專利名稱：：治療和預(yù)防眼部疾病的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明提供的是應(yīng)用環(huán)孢菌素化合物和組合物治療或預(yù)防眼部疾病和病癥例如水缺乏的干眼狀態(tài)、葡萄膜炎和晶狀體過敏性眼內(nèi)炎的方法。在特定方面，本發(fā)明提供的方法中所使用化合物是3-烷基氨基烷基取代的環(huán)孢菌素化合物、3-二烷基氨基烷基取代的環(huán)孢菌素化合物或3-雜環(huán)烷基取代的環(huán)孢菌素化合物。在一些實(shí)施方案中，該方法包括向有需要的患者施用有效量的本發(fā)明提供的化合物來治療或預(yù)防眼部疾病和病癥，例如水缺乏的干眼狀態(tài)、葡萄膜炎和晶狀體過敏性眼內(nèi)炎。2.
背景技術(shù)：
：干眼狀態(tài)可以在廣泛的個(gè)體上發(fā)生，但是其更常見于婦女、老人以及患有結(jié)締組織疾病(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、Sjogren's綜合癥)的人群。干眼癥患者通常會(huì)抱怨眼部剌激或不適。正如該名稱所暗示的，干燥是最常被提及的問題，患者會(huì)進(jìn)一步報(bào)告瘙癢、燒灼感或者"沙/沙礫樣"異物感。空氣質(zhì)量差、濕度低或極熱會(huì)加重癥狀，并且在一天中的較晚時(shí)刻是更明顯的。偶爾，患者會(huì)4艮告伴有不適的過度流淚或淚溢。葡萄膜炎，葡萄膜的炎癥，在美國(guó)導(dǎo)致大約10%的視力缺損。眼部的葡萄膜包括虹膜、睫狀體和脈絡(luò)膜。覆蓋視網(wǎng)膜的炎癥，稱作視網(wǎng)膜炎，或者視神經(jīng)的炎癥，稱作視神經(jīng)炎，可以伴隨或不伴隨葡萄膜炎發(fā)生。葡萄膜炎在解剖學(xué)上最常被分類為前部的、中部的、后部的或彌散的。前葡萄膜炎主要定位于眼睛的前段，包括虹膜炎和虹膜睫狀體炎。中葡萄膜炎，也稱作周邊葡萄膜炎，集中位于虹膜和晶狀體之后的區(qū)域，在睫狀體和睫狀環(huán)區(qū)域中，因此也使用另外的術(shù)語"睫狀體炎"和"睫狀環(huán)炎"。后葡萄膜炎指代視網(wǎng)膜炎、脈絡(luò)膜炎或視神經(jīng)炎形式中的任意類型。彌散葡萄膜炎表示涉及眼睛的所有部分，包括前部、中部和后部結(jié)構(gòu)的炎癥。晶狀體過敏性眼內(nèi)炎是人類自身免疫性疾病。它是在晶狀體嚢破裂后繼發(fā)的炎性眼部疾病，無論是外傷性的還是醫(yī)源性的，都稱作晶狀體導(dǎo)致的葡萄膜炎。晶體過敏癥是葡萄膜炎的嚴(yán)重形式，其中晶狀體是誘因抗原。晶狀體蛋白通常自出生前就被晶狀體嚢隔開。當(dāng)這些蛋白由于外傷或手術(shù)或偶然的在白內(nèi)障發(fā)展過程中被釋放入眼睛，它們會(huì)具有強(qiáng)烈的抗原性并會(huì)引發(fā)自身免疫反應(yīng)。如果反應(yīng)是中度的，則表現(xiàn)為慢性葡萄膜炎。如果發(fā)展的非?？欤劬Φ乃胁糠謺?huì)嚴(yán)重發(fā)炎。后者的反應(yīng)被稱作晶體過敏癥。人們對(duì)于發(fā)展新的且有效的化合物來治療眼部疾病和病癥，例如干眼癥、葡萄膜炎和晶狀體過敏性眼內(nèi)炎具有持續(xù)需求。環(huán)孢菌素是一組非極性環(huán)狀寡肽，具有免疫抑制、抗炎和抗寄生蟲的性質(zhì)。環(huán)孢菌素A是一種以用于治療干眼癥的局部用眼部乳劑制劑形式市售的、商標(biāo)名為Restasis的環(huán)孢菌素。在這些化合物的制劑中，環(huán)孢菌素的非水溶性是一個(gè)有待解決的問題。一方面，本發(fā)明尋求提供與環(huán)孢菌素A相比具有改善的水溶性，同時(shí)保持治療眼部疾病的有利性質(zhì)的環(huán)孢菌素衍生物。3.發(fā)明概述本發(fā)明提供治療或預(yù)防眼部疾病的方法，包括向有需要的患者施用治療有效量的通式(I)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>其中Ak是亞烷基；R'是-NRSR6，其中115和116各自獨(dú)立的為氬或包含1至6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；或者W和116與和它們相連的氮原子一起形成包含4至6個(gè)環(huán)原子的飽和或不飽和雜環(huán)，該環(huán)任選地包含另一個(gè)選自氮、氧和疏的雜原子，并且可以任選地被1至4個(gè)相同或不同的選自烷基、羥基、氨基、N-烷基氨基和N,N-二烷基氨基的基團(tuán)取代；R2是異丁基；R3是(E)-2-丁烯基-l或正丁基；W是乙基、l-羥乙基、異丙基或正丙基；或者其藥學(xué)上可接受的鹽或者溶劑化物。4.發(fā)明詳述本發(fā)明提供對(duì)有需要的患者進(jìn)行治療、預(yù)防或改善眼部疾病或病癥的方法。在一具體實(shí)施方案中，本發(fā)明提供上述定義的通式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，用于制備治療或預(yù)防眼部疾病的藥物。在下面的部分將詳述所述方法和組合物。4.1定義當(dāng)提及本發(fā)明提供的化合物和復(fù)合物時(shí)，下列術(shù)語具有下述含義，除非另有說明。"環(huán)孢菌素"指本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何環(huán)孢菌素化合物。參見Ruegger等人，1976,Helv.Chim.Acta.59:1075-92;Borel等人，1977，Immunology32:1017-25;其全部?jī)?nèi)容在此S|入作為參考。在本發(fā)明提供的方法中使用的示例性化合物是環(huán)孢菌素衍生物。除非另有說明，本文描述的環(huán)孢菌素是環(huán)孢菌素A，本文描述的環(huán)孢菌素衍生物是環(huán)孢菌素A的衍生物。"烷基"指單價(jià)飽和脂肪族烴基，尤其是具有最多約11個(gè)^f炭原子，更優(yōu)選為1-8個(gè)^友原子的較低級(jí)的烷基，更加優(yōu)選1-6個(gè)碳原子。烴鏈可以是直鏈或支鏈的。該術(shù)語示范性例子為，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正己基、正辛基、叔辛基和類似基團(tuán)。術(shù)"^吾"較低級(jí)的烷基"指具有1-6個(gè)^炭原子的烷基基團(tuán)。"亞烷基"指二價(jià)飽和脂肪族烴基基團(tuán)，尤其是具有最多約11個(gè)碳原子，更優(yōu)選具有1-6個(gè)碳原子，其可以是直鏈或支鏈的。該術(shù)語示范性例子為，例如亞甲基(-CH2-)、亞乙基(-CH2CHr)、亞丙基異構(gòu)體(例如-CH2CH2CHr和-CH(CH3)CH2-)和類似基團(tuán)。"氨基"指基團(tuán)-NH2。當(dāng)用于描述化合物或化合物上的基團(tuán)時(shí)，"雜"指化合物或基團(tuán)中的一個(gè)或多個(gè)碳原子被氮、氧或疏雜原子取代。"雜"可以應(yīng)用于上述任一烴基基團(tuán)，例如烷基，如雜烷基，芳基，如雜芳基，和具有1-5個(gè)尤其是1-3個(gè)雜原子的類似基團(tuán)。"雜環(huán)"指本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任意雜環(huán)。在本文中，雜環(huán)可以是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的雜芳基或環(huán)雜烷基。在一些實(shí)施方案中，雜環(huán)基指在環(huán)中包含一個(gè)或多個(gè)雜原子的4、5或6元飽和雜環(huán)。"二烷基氨基"指基團(tuán)-NRR，，其中R和R，獨(dú)立的代表如本文所定義的烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)雜烷基、取代的環(huán)雜烷基、雜芳基或取代的雜芳基。"鹵素"指氯、溴、氟或碘。"藥學(xué)上可接受的鹽"指本發(fā)明提供的化合物的任意鹽，該鹽保留了其生物學(xué)性質(zhì)、無毒且不具有不符合藥學(xué)用途的其它性質(zhì)。這些鹽可以來自多種本領(lǐng)域公知的有機(jī)和無機(jī)反離子。這些鹽包括(l)與有機(jī)酸或無機(jī)酸，例如鹽酸、氫溴酸、為t酸、硝酸、磷酸、磺酸、醋酸、三氟醋酸、三氯醋酸、丙酸、己酸、環(huán)戊基丙酸、羥乙酸、戊二酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、山梨酸、抗壞血酸、蘋果酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲?；?苯甲酸、苦味酸、肉桂酸、扁桃酸、酞酸、月桂酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙烷-二磺酸、2-羥基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟腦酸、樟腦磺酸、4-甲基二環(huán)[2.2.2]-辛-2-烯-l-羧酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基磺酸、葡糖酸、苯甲酸、谷氨酸、羥萘甲酸、水楊酸、硬脂酸、環(huán)己基磺酸、奎尼酸、粘康酸和類似酸形成的酸加成鹽；或者(2)當(dāng)存在于母體化合物中的酸性質(zhì)子(a)被金屬離子，例如堿金屬離子，堿土金屬離子或者鋁離子，或者堿金屬或堿土金屬氬氧化物，例如鈉、鉀、鈣、鎂、鋁、鋰、鋅和鋇的氫氧化物，氨取代，或(b)與有機(jī)堿，例如脂肪族、脂環(huán)族或芳香族有機(jī)胺，例如氨、甲胺、二甲胺、二乙胺、甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、乙二胺、賴氨酸、精氨酸、鳥氨酸、膽石威、N，N，-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、二乙醇胺、普魯卡因、N-芐基苯乙胺、N-甲基葡糖胺哌。秦、三(羥甲基)-氨基甲烷、四甲基銨氫氧化物和類似物配合形成的鹽。僅通過舉例方式說明，鹽進(jìn)一步包括，鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽、銨鹽、四烷基銨鹽以及類似鹽，以及當(dāng)化合物包含基本功能時(shí)，包括非毒性有機(jī)酸鹽或無機(jī)酸鹽，例如氬囟酸鹽，如鹽酸鹽和氬溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、磺酸鹽、硝酸鹽、醋酸鹽、三氟醋酸鹽、三氯醋酸鹽、丙酸鹽、己酸鹽、環(huán)戊基丙酸鹽、羥乙酸鹽、戊二酸鹽、丙酮酸鹽、乳酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、山梨酸鹽、抗壞血酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、3-(4-羥基苯甲?；?苯甲酸鹽、苦味酸鹽、肉桂酸鹽、扁桃酸鹽、酞酸鹽、月桂酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、1，2-乙烷-二磺酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、4-氯苯磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、4-甲苯磺酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、4-甲基二環(huán)[2.2.2]-辛-2-烯-l-羧酸鹽、葡庚糖酸鹽、3-苯基丙酸鹽、三甲基乙酸鹽、叔丁基乙酸鹽、ii月桂基磺酸鹽、葡糖酸鹽、苯甲酸鹽、谷氨酸鹽、羥萘甲酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、環(huán)己基磺酸鹽、奎尼酸鹽、粘康酸鹽和類似鹽。應(yīng)當(dāng)理解，當(dāng)本說明書中提到通式化合物時(shí)，也包括了所述通式(I)化合物的溶劑化物、水合物或與藥學(xué)上可接受的酸或堿形成的鹽。"肌氨酸"指N-甲基甘氨酸(CH3NHCH2C02H)。"溶劑化物"是指本發(fā)明提供的化合物或其鹽，其進(jìn)一步包括通過非共價(jià)分子間力結(jié)合的化學(xué)計(jì)算或非化學(xué)計(jì)算量的溶劑。其中當(dāng)溶劑是水時(shí)，所述溶劑化物為水合物。應(yīng)當(dāng)理解，具有相同分子式但是性質(zhì)或其原子的結(jié)合順序或其原子的空間排列不同的化合物稱作"異構(gòu)體"。其原子空間排列不同的異構(gòu)體稱作"立體異構(gòu)體"。彼此不是鏡像的立體異構(gòu)體稱作"非對(duì)映體"，那些各自為不重疊的鏡像立體異構(gòu)體稱作"對(duì)映體"。當(dāng)化合物具有一個(gè)不對(duì)稱中心時(shí)，例如當(dāng)其連接4個(gè)不同的基團(tuán)時(shí)，可能有一對(duì)對(duì)映體。對(duì)映體可采用其不對(duì)稱中心的絕對(duì)構(gòu)型來表征，并按照Cahn和Prelog規(guī)則命名為(R)或(S)(Cahn等人，1966,Angew.Chem.78:413-447,Angew.Chem.，Int.Ed.Engl.5:385-414(勘誤表Angew.Chem.,Int.Ed.Engl.5:511);Prelog和Helmchen，1982,Angew.Chem.94:614-631，Angew.Chem.Intemat.Ed.Eng.21:567-583;Mata和Lobo，1993，Tetrahedron:Asymmetry4:657-668)或者可以通過分子旋轉(zhuǎn)偏振光的平面的方式來表征，命名為右旋或左旋(即分別為(+)-或(-)-異構(gòu)體)。手性化合物能夠以單獨(dú)的對(duì)映體或其混合物存在。包含相等比例對(duì)映體的混合物稱作"外消旋混合物"。在一些實(shí)施方案中，在本發(fā)明提供的方法中使用的化合物可以具有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心；這種化合物因此能夠以單獨(dú)的(R)-或(S)-對(duì)映體或以其混合物產(chǎn)生。除非另外指明，例如指定分子式任意位置的立體化學(xué)結(jié)構(gòu)，在本說明書和權(quán)利要求書中的特定化合物的說明或命名意圖包括單獨(dú)的對(duì)映體和其混合物、外消旋混合物或其它。立體化學(xué)結(jié)構(gòu)的測(cè)定和立體異構(gòu)體的分離方法是本領(lǐng)域公知的。在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的是用堿處理過的上述化合物的立體異構(gòu)體。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的方法中使用的化合物是"立體化學(xué)純的"。立體化學(xué)純的化合物或具有立體化學(xué)純度水平的化合物被本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)為是"純的"。當(dāng)然，該純度水平將小于100%。在一些實(shí)施方案中，"立體化學(xué)純的"是指化合物基本上不含另外的異構(gòu)體。在特定實(shí)施方案中，化合物是85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、99.5%或99.9%的不含其它異構(gòu)體。在本文中，術(shù)語"患者"和"病人"可互換使用。術(shù)語"患者"指動(dòng)物，例如哺乳動(dòng)物，包括非靈長(zhǎng)類(例如牛、豬、馬、貓、狗、大鼠和小鼠)和靈長(zhǎng)類(例如猴子如短尾猴、黑猩猩和人)，包括人。在另一具體實(shí)施方案中，患者是家畜(例如馬、牛、豬等)或?qū)櫸?例如狗或貓)。在一些實(shí)施方案中，患者是人。在本文中，術(shù)語"治療劑"是指能夠被用于治療或預(yù)防病癥或一種或多種癥狀的任何藥劑。在一些實(shí)施方案中，術(shù)語"治療劑"指本發(fā)明提供的化合物。在一些其它實(shí)施方案中，所指的術(shù)語"治療劑"不是指本發(fā)明提供的化合物。治療劑是已知能夠用于，或已經(jīng)用于或目前正在用于治療或預(yù)防病癥或其一種或多種癥狀的藥劑。"治療有效量"指當(dāng)向患者施用來治療疾病時(shí)，足以有效治療疾病的化合物或復(fù)合物或其組合物的量。"治療有效量"尤其可以隨著化合物、疾病及其嚴(yán)重程度、被治療的患者的年齡、體重等發(fā)生變化。對(duì)任意疾病或病癥的"治療"，在一具體實(shí)施方案中，是指改善患者中存在的疾病或病癥。在另一具體實(shí)施方案中，"治療"指改善至少一種生理參數(shù)，其可以是患者難以辨別的。在另一具體實(shí)施方案中，"治療"指調(diào)節(jié)疾病或病癥，可以是物理上的(例如穩(wěn)定可辨別的癥狀)或生理上的(例如穩(wěn)定生理參數(shù))或者是兩者。在另一具體實(shí)施方案中，"治療"指延遲疾病或病癥的發(fā)生。在本文中，術(shù)語"預(yù)防劑"是指能夠被用于預(yù)防病癥或其一種或多種癥狀的任意藥劑。在一些實(shí)施方案中，術(shù)語"預(yù)防劑"指本發(fā)明提供的化合物。在一些其他實(shí)施方案中，術(shù)語"預(yù)防劑"不是指本發(fā)明提供的化合物。在一些實(shí)施方案中，預(yù)防劑是已知能夠用于、已經(jīng)用于或者目前正在用于預(yù)防或阻礙病癥的發(fā)生、發(fā)展、進(jìn)展和/或嚴(yán)重度的藥劑。在本文中，術(shù)語"預(yù)防"指通過進(jìn)行治療(例如施用預(yù)防劑或治療劑)或一種或多種癥狀復(fù)發(fā)、發(fā)生或發(fā)展的預(yù)防。在本文中，短語"預(yù)防有效量"指足以產(chǎn)生預(yù)防與病癥有關(guān)的一種或多種癥狀發(fā)展、復(fù)發(fā)或發(fā)生的治療(例如預(yù)防藥劑)或者促進(jìn)或改善另一治療(例如另一種預(yù)防劑)的預(yù)防效果的量。在本文中，術(shù)語"聯(lián)合"指使用多于一種治療(例如一種或多種預(yù)防和/或治療劑)。術(shù)語"聯(lián)合"的應(yīng)用不限制向患病患者施用治療(例如預(yù)防和/或治療劑)的順序。對(duì)于患病患者的第一治療(例如預(yù)防或治療劑如本發(fā)明提14供的化合物)的施用可以在施用第二治療之前(例如5分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)、1星期、2星期、3星期、4星期、5星期、6星期、8星期或12星期前)、同時(shí)或之后(例如5分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)、1星期、2星期、3星期、4星期、5星期、6星期、8星期或12星期后)。在本文中，術(shù)語"協(xié)同"指已經(jīng)被用于或正在被用于預(yù)防、管理或治療病癥的本發(fā)明提供的化合物和另一種治療(例如預(yù)防劑或治療劑)的聯(lián)合比這些治療的疊加效果更加有效。聯(lián)合治療(例如預(yù)防或治療劑的組合)的協(xié)同作用允許向患病患者施用較低量的一種或多種治療劑量和/或減少所述治療的施用頻率。使用較低量的治療(例如預(yù)防劑或治療劑)的能力和/或減少所述治療施用頻率的能力將減少與向患者施用所述治療相關(guān)的毒性，但不降低所述治療的預(yù)防或治療病癥的有效性。此外，協(xié)同作用可以導(dǎo)致藥劑在預(yù)防或治療病癥中的療效改善。最后，聯(lián)合治療(例如預(yù)防或治療劑的組合)的協(xié)同作用可以避免或減少與任一療法單獨(dú)使用相關(guān)的不利或不需要的副作用。4.2本發(fā)明的具體實(shí)施方案本發(fā)明提供治療、預(yù)防或改善眼部疾病和病癥例如缺水性干眼狀態(tài)、葡萄膜炎和晶狀體過敏性眼內(nèi)炎的方法，其包括向有需要的患者施用式I的化合物。不希望受任何特定工作理論的限制，我們認(rèn)為，在一些實(shí)施方案中，所述化合物以增強(qiáng)或恢復(fù)淚腺淚液生成的方式作用以提供需要的治療效果。4.2.1用于本發(fā)明方法的化合物除非另外指明，本文使用的術(shù)語"環(huán)孢菌素"指本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的化合物環(huán)孢菌素A。例如參見Ruegger等人，1976，Helv.Chim.Acta.59:1075-92;Borel等人，1977，Immunology32:1017-25;其內(nèi)容在此全部引入作為參考。術(shù)語"環(huán)孢菌素化合物"指本文描述的具有抵抗眼部疾病活性的任意環(huán)孢菌素化合物，無論該化合物是天然的、合成的或是半合成的。在一些實(shí)施方案中，Ak是-(CH2)p-，其中p是l、2、3或4;和/或R1是-NR5116且R5和R6選自如下a)R5和R6各自獨(dú)立的為包含1至6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或b)R5和R6與它們連接的氮原子一起形成包含5至6個(gè)環(huán)原子的飽和或不飽和雜環(huán)，該環(huán)可以任選地包含選自氮、氧和疏的另一雜原子。在一些實(shí)施方案中，Ak是-CH2CH2-。在一些實(shí)施方案中，R'是-NRSR6，其中RS和W各自獨(dú)立的為氫或包含1至6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；或W和W與它們連接的氮原子一起形成包含5至6個(gè)環(huán)原子的飽和或不飽和雜環(huán)，該環(huán)可以任選地包含選自氮、氧和疏的另一雜原子，并且可以任選地被相同或不同的1至4個(gè)烷基基團(tuán)取代。在一些實(shí)施方案中，仗5和116都是甲基。在一些實(shí)施方案中，RS和R6與它們連接的氮原子一起形成包含6個(gè)環(huán)原子的飽和雜環(huán)，該環(huán)可以任選地包含選自氮、氧和疏的另一雜原子。在進(jìn)一步的具體實(shí)施方案中，W和R6與它們連接的氮原子一起形成氮雜環(huán)丁烷環(huán)。在進(jìn)一步的具體實(shí)施方案中，R5和R6與它們連接的氮原子一起形成吡咯烷環(huán)。在一些實(shí)施方案中，115和R6與它們連接的氮原子一起形成哌啶環(huán)。在一些實(shí)施方案中，R5和R6與它們連接的氮原子一起形成N-甲基哌口秦環(huán)。在一些實(shí)施方案中，R5和R6與它們連接的氮原子一起形成嗎啉環(huán)。在一些實(shí)施方案中，R5和R6與它們連接的氮原子一起形成2,6-二甲基嗎啉環(huán)。在一些實(shí)施方案中，所述環(huán)孢菌化合物與環(huán)孢菌素A在本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的第三位點(diǎn)，即N-甲基甘氨酸位點(diǎn)處不同。在一些實(shí)施方案中，所述環(huán)孢菌素化合物包含3-烷基氨基烷基，3-N,N-二烷基氨基烷基或3-雜環(huán)烷基基團(tuán)。環(huán)孢菌素化合物可以進(jìn)一步包含本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它環(huán)孢菌素變體。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的方法包括向患者施用治療或預(yù)防有效量的上述通式(I)的環(huán)胞菌素化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物，其中B、X、R1、R2和R3如上所定義。在一些實(shí)施方案中，R3是(E)-2-丁烯基-l。在一些實(shí)施方案中R3是正丁基。在一些實(shí)施方案中，W是乙基。在進(jìn)一步的具體實(shí)施方案中，Ak是(CH2)p，p為2或3;R1是-NR5R6;W和W可以是相同或不同的，為氫或Cw烷基；或者R5和R6與它們連接的氮原子一起形成包含4至6個(gè)環(huán)原子的飽和或不飽和雜環(huán)，該環(huán)可以任選地包含選自氮和氧的另一雜原子，并且可以任選地被可以是相同或不同的選自甲基、羥基和二甲基氨基的1或2個(gè)基團(tuán)取代；W是異丁基；RS是(E)-2-丁烯基-l;且R4是乙基。17用于本發(fā)明才是供的方法的化合物是如下所列的環(huán)孢菌素化合物:A3-[2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基]環(huán)孢菌素。B3-[2-(氮雜環(huán)丁烷-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素。C3-[2-(吡咯烷-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素。D3-[2-(哌啶-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素。E3-[2-(4-甲基哌溱-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素。F3-[2-(嗎啉-4-基)乙氧基]環(huán)孢菌素。G3-[2-(2，6-二甲基嗎啉-4-基)乙氧基]環(huán)孢菌素。H3-[2-(3-羥基吡咯烷-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素。I3-{2-[(4-二甲基氨基)哌啶-1-基]乙氧基}環(huán)孢菌素。JT3-[2-(4-羥基哌啶-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素。K3-[2-(咪唑-1-基)乙氧基]環(huán)孢菌素。L3-[2-(N-甲基氨基)乙氧基]環(huán)孢菌素。M3-[2-(N-異丙基-N-甲基氨基)乙氧基]環(huán)孢菌素。N3-[2-(氨基丙氧基)]環(huán)孢菌素。化合物字母編號(hào)A-N將在下文中使用。式(I)化合物的鹽是新的，因此形成本發(fā)明的進(jìn)一步的特征。在一具體實(shí)施方案中，所述鹽選自鹽酸鹽、疏酸鹽、磷酸鹽、碳酸鹽、醋酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、硬脂酸鹽、丙酸鹽、苯甲酸鹽、延胡索酸鹽、馬尿酸鹽、葡萄糖酸鹽、抗壞血酸鹽、己二酸鹽、谷氨酸鹽、甲磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、油酸鹽、十二烷基疏酸鹽、氫溴酸鹽和硝酸鹽。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物具有最佳的免疫抑制效價(jià)。與環(huán)孢菌素A有關(guān)的免疫調(diào)節(jié)效價(jià)可以用混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)試驗(yàn)來測(cè)定。該試驗(yàn)是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，例如，參見US6,946,465。該試驗(yàn)可采用來自大鼠、小鼠或人的淋巴細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物與環(huán)孢菌素A在MLR試驗(yàn)中等效。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物比環(huán)孢菌素A的效價(jià)低約1至約5000、約10至約3000、約50至約2000、約70至約1000、約100至約500、約150至約300倍。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物比環(huán)孢菌素A的效價(jià)低約10至約100,或約100至約5000倍。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物比環(huán)孢菌素A的效價(jià)低約2至約100、約2至約80、約2至約65、約2至約50、約2至約30、約2至約20、約2至約10、約2至約9、約2至約7或約2至約5倍。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物比環(huán)孢菌素A的效價(jià)低約1、5、10、15、25、50、100、150、200、250、300、350、400、450、500或1000倍。其它基于細(xì)胞的試驗(yàn)也可以被用來測(cè)定抗特定致炎細(xì)胞因子產(chǎn)物的活性，所述特定致炎細(xì)胞因子產(chǎn)物包括IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、TNF-cu干擾素和TGF-P。在一些實(shí)施方案中，本文的環(huán)孢菌素衍生物在通過下調(diào)細(xì)胞因子在干眼癥或葡萄膜炎的治療中提供臨床有益效果。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物具有有助于產(chǎn)生在眼內(nèi)傳遞和釋放化合物的最佳制劑的溶解度。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物具有比環(huán)孢菌素A改善的溶解度。在一些實(shí)施方案中，環(huán)孢菌素衍生物具有約0.001至約5mM、約0.005至約3mM、約0.007至約1mM、約0.01至約0.5mM、約0.02至約0.3mM、約0.05至約0.1mM、約0.06至約0.6mM、約0.08至約0.5mM或約0.1至約1mM的水溶解度。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物與環(huán)孢菌素相比具有改善的安全性。安全性可以通過包括急性和慢性動(dòng)物毒理模型在內(nèi)的各種試驗(yàn)?zāi)Ｐ蛠頊y(cè)定。對(duì)人類的潛在毒性也可以利用稱作細(xì)胞毒性試驗(yàn)的基于人類細(xì)胞的試驗(yàn)來測(cè)定。細(xì)胞毒性可以采用多種指標(biāo)和報(bào)告在各種細(xì)胞類型中進(jìn)行評(píng)價(jià)，參見GuidanceDocumentonUsing/"DatatoEstimate/FifvoStartingDosesforAcuteToxicity,(NIHPublicationNo.01-4500)。在一些實(shí)施方案中，在細(xì)胞毒性試驗(yàn)中，用于本發(fā)明提供的方法的化合物比環(huán)孢菌素的活性低約2至約10、約3至約8、約2至約6、約2至約5、約2至約3倍。在一些實(shí)施方案中，所述化合物是純的形式。純度可以是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何純度，例如絕對(duì)純、立體化學(xué)純或者兩者都是。在一些實(shí)施方案中，所述化合物至少為80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的純度。在一些實(shí)施方案中，所述化合物至少為90%的純度。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，該化合物至少為98%的純度。純化這些化合物的方法如下所迷。式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽是文獻(xiàn)中已知的或者可以通過采用已知方法來制備，例如如US專利6,583,265或國(guó)際專利WO99/65933、WO99/67280中所描述的，其內(nèi)容在此引入作為參考。4.2.2藥物組合物和施用方法用于本發(fā)明提供的方法的環(huán)孢菌素化合物是用于治療眼部疾病的。20本發(fā)明提供的方法采用包含至少一種通式(I)化合物的藥物組合物，如果合適可以為鹽形式，所述化合物可以單獨(dú)使用或者與一種或多種相容的且藥學(xué)上可接受的載體如稀釋劑或佐劑聯(lián)合，或者所述化合物可以與其它活性成分聯(lián)合的形式使用。在臨床實(shí)踐中，用于本發(fā)明提供的方法的環(huán)孢菌素化合物可以通過任何常規(guī)途徑施用，包括但不限于局部、口服、腸胃外或吸入(例如以氣霧劑的形式)施用。在一具體實(shí)施方案中，用于本發(fā)明提供的方法的環(huán)孢菌素化合物是口服施用?？梢杂闷瑒?、丸劑、^更膠嚢、粉劑或顆粒劑作為固體組合物用于口服施用來使用。在這些組合物中，本發(fā)明提供的活性產(chǎn)物與一種或多種惰性稀釋劑或佐劑，例如蔗糖、乳糖或淀粉混合。這些組合物可以包含除稀釋劑之外的物質(zhì)，例如潤(rùn)滑劑，如^更脂酸鎂，或者用于控制釋放的包膜?？梢杂冒栊韵♂寗┤缢蛞簯B(tài)石蠟的藥學(xué)上可接受的溶液、懸浮液、乳劑、糖漿和酏劑作為液體組合物用于口服施用來使用。這些組合物也可以包含除稀釋劑以外的其它物質(zhì)，例如潤(rùn)濕、增甜或調(diào)味產(chǎn)品。用于腸胃外施用的組合物可以是乳劑或無菌溶液。可以用丙二醇、聚乙二醇、植物油尤其是橄欖油、或可注射有機(jī)酯例如油酸乙酯作為溶劑或介質(zhì)來使用。這些組合物也可以包含佐劑，尤其是潤(rùn)濕劑、等滲劑、乳化劑、分散劑和穩(wěn)定劑。滅菌能夠以多種方式進(jìn)行，例如采用細(xì)菌過濾器，通過輻射或加熱。它們也可以被制成無菌固體組合物形式，其能夠在使用時(shí)溶解于無菌水或任何其它可注射無菌介質(zhì)中。所述組合物也可以是氣霧劑。以液體氣霧劑的形式使用，組合物可以是穩(wěn)定的無菌溶液或在使用時(shí)溶解于無熱源無菌水、生理鹽水或任何其它藥學(xué)上可接受的介質(zhì)中的固體組合物。由于以可直接吸入的干氣霧劑形式使用，所述活性成分進(jìn)行細(xì)微分散并與水溶性固體稀釋劑或介質(zhì)，例如右旋糖苷、甘露醇或乳糖結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的組合物是藥物組合物或者是單一劑量形式。本發(fā)明提供的藥物組合物和單一劑量形式包含預(yù)防或治療有效量的一種或多種預(yù)防劑或治療劑(例如，本發(fā)明^是供的化合物，或者其它預(yù)防劑或治療劑)，以及通常一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。在特定實(shí)施方案和本文上下文中，術(shù)語"藥學(xué)上可接受的"是指被聯(lián)邦或州政府管理機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的，或列在美國(guó)藥典中的或其它通常被藥典認(rèn)為可用于動(dòng)物，更尤其是人。術(shù)語"載體"是指隨治療劑一起施用的稀釋劑、佐劑(例如弗氏佐劑(完全的和不完全的))、賦形劑或介質(zhì)。這些藥物栽體可以是無菌液體，例如水和油，包括那些石油、動(dòng)物油、植物油或合成來源的，如花生油、大豆油、礦物油、芝麻油等。在一些實(shí)施方案中，水是當(dāng)藥物組合物是靜脈內(nèi)施用時(shí)的載體。生理鹽水溶液、葡萄糖水溶液和甘油溶液也可以被用作液體載體，尤其是可注射溶液。合適的藥用載體的例子見E.W.Martin著的"Remington'sPharmaceuticalSciences"中的描述。通常藥物組合物和劑型包含一種或多種賦形劑。合適的賦形劑是藥學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，合適的賦形劑的非限制性實(shí)例包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明膠、麥芽、米、面、白堊、硅膠、硬脂酸鈉、單硬脂酸甘油酯、滑石、氯化鈉、脫脂奶粉、甘油、丙烯、丙二醇、水、乙醇等。特定的賦形劑是適于加入藥物組合物還是加入劑型取決于本領(lǐng)域公知的多種因素，包括但不限于，劑型將被施用給患者的方式和劑型中的具體活性成22分。如果需要，組合物或單一劑量單元也可以包含微量潤(rùn)濕劑或乳化劑或pH緩沖劑。本發(fā)明提供的無乳糖組合物可以包含本領(lǐng)域公知的和例如在美囯藥典(USP)SP(XXI)/NF(XVI)中列出的賦形劑。一般而言，無乳糖組合物包含活性成分，藥學(xué)上相容的和藥學(xué)上可接受量的結(jié)合劑/填充劑和潤(rùn)滑劑。示例性的無乳糖劑型包含活性成分、微晶纖維素、預(yù)糊化淀粉和硬脂酸鎂。本發(fā)明進(jìn)一步提供包含活性成分的無水藥物組合物和劑型，因?yàn)樗畷?huì)促進(jìn)一些化合物的降解。例如，加入7jc(例如5%)是藥學(xué)領(lǐng)域廣泛接受的模擬長(zhǎng)期儲(chǔ)存的手段，以便測(cè)定例如貨架期或制劑隨時(shí)間的穩(wěn)定性的性質(zhì)。例如參見JensT.Carstensen,DrugStability:Principles&Practice,2d.Ed.，MarcelDekker，NY,NY，1995,pp.37980。實(shí)際上，水和熱可加速一些化合物的降解。因此，水對(duì)制劑的作用可具有重要意義，因?yàn)樗趾?或濕度在制劑的生產(chǎn)、處理、包裝、儲(chǔ)存、運(yùn)輸中是常常會(huì)遇到的。本發(fā)明提供的無水藥物組合物和制劑可以采用無水或低水分成分并且在低水分和低濕度條件下制備。如果預(yù)期在生產(chǎn)、包裝和/或儲(chǔ)存中會(huì)有水分和/或濕度有實(shí)質(zhì)性接觸，包含乳糖和包含伯胺或仲胺的至少一種活性成分的藥物組合物在一些實(shí)施方案中是無水的。無水藥物組合物在制備和儲(chǔ)存中應(yīng)維持其無水性質(zhì)。相應(yīng)的，在一些實(shí)施方案中，無水組合物用已知能防水的材料包裝，因此它們可以被包含在合適的試劑盒中。合適的包裝的例子包括但不限于密封箔材、塑料、單劑量包裝(例如小藥瓶)、泡罩板和條狀板。本發(fā)明進(jìn)一步4是供包含一種或多種降低活性成分降解速率的化合物的的藥物組合物和劑型。這種化合物在本文中被稱為"穩(wěn)定劑"，包括但不限于抗氧化劑例如抗壞血酸、pH緩沖劑或鹽緩沖劑。藥物組合物和單一劑量形式可以是溶液、懸浮液、乳劑、片劑、丸劑、膠嚢、粉劑、持續(xù)釋放制劑等形式?？诜苿┛梢园瑯?biāo)準(zhǔn)載體例如藥用等級(jí)的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、纖維素、碳酸鎂等。在一些實(shí)施方案中，這種組合物和劑型將包含預(yù)防或治療有效量的純的形式的預(yù)防或治療劑以及合適量的載體，以便提供適于向患者施用的形式。劑型應(yīng)當(dāng)適應(yīng)于施用模式。在一具體實(shí)施方案中，藥物組合物或單一劑量形式是無菌的并且是適于向患者施用的形式，例如動(dòng)物患者，或哺乳動(dòng)物患者，例如人類患者。本發(fā)明提供的藥物組合物被配制成與其施用途徑相適應(yīng)。施用途徑的例子包括但不限于，腸胃外，例如靜脈內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、皮下，口服、頰內(nèi)、舌下、吸入、鼻內(nèi)、透皮、局部、跨粘膜、腫瘤內(nèi)和滑膜腔內(nèi)施用。在一些實(shí)施方案中，組合物被配制成與常規(guī)操作相適應(yīng)，如藥物組合物適用于靜JI^內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、口服、鼻內(nèi)或局部給人施用。在一具體實(shí)施方案中，藥物組合物被配制成與對(duì)人皮下施用的常規(guī)操作相適應(yīng)。通常，用于靜脈內(nèi)施用的組合物是在無菌等滲含水緩沖液中的溶液。當(dāng)必須時(shí)，組合物也可以包含助溶劑和局部麻醉劑，例如lignocamne來緩解注射部位的疼痛。劑型的例子包括但不限于片劑；膠囊藥片；膠囊，例如軟彈性明膠膠囊；扁膠囊；含片；錠劑；分散劑；栓劑；軟膏劑；泥敷劑；糊劑；粉劑；敷料；乳膏劑；硬膏劑；溶液、貼劑；氣霧劑(例如鼻噴霧或吸入劑)；凝膠劑；適用于向患者經(jīng)口服或粘膜施用的液體制劑，包括懸浮劑(例如含水或不含水的液體懸浮劑、水包油乳劑或油包水液體乳劑)、溶液劑和酏劑；適用于腸胃外向患者施用的液體劑型；和無菌固體(例如結(jié)晶或無定性固體)，其能夠被重組來提供適于向患者腸胃外施用的液體劑型。本發(fā)明提供的組合物、制劑的形狀和類型通常隨其用途變化。例如，W可以包含比用于維持'3的一種或多種活性成分。類似的，腸胃外劑型可以包含與用于治療相同疾病或病癥的口服劑型相比較少量的一種或多種活性成分。本文包含的具體劑型的這些和其它方式彼此變化，其對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的。例A口參見Remington'sPharmaceuticalSciences,第20版，MackPublishing，EastonPA(2000)。通常，本發(fā)明提供的組合物的成分在單劑量形式中是單獨(dú)提供的或者是混合在一起的，例如，在密封容器例如指明活性成分量的安瓿或小袋中的凍干粉或無水濃縮物。當(dāng)組合物是輸液施用時(shí)，它可以被分裝在含有無菌藥用等級(jí)的水或生理鹽水的輸液瓶中。當(dāng)組合物是注射施用時(shí)，可以提供用于注射的無菌水安瓿或生理鹽水，使成分在注射前可以被混合。本發(fā)明提供的典型劑型包含本發(fā)明提供的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物，其范圍是約O.lmg至約lOOOmg每天，在早上以每天一次的單次劑量施用或者隨著食物以全天分散劑量施用。本發(fā)明提供的特定劑型含有大約0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1.0、2.0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、100、200、250、500或lOOOmg的活性環(huán)孢菌素。4.2.2.1透皮、局部和軲膜劑型25在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的是透皮、局部和粘膜劑型。本發(fā)明提供的透皮、局部和粘膜劑型包括但不限于眼用溶液、噴霧劑、氣霧劑、乳膏劑、洗劑、軟膏劑、凝膠劑、溶液、乳液、懸浮液或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它劑型。例如參見Remington'sPharmaceuticalSciences,第20版，MackPublishing,EasternPA(2000);和IntroductiontoPharmaceuticalDosageForms,第4版，Lea&Febiger，Philadelphia(1985)。適用于治療口腔內(nèi)粘膜組織的劑型可以被制成漱口劑或口用凝膠。此外，透皮劑型包括"儲(chǔ)庫型"或"基質(zhì)型"貼片，它可以被施用于皮膚并保持特定長(zhǎng)的時(shí)間以允許需要量的活性成分滲入?？梢员挥糜谔峁┍景l(fā)明透皮、局部和粘膜制劑的合適賦形劑(例如栽體和稀釋劑)和其它物質(zhì)是藥學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員公知的，取決于特定的藥物組合物或劑型將要被施用的特定組織?？紤]到這種情況，典型的賦形劑包括但不限于水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙二醇、丁-l,3-二醇、肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、礦物油及其混合物來形成洗劑、酊劑、乳膏劑、乳劑、凝膠劑或軟膏劑，它們是無毒的并且上藥學(xué)上可接受的。如果需要，保濕劑或潤(rùn)濕劑也可以被加入藥物組合物和劑型中。這種另外的成分的例子是本領(lǐng)域/>知的。例如參見Remington'sPharmaceuticalSciences，第20版，MackPublishing,EastonPA(2000)。取決于被治療的具體組織，在用本發(fā)明提供的活性成分治療之前、同時(shí)或之后可以使用其它成分。例如，可以使用滲透促進(jìn)劑幫助遞送活性成分至組織。合適的滲透促進(jìn)劑包括但不限于丙酮；各種醇類，例如乙醇、油醇和四氫p夫喃醇；烷基亞砜，例如二甲基亞砜；二甲基乙酰胺；二甲基甲酰胺；聚乙二醇；吡咯烷酮，例如聚乙烯吡咯烷酮；聚乙烯吡咯烷酮級(jí)(聚維酮，聚乙烯吡咯烷酮)；尿素和各種水溶性或水不溶性糖酯，例如吐溫80(聚山梨醇酯80)和司盤60(山梨醇酐單硬脂酸酯)。藥物組合物或劑型的pH值或者施用藥物組合物或劑型的組織的pH值也可以被調(diào)整以改善一種或多種活性成分的遞送。類似的，也可以調(diào)整溶劑載體的極性，它的離子強(qiáng)度或者張力以改善遞送?；衔锢缬仓狨ヒ部梢员患尤胨幬锝M合物或劑型從而有利地改變一種或多種活性成分的親水性或親脂性以便改善遞送。在這點(diǎn)上，硬脂酸酯可以作為脂質(zhì)介質(zhì)用于制劑，其可作為乳化劑或表面活性劑，作為遞送促進(jìn)劑或滲透促進(jìn)劑。活性成分的不同的鹽、水合物或溶劑化物可被用于進(jìn)一步調(diào)整獲得的組合物的性質(zhì)。4.2.2.2用于眼部施用的藥物組合物本發(fā)明提供的方法采用包含至少一種通式(I)化合物的藥物組合物，如果合適為鹽形式，所述化合物可以單獨(dú)使用或者與一種或多種相容的且藥學(xué)上可接受的栽體如稀釋劑或佐劑組合使用，或者與其它活性成分例如另一種用于治療眼部疾病的藥劑組合使用。在臨床實(shí)踐中，用于本發(fā)明提供的方法的包含環(huán)孢菌素化合物的藥物組合物可以以任何適用于眼部藥物給藥的方式進(jìn)行施用，例如溶液、懸浮液、軟膏劑、凝膠劑、脂質(zhì)分散體、膠狀微粒懸浮液、注射液例如眼內(nèi)注射液或結(jié)膜下注射液等，或是眼部植入物，例如任選地生物可降解控制釋放聚合物基質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，所述組合物被制成水溶液。在其它具體實(shí)施方案中，所述組合物是懸浮液、粘性或半粘性凝膠，或者其它類型的固體或半固體組合物?？梢员挥糜谒鲋苿┑亩喾N載體包括但不限于水，水和易溶于水的溶劑的混合物例如C廣Cr烷醇，包含0.5至5%無毒水溶性聚合物的植物油或礦物油，天然產(chǎn)物，例如明膠、海藻酸鹽、果膠、黃蓍膠、刺梧桐樹膠、黃原膠、角叉菜膠、瓊脂和阿拉伯膠，淀粉衍生物，例如醋酸淀粉和羥丙基淀粉，以及其它合成產(chǎn)物，例如聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯甲醚、聚環(huán)氧乙烷、交聯(lián)聚丙烯酸，例如中性卡波普，或那些聚合物的混合物。所述載體的濃度通常是所述活性成分濃度的1至10000倍?？梢员话谥苿┲械钠渌煞职◤埩υ鰪?qiáng)劑、防腐劑、增溶劑、無毒賦形劑、緩和劑、掩蔽劑、pH調(diào)節(jié)劑、共溶劑和增粘劑。在一些實(shí)施方案中，為了調(diào)節(jié)pH，例如調(diào)整為生理pH值，可以使用緩沖劑。pH值通常維持在約4.0至8.0、約4.0至6.0或約6.5至7.5范圍內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，pH值維持在約6、6.3、6.5、6.7、7.0、7.2或7.5。可以加入合適的緩沖劑，例如醋酸鹽、抗壞血酸鹽、硼酸、硼酸鈉、檸檬酸鉀、檸檬酸、碳酸氫鈉、葡萄糖酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、TRIS以及各種混合的磷酸鹽緩沖液(包括Na2HP04,NaH2P04和KH2P04的組合)和其混合物。加入的緩沖物質(zhì)的量，例如必須確保和維持生理上可接受的pH值范圍。通常，緩沖液的使用量為約0.05至3%重量、約0.07至2.5%重量、約0.1至2%重量、約0.5至2%重量或約1至2%重量。在一些實(shí)施方案中，緩沖液的量為制劑的約0.05、0.1、0.5、1、1.5、2、2.3或3%重量。在一些實(shí)施方案中，組合物包含張力增強(qiáng)劑，選自離子和非離子化合物。本發(fā)明使用的離子化合物包括但不限于堿金屬或堿土金屬鹵化物，例如CaCl2、KBr、KC1、LiCl、Nal、NaBr、NaCl或硼酸。非離子張力增強(qiáng)劑例如是尿素、甘油、山梨醇、甘露醇、丙二醇或右旋糖。本發(fā)明提供的組合物包括，例如足夠的張力增強(qiáng)劑來形成即用型眼部組合物，滲透壓約為約50至1000mOsmol、約100至500mOsmol、約200至400mOsmol、約280至350mOsmol或者約230至320mOsmol。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明4是供的組合物包含防腐劑。防腐劑的例子有季銨鹽，例如溴棕三甲銨、苯扎氯銨或苯佐氯銨，疏代水楊酸的烷基-汞鹽，例如疏柳汞、硝酸苯汞、醋酸苯汞或硼酸苯汞、對(duì)羥基苯甲酸酯，例如對(duì)鞋基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯，乙醇，例如氯丁醇、苯甲醇或苯乙醇，胍衍生物，例如氯己啶或聚己亞甲基雙胍，過硼酸鈉，GermalII或山梨酸。在一些實(shí)施方案中，防腐劑是溴棕三甲銨、苯扎氯銨或苯佐氯銨或?qū)αu基苯甲酸酯。如果合適，向眼用組合物中加入足夠量的防腐劑以確保在使用期間避免細(xì)菌和真菌的二次污染。在另一具體實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的局部制劑不包括防腐劑。這種制劑可以被用于佩戴隱形眼鏡的患者，或者那些使用多種局部滴眼劑和/或那些眼表面缺乏抵抗力可能更需要限制接觸防腐劑的患者。本發(fā)明提供的局部制劑可以進(jìn)一步包含增溶劑。適用于該組合物的增溶劑選自泰洛沙泊、脂肪酸、聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇脂肪酸酯、聚乙二醇、甘油醚、環(huán)糊精(例如a-、P-或y-環(huán)糊精，例如烷基化的、羥基烷基化的、羧基烷基化的或烷氧基羰基-烷基化的衍生物，或單-或二糖基-a-、P-或，環(huán)糊精，單-或二-麥芽才唐基-a-、|3-或，環(huán)糊精或panosyl-環(huán)糊精)、聚山梨酯20、聚山梨酯80、橄欖油、蓖麻油、花生油、礦物油或這些化合物的混合物。在一些實(shí)施方案中，增溶劑是蓖麻油和環(huán)氧乙烷的反應(yīng)產(chǎn)物，例如商業(yè)產(chǎn)品CremophorEL或CremophorRH40。蓖麻油和環(huán)氧乙烷的反應(yīng)產(chǎn)物已知是能被眼睛良好耐受的特別好的增溶劑。在其它具體實(shí)施方案中，增溶劑選自泰洛沙泊和環(huán)糊精。本文使用的增溶劑的濃度尤29其取決于活性成分的濃度。加入的量通常足以增溶活性成分。例如，增溶劑的濃度是活性成分濃度的0.1至5000倍。所述制劑可以進(jìn)一步包含無毒賦形劑，例如凡士林油、二甲基亞砜、Miglyol182(可從DynamitNobelKay-FriesChemicalCompany,MontVale,N丄購(gòu)買)、醇(例如乙醇、正丙醇或異丙醇)、脂質(zhì)體或脂質(zhì)體樣產(chǎn)品或硅酮液體、乳化劑、潤(rùn)濕劑或填充劑，例如聚乙二醇200、300、400和600，或Carbowax1000、1500、4000、6000和10000。如果需要，可以使用其它下列賦形劑，但是它們不試圖以任何方式限制可能的賦形劑的范圍。它們是絡(luò)合劑，例如EDTA二鈉或EDTA，抗氧化劑例如抗壞血酸、乙酰半胱氨酸、半胱氨酸、亞疏酸氬鈉、丁基-羥基苯甲醚、丁基羥基甲苯或a-生育酚醋酸酯；穩(wěn)定劑，例如環(huán)糊精、疏脲、疏代山梨醇、二辛基磺基琥珀酸鈉或單疏代甘油，維生素E和維生素E衍生物，例如維生素E生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(TPGS);或其它賦形劑，例如月桂酸山梨醇酯、油酸三乙醇胺鹽或棕櫚酸酯。在一些實(shí)施方案中，賦形劑是絡(luò)合劑例如EDTA二鈉和穩(wěn)定劑例如環(huán)糊精。添加的賦形劑的量和類型與特定需要相適應(yīng)，通常為約0.0001至約90%重量。其它化合物也可以被加入本發(fā)明提供的組合物中來增加載體的粘度。粘度增加劑的例子包括但不限于纖維素聚合物，例如甲基纖維素(MC),、羥乙基纖維素(HEC)、羥丙基纖維素(HPC)、羥丙甲基纖維素(HPMC)和羧甲基纖維素鈉(NaCMC)，以及其它可溶脹的親水性聚合物，例如聚乙烯醇(PVA)、透明質(zhì)酸及其鹽(例如透明質(zhì)酸鈉)、疏酸軟骨素及其鹽、右旋糖和通常稱作"卡波姆"的交聯(lián)丙烯酸聚合物(可購(gòu)自B.F.Goodrich,名稱為Carbopol聚合物)。在一些實(shí)施方案中，任何增稠劑的量都是在提供約15cps至25cps的范圍的粘度，具有前述范圍粘度的溶液通常被認(rèn)為是最佳的適于制劑在眼中的舒適度和保留度。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的組合物包含本發(fā)明提供的化合物，在作為潤(rùn)滑劑的純化水中的羧甲基纖維素鈉(純化水作為潤(rùn)滑劑)、低滲物質(zhì)、硼酸鹽緩沖液、氯化鈉、氯化鉀、碳酸氫鈉、氯化鈣、氯化鎂和磷酸鈉。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的組合物包含本發(fā)明提供的化合物、礦物油和羊毛脂。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的組合物包含本發(fā)明提供的化合物、緩沖溶液、等滲水溶液、檸檬酸緩沖液、氯化鈉、乙二胺四乙酸二鈉和聚四聚季銨鹽。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的組合物包含本發(fā)明提供的化合物、氯化鈉、硼酸、氯化鉀、氯化鈣、氯化鎂、純化水和穩(wěn)定的氧氯復(fù)合物。4.2.3治療方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明提供的是對(duì)于需要此治療的患者治療或預(yù)防眼部疾病的方法，例如干眼癥、葡萄膜炎和晶狀體過敏性眼內(nèi)炎。盡管干眼癥可能起因于多種不相關(guān)的致病因素，所有并發(fā)癥都表現(xiàn)共同的效果，就是眼前淚膜的損壞，導(dǎo)致暴露的外表面脫水和許多下面列出的癥狀。在一些實(shí)施方案中，干眼的癥狀包括感覺干燥，持續(xù)的刺激例如通常由存在于眼皮和眼表面之間的小物體引起。在嚴(yán)重的病例中，視覺可能有實(shí)質(zhì)性損傷。干眼疾病包括但不限于干性角膜結(jié)膜炎(KCS)、與年齡相關(guān)的干眼癥、Stevens-Johnson綜合癥、Sjogren's綜合癥、目艮疤痕性類天皰瘡、眼瞼炎、角膜損傷、感染、Riley-Day綜合癥、先天性淚缺乏、營(yíng)養(yǎng)失調(diào)或缺乏(包括維生素)、藥物副作用、眼壓和腺體和組織損傷、暴露31于霧、煙、過度干燥的空氣、空中顆粒的環(huán)境、自身免疫和其它免疫缺陷病癥。本發(fā)明才是供的方法可治療或預(yù)防一種或多種干眼疾病。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療或預(yù)防葡萄膜炎的方法。在一些實(shí)施方案中，葡萄膜炎前部的、中部的、后部的或彌散的葡萄膜炎。前葡萄膜炎主要定位于眼睛的前段，包括虹膜炎和虹膜睫狀體炎。中葡萄膜炎，也稱作周邊葡萄膜炎，位于虹膜和晶狀體之后的區(qū)域中心，在睫狀體和睫狀環(huán)區(qū)域中。后葡萄膜炎指代多種類型的視網(wǎng)膜炎、脈絡(luò)膜炎或視神經(jīng)炎中的任意形式。彌散葡萄膜炎表示炎癥波及眼睛的所有部分，包括前部、中部和后部結(jié)構(gòu)。葡萄膜炎的癥狀可以隨著葡萄膜炎的位置而變化急性和嚴(yán)重癥狀在前葡萄膜炎中通常是更常見的，可能包括眼疼、眼紅、畏光、視力模糊、視力下降和失明。其它癥狀包括"漂浮物"，其是小的斑點(diǎn)或云狀物在視野內(nèi)移動(dòng)，眼內(nèi)長(zhǎng)期閃光，帶狀角膜病變，繼發(fā)性青光眼和后部囊下白內(nèi)障。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療或預(yù)防晶狀體過敏性眼內(nèi)炎的方法。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療或預(yù)防晶體過敏癥的方法，它是葡萄膜炎的嚴(yán)重形式。4.2.4劑量和單位劑量形式在人類治療中，醫(yī)生將決定劑量方案，該方案是他認(rèn)為按照具體被治療患者的年齡、體重、病程階段和其它因素以及按照預(yù)防或治愈性治療最合適的。在一些實(shí)施方案中，劑量比例是一個(gè)成人每天大約0.001至約1000mg。在一些實(shí)施方案中，劑量是一個(gè)成人每天大約1至約1000mg，或者每天約5至約250mg或者每天約10至50mg。在一些實(shí)施方案中，劑量是每天約5至約400mg,每天約25至200mg，每天約50至約500mg。在一些實(shí)施方案中，劑量是一個(gè)成人每天約0.001至約500mg、每天約0.001至約100mg、每天約0.005至約50mg、每天約0.01至10mg、每天約0.03至lmg、每天約0.05至lmg、每天約0.06至lmg、每天約0.08至lmg或約0.1至lmg。在一些實(shí)施方案中，劑量是每人每天約O.OOlmg、0.005mg、0.0lmg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg、0.08mg、0.09mg、O.lmg、0.3mg、0.5mg、lmg、5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、60mg、70mg、80mg或100mg。能夠有效預(yù)防或治療病癥或一種或多種疾病癥狀的本發(fā)明提供的化合物或組合物的量，將隨著疾病或狀況的性質(zhì)和嚴(yán)重程度以及活性成分的施用途徑而變化。頻率和劑量也將隨著每個(gè)患者的具體因素變化，取決于給予的具體治療(例如治療劑或預(yù)防劑)、病癥、疾病或狀況的嚴(yán)重程度、施用途徑、以及患者的年齡、身體、體重、反應(yīng)和醫(yī)療歷史。有效量可以從體內(nèi)或動(dòng)物模型試驗(yàn)系統(tǒng)的劑量-反應(yīng)曲線外推得到。組合物的示例性劑量包括每千克患者體重或樣本重量活性化合物的毫克或微克量(例如約每千克O.l微克至約每千克50毫克、每千克約0.5微克至每千克約25毫克、每千克約0.1微克至每千克約10毫克、每千克約1微克至每千克約5毫克、每千克約10微克至每千克約5毫克、每千克約100微克至每千克約2.5毫克，或每千克約100微克至每千克約1毫克)。在一些實(shí)施方案中，每患者體重或樣本重量劑量為每千克約10微克至每千克約50毫克、每千克約100微克至每千克約25毫克、或每千克約100微克至每千克約10毫克。對(duì)于提供的組合物，以活性化合物的重量計(jì)算，對(duì)患者的施用劑量通常占患者體重0.140mg/kg至3mg/kg。在一些具33體實(shí)施方案中，對(duì)患者的施用劑量占患者體重介于0.20mg/kg至2.00mg/kg、或介于0.30mg/kg至1.50mg/kg之間。在一些實(shí)施方案中，對(duì)于本發(fā)明提供的組合物，以活性化合物的重量計(jì)算，對(duì)患者的施用劑量占患者體重約0.0001mg/kg至0.01mg/kg。在一些實(shí)施方案中，以活性化合物的重量計(jì)算，對(duì)患者的施用劑量占患者體重約0.0005mg/kg至0.01mg/kg。在一些實(shí)施方案中，對(duì)于本發(fā)明提供的組合物，以活性化合物的重量計(jì)算，對(duì)患者的施用劑量占患者體重約0.140mg/kg至3mg/kg。在一些實(shí)施方案中，對(duì)患者的施用劑量占患者體重約0.0001mg/kg至約0.01mg/kg、約0.0005mg/kg至約O.OOlmg/kg、約O.OOlmg/kg至約O.Olmg/kg、約0.20mg/kg至2.00mg/kg、或介于0.30mg/kg至1.50mg/kg。在一些實(shí)施方案中，對(duì)患者的施用劑量為約0.001mg/kg，當(dāng)患者重約60kg時(shí)，式I化合物的施用劑量為約0.006mg每劑量。在一些實(shí)施方案中，用于本文描述的狀況的本發(fā)明4是供的組合物的推薦日劑量范圍在每天約0.0005mg至約O.lmg,或每天約O.lmg至約lOOOmg范圍內(nèi)，以一天一次的單劑量施用或以貫穿全天的間隔劑量施用。在一具體實(shí)施方案中，日劑量是以均等間隔的劑量每天施用兩次。在一具體實(shí)施方案中，日劑量范圍是每天約10mg至約200mg、每天約10mg至約150mg、或者每天約25至約100mg。在另一具體實(shí)施方案中，日劑量是每天約O.OOOlmg至約O.Olmg，在另一具體實(shí)施方案中，日劑量是每天約0.0005mg至約0.005mg，或者在另一具體實(shí)施方案中日劑量是每天約O.OOlmg至約0.05mg。在某些情況下，可能需要使用超出上文公開的范圍的活性成分劑量，這一點(diǎn)對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。此外，應(yīng)當(dāng)指出，臨床醫(yī)生或治療醫(yī)生根據(jù)患者的反應(yīng)會(huì)知道如何和何時(shí)中斷、調(diào)整或結(jié)束治療。對(duì)于不同的疾病和狀況可以采用不同的治療有效量，這一點(diǎn)對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說是容易知道的。類似的，足以預(yù)防、處理、治療或改作用的量也包括在上述劑量和施用頻率計(jì)劃內(nèi)。此外，當(dāng)向患者進(jìn)行多劑量施用本發(fā)明提供的組合物時(shí)，不是所有的劑量都必須相同。例如，對(duì)患者的施用劑量可以增加以改善組合物的預(yù)防或治療效果或者它可以減少來降低特定患者經(jīng)歷的一種或多種副作用。在特定實(shí)施方案中，基于活性化合物的重量向患者施用所述組合物劑量以預(yù)防、治療、控制或改善病癥或其一種或多種癥狀，本發(fā)明提供的組合物的劑量占患者體重約0.000lmg/kg、0.0005mg/kg、0.0007mg/kg、0.0009mg/kg、0.001mg/kg、0.0012mg/kg、0.0015mg/kg、0.0017mg/kg、0.002mg/kg、0.0025mg/kg、0.003mg/kg、0.0035mg/kg、0.004mg/kg、0.005mg/kg、0.01mg/kg、0.1mg/kg、lmg/kg或更多。在另一具體實(shí)施方案中，為預(yù)防、治療、控制或改善病癥或其一種或多種癥狀而向患者施用的本發(fā)明提供的組合物的劑量是約0.000lmg至約100mg、0.0005mg至50mg、0細(xì)8mg至25mg、O.OOlmg至10mg、0扁3mg至10mg、0.0015mg至10mg、0.0018mg至10mg、0.002mg至10mg、0.005mg至10mg、0.015mg至10mg、O.Olmg至lmg或O.lmg至lmg齊'J量單4立。在一些實(shí)施方案中，可重復(fù)施用本發(fā)明提供的相同組合物，并且所述施用可以間隔至少1天、2天、3天、5天、10天、15天、30天、45天、2月、75天、3個(gè)月或6個(gè)月。在另一具體實(shí)施方案中，可以重復(fù)施用相同預(yù)防或治療劑，并且施用可以間隔至少1天、2天、3天、5天、10天、15天、30天、45天、2個(gè)月、75天、3個(gè)月或6個(gè)月。在一些方面，本發(fā)明提供的單位劑量以適于施用的形式包含本發(fā)明提供的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。這種劑型在前面已經(jīng)進(jìn)行了詳細(xì)描述。在特定具體實(shí)施方案中，單位劑量包含大約0.001、0.005、0.006、0.007、0扁、0.009、0.01、0.015、0.02、0.025、0.03、0.05、0.1、1、5、10、25、50或100mg活性成分。這種單位劑量可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的技術(shù)來制備。4.2.5聯(lián)合治療在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的治療或預(yù)防的方法包括向有需要的患者施用能有效治療或預(yù)防眼部疾病和病癥(例如缺水性干眼狀態(tài)、葡萄膜炎或晶狀體過敏性眼內(nèi)炎)的第二藥劑。所述第二藥劑可以是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知能夠有效治療或預(yù)防干眼癥、葡萄膜炎或晶狀體過敏性眼內(nèi)炎的任意藥劑。所述第二藥劑可以是目前本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的第二藥劑，或者所述第二藥劑可以是今后開發(fā)的用于治療或預(yù)防干眼癥、葡萄膜炎和/或晶狀體過敏性眼內(nèi)炎的第二藥劑。在一些實(shí)施方案中，所述第二藥劑目前已經(jīng)被批準(zhǔn)用于治療或預(yù)防千眼癥、葡萄膜炎和/或晶狀體過敏性眼內(nèi)炎。在一些實(shí)施方案中，所述第二治療活性劑可以是可被用于治療干眼癥、葡萄膜炎和/或晶狀體過敏性眼內(nèi)炎的癥狀或其任意潛在起因的任意藥劑。此外，所述第二治療活性劑可以是能用于預(yù)防或治療任何可能與干眼癥、葡萄膜炎和晶狀體過敏性眼內(nèi)炎同時(shí)發(fā)生的疾病的任意藥劑，無論該疾病是否相關(guān)。在一些實(shí)施方案中，所述第二治療活性劑可以是在局部眼用組合物中使用的藥物，其中所述局部眼用組合物可能會(huì)導(dǎo)致、有助于或加劇眼部疾病，在這里被視為伴隨應(yīng)用的副作用。在這方面，本發(fā)明提供的方法可用于減少或根除所述副作用。用于本發(fā)明4是供的治療眼部疾病的一類有用的第二治療活性劑是核苷酸嘌呤受體激動(dòng)劑，例如尿苷5，-三磷酸鹽、二核苷酸、胞苷5，-二磷酸鹽、腺苷5，-二磷酸鹽、P'-(胞苷5，-)-P-(尿苷5，-)四磷酸鹽、P1，P氣二(尿苷5，)-四磷酸鹽，或其治療有效類似物或衍生物，它們可以影響眼淚分泌，尤其是粘膜層的眼淚，因此可能具有治療干眼疾病的潛力。這些化合物在下述專利中有所描述，所有這些被全文引入作為參考U.S6,555,675;U.S6,548,658;U.S6,436,910;U.S6,348,589;U.S6,331,529;U.S6,323,187;U.S6,319,908;和U.S5,900,407。作為第二治療活性劑用于本發(fā)明提供的治療眼部疾病的方法的另一類有用的化合物是煙堿性受體激動(dòng)劑，例如煙堿及其類似物、反式位變異購(gòu)煙;威及其類似物、地棘蛙素及其類似物、吡啶酚衍生物、p泉咬生物;威例如洛貝林及其類似物、特定對(duì)-烷基琉苯酚衍生物，和吡蟲啉及其類似物。這些化合物被認(rèn)為能通過粘膜杯狀細(xì)胞刺激粘蛋白分泌，因此可以用于治療干眼，如US6，277，855中的描述，其在此引入作為參考。在本發(fā)明提供的用于治療眼部疾病的方法中的另一類第二治療活性劑是四環(huán)素、四環(huán)素的衍生物或類似物，或化學(xué)改性的四環(huán)素。這些化合物被認(rèn)為具有糾正延遲的眼淚清除的潛能，如u.S6,455,583Bl中的描述，其在此引入作為參考，它與某些干眼病例相關(guān)。作為第二治療活性劑用于本發(fā)明提供的治療眼部疾病的方法的另一類化合物是皮質(zhì)激素，例如甲氫潑尼松琥珀酸鈉、醋酸氫化潑尼松、氫化潑37尼松磷酸鈉、氟米龍、醋酸氟米龍、地塞米松磷酸鈉、羥甲基孕酮、利美索龍、布地奈德和替可的松pivalatein，它們被認(rèn)為能用于治療干眼癥，如U.S6,153,607所描述，其在此引入作為參考。作為第二治療活性劑用于本發(fā)明提供的治療眼部疾病的方法的另一類化合物是人淚腺腺泡上皮產(chǎn)物例如生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子，包括轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子P(TGFP),其在U.S5,652,209中被公開用于治療干眼癥，其在此引入作為參考。用于本發(fā)明提供的治療眼部疾病的方法中的另一類有用的第二治療活性劑是雄激素或雄激素類似物，例如17a-甲基-17(3-羥基-2-氧雜-5a-雄甾烷-3-酮、睪酮或睪酮衍生物、4,5a-二氬睪酮或衍生物、17P-羥基-5a-雄甾烷和衍生物、19-去甲睪酮或衍生物和氮取代的雄激素，它們?cè)谙铝袑＠斜唤虒?dǎo)用于治療干眼疾病，這些專利在此引入作為參考，U.S6,107,289;U.S5,958,912;U.S5,688,765和U.S5,620,921。在一些實(shí)施方案中，用于本發(fā)明提供的治療眼部疾病的方法的第二治療活性劑是局部用皮質(zhì)激素，包括但不限于潑尼松和曲安奈德；睫狀肌麻痹劑例如環(huán)噴托酯和氳溴酸后馬托品，以及免疫抑制劑例如甲氨蝶呤、環(huán)孢菌素A、環(huán)磷酰胺和苯丁酸氮芥。用于本發(fā)明提供的治療眼部疾病的方法的另一類第二治療活性劑是抗生素，包括但不限于大環(huán)內(nèi)酯類(例如雷帕霉素、妥布霉素、子嚢霉素、氮雜內(nèi)酯類例如阿奇霉素)；唑烷酮類(例如利奈唑胺、依哌唑胺)；喹諾酮類(例如氧氟沙星、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、洛美沙星)、慶大霉素和毛果蕓香堿。疾病的方法的其他有用的第二治療活性劑是環(huán)孢菌素A、環(huán)孢菌素B、環(huán)孢菌素C、環(huán)孢菌素D和環(huán)孢菌素G。在一些實(shí)施方案中，所述第二藥劑可以與本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物一起制劑或包裝。當(dāng)然，只有根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員的判斷，所述第二藥劑的這種共同制劑不影響各自藥劑活性或施用方式時(shí)，才能與本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物一起制劑。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物和第二藥劑被分離地制劑。它們可以被包裝在一起或分別包裝，以本領(lǐng)域技術(shù)人員的方便為準(zhǔn)。在這里提供用于本發(fā)明^是供的聯(lián)合治療的所述第二藥劑的劑量。在一些實(shí)施方案中，低于目前已經(jīng)或正在^f皮用于預(yù)防或治療本文所述疾病的劑量被用于本發(fā)明提供的聯(lián)合治療。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠從其知識(shí)中獲得第二藥劑的推薦劑量。對(duì)于被批準(zhǔn)用于臨床應(yīng)用的那些第二藥劑，推薦劑量例如見Hardman等人.,eds.,1996,Goodman&Gilman'sThePharmacologicalBasisOfBasisOfTherapeutics第9版，Mc-Graw-Hill，NewYork;Physician'sDeskReference(PDR)第57版，2003，MedicalEconomicsCo.,Inc.,Montvale，NJ中的描述，其在此全文引入作為參考。在各種具體實(shí)施方案中，治療(例如本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物和第二藥劑)的施用小于5分鐘間隔、小于30分鐘間隔、小于l小時(shí)間隔、在約1小時(shí)間隔、在約1至約2小時(shí)間隔、在約2小時(shí)至約3小時(shí)間隔、在約3小時(shí)至約4小時(shí)間隔、在約4小時(shí)至約5小時(shí)間隔、在約5小時(shí)至約6小時(shí)間隔、在約6小時(shí)至約7小時(shí)間隔、在約7小時(shí)至約8小時(shí)間隔、在約8小時(shí)至約9小時(shí)間隔、在約9小時(shí)至約10小時(shí)間隔、在約10小時(shí)至約11小時(shí)間隔、在約11小時(shí)至約12小時(shí)間隔、在約12小時(shí)至18小39時(shí)間隔、18小時(shí)至24小時(shí)間隔、24小時(shí)至36小時(shí)間隔、36小時(shí)至48小時(shí)間隔、48小時(shí)至52小時(shí)間隔、52小時(shí)至60小時(shí)間隔、60小時(shí)至72小時(shí)間隔、72小時(shí)至84小時(shí)間隔、84小時(shí)至96小時(shí)間隔、或96小時(shí)至120小時(shí)間隔。在一些實(shí)施方案中，兩種或多種療法是在同一巡診中給予。在一些實(shí)施方案中，循環(huán)施用本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物和第二藥劑。循環(huán)治療包括給予第一治療(例如第一預(yù)防或治療劑)一段時(shí)間，然后給予第二治療(例如第二預(yù)防或治療劑)一段時(shí)間，然后給予第三治療(例如第三預(yù)防或治療劑)一段時(shí)間等等，并且重復(fù)該順序施用，也就是說，所述循環(huán)是為了減少對(duì)一種藥劑的抗藥性的發(fā)展，避免或減少一種藥劑的副作用，和/或改善治療的有效性。在一些實(shí)施方案中，相同藥劑可以重復(fù)施用，并且所述施用可以間隔至少1天、2天、3天、5天、10天、15天、30天、45天、2個(gè)月、75天、3個(gè)月、或6個(gè)月。在另一具體實(shí)施方案中，相同藥劑的施用可以重復(fù)，并且所述施用可以間隔至少1天、2天、3天、5天、10天、15天、30天、45天、2個(gè)月、75天、3個(gè)月或6個(gè)月。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的環(huán)孢菌素衍生物和第二藥劑被按順序并在一定的時(shí)間間隔內(nèi)施用給患者例如哺乳動(dòng)物包括人，使得環(huán)孢菌素衍生物與其它藥劑一起發(fā)生作用以提供比它們以其他方式施用更多的益處。例如，所述第二活性劑可以在相同的時(shí)間施用或者以任意順序在不同時(shí)間點(diǎn)施用；不過，如果不在相同時(shí)間施用，其施用在時(shí)間上應(yīng)當(dāng)足夠近以便提供需要的治療或預(yù)防效果。在一具體實(shí)施方案中，環(huán)孢菌素衍生物和第二活性劑在重疊的時(shí)間發(fā)揮其藥效。每個(gè)第二活性劑可以任意合適的方式、通過任何適合的途徑進(jìn)行單獨(dú)施用。在其它具體實(shí)施方案中，環(huán)孢菌素衍生物在第二活性劑施用之前、同時(shí)或之后施用。在各個(gè)具體實(shí)施方案中，環(huán)孢菌素衍生物和第二藥劑的施用為小于約1小時(shí)間隔、在約1小時(shí)間隔、在約1小時(shí)至約2小時(shí)間隔、在約2小時(shí)至約3小時(shí)間隔、在約3小時(shí)至約4小時(shí)間隔、在約4小時(shí)至約5小時(shí)間隔、在約5小時(shí)至約6小時(shí)間隔、在約6小時(shí)至約7小時(shí)間隔、在約7小時(shí)至約8小時(shí)間隔、在約8小時(shí)至約9小時(shí)間隔、在約9小時(shí)至約10小時(shí)間隔、在約10小時(shí)至約11小時(shí)間隔、在約11小時(shí)至約12小時(shí)間隔、不超過24小時(shí)間隔或不超過48小時(shí)間隔。在其它具體實(shí)施方案中，環(huán)孢菌素衍生物和第二藥劑同時(shí)施用。在其它具體實(shí)施方案中，環(huán)孢菌素衍生物和第二藥劑的施用為約2至4天間隔、在約4至6天間隔、在約1星期間隔、在約1至2星期間隔、或超過2星期間隔。在一些實(shí)施方案中，環(huán)孢菌素衍生物和第二藥劑被循環(huán)施用給患者。循環(huán)治療包括施用第一藥劑一段時(shí)間，然后施用第二藥劑一段時(shí)間和/或第三藥劑一段時(shí)間，并重復(fù)該施用順序。循環(huán)治療可以降低對(duì)一種或多種治療的抗藥性的發(fā)展，避免或減少一種療法的副作用，和/或改善治療的有效性。在一些實(shí)施方案中，環(huán)孢菌素衍生物和第二活性劑的施用為一小于約3星期的循環(huán)，約每?jī)尚瞧谝淮?，約每10天一次或約每周一次。一個(gè)循環(huán)可以包括每個(gè)循環(huán)經(jīng)大約90分鐘、每個(gè)循環(huán)經(jīng)大約1小時(shí)、每個(gè)循環(huán)經(jīng)大約45分鐘通過輸液施用環(huán)孢菌素衍生物和第二藥劑。每個(gè)循環(huán)可包括至少1星期休整、至少2星期休整、至少3星期休整。施用循環(huán)的數(shù)目為約1至約12個(gè)循環(huán)，更通常為約2至約10個(gè)循環(huán)，更通常為約2至約8個(gè)循環(huán)。在其它具體實(shí)施方案中，治療過程為同時(shí)向患者施用，即在時(shí)間周期內(nèi)單獨(dú)施用單劑量的第二藥劑，這樣環(huán)孢菌素衍生物可以與第二活性劑一起作用。例如，一種成分每星期施用一次，并與每?jī)尚瞧诨蛎咳瞧谑┯靡淮蔚钠渌煞致?lián)合施用。換句話說，即使治療不是同時(shí)給予或者在同一天給予，也可以同時(shí)執(zhí)行施用方案。第二藥劑可以另外或與環(huán)孢菌素衍生物協(xié)同起效。在一具體實(shí)施方案中，環(huán)孢菌素衍生物與在同一藥物組合物中的一種或多種第二藥劑同時(shí)施用。在另一具體實(shí)施方案中，環(huán)孢菌素衍生物與在不同藥物組合物中的一種或多種第二藥劑同時(shí)施用。在另一具體實(shí)施方案中，環(huán)孢菌素衍生物在第二藥劑施用之前或之后施用。也包括通過相同或不同的施用途徑施用環(huán)孢菌素衍生物和第二藥劑，例如口服和腸胃外。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)環(huán)孢菌素衍生物與潛在產(chǎn)生副作用(包括但不限于毒性)的第二藥劑同時(shí)施用時(shí)，所述第二活性劑可以有利地以低于引發(fā)副作用閾值的劑量施用。4.2.6試劑盒在一些實(shí)施方案中，提供用于治療或預(yù)防眼部疾病的試劑盒。試劑盒可以包括本發(fā)明提供的藥物化合物或組合物以及向醫(yī)療提供者提供關(guān)于治療或預(yù)防眼部疾病的用法的信息說明書。說明書可以印刷形式，或電子媒介形式例如軟盤、CD或DVD,或可以獲得說明的網(wǎng)址的形式來提供。本發(fā)明提供的化合物或組合物的單位劑量可包括當(dāng)向患者施用時(shí)可使治療或預(yù)防有效的血漿水平的化合物或組合物在患者體內(nèi)維持至少一天的劑量。在某些具體實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的化合物或組合物可以無菌含水藥物42組合物或干粉(例如凍干的)組合物的形式被包括在試劑盒中。在一具體實(shí)施方案中，所述化合物為式(I)化合物。在某些具體實(shí)施方案中，提供合適的包裝。在本文中，"包裝"指固體基質(zhì)或材料，其通常能用于系統(tǒng)并且能夠在一定范圍內(nèi)保持本發(fā)明4是供的化合物或組合物，從而適于向患者施用。這種材料包括玻璃和塑料(例如聚乙烯、聚丙烯和聚碳酸酯)、瓶子、小瓶、紙、塑料和塑料-箔薄板封套等。如果采用電子光束滅菌技術(shù)，所述包裝應(yīng)當(dāng)具有足夠低的密度以允許內(nèi)容物;陂滅菌。除本發(fā)明提供的化合物或組合物以外，本發(fā)明4是供的試劑盒還包括與如上述方法所述的化合物或組合物的一起使用的第二藥劑或包含第二藥劑的組合物。下述實(shí)施例說明了在本發(fā)明方法中使用的組合物的制備。具體記錄了從環(huán)孢菌素A到3-[2-(吡咯烷-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素(化合物C)的7個(gè)合成步驟。也顯示了化合物C磷酸鹽的合成?；衔顰、B、D、E、F和G與其磷酸鹽一起，可以相似的方式采用不同的胺在倒數(shù)第二個(gè)還原胺化反應(yīng)步驟中合成。根據(jù)本文的教導(dǎo)下，所要求保護(hù)的主題可以有多種改變和變化，因此，它們也在要求保護(hù)的主題范圍內(nèi)。5實(shí)施例實(shí)施例El向[3，-乙酰氧基-N-甲基-Bmt]、(R)-2，-(2-吡咯烷-l-基)乙氧基-Sar]3環(huán)孢菌素A(150mg)的甲醇(IOmL)溶液中加入25wt%甲氧基鈉的甲醇(0.04mL)溶液，在氮?dú)庀略谑覝財(cái)嚢杷没旌衔?4小時(shí)。減壓除去甲醇，用乙酸乙酯稀釋殘留物，用飽和氯化銨、鹽水洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥。在除去溶劑后，利用制備型液相色譜純化殘留物，得到33mg的3-[2-(吡咯烷-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素(化合物C)。'HNMR峰在5.89，7.10，7.15，7.64和7.96ppm。LCMS(ESI):計(jì)算為C68H122N12013:1314，實(shí)測(cè)為1315.2(M+H)+。按照相同的方法也制備得到了下述化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table>化合物C的五價(jià)磷鹽的按如下制備將化合物C(50mg)溶解在乙腈(1mL)和氺《1.0mL)的溶劑混合物中，向該溶液中加入H3P04的水溶液(O.lM，0.38mL)。徹底混合得到的混合物，然后凍干28小時(shí)，得到50mg相應(yīng)的五價(jià)磷鹽。'HNMR峰在5.92，7.11，7.63和8.01ppm。參考實(shí)施例1將乙醛、[3'-乙酰氧基-N-甲基-Bmt]'[(R)-2，-甲酰甲氧基-Sar]3環(huán)孢菌素A(290mg)溶解在甲醇(15mL)中，向此溶液中加入乙酸(30pL)、吡咯烷(50pL)和氰基硼氫化鈉(30mg)。將得到的混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。除去溶劑，用硅膠色譜柱純化殘留物得到154mg的[3'-乙酰氧基-N-甲基-Bmt]'[(R)-2，-(2-吡咯烷-l-基)乙氧基-Sar]3環(huán)孢菌素A。'H畫R峰在5.95，7.08,7.16，7.60和7.90ppm。參考實(shí)施例2向Dess-Martinperiodinane(300mg)的二氯甲烷(30mL)懸浮液中加入[3，-乙酰氧基-N-甲基-Bmt]'[(R)-2，-羥基甲基甲氧基-Sar]3環(huán)孢菌素A(600mg)的二氯甲烷(15mL)溶液，在室溫?cái)嚢璧玫降幕旌衔?小時(shí)。用MTBE(IOOmL)稀釋反應(yīng)混合物，用l:l(體積/體積)的10%Na2S203和飽和NaHCO3(2x50mL)混合物、飽和鹽水溶液洗滌，經(jīng)無水疏酸鈉干燥。在除去溶劑后，獲得580mg的[3，-乙酰氧基-N-甲基-Bmt]'[(R)-2，-甲酰甲氧基畫Sar]3環(huán)孢菌素A。參考實(shí)施例3將樟腦磺酸(l.Og)加入[3，-乙酰氧基-N-甲基-Bmt]'[2，-乙酰氧基-Sar]3環(huán)孢菌素A(5.14g)在THF(IOmL)與干乙二醇(IOOmL)的溶劑混合物中的溶液中，在5(TC攪拌得到的混合物5小時(shí)。用飽和的NaHCO3(150mL)、水(200mL)稀釋反應(yīng)混合物，并用乙酸乙酯(3x150mL)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用水(150mL)、飽和氯化鈉溶液(150mL)洗滌，并經(jīng)無水疏酸鈉干燥。在除去溶劑后，獲得2.66g的[3，-乙酰氧基-N-甲基-Bmt]'[(R)-2，-羥基甲基甲氧基-Sar]3環(huán)孢菌素A。'HNMR峰在5.90，7.26，7.46,8.03和8.55ppm。參考實(shí)施例4將醋酸汞(4.4g)加入[3，隱乙酰氧基-N國(guó)甲基-Bmt]'[(R)-2，-疏代苯-Sar]3環(huán)孢菌素A(4.4g)在冰醋酸(90mL)的溶液中，在5(TC攪拌得到的混合物3小時(shí)。然后除去溶劑，將殘留物溶解在乙酸乙酯(300mL)中，用碳酸氬鈉的飽和溶液(150mL)洗滌，然后用鹽水(150mL)洗滌，經(jīng)無水i^克酸鈉干燥。在除去溶劑后，利用硅膠色譜柱純化粗產(chǎn)物得到5.14g的[3，-乙酰氧基"^-甲基-Bmt]'[2，-乙酰氧基-Sar]3環(huán)孢菌素A。參考實(shí)施例5將N,N-二甲基氨基吡啶(1.23g)、三乙胺(1.39mL)和醋酸酐(0.63mL)加入到[(R)-2，-疏代苯基-Sar]3環(huán)孢菌素A(4.36g)的干二氯甲烷(60mL)溶液中。將得到的混合物在室溫?cái)嚢杓s2.5天。然后用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，用水和鹽水洗滌并濃縮。通過硅膠柱利用色譜法來純化粗產(chǎn)物，用乙酸乙酯和己烷的混合物洗脫得到[3，-乙酰氧基-N-甲基-Bmt]'[(R)-2'-疏代苯基-Saif環(huán)孢菌素A。參考實(shí)施例6在-33'C在惰性氣氛下將環(huán)孢菌素A(8.0g)在干叔丁基甲基醚(TBME，50mL)的溶液加入氨基鈉(7.0g)在液氮(200mL)中的懸浮液中。在惰性氣氛下在-33。C攪拌反應(yīng)混合物90分鐘。然后加入二疏二苯(25g)，在惰性氣氛下在-33-C再攪拌2小時(shí)。然后用固體氯化銨(17.5g)終止反應(yīng)，并蒸發(fā)氨。用TBME(250ml)和7jc(250mL)稀釋反應(yīng)混合物，徹底混合，分層。用46鹽水(250mL)洗滌有機(jī)層，然后濃縮。使用硅膠柱通過色譜法純化殘留物，先用乙酸乙酯和庚烷的混合物洗脫，然后用甲醇和乙酸乙酯的混合物洗脫，得到4.36g的[(R)-2，-疏代苯基-Sar]3環(huán)孢菌素A。5.1實(shí)施例l:口服劑型-口服膠嚢劑型用于本發(fā)明提供的方法的一種或多種化合物可以被制成膠嚢。這種膠囊可以包含10至100mg所述化合物以及一種或多種賦形劑，所述賦形劑選自微晶纖維素、預(yù)糊化淀粉、乳糖、羥基乙酸淀粉鈉、交聯(lián)聚維酮、聚維酮、羥丙基纖維素、硬脂酸鎂和二氧化硅。得到的組合物可以用一種或多種膠嚢化組合物例如明膠或增塑劑制成膠嚢。5.2實(shí)施例2:口服液體制劑用于本發(fā)明提供的方法的一種或多種化合物可以被制成在糖漿或酏劑中的鹽。所述化合物的總濃度可以為5至50mg/mL。糖漿或酏劑可以進(jìn)一步包含聚乙二醇、丙而醇、聚乙二醇混合物、PEG400、環(huán)氧乙烷和環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物(例如，泊洛沙姆407)、聚山梨酯20、乙醇、糖、檸檬酸和/或調(diào)味劑。5.3實(shí)施例3:眼用乳劑制劑用于本發(fā)明提供的方法的化合物可以被制成眼用乳劑。這種乳劑每毫升可以包含0.05%的本發(fā)明提供的化合物和一種或多種賦形劑，所述賦形劑選自甘油、蓖麻油、聚山梨酯80、卡波姆1342、用來調(diào)節(jié)pH值的純化水以及氬氧化鈉。得到的制劑可以具有230至320mOsmol/kg的滲透壓和6.5-8.0的pH值。5.4實(shí)施例4:滴眼液制劑用于本發(fā)明提供的方法的化合物可以被制成滴眼劑。這種滴眼劑可以包含一種或多種用于本發(fā)明提供的方法的化合物和一種或多種賦形劑，所述賦形劑選自作為潤(rùn)滑劑的純化水、無菌低滲硼酸鹽緩沖溶液、在天然淚液中發(fā)現(xiàn)的電解質(zhì)、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈉、-炭酸氫鈉、氯化鈣、氯化鎂、磷酸鈉、高朋酸鈉和膦酸穩(wěn)定劑。用于本發(fā)明提供的方法的化合物可以被制成滴眼劑。這種滴眼劑可以包含一種或多種用于本發(fā)明提供的方法的化合物和一種或多種賦形劑，所述賦形劑選自作為潤(rùn)滑劑的純化水、無菌低滲硼酸鹽緩沖溶液、在天然淚液中發(fā)現(xiàn)的電解質(zhì)、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈉、碳酸氫鈉、氯化鈣、氯化鎂、磷酸鈉、高朋酸鈉和膦酸穩(wěn)定劑。本發(fā)明的眼用制劑被方便地包裝成適于定量使用的形式，例如在配有滴管的容器中，以方便施用于眼睛。適于滴加使用的容器通常由合適的惰性、無毒塑料材料制成，通常包含約0.5至約20ml溶液。一個(gè)包裝可以包含一個(gè)或多個(gè)單位劑量。尤其是無防腐劑溶液通常被制備在不能重復(fù)密封的容器中，其包含高至約十二個(gè)，優(yōu)選高至約五個(gè)單位劑量，其中通常的單位劑量是一至約八滴，優(yōu)選一至約三滴。一滴的量大約是20-40pL。6.生物活性鼠混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)試驗(yàn)這一試驗(yàn)通過測(cè)定摻入小鼠脾分離T-細(xì)胞DNA中的氖化胸苷來監(jiān)測(cè)T-細(xì)胞增殖；T-細(xì)胞的增殖與摻入DNA的氘直接成比例?；旌系钠⒓?xì)胞制備自兩種小鼠，每種三只三只C57BL/6小鼠和三只BALB/c小鼠。在MLR中，C57BL/6小鼠被作為應(yīng)答者(R)使用，BALB小鼠被作為刺激者(S)使用。完全培養(yǎng)基包括含有25mMHEPES的RPMI1640、10%的熱滅活低背景的胎牛血清、502-巰基乙醇、2mML-谷氨酸和抗生素。在Bevill輻射器中在3000倫琴用y射線輻射BALB/c脾細(xì)胞，用培養(yǎng)基洗滌一次，用作S細(xì)胞；S細(xì)胞以1.6xl06/mL在完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)。R細(xì)胞以8xl05mL在完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)。最終細(xì)胞密度為在96孔微量滴定板中每個(gè)試驗(yàn)孔2x105R和4xl05S。將DMSO儲(chǔ)存溶液中的10mM化合物稀釋加入培養(yǎng)基；在0.001至30pM(三倍稀釋液)的10個(gè)濃度下檢測(cè)化合物。背景對(duì)照孔包含150培養(yǎng)10.3%DMSO和50R細(xì)胞(2xl05/孔)。所有其它孔包含100nL培養(yǎng)_170.3%DMSO或化合物(也含于0.3%DMSO中)、50|iLR細(xì)胞(2xl0V孔)和50pLS細(xì)胞(4xl0"孔)。將板在37。C在5%C02中孵育5天，隨后加入1pCi/孔的311-胸苷振動(dòng)6-18小時(shí)。收集細(xì)胞，利用閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定氘的結(jié)合。在體外抑制T-淋巴細(xì)胞活化淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)是干眼癥和葡萄膜炎的主要機(jī)制之一。因此，抑制T-細(xì)胞活化提供了治療這些疾病的基礎(chǔ)。使用人類細(xì)胞的試驗(yàn)被用來測(cè)定化合物是否l)抑制T-細(xì)胞活化(利用細(xì)胞因子釋放作為生物標(biāo)記)，和2)減少或預(yù)防細(xì)胞因子誘導(dǎo)的病理狀況。將化合物與被刺激的人類T-淋巴細(xì)胞一起在設(shè)計(jì)成能測(cè)定細(xì)胞因子生成的體外系統(tǒng)中溫育；細(xì)胞因子的生成表明T-細(xì)胞活化和隨后細(xì)胞因子在體內(nèi)誘導(dǎo)的損傷。從兩個(gè)人的炎癥部位分離人T-淋巴細(xì)胞(Yssel等人，J.Immunol.Meth，74:219)，標(biāo)記為P23和P26。將細(xì)胞一式三份的用細(xì)胞培養(yǎng)基中的化合物或介質(zhì)(DMSO)在37'C處理2小時(shí)。然后用5抗-CD3/49抗國(guó)CD28ExpandBeads(DynaBeads，Invitrogen111.31)刺激細(xì)胞并粹育24小時(shí)。在0.02、0.2和2^M三個(gè)濃度檢測(cè)化合物。為每個(gè)細(xì)胞因子標(biāo)記設(shè)置未處理的對(duì)照。下述細(xì)胞因子是利用特定的ELISA試劑盒，按照生產(chǎn)商的"i兌明來定量測(cè)定的IL2(Eli-pair,Diaclone)、IL4(ImmunoTools313.300.49)、月中瘤壞死因子a(TNFa,ImmunoTools313.33.0.1)和千擾素y(IFN-力Eli-pair，Diaclone)。表l.對(duì)人T-淋巴細(xì)胞和鼠混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)中的細(xì)胞因子生成的抑制。<table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>來自兩位供者培養(yǎng)物的試驗(yàn)結(jié)果的平均值。上述表1中列出的化合物抑制來自被刺激的人淋巴細(xì)胞和鼠MLR淋巴細(xì)胞的細(xì)胞因子生成；在所有檢測(cè)濃度都沒有觀察到細(xì)胞毒性。利用濁度滴定法(Schote，等人.，2002.JPharmSciences91(3):856)測(cè)定化合物在人工淚液制劑中的溶解度。不同的淚液制劑是緩沖的并且包含各種生理電解質(zhì)包括鈉、鉀、磷和氯。所述制劑的不同之處主要在于提供潤(rùn)滑性和粘度的"活性"成分。在包含如下主要類別活性劑的各種人工淚液制劑中測(cè)試化合物的溶解度0.5%羧甲基纖維素、0.95%丙二醇、0.5%羧甲基纖維素鈉、1%聚乙二醇400、加1%聚乙烯醇，和0.1%右旋糖酐70以及0.3%羥丙甲基纖維素。在各種人工淚液中測(cè)定的N-取代的類似物的溶解度為100至2000^M(見下述實(shí)施例)。表2.化合物A在人工淚液制劑中的溶解度<table>tableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table>pH值用HC1調(diào)整至7.4至6.7。應(yīng)用HET-CAM試驗(yàn)評(píng)價(jià)眼刺激可能性在體外試驗(yàn)中評(píng)價(jià)本發(fā)明化合物對(duì)眼睛不造成刺激的可能性，這一能夠用于預(yù)測(cè)其性質(zhì)的試驗(yàn)被稱作HET-CAM試驗(yàn)(Steiling等人，1999.ToxicologyinVitro13(2):375)。在這一試驗(yàn)中，將已受精雞蛋的絨毛尿囊膜(CAM)暴露在試驗(yàn)物質(zhì)的無菌水溶液中。在大約5分鐘的溫育期間，通過視覺檢驗(yàn)CAM血管網(wǎng)絡(luò)的出血、溶解和/或凝結(jié)來評(píng)價(jià)刺激度。對(duì)每種結(jié)果的出現(xiàn)時(shí)間和現(xiàn)象用數(shù)字評(píng)分，將分?jǐn)?shù)相加得到單一數(shù)值，獲得若干雞蛋的平均數(shù)值分?jǐn)?shù)?；谂c歷史對(duì)照物質(zhì)和介質(zhì)的比較，獲得刺激可能性的分類(Luepke，1985.FoodChem.Toxicol.23:287)。本發(fā)明化合物的刺激可能性匯總?cè)缦卤?.應(yīng)用HET-CAM試驗(yàn)得到的刺激可能性<table>tableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table>用兔評(píng)價(jià)眼耐受性經(jīng)三天試驗(yàn)周期通過在兔眼中滴注來評(píng)價(jià)本發(fā)明化合物的耐受性。兔子在20分鐘內(nèi)接受五次滴注五十微升溶于介質(zhì)的受試物質(zhì)的溶液，滴在右眼中，第1天1次，第2天2次，第3天4次。利用Draizescale(Draize等人.J.Pharmacol.Exp.Ther.1944.82:377)進(jìn)行眼刺激度的評(píng)價(jià)。在這一評(píng)價(jià)中，化合物A(0.05%(w/w)在人工淚液制劑中)有非常好的耐受性，僅引發(fā)輕微角膜紅，與僅用介質(zhì)處理的實(shí)驗(yàn)組沒有顯著區(qū)別。本發(fā)明化合物的溶解度和抗炎性質(zhì)在干眼癥和葡萄膜炎的局部治療中都顯示出有益效果。在兔中LPS誘導(dǎo)的葡萄膜炎基于AllenJB等人.，Exp.EyeRes.1996Jan;62(l):21-8中描述的方法，用12只兔子進(jìn)行研究，以評(píng)價(jià)化合物在兔子中對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)的急性葡萄膜炎的效果。為引發(fā)急性前葡萄膜炎，將腸道沙門氏菌脂多糖內(nèi)毒素(LPS)經(jīng)玻璃腔體內(nèi)注射入兔子右眼。對(duì)化合物(右眼)或?qū)φ?左眼)的兩只眼睛進(jìn)行局部治療，每6小時(shí)一次，在經(jīng)玻璃腔體注射10ngLPS或介質(zhì)后立即給予6只兔子最佳劑量例如為0.1%w/v(見下表)。四只眼睛的組包括僅接受介質(zhì)的陰性對(duì)照(組1)，不用藥物治療的陽性-葡萄膜炎對(duì)照(組2)，用藥物治療的葡萄膜炎眼睛(組3)，治療每只眼睛并持續(xù)7天。對(duì)眼睛進(jìn)行臨床刺激評(píng)分(顯微鏡眼檢查)、熒光素染色試驗(yàn)、視網(wǎng)膜電圖(視網(wǎng)膜毒性的電診斷方法)、房水蛋白濃度和細(xì)胞計(jì)數(shù)以及完整的眼組織病理學(xué)。在7天后，發(fā)現(xiàn)良好的應(yīng)答，在第1組和第3組之間沒有臨床上的顯著差異。采用犬干性角結(jié)膜炎(KCS)作為模型，試驗(yàn)對(duì)于干眼癥的局部治療52犬KCS的典型臨床表現(xiàn)包括進(jìn)展性結(jié)膜炎、表面結(jié)膜炎、眼排泄粘液、眼瞼痙攣、最終的角膜疤痕和會(huì)導(dǎo)致失明的色素角膜炎。該疾病是雙邊且?guī)缀跏菍?duì)稱的。KCS的診斷是基于典型臨床特征的出現(xiàn)和Schirmer淚液試—斷STT)值小于10mm潤(rùn)濕/分鐘(正常是15-30mm/min)。選擇經(jīng)獸醫(yī)眼科學(xué)家診斷患有慢性(持續(xù)長(zhǎng)于3個(gè)月)免疫介導(dǎo)的KCS狗來進(jìn)行治療。研究是開放標(biāo)記的，單一組有效性研究，采用一天兩次在每只受感染的眼睛中施用50滴)的0.1%化合物?；跍I液產(chǎn)生來評(píng)價(jià)藥物的有效性(通過STT測(cè)定)，臨床觀察角膜的反應(yīng)，狗的主人和參加的眼科學(xué)家全面評(píng)價(jià)有效性。在試驗(yàn)期間(12星期)每2星期進(jìn)行生理和眼科檢查(活組織顯微鏡檢查，間接檢眼睛檢查)。這些檢查包括進(jìn)行STT和評(píng)價(jià)眼睛炎癥的嚴(yán)重性。在臨床試驗(yàn)前和期間，經(jīng)活組織顯微鏡檢查在每次檢查期間對(duì)每只狗的角膜發(fā)炎量進(jìn)行主觀評(píng)分。對(duì)3個(gè)參數(shù)在0至4范圍內(nèi)記錄分?jǐn)?shù)(0=正常；4=最嚴(yán)重)角膜血管形成面積(O，1-25%,26-50%，51-75%,和>75%);透明度喪失的嚴(yán)重性(角膜云斑-正常，輕」徵，中等，嚴(yán)重喪失透明度和不透明)，角膜云斑的面積(O，1-25%，26-50%，51-75%，和>75%)。采用Tukey-Kramer多重比較程序的ANOVA、Kruskal-Wallis檢驗(yàn)、學(xué)生t檢驗(yàn)和/或計(jì)算Pearson相關(guān)系數(shù)(r)的統(tǒng)計(jì)分析來證實(shí)結(jié)果。所有結(jié)果和可能性由計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)軟件生成(SAS，Inc，Cary，NC)，PO.05的值被認(rèn)為具有顯著性。在STT的增加^5mm/min和在臨床表現(xiàn)上取得實(shí)質(zhì)性改善(例如粘液排泄、眼瞼痙享、結(jié)膜充血等的減少)被視為對(duì)化合物的有效應(yīng)答，其由眼科學(xué)家在6個(gè)星期內(nèi)觀察到的。53本說明書中引用的所有出版物和專利申請(qǐng)都被納入作為參考，如同每個(gè)單獨(dú)的出版物或?qū)＠暾?qǐng)被具體和個(gè)別引入作為參考一樣。雖然本發(fā)明已采用各種優(yōu)選的具體實(shí)施方案進(jìn)行了描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解可以做出不偏離本發(fā)明精神的各種改變、替代、省略和變化。相應(yīng)的，要求保護(hù)的主題的范圍不僅限于下述權(quán)利要求的范圍，也包括其等同方案。權(quán)利要求1.治療或預(yù)防眼部疾病的方法，包括向有需要的患者施用治療有效量的通式(I)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或者溶劑化物其中Ak是亞烷基；R1是-NR5R6，其中R5和R6各自獨(dú)立的為氫或包含1至6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；或者R5和R6與和它們相連的氮原子一起形成包含4至6個(gè)環(huán)原子的飽和或不飽和雜環(huán)，該環(huán)任選地包含選自氮、氧或硫的另一雜原子，并且可以任選地被1至4個(gè)相同或不同的選自烷基、羥基、氨基、N-烷基氨基和N，N-二烷基氨基的基團(tuán)取代；R2是異丁基；R3是(E)-2-丁烯基-1或正丁基；R4是乙基、1-羥乙基、異丙基或正丙基。2.權(quán)利要求1的方法，其中RS和R"各自獨(dú)立的為氫或包含1至6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；或R5和R6與它們連接的氮原子一起形成包含5至6個(gè)環(huán)原子的飽和或不飽和雜環(huán)，該環(huán)可以任選地包含選自氮、氧和疏的另一雜原子，并且可以任選地被相同或不同的1至4個(gè)烷基基團(tuán)取代。3.權(quán)利要求1或2的方法，其中Ak是-(CH2)p-，其中p是l、2、3或4。4.權(quán)利要求l、2或3的方法，其中W是(E)-2丁烯基-1，W是乙基。5.權(quán)利要求l-4任一項(xiàng)的方法，其中R"是N-嗎啉或N,N-二甲胺。6.權(quán)利要求1的方法，其中Ak是(CH2)p，并且p為2或3;R'是-NR5R6;115和RS可以是相同或不同的，為氳或Q.3烷基；或者R5和R6與它們連接的氮原子一起形成包含4至6個(gè)環(huán)原子的飽和或不飽和雜環(huán)，該環(huán)可以任選地包含選自氮和氧的另一雜原子，并且可以任選地;故相同或不同的選自甲基、羥基和二甲基氨基的1或2個(gè)基團(tuán)取代；W是異丁基；R3是(E)-2-丁蹄基-l;且W是乙基。7.權(quán)利要求l的方法，其中通式(I)化合物是3-[2-(N,N-二甲基氨基)乙氧基]環(huán)孢菌素；3-[2-(氮雜環(huán)丁烷-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素；3-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]環(huán)孢菌素；3-[2-(哌啶-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素；3-[2-(4-甲基哌嗪-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素；3-[2-(嗎啉-4-基)乙氧基]環(huán)孢菌素；3-[2-(2，6-二甲基嗎啉-4-基)乙氧基]環(huán)孢菌素；3-[2-(3-羥基吡咯烷-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素；3-{2-[(4-二甲基氨基)哌啶-1-基]乙氧基}環(huán)孢菌素；3-[2-(4-羥基哌啶-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素；3-[2-(咪唑-l-基)乙氧基]環(huán)孢菌素；3-[2-(N-甲基氨基)乙氧基]環(huán)孢菌素；3-[2-(N-異丙基-N-甲基氨基)乙氧基]環(huán)孢菌素；或3-[2-(氨基丙氧基)]環(huán)孢菌素；或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。8.權(quán)利要求l-7任一項(xiàng)的方法，其中所述疾病選自干眼癥、葡萄膜炎和晶狀體過敏性眼內(nèi)炎。9.如權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所定義的通式(I)化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，在制備治療或預(yù)防至少一種眼部疾病的藥物中的用途。10.權(quán)利要求9的用途，其中疾病選自干眼癥、葡萄膜炎和晶狀體過敏性眼內(nèi)炎。11.治療或預(yù)防眼部疾病的方法，包括向有需要的患者施用(a)如權(quán)利要求1所定義的治療有效量的通式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物；和(b)能有效治療或預(yù)防眼部疾病的第二藥劑。12.如權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所定義的式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。全文摘要本發(fā)明提供治療眼部疾病的方法。該方法包括施用通式(I)的化合物，其中R¹、R²、R³、R⁴和Ak如說明書中所定義。文檔編號(hào)A61P27/02GK101511357SQ200780026775公開日2009年8月19日申請(qǐng)日期2007年5月18日優(yōu)先權(quán)日2006年5月19日發(fā)明者大衛(wèi)·蘭威克·霍克申請(qǐng)人:西尼克斯公司