專利名稱：銀杏葉中提取粗品黃酮和黃酮糖苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥材的提取方法，特別是涉及一種中藥有效成分 的提取與凈化方法。
技術(shù)背景目前中藥制藥企業(yè)中藥物提取凈化的常用方法是水提醇沉法，水 提醇沉法以水為溶劑，對中藥材進(jìn)行煎煮、精提，再以乙醇為澄清劑， 對水提液進(jìn)行澄清處理，去除中藥水提液中的大部分多糖、蛋白質(zhì)、 樹脂等，最后回收乙醇，得到澄清透明的提取物溶液。此種方法適用 于所含有效成分對熱穩(wěn)定、能溶于水，并能溶于一定濃度乙醇的中藥 材。雖然使用醇沉法可以得到清澈的有效成分溶液，但也存在成品穩(wěn) 定性較差、乙醇耗用大、工藝復(fù)雜、成本較高且資源浪費嚴(yán)重等缺點。 在澄清藥液同時又將中藥中的一些醇不溶性的大分子有效成分(如蛋 白質(zhì)及部分多糖)作為雜質(zhì)除去，而這些成分特別是多糖通過藥理學(xué)、 免疫學(xué)及臨床研究表明具有增強免疫作用和廣泛的生理活性，難以保 證成品制劑的有效性且成品的穩(wěn)定性較差。 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供對銀杏葉水提液醇沉法的過程進(jìn)行改進(jìn)， 在醇沉之前，使用具有選擇性吸附作用的殼聚糖作為銀杏葉水提液的 澄清劑，通過絮凝法對銀杏葉水提液進(jìn)行澄清凈化以去除雜質(zhì)，達(dá)到 提高粗品黃酮和黃酮苷的有效成分含量的目的。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的銀杏葉中提取粗品黃酮和黃酮糖苷的方法，利用絮凝澄清法處理 銀杏葉水提液；在醇沉之前凈化；使用具有選擇性吸附作用的殼聚糖 作為銀杏葉水提液的澄清劑。所述的銀杏葉中提取粗品黃酮和黃酮糖苷的方法，在銀杏葉水提 液醇沉法提取粗品黃酮和黃酮糖苷之前使用絮凝法除雜。所述的銀杏葉中提取粗品黃酮和黃酮糖苷的方法，對銀杏葉水提 液使用選擇性絮凝的方法凈化除雜。本發(fā)明的優(yōu)點與效果是-本發(fā)明通過將殼聚糖絮凝劑用于銀杏葉水提液的凈化除雜，得到 如下結(jié)論1. 本發(fā)明選用的澄清劑殼聚糖對銀杏葉水提液有良好的澄清作 用，絮凝率可達(dá)90%以上。2. 殼聚糖對銀杏葉水提液的絮凝作用具有選擇性，僅絮凝沉降 藥液中的雜質(zhì)，基本不對有效成分起作用，總黃酮損失率低于3%。3. 絮凝法處理的銀杏葉水提液總黃酮含量比水提醇沉法高 5.4%,比醇提法高21%。4. 本發(fā)明選用的澄清劑殼聚糖處理的粗品黃酮和黃酮糖苷呈亮 黃色，品質(zhì)明顯好于傳統(tǒng)方法所得到的粗品黃酮和黃酮糖苷，更適合 制藥。


圖1為本發(fā)明殼聚糖加入量對絮凝效果的影響； 圖2為本發(fā)明總黃酮損失率隨PH值的變化曲線圖；圖3為本發(fā)明溫度對總黃酮損失率影響的關(guān)系曲線； 圖4為本發(fā)明絮凝原理中未加入絮凝劑時膠體溶液的示意圖； 圖5為本發(fā)明絮凝原理中絮凝劑吸附在顆粒上的示意圖； 圖6為本發(fā)明絮凝原理加入絮凝劑攪拌后膠體溶液的示意圖； 圖7為本發(fā)明選擇性絮凝前兩種性質(zhì)不同顆粒膠體溶液示意圖； 圖8為本發(fā)明膠體溶液選擇性絮凝后示意圖； 圖9a為本發(fā)明殼聚糖絮凝作用架橋的機理示意圖； 圖％為本發(fā)明殼聚糖絮凝作用電荷中和作用示意圖； 圖9c為本發(fā)明殼聚糖絮凝作用網(wǎng)捕巻掃示意圖。
具體實施方式
下面參照附圖對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。 銀杏葉水提液的特點和銀杏葉水提液的醇沉法 在銀杏葉水提液中存在兩##質(zhì)不同的膠體顆粒，有效成分膠體 和雜質(zhì)膠體，其中有效成分膠體的粒度遠(yuǎn)小于雜質(zhì)膠體的粒度。醇沉法是中藥現(xiàn)代生產(chǎn)的常用方法，它主要利用蛋白質(zhì)、淀粉、 多糖等雜質(zhì)不溶于醇，而中藥有效成分溶于醇的性質(zhì)來實現(xiàn)有效成份 和雜質(zhì)分離的。醇沉法分水提醇沉法和醇提法兩種。水提醇沉法一般 將中藥水提液濃縮后加入醇，使藥液的醇濃度超過80%，這時不溶于 醇的雜質(zhì)就沉降出來，而有效成分溶于醇液中，實現(xiàn)了有效成份的分 離。由于銀杏葉水提液中雜質(zhì)膠體顆粒不溶于醇，有效成分膠體顆粒 溶于醇，因此采用水提液醇沉法得到純凈的粗品黃酮和黃酮糖苷。 絮凝澄清法原理絮凝澄清技術(shù)是一種新興的中藥生產(chǎn)技術(shù)，它利用無毒的絮凝劑 吸附中藥水提液中不能沉降的微小的雜質(zhì)顆粒，使之結(jié)合成較大的能夠沉降的絮團(tuán)來凈化中藥水提液，如圖4、 5、 6所示，絮凝劑加入膠體溶液后吸附在膠體顆粒上，經(jīng)機械脫水(攪拌)形成絮團(tuán)并沉降， 絮凝法在一些中藥生產(chǎn)中已取得成功，但還沒有應(yīng)用到銀杏葉生產(chǎn)的 報道。對于有效成分難溶于水的中藥水提液(有效成分在水提液中和雜 質(zhì)一樣呈膠體存在)，應(yīng)該使用選擇性絮凝的方法實現(xiàn)去除雜質(zhì)的目的，選擇性絮凝的原理如圖7、 8所示，絮凝劑只吸附絮凝膠體溶液 (具有兩種以上性質(zhì)不同的膠體顆粒)中的一種膠體顆粒，而保留其它種類的顆粒。殼聚糖對銀杏葉水提液具有選擇性絮凝吸附作用 殼聚糖作為銀杏葉水提液的澄清劑具有選擇性絮凝吸附作用，它只絮凝吸附雜質(zhì)膠體顆粒，而對有效成分膠體顆粒不產(chǎn)生吸附作用，從而實現(xiàn)了選擇性的絮凝沉降雜質(zhì)而保留有效成分的目的，為醇沉法提取較純凈的粗品黃酮和黃酮糖苷提供了條件。殼聚糖作為絮凝劑兼有電荷中和絮凝及吸附絮凝的雙重作用一方面通過電荷中和而使膠體顆粒脫穩(wěn)并形成細(xì)小的凝聚體；另一方面 通過高分子架橋作用使這些凝聚體形成大體積的絮團(tuán)。在絮凝銀杏葉水提液過程中，由于殼聚糖分子鏈上分布著大量的 游離羥基和氨基，在稀酸溶液中氨基容易質(zhì)子化，從而使殼聚糖分子 鏈上帶有大量的正電荷，成為一種可溶性的聚電解質(zhì)，具有陽離子絮 凝劑的作用。而銀杏葉水提液中的雜質(zhì)顆粒帶有負(fù)電荷，剛好構(gòu)成了異種電荷的吸附絮凝。殼聚糖絮凝劑對銀杏葉水提液的絮凝作用，首先通過靜電作用被 吸引到銀杏葉水提液中的粒子上，并在不同的粒子間架橋，然后再通 過電荷中和和雙電層的壓縮作用形成了較大的絮團(tuán)，在絮團(tuán)的下沉過 程中不斷的巻掃水提液中的細(xì)小顆粒，最后形成絮狀沉淀，達(dá)到澄清水提液的目的。如圖9a 9c所示為殼聚糖絮凝劑對銀杏葉水提液的 絮凝作用三種原理圖。 銀杏葉提取液的制備稱取銀杏葉藥粉C100目過濾)50g放入1000mL燒瓶中，先向燒瓶 中加入500mL溫水(35°C 45°C)浸泡約20min，然后加熱至沸騰， 煎煮lh，停止加熱，冷卻后用篩網(wǎng)(200目)三層過濾，將濾渣擠至 半干，再次放入燒瓶中，向燒瓶中加入400mL熱水，繼續(xù)加熱至沸 騰，lh后停止加熱，冷卻，過濾，擠干藥渣，合并兩次濾液，并采 用稀釋或蒸發(fā)濃縮的辦法，保證生藥濃度為0.1g/mL。殼聚糖溶液的制備用1%的乙酸溶液配制成濃度為1%的殼聚糖溶液，充分溶脹后作 為絮凝劑立即使用，以免在稀酸中緩慢水解而影響絮凝效果。水提醇沉法操作方法取銀杏葉提取液50mL加熱進(jìn)行濃縮，然 后加入適量的無水乙醇，使得藥液濃度為0.1g/raL，邊加邊攪拌，靜 置24h后去除沉淀，即可得到純凈的粗品黃酮和黃酮苷。
權(quán)利要求
1.銀杏葉中提取粗品黃酮和黃酮糖苷的方法，其特征在于利用絮凝澄清法處理銀杏葉水提液；在醇沉之前凈化；使用具有選擇性吸附作用的殼聚糖作為銀杏葉水提液的澄清劑。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的銀杏葉中提取粗品黃酮和黃酮糖苷的 方法，其特征在于在銀杏葉水提液醇沉法提取粗品黃酮和黃酮糖苷之 前使用絮凝法除雜。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的銀杏葉中提取粗品黃酮和黃酮糖苷的 方法，其特征在于對銀杏葉水提液使用選擇性絮凝的方法凈化除雜。
全文摘要
銀杏葉中提取粗品黃酮和黃酮糖苷的方法，涉及一種藥材的提取方法，特別是涉及一種中藥有效成分的提取與凈化的方法。利用絮凝澄清法處理銀杏葉水提液；在醇沉之前凈化；使用具有選擇性吸附作用的殼聚糖作為銀杏葉水提液的澄清劑。在銀杏葉水提液醇沉法提取粗品黃酮和黃酮糖苷之前使用絮凝法除雜。對銀杏葉水提液使用選擇性絮凝的方法凈化除雜。本發(fā)明選用的澄清劑殼聚糖處理的組品黃酮和黃酮糖苷呈亮黃色，品質(zhì)明顯好于傳統(tǒng)方法所得到的粗品黃酮和黃酮糖苷，更適合制藥。
文檔編號A61K36/16GK101224224SQ20081001001
公開日2008年7月23日 申請日期2008年1月2日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月2日
發(fā)明者張建偉, 范紅偉, 圓 袁 申請人:沈陽化工學(xué)院