專利名稱：：用于治療和預(yù)防再狹窄的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及通過抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖而具有治療和/或預(yù)防再狹窄的療效的藥物組合物，更具體地涉及包括以下的藥物組合物(l)治療有效量的式1化合物和式2化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前體藥物、溶劑合物或異構(gòu)體，和(b)藥學(xué)可接受的載體、稀釋劑或賦形劑或其任何組合。
背景技術(shù)：
：血管平滑肌細(xì)胞增殖，其作為對血管壁損傷的應(yīng)答，是指在動脈硬化中被顯著地觀察到的一種現(xiàn)象，其在動脈內(nèi)膜中由于脂質(zhì)所引起的血管壁損傷而顯示繼發(fā)性變化。因此，血管平滑肌細(xì)胞增殖已知是動脈粥樣硬化的主要原因。另外，血管平滑肌細(xì)胞增殖是在外科手術(shù)諸如血管成形術(shù)、搭橋術(shù)或血管移植中的已知的嚴(yán)重問題，這些方法是目前用于恢復(fù)由于動脈硬化而變窄的血管的功能的最好方法。因此，為了預(yù)防和治療動脈硬化，血管平滑肌細(xì)胞增殖被認(rèn)為是非常重要的因素，并且因此，目前正在積極地對血管平滑肌細(xì)胞增殖進(jìn)行研究。最近，已知在細(xì)胞能量代謝中起到關(guān)鍵作用的AMP活化蛋白激酶(AMPK)的效果已被報道為，增加的AMPK活性足以抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖。在這一點上，NAD是增加AMPK活性的多種因子中的重要因子，并且NAD(P)H:奎寧氧化還原酶l(NQOl)是提高細(xì)胞中NAD的主要因子之一。NAD(P)H:醌氧化還原酶(EC1.6.99.2)也被稱作DT-黃遞酶、醌還原酶、甲萘醌還原酶、維生素K還原酶或偶氮染料還原酶，并且這些NQO以兩種同工型NQOl和NQ02存在(ROM.J.INTERN.MED.2000-2001，第38-39巻，第33-50頁)。NQO是黃素蛋白并且催化醌或醌衍生物的的雙電子還原和去毒。NQO的活性防止形成具有極高反應(yīng)性的醌代謝物，使苯并(d)芘和醌去毒，并削弱鉻的毒性。NQO的活性在所有種類的組織中都被發(fā)現(xiàn)，但是因組織與組織的不同而具有差別。通常，NQO的高水平表達(dá)在癌細(xì)胞、肝、胃和腎組織中被證實。NQO基因表達(dá)由生物體內(nèi)異物、抗氧化劑、氧化劑、重金屬、紫外線、射線照射等所觸發(fā)。NQO是由氧化應(yīng)激所誘導(dǎo)的多種細(xì)胞防衛(wèi)機(jī)制的一部分。與這種細(xì)胞防衛(wèi)機(jī)制有關(guān)的相關(guān)基因表達(dá)，包括NQO基因表達(dá)在內(nèi)，足以保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激、自由基和瘤形成的損傷。NQOl主要分布在上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中。這暗示了NQOl可以擔(dān)當(dāng)對抗被空氣、食管或血管吸收的化合物的防衛(wèi)機(jī)制。新近的研究顯示了NQOl通過氧化還原機(jī)制參與穩(wěn)定細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子p53。NQO使用NADH和NADPH二者作為電子施體。NADPH在生物合成過程中被用作還原劑，NADH被用在產(chǎn)生能量反應(yīng)中。NADPH是牽涉脂肪合成的重要因子，并且棕櫚酸酯的合成需要14個NADPH分子。然而，產(chǎn)生自由基諸如反應(yīng)性氧自由基(ROS)，在此期間，在脂肪合成和能量產(chǎn)生之后殘留的過剩的NAD(P)H，被存在于質(zhì)膜上的被稱作NAD(P)H氧化酶的氧化酶所清除。在肥胖癥和糖尿病中的增加的氧化應(yīng)激的根本原因被認(rèn)為主要是NAD(P)H氧化酶(FreeRadicalBiology&Medicine.Vol.37,No1,115-123,2004)。還已發(fā)現(xiàn)由NAD(P)H氧化酶產(chǎn)生的自由基諸如反應(yīng)性氧自由基(ROS)對于諸如以下的各種疾病的發(fā)病機(jī)理是主要因素癌，心血管疾病，高血壓，動脈硬化，心臟肥大，缺血性心臟病，敗血癥，炎性病況和疾病，血栓形成，腦神經(jīng)疾病(諸如腦中風(fēng)(卒中)，阿爾茨海默病和帕金森病)，衰老加速(J.Pharm.9Pharmacol.2005,57(1):111-116)。因此，當(dāng)體內(nèi)或體外的NAD+/NADH和NADP+/NADPH的比降低時，則剩余過剩的NADH和NADPH分子，它們被用于脂肪生物合成過程。另外，因為過剩的NADH和NADPH當(dāng)它們過量存在時也被用作引起反應(yīng)性氧物質(zhì)(ROS)產(chǎn)生的主要底物，因此NADH和NADPH可能是包括由ROS所引起的炎性病況和疾病在內(nèi)的重大疾病的致病因素。由于這些原因，據(jù)信當(dāng)可以建立體內(nèi)或體外環(huán)境以確保維持NAD+/NADH和NADP+/NADPH的比以增加的狀態(tài)穩(wěn)定時，可活化由NAD+和NADP+進(jìn)行的脂肪氧化和各種能量消耗(代謝)。最近大量的關(guān)注集中于NA(D)P+。NA(D)P+起到在包括脂肪氧化在內(nèi)的許多代謝中所牽涉的各種酶的底物或輔酶的作用。具體而言，NA(D)P+是牽涉許多生物代謝過程的體內(nèi)物質(zhì)并且被用作包括以下在內(nèi)的多種類型的酶的底物或輔酶NAD+-依賴性DNA連接酶，NAD+-依賴性氧化還原酶，聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)，CD38，AMPK，CtBP和Sir2p家族成員，以及被用作負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)能量代謝、DNA修復(fù)和轉(zhuǎn)錄的各種酶的輔酶。NAD+被發(fā)現(xiàn)在轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、長壽、卡路里限制性介導(dǎo)的疾病中通過上述的體內(nèi)作用而起到關(guān)鍵的作用。因此，NAD(P)VNAD(P)H的比，作為調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)氧化還原態(tài)的主要因素，通常被認(rèn)為是反映有機(jī)體的代謝狀態(tài)的指示器。NAD(P)VNAD(P)H的比根據(jù)代謝過程的不同而異。尤其是，公知NAD+起到代謝調(diào)整物的作用。許多的老化相關(guān)疾病直接或間接地與NAD+的氧化還原態(tài)或NAD(P)+/NAD(P)H的變化有關(guān)。同時，證實了AMP活化蛋白激酶(AMPK)是感知活生物體內(nèi)的能量狀態(tài)、氧化還原態(tài)和磷酸化的程度的蛋白質(zhì)，并且不僅被AMP活化而且也被NAD+所活化(J.Biol.Chem.2004,Dec.17;279(51):52934-9)。通過磷酸化作用被活化的AMPK已據(jù)報道表現(xiàn)出各種功能和作用，諸如抑制脂肪合成，促進(jìn)葡萄糖攝取，促進(jìn)脂肪降解(脂解)和脂肪氧化，促進(jìn)糖酵解，增強(qiáng)胰島素靈敏性，抑制糖原合成，抑制甘油三酯和膽固醇合成，減輕炎癥(抗炎作用)，血管擴(kuò)張活性，心血管系統(tǒng)的功能性改善，線粒體再生和肌肉結(jié)構(gòu)變化，抗氧化功能，抗老化和抗癌效果。另外，由于以上所述的各種活性和功能，AMPK被認(rèn)為是治療諸如以下疾病的靶蛋白肥胖癥，糖尿病，代謝綜合征，脂肪肝，缺血性心臟病，高血壓，退行性腦疾病，高脂血癥，糖尿病并發(fā)癥和勃起功能障礙(Nat.Med.2004Jul;10(7):727-33;Naturereviews3,340-351,2004;禾卩Genes&Development27,1-6，2004》Lee等人(Naturemedicine,13(June),2004)己經(jīng)建議了a-硫辛酸通過抑制下丘腦AMPK活性從而控制食欲可以發(fā)揮抗肥胖效果。他們還報道說a-硫辛酸通過活化肌肉組織內(nèi)的、而非下丘腦內(nèi)的AMPK而促進(jìn)脂肪代謝，并且a-硫辛酸對于治療肥胖癥是治療有效的，因為它通過活化特別是在脂肪細(xì)胞中的UCP-1而促進(jìn)能量消耗。Roger等人(Cell,117,145-151,2004)已建議了AMPK活化因子或丙二?；?輔酶A還原因子可以是用于從這種異常疾病和綜合征中恢復(fù)或預(yù)防這些異常疾病和綜合征的可能的靶標(biāo)。Nandakumar等人(Progressinlipidresearch42，238-256，2003)已經(jīng)推薦了，在缺血性心臟病中，AMPK將是借助于調(diào)節(jié)脂肪和葡萄糖代謝而治療缺血再灌注損傷的靶標(biāo)。Min等人(Am.J.Physiol.GastrointestLiverPhysiol287,Gl-6,2004)已經(jīng)報道說AMPK有效用于調(diào)節(jié)酒精性脂肪肝。Genevieve等人(J.Biol.Chem.279,20767-74,2004)已經(jīng)報道說AMPK抑制在慢性炎性病況或內(nèi)毒素休克(包括肥胖癥相關(guān)糖尿病在內(nèi))中作為炎癥遞質(zhì)的iNOS酶的活性，從而AMPK有效地用于開發(fā)具有能夠增強(qiáng)胰島素敏感性的機(jī)理的新藥物。另外，他們已經(jīng)報道說iNOS活性的抑制通過AMPK的活化而實現(xiàn)，并且因此，這一發(fā)現(xiàn)可在臨床上適用于諸如敗血癥、多發(fā)性硬化、心肌梗死、炎性腸病和胰腺p細(xì)胞功能障礙的疾病。Zing-ping等人(FEBSLetters443，285-289，1999)己經(jīng)報道說AMPK在鼠科動物肌細(xì)胞和心肌細(xì)胞中在Ca-鈣調(diào)蛋白存在的條件下通過磷酸化作用而活化內(nèi)皮NO合酶。這指出AMPK牽涉包括心絞痛在內(nèi)的心臟病。Javier等人(Genes&Develop.2004)已經(jīng)報道說通過限制能量利用可以延長壽命并且這種被延長的壽命以體內(nèi)AMP/ATP比被增加并因此AMPK的ot2亞單位被AMP活化的方式來實現(xiàn)。因此，他們已經(jīng)建議了AMPK可起到用于檢測壽命延長和能量水平以及胰島素樣信號信息之間的關(guān)系的探測器的作用。同時，具有常規(guī)的萘醌基化合物的一些藥物組合物是已知的。其中，P-拉杷醌(lapachone)是從南美洲當(dāng)?shù)氐膌apacho樹(單葉風(fēng)鈴木(ra&6w/aave^M^ae))中獲得的拉帕醇由來的天然存在植物產(chǎn)品。董尼酮和a-董尼酮也得自南美洲當(dāng)?shù)氐牡鞘虾猛擒奶?&r印tocflw^^"m7)的葉子。因為在古代的南美洲，這些天然的三環(huán)萘醌衍生物已被廣泛用作抗癌藥物和用于治療在南美洲中作為典型地方病的恰加斯氏病(Chagasdisease),并且已知發(fā)揮優(yōu)異的治療效果。特別地，因為它們作為抗癌藥物的藥理作用通常被西方國家所已知，因此這些三環(huán)萘醌衍生物最近引起人們的相當(dāng)多的注意。事實上，如美國專利No.5,969,163所公開的，這種三環(huán)萘醌衍生物化合物目前正被許多科研小組和機(jī)構(gòu)開發(fā)作為一類抗癌藥物。然而，盡管進(jìn)行許多的調(diào)查和研究，但是這些萘醌化合物借助于增加NAD和AMPK的活性具有用于治療或預(yù)防與用于動脈硬化的外科手術(shù)有關(guān)的再狹窄的治療效力或治療由血管平滑肌細(xì)胞增殖引起的動脈硬化的事實仍然是未知的。發(fā)明概述通過基于如上所述的事實所進(jìn)行的許多廣泛的和密集的研究和實驗，本發(fā)明的發(fā)明人新證實了借助于具體化合物的采用來活化NQOl通過抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖而有效用于預(yù)防和/或治療與用于治療動脈硬化的外科手術(shù)有關(guān)的再狹窄?；谶@些發(fā)現(xiàn)完成了本發(fā)明。因此，本發(fā)明的目的是提供一種藥物組合物，其包括作為活性成分的化合物，該化合物具有用于治療和預(yù)防與用于治療動脈硬化的外科手術(shù)有關(guān)的再狹窄的治療有效性。根據(jù)本發(fā)明的一方面，上述目的和其它目的可通過提供用于治療和/或預(yù)防再狹窄的藥物組合物來實現(xiàn)，該藥物組合物包括(a)治療有效量的一種或多種選自下式1和下式2所示的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前體藥物、溶劑合物或異構(gòu)體R,和R2各自獨立地是氫，鹵素，氨基，烷氧基，或Q-C6低級烷基或烷氧基，或者R,和R2可連在一起形成被取代的或未被取代的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)可以是飽和的或部分不飽和的或完全不飽和的；R3、R4、R5、R^、R7和Rs各自獨立地是氫，羥基，氨基，C廣C20垸基，烯或烷氧基，C4-C2()環(huán)烷基，雜環(huán)烷基，芳基或雜芳基，R3到Rg的兩個取代基可連在一起形成可以是飽和的或部分不飽和或完全不飽和的環(huán)狀結(jié)構(gòu)；X選自C(R)(R，)，N(R")，O和S，優(yōu)選O或S，更優(yōu)選O，其中R'是氫或Q-C6低級烷基；Y是C，S或N，條件是當(dāng)Y是S時則R7和Rs什么都不是并且當(dāng)Y是N時則R7是氫或CrC6低級垸基并且R"十么都不是；和n是0或l，條件是當(dāng)n是0時，與n相鄰的碳原子通過直接鍵形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)；和(b)藥學(xué)可接受的載體、稀釋劑、或賦形劑或其任何組合。為了證實式1化合物對再狹窄的治療效果，本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)進(jìn)行了實驗。并且，結(jié)果是，證實了當(dāng)式1或2的化合物被給予到血管平滑肌細(xì)胞時，其提高NQOl表達(dá)，并且與NQOl表達(dá)相一致的增加的NAD+提高AMPK活性從而抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖。另外，還證實了化合物的給藥在進(jìn)行用于治療動脈硬化的球囊血管成形術(shù)后抑制了內(nèi)膜增生。在這方面，式1或2的化合物被認(rèn)為對于預(yù)防和治療與通常在進(jìn)行球囊血管成形術(shù)后產(chǎn)生的與血管平滑肌細(xì)胞增殖有關(guān)的再狹窄和與在由脂質(zhì)導(dǎo)致的血管壁損傷后的與血管平滑肌細(xì)胞增殖有關(guān)的動脈硬化具有優(yōu)異效果。本公開使用的術(shù)語"藥學(xué)可接受的鹽"是指化合物的不對其所被給予的有機(jī)體產(chǎn)生顯著的刺激并且不喪失該化合物的生物活性和性質(zhì)的形式。藥學(xué)可接受的鹽的實例包括該化合物與包含藥學(xué)可接受的陰離子并且能夠形成無毒的酸加成鹽的酸所形成的酸加成鹽，所述酸為14例如無機(jī)酸，諸如鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸、氫溴酸和氫碘酸；有機(jī)含碳酸，諸如酒石酸、甲酸、枸櫞酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、葡糖酸、苯甲酸、乳酸、富馬酸、馬來酸和水楊酸；或磺酸，諸如甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸和對甲苯磺酸。具體而言，藥學(xué)可接受的羧酸鹽的實例包括含有堿金屬或堿土金屬諸如鋰、鈉、鉀、鈣和鎂的鹽，含有氨基酸諸如精氨酸、賴氨酸和胍的鹽，含有有機(jī)堿諸如二環(huán)己胺、N-甲基-D-葡糖胺、三(羥基甲基)甲胺、二乙醇胺、膽堿和三乙胺的鹽。本發(fā)明的化合物可通過本領(lǐng)域公知的常規(guī)方法被轉(zhuǎn)化為其鹽。本文使用的術(shù)語"前體藥物"是指在體內(nèi)可被轉(zhuǎn)化為母體藥物的試劑。前體藥物經(jīng)常是有用的，因為，在一些部位，它們可比母體藥物更容易地被給予。例如，它們通過口服給藥可具有生物利用度，而母體化合物可能并非如此。前體藥物與母體藥物相比還可具有在藥物組合物中的改善的溶解度。前體藥物的非限制性實例是作為酯("前體藥物")被給予的本發(fā)明的化合物從而幫助轉(zhuǎn)運通過其中水溶性對移動不利的細(xì)胞膜，然后當(dāng)其位于其中水溶性是有益的細(xì)胞內(nèi)部時其被代謝性水解成羧酸即活性實體。前體藥物的另一個實例可能是與酸性基團(tuán)鍵合的短肽(聚胺酸)，其中所述肽被代謝掉以暴露出活性部分。作為這種前體藥物的實例，本發(fā)明的藥物化合物可以包括作為活性物質(zhì)的由下式la表示的前體藥物R!、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、X和n具有式l中的定義。R9和R1Q各自獨立地是-SCVNa+或由下式A表示的取代基或其鹽，Ru和R,2各自獨立地是氫或被取代的或未被取代的d-C2o直鏈烷基或d-C2。支鏈烷基，Ru選自以下的i)到viii)的基團(tuán)-;、每.ii)被取代的或未被取代的CrC2o直鏈垸基或d-C2o支鏈烷基；iii)被取代的或未被取代的胺；iv)被取代的或未被取代的C3-Cu)環(huán)烷基或C3-q。雜環(huán)烷基；v)被取代的或未被取代的C4-do芳基或CVCK)雜芳基；vi)-(CRR，-NR"CO)廣Rm，其中R、R，和R"各自獨立地是氫或被取代的或未被取代的CpC20直鏈烷基或CVC^支鏈垸基，R14選自氫，被取代的或未被取代的胺，環(huán)烷基，雜環(huán)垸基，芳基和雜芳基，l選自15;Vii)被取代的或未被取代的羧基；viii)-OS03-Na+;k選自020，條件是當(dāng)k是O時，Rn和Ru什么都不是并且Rn直接結(jié)合于羰基。本文使用的術(shù)語"溶劑合物"是指本發(fā)明的化合物或其鹽進(jìn)一步包括化學(xué)計量的或非化學(xué)計量的量的通過非共價分子間作用力與其結(jié)合的溶劑。優(yōu)選的溶劑是揮發(fā)性的、無毒的和/或?qū)τ谌说慕o藥是可接受的。當(dāng)溶劑是水時，則溶劑合物是指水合物。本文使用的術(shù)語"異構(gòu)體"是指本發(fā)明的化合物或其鹽，其具有相同的化學(xué)式或分子式，但是在光學(xué)上或空間上具有不同的構(gòu)型。D型旋光異構(gòu)體和L型旋光異構(gòu)體可存在于式1中，根據(jù)被選擇的R3~R8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其類型的取代基的不同而異。除非另作說明，否則術(shù)語"式1或2的化合物"意在包涵化合物自身及其藥學(xué)可接受的鹽、前體藥物、溶劑合物和異構(gòu)體。本文使用的術(shù)語"垸基"是指脂肪族烴基。烷基部分可以是"飽和的烷基"基團(tuán)，這意味著不包含任何的烯或炔部分。作為替代，垸基部分也可是"不飽和的烷基"部分，這意味著其包含至少一個烯或炔部分。術(shù)語"烯"部分是指這樣的基團(tuán)，在該基團(tuán)中，至少兩個碳原子形成至少一個碳-碳雙鍵，并且"炔"部分是指這樣的基團(tuán)，在該基團(tuán)中，至少兩個碳原子形成至少一個碳-碳三鍵。烷基部分，無論是是被取代或未被取代的，可以是支鏈的、直鏈的或環(huán)狀的。本文使用的術(shù)語"雜環(huán)烷基"是指其中一個或多個環(huán)碳原子被氧、氮或硫代替的碳環(huán)基團(tuán)，并且其包括例如但不限于呋喃、噻吩、吡咯、吡咯啉、吡咯烷、喊唑、噻唑、咪唑、咪唑啉、咪唑垸、吡唑、吡唑啉、吡唑垸、異噻唑、三唑、噻二唑、吡喃、吡啶、哌啶、嗎啉、硫代嗎啉、噠嗪、嘧啶、吡嗪、哌嗪和三嗪。本文使用的術(shù)語"芳基"是指具有至少一個具有共軛^電子系統(tǒng)的環(huán)的芳香取代基團(tuán)并且包括碳環(huán)芳基(例如苯基)和雜環(huán)芳基(例如吡啶)基團(tuán)。該術(shù)語包括單環(huán)的或稠環(huán)的多環(huán)(S卩，共享相鄰的碳原子對的環(huán))基團(tuán)。本文使用的術(shù)語"雜芳基"是指包含至少一個雜環(huán)的芳基。芳基或雜芳基的實例包括但不限于苯基、呋喃、吡喃、吡啶基、嘧啶基和三唑基。本發(fā)明的式1或2中的RpR2、R3、R4、R5、R6、R和Rg可任選被取代。當(dāng)被取代時，取代基團(tuán)是一個或多個分別地且獨立地選自以下的基團(tuán)環(huán)烷基，芳基，雜芳基，雜脂環(huán)基，羥基，垸氧基，芳基氧基，巰基，垸基硫基，芳基硫基，氰基，鹵素，羰基，硫代羰基，O-氨甲?；?，N-氨甲?；?，O-硫代氨甲酰基，N-硫代氨甲酰基，C-酰胺基，N-酰胺基，S-磺酰胺基，N-磺酰胺基，C-羧基，O-羧基，異氰基，硫氰基，異硫氰基，硝基，甲硅垸基，三鹵代甲磺?；约鞍ū灰蝗〈投〈陌被趦?nèi)的氨基，及其被保護(hù)的衍生物。另外，在式la中的Ru、Ru和Rn也可被上述取代基所取代，并且當(dāng)被取代時，它們可被上述取代基所取代。在式l的化合物中，優(yōu)選下式3和4的化合物。式3的化合物是其中n是0且相鄰碳原子通過它們之間的直接鍵形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)(呋喃環(huán))的化合物，并且在以下通常被稱為"呋喃化合物"或"呋喃并-o-萘醌衍生物"。式4的化合物是其中n是1的化合物并且在以下通常被稱為"吡喃化合物"或"吡喃并-o-萘醌"。18<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>(4)。在式1中，每個Ri和R2特別優(yōu)選是氫。在式3的呋喃化合物中，特別優(yōu)選其中Rt、112和R4是氫的式3a的化合物或者其中R"R2和R6是氫的式3b的化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>(3a)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>(3b)。另外，在式4的吡喃化合物中，特別優(yōu)選其中Ri、R2、R5、R6、仗7和R8是氫的式4a的化合物或者其中&和R2連在一起形成被取代的或未被取代的環(huán)狀結(jié)構(gòu)的式4b或4c的化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>在式2的化合物中，優(yōu)選但不限于下式2a和2b的化合物。式2a的化合物是其中n是0且相鄰碳原子借助于它們之間的直接鍵形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)并且Y是C的化合物。(2a)'式2b的化合物是其中n是1且Y是C的化合物。0R8R7(2b)。在式2a或2b中，RpR2、R3、R4、R5、R6、R7、Rg和X如式2中的定義。本文使用的術(shù)語"藥物組合物"是指式1或2的化合物與其它化學(xué)組分諸如稀釋劑或載體的混合物。藥物組合物幫助給藥該化合物到有機(jī)體。給予化合物的各種技術(shù)是本領(lǐng)域已知的并且包括但不限于口服、注射、氣霧劑、非腸道和局部給藥。藥物組合物還可通過使感興趣的化合物與酸諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸等反應(yīng)而獲得。對于治療和預(yù)防再狹窄是治療有效的有效成份包括所有的上式所示的化合物，在后文中被稱為"活性成分"。術(shù)語"治療有效量"是指一定量的活性成分，當(dāng)給予化合物時，該量有效減輕或減少需要治療的疾病的一個或多個癥狀到某些程度，或者推遲需要預(yù)防的疾病的臨床標(biāo)志或癥狀的開始。因此，治療有效量是指表現(xiàn)出以下效果的活性成分的量(i)反轉(zhuǎn)疾病的進(jìn)程的速率；(ii)在某種程度上抑制疾病的進(jìn)一步發(fā)展；和/或，(iii)在某種程度上緩解(或優(yōu)選消除)與疾病有關(guān)的一種或多種癥狀。治療有效量可釆用在已知的用于需要治療的疾病的體內(nèi)和體外模型系統(tǒng)中用該化合物進(jìn)行實驗而憑經(jīng)驗進(jìn)行確定?；钚猿煞值闹苽湓诒景l(fā)明的藥物組合物中，作為活性物質(zhì)的式1或2的化合物，正如下文所示例的，可以通過本領(lǐng)域已知的常規(guī)方法和/或各種基于有機(jī)化學(xué)合成領(lǐng)域中的一般技術(shù)和實踐的方法制備。如下所述的制備方法僅僅是示例性的并且還可使用其它方法。因此，本發(fā)明的范圍不受以下方法的限制。制備方法1:通過酸催化的環(huán)化合成活性物質(zhì)具有相對簡單的化學(xué)結(jié)構(gòu)的三環(huán)萘醌(吡喃并-O-萘醌和呋喃并-O-萘醌)衍生物通常借助于使用硫酸作為催化劑進(jìn)行的環(huán)化以比較高的收率被合成，基于這一方法，可以合成出許多的式1的化合物。更具體地說，上述合成方法可以總結(jié)如下。也就是說，當(dāng)2-羥基-l，4-萘醌與各種烯丙基溴化物或其等價物在堿存在的條件下反應(yīng)時，同時獲得C-烷基化產(chǎn)物和O-烷基化產(chǎn)物。也可能僅僅根據(jù)反應(yīng)條件合成出兩個衍生物中的任一種。因為O-烷基化衍生物通過使用溶劑諸如甲苯或二甲苯對O-垸基化衍生物進(jìn)行回流經(jīng)過克萊森重排而被轉(zhuǎn)化為另一種類型的C-烷基化衍生物，因此，有可能獲得各種類型的3-取代的-2-羥基-l,4-萘醌衍生物。如此獲得的各種類型的C-垸基化衍生物可經(jīng)歷采用硫酸作為催化劑進(jìn)行的環(huán)化，從而能夠合成屬于式1的化合物的吡喃并-O-萘醌或呋喃并-O-萘醌衍生物。制備方法2:使用3-亞甲基-l,2，4-[3H]萘三酮的狄爾斯-阿爾德反應(yīng)根據(jù)V.Nair等人在TetrahedronLett.42(2001)，4549-4551中的教導(dǎo)，據(jù)報導(dǎo)，許多的吡喃并-o-萘醌衍生物可以通過使3-亞甲基-l,2,4-[3H]萘三酮(其當(dāng)共同加熱2-羥基-l,4-萘醌和甲醛時被產(chǎn)生)經(jīng)歷與各種烯烴化合物進(jìn)行的狄爾斯-阿爾德反應(yīng)可相對容易地被合成出。這一方法的優(yōu)點在于，與采用硫酸作為催化劑誘導(dǎo)環(huán)化的方式相比，各種形式的吡喃并-o-萘醌衍生物可以采用相對簡單化的方式被合成出。制備方法3:通過自由基反應(yīng)進(jìn)行鹵代垸基化和環(huán)化在合成隱丹參醌和15,16-二氫-丹參酮中所用的相同方法也可被方便地用來合成呋喃并-o-萘醌衍生物。也就是說，根據(jù)A.C.Baillie等人(J.Chem.Soc.(C)1968,48-52)的教導(dǎo)，得自3-鹵代丙酸或4-鹵代丁酸衍生物的2-鹵代乙基或3-鹵代乙基化學(xué)物質(zhì)可與2-羥基-l,4-萘醌反應(yīng)，從而合成出3-(2-卣代乙基或3-卣代丙基)-2-羥基-l,4-萘醌，其然后在適當(dāng)?shù)乃嵝源呋瘎l件下經(jīng)歷環(huán)化，以合成出各種吡喃并-o-萘醌或呋喃并-o-萘醌衍生物。制備方法4:通過狄爾斯-阿爾德反應(yīng)進(jìn)行4,5-苯并呋喃二酮的環(huán)化在合成隱丹參醌和15，16-二氫-丹參酮中所用的另一個方法可以是由J.K.Snyder等人(TetrahedronLetters28(1987),3427-3430)所教導(dǎo)的方法。根據(jù)這一方法，呋喃并-o-萘醌衍生物可以通過在4,5-苯并呋喃二酮衍生物和各種二烯衍生物之間經(jīng)過狄爾斯-阿爾德反應(yīng)進(jìn)行環(huán)加成被合成出。另外，基于以上所述的制備方法，采用相應(yīng)的合成法，根據(jù)取代基類型的不同而異，可以合成出各種衍生物。如此合成的衍生物的具體實例和方法在下表1中示出。具體的制備方法將在以下的實施例中描述。[表1]1oG15H14C)3242.27方法102Ci5H1403242.27方法13C15H14O3242.27方法1<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>本發(fā)明的藥物組合物可采用自身已知的方法被制備，例如，借助于常規(guī)的混合、溶解、造粒、制糖衣丸、磨光、乳化、包封、截留或凍干過程。本發(fā)明的藥物組合物可另外包含藥學(xué)可接受的載體、稀釋劑或賦形劑或其任何組合。因此，本發(fā)明的藥物組合物可以常規(guī)方式被制備，采用一種或多種包括幫助將活性化合物加工成藥學(xué)可使用的制劑的賦形劑和助劑在內(nèi)的藥學(xué)可接受的載體進(jìn)行。該藥物組合物幫助將化合物給藥至有機(jī)體。術(shù)語"載體"是指幫助將化合物并入細(xì)胞或組織內(nèi)的化學(xué)物質(zhì)。例如，二甲亞砜(DMSO)是通常被采用的載體，因為其幫助使許多有機(jī)化合物被攝取進(jìn)入有機(jī)體的細(xì)胞或組織內(nèi)。術(shù)語"稀釋劑"是指在水中稀釋的化學(xué)物質(zhì)，其將感興趣的化合物溶解以及使得該化合物的生物學(xué)活性形式是穩(wěn)定的。溶解在緩沖溶液中的鹽在本領(lǐng)域中用作稀釋劑。一種常用的緩沖溶液是磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)，因為其摹擬人體液的離子強(qiáng)度條件。因為緩沖鹽可以在低濃度下控制溶液的pH，因此緩沖液稀釋劑很少地改變化合物的生物活性。本文所述的化合物可以自身的形式或以它們與其它活性成分或適當(dāng)?shù)妮d體或賦形劑混合的藥物組合物的形式(如在聯(lián)合治療中的那樣)被給藥至人患者?；衔锏呐渲坪徒o藥技術(shù)可見于"Remington'sPharmaceuticalSciences,"MackPublishingCo.,Easton，PA,第18版,1990。給予化合物的各種技術(shù)是本領(lǐng)域已知的并且包括但不限于口服、注射、氣霧劑、非腸道和局部給藥。藥物組合物還可通過使感興趣的化合物與酸諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸等反應(yīng)而獲得。化合物可釆用本領(lǐng)域已知的許多方法進(jìn)行配制，優(yōu)選被配制成藥學(xué)可接受的口服、外用、透粘膜和可注射的制劑，更優(yōu)選被配制成口服制劑。本發(fā)明的用于口服給藥的藥物組合物優(yōu)選被制備成腸靶向制劑。通常，口服藥物組合物在口服給藥時經(jīng)過胃，大部分被小腸所吸收，然后散布于所有的體組織內(nèi)，從而發(fā)揮對靶組織的治療效果。在這一點上，本發(fā)明的口服藥物組合物借助于活性成分的腸靶向制劑而增強(qiáng)了作為活性成分的式1或2化合物的生物吸收和生物利用度。更具體地說，當(dāng)本發(fā)明的藥物組合物中的活性成分主要在胃內(nèi)和小腸上部被吸收時，被吸收進(jìn)入體內(nèi)的活性成分直接經(jīng)歷肝代謝，這伴隨著活性成分的大量降解，因此，不可能發(fā)揮所需水平的治療效果。另一方面，預(yù)期當(dāng)活性成分主要地在小腸下部周圍和下游被吸收時，被吸收的活性成分經(jīng)由淋巴管移動到靶組織，從而發(fā)揮高的治療效果。另外，因為藥物以本發(fā)明的藥物組合物靶向于直到作為消化過程的最終目的地的結(jié)腸的方式進(jìn)行構(gòu)建，因此有可能增加藥物的體內(nèi)潴留時間并且還有可能使得當(dāng)藥物被給藥到體內(nèi)時由于身體代謝而可能發(fā)生的藥物分解最小化。結(jié)果是，有可能改善藥物的藥代動力學(xué)性質(zhì)，顯著降低治療疾病所必需的活性成分的必需有效劑量，并且甚至給予痕量的活性成分時也可獲得所需的治療效果。另外，在口服藥物組合物中，還有可能通過降低由于胃內(nèi)pH變化和飲食攝取模式所帶來的生物利用度在個體間和個體內(nèi)的差異而使得藥物吸收差異最小化。因此，本發(fā)明的腸耙向制劑被構(gòu)建為使得活性成分主要地在小腸和大腸內(nèi)被吸收，更優(yōu)選在與小腸下部所對應(yīng)的空腸、回腸和結(jié)腸內(nèi)被吸收，特別優(yōu)選在回腸或結(jié)腸內(nèi)被吸收。腸靶向制劑可通過許多方法利用消化道的許多生理參數(shù)進(jìn)行設(shè)計。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方案中，腸靶向制劑可如下制備(l)基于pH敏感聚合物的制劑方法，(2)基于可被腸特異性細(xì)菌酶分解的生物可降解的聚合物的制劑方法，(3)基于可被腸特異性細(xì)菌酶分解的生物可降解的基質(zhì)的制劑方法，或(4)在給定的滯后時間后允許釋放藥物的制劑方法，及其任何組合。具體而言，(l)采用pH敏感聚合物的腸靶向制劑是基于消化道的pH變化的藥物遞送系統(tǒng)。胃的pH在1-3的范圍內(nèi)，而小腸和大腸的pH值與胃的pH相比為7或更高?；谶@一事實，pH敏感聚合物可被使用的目的是為了確保藥物組合物到達(dá)更靠下的腸部分而不受消化道的pH波動的影響。pH敏感聚合物的實例可包括但不限于選自以下的至少一種甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物(Eudragit:RohmPharmaGmbH的注冊商標(biāo))、羥基丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯(HPMCP)及其混合物。優(yōu)選地，pH敏感聚合物可通過包衣法被附加。例如，聚合物的附加可以通過將該聚合物混合在溶劑中以形成水性包衣懸浮液、將所得的包衣懸浮液進(jìn)行噴霧以形成薄膜包衣、并對該薄膜包衣進(jìn)行干燥而進(jìn)行。(2)使用可被腸特異性細(xì)菌酶分解的生物可降解的聚合物的腸靶向制劑基于采用可由腸細(xì)菌產(chǎn)生的特異性酶的降解能力。特異性酶的實例可包括偶氮還原酶、細(xì)菌水解酶、糖苷酶、酯酶、多糖酶等等。當(dāng)希望設(shè)計使用偶氮還原酶作為靶標(biāo)的腸靶向制劑時，生物可降解的聚合物可能是包含偶氮芳香性鏈接的聚合物，例如苯乙烯和甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)的共聚物。當(dāng)該聚合物被附加到包含活性成分的制劑中時，通過偶氮還原酶的作用將該聚合物的偶氮基還原，活性成分可被釋放進(jìn)入腸，偶氮還原酶通過腸細(xì)菌例如脆弱類桿菌(5acZero/de51戶ag〃/50禾卩禾占液真桿菌Cfi^&(3fcer/M附//wojww)牛寺異'性分^^、。當(dāng)希望設(shè)計采用糖苷酶、酯酶或多糖酶作為靶標(biāo)的腸靶向制劑時，生物可降解的聚合物可以是天然存在多糖或其被取代的衍生物。例如，生物可降解的聚合物可以是選自以下的至少一種葡聚糖酯、果膠、淀粉酶、乙基纖維素及其藥學(xué)可接受的鹽。當(dāng)聚合物被附加到活性成分時，通過被腸細(xì)菌例如雙歧桿菌(^y^o^"en'a)和畸形菌體(J^cto^W^^p.)特異性分泌的每種酶的作用而將聚合物水解，活性成分可被釋放進(jìn)入腸。這些聚合物是天然物質(zhì)，并且具有低的體內(nèi)毒性風(fēng)險的優(yōu)點。(3)使用可被腸特異性細(xì)菌酶分解的生物可降解的基質(zhì)的腸靶向制劑可以是其中生物可降解的聚合物彼此交聯(lián)并且被附加到活性成分或包含活性成分的制劑中的形式。生物可降解的聚合物的實例可包括天然存在的聚合物諸如硫酸軟骨素、瓜爾膠、脫乙酰殼多糖、果膠等等。藥物釋放的程度可根據(jù)構(gòu)成基質(zhì)的聚合物的交聯(lián)程度的不同而異。除了天然存在的聚合物之外，生物可降解的基質(zhì)還可是基于N-取代的丙烯酰胺的合成水凝膠。例如，可采用通過N-叔丁基丙烯酰胺與丙烯酸的交聯(lián)或通過甲基丙烯酸-2-羥乙酯與4-甲基丙烯?；趸嫉降墓簿酆铣傻乃z作為基質(zhì)。交聯(lián)可以是例如上述的偶氮鏈接，并且制劑可以是其中交聯(lián)密度被保持為以提供用于腸藥物遞送的最佳條件的形式，并且當(dāng)藥物被遞送到腸時該鏈接被降解以與腸粘膜相互作用。另外，(4)在滯后時間后隨著時程釋放藥物的腸靶向制劑是采用允許在預(yù)定時間后與pH變化無關(guān)地釋放活性成分的機(jī)制的藥物遞送系統(tǒng)。為了實現(xiàn)活性藥物的腸釋放，該制劑應(yīng)該耐受胃pH環(huán)境，并且應(yīng)當(dāng)具有在活性成分釋放進(jìn)入腸之前與藥物從身體被遞送到腸所采用的時段相當(dāng)?shù)?-6小時的靜止相。時間特異性延遲釋放制劑可通過附加從聚環(huán)氧乙烷與聚氨酯的共聚而制備的水凝膠制備。具體而言，延遲釋放制劑可具有這樣的結(jié)構(gòu)，其中在施加藥物到不溶性聚合物之后，當(dāng)附加具有上述組成的水凝膠時，該制劑在停留在胃內(nèi)和小腸的上消化道內(nèi)時吸收水、然后溶脹，并且然后移動到作為下消化道的小腸下部并釋放藥物，藥物的滯后時間根據(jù)水凝膠長度的不同而異。作為聚合物的另一個實例，乙基纖維素(EC)可用于延遲釋放劑型中。EC是不溶性聚合物，并且可充當(dāng)響應(yīng)由于水滲透或由蠕動帶來的腸內(nèi)壓力的改變所導(dǎo)致的溶脹介質(zhì)的膨脹而用于延遲藥物釋放時間的因素。滯后時間可通過EC的濃度來控制。作為附加實例，羥基丙基甲基纖維素(HPMC)也可用作阻滯劑，其通過控制聚合物的濃度而允許藥物在給定時段后釋放，并可具有5到IO小時的滯后時間。在本發(fā)明的口服藥物組合物中，活性成分可具有高結(jié)晶度的晶體結(jié)構(gòu)、或低結(jié)晶度的晶體結(jié)構(gòu)?；钚猿煞謨?yōu)選具有低結(jié)晶度的晶體結(jié)構(gòu)，這可以解決與式1或2的化合物的微溶有關(guān)的問題，并且增加溶出速率和體內(nèi)吸收速率。本文使用的術(shù)語"結(jié)晶度"被定義為是總化合物的結(jié)晶部分的重量分?jǐn)?shù)并且可通過本領(lǐng)域已知的常規(guī)方法進(jìn)行測定。例如，結(jié)晶度的測量可如下進(jìn)行密度法或沉淀法，該方法通過對結(jié)晶部分和無定形部分的每個密度加上和/或減去適當(dāng)?shù)闹刀@得的事先假設(shè)的預(yù)置值；牽涉熔融熱的測量的方法；其中當(dāng)進(jìn)行X射線衍射分析時通過從X射線衍射強(qiáng)度分布中分離出晶體衍射級分和非結(jié)晶衍射級分來計算結(jié)晶度的X射線法；或從在紅外吸收光譜的結(jié)晶帶之間的寬度的峰值計算結(jié)晶度的紅外線方法。在本發(fā)明的口服藥物組合物中，活性成分的結(jié)晶度優(yōu)選為50%或更低。更優(yōu)選地，活性成分可具有無定形結(jié)構(gòu)，材料的固有的結(jié)晶度從該結(jié)構(gòu)中完全喪失。無定形化合物與結(jié)晶化合物相比表現(xiàn)出比較高的溶解度，并且可以顯著地改善藥物的溶出速率和體內(nèi)吸收速率。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方案中，無定形結(jié)構(gòu)可在將活性成分制成微粒子或細(xì)粒(活性成分的微粉化)期間形成。微粒子可例如如下制備活性成分的噴霧干燥，牽涉形成活性成分與聚合物的熔融物的熔融法，牽涉在將活性成分溶解在溶劑中、形成包含體、溶劑揮發(fā)之后形成活性成分與聚合物的共沉淀物的共沉淀法。優(yōu)選噴霧干燥。即使當(dāng)活性成分不是無定形結(jié)構(gòu)時，S卩，其具有晶體結(jié)構(gòu)或半結(jié)晶結(jié)構(gòu)，借助于機(jī)械研磨將活性成分進(jìn)行微粉化處理變成細(xì)粒，從而由于粒子具有大的比表面積而改善溶解度，因此，得到活性藥物的改善的溶出速率和生物吸收速率。噴霧干燥是通過將活性成分溶解在某些溶劑中并將所得溶液進(jìn)行噴霧干燥而制備細(xì)粒的一種方法。在噴霧干燥期間，化合物的結(jié)晶度的大部分喪失，從而得到無定形態(tài)，因此，獲得了細(xì)粉形式的噴霧燥的產(chǎn)品。機(jī)械研磨是通過施加強(qiáng)力到活性成分粒子上而將活性成分研磨形成細(xì)粒的一種方法。機(jī)械研磨可采用許多粉碎方法諸如噴射研磨、球磨研磨、振動研磨、錘磨等進(jìn)行。特別優(yōu)選的是噴射研磨，其可采用空氣壓力和在低于40'C的溫度下進(jìn)行。同時，與晶體結(jié)構(gòu)無關(guān)，粒狀活性成分的粒徑降低導(dǎo)致比表面積增加，從而增加了溶出速率和溶解度。然而，過小的粒徑使得很難制備具有如此大小的細(xì)粒并還產(chǎn)生導(dǎo)致溶解度降低的粒子的結(jié)塊或聚結(jié)問題。因此，在一個優(yōu)選方案中，活性成分的粒徑范圍為5納米到500微米。在這一范圍內(nèi)，可最大限度地抑制粒子結(jié)塊或聚結(jié)，并且由于粒子的高的比表面積而使得溶出速率和溶解度最大化。優(yōu)選地，表面活性劑可另外地被加入以防止粒子結(jié)塊或聚結(jié)，這一現(xiàn)象可發(fā)生在細(xì)粒形成期間，和/或抗靜電劑可另外地被加入以防止靜電發(fā)生。如有必要，在研磨期間可另外加入吸濕材料。式1或2的化合物傾向于由于水而發(fā)生結(jié)晶，因此，吸濕材料的引入抑制了式1或2的化合物隨時間而發(fā)生的重結(jié)晶并且能保持化合物粒子由于微粉化而具有的增加的溶解度。另外，吸濕材料用于抑制藥物組合物的凝結(jié)和聚結(jié)而不會不利地影響活性成分的治療效果。表面活性劑的實例可包括但不限于陰離子型表面活性劑諸如多庫酯鈉和十二垸基硫酸鈉；陽離子型表面活性劑諸如苯扎氯銨、芐索氯銨和西曲溴銨；非離子型表面活性劑諸如甘油單油酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯和山梨糖醇酐酯；兩性聚合物諸如聚乙烯-聚丙烯聚合物和聚氧乙烯-聚氧丙烯聚合物(泊洛沙姆)，和GducireTM系列(GattefosseCorporation,USA);丙二醇單辛酸酯，油?；垡叶?6-甘油酯，亞油?；垡叶?6-甘油酯，辛酰己?；垡叶?8-甘油酯，丙二醇單月桂酸酯，和聚甘油基-6-二油酸酯。這些物質(zhì)可單獨或以其任何組合的方式使用。吸濕材料的實例可包括但不限于膠態(tài)氧化硅，輕質(zhì)無水硅酸，重質(zhì)無水硅酸，氯化鈉，硅酸鈣，鋁硅酸鉀，鋁硅酸鈣等等。這些材料可單獨或以其任何組合的方式使用。上述的一些吸濕劑還可用作抗靜電劑。表面活性劑、抗靜電劑和吸濕劑可以能夠?qū)崿F(xiàn)上述效果的量被加入，并且這些量可根據(jù)微粉化條件而異進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。優(yōu)選地，以基于活性成分的總重量的0.05到20%使用添加劑。在一個優(yōu)選方案中，在將本發(fā)明的藥物組合物配制成用于口服給藥的制劑期間，可另外加入水溶性聚合物、增溶劑和崩解促進(jìn)劑。優(yōu)選地，可通過將添加劑和粒狀活性成分混合在溶劑中并將所述混合物噴霧干燥將組合物配制成所需劑型。水溶性聚合物通過使得式1或2的化合物分子或粒子的環(huán)境是親水性的從而增強(qiáng)水溶性并優(yōu)選保持活性成分式1或2的化合物的無定形態(tài)而用來幫助防止粒狀活性成分聚結(jié)。優(yōu)選地，水溶性聚合物是pH非依賴性的聚合物，并且可帶來活性成分的結(jié)晶度損失和親水性增強(qiáng)，即使在胃腸pH的個體間和個體內(nèi)差異的條件下也是如此。水溶性聚合物的優(yōu)選實例可包括選自以下的至少一種纖維素衍生物諸如甲基纖維素、羥基甲基纖維素、羥基乙基纖維素、乙基纖維素、羥基乙基甲基纖維素、羧基甲基纖維素、羥基丙基甲基纖維素、羥基丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、羧基甲基纖維素鈉和羧基甲基乙39基纖維素；聚乙烯醇；聚乙酸乙烯酯；聚乙酸乙烯鄰苯二甲酸酯；聚乙烯吡咯烷酮(PVP);和包含其的聚合物；聚氧化烯或聚亞烷基二醇，和包含其的聚合物。優(yōu)選羥基丙基甲基纖維素。在本發(fā)明的藥物組合物中，高于給定水平的過高含量的水溶性聚合物不再提供溶解度的進(jìn)一步增加，而是不利地帶來各種問題，諸如制劑硬度的總體增加，由于水溶性聚合物當(dāng)暴露于洗脫液下時的過度溶脹而在制劑周圍形成膜而使得洗脫液不滲透進(jìn)入制劑。因此，增溶劑優(yōu)選被加入以通過修飾式1或2的化合物的物理性質(zhì)而使得制劑的溶解度達(dá)最大化。在這方面，增溶劑用于增強(qiáng)微溶的式1或2的化合物的增溶性和濕潤性，可以顯著地降低式1或2的化合物的由于飲食和在攝取飲食后給藥的時間差異所帶來的生物利用度的差異。增溶劑可選自常規(guī)地被廣泛使用的表面活性劑或兩性分子，增溶劑的具體實例可以是上面闡述的表面活性劑。崩解促進(jìn)劑用于改善藥物釋放速度，能夠使得藥物在目標(biāo)部位快速釋放從而增加藥物的生物利用度。崩解促進(jìn)劑的優(yōu)選實例可包括但不限于選自以下的至少一種交聯(lián)羧甲纖維素鈉、交聚維酮、羧基甲基纖維素鈣、淀粉羥乙酸鈉和被低級取代的羥基丙基纖維素。優(yōu)選是交聯(lián)羧甲纖維素鈉。當(dāng)考慮如上所述的各種因素在內(nèi)時，基于100重量份的活性成分，優(yōu)選加入10到1000重量份的水溶性聚合物，1到30重量份的崩解促進(jìn)劑和0.1到20重量份的增溶劑。除了以上所述的成分之外，如有必要，可任選加入本領(lǐng)域已知的與制劑有關(guān)的其它材料。用于噴霧干燥的溶劑是表現(xiàn)出高溶解度而不改變其物理性質(zhì)并在噴霧干燥期間容易揮發(fā)的物質(zhì)。這種溶劑的優(yōu)選實例包括但不限于二氯甲垸、氯仿、甲醇和乙醇。這些物質(zhì)可單獨或以其任何組合的方式使用。優(yōu)選地，在噴霧溶液中的固體的含量范圍基于噴霧溶液的總重量為5到50%。以上所述的腸靶向制劑方法可優(yōu)選地用于如上制備的制劑粒子。在一個優(yōu)選方案中，本發(fā)明的口服藥物組合物可通過包括以下步驟的方法被配制(a)加入單獨的或與表面活性劑和吸濕材料組合的式1或2的化合物，并用噴射磨研磨式1或2的化合物以制備活性成分微粒子；(b)將活性成分微粒子連同水溶性聚合物、增溶劑和崩解促進(jìn)劑溶解在溶劑中并對所得溶液進(jìn)行噴霧干燥以制備制劑粒子；和(c)將制劑粒子連同pH敏感聚合物和增塑劑溶解在溶劑中并對所得溶液進(jìn)行噴霧干燥以在制劑粒子上施加腸靶向包衣。表面活性劑、稀釋材料、水溶性聚合物、增溶劑和崩解促進(jìn)劑如上所闡述。增塑劑是被加入以防止包衣變硬的添加劑，并且可包括例如聚合物，諸如聚乙二醇?；蛘撸钚猿煞值呐渲瓶赏ㄟ^步驟(b)的媒介物和步驟(c)的腸靶向包衣材料被順序地或同時地噴霧到作為籽粒的步驟(a)的經(jīng)過噴射研磨的活性成分粒子上來進(jìn)行。對于注射，本發(fā)明的藥劑可被配制在含水溶液中，優(yōu)選被配制在生理學(xué)相容的緩沖液諸如Hanks's溶液、林格氏液或生理鹽水中。對于透粘膜給藥，在制劑中使用適于待滲透的屏障的滲透劑。這種滲透劑是本領(lǐng)域通常已知的?；衔锟杀慌渲瞥赏ㄟ^注射進(jìn)行的非腸道給藥，例如通過快速濃注或連續(xù)輸注。用于注射的制劑可以單位劑型存在，例如存在于安瓿或多劑量容器中，并加有防腐劑。該組合物可釆取諸如以下的形式在油性或水性媒介物中的懸浮劑、溶液劑或乳劑，并且可包括配制用試劑諸如助懸劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。作為替代，活性成分可以是用于在使用前與適當(dāng)?shù)拿浇槲锢鐭o菌、無熱原的水構(gòu)建的粉末。本發(fā)明的藥物組合物可被制成或被加入到常用片劑、以及能夠遞送活性成分到患病區(qū)域的各種形式中。例如，該組合物的附加可通過被包衣在或被包埋在要被插入到血管內(nèi)的網(wǎng)狀支架中。該支架通常通過手術(shù)被插入以調(diào)節(jié)血管、胃腸道、膽道等內(nèi)的血液或體液流。其是由不銹鋼、形狀記憶合金、鎳鈦金屬互化物(Ti-Ni)等制成的網(wǎng)狀材料。因此，本發(fā)明的藥物組合物可通過以下方式被施用于患病區(qū)域直接被包覆到支架的外表面或借助于預(yù)定粘合劑被附著到支架的外表面上、或以能夠向外釋放的形式被包埋在支架中。盡管上面僅僅舉例說明了支架作為介質(zhì)用于附加活性成分，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員可能進(jìn)行各種修改、附加和置換而不脫離由權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的范圍和精神。適用于本發(fā)明的藥物組合物包括其中活性成分以有效實現(xiàn)預(yù)定目的的量被包含在內(nèi)的組合物。更具體地說，治療有效量是指化合物的有效預(yù)防、緩和或改善被治療受試者的病癥或延長被治療受試者的存活的量。治療有效量的確定完全處在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力下，特別是根據(jù)本文提供的詳細(xì)公開后。當(dāng)本發(fā)明的藥物組合物被配制成單位劑型時，式1或2的化合物作為活性成分優(yōu)選以約0.1至1,000mg的單位劑量被包含在內(nèi)。式1或2的化合物的給藥量由主治醫(yī)師根據(jù)被治療患者的體重和年齡、疾病的特征性質(zhì)和嚴(yán)重程度的不同來進(jìn)行確定。本發(fā)明還提供了式1或2的化合物在制備用于預(yù)防和治療再狹窄的藥物中的應(yīng)用。本文使用的術(shù)語"治療"是指當(dāng)藥物在表現(xiàn)出病癥發(fā)病的受試者中被使用時停止或延遲疾病的發(fā)展。術(shù)語"預(yù)防"是指當(dāng)藥物在未表現(xiàn)出病癥發(fā)病但是具有高的疾病發(fā)病風(fēng)險的受試者中被使用時停止或延遲病癥發(fā)病。本發(fā)明的上述的和其它目的、特征以及其它優(yōu)點可從以下的詳細(xì)說明并結(jié)合附圖得以更清楚的理解，其中圖1是表示用改變濃度的本發(fā)明的化合物1進(jìn)行預(yù)處理后對活細(xì)胞數(shù)的計數(shù)結(jié)果的柱狀圖表；圖2是證實用本發(fā)明的化合物1處理的血管平滑肌細(xì)胞中的NQOl的表達(dá)的-PCR的結(jié)果；圖3是證實用本發(fā)明的化合物1處理的血管平滑肌細(xì)胞中的AMPK和ACC的磷酸化程度的結(jié)果；圖4是證實用本發(fā)明的化合物1處理的血管平滑肌細(xì)胞中的p53、p21、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤和CDK的表達(dá)的結(jié)果；圖5是證實用本發(fā)明的化合物1處理的血管平滑肌細(xì)胞中的細(xì)胞增殖的抑制的結(jié)果；圖6是在給予本發(fā)明的化合物1的大鼠中的血管內(nèi)膜增生的觀察結(jié)果；和圖7是通過殺死給予了本發(fā)明的化合物1的大鼠并用油紅O染色后在內(nèi)部血管壁和主動脈瓣上的脂質(zhì)積聚程度的比較/觀察結(jié)果。優(yōu)選方案的詳細(xì)說明現(xiàn)在，將參見以下實施例更詳細(xì)地描述本發(fā)明。這些實施例的提供僅用于說明本發(fā)明的目的，且決不被認(rèn)為是對本發(fā)明的范圍和精神構(gòu)成限制。實施例hB-拉杷醌(化合物U的合成17.4g(0.10M)的2-羥基-l,4-萘醌被溶解在120ml的DMSO中，向其中逐漸加入0.88g(0.11M)的LiH。這里，應(yīng)當(dāng)小心進(jìn)行因為產(chǎn)生氫。攪拌該反應(yīng)溶液，在證實不進(jìn)一步產(chǎn)色氫后另外攪拌30分鐘。然后，向其中逐漸地加入15.9g(0.10M)的異戊二烯基溴(l-溴-3-甲基-2-丁烯)和3.35g(0.025M)的Lil，將反應(yīng)溶液加熱到45'C然后在該溫度下劇烈攪拌12小時。將反應(yīng)溶液冷卻到低于l(TC,先加入76g的冰、然后加入250ml的水，之后，逐漸加入25ml的濃鹽酸以保持所得溶液處于大于1的酸性pH下。向反應(yīng)混合物中加入200ml的EtOAc，然后劇烈攪拌，從而得到白色固相，其不溶于EtOAc中。過濾這些固體并分離EtOAc層，水層再一次用100ml的EtOAc提取并與之前提取的有機(jī)層合并，將該有機(jī)層用150ml的5n/。NaHC03洗滌并濃縮，所得的濃縮物被溶解在200ml的CH2C12中，加入70ml的2NNaOH水溶液并劇烈搖動以分離出兩個層，通過用2N的NaOH水溶液處理兩次(70mlX2)進(jìn)一步分離CH2Cl2層，將如此分離的水性溶液合并在一起并調(diào)節(jié)到大于2的酸性pH，從而形成固體，所得固體經(jīng)過濾和分離，得到拉帕醇。將如此獲得的拉帕醇從75%的EtOH中重結(jié)晶，所得拉帕醇與80ml的硫酸混合，在室溫下劇烈攪拌該混合物達(dá)IO分鐘并向其中加入200g的冰以完成反應(yīng)，向反應(yīng)物質(zhì)中加入60ml的CH2Cl2，然后劇烈搖動。之后，分離出CH2Cl2層并用5。/。的NaHC03洗滌，水層再一次用30ml的CH2Cl2提取，用50/。NaHC03洗滌并與之前提取的有機(jī)層合并。有機(jī)層用MgS04干燥并濃縮，得到不純的(3-拉杷醌。如此獲得的(5-拉杷醌從異丙醇重結(jié)晶，從而獲得8.37g的純的(5-拉杷醌。iH-NMR(CDCl3，S):8.05(1H,dd，J=l,8Hz),7.82(1H,dd,J=l，8Hz),7.64(1H，dt，J=l，8Hz),7.50(1H,dt,J=l,8Hz)，2.57(2H,t，J=6.5Hz),L86(2H,t,J=6.5Hz)1.47(6H,s)。實施例董尼酮(化合物2)的合成在實施例1的獲得拉帕醇的過程中，不溶于EtOAc中的被分離出的固體是2-異戊二烯基氧基-l,4-萘醌，一種O-烷基化產(chǎn)物，其與作為C-垸基化產(chǎn)物的拉帕醇不同。被分離出的2-異戊二烯基氧基-l,4-萘醌首先再一次從EtOAc中重結(jié)晶，將3.65g(0.015M)的經(jīng)過如此純化的固體溶解在甲苯中并將甲苯回流5小時以誘導(dǎo)克萊森重排，通過減壓蒸餾將甲苯濃縮，然后與15ml的硫酸混合，而無需另外純化，在室溫下劇烈攪拌所得混合物IO分鐘，向其中加入100g的冰以完成反應(yīng)，向反應(yīng)物質(zhì)中加入50ml的CH2Cl2并劇烈搖動。之后，分離出CH2Cl2層并用5y。的NaHC03洗滌，水層再一次用20ml的CH2Cl2提取，用5%的NaHC03洗滌并與之前提取的有機(jī)層合并，有機(jī)層用MgS04干燥、濃縮并進(jìn)行硅膠色譜純化，得到2.32g的純的董尼酮。'H隱NMR(CDCl3,S):8.05(1H,d,JN8Hz),7.64(2H，d,J=8Hz)，7.56(1H,m)，4.67(1H,q,J=7Hz)，1'47(3H，d，J=7Hz),1.45(3H，s)1.27(3H，s)。實施例3:a-董尼酮(化合物3)的合成將在實施例2中經(jīng)過純化的4.8g(0.020M)的2-異戊二烯基氧基-1,4-萘醌溶解在二甲苯中，將二甲苯回流15小時，從而在與實施例2相比是顯著更高的溫度和更長的反應(yīng)條件下誘導(dǎo)克萊森重排，根據(jù)這一反應(yīng)過程，獲得了已成環(huán)的a-董尼酮以及已經(jīng)歷克萊森重排并且其中兩個甲基之一移位的拉帕醇衍生物。通過減壓蒸餾濃縮二甲苯并通過硅膠色譜純化，得到1.65g的純的a-董尼酮。^-NMR(CDCl3,S):8.06(1H,d,J=8Hz),7.64(2H,m),7.57(1H，m),3.21(1H,q，J=7Hz),1.53(3H,s),1.51(3H,s)1.28(3H,d,J=7Hz)。實驗例4:化合物4的合成將17.4g(0.10M)的2-羥基-l,4-萘醌溶解在120ml的DMSO中，向其中加入0.88g(0.11M)的LiH，此時，應(yīng)當(dāng)小心進(jìn)行因為放出氫。攪拌該反應(yīng)溶液，并且在證實不進(jìn)一步產(chǎn)生氫后，另外攪拌30分鐘，然后，向其中逐漸加入14.8g(0.11M)的甲代烯丙基溴(l-溴-2-甲基丙烯)和3.35g(0.025M)的Lil，將反應(yīng)溶液加熱到45°C，然后在該溫度下劇烈攪拌12小時，將反應(yīng)溶液冷卻到低于10°C，先加入80g的冰、然后加入250ml的水，之后，逐漸加入25ml的濃鹽酸以保持所得溶液處于大于l的酸性pH下，向反應(yīng)混合物中加入200ml的CH2C12，然后劇烈攪拌以分離出兩層，水層通過加入70ml的CH2Cl2再一次被提取并與之前提取的有機(jī)層合并在一起，通過TLC證實了新形成了兩種物質(zhì)，并且隨后被使用而無需進(jìn)行任何特定的分離過程，通過減壓蒸餾將有機(jī)層濃縮，再一次溶解在二甲苯中，然后回流8小時，在該過程中，TLC上的兩種物質(zhì)合為一種物質(zhì)，從而獲得了相對純的拉帕醇衍生物，將如此獲得的拉帕醇衍生物與80ml的硫酸混合并在室溫下劇烈攪拌10分鐘，向其中加入200g的冰以完成反應(yīng)，向反應(yīng)物質(zhì)中加入80ml的CH2C12，然后劇烈搖動。之后，分離出CH2Cl2層并用5%的NaHCCV冼滌，水層再一次用50ml的012(312提取，用5%的NaHC03洗滌并與之前提取的有機(jī)層合并在一起，有機(jī)層用MgS04干燥并濃縮，得到不純的P-拉杷醌衍生物(化合物4)，如此獲得的卩-拉杷醌衍生物從異丙醇中重結(jié)晶，從而獲得12.21g的純化合物4。iH國NMR(CDCl3，S):8.08(1H,d，J=8Hz),7.64(2H,m)，7.57(1H,m),2.95(2H，s),1.61(6H，s)。實驗例5:化合物5的合成與實施例4的相同方式獲得化合物5，不同之處在于使用烯丙基溴代替甲代烯丙基溴。^-NMR(CDCl3,S):8.07(1H,d，J=7Hz),7.65(2H,m)，7.58(1H,m)，5.27(1H,m)，3.29(1H,dd，J=10,15Hz),2.75(1H,dd,J=7,15Hz),1.59(3H，d，J=6Hz)。46實驗例6:化合物6的合成5.08g(40mM)的3-氯丙酰氯被溶解在20ml的醚中并被冷卻到-78°C，向所得溶液中逐漸加入1.95g(25mM)的過氧化鈉(Na202)，并同時在該溫度下劇烈攪拌，然后另外劇烈攪拌30分鐘，將反應(yīng)溶液加熱到(TC并向其中加入7g的冰，然后另外攪拌10分鐘，分離有機(jī)層，再一次用10ml的0'C的冷水洗滌，然后用0'CNaHCO3水溶液洗滌，分離出有機(jī)層，用MgS04干燥，在低于0'C的溫度減壓蒸餾進(jìn)行濃縮，從而獲得3-氯過氧丙酸。1.74g(10mM)的2-羥基-l,4-萘醌被溶解在20ml的乙酸中，在室溫下向其中逐漸加入之前已制備的3-氯過氧丙酸，將反應(yīng)混合物攪拌回流2小時，然后減壓蒸餾以除去乙酸，所得濃縮物被溶解在20ml的CH2Cl2中，用20ml的5M的NaHC(V冼滌，水層再一次用20ml的CH2Cl2提取并與之前提取的有機(jī)層合并在一起，有機(jī)層用MgS04干燥并濃縮，得到化合物6，其與2-(2-氯乙基)-3-羥基-l,4-萘醌混合在一起，通過硅膠色譜純化所得的化合物，得到0.172g的純的拉杷醌衍生物(化合物6)。iH-NMR(CDCl3,S):8.07(1H，d,J=7.6Hz),7.56-7.68(3H，m)，4.89(2H，t，J=9.2Hz),3.17(2H,t,J=9.2Hz)。實施例7:化合物7的合成17.4g(0.10M)的2-羥基-l，4-萘醌被溶解在120ml的DMS中，向其中逐漸加入0.88g(0.11M)的LiH，應(yīng)當(dāng)小心進(jìn)行因為放出氫，攪拌該反應(yīng)溶液，在證實不進(jìn)一步放出氫后，另外攪拌30分鐘，然后向其中逐漸加入19.7g(0.10M)的肉桂基溴(3-苯基烯丙基溴)禾卩3.35g(0.025M)的LiI，將反應(yīng)溶液加熱到45'C，然后在該溫度下劇烈攪拌12小時，將反應(yīng)溶液冷卻到低于10°C，先加入80g的冰，然后加入250ml的水，之后，逐漸加入25ml的濃鹽酸以維持所得溶液處于大于1的酸性pH，加入200ml的CH2C12以溶解反應(yīng)混合物，然后劇烈振搖以分離出兩層，水層被丟棄，CH2Cl2層用2NNaOH水溶液(100mlX2)處理，分離出水層兩次，此時，在用2NNaOH水溶液提取后在實施例8中再次使用剩余的CH2Cl2層，如此分離的水性溶液經(jīng)合并，并使用濃鹽酸調(diào)整到大于2的酸性pH，從而形成固體，所得固體經(jīng)過濾和分離，得到拉帕醇衍生物，如此獲得的拉帕醇衍生物從75。/。EtOH中重結(jié)晶，所得拉帕醇衍生物與50ml的硫酸混合，該混合物在室溫下劇烈攪拌10分鐘，并向其中加入150g的冰以完成反應(yīng)，向反應(yīng)物質(zhì)中加入60ml的CH2C12，然后劇烈搖動，之后，分離出CH2Cl2層并用5。/。NaHC03洗滌，水層再一次用30ml的CH2Cl2提取，用5%的NaHC03洗滌并與之前提取的有機(jī)層合并，有機(jī)層經(jīng)濃縮和硅膠色譜純化，得到2.31g的純化合物7。'H-NMR(CDCl3,S):8.09(1H,dd,J=1.2,7.6Hz),7.83(1H,d,J=7.6Hz),7'64(1H,dt，J=1.2,7.6Hz),7'52(1H，dt,J=1.2，7.6Hz),7.41(5H,m),5.27(1H，dd，J=2.5,6.0Hz),2.77(1H，m)2.61(lH，m),2.34(1H，m)，2.08(1H,m)，0.87(1H，m)。實施例8:化合物8的合成將在實施例7中的用2N的NaOH水溶液提取后剩余的<3112(:12層通過減壓蒸餾濃縮，所得濃縮物被溶解在30ml的二甲苯中，然后回流10時以誘導(dǎo)克萊森重排，通過減壓蒸餾將二甲苯濃縮，然后與15ml的硫酸混合，而無需另外純化，在室溫下劇烈攪拌所得混合物10分鐘，向其中加入100g的冰以完成反應(yīng)，向反應(yīng)物質(zhì)中加入50ml的CH2C12并劇烈搖動。之后，分離出CH2Cl2層并用5%的NaHC03洗滌，水層再一次用20ml的CH2Cl2提取，用5M的NaHCCV冼滌并與之前提取的有機(jī)層合并，有機(jī)層用MgS04干燥、濃縮并進(jìn)行硅膠色譜純化，得到1.26g的純化合物8。!H-NMR(CDCl3，S):8.12(1H，dd，J=0.8,8.0Hz),7.74(1H,dd，J=1.2，7.6Hz)，7.70(1H,dt，J=1.2,7.6Hz),7.62(1H,dt,J=1.6，7.6Hz)，7.27(3H,m)，7.10(2H,td,J=1.2,6.4Hz),5.38(1H,qd，J=6.4，9.2Hz),4.61(1H,d，J=9.2Hz),1.17(3H,d,J=6.4Hz)。實施例9:化合物9的合成3.4g(22mM)的1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]H"^—碳-7-烯和1.26g(15mM)的2-甲基-3-丁炔-2-醇被溶解在10ml的乙腈中，將所得溶液冷卻到0°C，在攪拌下向反應(yīng)溶液中逐漸加入3.2g(15mM)的三氟醋酐，然后在(TC繼續(xù)攪拌。在另一個燒瓶中，1.74g(10mM)的2-羥基-l，4-萘醌和135mg(l.OmM)的氯化銅(CuCb)被溶解在10ml的乙腈中并攪拌，將之前已純化的溶液逐漸加入到反應(yīng)溶液中，然后回流20分鐘，通過減壓蒸餾將反應(yīng)溶液濃縮，然后進(jìn)行硅膠色譜純化，得到0.22g的純化合物9。^國NMR(CDCl3，S):8.11(1H,dd,J=1.2,7.6Hz),7.73(1H,dd，J=1.2,7.6Hz)，7.69(1H,dt，J=1.2，7.6Hz)，7.60(1H,dt，J=1.6,7.6Hz),4.95(1H，d,J=3.2Hz),4.52(1H,d，J=3.2Hz)，L56(6H，s)。實施例10:化合物10的合成0.12g的化合物9被溶解在5ml的MeOH中，向其中加入10mg的5%的Pd/C，然后在室溫下強(qiáng)烈攪拌3小時，將反應(yīng)溶液過濾通過硅膠以除去5。/。的Pd/C，并進(jìn)行減壓蒸餾濃縮，得到化合物IO。^-NMR(CDCl3,S):8.05(1H,td,J=1.2,7.6Hz)，7'64(2H，m)，7.54(1H,m),3.48(3H,s),L64(3H,s)，1.42(3H,s),1.29(3H，s)。實施例11:化合物11的合成1.21g(50mM)的卩-拉杷醌(化合物l)和1.14g(50mM)的DDQ(2,3-二氯-5,6-二氰基-l，4-苯醌)被溶解在50ml的四氯化碳中并回流72小時，通過減壓蒸餾濃縮反應(yīng)溶液，然后進(jìn)行硅膠色譜純化，得到1.18g的純化合物11。'H-NMR(CDCl3，S):8.08(1H,dd,J=l,2,7.6Hz)，7.85(1H,dd，J=0.8,7.6Hz),7.68(1H，dt,J=1.2,7.6Hz),7.55(1H,dt,J=1.2,7.6Hz)，6.63(1H，d，J=10.0Hz),5.56(1H，d,J=10.0Hz),L57(6H,s)。實施例12:化合物12的合成1.74g(lOmM)的2-羥基-l，4-萘醌、3.4g(50mM)的2-甲基-l,3-丁二烯(異戊二烯)、3.0g(lOOmM)的多聚甲醛和20ml的1,4-二氧雜環(huán)己烷被置于壓力容器中，然后在IO(TC加熱并攪拌48小時，將反應(yīng)容器冷卻至室溫，將其內(nèi)容物過濾，減壓蒸餾濃縮濾液，然后進(jìn)行硅膠色譜純化，得到238mg的化合物12，為f3-拉杷醌的2-乙烯基衍生物。iH國NMR(CDCl3,S):8.07(1H,dd,J=1.2,7.6Hz),7.88(1H,dd,J=0.8,7.6Hz),7'66(1H，dt,J=1.2,7.6Hz)，7'52(1H,dt，J=0.8，7.6Hz),5.87(1H,dd,J=10.8,17.2Hz),5.18(1H,d，J=10.8Hz),5.17(1H，17.2Hz),2.62(1H，m),2.38(1H,m),2.17(3H，s),2力0(1H，m),1.84(1H，m)。實施例13:化合物13的合成1.74g(10mM)的2-羥基-l,4-萘醌、4.8g(50mM)的2,4-二甲基-1,3-戊二烯和3.0g(lOOmM)的多聚甲醛被溶解在20ml的1,4-二氧雜環(huán)己垸中，將所得混合物在強(qiáng)烈攪拌下回流IO小時，將反應(yīng)容器冷卻至室溫，將其內(nèi)容物過濾以從固體中除去多聚甲醛，減壓蒸餾濃縮濾液，然后進(jìn)行硅膠色譜純化，得到428mg的化合物13，為P-拉杷醌衍生物。iH-NMR(CDCb，S):8'06(1H,dd,J=1.2,7.6Hz),7.83(1H,dd,J-0.8,7.6Hz),7.65(1H,dt,J=1.2,7.6Hz)，7.50(1H,dt,J=0.8,7.6Hz),5.22(1H,bs)，2.61(1H,m),2.48(1H,m)，2.04(1H,m),1.80(3H，d，J=1.0Hz),L75(1H，m),L72(1H，d,J=1.0Hz),L64(3H，s)。實施例14:化合物14的合成5.3g(30mM)的2-羥基-l,4-萘醌、20.4g(150mM)的2,6-二甲基50-2,4，6-辛三烯和9.0g(300mM)的多聚甲醛被溶解在50ml的1,4-二氧雜環(huán)己烷中，將所得混合物在強(qiáng)烈攪拌下回流IO小時，將反應(yīng)容器冷卻至室溫，將其內(nèi)容物過濾以從固體除去多聚甲醛，減壓蒸餾濃縮濾液，然后進(jìn)行硅膠色譜純化，得到1.18g的化合物14，為(3-拉杷醌衍生物。'H-NMR(CDCl3,S):8.07(1H，dd,J=1.2，7.6Hz)，7.87(1H，dd，J=0.8,7.6Hz),7.66(1H,dt,J=1.2,7.6Hz)，7.51(1H,dt,J=0.8，7.6Hz),6.37(1H,dd:J=11.2，15.2Hz),5.80(1H，寬的d,J=11.2Hz),5.59(1H,d，J=15.2Hz)，2.67(1H,dd,J=4.8,17.2Hz)，2.10(1H,dd,J=6.0,17.2Hz),l-97(lH,m),1.75(3H,bs)，1.64(3H，bs)，1.63(3H,s),L08(3H，d,J=6.8Hz)。實施例15:化合物15的合成5.3g(30mM)的2-羥基-l，4-萘醌、20.4g(50mM)的萜品烯和9.0g(300mM)的多聚甲醛被溶解在50ml的1,4-二氧雜環(huán)己烷中，將所得混合物在強(qiáng)烈攪拌下回流IO小時，將反應(yīng)容器冷卻至室溫，將其內(nèi)容物過濾以從固體除去多聚甲醛，減壓蒸餾濃縮濾液，然后進(jìn)行硅膠色譜純化，得到1.12g的化合物15，為四環(huán)的o-醌衍生物。iH-NMR(CDCl3,S):8.06(1H,d,J=7.6Hz),7.85(1H,d,J=7.6Hz),7.65(1H,t，J=7.6Hz),7.51(1H,t，J=7.6Hz)，5.48(1H，寬的s)，4.60(1H，寬的s),2.45(1H,d，J=16.8Hz),2,21(1H,m),2.20(1H，d，J=16.8Hz),2.09(1Hm),1.77(1H，m),1.57(1H,m),1.07(3H,s)，L03(3H,d，J=0.8Hz),1.01(3H,d,J=0.8Hz),0.96(1H,m)。實施例16:化合物16和17的合成17.4g(0.10M)的2-羥基-l,4-萘醌被溶解在120ml的DMS中，向其中逐漸加入0.88g(0.11M)的LiH，應(yīng)當(dāng)小心進(jìn)行因為放出氫，攪拌該反應(yīng)溶液，在證實不進(jìn)一步放出氫后，另外攪拌30分鐘，然后向其中逐漸加入16.3g(0.12M)的巴已酰溴和3.35g(0.025M)的Lil，將反應(yīng)溶液加熱到45'C，然后在該溫度下劇烈攪拌12小時，將反應(yīng)溶液冷卻到低于10°C，先加入80g的冰，然后加入250ml的水，之后，逐漸加入25ml的濃鹽酸以維持所得溶液處于大于1的酸性pH，加入200ml的CH2Cl2以溶解反應(yīng)混合物，然后劇烈振搖以分離出兩層，水層被丟棄，CH2Cl2層用2NNaOH水溶液(100mlX2)處理，分離出水層兩次，此時，在用2NNaOH水溶液提取后的剩余的0^12(:12層在實施例17中被再次使用，如此分離的水性溶液經(jīng)合并，并用濃鹽酸調(diào)節(jié)到大于2的酸性pH，從而形成固體，所得固體經(jīng)過濾和分離，得到拉帕醇衍生物，如此獲得的拉帕醇衍生物從75%EtOH中重結(jié)晶，所得拉帕醇衍生物與50ml的硫酸混合，該混合物在室溫下劇烈攪拌IO分鐘，之后向其中加入150g的冰以完成反應(yīng)，向反應(yīng)物質(zhì)中加入60ml的CH2Cl2，然后劇烈搖動，之后，分離出CH2Cl2層并用5%NaHC03洗滌，水層再一次用30ml的CH2Cl2提取，用5。/。的NaHC03洗滌并與之前提取的有機(jī)層合并，有機(jī)層經(jīng)濃縮和硅膠色譜純化，分別得到1.78和0.43g的純化合物16和17?；衔?6的tH-NMR(CDCl3,S):58.07(1H，dd,J=0.8，6.8Hz),7.64(2H,寬的d，J=3.6Hz),7.57(1H，m),5.17(1H，qd,J=6.0，8.8Hz)，3.53(1H,qd,J=6.8,8.8Hz)，1.54(3H,d,6.8Hz),L23(3H，d，6.8Hz)。化合物17的^-NMR(CDCl3，S):S8.06(1H,d,J=0.8，7.2Hz),7.65(2H，寬的d，J=3.6Hz)，7.57(1H，m)，4.71(1H,五重峰，J=6.4Hz)，3.16(1H,五重峰，J=6.4Hz),1.54(3H,d,6.4Hz),1.38(3H,d,6.4Hz)。實施例17:化合物18和19的合成將在實施例16中的用2N的NaOH水溶液提取后剩余的CH2C12層通過減壓蒸餾濃縮，所得濃縮物被溶解在30ml的二甲苯中，然后回流10時以誘導(dǎo)克萊森重排，通過減壓蒸餾將二甲苯濃縮，然后與15ml的硫酸混合，而無需另外純化，在室溫下劇烈攪拌所得混合物10分鐘，向其中加入100g的冰以完成反應(yīng)，向反應(yīng)物質(zhì)中加入50ml的CH2C12并劇烈搖動。之后，分離出CH2Cl2層并用5%的NaHC03洗滌，水層再一次用20ml的CH2Cl2提取，用5。/。的NaHC(V冼滌并與之前提取的有機(jī)層合并，有機(jī)層用MgS04干燥、濃縮并進(jìn)行硅膠色譜純化，分別得到0.62和0.43g的純化合物18和19。化合物18的iH國NMR(CDCb，S):8.06(1H,dd,J=0.8，7.2Hz),7.81(1H,dd，J=0.8，7.6Hz),7.65(1H,dt,J=0.8，7.6Hz)，7.51(1H,dt,J=0.8，7.2Hz),4.40(1H,m)，2.71(1H，m),2.46(1H，m),2.11(1H，m)，1.71(1H,m)，L54(3H，d,6.4Hz),1.52(1H，m)?；衔?9的iH-麗R(CDCl3，S):8.08(1H,d,J=0.8,7.2Hz)，7.66(2H,寬的d，J=4.0Hz),7.58(1H,m),5'08(1H，m),3.23(1H,dd,J=9.6,15.2Hz)，2.80(1H,dd,J=7.2,15.2Hz),1.92(1H,m),L82(1H,m)，1.09(3H,t,7.6Hz)。實施例18:化合物20的合成17.4g(0.10M)的2-羥基-l，4-萘醌被溶解在120ml的DMS中，向其中逐漸加入0.88g(0.11M)的LiH，應(yīng)當(dāng)小心進(jìn)行因為放出氫，攪拌該反應(yīng)溶液，在證實不進(jìn)一步放出氫后，另外攪拌30分鐘，然后向其中逐漸加入21.8g(0.10M)的溴化香葉酯和3.35g(0.025M)的Lil，將反應(yīng)溶液加熱到45'C，然后在該溫度下劇烈攪拌12小時，將反應(yīng)溶液冷卻到低于1(TC，先加入80g的冰，然后加入250ml的水，之后，逐漸加入25ml的濃鹽酸以維持所得溶液處于大于1的酸性pH，加入200ml的CH2Cl2以溶解反應(yīng)混合物，然后劇烈振搖以分離出兩層，水層被丟棄，CH2Cl2層用2NNaOH水溶液(100mlX2)處理，分離出水層兩次，如此分離的水性溶液經(jīng)合并，并用濃鹽酸調(diào)節(jié)到大于2的酸性pH，從而形成固體，所得固體經(jīng)過濾和分離，得到2-香葉基-3-羥基-l,4-萘醌，如此獲得的產(chǎn)物與50ml的硫酸混合，無需另外純化，該混合物在室溫下劇烈攪拌10分鐘，之后向其中加入150g的冰以完成反應(yīng)，向反應(yīng)物質(zhì)中加入60ml的CH2Cl2，然后劇烈搖動，之后，分離出CH2Cl2層并用5。/。的NaHC03洗滌，水層再一次用30ml的CH2Cl2提取，用5%的NaHC03洗滌并與之前提取的有機(jī)層合并，有機(jī)層經(jīng)濃縮和硅膠色譜純化，得到3.62g的純化合物20。'H-NMR(CDCl3，S):8.05(1H,d,J=7,6Hz)，7.77(1H,d,J=7.6Hz),7.63(1H,t，J=7.6Hz)，7.49(1H,t,J=7.6Hz)，2.71(1H，dd,J=6.0，17.2Hz)，2.19(1H,dd,J=12.8,17.2Hz),2.13(1H，m)，1.73(2H,m),1.63(1H，dd,J=6.0，12.8Hz)，1.59(1H，m)，1.57(1H，m)，1.52(1H，m),1.33(3H,s),1.04(3H,s)，0.93(3H,s)。實施例19:化合物21的合成以與實施例1相同的方式獲得化合物21，不同之處在于使用6-氯-2-羥基-1，4-萘醌代替2-羥基-l，4-萘醌。'H國NMR(CDCl3,S):8.02(1H,d，J=8Hz)，7.77(1H,d，J=2Hz),7.50(1H,dd,J=2,8Hz)，2.60(2H,t，J=7Hz),1.87(2H，t,J=7Hz)1.53(6H，s)。實施例20:化合物22的合成以與實施例1相同的方式獲得化合物22，不同之處在于使用2-羥基-6-甲基-l,4-萘醌代替2-羥基-l,4-萘醌。iH-雇R(CDCl3，5):7.98(1H,d,J=8Hz),7.61(1H,d,J=2Hz)，7.31(1H,dd，J=2，8Hz),2.58(2H,t，J=7Hz),1.84(2H,t,J=7Hz)1.48(6H，s)。實施例21:化合物23的合成以與實施例1相同的方式獲得化合物23，不同之處在于使用6,7-二甲氧基-2-羥基-l,4-萘醌代替2-羥基-l，4-萘醌?；_R(CDCl3,S):7.56(1H,s)，7.25(1H,s)，3.98(6H,s)，2.53(2H,t，54J=7Hz),L83(2H,t,J=7Hz)1.48(6H,s)。實施例22:化合物24的合成以與實施例l相同的方式獲得化合物24，不同之處在于使用1-溴-3-甲基-2-戊烯代替l-溴-3-甲基-2-丁烯。iH-NMR(CDCl3,S):7.30-8.15(4H,m),2.55(2H,t，J=7Hz),1.83(2H,t,J=7Hz),1.80(2H,q,7Hz)1.40(3H，s),1.03(3H,t,J=7Hz)。實施例23:化合物25的合成以與實施例l相同的方式獲得化合物25，不同之處在于使用1-溴-3-乙基-2-戊烯代替l-溴-3-甲基-2-丁烯。iH-NMR(CDCl3,5):7.30-8.15(4H,m),2.53(2H,t,J=7Hz),1.83(2H,t,J=7Hz),1.80(4H，q，7Hz)0.97(6H，t，J=7Hz)。實施例24:化合物26的合成以與實施例1相同的方式獲得化合物26,不同之處在于使用1-溴-3-苯基-2-丁烯代替l-溴-3-甲基-2-丁烯。iH-麗R(CDCl3,5):7.15-8.15(9H，m)，1.90隱2.75(4H，m)，1.77(3H,s)。實施例25:化合物27的合成以與實施例1相同的方式獲得化合物27，不同之處在于使用2-溴-亞乙基環(huán)己垸代替l-溴-3-甲基-2-丁烯。iH-NMR(CDCl3，S):7.30-8.25(4H，m),2.59(2H,t,J=7Hz),1.35-2.15(12H,m)。實施例26:化合物28的合成以與實施例1相同的方式獲得化合物28，不同之處在于使用2-溴-亞乙基環(huán)戊烷代替l-溴-3-甲基-2-丁烯。iH-NMR(CDCb,5):7.28-8.20(4H,m)，2.59(2H，t，J=7Hz),1.40-2.20(10H,m)。實施例27:化合物29的合成將在實施例5中合成的8.58g(20mM)的化合物5溶解在1000ml的四氯化碳中，然后加入11.4g(50mM)的2，3-二氯-5,6-二氰基-1，4-苯醌，所得混合物回流96小時，減壓蒸餾濃縮反應(yīng)溶液，所得的紅色固體然后從異丙醇中重結(jié)晶，從而獲得7.18g的純化合物29。iH-麗R(CDCl3,S):8.05(1H，dd,J=1.2，7.6Hz),7.66(1H,dd,J=1.2,7.6Hz),7.62(1H，dt，J=1.2，7.6Hz),7.42(1H,dt,J=1.2，7.6Hz),6.45(1H,q,J=1.2Hz)，2.43(3H,d，J=1.2Hz)。實施例28:化合物30的合成與J.Org.Chem.,55(1990)4995-5008中所教導(dǎo)的方法類似，使用對苯醌和l-(N-嗎啉)丙烯合成4,5-二氫-3-甲基苯并[l,2-b]呋喃-4,5-二酮{苯并呋喃-4,5-二酮}，將1.5g(9.3mM)的如此制備的苯并呋喃-4,5-二酮和3.15g(28.2mM)的l-乙酰氧基-l,3-丁二烯溶解在200ml的苯中，所得混合物回流12小時，將反應(yīng)溶液冷卻至室溫并減壓蒸餾濃縮，之后進(jìn)行硅膠色譜分離，得到1.13g的純化合物30。^-NMR(CDCb，S):8.05(1H,dd,J=1.2,7.6Hz)，7.68(1H,dd，J=1.2,7.6Hz),7.64(1H,td,J=1.2，7.6Hz),7.43(1H,td,J=1.2,7.6Hz),7.26(1H,q,J=1.2Hz)，2.28(3H,d,J=1.2Hz)。實施例29:化合物31和32的合成1.5g(9.3mM)的4，5-二氫-3-甲基苯并[l,2-b]呋喃-4，5-二酮{苯并呋喃-4,5-二酮}和45g(0.6M)的2-甲基-l,3-丁二烯被溶解在200ml的苯中，所得混合物回流5小時，將反應(yīng)溶液冷卻至室溫并減壓蒸餾進(jìn)行完全濃縮，將如此獲得的濃縮物再一次溶解在150ml的四氯化碳中，之后加入2.3g(10mM)的2，3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌，所得混合物另外回流15小時，將反應(yīng)溶液冷卻和減壓蒸餾濃縮，所得濃縮物進(jìn)行硅膠色譜純化，分別得到0.13g和0.11g的純化合物31和32?；衔?1的'H-NMR(CDCl3,S):7.86(1H,s),7.57(1H,d,J=8.1Hz),7.42(1H,d,J=8,lHz),7.21(1H,q,J=1.2Hz),2.40(3H，s)，2.28(1H,d,J=1.2Hz)?；衔?2的!H-NMR(CDCl3,S):57.96(1H，d,J=8.0Hz),7.48(1H,s),7.23(2H,m),2.46(3H,s),2.28(1H,d,J=1.2Hz)。下文中，將給出本發(fā)明使用的物質(zhì)和方法。1.細(xì)胞培養(yǎng)對于血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)，從大鼠主動脈分離血管平滑肌細(xì)胞并對其進(jìn)行最初培養(yǎng)。血管平滑肌細(xì)胞在包含20。/。胎牛血清(FBS)的培養(yǎng)液中在37'C和5%032中培養(yǎng)和生長，在該過程中獲得的細(xì)胞被轉(zhuǎn)移到新的實驗用培養(yǎng)板中。在實驗中使用的細(xì)胞是傳代培養(yǎng)4至7次的原始細(xì)胞，為了活化NQOl，當(dāng)細(xì)胞匯合達(dá)80至90%時，將血管平滑肌細(xì)胞在包含0.5%胎牛血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時，以維持細(xì)胞處于靜止期，該細(xì)胞用實施例1的化合物(以下被稱為化合物l)處理。2.考察血管平滑肌細(xì)胞的增殖速率將血管平滑肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)物接種到96孔板上，培養(yǎng)到70%的細(xì)胞匯合，并轉(zhuǎn)移和再次在包含0.5%胎牛血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時。然后，維持細(xì)胞處于靜止期，之后，將細(xì)胞用血小板衍生生長因子(PDGF)和化合物l處理，并在37'C下反應(yīng)48小時，到此為止，處理了用于證57實細(xì)胞增殖的試劑。在另外反應(yīng)4小時后，采用酶聯(lián)吸附測定讀數(shù)器在450nm測量吸光度以考察細(xì)胞增殖速率。3.RT-PCR將血管平滑肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)物用化合物1在37'C下處理并反應(yīng)預(yù)定時段，采用trizol提取RNA然后逆轉(zhuǎn)錄到cDNA中。使用NQOl引物對所構(gòu)造的cDNA進(jìn)行擴(kuò)增，然后進(jìn)行電泳以證實NQOl的表達(dá)。4.蛋白質(zhì)印跡在與化合物1反應(yīng)后被收集的血管平滑肌細(xì)胞在RIPA緩沖液(50mMTris-HCl，150mMNaCl，5mMEDTA，l%NP-40，lmMPMSF，1mMDTT和1mg/ml蛋白酶抑制劑)中進(jìn)行溶解以分離出全部蛋白質(zhì)。每個樣品中的被分離的蛋白質(zhì)經(jīng)過定量化。將25ug的蛋白質(zhì)與樣品緩沖液混合并沸騰5分鐘。沸騰蛋白質(zhì)被冷卻并在十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行電泳，從而按其大小分離出蛋白質(zhì)。這些蛋白質(zhì)再一次被轉(zhuǎn)移到PVDF膜上并與抗pAMPK、pACC、p53、p21、CDK和pRb的抗體進(jìn)行免疫反應(yīng)，以證實蛋白質(zhì)表達(dá)。另外，為了檢驗是否使用等量的蛋白質(zhì)，將蛋白質(zhì)與抗p-肌動蛋白反應(yīng)。5.細(xì)胞周期分析使用FACS用于細(xì)胞周期分析。將在包含0.5%胎牛血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時的血管平滑肌細(xì)胞用化合物1預(yù)先處理2小時。將細(xì)胞用PDGF和胰島素處理以誘導(dǎo)細(xì)胞增殖并反應(yīng)48小時，之后，收集細(xì)胞并使其通過固定過程，然后用碘化丙啶(PI)進(jìn)行核染色，然后，采用FACS分析細(xì)胞周期。6.動物試驗使用SD大鼠用于實施球囊血管成形術(shù)。將動物圈養(yǎng)在飼養(yǎng)室中，飼養(yǎng)室保持在22土2"C的恒定溫度和12小時光明/黑暗(L/D)循環(huán)的條件下。將動物分成兩組，即，給予一般飲食的對照組和給予100mg/kg的化合物1的實驗組，每組4只動物。每組中的4只動物在每只動物位于分開的籠中被詞養(yǎng)4周，期間進(jìn)行實驗。在進(jìn)行球囊血管成形術(shù)之前將動物飼養(yǎng)2周，并且在實施球囊血管成形術(shù)之后2周進(jìn)行給予一般飲食和化合物1飲食的攝取。之后，分離出它們的主動脈通過H&E(蘇木精和曙紅)染色以證實增生。7.脂肪形成的測量將動物處死以分離出它們的心臟和腹主動脈，將其分別固定在4%的福爾馬林中。將固定的心臟組織浸沒在等滲蔗糖溶液中，然后通過包埋在OCT化合物中保存在冷凍機(jī)中。同時，將固定的腹主動脈進(jìn)行縱向切割并進(jìn)行制備從而使得內(nèi)部血管暴露出，將冷凍的心臟組織切割成20微米厚的切片并附著于覆層載玻片上，而將腹主動脈浸沒在油紅O溶液中以進(jìn)行油紅O染色，并對其進(jìn)行觀察。實驗例1:化合物1對血管平滑肌細(xì)胞增殖的效果為了確定化合物l對血管平滑肌細(xì)胞增殖的效果，在96孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞被保持為靜止期，之后用不同濃度的化合物1對其進(jìn)行預(yù)先處理，并且使其與PDGF反應(yīng)48小時，采用WST細(xì)胞計數(shù)試劑盒對活細(xì)胞數(shù)進(jìn)行計數(shù)。在3次以上的獨立實驗中進(jìn)行計數(shù)以計算平均值。對活細(xì)胞的測量結(jié)果參見圖1。在圖1中，用PDGF和化合物1處理的血管平滑肌細(xì)胞數(shù)顯著低于僅用PDGF處理的血管平滑肌細(xì)胞數(shù)。這一細(xì)胞數(shù)類似于未用PDGF和化合物1處理的對照組中的細(xì)胞數(shù)(PDGF:-，化合物l:-)。另外，已知血管平滑肌細(xì)胞數(shù)的下降程度隨著化合物1的給藥劑量增加而增加。結(jié)果，相信血管平滑肌細(xì)胞數(shù)的下降呈現(xiàn)化合物1給藥濃度依賴性。因此，化合物1顯示了降低血管平滑肌細(xì)胞數(shù)的效力。因此，化合物1被認(rèn)為對于與血管平滑肌細(xì)胞數(shù)急劇增加有關(guān)的再狹窄或動脈硬化的治療具有優(yōu)異的效果。實驗例2:化合物1對NOOl表達(dá)的效果如下進(jìn)行研究旨在考察化合物1對NQOl表達(dá)的效果。將血管平滑肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)物保持為靜止期，然后用0.5"M的化合物1處理，在它們反應(yīng)預(yù)定時段后，采用trizol從細(xì)胞提取RNA。之后，采用NQOl引物對DNA進(jìn)行擴(kuò)增，然后進(jìn)行電泳以證實NQOl的表達(dá)水平。結(jié)果參見圖2。在圖2中，證實了血管平滑肌細(xì)胞中NQOl的表達(dá)水平顯著玄工？4fia厶口田曰/1,A仏1ipt—、！水曰古\t/^/"ii、、工/k女ilfVi乂Ar田問J》j"u:yiot口木疋，'i勺口i";/ji飯^A/v六'sjNv^丄y口ruu口'ji卜fflo實驗例3:化合物1對AMPK和ACC的磷酸化的效果本實施例意在考察化合物1作為再狹窄的治療劑的機(jī)理，并且如下進(jìn)行了本實驗。血管平滑肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)物被保持為靜止期，然后用0.5yM的化合物1處理。在它們反應(yīng)預(yù)定時段后，收集細(xì)胞以進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡法。釆用對于磷酸化的AMPK和乙酰輔酶A羧化酶(ACC)和對于(5-肌動蛋白是特異性的抗體進(jìn)行定量分析。結(jié)果通過三次以上的重復(fù)實驗被證實。結(jié)果參見圖3。在圖3中，當(dāng)與對照組相比時，用化合物1處理的AMPK和ACC的磷酸化程度表現(xiàn)出增加的AMPK磷酸化，而表現(xiàn)出降低的ACC磷酸化。磷酸化的AMPK在用化合物1處理后的1小時被觀察到，并持續(xù)6小時，這是因為，化合物1降低血管平滑肌細(xì)胞數(shù)，通過活化NQOl而升高細(xì)胞內(nèi)的NAD+，其還活化AMPK。另外，證實了已知作為AMPK的耙蛋白的ACC的磷酸化程度降低的原因，是因為化合物1活化AMPK，從而抑制ACC的活性(ACC是用于脂肪形成的重要的調(diào)節(jié)酶)，并增加脂類代謝。因此，能夠看出化合物1作為再狹窄和動脈硬化的治療劑的機(jī)理是化合物1增加NQOl和AMPK的活性導(dǎo)致血管平滑肌細(xì)胞增殖被抑制，以及降低ACC活性導(dǎo)致脂肪生成活性被抑制。實驗例4:化合物1對P53和P21的表達(dá)變化、和對RB和CDK的表達(dá)變化的效果。血管平滑肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)物用0.5ixM的化合物1處理。在它們反應(yīng)預(yù)定時段后，收集細(xì)胞以進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡。采用25mg的細(xì)胞碎片也證實了p53和p21的表達(dá)(圖4A)和磷酸化的視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(RB)和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)的表達(dá)(圖4B)。通過三次以上的重復(fù)實驗證實了結(jié)果。結(jié)果參見圖4。通過測量細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白諸如CDK、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤蛋白、p53以及受到p53表達(dá)水平控制的下游p21的表達(dá)水平，可以證實細(xì)胞增殖是否進(jìn)展。這與抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖密切相關(guān)。在圖4A中，當(dāng)用化合物1處理蛋白質(zhì)時，p53的表達(dá)水平不大量增加，但是證實了p21的大量增加與p53的表達(dá)有關(guān)。這指明了細(xì)胞周期可以通過誘導(dǎo)p21的表達(dá)受到抑制，p21是p53的下游蛋白質(zhì)。在圖4B中，當(dāng)用化合物1處理蛋白質(zhì)時，CDK通過磷酸化作用被活化。因此，能夠看出細(xì)胞周期蛋白D、細(xì)胞周期蛋白E和細(xì)胞周期蛋白B的表達(dá)水平全都顯著低于對照組。這里，細(xì)胞周期蛋白D已知在啟動細(xì)胞周期中發(fā)揮重要作用，細(xì)胞周期蛋白E已知通過在Gl期的最后期被表達(dá)從而與CDK2結(jié)合而作為Gl-S轉(zhuǎn)換的必要因素，和細(xì)胞周期蛋白B加速細(xì)胞周期向M期的進(jìn)展。因此，當(dāng)用化合物1處理血管平滑肌細(xì)胞時，能夠看出細(xì)胞增殖通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的進(jìn)展受到抑制。這指明化合物1被認(rèn)為對血管平滑肌細(xì)胞增殖的抑制具有效果。因此，可以證實化合物1可被有效用于治療與血管平滑肌細(xì)胞增殖有關(guān)的再狹窄。實驗例5:化合物l對細(xì)胞周期的效果血管平滑肌的原代培養(yǎng)物用0.5UM的化合物1處理，然后與PDGF和胰島素反應(yīng)48小時。在反應(yīng)預(yù)定時段后，將細(xì)胞固定并用碘化丙啶(PI)染色，對每個樣品進(jìn)行10,000個細(xì)胞的計數(shù)，并且每個細(xì)胞周期中的各期用百分?jǐn)?shù)表示，參見圖5。在圖5中，用化合物1、PDGF和胰島素處理的圖5C的Gl期是62%，而僅用PDGF和胰島素處理的圖5B的Gl期是57%。由此可見圖5C的Gl期與圖5B的Gl期相比進(jìn)一步增加。Gl期是用于確定細(xì)胞增殖是否受到抑制的時期。因此，Gl期的增加暗示了血管平滑肌細(xì)胞增殖因使用化合物1進(jìn)行處理而受到抑制，因為Gl期不進(jìn)展到S期。因此，證實了化合物1有效用于抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖。結(jié)果是，化合物1可用作用于治療與血管平滑肌細(xì)胞增殖有關(guān)的動脈硬化和再狹窄的組合物。實驗例6:化合物l對內(nèi)膜增生的效果在實施球囊血管成形術(shù)后的14天，從大鼠中取出頸動脈。用H&E對頸動脈染色后，觀察血管內(nèi)膜增生。結(jié)果參見圖6。a是對照組，b是在實施球囊血管成形術(shù)后在一般飲食組中的血管內(nèi)膜，c是在實施球囊血管成形術(shù)后在100mg/kg的化合物1給藥組中的血管內(nèi)膜，和d是未實施球囊血管成形術(shù)但是在100mg/kg的化合物1給藥組中的對照組。從圖6的b和c可以看出，一般飲食組b表現(xiàn)為由于在實施球囊血管成形術(shù)后在血管內(nèi)的內(nèi)膜增生所致的再狹窄。另一方面，化合物l給藥組c顯示出由于低的內(nèi)膜增生率所致的足夠有保證的血流通路。另夕卜，當(dāng)考察內(nèi)膜/中膜比時，能夠看出一般飲食組b的內(nèi)膜/中膜比是2.5，而化合物1給藥組c的內(nèi)膜/中膜比是1，其與組b相比少得多，這暗示出組c具有顯著低的內(nèi)膜增生率。因此，相信化合物l可以是用于解62決由在對動脈硬化等實施外科手術(shù)后發(fā)生的內(nèi)膜增生所誘導(dǎo)的再狹窄問題的有效治療劑。實驗例7:化合物l對血管內(nèi)脂肪形成的效果將分別給予25mg/kg和50mg/kg的化合物1達(dá)4周的大鼠處死，取出其心臟和腹主動脈并制備成冷凍切片。將制備的切片用油紅O染色，并比較/觀察在內(nèi)部血管壁和主動脈瓣上的脂質(zhì)積聚程度。A(圖7的上部分)是主動脈瓣和B(圖7的下部分)是腹主動脈。實驗重復(fù)三次以證實結(jié)果，結(jié)果參見圖7。在圖7中，觀察到當(dāng)用化合物1處理時，在A和B二者中脂肪形成都受到抑制并且血流開始增加。還觀察到在給予約50mg/kg化合物1的大鼠的心臟和腹主動脈中的血流水平與正常大鼠中的血流水平大約相同。因此，化合物1被認(rèn)為對血管內(nèi)的脂肪形成具有抑制效果并且可被有效用于與由于脂質(zhì)所致的血管壁損傷而引起的血管平滑肌細(xì)胞的快速增殖有關(guān)的動脈硬化的實質(zhì)治療。從以上的說明明顯可知，本發(fā)明的藥物組合物可有效地發(fā)揮抑制血管平滑肌細(xì)胞快速增殖的作用。因此，該組合物對于實質(zhì)上治療和/或預(yù)防在外科手術(shù)后與血管平滑肌細(xì)胞增殖有關(guān)而產(chǎn)生的再狹窄具有優(yōu)異的效果。工業(yè)實用性從以上的說明書明顯可知，本發(fā)明的藥物組合物有效抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖。因此，本發(fā)明的藥物組合物在外科手術(shù)后與血管平滑肌細(xì)胞增殖有關(guān)而產(chǎn)生的再狹窄的基礎(chǔ)預(yù)防和治療中是有效的。盡管已經(jīng)公開了本發(fā)明的優(yōu)選方案用于示例性目的，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員可能進(jìn)行各種修改、附加和置換而不脫離由權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的范圍和精神。權(quán)利要求1.用于治療和/或預(yù)防再狹窄的藥物組合物，其包括(a)治療有效量的一種或多種選自下式1和下式2所示的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前體藥物、溶劑合物或異構(gòu)體其中R1和R2各自獨立地是氫，鹵素，氨基，烷氧基，或C1-C6低級烷基或烷氧基，或者R1和R2可連在一起形成被取代的或未被取代的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)可以是飽和的或部分不飽和的或完全不飽和的；R3、R4、R5、R6、R7和R8各自獨立地是氫，羥基，氨基，C1-C20烷基，烯或烷氧基，C4-C20環(huán)烷基，雜環(huán)烷基，芳基或雜芳基，R3到R8的兩個取代基可連在一起形成可以是飽和的或部分不飽和或完全不飽和的環(huán)狀結(jié)構(gòu)；X選自C(R)(R’)，N(R”)，O和S，優(yōu)選O或S，更優(yōu)選O，其中R’是氫或C1-C6低級烷基；Y是C，S或N，條件是當(dāng)Y是S時則R7和R8什么都不是并且當(dāng)Y是N時則R7是氫或C1-C6低級烷基并且R8什么都不是；和n是0或1，條件是當(dāng)n是0時，與n相鄰的碳原子通過直接鍵形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)；和(b)藥學(xué)可接受的載體、稀釋劑或賦形劑，或其任何組合。2.權(quán)利要求l的組合物，其中X是O。3.權(quán)利要求1的組合物，其中前體藥物是下式la所示的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中，Rj、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、X和n具有式l中的定義；R9和R1()各自獨立地是-S03'Na+或由下式A表示的取代基或其鹽，Ru和Ru各自獨立地是氫或被取代的或未被取代的CrC2o直鏈垸基或CrC2o支鏈烷基，Ri3選自以下的i)到viii)的基團(tuán)ii)被取代的或未被取代的Q-C2o直鏈烷基或CVC^支鏈烷基；iii)被取代的或未被取代的胺；iv)被取代的或未被取代的CVdQ環(huán)烷基或C3-do雜環(huán)烷基；v)被取代的或未被取代的CVCn)芳基或C4-CH)雜芳基；vi)-(CRR，-NR"CO)rRw，其中R、R，和R"各自獨立地是氫或被取代的或未被取代的CrC2。直鏈垸基或C廣C2。支鏈烷基，R14選自氫，被取代的或未被取代的胺，環(huán)垸基，雜環(huán)烷基，芳基和雜芳基，l選自1~5;i)氫;Vii)被取代的或未被取代的羧基；viii)-OS03-Na+;k選自020，條件是當(dāng)k是0時，Ru和R,2什么都不是并且R13直接結(jié)合于羰基。4.權(quán)利要求1的組合物，其中式1的化合物選自下式3和下式4所示的化合物其中，R4、R2、R3、R4、R5、R6、R7和Rs具有式1中的定義。5.權(quán)利要求1的組合物，其中每個I^和R2是氫。6.權(quán)利要求4的組合物，其中式3所示的化合物是其中R,、R2和R4分別是氫的式3a的化合物或者是其中R。R2和R6分別是氫的式3b的化合物OR3(3b)。7.權(quán)利要求4的組合物，其中式4所示的化合物是選自下式4a、4b和4c的化合物(4c)。8.權(quán)利要求1的組合物，其中式2所示的化合物是其中n是0且相鄰碳原子借助于它們之間的直接鍵形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)并且Y是C的式2a的化合物或者是其中n是1且Y是C的式2b的化合物，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中，R卜R2、R3、R4、R5、Rg、R7、Rg和X具有式1中的定義。9.權(quán)利要求1的組合物，其中式1或式2所示的化合物具有晶體結(jié)構(gòu)。10.權(quán)利要求1的組合物，其中式1或式2所示的化合物具有無定形結(jié)構(gòu)。11.權(quán)利要求1的組合物，其中式1或式2所示的化合物被配制成細(xì)粒形式。12.權(quán)利要求ll的組合物，其中細(xì)粒形式的制劑通過選自以下的粒子微粉化方法進(jìn)行機(jī)械研磨、噴霧干燥、沉淀法、高壓勻漿法和超臨界微粉化。13.權(quán)利要求12的組合物，其中制劑通過作為機(jī)械研磨的噴射研磨和/或噴霧干燥制備。14.權(quán)利要求11的組合物，其中細(xì)粒的粒徑為5納米至500微米。15.權(quán)利要求l的組合物，其中組合物被配制成腸靶向制劑。16.權(quán)利要求15的組合物，其中腸靶向制劑通過附加pH敏感聚合物制備。17.權(quán)利要求15的組合物，其中腸靶向制劑通過加入可被腸特異性細(xì)菌酶分解的生物可降解的聚合物制備。18.權(quán)利要求15的組合物，其中腸靶向制劑通過加入可被腸特異性細(xì)菌酶分解的生物可降解的基質(zhì)制備。19.權(quán)利要求15的組合物，其中腸靶向制劑通過配置為在滯后時間后經(jīng)時釋放藥物("時間特異性延遲釋放制劑")進(jìn)行。20.權(quán)利要求1的組合物，其中式1或式2所示的化合物通過被包覆在或包埋在待插入血管內(nèi)的網(wǎng)狀支架內(nèi)而被附加。21.權(quán)利要求1的式1或式2所示的化合物在制備用于預(yù)防和治療與血管平滑肌細(xì)胞的快速增殖有關(guān)的疾病的藥物中的應(yīng)用。22.權(quán)利要求21的應(yīng)用，其中疾病是再狹窄。全文摘要本發(fā)明提供了用于治療和/或預(yù)防再狹窄的藥物組合物，該藥物組合物包括(a)治療有效量的由式1和式2表示的特定化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前體藥物、溶劑合物或異構(gòu)體，和(b)藥學(xué)可接受的載體、稀釋劑或賦形劑或其任何組合。文檔編號A61K31/34GK101616666SQ200780044019公開日2009年12月30日申請日期2007年11月26日優(yōu)先權(quán)日2006年11月27日發(fā)明者樸明奎,柳相國,郭泰煥申請人:麥仁斯有限公司;韓國煙草人參公社