專利名稱：：桂花降血脂有效部位及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種桂花降血脂有效部位，同時(shí)還涉及一種該有效部位的制備方法及應(yīng)用，還涉及桂花在降血脂方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：高脂血癥(Hyperlipaemia，HLP)主要是指血清總膽固醇(TC)或甘油三酯(TG)水平過(guò)高和/或血清高密度脂蛋白一膽固醇(HDL-C)水平過(guò)低。高脂血癥是中老年的常見(jiàn)病和多發(fā)病，隨著人們生活水平的提高和生活習(xí)慣的改變，該病的發(fā)病率明顯增加，發(fā)病的年齡也有所提前。高脂血癥所引起的動(dòng)脈粥樣硬化(AS)是造成冠心病、高血壓和腦血管疾病的主要原因，嚴(yán)重危害到了人類的生命健康。目前，西藥調(diào)節(jié)血脂雖有肯定的療效，但有不同程度的副作用，且作用靶點(diǎn)單一。西藥他汀類是目前公認(rèn)為調(diào)脂最有效并被廣泛應(yīng)用的藥物，但具有肝臟和肌肉毒性等副作用。近年來(lái)，中藥調(diào)血脂以其療效好、副作用小的優(yōu)勢(shì)而成為研究的熱點(diǎn)。應(yīng)用有調(diào)血脂、抗自由基等作用的中藥可阻礙AS發(fā)生及發(fā)展，保護(hù)心血管功能。動(dòng)物飼喂富含膽固醇的高脂飼料可形成外源性高脂血癥病理模型，其病理狀態(tài)與人類相似。桂花又名木犀、九里香、金粟，為木犀科常綠喬木。實(shí)際上民間俗稱的"桂花"泛指木犀科木犀屬的多種植物。中國(guó)是該屬植物的世界分布中心。據(jù)《中國(guó)植物志》統(tǒng)計(jì)，我國(guó)木犀屬植物共25種，占全世界30種的80%以上，在我國(guó)已有2500年栽培歷史，分布在南嶺以北至秦嶺淮河流域以南，北至山東半島等地，形成了江蘇蘇州、湖北咸寧、四川成都、浙江杭州和廣西桂林等歷史上著名的五大桂花產(chǎn)區(qū)，年產(chǎn)干花100萬(wàn)公斤。桂花作為我國(guó)的名貴花木，其花香清雅，沁人心脾，除具有很高的觀賞價(jià)值外，尚能食用、藥用。明代李時(shí)珍《本草綱目》載"桂花生津、辟臭、化痰，治風(fēng)火牙痛。"現(xiàn)代研究表明，桂花尚含有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，其總氨基酸含量高達(dá)3.78%，也常用于美容和食療。桂花主要用于傳統(tǒng)桂花食品和高檔香料的生產(chǎn)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種從桂花中提取的具有降血脂作用的有效成分。同時(shí)，本發(fā)明的目的還在于提供一種從桂花中提取制備降血脂有效部位和有效成分的方法。進(jìn)一步地，本發(fā)明的目的還在于提供一種桂花有效成分在制備降血脂活性藥物方面的應(yīng)用。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案采用了一種桂花降血脂有效部位，該降血脂有效部位為由木犀屬植物桂花通過(guò)石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分別得到的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取物，其中乙酸乙酯提取物經(jīng)進(jìn)一歩分離得到桂花三萜。所述的桂花三萜的成分為熊果酸和齊墩果酸。本發(fā)明的技術(shù)方案還在于采用了一種桂花降血脂有效部位的制備方法，包括以下歩驟取桂花，粉碎，用丙酮與水/醇冷浸，過(guò)濾，合并濾液，減壓回收溶劑得濃縮物；將濃縮的提取物分散在水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次，得石油醚提取物、乙酸乙酯提取物及正丁醇提取物；將得到的乙酸乙酯提取物經(jīng)過(guò)200300目硅膠柱色譜，進(jìn)行梯度洗脫，得到的石油醚-丙酮(20:1)部分經(jīng)硅膠H柱色譜，石油醚-丙酮(20:1)洗脫，以TLC檢測(cè)合并，經(jīng)SephadexLH-20柱色譜，丙酮洗脫，得到桂花三萜。所述的制備方法具體為取干燥桂花，粉碎，用丙酮與水(體積比為7:3)/醇冷浸2—4次，每次6—8天，過(guò)濾，合并濾液，減壓回收溶劑得濃縮物；將濃縮的提取物分散在水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次，得石油醚提取物、乙酸乙酯提取物及正丁醇提取物；得到的乙酸乙酯提取物經(jīng)過(guò)200—300目硅膠柱色譜，以氯仿:甲醇(100:1—8:2)進(jìn)行梯度洗脫，得到的石油醚-丙酮(20:1)部分經(jīng)硅膠H柱色譜，石油醚-丙酮(20:1)洗脫，以TLC檢測(cè)合并，經(jīng)S印hadexLH-20柱色譜，丙酮洗脫，得到桂花三萜。所述的醇為甲醇、乙醇、丙醇或丁醇中的任意一種。所述的醇優(yōu)選為乙醇或甲醇。更進(jìn)一步講，本發(fā)明的技術(shù)方案還在于采用了一種桂花在降血脂方面的應(yīng)用。尤其是桂花降血脂有效部位在制備降血脂藥物方面的應(yīng)用。本發(fā)明的降血脂有效部位桂花三萜的成分為齊墩果酸和熊果酸，桂花桂花作為我國(guó)特有的植物分布廣泛且易得，這就使得本發(fā)明的原料易得，成本很低。經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究表明桂花有效成分——桂花三萜具有顯著的抗氧化及降血脂作用，對(duì)其進(jìn)一歩開(kāi)發(fā)，具有很好的發(fā)展前景。其有效成分桂花三萜可以作為制備天然的降血脂、抗氧化藥物；也可與其他中藥或西藥以任意比例混合作為制備降血脂、抗氧化的應(yīng)用；本發(fā)明的桂花及其有效成分——桂花三萜作為制備保健品用于高脂血癥的預(yù)防和輔助治療的應(yīng)用。通過(guò)體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明桂花三萜具有顯著地降低高脂血癥小鼠血清中TC、TG和LDL-C水平的作用，同時(shí)具有降低MDA、升高SOD活性的作用。說(shuō)明桂花不僅可以通過(guò)提高自身免疫力來(lái)降低血清中血脂水平，還可通過(guò)提高體內(nèi)抗氧化機(jī)制，降低血脂。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本實(shí)施例為桂花有效部位和有效成分的制備方法。取干燥金桂(1.9kg)，粉碎，用丙酮與水(體積比為7:3)/乙醇冷浸3次，每次7天，過(guò)濾，合并濾液，減壓回收溶劑得濃縮物；將濃縮的提取物分散在水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次，得到石油醚提取物i()g、乙酸乙酯提取物33.4g、正丁醇提取物400g。將得到的乙酸乙酯提取物33.4g經(jīng)過(guò)200300目硅膠柱色譜，以氯仿:甲醇(100:1—8:2)進(jìn)行梯度洗脫，得到的石油醚-丙酮(20:1)部分經(jīng)硅膠H柱色譜，石油醚-丙酮(20:1)洗脫，以TLC檢測(cè)合并，經(jīng)SephadexLH-20柱色譜，丙酮洗脫，得到桂花三萜。實(shí)施例2本實(shí)施例為桂花降血脂有效部位——桂花三萜的應(yīng)用例，其體內(nèi)降血脂、抗氧化試驗(yàn)如下動(dòng)物昆明小鼠，空腹體重為23士2g，全部雄性。由河南省醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。材料與試劑桂花三萜為由河南大學(xué)天然藥物研究所制備提供。決明子降脂片，吉林吉春制藥有限公司批號(hào)070501。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)測(cè)定試劑盒，南京建成生物工程研究所提供?？偰懝檀?TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測(cè)定試劑盒，北京中生生物工程高技術(shù)公司提供。試驗(yàn)方法高脂乳劑的配制豬油20%、膽固醇10%、丙硫氧嘧啶1%、膽鹽2%(配成10%溶液)、丙二醇2%和吐溫801%。動(dòng)物分組與處理取40只小鼠，平均體重23士2g，按實(shí)驗(yàn)要求分為正常對(duì)照組，高脂模型組，桂花三萜給藥組，陽(yáng)性對(duì)照組。正常對(duì)照組動(dòng)物上午ig(灌胃)給于蒸餾水，下午ig0.5。/。CMC-Na，高脂模型組均于每天上午ig給于高脂乳劑(0.2ml/10g'd)，下午ig0.5%CMC-Na，給藥組分別于每天上午ig給于高脂乳劑(0.2ml/10g-d)，下午ig給藥，給藥量見(jiàn)表2。IO天后，各組小鼠均禁食12h，眼球取血，離心分離血清用于血脂水平和SOD、MDA的測(cè)定。表2動(dòng)物分組與處理動(dòng)物愛(ài)i上午下午給藥量,口、)(0.2ml/10g)(0.2ml/10g)(mg/kg)正常對(duì)照組10蒸餾水0.5%CMC-Na——高脂模型組10高脂乳劑0.5%CMC-Na——陽(yáng)性對(duì)照組10高脂乳劑決明子降脂片120桂花三萜給藥組10高脂乳劑桂花三萜150指標(biāo)測(cè)定方法TC，TG，LDL-C，HDL-C，MDA，SOD的測(cè)定按試劑盒說(shuō)明方法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)5is表示，實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)采用spsslO.O統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析。結(jié)果(1)桂花三萜對(duì)高脂血癥小鼠血脂的影響，結(jié)果見(jiàn)表3。桂花三萜、陽(yáng)性給藥組的血清中TC，TG，LDL-C水平均明顯的低于高脂模型組，數(shù)據(jù)差異有顯著意義。(2)桂花三萜對(duì)高脂血癥小鼠抗氧化能力的影響，由表3數(shù)據(jù)可知，桂花三萜組的SOD水平明顯高于高脂血癥組；MDA水平明顯低于高脂血癥組。表明桂花三萜可能通過(guò)氧化途徑(升高SOD、降低MDA)來(lái)降低血脂水平。表3桂花三萜對(duì)營(yíng)養(yǎng)性高脂血癥小鼠血脂及抗氧化能力的<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注與正常對(duì)照組比較A代表顯著性差異，AA代表非常顯著性差異，AAA代表極顯著性差異；勾高脂模型組比較*代表顯著性差異，**代表非常顯著性差異，***代表極顯著性差異。實(shí)驗(yàn)表明桂花三萜具有顯著地降低高脂血癥小鼠血清中TC、TG和LDL-C水平的作用，同時(shí)具有降低MDA、升高SOD活性的作用。說(shuō)明桂花不僅可以通過(guò)提高自身免疫力來(lái)降低血清中血脂水平，還可通過(guò)提高體內(nèi)抗氧化機(jī)制降低血脂。桂花三萜作為制備天然的降血脂、抗氧化藥物的應(yīng)用桂花三萜以質(zhì)量比為2:l與填充劑環(huán)糊精/乳糖混合，進(jìn)行噴霧干燥，制備成膠囊劑。權(quán)利要求1、一種桂花降血脂有效部位，其特征在于該降血脂有效部位為由木犀屬植物桂花通過(guò)石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分別得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取物，其中乙酸乙酯提取物經(jīng)進(jìn)一步分離得到桂花三萜。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的桂花降血脂有效部位，其特征在于所述的桂花三萜的成分為熊果酸和齊墩果酸。3、一種桂花降血脂有效部位的制備方法，其特征在于包括以下步驟取桂花，粉碎，用丙酮與水/醇冷浸，過(guò)濾，合并濾液，減壓回收溶劑得濃縮物；將濃縮的提取物分散在水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次，得石油醚提取物、乙酸乙酯提取物及正丁醇提取物；將得到的乙酸乙酯提取物經(jīng)過(guò)200300目硅膠柱色譜，進(jìn)行梯度洗脫，得到的石油醚-丙酮(20:l)部分經(jīng)硅膠H柱色譜，石油醚-丙酮(20:l)洗脫，以TLC檢測(cè)合并，經(jīng)SephadexLH-20柱色譜，丙酮洗脫，得到桂花三萜。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的桂花降血脂有效部位的制備方法，其特征在于制備方法具體為取干燥桂花，粉碎，用丙酮與水(體積比為7:3)/醇冷浸2一4次，每次6—8天，過(guò)濾，合并濾液，減壓回收溶劑得濃縮物；將濃縮的提取物分散在水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次，得石油醚提取物、乙酸乙酯提取物及正丁醇提取物；得到的乙酸乙酯提取物經(jīng)過(guò)200—300目硅膠柱色譜，以氯仿:甲醇(100:1—8:2)進(jìn)行梯度洗脫，得到的石油醚-丙酮(20:1)部分經(jīng)硅膠H柱色譜，石油醚-丙酮(20:1)洗脫，以TLC檢測(cè)合并，經(jīng)SephadexLH-20柱色譜，丙酮洗脫，得到桂花三萜。5、根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的桂花降血脂有效部位的制備方法，其特征在于所述的醇為甲醇、乙醇、丙醇或丁醇中的任意一種。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的桂花降血脂有效部位的制備方法，其特征在于:所述的醇優(yōu)選為乙醇或甲醇。7、一種桂花在降血脂方面的應(yīng)用。8、一種桂花降血脂有效部位在制備降血脂藥物方面的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及一種桂花降血脂有效部位，同時(shí)還涉及一種該有效部位的制備方法及應(yīng)用，還涉及桂花在降血脂方面的應(yīng)用。其中桂花降血脂有效部位由木犀屬植物桂花通過(guò)石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分別得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取物，其中乙酸乙酯提取物經(jīng)進(jìn)一步分離得到桂花三萜。其有效成分桂花三萜可以作為制備天然的降血脂、抗氧化藥物；本發(fā)明的桂花及其有效成分——桂花三萜作為制備保健品用于高脂血癥的預(yù)防和輔助治療的應(yīng)用。通過(guò)體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明桂花三萜具有顯著地降低高脂血癥小鼠血清中TC、TG和LDL-C水平的作用，同時(shí)具有降低MDA、升高SOD活性的作用。說(shuō)明桂花不僅可以通過(guò)提高自身免疫力來(lái)降低血清中血脂水平，還可通過(guò)提高體內(nèi)抗氧化機(jī)制，降低血脂。文檔編號(hào)A61K36/185GK101664423SQ200810141288公開(kāi)日2010年3月10日申請(qǐng)日期2008年9月4日優(yōu)先權(quán)日2008年9月4日發(fā)明者姬志強(qiáng),宋艷麗,康文藝,賀光東申請(qǐng)人:河南大學(xué)