PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：冠心病是一種由冠狀動(dòng)脈器質(zhì)性狹窄或阻塞引起心肌缺血缺氧或心肌壞死的心臟病。由于其發(fā)病率和死亡率高，嚴(yán)重危害著人類健康。自1977年Gruenzig等首次報(bào)道用經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈成形術(shù)(PTCA)實(shí)行冠心病介入治療以來，PTCA及其相關(guān)技術(shù)逐漸成熟，已成為治療冠心病的主要方法之一，在臨床上得到廣泛應(yīng)用。但PTCA術(shù)后36個(gè)月的再狹窄發(fā)生率高達(dá)30%~50%，嚴(yán)重影響了PTCA的中、遠(yuǎn)期效果，成為當(dāng)前冠心病介入治療的主要障礙。PTCA術(shù)后再狹窄的機(jī)制主要是血管內(nèi)皮細(xì)胞才幾械性損傷所引發(fā)的一系列生理、病理反應(yīng)，包括早期血管彈性回縮，晚期血栓形成、內(nèi)膜增生以及血性回縮和負(fù)性重塑，但由于支架刺激引起的血栓形成和內(nèi)膜增生仍然可導(dǎo)致支架內(nèi)再狹窄。目前，PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄的防治主要采用藥物涂層支架治療和藥物治療。其中，藥物涂層支架有肝素涂層支架、雷帕霉素涂層支架和紫杉醇涂層支架等；藥物有抗氧化劑、抗凝劑、抗血小板藥物、抗增生藥物和調(diào)節(jié)血脂藥物等西藥，以及丹參、川彎、水蛭、黃芪、血府逐瘀湯、補(bǔ)陽還五湯等益氣活血化瘀中藥；但其效果均不理想。蘇木為豆利4直物蘇木C"as"/;z'm'as鄰，pawL.的干燥心才才。^未甘、咸，性平。歸心、肝、脾經(jīng)。功能行血祛瘀，消腫止痛，用于經(jīng)閉痛經(jīng)，產(chǎn)后瘀阻，胸腹刺痛，外傷腫痛。現(xiàn)代研究表明，蘇木含有巴西蘇木素、蘇木查爾酮、揮發(fā)油和鞣質(zhì)等成分，具有多種藥理作用水煎醇提液可增加冠脈流量，促進(jìn)微循環(huán)；水提液可抑制腺苷二磷酸誘發(fā)的血小板聚集；醇提液可擴(kuò)張腦血管，保護(hù)腦神經(jīng)原；此外，煎劑還有抗癌、鎮(zhèn)靜、催眠、抑菌等作用。但迄今為止，尚未見蘇木在制備抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄藥物中的應(yīng)用報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供蘇木在制備抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄藥物中的應(yīng)用，從而為PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄的預(yù)防和治療提供一種高效、安全、經(jīng)濟(jì)的解決辦法。為達(dá)到此目的，本發(fā)明提供了蘇木在制備抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄藥物中的應(yīng)用。進(jìn)一步，所述蘇木為蘇木水提物；進(jìn)一步，所述蘇木水提物用下述方法得到將蘇木粉碎成粉末，加水煎煮提取，提取液過濾，濃縮，即得蘇木水提物；進(jìn)一步，所述蘇木粉末加水煎煮提取共3次，每次加入相當(dāng)于蘇木重量510倍的水煎煮提取l小時(shí)。本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明采用國際公認(rèn)的PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄的經(jīng)典動(dòng)物模型(大鼠頸總動(dòng)脈球嚢損傷后再狹窄模型和兔髂動(dòng)脈球嚢損傷后再狹窄模型)對(duì)蘇木抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄作用進(jìn)^f亍了考察，結(jié)果顯示，蘇木具有顯著抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄作用，且作用強(qiáng)于文獻(xiàn)報(bào)道能明顯降低PTCA術(shù)后再狹窄率的雷帕霉素。因此，蘇木可以用于制備抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄藥物，發(fā)揮中藥多途徑、多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)的整體調(diào)節(jié)優(yōu)勢(shì)，為PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄的預(yù)防和治療提供一種高效、安全、經(jīng)濟(jì)的解決辦法。為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，其中圖1為大鼠頸動(dòng)脈血管切片的HE染色放大圖，其中A為正常對(duì)照，B和E為才莫型對(duì)照組，C和F為雷帕霉素組，D和G為蘇木組，B、C和D為40倍放大圖，E、F和G為400倍方欠大圖2為兔髂動(dòng)脈血管切片的HE染色放大圖，其中A為正常對(duì)照，B和D為模型對(duì)照組，C和E為蘇木組，B和C為40倍放大圖，D和E為400倍放大上述各圖中I為動(dòng)脈血管外膜，II為動(dòng)脈血管中膜，III為動(dòng)脈血管內(nèi)膜。具體實(shí)施例方式以下將參照附圖，對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。一、蘇木水提物的制備將蘇木(購自重慶桐君閣大藥房并經(jīng)生藥學(xué)鑒定)粉碎成細(xì)粉，取細(xì)粉100g,加水煎煮提取3次，每次l小時(shí)，依次加水1000g、700g和500g,合并提取液，過濾，小火濃縮，制成每mL相當(dāng)于生藥0.2g的溶液，溫度4X:保存。二、蘇木水提物抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄的實(shí)-驗(yàn)研究本實(shí)施例先采用大鼠頸總動(dòng)脈球嚢損傷后再狹窄模型，從血栓形成情況、血管丟失和破裂情況、血管管腔狹窄程度、病理形態(tài)學(xué)等多個(gè)方面考察蘇木水提物對(duì)PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄的防治作用；再采用兔髂動(dòng)脈球囊損傷后再狹窄模型，對(duì)蘇木水提物抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄作用進(jìn)行驗(yàn)證。1、蘇木水提物抗大鼠頸總動(dòng)"永^求嚢損傷后再狹窄的實(shí)驗(yàn)研究方法將體重400~500g的雄性Spmgue-Dawley大鼠(購自中南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)隨^L分成三組才莫型對(duì)照組(w=8)、雷帕霉素組(陽性對(duì)照，w=6)和蘇木組("=8);將各組大鼠右側(cè)頸外動(dòng)脈用球嚢(1.5x15mm)拉傷后結(jié)扎血管，建立大鼠頸總動(dòng)脈球嚢損傷后再狹窄模型，模型對(duì)照組術(shù)后正常飼養(yǎng)，雷帕霉素組術(shù)后6小時(shí)按5mg/kg/day的劑量每日腹腔注射雷帕霉素[將雷帕霉素(購自福建科瑞藥業(yè)有限公司，純度>99%)用質(zhì)量百分濃度為95%的乙醇溶液溶解，制成濃度為2L4mg/mL的溶液]，蘇木組術(shù)后6小時(shí)4姿lg/kg/day的劑量每日灌服蘇木水提物(每mL相當(dāng)于生藥0.2g);術(shù)后第16天處死各組大鼠，取球嚢拉傷后的病區(qū)血管中段0.5cm，用質(zhì)量百分濃度為10%的曱醛溶液固定，脫水，石蠟垂直定向包埋，常規(guī)切片，HE染色，置光學(xué)顯微鏡下觀察。結(jié)果(l)術(shù)后健康狀況各組大鼠術(shù)后6小時(shí)飲食、飲水正常，術(shù)后6~7天傷口愈合良好；實(shí)驗(yàn)期間無l只大鼠死亡，模型對(duì)照組發(fā)育良好，皮毛光澤，飲食較多，體重為455土8g;雷帕霉素組發(fā)育較差，飲食較少，體重下降為450土6g;蘇木組發(fā)育正常，皮毛光澤，體重為452士7g。(2)動(dòng)脈損傷程度動(dòng)物模型動(dòng)脈損傷程度的一致性是各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有可比性的保證。按表1所述評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)各組動(dòng)脈損傷程度進(jìn)行評(píng)分。結(jié)果見表2，模型對(duì)照組、雷帕霉素組和蘇木組的動(dòng)脈損傷程度無顯著性差異(P〉0.05)，表明各組建立的大鼠頸總動(dòng)脈球囊損傷后再狹窄模型具有一致性。表l動(dòng)脈損傷程度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)脈損傷情況1內(nèi)彈力膜完整，內(nèi)皮剝除，中膜受壓但沒破裂2內(nèi)彈力膜破裂，中膜受壓但沒破裂3內(nèi)彈力膜破裂，中膜可見撕裂，外彈力膜完整但受壓4外彈力膜破裂，典型大的跨腔中膜撕裂，動(dòng)脈結(jié)構(gòu)完全消失表2動(dòng)脈損傷程度評(píng)分結(jié)杲模型對(duì)照組雷帕霉素組蘇木組球嚢/動(dòng)脈比1.41±0.091.39±0.041.42±0.06動(dòng)脈損傷程度評(píng)分13.508.2511.94(3)血栓形成情況血栓形成是PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄發(fā)生的一個(gè)重要因素。按表3所述評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)各組血栓形成情況進(jìn)行評(píng)分。結(jié)果見表4,雷帕霉素組和蘇木組與模型對(duì)照組比較有極顯著性差異(PO.01),表明雷帕霉素和蘇木水提物對(duì)血栓形成均有較強(qiáng)的抑制作用；而蘇木組與雷帕霉素組比較無顯著性差異(P>0.05)，表明蘇木水提物與雷帕霉素作用相當(dāng)。表3血栓形成情況評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)記分血栓形成情況0無血栓形成1有少量附壁血栓形成2有大量血栓形成血栓淤積，堵塞血管表4血栓形成情況評(píng)分結(jié)果模型對(duì)照組雷帕霉素組蘇木組血栓形成情況評(píng)分17.5010.506.25(4)血管丟失和破裂情況血管丟失和破裂情況對(duì)評(píng)價(jià)抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄藥物的中、晚期治療效果具有重要意義。按表5所述評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)各組血管丟失和破裂情況進(jìn)行評(píng)分。結(jié)果見表6，雷帕霉素組和蘇木組與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(0.01<P<0.05),表明雷帕霉素和蘇木水提物對(duì)PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄均有較好的防治作用；而蘇木組與雷帕霉素組比較無顯著性差異(P〉0.05),表明蘇木水提物與雷帕霉素作用相當(dāng)。表5血管丟失和破裂情況評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)血管丟失和破裂情況71有血管丟失、破裂或無血管生理功能2有血管丟失、破裂或無血管生理功能，且血管有堵塞現(xiàn)象表6血管丟失和破裂情況評(píng)分結(jié)果模型對(duì)照組雷帕霉素組蘇木組血管丟失和破裂情況評(píng)分9.00(5)血管管腔狹窄程度動(dòng)脈血管的管腔面積可以4艮好的反映PTCA術(shù)后再狹窄的發(fā)生情況。測(cè)量各組血管管腔面積。結(jié)果見表7，蘇木組與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(0.01<P<0.05),表明蘇木W(wǎng)是物對(duì)PTCA術(shù)后再狹窄具有較好的防治作用；而雷帕霉素組與模型對(duì)照組比較無顯著性差異(P>0.05)，表明雷帕霉素對(duì)PTCA術(shù)后再狹窄的防治作用不明顯。表7血管管腔面積測(cè)量結(jié)果才莫型對(duì)照纟且雷帕霉素組蘇木組平均管腔面積1.25士1.248.49±4.7612.23±3.06最大管腔面積9.9724.1922.65最小管腔面積0.000.002.96(6)病理形態(tài)學(xué)觀察如圖l所示，模型對(duì)照組全部血管堵塞，內(nèi)彈力膜破裂或脫落，病灶區(qū)內(nèi)膜增厚且有大量炎癥細(xì)胞和血栓存在；雷帕霉素組有3個(gè)血管堵塞，另3個(gè)無明顯內(nèi)膜增厚，內(nèi)彈力膜情況與模型對(duì)照組基本相同；蘇木組大鼠無1個(gè)血管堵塞。2、蘇木水提物抗兔髂動(dòng)脈球嚢損傷后再狹窄的實(shí)-瞼研究方法將體重約2.5kg的雄性新西蘭大耳兔(購自中南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)隨機(jī)分成兩組模型對(duì)照組(w=6)和蘇木組(w=6);將兩組兔右側(cè)髂動(dòng)脈球嚢(2.5x15mm)拉傷后結(jié)扎遠(yuǎn)心端股動(dòng)脈，建立兔髂動(dòng)脈球嚢損傷后再狹窄模型，模型對(duì)照組術(shù)后正常飼養(yǎng)，蘇木組術(shù)后6小時(shí)按0.8g/kg/day的劑量每日灌服蘇木水提物(每mL相當(dāng)于生藥0.2g);術(shù)后第16天處死兩組兔，取球囊拉傷后的病區(qū)血管上、中、下三段各0.5cm(模型對(duì)照組共獲得18個(gè)標(biāo)本，蘇木組共獲得19個(gè)標(biāo)本)，用質(zhì)量百分濃度為10%的曱醛溶液固定，脫水，石蠟垂直定向包埋，常規(guī)切片，HE染色，置光學(xué)顯微鏡下觀察。結(jié)果(1)術(shù)后健康狀況兩組兔術(shù)后6小時(shí)飲食、飲水正常，術(shù)后6~7天傷口愈合良好；實(shí)驗(yàn)期間，模型對(duì)照組有2只兔死亡，其余兔發(fā)育良好，傷口有輕微化膿，皮毛光澤，體重為2.81士0.15kg;蘇木組有1只兔死亡，其余兔發(fā)育正常，皮毛光澤，體重為2.85±0.21kg。(2)動(dòng)脈損傷程度按表1所述評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)兩組動(dòng)脈損傷程度進(jìn)行評(píng)分。結(jié)果見表8，模型對(duì)照組和蘇木組的動(dòng)脈損傷程度無顯著性差異(P>0.05),表明兩組建立的兔髂動(dòng)脈球嚢損傷后再狹窄模型具有一致性。表8動(dòng)脈損傷程度評(píng)分結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>(3)血栓形成按表3所述評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)兩組血栓形成情況進(jìn)行評(píng)分。結(jié)果見表9，蘇木組與模型對(duì)照組比較無顯著性差異(P>0.05),因在兔髂動(dòng)脈球嚢損傷后再狹窄模型中血栓形成一般較少，故蘇木水提物對(duì)血栓形成的抑制作用在此處表現(xiàn)不明顯。表9血栓形成情況評(píng)分結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>(4)血管丟失和破裂情況按表5所述評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)兩組血管丟失和破裂情況進(jìn)行評(píng)分。結(jié)果見表10，蘇木組與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(0.01<P<用。表10血管丟失和破裂情況評(píng)分結(jié)果模型對(duì)照組蘇木組血管丟失和破裂情況評(píng)》23.7214.53(5)血管管腔狹窄程度測(cè)量?jī)山M血管管腔面積。結(jié)果見表ll，蘇木組與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(0.01<P<0.05),表明蘇木7械物對(duì)PTCA術(shù)后再狹窄具有4交好的防治作用。表ll血管管腔面積測(cè)量結(jié)果模型對(duì)照組蘇木組平均管腔面積最大管腔面積最小管腔面積6.20±2.308.500.0014.86±3.2423.530.00(6)病理形態(tài)學(xué)觀察如圖2所示，模型對(duì)照組下段血管標(biāo)本全部血管堵塞，內(nèi)彈力膜破裂或脫落，病灶區(qū)內(nèi)膜增厚且有大量炎癥細(xì)胞和血栓存在；蘇木組下段血管標(biāo)本僅1個(gè)堵塞。大鼠頸總動(dòng)脈球嚢損傷后再狹窄模型和兔髂動(dòng)脈球嚢損傷后再狹窄模型是國際公認(rèn)的PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄的經(jīng)典動(dòng)物;溪型。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，蘇木水提物對(duì)大鼠頸總動(dòng)脈球嚢損傷后再狹窄和兔髂動(dòng)脈球嚢損傷后再狹窄均有明顯的防治作用，且作用強(qiáng)于文獻(xiàn)報(bào)道能明顯降低PTCA術(shù)后再狹窄率的雷帕霉素。因此，蘇木水提物具有顯著的抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄作用?？梢蕴K木水提物或直接以蘇木細(xì)粉為活性物質(zhì)，單獨(dú)使用或與其它10具有藥理活性的化合物和/或提取物組成復(fù)方使用，按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)制劑方法制成各種劑型的抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄藥物，并通過適當(dāng)途徑給藥，達(dá)到高效、安全、經(jīng)濟(jì)地預(yù)防或治療PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄的目的。最后說明的是，以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管通過參照本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例已經(jīng)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以在形式上和細(xì)節(jié)上對(duì)其作出各種各樣的改變，而不偏離所附權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的精神和范圍。權(quán)利要求1、蘇木在制備抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄藥物中的應(yīng)用。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述蘇木為蘇木水提物。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述蘇木水提物用下述方法得到將蘇木粉碎成粉末，加水煎煮提取，提取液過濾，濃縮，即得蘇木水提物。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述蘇木粉末加水煎煮提取共3次，每次加入相當(dāng)于蘇木重量510倍的水煎煮提取1小時(shí)。全文摘要本發(fā)明公開了蘇木在制備抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄藥物中的應(yīng)用，實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，蘇木對(duì)大鼠頸總動(dòng)脈球囊損傷后再狹窄和兔髂動(dòng)脈球囊損傷后再狹窄均有明顯的防治作用，且作用強(qiáng)于雷帕霉素，可以制成抗PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄藥物，發(fā)揮中藥多途徑、多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)的整體調(diào)節(jié)優(yōu)勢(shì)，為PTCA術(shù)后再狹窄和支架內(nèi)再狹窄的預(yù)防和治療提供一種高效、安全、經(jīng)濟(jì)的解決辦法。文檔編號(hào)A61P9/10GK101537032SQ20091010365公開日2009年9月23日申請(qǐng)日期2009年4月20日優(yōu)先權(quán)日2009年4月20日發(fā)明者博凌,唐朝君,王貴學(xué),光龍申請(qǐng)人:重慶大學(xué)