專利名稱：：槌果藤在制備用于治療腎臟疾病藥物中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種植物藥的新用途，具體地說(shuō)是涉及一種植物藥槌果藤在用于治療腎臟疾病藥物中的新用途，特別是槌果藤在制備用于局灶節(jié)段性腎小珎J更化藥物中的用途。
背景技術(shù)：
：腎臟疾病是危害群眾健康的常見(jiàn)疾病，據(jù)最新的臨床流行病學(xué)調(diào)查，我國(guó)慢性腎臟疾病的發(fā)病率已接近10%。各種慢性腎臟疾病持續(xù)*將導(dǎo)致慢性腎功能衰竭而使患者必須以長(zhǎng)期腎替代治療(透析或移植)維持生命。目前我國(guó)接受透析治療的總?cè)藬?shù)達(dá)數(shù)十萬(wàn)，且每年還在以10%以上的速度增長(zhǎng)。每位透析患者每年IO余萬(wàn)的治療費(fèi)用，給家庭和社會(huì)造成沉重的負(fù)擔(dān)。因此，積極探索腎臟疾病的有效治療藥物，控制腎臟疾病或延緩腎功能不全的進(jìn)展已是當(dāng)前腎臟疾病領(lǐng)域研究的當(dāng)務(wù)之急。腎臟疾病中的局灶節(jié)段性腎小Jl^更化(FSGS)的病變特征為僅累及部分腎小球及腎小球毛細(xì)血管袢的部分小葉的硬化病變。臨床上以蛋白尿或腎病綜合征為其主要表現(xiàn)，在小兒原發(fā)性腎病綜合征中FSGS約占10%-20%，且為難治性腎病綜合征的主要病理類型。90%的兒童和70%的成人患者表現(xiàn)為腎病性蛋白尿，20%-30%的患者伴有進(jìn)展性腎功能減退，高血壓的發(fā)生率為30%-45%，近50%的患者有鏡下血尿。由于其療效差，病程長(zhǎng)，預(yù)后兇險(xiǎn)，故亦為兒童及成人終末期腎病最多見(jiàn)的病理改變。到目前為止，對(duì)原發(fā)性FSGS還沒(méi)有可靠一致的治療手段。在FSGS中，首選的治療是激素。根椐15個(gè)有關(guān)FSGS研究的薈萃分析，經(jīng)活檢證實(shí)的FSGS僅有大約25°/。對(duì)激素敏感，對(duì)激素敏感的病人15年后傾向于疾愈；相反，對(duì)激素不敏感的病人50%在4年內(nèi)血清肌肝翻倍。對(duì)于不能緩解或激素抵抗的FSGS的病人一個(gè)療程的環(huán)磷酰胺或苯丁酸氮芥和激素同時(shí)使用可能有效。其他的治療方案如環(huán)孢素(CsA)停用后易復(fù)發(fā)，且具有腎毒性；FK506近年也用于FSGS的治療，Duncan等觀察了FK506對(duì)FSGS有一定的治療效果，但因病例太少需進(jìn)一步觀察證明；霉酚酸脂(MMF)在一些零星的試驗(yàn)中其緩解后復(fù)發(fā)率少于50%,對(duì)照試驗(yàn)正在進(jìn)行。整體而言，目前FSGS的療效仍不滿意，需要進(jìn)一步探索有效的治療藥物或方案。槌果藤(CapparisspinosaL.)為百花科植物，半灌木狀匍旬藤本。喜生于荒漠戈壁和低山坡石質(zhì)沙土低處。藥用果實(shí)。分布于新疆、西藏等地。據(jù)中醫(yī)文獻(xiàn)記載，有祛風(fēng)、散寒、除濕、消腫、止痛之效。具有舒張血管、止血及抑制布氏桿菌和結(jié)核菌等作用。民間用于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肝硬化、肝炎、寒冷引起的脾胃病證、浮腫。對(duì)藥物成份研究，有報(bào)告含阿魏酸、芥子酸、,丁等成份;種子油含C!8不飽和脂肪酸。另?yè)?jù)記載還含糖、硫苷、芥子酶、甾體皂苷、抗壞血酸、紅色素、碘等成份。經(jīng)過(guò)文獻(xiàn)檢索和民間用法得知槌果藤有多方面的藥理學(xué)作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，槌果藤實(shí)具有鎮(zhèn)痛、消炎、抗凝血作用。而其在藥效學(xué)方面，國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)，其醇提取物具有很強(qiáng)的抗氧化效能，具有防輻，增強(qiáng)毛細(xì)血管的功能；提取物水溶液曱醇可溶性部分具有顯著的抗肝毒性活性；還具有抗動(dòng)脈硬化、利尿、滋補(bǔ)、免疫抑制等作用。作為維吾爾藥，在臨床上已采用槌果藤實(shí)治療風(fēng)濕病、肩周炎、硬皮病、瘢痕疙疼等病癥。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一種槌果藤在制備用于治療腎臟疾病藥物中的用途。用槌果藤為主要成份制成的藥物，可以較好治療各種腎臟疾病。本發(fā)明所述槌果藤在制備用于治療腎臟疾病藥物中的用途，特別是在制備用于治療局灶節(jié)段性腎小Ji^更化藥物中的應(yīng)用。槌果藤可按常規(guī)方法，加入適當(dāng)?shù)妮o料，加工成臨床上可應(yīng)用的任何一種制劑，例如煎劑、顆粒劑、丸劑以及片劑等。臨床上優(yōu)選為煎劑，制備、服用均十分方便。各種腎臟疾病的共同臨床表現(xiàn)是尿液檢查的異常，特別是蛋白尿；病理?yè)p害及發(fā)病機(jī)制都表現(xiàn)為腎小球或小管、間質(zhì)的病理?yè)p害，從基因水平看各種腎臟疾病在發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中均存在包括轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子P1、腫瘤壞死因子oc受體、足細(xì)胞相關(guān)蛋白(Podocin)、纖維連接蛋白等與腎纖維化及病理改變密切相關(guān)的基因表達(dá)出現(xiàn)顯著變化。為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，以下通過(guò)槌果藤對(duì)FSGS大鼠模型的治療作用和基因芯片初步篩選用為治療腎臟疾病的典型，從而說(shuō)明其作用機(jī)制。一、實(shí)-瞼動(dòng)物健康雄性SD大鼠60只，體重為237.69±22.83g，均由浙江省中醫(yī)研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。二、藥物與試劑槌果藤,按體重60Kg成人分別給藥10g、30g、60g和120g的劑量換算成大鼠該藥劑量分別為lg/Kg、3g/Kg、6g/Kg、12g/Kg,再以每只大鼠每次灌胃量2ml計(jì)算出四種不同煎劑濃度分別為75g/L、150g/L、300g/L及600g/L。煎制前先將稱取藥物清水浸泡半小時(shí)，各組濃度均為水沸后煎煮45分鐘左右，煎取的藥品4'C儲(chǔ)存?zhèn)溆?。三、?dòng)物模型與分組將所有動(dòng)物隨^^分為6組，每組n-12。其中五組氯胺酮(江蘇省連云港制藥廠)50mg/Kg腹腔注射，麻醉后行左腎摘除術(shù)，7天后尾靜脈注射阿霉素5mg/Kg(浙江海正藥業(yè)股份有限公司)，30天后再次尾靜脈注射阿霉素3mg/Kg，按不同灌胃給藥濃度將上述五組動(dòng)物分為75g/L組(A組)、150g/L組(B組)、300g/L組(C組)、600g/L組(D組)，各組動(dòng)物每日均給予2ml煎劑灌胃。另兩組分別為每日等量生理鹽水灌胃的安慰劑對(duì)照組(E組)和假手術(shù)組(F組)。F組動(dòng)物予剝離腎包膜，不切除腎臟并縫合切口，與其他五組同時(shí)給予等量生理鹽水。各組給藥時(shí)間均為四周。四、4全測(cè)指標(biāo)與方法各組動(dòng)物于治療前后均分別測(cè)定24小時(shí)尿蛋白定量(考馬斯亮藍(lán)法，上?；瘜W(xué)試劑公司)，尾靜脈采血檢測(cè)血常規(guī)，用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、總蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、膽固醇(Choi)水平，四周后所有大鼠均斷頭處死并取腎組織迅速置于液氮中保存?zhèn)錄_企。五、基因芯片檢測(cè)(一)樣本采集1.首先準(zhǔn)備好用于包裝樣本的冷凍保存管，并且用油性記號(hào)筆在凍存管外表寫明樣本編號(hào)。2.準(zhǔn)確切除所需腎組織。3.立即剔除結(jié)締組織和脂肪組織等組織類型。4.在RNase-free的O.9%生理鹽水中漂洗樣本，以去除血漬和污物。5.用冷凍保存管裝栽包裹組織，-2(TC凍存4小時(shí)，-8(TC凍存12小時(shí)，然后迅速投入液氮冷卻保存。(二)總RNA抽提及鑒定1.將超低溫保存的樣品除去樣品袋，在電子天平上稱重后，轉(zhuǎn)移至用液氮預(yù)冷的碾缽中，用扦子碾磨組織，其間不斷加入液氮，直至碾磨成粉末狀。2.將碾磨成粉末狀的樣品，轉(zhuǎn)移至已經(jīng)加入適量UNIzol試劑(上海博星生物公司)的勻漿管中，把勻漿管置于水浴中，在組織勻漿粉碎機(jī)上進(jìn)行勻漿。勻漿至勻漿液不粘且無(wú)顆粒即可。3.將勻漿液轉(zhuǎn)移至15mL離心管中，于4。C,12000g,離心10分鐘。4.小心吸取上清液轉(zhuǎn)入新的15mL離心管，在15-30。C放置5分鐘。5.向勻漿液中加入氯仿，蓋緊離心管蓋，用力震蕩離心管，在15-30'C放置3分鐘。6.于4。C,12000g，離心15分鐘。7.從離心機(jī)中小心地取出離心管，吸取上清至另一15mL離心管。8.向上清加入異丙醇，輕輕顛倒離心管充分混勻液體，在15-30X^文置10分鐘。9.于4。C，12000g，離心10分鐘。10.棄去上清，緩慢地沿管壁加入75y。乙醇5mL，輕輕顛倒洗滌離心管管壁，小心棄去乙醇。11.再加入75W乙醇10mL，在渦旋器上短暫渦旋；于4。C,8000g離心10min。12.小心棄上清，短暫離心，用移液槍吸去所有上清，在超凈工作臺(tái)中干燥沉淀5min。13.加入RNase-free的Milli-Q水完全溶解RNA沉淀后，-80。C保存。14.進(jìn)行電泳以及紫外分析、70。C水浴保溫實(shí)驗(yàn)(三)RNA質(zhì)量判定標(biāo)準(zhǔn)1.RNA樣本的OD260/OD280應(yīng)在1.7-2.2之間。2.總RNA電泳圖i普有清晰的28S、18S條帶。3.70。C水浴保溫l小時(shí)后的電泳圖鐠與水浴保溫前的圖譜無(wú)明顯差異。(四)探針標(biāo)記與雜交1.預(yù)雜交1)配制預(yù)雜交液雜交試劑l(上海博星生物公司)加入到的Eppenderf管中，振蕩混勻后，加入雜交試劑2(上海博星生物公司)混勻。2)將配制好的預(yù)雜交液放入95"水浴鍋內(nèi)變性2分鐘，將待預(yù)雜交的玻片放入95。C水浴鍋內(nèi)變性30秒，玻片取出后即放入無(wú)水乙醇中30秒，晾干。3)將已變性的預(yù)雜交液加到玻片的點(diǎn)樣區(qū)域內(nèi)，蓋上蓋玻片，放入雜交箱內(nèi)42。C預(yù)雜交56小時(shí)。2.標(biāo)記探針(以下在冰浴中進(jìn)行)1)于一已滅菌的1.5mLE卯endorf管內(nèi)依次加入以下試劑(反應(yīng)終體積為50juL，以下i式劑均為RNase-free):謹(jǐn)2023jaL逆轉(zhuǎn)錄引物5|iL總RNA30-50jig振蕩混勻，置于7(TC水浴10分鐘。取出后，迅速置于冰上。2)分別加入以下試劑逆轉(zhuǎn)錄酶緩沖液10|iLDTT5jiLdNTPs4juL3)而后在暗室中加入以下試劑逆轉(zhuǎn)錄酶2nLCy5-dCTP或Cy3-dCTP3juL4)用手指彈打管壁以混勻樣品，手浴2分鐘。將Eppendorf管置于42。C水浴2小時(shí)。5)依次在Eppendorf管中加入標(biāo)記試劑I465。C水浴10分鐘后加入標(biāo)記試劑II4iliI?；靹颍喜?duì)照組、實(shí)驗(yàn)組。避光，真空抽干至50JiL左右。6)使用DM純化柱(或乙醇沉淀)純化DM。7)將柱體在旋渦混合器上劇烈振蕩搖勻，懸浮內(nèi)溶的樹(shù)脂。將柱頂端的小帽旋松四分之一圈，掰斷柱下端的密封頭。8)將柱置于一個(gè)1.5ml的Eppendorf管中，以3000rpm離心l分鐘將柱置于另一個(gè)新的l.5mlEppendorf管中，去掉頂端的帽，將樣品慢慢加到樹(shù)脂上表面的中間。以3000rpm離心2分鐘，經(jīng)純化的樣品流出，被收集在支持用的Eppendorf管中。9)加入標(biāo)記試劑III8jul，真空抽千。3.雜交1)在抽干的探針管中加6.5pL雜交試劑l，充分混勻，使4笨針溶解。再加入6.5juL雜交試劑2，混勻備用。2)將預(yù)雜交的玻片取出，用(1朋20沖去蓋玻片。3)將探針置于95。C水浴中變性2分鐘；玻片置于95'C水浴中變性30秒，玻片取出浸無(wú)水乙醇30秒，探針取出后迅速置于水上。4)將探針置于大鼠cDNA表達(dá)譜芯片(BiostarR-40S,上海博星生物公司)上，用蓋玻片覆蓋，置于雜交搶中，用Parafilm密封，放入42。C雜交箱內(nèi)雜交過(guò)夜(16~18h)。4.洗片1)用O.5%的洗滌液1(上海博星生物公司)沖洗玻片，去除蓋玻片。2)準(zhǔn)備兩個(gè)染色缸，分別裝有O.5%的洗片試劑1+2%的洗片試劑2、5%的洗片試劑3(上海博星生物公司)，放入6(TC水浴鍋中。3)將玻片依次浸入以上兩個(gè)染色缸中洗滌IOmin。4)用O.5%的洗滌液1沖洗玻片，晾千后掃描。(五)掃描結(jié)果篩選及分析1.通過(guò)芯片圖像分析軟件對(duì)芯片灰度掃描圖進(jìn)行分析，可以得到芯片上每個(gè)基因點(diǎn)的原始信號(hào)值，包括前景信號(hào)值和背景信號(hào)值，然后根據(jù)這些原始信號(hào)值進(jìn)行后續(xù)的數(shù)值分析。2.用基因點(diǎn)Cy5信號(hào)的前景信號(hào)值減去它的背景信號(hào)值，得到該基因點(diǎn)的Cy5信號(hào)的實(shí)際強(qiáng)度值(以下簡(jiǎn)稱為信號(hào)值)；并且，為了避免弱信號(hào)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，將所有小于200的Cy5信號(hào)值用200替代。3.用基因點(diǎn)Cy3信號(hào)的前景信號(hào)值減去它的背景信號(hào)值，得到該基因點(diǎn)的Cy3信號(hào)值。4.為了校正Cy5、Cy3標(biāo)記體系間的系統(tǒng)誤差，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)要進(jìn)行均一化處理。均一化處理時(shí)先依據(jù)以下2個(gè)原則篩選出參與均一化處理的有效基因點(diǎn)1)該基因點(diǎn)的Cy3、Cy5信號(hào)值皆大于200，或者其中之一大于800;2)該基因點(diǎn)的Cy5信號(hào)值/Cy3信號(hào)值的比值在0.1-IO之間。5.計(jì)算每個(gè)有效基因點(diǎn)Cy5信號(hào)值/Cy3信號(hào)值的比值，然后求出其相應(yīng)的自然對(duì)數(shù)值r=ln(Cy5/Cy3)，算出全部有效基因點(diǎn)r值的平均值R,那么實(shí)驗(yàn)的均一化系數(shù)就等于R的倒數(shù)即EXP(R)。6.將所有基因點(diǎn)的Cy3信號(hào)值乘上均一化系數(shù)，得出調(diào)整后的Cy3*。并且，為了避免弱信號(hào)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，將所有小于200的Cy3承值以200取代。7.計(jì)算每個(gè)基因點(diǎn)在本次實(shí)驗(yàn)中的表達(dá)差異值Ratio,Ratio-Cy5/Cy3*。8.篩選出Ratio大于2或小于0.5的基因點(diǎn)，這些數(shù)據(jù)所代表的基因在與兩種探針雜交時(shí)表現(xiàn)出較大的差異。9.將表達(dá)具有顯著性差異的基因與Genebank進(jìn)行比對(duì)，從而篩選出有意義的基因。六、不同組別間基因芯片對(duì)比情況(表l)表1不同組別間基因芯片對(duì)比表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>七、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(；±s)表示，采用SPSS11.0forwindows軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，組內(nèi)采用配對(duì)t檢^r、組間采用方差分析進(jìn)行資料統(tǒng)計(jì)，P<0.05示結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。八、試驗(yàn)結(jié)果1.尿蛋白變化各組動(dòng)物造模前24小時(shí)尿蛋白定量無(wú)顯著性差異(P>0.05)，治療前(第四周)各沖莫型組24小時(shí)尿蛋白定量均顯著增高，與F組比較有顯著性差異(P<0.01)。治療后(第八周)A、B、C、D各組24小時(shí)尿蛋白定量均值較治療前均有顯著下降(P〈0.05)，組間比較可見(jiàn)治療后(第八周)A、B、C、D各組24小時(shí)尿蛋白定量均顯著低于E組(P〈0.01)，D組治療后24小時(shí)尿蛋白定量顯著低于同期A、B、C組(P〈0.05)。由此可見(jiàn)，實(shí)驗(yàn)組不同治療濃度的槌果藤煎劑均有降蛋白尿的作用，其中又以D組(600g/L)作用為最強(qiáng)(表2)。表2各組動(dòng)物治療前后24小時(shí)尿蛋白定量(mg/24h)對(duì)比<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*各組治療前后比較有顯著性差異(P<0.05)"與E組比較，治療后有顯著性差異(P<0.01)'與A、B、C組比較，治療后有明顯差異(P<0.05)2.血常規(guī)從各組治療前后血常規(guī)結(jié)果比較看，各組白細(xì)胞總數(shù)和血小板數(shù)治療前(第4周)與治療后(第八周)均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。模型組治療前血紅蛋白均低于假手術(shù)組(F組，P<0.05),A、B、C、D組治療后血紅蛋白低于治療前，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),而E組治療后血紅蛋白顯著低于治療前(P<0.05，表3)。表3各組治療前后血常規(guī)變化<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>承與同期F組比較有顯著性差異(P<0.05)"與同組治療前比較，有顯著性差異(P<0.05)3.生化指標(biāo)各模型組血漿白蛋白水平治療前顯著低于F紐(P〈0.05)。而A、B、C、D各組治療后血漿白蛋白較治療前顯著上升，E組血漿白蛋白水平則較治療前顯著降低(P<0.05)。各組谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平治療前后無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05，表4)。各模型組治療前血膽固醇、肌酐、尿素氮水平均顯著高于F組(P<0.05),而而A、B、C、D各組治療后血膽固醇、肌酐、尿素氮水平均較治療前有顯著降低，E組血膽固醇、肌酐、尿素氮水平則較治療前顯著升高(P<0.05，表5)。表4各組治療前后血漿白蛋白和谷丙轉(zhuǎn)氨酶比較<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表5各組治療前后腎功能和血膽固醇水平比較<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>氺與同期F組比較有顯著性差異(P<0.05)"與同組治療前比較，有顯著性差異(P<0.05)4.基因芯片檢測(cè)結(jié)果4.1總RNA的質(zhì)量鑒定為減小樣本間個(gè)體差異，分別取D、E、F組各4個(gè)組織標(biāo)本，分別提取總RNA,編號(hào)分別為D—D4、Ei-E4、F,-F4。經(jīng)鑒定各樣本的OD260/OD280值均在1.7-2.2之間。各樣本總RNA電泳圖語(yǔ)有清晰的28S、18S條帶，70°C水浴保溫1小時(shí)后的電泳圖譜與水浴保溫前的圖鐠無(wú)明顯差異。然后將每組4個(gè)標(biāo)本各取100ng等量混合成各組待4全RNA標(biāo)本。4.2基因芯片檢測(cè)結(jié)果通過(guò)計(jì)算每個(gè)基因點(diǎn)在本次實(shí)驗(yàn)中的表達(dá)差異值Ratio(Ratio=Cy5/Cy3*)，篩選出Ratio大于2或小于0.5的基因點(diǎn)，這些數(shù)據(jù)所代表的基因在與兩種探針雜交時(shí)表現(xiàn)出較大的差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與E組比較，D組共有185條基因表達(dá)下調(diào)，146條基因表達(dá)上調(diào)。再通過(guò)三組樣本(D、E、F組)之間的橫向比較以及與Genbank進(jìn)行比對(duì)，從而篩選出有意義的基因102條，其中73條表達(dá)下調(diào)，29條表達(dá)上調(diào)。其中包括轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子P1、腫瘤壞死因子oc受體、足細(xì)胞相關(guān)蛋白(Podocin)、纖維連接蛋白等與FSGS發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的基因表達(dá)具有顯著性差異(表6)。表6基因芯片檢測(cè)D組與E組表達(dá)顯著差異的部分基因列表GeneBank號(hào)Cy5/Cy3*基因名稱BC0870390.223III型膠原X159060.356纖維連接蛋白(Fibronectin)AY0396510.365足細(xì)胞相關(guān)蛋白PodocinAF1212170.367I型膠原BC0839090.371腫瘤壞死因子a(TNFoc)受體AF1878180.396表皮生長(zhǎng)因子(EGF)受體固—0215780.400轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子P1(TGFP1)NM—0239620.403血小板書(shū)t化生長(zhǎng)因子(PDGF)NM—1334090.425整合素連接激酶(ILK)BC0788380.449腎特異性膜蛋白(離子通道，鈣超載)XM—2134210.452血管內(nèi)皮細(xì)胞鋅指蛋白XM一2152514.050鋅指蛋白216(VitD)BC0605475.135硒蛋白(抗氧化)槌果藤對(duì)FSGS大鼠模型均有減少尿蛋白的作用，起到免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗纖維化作用，從而對(duì)FSGS具有治療作用，且未發(fā)現(xiàn)骨髓抑制、肝損害等副反應(yīng)。臨床方面，將單次給藥相當(dāng)于原藥材120g濃度的槌果藤煎劑治療腎臟疾病患者248例，每次5ml，一日三次，兩個(gè)月為一療程。觀察期內(nèi)慢性腎小球腎炎97例，89例有顯效；IgA腎病62例，48例有顯效；紫癜型腎炎29例，18例有顯效；糖尿病腎病35例，27例有顯效；慢性間質(zhì)性腎炎15例，IO例有顯效。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施列對(duì)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)內(nèi)容進(jìn)行說(shuō)明，但本
發(fā)明內(nèi)容并不局限于此。實(shí)施例1煎劑的制備稱取12kg槌果藤加10倍水浸泡半小時(shí)，加熱，水煮沸提取45分鐘，過(guò)濾，濾渣棄去，定容1000ml，得到相當(dāng)于原藥材12g/ml濃度的煎劑。實(shí)施例2顆粒劑的制備稱取6kg槌果藤加8倍水浸泡半小時(shí)，加熱，水煮沸提取45分鐘，過(guò)濾，濾渣棄去，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.38-1.40(6(TC)的清膏，取清膏加入蔗糖粉與淀粉的混合物重量比(1:2)適量，混勻，加入乙醇適量，制成1000g顆粒，4安每袋10g包裝。實(shí)施例3片劑的制備稱取3kg槌果藤加9倍水浸泡半小時(shí)，加熱，水煮沸提取60分鐘，，過(guò)濾，濾渣棄去，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.38-1.40(60°C)的清膏，取清膏加入環(huán)糊精適量，制顆粒，加入適量滑石粉，壓片，得1000片。實(shí)施例4丸劑的制備稱取3kg槌果藤加9倍水浸泡半小時(shí)，加熱，水煮沸提取60分鐘，過(guò)濾，濾淹棄去，濾液濃縮，干燥，4分碎，過(guò)篩，用蒸餾水泛丸，干燥，制得1000丸。應(yīng)用例1取按實(shí)施例1制得的槌果藤煎劑治療腎臟疾病患者92例，每次10ml，一曰三次，兩個(gè)月為一療程。觀察期內(nèi)慢性腎小球腎炎47例，39例有顯效；IgA腎病32例，28例有顯效；慢性間質(zhì)性腎炎15例，IO例有顯效。應(yīng)用例2取按實(shí)施例2制得的槌果藤顆粒劑治療腎臟疾病患者111例，每次10g，一曰三次，兩個(gè)月為一療程。觀察期內(nèi)慢性腎小球腎炎67例，51例有顯效；IgA腎病22例，18例有顯效；慢性間質(zhì)性腎炎25例，17例有顯效。應(yīng)用例3取按實(shí)施例3制得的槌果藤片劑治療腎臟疾病患者120例，每次3片，一日三次，兩個(gè)月為一療程。觀察期內(nèi)慢性腎小球腎炎59例，47例有顯效；IgA腎病29例，21例有顯效；慢性間質(zhì)性腎炎32例，24例有顯效。應(yīng)用例4取按實(shí)施例4制得的槌果藤丸劑治療腎臟疾病患者121例，每次3丸，一日三次，兩個(gè)月為一療程。觀察期內(nèi)慢性腎小球腎炎62例，48例有顯效；IgA腎病36例，29例有顯效；慢性間質(zhì)性腎炎23例，16例有顯效。權(quán)利要求1.槌果藤在制備用于治療腎臟疾病藥物中的用途。2.如權(quán)利要求l所述的用途，其特征在于所述槌果籐在制備用于治療局灶節(jié)段性腎小肆J更化藥物中的用途。3.如權(quán)利要求1或2所述的用途，其特征在于槌果藤按常規(guī)方法加工成臨床上可應(yīng)用的任何一種制劑。4.如權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于所述制劑為煎劑。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了槌果藤在制備用于治療腎臟疾病藥物中的用途，特別是在制備用于治療局灶節(jié)段性腎小球硬化藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明通過(guò)槌果藤對(duì)局灶節(jié)段腎小球硬化大鼠模型的治療作用和基因芯片初步篩選說(shuō)明其作用機(jī)制，通過(guò)槌果藤制備成的藥物在臨床試驗(yàn)中表明，對(duì)治療腎臟疾病有顯著療效，且未發(fā)現(xiàn)骨髓抑制、肝損害等副作用，具有廣闊的應(yīng)用前景。文檔編號(hào)A61P13/00GK101234130SQ20081005998公開(kāi)日2008年8月6日申請(qǐng)日期2008年3月7日優(yōu)先權(quán)日2008年3月7日發(fā)明者應(yīng)旭旻申請(qǐng)人:應(yīng)旭旻