專利名稱：一種草烏甲素脂質(zhì)體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，特別涉及一種草烏甲素脂質(zhì)體及其制備方法。
背景技術(shù)：
草烏甲素(Bulleyaconitine A)又稱滇西嘟啦堿甲，為毛茛科烏頭屬植物龍頭烏 頭(Aconitum Longtounense T.L.Ming)中分離提取的二萜雙酯型生物堿，具有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛 及明顯的抗炎作用。其相對(duì)鎮(zhèn)痛作用為嗎啡的15倍，阿司匹林的1208倍，且連續(xù)用藥不產(chǎn) 生鎮(zhèn)痛作用耐受，是一種不同于嗎啡類的非成癮性鎮(zhèn)痛劑。由于草烏甲素的鎮(zhèn)痛時(shí)間持續(xù) 時(shí)間長(zhǎng)，因此它更適用于各種慢性疼痛疾病的治療。動(dòng)物試驗(yàn)和臨床應(yīng)用均表明，草烏甲素 對(duì)風(fēng)濕性及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肩周炎、良性關(guān)節(jié)痛及多種病因引起的疼痛等均有良好療效。 除此之外，草烏甲素還具有長(zhǎng)效的局部麻醉作用。脂質(zhì)體(liposome)最早由Bangham等人于1965年發(fā)現(xiàn)，后來(lái)作為一種生物膜的 模型廣泛應(yīng)用于生物學(xué)領(lǐng)域。自70年代初，Gegoridis首先用脂質(zhì)體作為乳糖苷酶載體治 療糖原累積疾病后，人們開始將其作為一種新型的藥物載體而進(jìn)行了廣泛研究。由于其結(jié) 構(gòu)類似生物膜，可包封水溶性和脂溶性藥物，具有減少藥物劑量，降低毒性；減輕變態(tài)反應(yīng) 和免疫反應(yīng)；延緩釋放，降低體內(nèi)消除速度；改變藥物在體內(nèi)的分布，并能靶向性釋藥等優(yōu) 點(diǎn)而得到廣泛注意和深入研究。目前上市的草烏甲素劑型主要有片劑、膠丸劑、口服液和注射劑，草烏甲素的首過(guò) 效應(yīng)較大，且對(duì)粘膜和肌肉等有較強(qiáng)的刺激性，患者順應(yīng)性差。因此將脂質(zhì)體包裹草烏甲 素，可以降低其毒副作用，提高患者順應(yīng)性。目前公開的草烏甲素脂質(zhì)體是柔性脂質(zhì)體，柔性脂質(zhì)體所用的輔料較多，為經(jīng)皮 滲透性脂質(zhì)體，非注射用劑。公開的草烏甲素多囊脂質(zhì)體的粒徑都較大，在微米級(jí)，作為皮 下注射用劑，并且其制備工藝比較復(fù)雜，沒(méi)有大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)的可行性。上述草烏甲素脂質(zhì) 體制劑都不適于肌肉注射。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題就是針對(duì)現(xiàn)有的草烏甲素脂質(zhì)體存在難以作為肌 肉注射劑的缺陷，提供一種新的草烏甲素脂質(zhì)體及其制備方法，該制備方法操作簡(jiǎn)便，可控 性和重現(xiàn)性好；所得的草烏甲素脂質(zhì)體包封率高、粒徑小、生物利用度高、適合作為肌肉注 射劑。本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案之一是，一種草烏甲素脂質(zhì)體，其包 括以下質(zhì)量份的各組分
1份草烏甲素磷脂膽固醇維生素E
0. 01 1份 0. 05 0. 001
1份
0. 03份。
本發(fā)明中，磷脂是構(gòu)成脂質(zhì)體雙分子膜的主要成份。所述的磷脂選自天然磷脂和 合成磷脂中的一種或多種，其中所述的天然磷脂較佳的選自大豆磷脂和卵磷脂，所述的合 成磷脂較佳的選自中性、負(fù)電性磷脂和聚乙二醇修飾的磷脂，更佳的選自二豆蔻磷脂酰膽 堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰甘油酯、磷脂酰乙醇胺和 磷脂酰絲氨酸中的一種或多種。膽固醇是脂質(zhì)體雙分子膜穩(wěn)定劑，用量對(duì)脂質(zhì)體的穩(wěn)定性 和釋放行為有顯著的影響。維生素E是磷脂的抗氧劑。本發(fā)明的草烏甲素脂質(zhì)體中較佳的還包括pH3.0 5.0的緩沖液。所述的 PH3. 0 5. 0緩沖液較佳的選自常規(guī)的磷酸鹽緩沖液、檸檬酸緩沖液或醋酸鹽緩沖系統(tǒng)。 本發(fā)明的草烏甲素脂質(zhì)體是普通的脂質(zhì)體，其平均粒徑為50 200nm，較佳的是 lOOnm。本發(fā)明的草烏甲素脂質(zhì)體特別適合用于肌肉注射。本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案之二是，所述的草烏甲素脂質(zhì)體的制 備方法，包括以下步驟1)采用注入法或薄膜法制備包含pH3. O 5. O緩沖液的初級(jí)空白脂質(zhì)體分散液， 經(jīng)過(guò)高壓乳勻或微射流得到次級(jí)空白脂質(zhì)體混懸液，用堿液調(diào)節(jié)PH至6 9，得空白脂質(zhì)體 成品；2)稱取草烏甲素溶解在弱酸溶液中，得草烏甲素溶液；3)將步驟1)的空白脂質(zhì)體成品和步驟2)的草烏甲素溶液混合，置于20 70°C 保溫5min 60min，即得草烏甲素脂質(zhì)體。本發(fā)明中，步驟1)為采用注入法或薄膜法制備包含pH3. O 5. O緩沖液的初級(jí) 空白脂質(zhì)體分散液，經(jīng)過(guò)高壓乳勻或微射流得到次級(jí)空白脂質(zhì)體混懸液，用堿液調(diào)節(jié)PH至 6 9，得空白脂質(zhì)體成品。其中，所述的注入法是常規(guī)的脂質(zhì)體制備步驟之一，較佳的包 括將磷脂、膽固醇和維生素E，用乙醚或乙醇溶解得到有機(jī)相，將有機(jī)相滴到溫度為20 70°C、磁力攪拌的0. 05 0. 30M的pH3. O 5. O緩沖液中，揮去殘留的有機(jī)溶劑，即得到初 級(jí)空白脂質(zhì)體。所述的薄膜法是常規(guī)的脂質(zhì)體制備步驟之一，較佳的包括將磷脂、膽固醇、 維生素E溶于氯仿、乙酸乙酯、乙醚或者乙醇中，在溫度為20 70°C條件下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成 均勻的薄膜，加入0. 05 0. 30M的pH3. O 5. O緩沖液，振搖至膜完全水化，即得到初級(jí)空 白脂質(zhì)體。所述的高壓乳勻或微射流的作用是控制脂質(zhì)體的粒徑，使脂質(zhì)體的粒徑更細(xì)小 更均勻。所述的PH3. O 5. O緩沖液較佳的選自常規(guī)的磷酸鹽緩沖液、檸檬酸緩沖液或醋 酸鹽緩沖系統(tǒng)。注入法或薄膜法處理后，所述的PH3. O 5. O緩沖液被包裹在初級(jí)空白脂 質(zhì)體內(nèi)，使脂質(zhì)體內(nèi)的環(huán)境是低PH值的。所述的調(diào)節(jié)pH的堿液較佳的選自氫氧化鈉、磷酸 氫二鈉或碳酸鈉的水溶液。調(diào)節(jié)PH后，外相pH升高，內(nèi)相pH不變，這樣就形成了脂質(zhì)體內(nèi) 外相的PH梯度，但是內(nèi)外的滲透壓相同，可以用于下一步的主動(dòng)載藥。本發(fā)明中，所述的次級(jí)空白脂質(zhì)體混懸液，除了采用上述的用堿液調(diào)節(jié)pH至6 9 得空白脂質(zhì)體成品的方法外，較佳的，還采用另一種方法處理，即所述的次級(jí)空白脂質(zhì)體混 懸液，通過(guò)葡聚糖凝膠柱或通過(guò)透析法，用pH7. O 8. OHEPES (4-羥乙基哌嗪乙磺酸)緩沖 液洗脫或作為透析外液透析，置換掉空白脂質(zhì)體的外部介質(zhì)，得空白脂質(zhì)體成品。本發(fā)明中，步驟2)為稱取草烏甲素溶解在弱酸溶液中，得草烏甲素溶液。其中， 所述的弱酸溶液選自pH3 7的水溶液，特別是磷酸鹽緩沖液、檸檬酸緩沖液或醋酸鹽緩沖 系統(tǒng)。草烏甲素在水中的溶解度很低，直接溶于水中所制備的脂質(zhì)體劑量達(dá)不到要求。但是草烏甲素易溶于弱酸溶液中，所以使用弱酸溶液溶解。草烏甲素在弱酸溶液中的濃度較 佳的為 20mg/ml 800mg/ml。本發(fā)明中，步驟3)為將步驟1)的空白脂質(zhì)體成品和步驟2)的草烏甲素溶液混 合，置于20 70°C保溫5min 60min，即得草烏甲素脂質(zhì)體。草烏甲素在脂質(zhì)體雙分子層 內(nèi)外的PH梯度的催動(dòng)下，逐漸滲透入脂質(zhì)體中，最多可使草烏甲素全部進(jìn)入脂質(zhì)體中，使 草烏甲素利用率高。該主動(dòng)載藥的過(guò)程所得到的脂質(zhì)體中草烏甲素的濃度，比被動(dòng)載藥更高ο本發(fā)明所用的原料或試劑除特別說(shuō)明之外，均市售可得。相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果如下本發(fā)明采用獨(dú)特的兩步法制備草烏甲 素脂質(zhì)體，制備步驟少，操作簡(jiǎn)便，可控性和重現(xiàn)性好。本發(fā)明制備草烏甲素脂質(zhì)體藥物包 封率可達(dá)85%以上。所采用的磷脂選擇面廣，可使用天然磷脂或大豆磷脂，也可使用合成 的中性磷脂或負(fù)電性磷脂。本發(fā)明的草烏甲素脂質(zhì)體粒徑低于200nm，且初步的毒性試驗(yàn) 表明，其能降低草烏甲素的毒性和刺激性，提高患者的順應(yīng)性，因此特別適合作為肌肉注射 劑。
具體實(shí)施例方式下面用實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明并不受其限制。實(shí)施例中未注明具 體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。其中草烏甲素脂質(zhì) 體的粒徑采用Mcomp 380納米粒度分析儀測(cè)定。包封率測(cè)定方法為取制備的脂質(zhì)體溶液0.5mL于超濾管中，再把超濾管放入配 套的離心管中，1200Xg離心3min，濾過(guò)的離心液用來(lái)測(cè)定游離藥物的濃度，另取脂質(zhì)體溶 液適量，用Triton-XlOO破膜溶解，測(cè)定總的藥物濃度。用下列公式計(jì)算脂質(zhì)體的包封率包封率(％) = (1-游離的草烏甲素量/總的草烏甲素量)X 100%。實(shí)施例1步驟1 將二硬脂酰磷脂酰膽堿450mg、二棕櫚酰磷脂酰甘油酯150mg、膽固醇 150mg、維生素E 20mg溶于50ml乙醚中，在溫度為25°C條件下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的薄膜， 加入0. 2M的pH3. 8醋酸鹽緩沖液，振搖至膜完全水化，得到初級(jí)空白脂質(zhì)體。將初級(jí)空白 脂質(zhì)體通過(guò)高壓勻質(zhì)(600bar勻質(zhì)5次)得到小粒徑的脂質(zhì)體，即次級(jí)空白脂質(zhì)體，用0. IM 氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至7. 0，得到空白脂質(zhì)體成品。步驟2 稱取40mg草烏甲素溶解在2ml的0. 1M，pH3. 5醋酸緩沖液中。步驟3 將步驟1的空白脂質(zhì)體和步驟2的草烏甲素溶液混合，置于65°C保溫 30min,即得。Nicomp 380納米粒度分析儀測(cè)定粒徑，測(cè)得草烏甲素脂質(zhì)體平均粒徑為llOnm， 包封率為88. 6%。實(shí)施例2步驟1 將二棕櫚酰磷脂酰膽堿350mg、二硬酯酰磷脂酰膽堿150mg、膽固醇150mg、 維生素E 15mg溶于50ml乙酸乙酯，在溫度為30°C條件下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的薄膜，加入 0. 3M的pH4. O檸檬酸緩沖液，振搖至膜完全水化，得到初級(jí)空白脂質(zhì)體。將初級(jí)空白脂質(zhì)體 通過(guò)高壓勻質(zhì)(600bar勻質(zhì)5次)得到小粒徑的脂質(zhì)體，即次級(jí)空白脂質(zhì)體，用0. IM碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)PH至7. 2，得到空白脂質(zhì)體成品。步驟2 稱取40mg草烏甲素溶解在2ml的0. 1M，pH4. 0檸檬酸緩沖液中。步驟3:同實(shí)施例1。測(cè)得草烏甲素脂質(zhì)體平均粒徑為113nm，包封率為85. 5%。實(shí)施例3步驟1 將二棕櫚酰磷脂酰膽堿550mg、磷脂酰乙醇胺60mg、膽固醇IOOmg和維生 素E 20mg，用50ml乙醇溶解，得有機(jī)相。將有機(jī)相逐漸滴加到溫度為45°C、并帶有磁力攪 拌(攪拌速度IOOrpm)的0. 3M的pH4. 5磷酸鈉鹽緩沖液中，揮去殘留的有機(jī)溶劑，得到初 級(jí)空白脂質(zhì)體。將初級(jí)空白脂質(zhì)體高壓勻質(zhì)(600bar勻質(zhì)5次)得到小粒徑的脂質(zhì)體，即 次級(jí)空白脂質(zhì)體，用0. IM氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至8.0，得到空白脂質(zhì)體成品。步驟2 稱取40mg草烏甲素溶解在2ml的0. 3M，pH7. O磷酸鈉鹽緩沖液中。步驟3:同實(shí)施例1。測(cè)得草烏甲素脂質(zhì)體粒徑約為140nm，包封率為91.3%。實(shí)施例4步驟1 將二豆蔻磷脂酰膽堿560mg、磷脂酰絲氨酸50mg、膽固醇lOOmg、維生素 E 15mg溶于50ml氯仿中，在溫度為30°C條件下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的薄膜，加入0. 3M的 pH4. O磷酸鈉鹽緩沖液，振搖至膜完全水化，得到初級(jí)空白脂質(zhì)體。將初級(jí)空白脂質(zhì)體通 過(guò)微射流儀擠壓(0. Iym的濾膜擠壓10次)得到小粒徑的脂質(zhì)體，即次級(jí)空白脂質(zhì)體，用 0. IM磷酸氫二鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7. 5，得到空白脂質(zhì)體成品。步驟2 稱取200mg草烏甲素溶解在2ml的0. 2M，pH6. O磷酸鹽緩沖液中。步驟3:同實(shí)施例1。測(cè)得草烏甲素脂質(zhì)體平均粒徑為106nm，包封率為92. 8%。實(shí)施例5步驟1 將大豆磷脂600mg、膽固醇IOOmg和維生素E IOmg,用50ml乙醚溶解得有 機(jī)相。將有機(jī)相逐漸滴加到溫度為20°C、并帶有磁力攪拌(攪拌速度IOOrpm)的0. 20M的 PH4. O磷酸鈉鹽緩沖液中，揮去殘留的有機(jī)溶劑，得到初級(jí)空白脂質(zhì)體。將初級(jí)空白脂質(zhì)體 高壓勻質(zhì)(600bar勻質(zhì)5次)得到小粒徑的脂質(zhì)體，即次級(jí)空白脂質(zhì)體，用0. 2M磷酸氫二 鈉溶液調(diào)節(jié)PH至7. 0，得到空白脂質(zhì)體成品。步驟2 稱取40mg草烏甲素溶解在2ml的0. 1M，pH5. O磷酸鹽緩溶液中。步驟3:同實(shí)施例1。測(cè)得草烏甲素脂質(zhì)體平均粒徑為120nm，包封率為87. 2%。實(shí)施例6步驟1 將卵磷脂600mg、膽固醇IOOmg和維生素E 10mg，用50ml乙醇溶解，得有機(jī) 相。將有機(jī)相逐漸滴加到溫度為60°C并帶有磁力攪拌(攪拌速度50rpm)的0. IM的pH3. 5 檸檬酸鈉鹽緩沖液中，揮去殘留的有機(jī)溶劑，得到初級(jí)空白脂質(zhì)體。將空白脂質(zhì)體高壓勻質(zhì) (600bar勻質(zhì)5次)得到小粒徑的脂質(zhì)體，即次級(jí)空白脂質(zhì)體，用0. IM氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) PH至6，得到空白脂質(zhì)體成品。步驟2 稱取600mg草烏甲素溶解在2ml的0. 1M，pH4. O檸檬酸緩沖液中。步驟3:同實(shí)施例1。
測(cè)得草烏甲素脂質(zhì)體平均粒徑為lOOnm，包封率為84. 9%。實(shí)施例7步驟1 將大豆磷脂600mg、膽固醇lOOmg、維生素E 20mg溶于50ml乙醇中，在溫 度為50°C條件下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的薄膜，加入0. 30M的pH4. 5磷酸鹽緩 沖液，振搖至 膜完全水化，得到初級(jí)空白脂質(zhì)體，將初級(jí)空白脂質(zhì)體通過(guò)高壓勻質(zhì)(600bar勻質(zhì)5次)得 到小粒徑的脂質(zhì)體，即次級(jí)空白脂質(zhì)體。將次級(jí)空白脂質(zhì)體通過(guò)葡聚糖凝膠柱(Sephadex G-50)，用pH7. OHEPES緩沖液洗脫，置換脂質(zhì)體的外部介質(zhì)，得到空白脂質(zhì)體成品成品。步驟2 稱取400mg草烏甲素溶解在2ml的0. 05M, pH4. 5磷酸鈉鹽緩沖液中。步驟3:同實(shí)施例1。測(cè)得草烏甲素脂質(zhì)體平均粒徑為150nm，包封率為90. 5%。實(shí)施例8步驟1 大豆磷脂600mg、膽固醇120mg、維生素E 20mg溶于50ml氯仿中，在溫度 為30°C條件下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的薄膜，加入0. IM的pH4. O檸檬酸緩沖液，振搖至膜完 全水化，得到初級(jí)空白脂質(zhì)體，將初級(jí)空白脂質(zhì)體通過(guò)微射流儀得到小粒徑的脂質(zhì)體，即次 級(jí)空白脂質(zhì)體。用PH8. OHEPES作為透析外液，IOOrpm攪拌條件下透析，置換次級(jí)空白脂質(zhì) 體的外部介質(zhì)，得到空白脂質(zhì)體成品。步驟2 稱取IOOmg草烏甲素溶解在2ml上述檸檬酸緩沖液中。步驟3:同實(shí)施例1。測(cè)得草烏甲素脂質(zhì)體平均粒徑為130nm，包封率為94. 5%。實(shí)施例9步驟1 將卵磷脂600mg、膽固醇600mg、維生素E 3mg溶于50ml乙醚中，在溫度為 70°C條件下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的薄膜，加入0. 05M的pH3. O醋酸鹽緩沖液，振搖至膜完全 水化，得到初級(jí)空白脂質(zhì)體。將初級(jí)空白脂質(zhì)體通過(guò)高壓勻質(zhì)(600bar勻質(zhì)5次)得到小 粒徑的脂質(zhì)體，即次級(jí)空白脂質(zhì)體，用0. IM氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.0，得到空白脂質(zhì)體成
P
ΡΠ O步驟2 稱取600mg草烏甲素溶解在2ml的0. 05M, pH3. O醋酸緩沖液中。步驟3 將步驟1的空白脂質(zhì)體和步驟2的草烏甲素溶液混合，置于70°C保溫 5min,即得。測(cè)得草烏甲素脂質(zhì)體平均粒徑為50nm，包封率為81. 6%。實(shí)施例10步驟1 將卵磷脂600mg、膽固醇30mg、維生素E 0. 6mg溶于50ml乙醚中，在溫度 為70°C條件下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的薄膜，加入0. IM的pH5. O醋酸鹽緩沖液，振搖至膜完 全水化，得到初級(jí)空白脂質(zhì)體。將初級(jí)空白脂質(zhì)體通過(guò)高壓勻質(zhì)(600bar勻質(zhì)5次)得到 小粒徑的脂質(zhì)體，即次級(jí)空白脂質(zhì)體，用0. IM氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至8.0，得到空白脂質(zhì)體 成品。步驟2 稱取6mg草烏甲素溶解在2ml的0. 1M，pH7. O醋酸緩沖液中。步驟3 將步驟1的空白脂質(zhì)體和步驟2的草烏甲素溶液混合，置于20°C保溫 60min,即得。測(cè)得草烏甲素脂質(zhì)體平均粒徑為200nm，包封率為81.6%。
效果實(shí)施例1取家兔6只，隨機(jī)分成2組，雌雄各半，分別在家兔的左腿股四頭肌注射ImL的 0. lmg/mL草烏甲素溶液和實(shí)施例8所制備草烏甲素脂質(zhì)體，相當(dāng)于注射相同量的草烏甲 素。在右腿股四頭肌注射相同體積的生理鹽水作為對(duì)照。注射后24h處死家兔，解剖觀察 家兔股四頭肌的刺激性情況，結(jié)果見(jiàn)表1。表1.草烏甲素脂質(zhì)體對(duì)家兔的股四頭肌的刺激性
權(quán)利要求
一種草烏甲素脂質(zhì)體，其包括以下質(zhì)量份的各組分草烏甲素0.01～1份磷脂1份膽固醇 0.05～1份維生素E 0.001～0.03份。
2.如權(quán)利要求1所述的草烏甲素脂質(zhì)體，其特征在于，所述的磷脂選自天然磷脂和合 成磷脂中的一種或多種。
3.如權(quán)利要求1所述的草烏甲素脂質(zhì)體，其特征在于，所述的天然磷脂選自大豆磷脂 和卵磷脂，所述的合成磷脂選自二豆蔻磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰 膽堿、二棕櫚酰磷脂酰甘油酯、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰絲氨酸中的一種或多種。
4.如權(quán)利要求1所述的草烏甲素脂質(zhì)體，其特征在于，所述的草烏甲素脂質(zhì)體中還包 括pH3. 0 5. 0的緩沖液。
5.如權(quán)利要求1所述的草烏甲素脂質(zhì)體，其特征在于，所述的草烏甲素脂質(zhì)體的平均 粒徑是50 200nm。
6.一種權(quán)利要求1 5任一項(xiàng)所述的草烏甲素脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟1)采用注入法或薄膜法制備包含PH3.0 5. 0緩沖液的初級(jí)空白脂質(zhì)體分散液，經(jīng)過(guò) 高壓乳勻或微射流得到次級(jí)空白脂質(zhì)體混懸液，用堿液調(diào)節(jié)PH至6 9，得空白脂質(zhì)體成Pm ；2)稱取草烏甲素溶解在弱酸溶液中，得草烏甲素溶液；3)將步驟1)的空白脂質(zhì)體成品和步驟2)的草烏甲素溶液混合，置于20 70°C保溫 5min 60min，即得草烏甲素脂質(zhì)體。
7.如權(quán)利要求6所述的草烏甲素脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，步驟1)所述的注 入法包括將磷脂、膽固醇和維生素E，用乙醚或乙醇溶解得到有機(jī)相，將有機(jī)相滴到溫度為 20 70°C、磁力攪拌的0. 05 0. 30M、pH3. 0 5. 0緩沖液中，揮去殘留的有機(jī)溶劑，即得 到初級(jí)空白脂質(zhì)體；所述的薄膜法包括將磷脂、膽固醇、維生素E溶于氯仿、乙酸乙酯、乙醚 或者乙醇中，在溫度為20 70°C條件下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成均勻的薄膜，加入0. 05 0. 30M的 PH3. 0 5. 0緩沖液，振搖至膜完全水化，即得到初級(jí)空白脂質(zhì)體；所述的調(diào)節(jié)pH的堿液選 自氫氧化鈉、磷酸氫二鈉或碳酸鈉的水溶液。
8.如權(quán)利要求6所述的草烏甲素脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，所述的pH3.0 5. 0 緩沖液選自常規(guī)的磷酸鹽緩沖液、檸檬酸緩沖液或醋酸鹽緩沖系統(tǒng)。
9.如權(quán)利要求6所述的草烏甲素脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，所述的次級(jí)空白脂 質(zhì)體混懸液通過(guò)葡聚糖凝膠柱或通過(guò)透析法，用PH7. 0 8. 0的4-羥乙基哌嗪乙磺酸緩沖 液洗脫或作為透析外液透析，置換掉空白脂質(zhì)體的外部介質(zhì)，即得空白脂質(zhì)體成品。
10.如權(quán)利要求6所述的草烏甲素脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，步驟2)所述的弱 酸溶液選自pH3 7的磷酸鹽緩沖液、檸檬酸緩沖液或醋酸鹽緩沖系統(tǒng)；草烏甲素的濃度是 20mg/ml 800mg/ml。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種草烏甲素脂質(zhì)體，其包括以下質(zhì)量份的各組分草烏甲素0.01～1份，磷脂1份，膽固醇0.05～1份，維生素E 0.001～0.03份。本發(fā)明采用獨(dú)特的兩步法制備草烏甲素脂質(zhì)體，制備步驟少，操作簡(jiǎn)便，可控性和重現(xiàn)性好。本發(fā)明制備草烏甲素脂質(zhì)體藥物包封率可達(dá)85％以上。所采用的磷脂選擇面廣，可使用天然磷脂或大豆磷脂，也可使用合成的中性磷脂或負(fù)電性磷脂。本發(fā)明的草烏甲素脂質(zhì)體粒徑低于200nm，且初步的毒性試驗(yàn)表明，其能降低草烏甲素的毒性和刺激性，提高患者的順應(yīng)性，因此特別適合作為肌肉注射劑。
文檔編號(hào)A61K9/127GK101884615SQ20091005129
公開日2010年11月17日 申請(qǐng)日期2009年5月15日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月15日
發(fā)明者奉建芳, 戰(zhàn)丹, 李瑞新, 祝林, 邵紅霞 申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院