專利名稱：阿歸養(yǎng)血液體制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種阿歸養(yǎng)血液體制劑的質(zhì)量控制方法，屬于對(duì)藥品進(jìn)行質(zhì)量控制的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
阿歸養(yǎng)血制劑是一種經(jīng)典的中成藥，主要有補(bǔ)氣養(yǎng)血等作用，用于氣血虧虛，面色萎黃，眩暈乏力，肌肉消瘦，經(jīng)閉，赤白帶下等病癥。其中阿歸養(yǎng)血顆?？窃谥腥A人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)《中藥成方制劑》第12冊(cè)，且該顆粒劑在臨床上應(yīng)用多年，取得了比較滿意的治療效果。但經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有阿歸養(yǎng)血制劑存在質(zhì)量控制方法簡(jiǎn)單、產(chǎn)品質(zhì)量不易控制的缺點(diǎn)，在產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中，用該質(zhì)量控制方法不能有效控制該制劑的質(zhì)量，從而將影響其臨床療效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種阿歸養(yǎng)血液體制劑的質(zhì)量控制方法，本發(fā)明針對(duì)原有阿歸養(yǎng)血顆粒質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)單、產(chǎn)品質(zhì)量不易控制的缺點(diǎn)，對(duì)本制劑的質(zhì)量控制方法進(jìn)行了研究，增加了當(dāng)歸中阿魏酸的含量測(cè)定和當(dāng)歸、黃芪、甘草、白芍四味藥材的薄層色譜鑒別，提高了阿歸養(yǎng)血制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，從而保證了該制劑的臨床療效。
本發(fā)明所述的阿歸養(yǎng)血液體制劑包括糖漿劑和口服液體制劑；所述制劑是按照重量比例，由當(dāng)歸100-300、黨參5-20、白芍5-20、甘草(蜜炙)2-10、茯苓5-20、黃芪5-20、熟地黃5-20、川芎2-10和阿膠5-20制成的，其制備方法為取當(dāng)歸、黨參、白芍、甘草、茯苓、黃芪、熟地黃和川芎八味藥材粉碎成粗粉，混勻，照中國(guó)藥典流浸膏與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法，用40-85％乙醇作溶劑，浸漬12-60小時(shí)，緩緩滲漉，收集漉液，回收乙醇，濃縮，放置后，收集上浮的油狀物，另器保存；藥渣加水煎煮，過(guò)濾，濾液靜置。合并上述兩種藥液，加入輔料及用水溶化后的阿膠溶液，攪勻，加入上述油狀物，煮沸10-60分鐘，濾過(guò)，加水調(diào)整總量至1000ml，即得。
本發(fā)明所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對(duì)制劑中當(dāng)歸、黃芪、甘草和白芍藥材的薄層色譜鑒別；含量測(cè)定是對(duì)制劑中當(dāng)歸所含阿魏酸的含量測(cè)定。
當(dāng)歸的鑒別方法是以阿魏酸對(duì)照品為對(duì)照，以60-90℃石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝5-20∶1-10∶0.1-2為展開(kāi)劑的薄層色譜法。
黃芪、甘草的鑒別方法是以黃芪甲苷對(duì)照品、甘草對(duì)照藥材為對(duì)照，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝5-20∶1-10∶0.5-5的下層溶液為展開(kāi)劑的薄層色譜法。
白芍的鑒別方法是以芍藥苷對(duì)照品為對(duì)照，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶甲酸＝30-50∶1-10∶5-20∶0.1-1為展開(kāi)劑的薄層色譜法。
具體的鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部(1)取本制劑2-10ml，加甲醇2-20ml，搖勻，再加石油醚1-10ml，振搖提取，分取石油醚液，揮干，殘?jiān)?％香草醛硫酸溶液1～10滴，顯棕黃色，放置后，漸變?yōu)榧t紫色；(2)取本制劑2-20ml，用乙醚振搖提取1-6次，合并乙醚液，用1-10％碳酸氫鈉溶液振搖提取1-5次，合并堿液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1～6，再用乙醚振搖提取1-5次，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖?.5-5ml使溶解，作為供試品溶液；另取阿魏酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含0.5-3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；分別吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液各5-25μl，照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G254薄層板上，以60-90℃石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝5-20∶1-10∶0.1-2為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取本制劑10-50ml，加乙醚10-100ml振搖提取，分取水層，加水飽和的正丁醇振搖提取1-5次，合并正丁醇液，用水洗滌1-5次，正丁醇液蒸干，加甲醇溶解，通過(guò)中性氧化鋁柱，用20-80％甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.2-3ml使溶解，作為供試品溶液；取甘草對(duì)照藥材0.1-0.5g，用正丁醇振搖提取1-5次，合并正丁醇液，用水洗滌1-5次，正丁醇液蒸干，加甲醇0.5-3ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5-5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液與對(duì)照藥材溶液各1-20μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝5-20∶1-10∶0.5-5的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取本制劑10-40ml，加乙酸乙酯萃取1-5次，棄去乙酸乙酯層，水層用水飽和的正丁醇萃取1-5次，合并正丁醇層，用正丁醇飽和的水洗1-5次，取正丁醇層揮干，殘?jiān)眉状?.2-2ml溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含0.5-5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-20μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶甲酸＝30-50∶1-10∶5-20∶0.1-1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
當(dāng)歸中阿魏酸的含量測(cè)定方法是以阿魏酸對(duì)照品為對(duì)照，以甲醇或乙晴∶0.05-0.2％磷酸溶液＝10-90∶90-10為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
具體的含量測(cè)定方法為照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇或乙晴∶0.05-0.2％磷酸溶液＝10-90∶90-10為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm；理論板數(shù)以阿魏酸峰計(jì)算不得低于5000；對(duì)照品溶液的制備取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含5-20μg的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備精密量取本制劑1-10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5-25μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑中，糖漿劑每1ml含當(dāng)歸以阿魏酸C10H10O4計(jì)，不得少于0.020mg；口服液體制劑每1ml含當(dāng)歸以阿魏酸C10H10O4計(jì)，不得少于0.010mg。
所述質(zhì)量控制方法包括性狀對(duì)于糖漿劑為深褐色的粘稠液體；氣微香，味甜、澀、微苦、辛；對(duì)于口服液為褐色的液體；氣微香，味甜、澀、微苦、辛；鑒別(1)取本制劑2-10ml，加甲醇2-20ml，搖勻，再加石油醚1-10ml，振搖提取，分取石油醚液，揮干，殘?jiān)?％香草醛硫酸溶液1～10滴，顯棕黃色，放置后，漸變?yōu)榧t紫色；(2)取本制劑2-20ml，用乙醚振搖提取1-6次，合并乙醚液，用1-10％碳酸氫鈉溶液振搖提取1-5次，合并堿液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1～6，再用乙醚振搖提取1-5次，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖?.5-5ml使溶解，作為供試品溶液；另取阿魏酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含0.5-3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；分別吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液各5-25μl，照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G254薄層板上，以60-90℃石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝5-20∶1-10∶0.1-2為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取本制劑10-50ml，加乙醚10-100ml振搖提取，分取水層，加水飽和的正丁醇振搖提取1-5次，合并正丁醇液，用水洗滌1-5次，正丁醇液蒸干，加甲醇溶解，通過(guò)中性氧化鋁柱，用20-80％甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.2-3ml使溶解，作為供試品溶液；取甘草對(duì)照藥材0.1-0.5g，用正丁醇振搖提取1-5次，合并正丁醇液，用水洗滌1-5次，正丁醇液蒸干，加甲醇0.5-3ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5-5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液與對(duì)照藥材溶液各1-20μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝5-20∶1-10∶0.5-5的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取本制劑10-40ml，加乙酸乙酯萃取1-5次，棄去乙酸乙酯層，水層用水飽和的正丁醇萃取1-5次，合并正丁醇層，用正丁醇飽和的水洗1-5次，取正丁醇層揮干，殘?jiān)眉状?.2-2ml溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含0.5-5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-20μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶甲酸＝30-50∶1-10∶5-20∶0.1-1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查相對(duì)密度取糖漿劑5-20g，加水10-50ml稀釋后，依照中國(guó)藥典相對(duì)密度測(cè)定法測(cè)定，應(yīng)不低于1.09；其他應(yīng)符合中國(guó)藥典糖漿劑或口服液體制劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇或乙晴∶0.05-0.2％磷酸溶液＝10-90∶90-10為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm；理論板數(shù)以阿魏酸峰計(jì)算不得低于5000；對(duì)照品溶液的制備取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含5-20μg的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備精密量取本制劑1-10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5-25μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑中，糖漿劑每1ml含當(dāng)歸以阿魏酸C10H10O4計(jì)，不得少于0.020mg；口服液體制劑每1ml含當(dāng)歸以阿魏酸C10H10O4計(jì)，不得少于0.010mg。
為了確保本發(fā)明質(zhì)量控制方法科學(xué)、合理、可行，本申請(qǐng)人對(duì)方中當(dāng)歸、白芍、黃芪、甘草等進(jìn)行了薄層色譜鑒別研究，確定了鑒別方法；并增加了制劑中當(dāng)歸藥材所含阿魏酸的含量測(cè)定，具體試驗(yàn)如下一、阿魏酸含量測(cè)定方法研究1、供試品溶液制備方法研究取本制劑5ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，測(cè)定其阿魏酸含量，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表。
不同提取溶劑對(duì)阿魏酸含量測(cè)定的影響(n＝3)

試驗(yàn)結(jié)果表明，用甲醇提取，阿魏酸提取較為完全。
2、流動(dòng)相的選擇流動(dòng)相1以甲醇、磷酸溶液不同比例的混合溶液為流動(dòng)相；流動(dòng)相2以乙腈、磷酸溶液不同比例的混合溶液為流動(dòng)相；流動(dòng)相3以乙腈、水不同比例的混合溶液為流動(dòng)相；流動(dòng)相4以甲醇、水、冰醋酸不同比例的混合溶液為流動(dòng)相；結(jié)果以甲醇或乙晴∶0.05-0.2％磷酸溶液＝10-90∶90-10為流動(dòng)相，陰性樣品色譜圖在阿魏酸峰位置處無(wú)假陽(yáng)性峰；阿魏酸峰和相近的雜質(zhì)峰分離完全(分離度＞1.5)。最佳流動(dòng)相為乙腈∶0.085％磷酸溶液＝16∶84。
3、重現(xiàn)性試驗(yàn)精密吸取本制劑3ml，按本發(fā)明中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法，分別制備5份供試液，進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，阿魏酸平均含量為0.1017mg/ml，RSD為0.98％。表明重復(fù)性良好，結(jié)果見(jiàn)下表。
制劑供試品中阿魏酸的重復(fù)性試驗(yàn)

4、精密度試驗(yàn)精密吸取阿魏酸對(duì)照品溶液(10.42μg/ml)10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，重復(fù)進(jìn)樣5次，平均峰面積為498354，RSD為1.25％。表明精密度良好，結(jié)果見(jiàn)下表。
阿魏酸對(duì)照品溶液精密度試驗(yàn)

5、回收率試驗(yàn)采用加樣回收法，分別精密吸取本制劑(平均含量為0.1017mg/ml)，置具塞錐形瓶中，精密加入阿魏酸對(duì)照品(以甲醇為溶劑，制成含阿魏酸為32.44μg/ml)溶液5ml，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案，制成供試液。分別精密吸取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測(cè)定含量，計(jì)算回收率見(jiàn)下表。平均回收率為99.64％，RSD為0.69％，證明該方法可行。
供試品溶液中阿魏酸測(cè)定回收率試驗(yàn)

二、當(dāng)歸薄層鑒別研究以阿魏酸對(duì)照品鑒別方中當(dāng)歸藥材。
取藥物，用乙醚振搖提取3次，合并乙醚液，用5％碳酸氫鈉溶液振搖提取3次，合并堿液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2～3，再用乙醚振搖提取3次，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。取缺當(dāng)歸的陰性供試品，同法制得陰性供試品溶液。另取阿魏酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液、陰性供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑硅膠G薄層板上、硅膠G254上，分別以苯、甲醇、冰醋酸不同比例的混合溶液；以石油醚(60-90℃)、乙酸乙酯、冰醋酸不同比例的混合溶液為展開(kāi)劑。
以苯、甲醇、冰醋酸為展開(kāi)劑，陰性大多有干擾或斑點(diǎn)分離度不好。以60-90℃石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝5-20∶1-10∶0.1-2為展開(kāi)劑，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，但斑點(diǎn)較模糊；點(diǎn)于同一硅膠G254薄層板上，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，且分離效果好，斑點(diǎn)清晰，陰性對(duì)照無(wú)干擾，方法重現(xiàn)性好，最佳展開(kāi)劑為60-90℃石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝12∶5∶0.6。
三、黃芪、甘草薄層鑒別研究以黃芪甲苷對(duì)照品鑒別方中黃芪藥材、甘草對(duì)照藥材鑒別方中甘草藥材。
取藥物，加乙醚振搖提取，分取水層，加水飽和的正丁醇振搖提取2次，合并正丁醇液，用水洗滌2次，正丁醇液蒸干，加甲醇溶解，通過(guò)中性氧化鋁柱(100～120目，5g，內(nèi)徑10mm)，用40％甲醇溶液100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為供試品溶液；取缺甘草陰性樣品，同法制成缺甘草陰性對(duì)照供試液；另取黃芪陰性樣品，同法制成缺黃芪陰性對(duì)照供試液；再取甘草對(duì)照藥材，用正丁醇振搖提取3次，合并正丁醇液，用水洗滌2次，每次20ml，正丁醇液蒸干，加甲醇1ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；再取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液、缺黃芪陰性對(duì)照溶液、缺甘草陰性對(duì)照溶液各、對(duì)照品溶液與對(duì)照藥材溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，分別以醋酸乙酯、甲酸、冰醋酸、水不同比例的混合溶液；以氯仿、乙腈、水不同比例的混合溶液；以氯仿、甲醇、水不同比例的混合溶液為展開(kāi)。
結(jié)果以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝5-20∶1-10∶0.5-5的下層溶液為展開(kāi)劑，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光下檢視、紫外光365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，但斑點(diǎn)亮度弱，不清晰；在日光下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品、對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，斑點(diǎn)清晰，分離度好，陰性無(wú)干擾，重現(xiàn)性佳。最佳展開(kāi)劑為氯仿∶甲醇∶水＝13∶6∶2的下層溶液。
四、白芍薄層鑒別研究以芍藥苷對(duì)照品鑒別方中白芍藥材。
供試品溶液制備方法一、取藥物，蒸干，加乙醇振搖5分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；取缺白芍的陰性供試品，同法制得陰性供試品溶液?br> 供試品溶液制備方法二、取藥物，用乙醚萃取3次，棄乙醚層，水層用水飽和的正丁醇萃取2次，合并正丁醇層，用正丁醇飽和的水洗2次，取正丁醇層蒸干，殘?jiān)靡掖既芙?，作為供試品溶液；取缺白芍的陰性供試品，同法制得陰性供試品溶液?br> 供試品溶液制備方法三、取藥物，加乙酸乙脂萃取3次，棄乙酸乙脂層，水層用水飽和的正丁醇萃取3次，合并正丁醇層，用正丁醇飽和的水洗3次，取正丁醇層揮干，殘?jiān)眉状既芙?，作為供試品溶液。取芍藥苷?duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg溶液，作為對(duì)照品溶液。
照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，分別以氯仿、乙酸乙酯、甲醇、甲酸不同比例的混合溶液；以氯仿、乙酸乙酯、乙腈、甲酸不同比例的混合溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光檢視。
結(jié)果表明，方法一中供試品斑點(diǎn)背景干擾大，斑點(diǎn)不清晰；方法二斑點(diǎn)背景干擾大，斑點(diǎn)不清晰，陰性有干擾；方法三斑點(diǎn)清晰，分離度好陰性無(wú)干擾，重現(xiàn)性好。較好的展開(kāi)劑為氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶甲酸＝30-50∶1-10∶5-20∶0.1-1；最佳展開(kāi)劑為氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明質(zhì)量控制方法增加了當(dāng)歸中阿魏酸的含量測(cè)定和當(dāng)歸、黃芪、甘草、白芍四味藥材的薄層色譜鑒別，所采用的方法精密度高，重現(xiàn)性好，穩(wěn)定性好，回收率高，提高了阿歸養(yǎng)血制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，從而確保了該制劑的臨床療效。
以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限制。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的實(shí)施例1所述糖漿劑的質(zhì)量控制方法包括性狀本制劑為深褐色的粘稠液體；氣微香，味甜、澀、微苦、辛；鑒別(1)取本制劑5ml，加甲醇5ml，搖勻，再加石油醚5ml，振搖提取，分取石油醚液，揮干，殘?jiān)?％香草醛硫酸溶液1～2滴，顯棕黃色，放置后，漸變?yōu)榧t紫色；(2)取本制劑10ml，用乙醚振搖提取3次(15ml，10ml，10ml)，合并乙醚液，用5％碳酸氫鈉溶液振搖提取3次，每次15ml，合并堿液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2～3，再用乙醚振搖提取3次，每次15ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取阿魏酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；吸取供試品8μl、對(duì)照品溶液5μl，照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G254薄層板上，以60-90℃石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝12∶5∶0.6為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
(3)取本制劑40ml，加乙醚30ml振搖提取，分取水層，加水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗滌2次，每次20ml，正丁醇液蒸干，加甲醇溶解，通過(guò)100～120目、5g、內(nèi)徑10mm的中性氧化鋁柱，用40％甲醇溶液100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為供試品溶液；取甘草對(duì)照藥材0.2g，用正丁醇振搖提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，用水洗滌2次，每次20ml；正丁醇液蒸干，加甲醇1ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液與對(duì)照藥材溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶水＝13∶6∶2的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取本制劑25ml，加乙酸乙酯萃取3次，每次25ml，棄去乙酸乙酯層，水層用水飽和的正丁醇萃取3次，每次20ml，合并正丁醇層，用正丁醇飽和的水洗3次，每次10ml，取正丁醇層揮干，殘?jiān)眉状?.5ml溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查相對(duì)密度取本制劑10g，加水20ml稀釋后，依照中國(guó)藥典相對(duì)密度測(cè)定法測(cè)定，應(yīng)不低于1.09；其他應(yīng)符合中國(guó)藥典糖漿劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙晴∶0.085％磷酸溶液＝16∶84為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm；理論板數(shù)以阿魏酸峰計(jì)算不得低于5000；對(duì)照品溶液的制備取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備精密量取本制劑3ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；
糖漿劑每1ml含當(dāng)歸以阿魏酸C10H10O4計(jì)，不得少于0.040mg。
本發(fā)明的實(shí)施例2所述糖漿劑的質(zhì)量控制方法包括性狀為深褐色的粘稠液體；氣微香，味甜、澀、微苦、辛；鑒別(1)取糖漿劑10ml，加甲醇20ml，搖勻，再加石油醚10ml，振搖提取，分取石油醚液，揮干，殘?jiān)?％香草醛硫酸溶液10滴，顯棕黃色，放置后，漸變?yōu)榧t紫色；(2)取糖漿劑20ml，用乙醚振搖提取6次，合并乙醚液，用10％碳酸氫鈉溶液振搖提取1次，堿液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至6，再用乙醚振搖提取5次，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取阿魏酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；分別吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液各5μl，照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G254薄層板上，以60-90℃石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝20∶1∶0.1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取糖漿劑50ml，加乙醚100ml振搖提取，分取水層，加水飽和的正丁醇振搖提取5次，合并正丁醇液，用水洗滌5次，正丁醇液蒸干，加甲醇溶解，通過(guò)中性氧化鋁柱，用80％甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；取甘草對(duì)照藥材0.5g，用正丁醇振搖提取5次，合并正丁醇液，用水洗滌5次，正丁醇液蒸干，加甲醇3ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液與對(duì)照藥材溶液各1μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶水＝5∶10∶0.5的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取糖漿劑40ml，加乙酸乙酯萃取5次，棄去乙酸乙酯層，水層用水飽和的正丁醇萃取5次，合并正丁醇層，用正丁醇飽和的水洗5次，取正丁醇層揮干，殘?jiān)眉状?ml溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各20μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝30∶1∶20∶1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查相對(duì)密度取糖漿劑20g，加水50ml稀釋后，依照中國(guó)藥典相對(duì)密度測(cè)定法測(cè)定，應(yīng)不低于1.09；其他應(yīng)符合中國(guó)藥典糖漿劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇∶0.2％磷酸溶液＝90∶10為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm理論板數(shù)以阿魏酸峰計(jì)算不得低于5000；對(duì)照品溶液的制備取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備精密量取糖漿劑10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各25μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；糖漿劑每1ml含當(dāng)歸以阿魏酸C10H10O4計(jì)，不得少于0.020mg。
本發(fā)明的實(shí)施例3所述口服液的質(zhì)量控制方法包括性狀為褐色的液體；氣微香，味甜、澀、微苦、辛；鑒別(1)取口服液2ml，加甲醇2ml，搖勻，再加石油醚1ml，振搖提取，分取石油醚液，揮干，殘?jiān)?％香草醛硫酸溶液1滴，顯棕黃色，放置后，漸變?yōu)榧t紫色；(2)取口服液2ml，用乙醚振搖提取1次，合并乙醚液，用1％碳酸氫鈉溶液振搖提取5次，合并堿液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1，再用乙醚振搖提取1次，乙醚液蒸干，殘?jiān)右掖?.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取阿魏酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；分別吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液各25μl，照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G254薄層板上，以60-90℃石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝5∶10∶2為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取口服液10ml，加乙醚10ml振搖提取，分取水層，加水飽和的正丁醇振搖提取1次，正丁醇液用水洗滌1次，正丁醇液蒸干，加甲醇溶解，通過(guò)中性氧化鋁柱，用20％甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.2ml使溶解，作為供試品溶液；取甘草對(duì)照藥材0.1g，用正丁醇振搖提取1次，正丁醇液用水洗滌1次，正丁醇液蒸干，加甲醇0.5ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液與對(duì)照藥材溶液各1μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶乙腈∶水＝20∶1∶5的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取口服液10ml，加乙酸乙酯萃取1次，棄去乙酸乙酯層，水層用水飽和的正丁醇萃取1次，正丁醇層用正丁醇飽和的水洗1次，取正丁醇層揮干，殘?jiān)眉状?.2ml溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶乙腈∶甲酸＝50∶10∶5∶0.1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合中國(guó)藥典口服液體制劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙晴∶0.05％磷酸溶液＝10∶90為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm；理論板數(shù)以阿魏酸峰計(jì)算不得低于5000；對(duì)照品溶液的制備取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含5μg的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備精密量取口服液1ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；口服液體制劑每1ml含當(dāng)歸以阿魏酸C10H10O4計(jì)，不得少于0.010mg。
本發(fā)明的實(shí)施例4所述口服液的質(zhì)量控制方法可以包括性狀為褐色的液體；氣微香，味甜、澀、微苦、辛；鑒別(1)取本制劑15ml，用乙醚振搖提取2次，合并乙醚液，用6％碳酸氫鈉溶液振搖提取2次，合并堿液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3，再用乙醚振搖提取2次，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取阿魏酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；分別吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液各10μl，照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G254薄層板上，以60-90℃石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝15∶5∶0.8為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)取本制劑15ml，加乙酸乙酯萃取4次，棄去乙酸乙酯層，水層用水飽和的正丁醇萃取4次，合并正丁醇層，用正丁醇飽和的水洗4次，取正丁醇層揮干，殘?jiān)眉状?ml溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶乙腈∶甲酸＝35∶8∶10∶0.7為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合中國(guó)藥典口服液體制劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。
本發(fā)明的實(shí)施例5所述糖漿劑的質(zhì)量控制方法可以包括性狀為深褐色的粘稠液體；氣微香，味甜、澀、微苦、辛；檢查相對(duì)密度取糖漿劑5-20g，加水10-50ml稀釋后，依照中國(guó)藥典相對(duì)密度測(cè)定法測(cè)定，應(yīng)不低于1.09；其他應(yīng)符合中國(guó)藥典糖漿劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙晴∶0.1％磷酸溶液＝65∶35為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm；理論板數(shù)以阿魏酸峰計(jì)算不得低于5000；對(duì)照品溶液的制備取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備精密量取本制劑5ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各15μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；糖漿劑每1ml含當(dāng)歸以阿魏酸C10H10O4計(jì)，不得少于0.020mg。
權(quán)利要求
1.一種阿歸養(yǎng)血液體制劑的質(zhì)量控制方法，所述液體制劑包括糖漿劑和口服液，其特征在于所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對(duì)制劑中當(dāng)歸、黃芪、甘草和白芍藥材的薄層色譜鑒別；含量測(cè)定是對(duì)制劑中當(dāng)歸所含阿魏酸的含量測(cè)定。
2.按照權(quán)利要求1所述阿歸養(yǎng)血液體制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于當(dāng)歸的鑒別方法是以阿魏酸對(duì)照品為對(duì)照，以60-90℃石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝5-20∶1-10∶0.1-2為展開(kāi)劑的薄層色譜法。
3.按照權(quán)利要求1所述阿歸養(yǎng)血液體制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于黃芪、甘草的鑒別方法是以黃芪甲苷對(duì)照品、甘草對(duì)照藥材為對(duì)照，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝5-20∶1-10∶0.5-5的下層溶液為展開(kāi)劑的薄層色譜法。
4.按照權(quán)利要求1所述阿歸養(yǎng)血液體制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于白芍的鑒別方法是以芍藥苷對(duì)照品為對(duì)照，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶甲酸＝30-50∶1-10∶5-20∶0.1-1為展開(kāi)劑的薄層色譜法。
5.按照權(quán)利要求1、2、3或4所述阿歸養(yǎng)血液體制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于具體的鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部(1)取本制劑2-10ml，加甲醇2-20ml，搖勻，再加石油醚1-10ml，振搖提取，分取石油醚液，揮干，殘?jiān)?％香草醛硫酸溶液1～10滴，顯棕黃色，放置后，漸變?yōu)榧t紫色；(2)取本制劑2-20ml，用乙醚振搖提取1-6次，合并乙醚液，用1-10％碳酸氫鈉溶液振搖提取1-5次，合并堿液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1～6，再用乙醚振搖提取1-5次，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖?.5-5ml使溶解，作為供試品溶液；另取阿魏酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含0.5-3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；分別吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液各5-25μl，照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G254薄層板上，以60-90℃石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝5-20∶1-10∶0.1-2為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取本制劑10-50ml，加乙醚10-100ml振搖提取，分取水層，加水飽和的正丁醇振搖提取1-5次，合并正丁醇液，用水洗滌1-5次，正丁醇液蒸干，加甲醇溶解，通過(guò)中性氧化鋁柱，用20-80％甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.2-3ml使溶解，作為供試品溶液；取甘草對(duì)照藥材0.1-0.5g，用正丁醇振搖提取1-5次，合并正丁醇液，用水洗滌1-5次，正丁醇液蒸干，加甲醇0.5-3ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5-5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液與對(duì)照藥材溶液各1-20μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝5-20∶1-10∶0.5-5的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取本制劑10-40ml，加乙酸乙酯萃取1-5次，棄去乙酸乙酯層，水層用水飽和的正丁醇萃取1-5次，合并正丁醇層，用正丁醇飽和的水洗1-5次，取正丁醇層揮干，殘?jiān)眉状?.2-2ml溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含0.5-5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-20μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶甲酸＝30-50∶1-10∶5-20∶0.1-1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
6.按照權(quán)利要求1所述阿歸養(yǎng)血液體制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于當(dāng)歸中阿魏酸的含量測(cè)定方法是以阿魏酸對(duì)照品為對(duì)照，以甲醇或乙晴∶0.05-0.2％磷酸溶液＝10-90∶90-10為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
7.按照權(quán)利要求1或6所述阿歸養(yǎng)血液體制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述含量測(cè)定方法為照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇或乙晴∶0.05-0.2％磷酸溶液＝10-90∶90-10為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm；理論板數(shù)以阿魏酸峰計(jì)算不得低于5000；對(duì)照品溶液的制備取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含5-20μg的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備精密量取本制劑1-10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5-25μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑中，糖漿劑每1ml含當(dāng)歸以阿魏酸C10H10O4計(jì)，不得少于0.020mg；口服液體制劑每1ml含當(dāng)歸以阿魏酸C10H10O4計(jì)，不得少于0.010mg。
8.按照權(quán)利要求1所述阿歸養(yǎng)血液體制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法包括性狀對(duì)于糖漿劑為深褐色的粘稠液體；氣微香，味甜、澀、微苦、辛；對(duì)于口服液為褐色的液體；氣微香，味甜、澀、微苦、辛；鑒別(1)取本制劑2-10ml，加甲醇2-20ml，搖勻，再加石油醚1-10ml，振搖提取，分取石油醚液，揮干，殘?jiān)?％香草醛硫酸溶液1～10滴，顯棕黃色，放置后，漸變?yōu)榧t紫色；(2)取本制劑2-20ml，用乙醚振搖提取1-6次，合并乙醚液，用1-10％碳酸氫鈉溶液振搖提取1-5次，合并堿液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1～6，再用乙醚振搖提取1-5次，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖?.5-5ml使溶解，作為供試品溶液；另取阿魏酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含0.5-3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；分別吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液各5-25μl，照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G254薄層板上，以60-90℃石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝5-20∶1-10∶0.1-2為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取本制劑10-50ml，加乙醚10-100ml振搖提取，分取水層，加水飽和的正丁醇振搖提取1-5次，合并正丁醇液，用水洗滌1-5次，正丁醇液蒸干，加甲醇溶解，通過(guò)中性氧化鋁柱，用20-80％甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.2-3ml使溶解，作為供試品溶液；取甘草對(duì)照藥材0.1-0.5g，用正丁醇振搖提取1-5次，合并正丁醇液，用水洗滌1-5次，正丁醇液蒸干，加甲醇0.5-3ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5-5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液與對(duì)照藥材溶液各1-20μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝5-20∶1-10∶0.5-5的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取本制劑10-40ml，加乙酸乙酯萃取1-5次，棄去乙酸乙酯層，水層用水飽和的正丁醇萃取1-5次，合并正丁醇層，用正丁醇飽和的水洗1-5次，取正丁醇層揮干，殘?jiān)眉状?.2-2ml溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含0.5-5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-20μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶甲酸＝30-50∶1-10∶5-20∶0.1-1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查相對(duì)密度取糖漿劑5-20g，加水10-50ml稀釋后，依照中國(guó)藥典相對(duì)密度測(cè)定法測(cè)定，應(yīng)不低于1.09；其他應(yīng)符合中國(guó)藥典糖漿劑或口服液體制劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇或乙晴∶0.05-0.2％磷酸溶液＝10-90∶90-10為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm；理論板數(shù)以阿魏酸峰計(jì)算不得低于5000；對(duì)照品溶液的制備取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含5-20μg的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備精密量取本制劑1-10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5-25μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑中，糖漿劑每1ml含當(dāng)歸以阿魏酸C10H10O4計(jì)，不得少于0.020mg；口服液體制劑每1ml含當(dāng)歸以阿魏酸C10H10O4計(jì)，不得少于0.010mg。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種阿歸養(yǎng)血液體制劑的質(zhì)量控制方法，所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對(duì)制劑中當(dāng)歸、黃芪、甘草和白芍藥材的薄層色譜鑒別；含量測(cè)定是對(duì)制劑中當(dāng)歸所含阿魏酸的含量測(cè)定；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明質(zhì)量控制方法增加了當(dāng)歸中阿魏酸的含量測(cè)定和當(dāng)歸、黃芪、甘草、白芍四味藥材的薄層色譜鑒別，所采用的方法精密度高，重現(xiàn)性好，穩(wěn)定性好，回收率高，提高了阿歸養(yǎng)血制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，從而確保了該制劑的臨床療效。
文檔編號(hào)A61P1/00GK1895378SQ20061020057
公開(kāi)日2007年1月17日 申請(qǐng)日期2006年6月16日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月16日
發(fā)明者葉湘武, 沈夢(mèng)婕, 閆文超, 唐鵬, 江帆, 田淑華 申請(qǐng)人:貴州益佰制藥股份有限公司