專利名稱：聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物控釋制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定的控釋制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
癌癥是當(dāng)前危害人類健康的“三大殺手”之一，它的主要治療手段之一是藥物治 療。理想的藥物治療應(yīng)該是只對(duì)宿主的特定靶細(xì)胞發(fā)揮作用，而不對(duì)宿主的正常細(xì)胞產(chǎn)生 效應(yīng)，或者引起的毒副作用微不足道。但目前的抗癌藥物大多存在對(duì)腫瘤組織的選擇性較 差，療效低、毒性大的缺點(diǎn)。為增加抗癌效果減少毒副作用，各國(guó)都競(jìng)相研發(fā)最新型的納米 藥物載體材料和技術(shù)，包括最初期的癌癥診斷、準(zhǔn)確地指出它在身體內(nèi)的位置、向惡性細(xì)胞 準(zhǔn)確投遞抗癌藥物，以便從根本上改變目前癌癥診斷、治療和預(yù)防的狀況。近年來，隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，脂質(zhì)體制備工藝的逐步完善，脂質(zhì)體作用機(jī)制 的進(jìn)一步闡明，加之脂質(zhì)體適合體內(nèi)降解、無毒性和無免疫原性，特別是大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明 脂質(zhì)體作為藥物載體可以提高藥物治療指數(shù)、降低藥物毒性和減少藥物副作用，并減少藥 物劑量等優(yōu)點(diǎn)，脂質(zhì)體作為藥物載體的研究愈來愈受到重視。盡管脂質(zhì)體作為藥物載體具備了許多優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)，而且相關(guān)研究報(bào)道也已經(jīng)很 多，然而脂質(zhì)體的應(yīng)用并不象人們預(yù)期的那樣廣泛。傳統(tǒng)脂質(zhì)體所用膜材主要是磷脂及其 衍生物，由于磷脂容易水解和氧化，并且在表面活性劑作用下脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)容易被破壞，導(dǎo)致 傳統(tǒng)脂質(zhì)體的穩(wěn)定性較差，包封藥物容易泄露。這樣一來，對(duì)循環(huán)環(huán)境不穩(wěn)定的脂質(zhì)體會(huì)在 達(dá)到腫瘤位點(diǎn)之前過早泄露抗腫瘤劑，從而產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用。此外，磷脂的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)使 它難以與其他靶向分子連接，制備具有主動(dòng)靶向的磷脂脂質(zhì)體在技術(shù)上存在一定的困難， 通常需要借助于繁瑣復(fù)雜的有機(jī)合成手段，這給制備技術(shù)帶來了一定難度。由于穩(wěn)定性欠 佳以及和靶向分子連接困難等缺點(diǎn)，限制了脂質(zhì)體的臨床應(yīng)用，因此上述問題是脂質(zhì)體研 究過程中急需解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有脂質(zhì)體本身不穩(wěn)定、會(huì)產(chǎn)生聚集和氧化現(xiàn)象，對(duì)所 包裹的藥物泄漏，并且難以控制藥物釋放速率等問題，提供一種聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物 控釋制劑及其制備方法。聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物控釋制劑按聯(lián)乙炔單體、磷脂類物質(zhì)和抗癌藥物0 100 0 100 1 5的摩爾比制成。其中磷脂類物質(zhì)為磷脂酰膽堿、磷脂酰肌醇、磷脂 酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸、二月桂酰磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷 脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷 脂酸、二油酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰乙醇胺、卵磷脂、大豆磷脂、天然腦磷脂、合成腦磷 脂、心磷脂中的一種或幾種的混合物；聯(lián)乙炔單體的分子結(jié)構(gòu)式為R-C = C-C = C-R'式中，R為 CH3, CH3(CH2)4, CH3(CH2)9, C00H, COOH(CH2)4, COOH(CH2)9,PO4 (CH2) 2N (CH3) 3，PO4 (CH2) 2N (CH3) 3 (CH2) 4，或 PO4 (CH2) 2N (CH3) 3 (CH2) 9 ；R'為(CH2) 15CH3， (CH2)17CH3, (CH2)19CH3中的一種或幾種基團(tuán)的組合。制備聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物控釋制劑按以下步驟實(shí)現(xiàn)一、將聯(lián)乙炔單體、磷脂 類物質(zhì)和抗癌藥物按0 100 0 100 1 5的摩爾比混合后溶于有機(jī)溶劑中，得混 合溶液A ；二、將混合溶液A置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在溫度為20 70°C條件下旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)至 干燥，得脂膜；三、將脂膜置于PH為2 12的緩沖溶液中，在溫度為20 70°C、超聲功率 為40 400W的條件下超聲震蕩15 30min，至脂膜完全溶解，得混合溶液B ；四、將混合溶 液B在10 20W的紫外燈下光照10 60min，即得聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物緩釋制劑。其 中步驟一中磷脂類物質(zhì)為磷脂酰膽堿、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸、二 月桂酰磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿、 二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酸、二油酰磷脂酰膽堿、二油酰 磷脂酰乙醇胺、卵磷脂、大豆磷脂、天然腦磷脂、合成腦磷脂、心磷脂中的一種或幾種的混合 物；步驟一中聯(lián)乙炔單體的分子結(jié)構(gòu)式為R-C = C-C = C-R'式中，R為 CH3, CH3(CH2)4, CH3(CH2)9, C00H, COOH(CH2)4, COOH(CH2)9, PO4 (CH2) 2N (CH3) 3，PO4 (CH2) 2N (CH3) 3 (CH2) 4，或 PO4 (CH2) 2N (CH3) 3 (CH2) 9 ；R'為(CH2) 15CH3， (CH2)17CH3, (CH2)19CH3中的一種或幾種基團(tuán)的組合。本發(fā)明得到的聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物控釋制劑，因?yàn)槁?lián)乙炔單體含有共軛三 鍵，能夠在紫外光下聚合，生成聚聯(lián)乙炔，從而提高了類脂體的穩(wěn)定性。與傳統(tǒng)脂質(zhì)體相比， 不易聚集及發(fā)生水解和氧化現(xiàn)象，并且對(duì)表面活性劑的抵抗性增強(qiáng)。本發(fā)明得到的聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物控釋制劑，通過調(diào)節(jié)紫外光照時(shí)間，或者 通過摻入磷脂類物質(zhì)，改變類脂體的組成比，可以控制聯(lián)乙炔的聚合度，進(jìn)而控制藥物的體 內(nèi)外釋放速率。本發(fā)明得到的聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物控釋制劑，因?yàn)榫勐?lián)乙炔具有溫度和PH 敏感性，當(dāng)兩者變化時(shí)聚聯(lián)乙炔共軛骨架發(fā)生扭曲，可以加速藥物的釋放，因此在用作刺 激-響應(yīng)的藥物控釋載體方面具有應(yīng)用前景。本發(fā)明制備方法工藝簡(jiǎn)單，反應(yīng)條件溫和，易操作，重現(xiàn)性好，無污染，為抗癌藥物 緩釋制劑的研制及應(yīng)用研究提供物質(zhì)基礎(chǔ)與技術(shù)保障，具有良好的應(yīng)用前景。


圖1為利用動(dòng)態(tài)光散射測(cè)量聯(lián)乙炔類脂體粒徑在表面活性劑存在下的變化結(jié)果。 (·)表示聚合聯(lián)乙炔類脂體粒徑隨表面活性劑的加入變化圖；(■)表示未聚合聯(lián)乙炔類 脂體粒徑隨表面活性劑的加入變化圖。圖2為表面活性劑對(duì)聯(lián)乙炔類脂體的形貌影響示意 圖。a圖表示原始的聯(lián)乙炔類脂體透射電鏡照片；b圖表示未聚合的聯(lián)乙炔類脂體加入表 面活性劑后的透射電鏡照片；c圖表示聚合的聯(lián)乙炔類脂體加入表面活性劑后的透射電鏡 照片。圖3為不同體系中抗癌藥物的體外釋放曲線。(■)表示游離藥物體外釋放曲線； (·)表示磷脂類物質(zhì)脂質(zhì)體體外釋放曲線；(▲)表示摻雜75%磷脂類物質(zhì)的聯(lián)乙炔類脂 體體外釋放曲線；(▼)表示摻雜50%磷脂類物質(zhì)的聯(lián)乙炔類脂體體外釋放曲線；( )表示 摻雜25 %磷脂類物質(zhì)的聯(lián)乙炔類脂體體外釋放曲線。圖4表示摻雜50 %磷脂類物質(zhì)時(shí)，不同光照時(shí)間對(duì)體外釋放的影響，(■)表示光照時(shí)間為20分鐘；(▲)表示光照時(shí)間為30 分鐘；(·)光照時(shí)間為40分鐘。
具體實(shí)施例方式具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式是這樣實(shí)現(xiàn)的a、將聯(lián)乙炔單體、磷脂類物質(zhì)和抗 癌藥物按0 100 0 100 1 5的摩爾比混合后溶于有機(jī)溶劑中，得混合溶液A ;b、 將混合溶液A置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在溫度為20 70°C條件下旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)至干燥，得脂膜； c、將脂膜置于pH為2 12的緩沖溶液中，在溫度為20 70°C、超聲功率為40 400W的 條件下超聲震蕩15 30min，至脂膜完全溶解，得混合溶液B ;d、將混合溶液B在10 20W 的紫外燈下光照10 60min，即得聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物緩釋制劑。本實(shí)施方式中，磷脂類物質(zhì)為磷脂酰膽堿、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘 油、磷脂酸、二月桂酰磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰 磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酸、二油酰磷脂酰 膽堿、二油酰磷脂酰乙醇胺、卵磷脂、大豆磷脂、天然腦磷脂、合成腦磷脂、心磷脂中的一種 或幾種的混合物。本實(shí)施方式中，聯(lián)乙炔單體的分子結(jié)構(gòu)式為R-C = C-C = C-R'式中，R為 CH3, CH3(CH2)4, CH3(CH2)9, C00H, COOH(CH2)4, COOH(CH2)9, PO4 (CH2) 2N (CH3) PO4 (CH2) 2N (CH3) 3 (CH2) 4 ^ PO4(CH2)2N(CH3)3(CH2)9 ；R'為(CH2)15CH3, (CH2)17CH3, (CH2)19CH3中的一種或幾種基團(tuán)的組合。本實(shí)施方式中，有機(jī)溶劑為乙醇、甲醇、乙醚、丙酮、異丙醇、氯仿中的一種或幾種 的混合物。本實(shí)施方式中，緩沖溶液為20mM Hepes緩沖液、磷酸鹽緩沖液、含0. 15MNaCl、pH =7. 5的Tris-HCl緩沖液或含甘露醇的水溶液。本實(shí)施方式得到的聚聯(lián)乙炔類脂體穩(wěn)定性能大大增加，從圖1可以看出，未聚合 聯(lián)乙炔類脂體在加入表面活性劑后開始粒徑增大，隨后急劇降低到IOnm左右，說明開始時(shí) 表面活性劑插入類脂體的磷脂類物質(zhì)區(qū)域，導(dǎo)致類脂體粒徑增大。但當(dāng)表面活性劑繼續(xù)增 加，未聚合類脂體就會(huì)發(fā)生破裂，形成膠束。相反，表面活性劑加入到聚合聯(lián)乙炔類脂體中， 直到[Triton X_100]/[lipid]為48時(shí)，類脂體仍保持球型。說明聚合類脂體與未聚合類 脂體相比穩(wěn)定性有了明顯提高。這一點(diǎn)也可以從透射電鏡得到證明，從圖2可以看出，剛制 備出的聯(lián)乙炔類脂體粒徑在200 400nm(圖加)，加入表面活性劑后，未聚合類脂體變成 IOnm左右的聚集體(圖2b)，而聚合類脂體仍為球型，尺寸增大到600 lOOOnm。本實(shí)施方式得到的聚聯(lián)乙炔類脂體具有很好的控釋性能，從圖3可以看出，游離 藥物在8小時(shí)內(nèi)基本釋放完全，傳統(tǒng)脂質(zhì)體在M小時(shí)內(nèi)也基本釋放完全。而摻雜了聯(lián)乙炔 的聚合類脂體釋放明顯減緩，摻雜25%聯(lián)乙炔類脂體M小時(shí)內(nèi)釋放了大約72%，摻雜50% 聯(lián)乙炔類脂體M小時(shí)內(nèi)釋放了大約44%，摻雜75%聯(lián)乙炔類脂體M小時(shí)內(nèi)釋放了大約 20%。說明聯(lián)乙炔比例越大，藥物釋放速率越慢。圖4是光照時(shí)間對(duì)釋放速率的影響，光照 20分鐘后，藥物在M小時(shí)內(nèi)釋放了大約90%，光照30分鐘和40分鐘，24小時(shí)內(nèi)分別釋放 了 44%和37. 6%。說明光照時(shí)間越長(zhǎng)，聯(lián)乙炔類脂體的聚合度越大，藥物的釋放速率就越6慢。因此我們可以通過控制類脂體的組成比和光照時(shí)間調(diào)控藥物的釋放速率。
具體實(shí)施方式
二 本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是聚聯(lián)乙炔類脂體的抗癌 藥物控釋制劑按0 100 1 5的摩爾比由聯(lián)乙炔、和抗癌藥物制成。
具體實(shí)施方式
三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是抗癌藥物控釋制劑按 0 100 1 5的摩爾比由磷脂類物質(zhì)和抗癌藥物制成。
權(quán)利要求
1.聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物控釋制劑，其特征在于聚聯(lián)乙炔類脂體的抗癌藥物控釋制 劑按0 100 0 100 1 5的摩爾比由聯(lián)乙炔、磷脂類物質(zhì)和抗癌藥物制成。其中磷 脂類物質(zhì)為磷脂酰膽堿、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸、二月桂酰磷脂酰 膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂 酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酸、二油酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰乙醇胺、 卵磷脂、大豆磷脂、天然腦磷脂、合成腦磷脂、心磷脂中的一種或幾種的混合物；聯(lián)乙炔單體 的分子結(jié)構(gòu)式為R-C = C-C = C-R'式中，R 為 CH3, CH3 (CH2)4, CH3 (CH2)9, C00H, COOH(CH2)4, COOH(CH2)9, PO4(CH2)2N(CH3)3, PO4 (CH2)2N (CH3) 3 (CH2)4,或 PO4 (CH2)2N (CH3) 3 (CH2) 9 ；R，為(CH2)15CH3, (CH2)17CH3, (CH2)19CH3 中 的一種或幾種基團(tuán)的組合。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物緩釋制劑，其特征在于聚聯(lián)乙炔類 脂體的抗癌藥物緩釋制劑按0 100 0 100 1 5的摩爾比由聯(lián)乙炔單體、磷脂類 物質(zhì)和抗癌藥物制成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物緩釋制劑，其特征在于聚聯(lián)乙炔類 脂體的抗癌藥物緩釋制劑按O 100 1 5的摩爾比由聯(lián)乙炔單體和抗癌藥物制成。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物緩釋制劑，其特征在于聚聯(lián)乙炔類 脂體的抗癌藥物緩釋制劑按0 100 1 5的摩爾比由磷脂類物質(zhì)和抗癌藥物制成。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3或4所述的聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物緩釋制劑，其特征在于抗 癌藥物為5-氟脲嘧啶、氟脫氧尿苷、尿嘧啶替加氟、替吉奧S-1、卡培他賓、脫氧胞苷、阿糖 胞苷、5-氮雜胞嘧啶、吉西他汀、5-氮雜胞嘧啶-阿拉伯糖苷、6-琉基嘌呤、硫鳥嘌呤、硫唑 嘌呤、別嘌呤醇、克拉屈濱、氟達(dá)拉賓、噴司他丁、2-氯腺營(yíng)、順鉬、卡鉬、奧沙利鉬、依絡(luò)鉬、 鉬-DACH、奧馬鉬、CI-973、JM-216、阿霉素、道諾霉素、表阿霉素、伊達(dá)比星、米托蒽醌、表鬼 臼毒素-依托泊苷、替尼泊苷、依立替康、托泊特坎、勒托替康、Silatecan.9-氨基喜樹堿、 10，11-亞甲二氧喜樹堿、9-硝基喜樹堿、TAS 103、7-甲基-呱嗪-亞甲基)-10，11-亞 乙二氧基-20 (S)-喜樹堿、7- (2-N-異丙基氨基)乙基-20 (S)-喜樹堿、己烯雌酚、它莫西 芬、托瑞米芬、Tohnudex, Thyrnitaq、氟他胺、比卡魯胺、非那雄胺、雌二醇、曲西立濱、多洛 昔芬、醋酸甲羥孕酮、甲地孕酮醋酸酯、氨魯米特、睪內(nèi)酯、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng) 春酰胺、帕利它西、紫杉醇或多烯紫杉醇。
6.制備如權(quán)利要求1所述的聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物緩釋制劑按以下步驟實(shí)現(xiàn)一、 將聯(lián)乙炔單體、磷脂類物質(zhì)和抗癌藥物按0 100 0 100 1 5的摩爾比混合后溶 于有機(jī)溶劑中，得混合溶液A ；二、將混合溶液A置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在溫度為20 70°C條 件下旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)至干燥，得脂膜；三、將脂膜置于PH為2 12的緩沖溶液中，在溫度為 20 70°C、超聲功率為40 400W的條件下超聲震蕩15 30min，至脂膜完全溶解，得混合 溶液B ；四、將混合溶液B在10 20W的紫外燈下光照10 60min，即得聚聯(lián)乙炔類脂體抗 癌藥物緩釋制劑。其中步驟一中磷脂類物質(zhì)為磷脂酰膽堿、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷 脂酰甘油、磷脂酸、二月桂酰磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二 硬脂酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酸、二油酰 磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰乙醇胺、卵磷脂、大豆磷脂、天然腦磷脂、合成腦磷脂、心磷脂中的一種或幾種的混合物；步驟一中聯(lián)乙炔單體的分子結(jié)構(gòu)式為 R-C = C-C = C-R'式中，R 為 CH3, CH3 (CH2)4, CH3 (CH2)9, C00H, COOH(CH2)4, COOH(CH2)9, PO4(CH2)2N(CH3)3, PO4 (CH2)2N (CH3) 3 (CH2)4,或 PO4 (CH2)2N (CH3) 3 (CH2) 9 ；R，為(CH2)15CH3, (CH2)17CH3, (CH2)19CH3 中 的一種或幾種基團(tuán)的組合。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物緩釋制劑的方法，其特征在于 步驟一中有機(jī)溶劑為乙醇、甲醇、乙醚、丙酮、異丙醇、氯仿中的一種或幾種的混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備聚聯(lián)乙炔類脂體抗癌藥物緩釋制劑的方法，其特征在 于步驟三中緩沖溶液為20mM Hepes緩沖液、磷酸鹽緩沖液、含0. 15MNaCl、pH = 7. 5的 Tris-HCl緩沖液或含甘露醇的水溶液。
全文摘要
聚聯(lián)乙炔類脂體的抗癌藥物控釋制劑及其制備方法，它涉及一種控釋制劑及其制備方法。本發(fā)明解決了現(xiàn)有脂質(zhì)體本身不穩(wěn)定、會(huì)產(chǎn)生聚集和氧化現(xiàn)象，對(duì)所包裹的藥物泄漏以及難以控制藥物釋放速率等問題。產(chǎn)品由聯(lián)乙炔、磷脂類物質(zhì)、抗癌藥物制成。方法一、制混合溶液A；二、制脂膜；三、脂膜水化，超聲，得混合溶液B；四、將混合溶液B在紫外光下進(jìn)行光交聯(lián)，即得。本發(fā)明得到的產(chǎn)品具有低毒性、高的穩(wěn)定性以及可控釋放藥物的特性。本發(fā)明得到的產(chǎn)品對(duì)癌癥藥物的包封率及載藥率比較高。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，反應(yīng)條件溫和，重現(xiàn)性好，無污染。
文檔編號(hào)A61K45/08GK102038632SQ200910073060
公開日2011年5月4日 申請(qǐng)日期2009年10月16日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月16日
發(fā)明者劉紹琴, 姜暢, 戴志飛, 李文元, 郭彩欣 申請(qǐng)人:哈爾濱工業(yè)大學(xué)