專利名稱：治療冠心病的脈平藥物制劑及其制備方法和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種治療冠心病的脈平藥物制劑及其制備方法和質(zhì)量控制方法，屬于中藥的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
冠心病由于其發(fā)病率高，死亡率高，嚴(yán)重危害著人類的身體健康，從而被稱作是“人類的第一殺手”，冠心病的發(fā)病隨年齡的增長而增高，程度也隨年齡的增長而加重。脈平制劑為活血化瘀類藥物，用于瘀血閉阻的胸痹、心痛病，癥見胸悶，胸痛，心悸，舌暗或有瘀斑等，以及冠心病、心絞痛見上述癥狀者。但是上市產(chǎn)品只有片劑，在制備片劑的過程中需要經(jīng)過壓縮才能成型，崩解較慢，在人體內(nèi)的溶出度較低；而冠心病心絞痛屬于急重癥，這個問題在很大程度上影響了產(chǎn)品的質(zhì)量，導(dǎo)致產(chǎn)品的療效有待提高。更重要的是，要使該制劑達(dá)到滿意療效，并能規(guī)范生產(chǎn)管理，以及對其做進(jìn)一步研究與更新發(fā)展，首先該制劑要有穩(wěn)定可控的質(zhì)量。而現(xiàn)有脈平制劑的質(zhì)量控制方法較為粗略，難以達(dá)到現(xiàn)代藥物質(zhì)量穩(wěn)定可控的要求。因此，需要研究脈平制劑質(zhì)量控制的新方法。鑒于這些情況，為了提高藥物的生物利用度，需要尋找一種治療效果理想、質(zhì)量穩(wěn)定、劑型合理的有效治療藥物制劑來豐富劑型品種、滿足市場需要。并且為了更好的控制該制劑的質(zhì)量，保證用藥的安全性，更好的指導(dǎo)生產(chǎn)，使工藝控制更加嚴(yán)格合理，使消費(fèi)者能全面認(rèn)識產(chǎn)品質(zhì)地，需要深入研究控制該藥物制劑質(zhì)量的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種治療冠心病的脈平藥物制劑及其制備方法和質(zhì)量控制方法，本發(fā)明制備的膠囊，口服給藥后，相對于片劑崩解快，崩解時(shí)限易控制，囊殼破裂后，藥物迅速分散，故藥物釋放溶出快，顯效迅速，生物利用度高；可掩蓋不適的苦味，利于服用；不透光膠囊與較好的包裝材料可使藥物不受濕氣和空氣中氧、光線的影響，從而提高藥物的穩(wěn)定性；能簡化生產(chǎn)工藝，降低成本；外觀整潔美觀，運(yùn)輸、儲存、攜帶方便。本發(fā)明制備的微丸受食物輸送節(jié)律的影響很小，藥物吸收均勻而有規(guī)則，表面積增大可以提高藥物與胃腸道的接觸面積，使藥物吸收完全，提高生物利用度，同時(shí)外形美觀、流動性好、釋藥穩(wěn)定、局部刺激性小，不易吸濕；本發(fā)明提供的軟膠囊，起效快，生物利用度高。本發(fā)明提供的一種脈平制劑新的質(zhì)量控制方法，向相關(guān)的生產(chǎn)、檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)提供了檢測的指標(biāo)、檢測的手段、技術(shù)方法等；以便更好的控制該制劑的質(zhì)量，保證用藥的安全有效。
本發(fā)明是這樣構(gòu)成的治療冠心病的脈平藥物制劑按照重量組分計(jì)算，它主要由銀杏葉提取物12.5g、維生素C 12.5g、蘆丁5g、何首烏1000g、當(dāng)歸500g或用相應(yīng)重量份它們的提取物制作而成的注射液、粉針、凍干粉針、凝膠劑、分散片、膠囊劑、軟膠囊劑、微囊劑、顆粒劑、丸劑、微丸、散劑、滴丸劑、緩釋制劑、控釋制劑、凝膠劑、口服液體制劑、煎膏劑、浸膏劑或膜劑。
治療冠心病的脈平藥物制劑的制備方法取何首烏、當(dāng)歸，加6倍水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加2倍量乙醇沉淀48小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至50℃時(shí)相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入銀杏葉提取物、維生素C、蘆丁，然后分別制成膠囊劑、微丸劑或軟膠囊劑。
所述制劑中的膠囊劑這樣制備取何首烏、當(dāng)歸，加6倍水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加2倍量乙醇沉淀48小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至50℃時(shí)相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入銀杏葉提取物、維生素C、蘆丁及淀粉，混勻，裝入膠囊，分裝時(shí)應(yīng)控制相對濕度在60％以下，即得。
所述制劑中的微丸劑這樣制備取何首烏、當(dāng)歸，加6倍水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加2倍量乙醇沉淀48小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度50℃時(shí)為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入銀杏葉提取物、維生素C、蘆丁，混勻，真空干燥，然后加入與藥物比例為1∶1.5的MCC作為賦形劑，以95％乙醇為潤濕劑，2％HPMC粘合，用離心造粒法制粒，主機(jī)轉(zhuǎn)速為150r/min，粘合劑加入速度為15.0mL/min，然后干燥、滅菌，即得。
所述制劑中的軟膠囊劑這樣制備取何首烏、當(dāng)歸，加6倍水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加2倍量乙醇沉淀48小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度50℃時(shí)為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入銀杏葉提取物、維生素C、蘆丁，混勻，真空干燥，按藥物量∶基質(zhì)量＝1∶1.2加入大豆油，混勻；膠皮的配方為明膠∶甘油∶水∶二氧化鈦＝100g∶44g∶100g∶2g，配料化膠條件為稱量配料，投入化膠罐中，冷浸30分鐘后逐漸升溫至65±5℃，攪拌5小時(shí)并同時(shí)抽真空除氣泡，待膠料均勻后放料，濾過后裝入膠囊機(jī)之膠料桶中；調(diào)試壓丸機(jī)，明膠盒溫控65℃，噴體溫控40℃，滾模轉(zhuǎn)速2.0，膠皮厚度0.6mm，室內(nèi)溫度18～25℃，相對濕度＜40％，壓丸；干燥采用滾動定型干燥與托盤干燥兩步結(jié)合，滾動定型干燥2小時(shí)，干燥溫度22℃，干燥相對濕度應(yīng)低于40％，干燥時(shí)間在24～48小時(shí)，即得。
治療冠心病的脈平藥物制劑的質(zhì)量控制方法該方法包括以下全部或部分內(nèi)容(1)銀杏葉提取物、白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C、維生素C、蘆丁、何首烏藥材、大黃素、大黃素甲醚、當(dāng)歸藥材、阿魏酸中全部或部分成分的鑒別測試方法；(2)總黃酮醇苷、萜類內(nèi)酯、維生素C、蘆丁、阿魏酸、總黃酮中全部或部分成分的含量測試方法。
所述制劑的鑒別方法包括以下全部或部分內(nèi)容a.制劑中銀杏葉提取物的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加正丁醇或丙酮提取，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖蓟蚣状际谷芙?，作為供試品溶液；另取銀杏葉提取物適量，加乙醇或甲醇使溶解，作為對照提取物溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液，分別點(diǎn)于同一塊硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯或甲酸乙酯-丁酮或丙酮-甲醇或乙醇-水＝5～50∶3～30∶1～10∶1～10為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3～30％的三氯化鋁溶液，置紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照提取物色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；b.制劑中銀杏葉提取物、白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇提取，作為供試品溶液；或?qū)⒓状继崛∫赫舾?，殘?jiān)酉∷崾谷芙?，用乙酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖既芙?，作為供試品溶液；取銀杏葉提取物，同法制成對照提取物溶液；或另取白果內(nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品中的一種或幾種制成對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液中的一種與對照溶液中的一種或幾種，分別點(diǎn)于同一塊硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以甲苯或苯-乙酸乙酯或甲酸乙酯-丙酮或丁酮-甲醇或乙醇＝10～50∶5～25∶5～25∶0.6～3為展開劑，展開，取出，晾干，用醋酐蒸氣熏后在140～160℃加熱，放冷，置紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照提取物或?qū)φ掌飞V相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；c.制劑中白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C中一種或幾種的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇或乙醇提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉∷崛芤菏谷芙猓靡宜嵋阴セ蛉燃淄榛蚨燃淄樘崛?，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖既芙?，作為供試品溶液；另取白果?nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品中的一種或幾種，制成對照品溶液；采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；正丙醇-四氫呋喃-水＝0.2～5∶15～55∶84～95為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰；d.制劑中維生素C的化學(xué)鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加新煮沸過的冷開水適量與稀酸溶液適量，提取，濾過，取續(xù)濾液加入活性炭，加熱至沸，濾過，濾液作為供試品溶液；供試品溶液中滴加數(shù)滴二氯靛粉鈉試液，試液顏色消失；或供試液中加入硝酸銀試液數(shù)滴，生成黑色沉淀；e.制劑中蘆丁的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇或乙醇提取，提取液作為供試品溶液。另取蘆丁對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和蘆丁對照品溶液，分別點(diǎn)于同一塊硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以乙酸乙酯或甲酸乙酯-甲酸或乙酸-水＝8～40∶1～5∶1～5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；f.制劑中蘆丁的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇處理，提取液作為供試品溶液；另取蘆丁對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水-冰醋酸或磷酸或鹽酸＝8～65∶58～80∶0.05～5為流動相，檢測波長為為190～410nm中的一個或幾個；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰；g.制劑中何首烏藥材的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇或乙醇提取，提取液作為供試品溶液；取何首烏對照藥材，同法制備對照藥材溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和蘆丁對照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以苯-乙醇＝1～5∶1展開約5cm，取出，晾干，再以苯-乙醇＝2～10∶1展開約10cm，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，或噴以磷鉬酸溶液，稍加熱，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；h.制劑中大黃素、大黃素甲醚中一種或兩種的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加一定酸性溶液超聲提取，再加入三氯甲烷或二氯甲烷提取，合并三氯甲烷或二氯甲烷液，揮干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖际谷芙猓鳛楣┰嚻啡芤?；再取大黃素對照品或大黃素甲醚對照品的一種或兩種，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液與對照品溶液中一種或兩種，分別點(diǎn)于同一塊硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以30～60℃的石油醚或60～90℃的石油醚或乙醚-甲酸乙酯或乙酸乙酯-甲酸或乙酸＝15～150∶3～30∶1～10的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，氨蒸汽中顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；i.制劑中大黃素、大黃素甲醚的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇處理，提取液作為供試品溶液。以大黃素對照品、大黃素甲醚對照品制備對照品溶液。照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇或乙腈-水-磷酸或醋酸或鹽酸溶液＝55～95∶33～60∶0.01～5為流動相；檢測波長為為190～410nm中的一個或幾個；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰；j.制劑中當(dāng)歸藥材、阿魏酸的薄層鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加堿性溶液超聲處理，提取液用酸性溶液調(diào)節(jié)PH值2～3，再用乙醚或乙酸乙酯或三氯甲烷提取酸液，提取液揮干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖既芙?，作為供試品溶液；取?dāng)歸藥材，同法制成對照藥材溶液；或取阿魏酸對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液與對照藥材溶液或?qū)φ掌啡芤?，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以苯或甲苯-乙酸乙酯或甲酸乙酯-甲酸或乙酸＝4～20∶1～5∶0.1～1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材或?qū)φ掌飞V相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；k.制劑中阿魏酸的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇處理，提取液作為供試品溶液；以阿魏酸對照品配制對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈或甲醇-水-磷酸或醋酸或鹽酸溶液＝6～50∶60～95∶0.07～5為流動相，檢測波長為為190～410nm中的一個或幾個；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
具體的說制劑的鑒別方法包括以下全部或部分內(nèi)容a.制劑中銀杏葉提取物的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加正丁醇在水浴中溫浸提取，提取液蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；另取銀杏葉提取物，同法制備對照提取物溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以含0.4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲醇-水＝5∶3∶1∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3％三氯化鋁溶液，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照提取物色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；b.制劑中銀杏葉提取物、白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C中一種幾種的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇超聲提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉←}酸使溶解，用乙酸乙酯提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙猓鳛楣┰嚻啡芤?；取銀杏葉提取物，同法制成對照提取物溶液；另取白果內(nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品制成對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以含0.4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇＝10∶5∶5∶0.6為展開劑，展開，取出，晾干，用醋酐蒸氣熏15分鐘，在140～160℃加熱30分鐘，放冷，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照提取物與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；c.制劑中白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C中一種或幾種的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇超聲提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉←}酸使溶解，用乙酸乙酯提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，作為供試品溶液。另取白果?nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品中的一種或幾種，分別制成對照品溶液。照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；正丙醇-四氫呋喃-水＝1∶15∶84為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰；d.制劑中維生素C的鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加新煮沸過的冷開水適量與稀醋酸溶液適量，提取，濾過，取續(xù)濾液加入活性炭，加熱至沸，濾過，濾液作為供試品溶液；供試品溶液中滴加數(shù)滴二氯靛粉鈉試液，試液顏色消失；供試液中加入硝酸銀試液數(shù)滴，生成黑色沉淀；e.制劑中蘆丁的薄層鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇超聲提取，提取液作為供試品溶液。再取蘆丁對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和蘆丁對照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水＝8∶1∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3％三氯化鋁試液，置365nm紫外燈下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；f.制劑中蘆丁的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇超聲提取，提取液作為供試品溶液；以蘆丁對照品的甲醇溶液為對照；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-冰醋酸＝37∶58∶5為流動相；檢測波長為359nm；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰；g.制劑中何首烏藥材的薄層鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇超聲提取，提取液作為供試品溶液。再取何首烏對照藥材，同法制備對照藥材溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和何首烏藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上使成條狀，以苯-乙醇＝2∶1展開約5cm，取出，晾干，再以苯∶乙醇＝4∶1展開約10cm，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的條狀斑點(diǎn)；再噴以磷鉬酸溶液，稍加熱，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的條狀斑點(diǎn)；h.制劑中大黃素、大黃素甲醚的薄層鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加8％鹽酸溶液超聲提取，再加三氯甲烷加熱回流，冷卻，離心，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取2次，合并三氯甲烷液，室溫?fù)]干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，作為供試品溶液；再取大黃素、大黃素甲醚對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液各5μl，大黃素對照品溶液3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃的石油醚-甲酸乙酯-甲酸＝15∶3∶1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，氨蒸汽中顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；i.制劑中大黃素、大黃素甲醚的高效液相色譜鑒別方法、取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇超聲提取，提取液作為供試品溶液；以大黃素對照品、大黃素甲醚對照品的甲醇溶液為對照；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)；色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸＝67∶33∶0.25為流動相；檢測波長為288nm；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
j.制劑中當(dāng)歸藥材、阿魏酸的薄層鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加1％碳酸氫鈉溶液超聲提取，提取液用稀鹽酸調(diào)節(jié)PH值2～3，再用乙醚提取酸液，提取液揮干，殘?jiān)蛹状既芙?，作為供試品溶液；取?dāng)歸藥材，同法制成對照藥材溶液；取阿魏酸對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取以上溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸＝4∶1∶0.1展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；k.制劑中阿魏酸的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇超聲提取，提取液作為供試品溶液；以阿魏酸對照品制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)；色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-磷酸溶液＝17∶83∶0.07為流動相；檢測波長為316nm；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
制劑的含量測定方法包括以下全部或部分內(nèi)容a.制劑中總黃酮醇苷含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇適量，超聲處理，取出，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液加入酸性溶液，回流，放冷，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；分別以槲皮素對照品、山柰素對照品、異鼠李素對照品制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水-磷酸或鹽酸或醋酸溶液＝50～90∶50～90∶0.02～5為流動相，檢測波長為190～410nm中的一個或幾個；以外標(biāo)一點(diǎn)法或標(biāo)準(zhǔn)曲線法，按照總黃酮苷含量＝[槲皮素含量+山柰素含量+異鼠李素含量]*2.51計(jì)算，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含總黃酮苷不得低于16mg；b.制劑中萜類內(nèi)酯含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇或乙醇提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉∷崛芤菏谷芙?，用乙酸乙酯或氯仿提取，反?fù)洗滌，合并乙酸乙酯或氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖既芙?，作為供試品溶液；取白果?nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品分別制成對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，正丙醇-四氫呋喃-水＝0.1～5∶10～55∶50～95為流動相，用蒸發(fā)光散射檢測器或紫外檢測器或示差折光檢測器檢測；以外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算，總萜類內(nèi)酯的含量以白果內(nèi)酯-C15H18O8、銀杏內(nèi)酯A-C20H24O9、銀杏內(nèi)酯B-C20H24O10、銀杏內(nèi)酯C-C20H24O11的總量計(jì)，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含萜類內(nèi)酯不得低于4.0mg；
c.制劑中維生素C含量的滴定法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加新煮沸過的冷開水適量與稀酸溶液適量，提取，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，加入淀粉指示劑適量，用碘滴定液滴定至溶液顯藍(lán)色并30秒鐘內(nèi)不褪；每1ml的0.1mol/L碘滴定液相當(dāng)于維生素C-C6H8O68.806mg；待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含維生素C-C6H8O6不得低于68mg；d.制劑中蘆丁含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇提取，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液適當(dāng)稀適，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；以蘆丁對照品制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水-冰醋酸或磷酸或甲酸＝7～57∶38～90∶0～5為流動相，檢測波長為190～410nm中的一個或幾個；以外標(biāo)一點(diǎn)法或標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算，待測平脈制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含蘆丁C27H30O16不得低于27mg；e.制劑中阿魏酸含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇提取，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液；以阿魏酸對照品制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈或甲醇-水-磷酸或鹽酸或冰醋酸＝7～50∶50～90∶0.02～5為流動相；檢測波長為190～410nm中的一個或幾個；柱溫20～50℃；以外標(biāo)一點(diǎn)法或標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含阿魏酸C10H10O4不得低于0.8mg；f.制劑中總黃酮含量的分光光度法測定用蘆丁對照品配制對照品溶液，并稀釋成5或6個有梯度差別的濃度，取這些不同濃度的溶液各等份，以亞硝酸溶液-硝酸鋁溶液-氫氧化鈉溶液顯色，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液；或以三氯化鋁溶液-醋酸鋁溶液-乙醇溶液顯色，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液；以相應(yīng)的溶液為空白；照中國藥典公開的分光光度法試驗(yàn)，在300～600nm某一波長處測試標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)、蘆丁濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇或甲醇溶液或乙醇溶液提取，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液，量取供試品溶液，照蘆丁對照品溶液顯色方法顯色，測試吸光度；用標(biāo)準(zhǔn)曲線法或外標(biāo)一點(diǎn)或二點(diǎn)法計(jì)算，即得；待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑含總黃酮以蘆丁C27H30O16計(jì)不得低于35mg。
具體的制劑的含量測定方法包括以下全部或部分內(nèi)容a.制劑中總黃酮醇苷含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加甲醇適量，超聲處理，取出，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液加入25％的鹽酸溶液，回流30分鐘，放冷，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；分別以槲皮素對照品、山柰素對照品、異鼠李素對照品的甲醇溶液為對照；采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸＝50∶50∶0.2為流動相；檢測波長為360nm；以外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算，總黃酮苷含量＝[槲皮素含量+山柰素含量+異鼠李素含量]*2.51，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含總黃酮苷不得低于32mg。
b.制劑中萜類內(nèi)酯含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇提取，提取液蒸干，殘?jiān)?％鹽酸使溶解，用乙酸乙酯提取數(shù)次，提取液用5％的醋酸鈉溶液洗滌，洗滌液再用乙酸乙酯洗滌，乙酸乙酯提取液與洗滌液合并，水洗兩次，合并水洗液，再用乙酸乙酯洗滌，合并乙酸乙酯溶液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙猓鳛楣┰嚻啡芤?；另取白果?nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品分別制成對照品溶液；采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；正丙醇-四氫呋喃-水＝1∶15∶84為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；以外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算，總萜類內(nèi)酯的含量以白果內(nèi)酯C15H18O8、銀杏內(nèi)酯A C20H24O9、銀杏內(nèi)酯B C20H24O10、銀杏內(nèi)酯C C20H24O11的總量計(jì)，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含萜類內(nèi)酯不得低于8mg；c.制劑中維生素C含量的滴定法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加新煮沸過的冷開水適量與稀醋酸適量，提取，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，加入淀粉指示劑適量，用0.1mol/L碘滴定液滴定至終點(diǎn)，溶液顯藍(lán)色并30秒鐘內(nèi)不褪；每1ml碘滴定液0.1mol/L相當(dāng)于維生素C C6H8O68.806mg，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為日用劑量含維生素C C6H0O6不得低于135mg；d.制劑中蘆丁含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加甲醇提取，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液適當(dāng)稀適，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液，以蘆丁對照品的甲醇溶液為對照，采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-冰醋酸＝32∶67∶1為流動相；檢測波長為359nm；以外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算，待測平脈制劑含量限度應(yīng)為日用劑量含蘆丁C27H30O16不得低于54mg；e.制劑中阿魏酸含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加70％甲醇加熱回流30分鐘，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液，以阿魏酸對照品的甲醇溶液為對照，采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-磷酸＝17∶83∶0.07為流動相；檢測波長為316nm；柱溫35℃；以外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用劑量含阿魏酸C10H10O4不得低于1.6mg；f.制劑中總黃酮含量的分光光度法測定精密稱取蘆丁對照品，用加50％甲醇配制成每1ml含0.2mg的溶液；精密量取對照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，置10ml的量瓶中，加50％甲醇至5ml，分別加入5％的亞硝酸鈉溶液0.3ml，混勻，放置6分鐘，再加入10％的硝酸鋁溶液0.3ml，混勻，放置6分鐘，各加入氫氧化鈉試液4ml，再加50％甲醇至刻度，混勻；以相應(yīng)的溶液為空白；照中國藥典公開的分光光度法，在510nm處測定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；取待測脈平顆粒劑適量，置錐形瓶中，加50％甲醇超聲20分鐘，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。量取供試品溶液，自標(biāo)準(zhǔn)曲線法“加50％甲醇至5ml，”做起，測試吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出相當(dāng)于蘆丁的重量，計(jì)算，即得；本品一日用劑量含總黃酮以蘆丁C27H30O16計(jì)不得低于70mg。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的產(chǎn)品用于瘀血閉阻的胸痹、心痛病，癥見胸悶，胸痛，心悸，舌暗或有瘀斑等，對于冠心病、心絞痛等疾病具有顯著的治療效果；本發(fā)明制備的膠囊，通過顆粒包薄膜衣，增重小，抗?jié)裥阅芰?qiáng)，采用了高分子材料，取消了糖粉，更有利于老年人和糖尿病患者的服用，確保藥物的療效和安全性，生物利用度高；本發(fā)明制備的微丸受食物輸送節(jié)律的影響很小，藥物吸收均勻而有規(guī)則，表面積增大可以提高藥物與胃腸道的接觸面積，使藥物吸收完全，提高生物利用度，同時(shí)外形美觀、流動性好、釋藥穩(wěn)定、局部刺激性小，不易吸濕，本發(fā)發(fā)明制備的軟膠囊，生物利用度高，有效成分起效快；克服現(xiàn)有技術(shù)、產(chǎn)品存在的問題；達(dá)到了發(fā)明的目的。
本申請人在研究中發(fā)現(xiàn)，由于本方含有當(dāng)歸等多糖含量高的藥材，浸膏原粉吸濕性很強(qiáng)，常規(guī)方法制成膠囊劑、微丸、軟膠囊分別會出現(xiàn)內(nèi)容物粘結(jié)、吸潮等現(xiàn)象，影響了產(chǎn)品的穩(wěn)定性和質(zhì)量。特別是制備膠囊時(shí)，浸膏極易吸潮，流動性很差，根本無法裝入膠囊，即使勉強(qiáng)裝入，也易結(jié)快，藥品質(zhì)量的穩(wěn)定性難以得到保證，為此，本申請人采用適當(dāng)?shù)妮o料和工藝條件，使得指的產(chǎn)品性能良好。本產(chǎn)品微丸具有較大的吸濕性，為了增加微丸制劑的抗?jié)裥裕岣弋a(chǎn)品本身的質(zhì)量，本發(fā)明微丸通過對賦形劑的篩選，來提高微丸的抗?jié)裥?，通過實(shí)驗(yàn)篩選后確定加入與藥物比例為1∶1.5的MCC作為賦形劑，以95％乙醇為潤濕劑，2％HPMC粘合，用離心造粒法制粒，主機(jī)轉(zhuǎn)速為150r/min，粘合劑加入速度為15.0mL/min，制得的微丸性能良好。而軟膠囊在胃腸道中崩解快，囊殼破裂后，藥物迅速分散，故藥物釋放溶出快，顯效迅速，生物利用度高；半透光軟膠囊與較好的包裝材料可保護(hù)藥物不受濕氣和空氣中氧、光線的作用，從而提高抗?jié)裥?；所以膠囊本身的穩(wěn)定性及成型工藝直接影響產(chǎn)品的穩(wěn)定性，是十分關(guān)鍵的技術(shù)。并且，本發(fā)明質(zhì)量控制方法對以銀杏葉提取物、維生素C、蘆丁、何首烏、當(dāng)歸制成的中藥制劑產(chǎn)品的質(zhì)量控制更為有效，方法精密度、穩(wěn)定性均較理想，能更全面、更嚴(yán)格的控制以銀杏葉提取物、維生素C、蘆丁、何首烏、當(dāng)歸制成的中藥制劑產(chǎn)品的質(zhì)量。
本發(fā)明中，銀杏葉提取物可以是市售的，或者按照中華人民共和國2005版藥典中“銀杏葉提取物”的制備方法或申請?zhí)枮榈摹癈N200510056634.X”專利申請中銀杏葉提取物的制備方法進(jìn)行制備獲??；蘆丁可以是市售的如國藥準(zhǔn)字H15020035、國藥準(zhǔn)字H37020490；維生素C可以是市售的如國藥準(zhǔn)字H32020972。
申請人進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)，以選擇本發(fā)明提供的藥物制劑的制備工藝、使用的輔料種類及用量、比例等；保證其科學(xué)、合理、可行；得到的制劑具有有效的治療效果。
實(shí)驗(yàn)例1提取工藝研究(1)因素選擇中藥煎煮提取效果受到加水量、提取時(shí)間、提取次數(shù)等因素的影響。因現(xiàn)有技術(shù)已對提取時(shí)間、提取次數(shù)進(jìn)行了考察，故在何首烏、當(dāng)歸煎煮考察時(shí)，選取加水量作為因素，重點(diǎn)考察因素的不同水平對煎煮提取效果的影響。結(jié)合生產(chǎn)成本、能源等方面進(jìn)行綜合考慮，選擇因素水平。
(2)指標(biāo)確定浸膏是固體制劑發(fā)揮療效的物質(zhì)基礎(chǔ)，其收率高低直接影響制劑工藝，故選擇浸膏收得率作為評價(jià)指標(biāo)是合理的。
(3)試驗(yàn)稱取何首烏、當(dāng)歸300g，共三份，分別加入不同體積的水加熱煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小時(shí)，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計(jì)算出膏率，結(jié)果見下表。
加水量考察結(jié)果表

由上表可知，加水量為5倍時(shí)，其出膏率明顯低于加水量為6倍量，加水量為7倍與加水量為6倍的浸膏收得率較高，但是二者差別不大，說明加入6倍量水即可將大部分成分提取出來，因此從節(jié)約能源和出膏率的角度來考慮，選用加水量為6倍量，故最佳提取工藝為加水煎煮三次，每次1小時(shí)，加水量為6倍。并根據(jù)此條件進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。
加水量驗(yàn)證考察結(jié)果表

由上表可知，各組的浸膏收得率差別不大，說明篩選的條件是穩(wěn)定可行的，因此確定加水量的最佳工藝為加水煎煮三次，每次加6倍量。
綜上所述，何首烏、當(dāng)歸的最佳提取工藝為何首烏、當(dāng)歸加6倍水加熱煎煮三次，每次1小時(shí)。
實(shí)驗(yàn)例2成型工藝研究2.1膠囊劑(1)吸濕性考察原工藝中維生素C、銀杏葉提取物和蘆丁是直接加入，我們對提取藥膏與維生素C、銀杏葉提取物和蘆丁的混合物料進(jìn)行吸濕性考察試驗(yàn)，結(jié)果見下表。
吸濕性試驗(yàn)結(jié)果


通過吸濕性試驗(yàn)考察，認(rèn)為混合物料具有一定的吸濕性，直接裝膠囊難度較大。
(2)稀釋劑選擇原劑型中選用淀粉作為稀釋劑，考慮到提取的物料性質(zhì)基本相同，因此我們也選用淀粉作為稀釋劑來調(diào)整處方重量。
(3)流動性考察為保證分劑量準(zhǔn)確，要求填充物料具良好的流動性，故以測定休止角方法考查混合物料的流動性。
固定漏斗法取3只漏斗串聯(lián)，最底端距水平放置坐標(biāo)紙1.5cm處，小心地將填充物料沿漏斗壁倒入最上的漏斗中直到最下面漏斗形成的顆粒圓錐體尖端接觸到漏斗下口為止，由坐標(biāo)紙測出圓錐底部的直徑，計(jì)算出休止角(tgα＝H/R/2)，計(jì)算結(jié)果見下表。
填充物料的休止角α

由上表可知，混合物料休止角＜40°，即表明混合物料流動性較好，能滿足分裝要求。
(4)填充物料堆密度測定及空膠囊選擇空膠囊規(guī)格的選擇一般根據(jù)藥物的晶型、細(xì)度、密度及劑量的不同，特別是堆密度來確定。采用量筒法測定混合物料堆密度，即將精密稱量的混合物裝入干燥的10ml量筒內(nèi)，左右輕輕振搖，來回20次，記錄容量，計(jì)算，結(jié)果見下表。
堆密度測定結(jié)果

結(jié)果測得填充顆粒堆密度約0.58(g/cm3)，根據(jù)空膠囊號碼和近似容量的關(guān)系，選擇1號空膠囊殼分裝，即每粒膠囊裝量為0.32g(相當(dāng)于1.53g生藥/粒)左右。
(5)臨界相對濕度(CRH)測定為了保證生產(chǎn)時(shí)物料能夠順利進(jìn)行填裝，需要控制環(huán)境的濕度，以便使物料具有較好的流動性，使裝量均勻，為此我們對混合物料進(jìn)行平衡吸濕性試驗(yàn)，即吸濕平衡曲線測定。取混合物料約1g共六份，置稱量瓶中，精密稱定，將稱量瓶蓋打開，分別放入相對濕度為20％、33％、43％、60％、75％、92％的環(huán)境中，于25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)放置84小時(shí)，取出稱量瓶，加蓋后精密稱定，計(jì)算吸濕百分率，以相對濕度為橫坐標(biāo)，吸濕百分率為縱坐標(biāo)，繪制吸濕平衡曲線見附圖1，試驗(yàn)結(jié)果見下表。
填充顆粒的吸濕百分率(％)

從上表可知，膠囊在不同相對濕度環(huán)境下，其吸水量不等，在相對濕度約為60.0％以下時(shí)，吸濕性較小，因此分裝時(shí)應(yīng)控制相對濕度在60％以下。
2.2微丸劑(1)賦形劑品種及用量的篩選吸濕百分率的測定將底部盛有飽和KBr溶液在20℃放置2d，使其內(nèi)部RH恒定在84％，在已干燥恒重的稱量瓶中放人約2g微丸，平鋪于底部，厚約2mm，打開稱量瓶，定時(shí)稱重并計(jì)算吸濕百分率，結(jié)果見表。
不同賦形劑的吸濕百分率(％)

由上表的結(jié)果可知，對于本產(chǎn)品而言淀粉吸濕性大于微晶纖維素，因此，本發(fā)明微丸選擇微晶纖維素為賦形劑，但是不同劑量賦形劑的加入，對微丸的質(zhì)量也會產(chǎn)生一定的影響。為此，本申請人對微晶纖維素的使用量進(jìn)行了比較和篩選，測定MCC不同使用量微丸的休止角和松密度，具體數(shù)據(jù)見表。
MCC不同使用量對微丸休止角和松密度的影響

根據(jù)表6的數(shù)據(jù)可知，隨著MCC含量的增加，所得微丸的休止角減少，松密度增加，但是從成本方面考慮，選擇軟材與MCC比例為1∶1.5。
(2)主機(jī)轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速的影響將微丸中間品與MCC按1∶1的比例混合均勻，取500g置離心造粒機(jī)中，以3％HPMC水溶液為粘合劑，加入量為90mL，主機(jī)轉(zhuǎn)速分別為100，200，300r/min，結(jié)果見表。
主機(jī)轉(zhuǎn)速對微丸粒度分布及收率的影響

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，當(dāng)主機(jī)轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速為100r/min時(shí)，大部分粉末依附于底盤而達(dá)不到均勻潤濕，制粒的結(jié)果是較大的聚集塊、微丸與中間品并存，粒徑600～400μm微丸的收率較低；當(dāng)主機(jī)轉(zhuǎn)速增加至150r/min時(shí)，由于粉末潤濕較為均勻，顆粒與檔板的撞擊沖力變大，較大的顆粒會進(jìn)一步破碎，因而使粒徑大于900μm的顆粒和小于400μm的粉末隨之減少；當(dāng)主機(jī)轉(zhuǎn)速從150r/min增至200r/min時(shí)，粒徑變化不再明顯，說明此時(shí)粒子破碎與集聚基本達(dá)到平衡，所以對于本產(chǎn)品而言，主機(jī)轉(zhuǎn)速應(yīng)為150r/min。
2.3軟膠囊劑軟膠囊在胃腸道中崩解快，囊殼破裂后，藥物迅速分散，故藥物釋放溶出快，顯效迅速，生物利用度高；半透光軟膠囊與較好的包裝材料可保護(hù)藥物不受濕氣和空氣中氧、光線的作用，從而提高穿心蓮內(nèi)酯等不穩(wěn)定成分的穩(wěn)定性；所以膠囊的穩(wěn)定性及成型工藝是十分關(guān)鍵的技術(shù)。
(1)分散介質(zhì)(或稱基質(zhì))選擇在填充物料與基質(zhì)能混合均勻，并能通暢輸料及壓丸的前提下，盡量減少基質(zhì)用量。通過多次試驗(yàn)，確定藥物量(g)∶基質(zhì)量(g)＝1∶1.2為宜，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表。
基質(zhì)用量考察

(2)膠囊殼配方篩選按下表配料比例配料，放入500ml抽濾瓶中，65℃水浴溶化，自動攪拌化膠，同時(shí)抽真空，真空度0.095Mpa左右，經(jīng)5小時(shí)后保溫放置1小時(shí)，過濾膠液，取一部分膠液測定粘度及其它性能，一部分膠液在鐵板上均勻鋪成一薄層(先在下面抹一層液體石蠟)，放置于次日觀察膠皮性能再作評價(jià)，將各指標(biāo)的考察結(jié)果由好至差依次用“+++，“++”，“+”，“-”表示，結(jié)果見表。
膠皮配料篩選結(jié)果

經(jīng)以上篩選，綜合評價(jià)，明膠100g∶甘油44∶水100，最適合本產(chǎn)品。
(3)遮光劑選擇透明膠囊殼易致不穩(wěn)定，故需加入一定量的遮光劑。經(jīng)考察選擇二氧化鈦(鈦白粉)作遮光劑可達(dá)到有效的遮光效果，且質(zhì)量穩(wěn)定，不與膠漿及填充物料發(fā)生化學(xué)變化。其用量經(jīng)考察以明膠∶甘油∶水∶二氧化鈦＝100g∶44g∶100g∶2g為宜，且對膠皮質(zhì)量影響不大，結(jié)果見表。
遮光劑用量選擇

膠囊配方中加入遮光劑后質(zhì)量更為穩(wěn)定。
實(shí)驗(yàn)例3溶出度實(shí)驗(yàn)純化水為溶媒，37±0.5℃100轉(zhuǎn)/分。取脈平片、本發(fā)明膠囊、本發(fā)明軟膠囊、本發(fā)明微丸，置溶出杯中分別于5min、10min、20min、30min、40min、50min、60min、90min時(shí)取6ml杯中溶液，立即置離心管中以4千轉(zhuǎn)/分離心5min，取上清液5ml，加水稀釋至10ml，微孔濾膜濾過，用高效液相法測定鹽酸小檗堿的含量，計(jì)算釋放累積百分率。

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，片劑在制備的過程中需要經(jīng)過壓縮才能成型，崩解較慢，在人體內(nèi)的溶出度較低，本發(fā)明制劑更有利于人體的吸收利用。
實(shí)驗(yàn)例4藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)
(1)對血瘀癥大鼠血小板活化的作用選用wistar大鼠32只，雌雄不拘，體重280±20g。隨機(jī)分為4組，每組8只，即正常組正常喂養(yǎng)；模型組生理鹽水2ml/kg體重灌胃；脈平片組、本發(fā)明膠囊組、本發(fā)明軟膠囊組、本發(fā)明微丸組分別按4.0g/kg體重灌胃給予相應(yīng)藥物。除正常組外，其余3組同時(shí)腹腔內(nèi)注射地塞米松0.25mg/kg體重制備血瘀模型。以上處理共8d。觀察指標(biāo)第9天取材，動物麻醉后，剖開腹腔，剝離出腹主動脈取血2ml裝入加有抗凝劑的塑料試管，于4℃3000rpm離心10min，分離血漿，測定血小板膜糖蛋白-140(GMP-140)含量，單位以ng/ml表示。具體結(jié)果見下表。
各組大鼠血漿GMP-140的變化

上表結(jié)果說明，模型組GMP-140水平較高，與正常組比較有顯著差異。而加用脈平片、本發(fā)明膠囊、本發(fā)明軟膠囊、本發(fā)明微丸，血漿GMP-140水平較模型組有顯著降低，而GMP-140是血小板活化釋放的特異分子標(biāo)志物之一，可反映體內(nèi)血小板的活化程度及血栓形成傾向。其中，本發(fā)明產(chǎn)品的藥效并優(yōu)于脈平片，提示說明本發(fā)明產(chǎn)品能夠抑制血小板活化，用于血瘀冠心病心絞痛的治療。
(2)對應(yīng)急性心肌缺血大鼠血流變的影響取大鼠48只，隨機(jī)分為正常對照組、模型組、脈平片組、本發(fā)明膠囊組、本發(fā)明軟膠囊組、本發(fā)明微丸組，每組8只。各藥物組按1ml/100g體重，分別灌胃相應(yīng)藥物，正常對照組及模型組給等容量生理鹽水灌胃，每日1次，連續(xù)5天。第6天除正常對照組外，其它5組每只大鼠背部皮下注射0.1％腎上腺素0.1ml/100g體重，共2次，間隔2h。于第1次注射1h后將大鼠放入0℃冰水中浸泡5min。第6天灌胃給藥1h后以20％烏拉坦1g/kg體重腹腔注射麻醉，自腹主動脈取血4ml，做血液流變學(xué)檢查，結(jié)果見下表。


從上表可以看出，用藥組與模型組比較血漿粘滯度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、卡松粘度等均有顯著性差異，趨向于正常值，且本發(fā)明產(chǎn)品的效果優(yōu)于脈平片。
實(shí)驗(yàn)例5質(zhì)量控制方法的考察(1)膠囊中銀杏葉提取物的薄層鑒別本實(shí)驗(yàn)的目的是為了突出銀杏葉提取物的特征，為排除制劑中與銀杏提取物所含成分類似的其它成分的干擾，試驗(yàn)者對樣品提取、展開系統(tǒng)、顯色方法等分別進(jìn)行了比較試驗(yàn)。經(jīng)過篩選，確定了最佳方法與條件以正丁醇為樣品提取溶劑；以硅膠G薄層板為固定相，醋酸乙酯-丁酮-甲醇-水(5∶3∶1∶1)為展開劑；以3％的三氯化鋁溶液顯色；在此條件下，樣品與銀杏葉提取物對照品均分離清晰，陰性無干擾。
膠囊中銀杏葉提取物的薄層鑒別

(2)膠囊中銀杏葉提取物、白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C的薄層鑒別本實(shí)驗(yàn)的目的是為了突出銀杏葉提取物中內(nèi)酯類成分的特征，為排除制劑中與銀杏提取物所含內(nèi)酯類成分類似的其它成分的干擾，試驗(yàn)者對樣品提取、展開系統(tǒng)、顯色方法等分別進(jìn)行了比較試驗(yàn)。經(jīng)過篩選，確定了最佳方法與條件樣品內(nèi)容物加甲醇提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉←}酸使溶解，用乙酸乙酯提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙庵苽涔┰嚻啡芤?；以硅膠G薄層板為固定相，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇(10∶5∶5∶0.6)為展開劑；用醋酐蒸氣熏后在140～160℃加熱顯色；置紫外燈(365nm)下檢視；在此條件下，樣品、銀杏葉提取物對照品、銀杏內(nèi)酯類對照品均分離清晰，陰性無干擾。
實(shí)驗(yàn)中幾種展開系統(tǒng)的展開效果比較見下表膠囊中銀杏葉提取物、白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C的薄層鑒別

(3)顆粒劑中白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C中一種或兩種或三種或四種的高效液相鑒別本實(shí)驗(yàn)的目的是為了突出銀杏葉提取物中內(nèi)酯類成分的特征，為排除制劑中與銀杏提取物所含內(nèi)酯類成分類似的其它成分的干擾，試驗(yàn)者對樣品提取、展開系統(tǒng)等分別進(jìn)行了比較試驗(yàn)。經(jīng)過篩選，確定了最佳方法與條件樣品加甲醇提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉←}酸使溶解，用乙酸乙酯提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙庵苽涔┰嚻啡芤?；色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；正丙醇-四氫呋喃-水(1∶15∶84)為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測的最佳實(shí)驗(yàn)條件與參數(shù)。在此條件下，樣品、銀杏葉提取物對照品、銀杏內(nèi)酯類對照品均分離清晰，陰性無干擾。
實(shí)驗(yàn)中幾種展開系統(tǒng)的展開效果比較見下表顆粒劑中白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C中一種或兩種或三種或四種的高效液相鑒別

(4)片劑中維生素C的鑒別化學(xué)鑒別本實(shí)驗(yàn)的目的是為了突出片劑中的維生素C的化學(xué)性質(zhì)，經(jīng)試驗(yàn)確定鑒別方法為取待測脈平片劑內(nèi)容物適量，加新煮沸過的冷開水適量與稀醋酸適量，提取，濾過，取續(xù)濾液加入活性炭，加熱至沸，濾過，濾液作為供試品溶液；一份供試品溶液中滴加數(shù)滴二氯靛粉鈉試液，試液顏色消失；另一份供試液中加入硝酸銀試液數(shù)滴，生成黑色沉淀。
(5)顆粒劑中蘆丁的薄層鑒別本實(shí)驗(yàn)的目的是為了突出蘆丁的特征，為排除制劑中與銀杏提取物所含成分類似的其它成分的干擾，試驗(yàn)者對樣品提取、展開系統(tǒng)、顯色方法等分別進(jìn)行了比較試驗(yàn)。經(jīng)過篩選，確定了最佳方法與條件以甲醇為脈平顆粒樣品的提取溶劑；以硅膠G薄層板為固定相，乙酸乙酯-甲酸-水(8∶1∶1)為展開劑；三氯化鋁試液顯色，置紫外燈(365nm)下檢視的最佳實(shí)驗(yàn)條件與參數(shù)。在此條件下，樣品與蘆丁對照品均分離清晰，陰性無干擾。
實(shí)驗(yàn)中幾種展開系統(tǒng)的展開效果比較見下表顆粒劑中蘆丁的薄層鑒別

(6)片劑中蘆丁的高效液相鑒別方法本實(shí)驗(yàn)的目的是為了突出蘆丁的特征，為排除制劑中與蘆丁類似的其它成分的干擾，試驗(yàn)者對樣品提取、展開系統(tǒng)等分別進(jìn)行了比較試驗(yàn)。經(jīng)過篩選，確定了最佳實(shí)驗(yàn)條件與參數(shù)取待測脈平片劑內(nèi)容物適量，加甲醇超聲處理，提取液作為供試品溶液。以蘆丁對照品的甲醇溶液為對照。采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-冰醋酸(37∶58∶5)為流動相；檢測波長為359nm。在此條件下，樣品、蘆丁對照品均分離清晰，陰性無干擾。實(shí)驗(yàn)中幾種洗脫系統(tǒng)的洗脫效果比較見下表片劑中蘆丁的高效液相鑒別方法


(7)脈平膠囊中何首烏藥材的薄層鑒別本實(shí)驗(yàn)的目的是為了突出何首烏藥材的特征，為排除制劑中與何首烏藥材所含成分類似的其它成分的干擾，試驗(yàn)者對樣品提取、展開系統(tǒng)、顯色方法等分別進(jìn)行了比較試驗(yàn)。經(jīng)過篩選，確定了最佳實(shí)驗(yàn)條件與參數(shù)以甲醇為脈平膠囊樣品的提取溶劑；以硅膠G薄層板為固定相，先以苯-乙醇(2∶1)為展開劑，再以苯-乙醇(4∶1)為展開劑二次展開，置紫外光燈(365)下檢視。在此條件下，樣品與何首烏藥材均分離清晰，陰性無干擾。
實(shí)驗(yàn)中幾種展開系統(tǒng)的展開效果比較見下表脈平膠囊中何首烏藥材的薄層鑒別

(8)脈平顆粒劑中大黃素、大黃素甲醚的薄層鑒別本實(shí)驗(yàn)的目的是為了突出何首烏中大黃素或大黃素甲醚的特征斑點(diǎn)，為排除制劑中與大黃素或大黃素甲醚類似成分的干擾，試驗(yàn)者對樣品提取、展開系統(tǒng)、顯色方法等分別進(jìn)行了比較試驗(yàn)。經(jīng)過篩選，確定了最佳實(shí)驗(yàn)條件與參數(shù)以8％鹽酸溶液為脈平顆粒劑樣品提取溶劑，超聲處理，再加三氯甲烷提取鹽酸溶液，最后加甲醇制備供試品溶液；以硅膠G薄層板為固定相，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶3∶1)的上層溶液為展開劑；氨蒸汽顯色檢視。在此條件下，樣品與大黃素或大黃素甲醚均分離清晰，陰性無干擾。
實(shí)驗(yàn)中幾種展開系統(tǒng)的展開效果比較見下表脈平顆粒劑中大黃素、大黃素甲醚的薄層鑒別

(9)片劑中大黃素、大黃素甲醚的高效液相色譜鑒別本實(shí)驗(yàn)的目的是為了突出何首烏中大黃素、大黃素甲醚的特征，為排除制劑中與大黃素、大黃素甲醚類似的其它成分的干擾，試驗(yàn)者對樣品提取、展開系統(tǒng)等分別進(jìn)行了比較試驗(yàn)。經(jīng)過篩選，確定了最佳實(shí)驗(yàn)條件與參數(shù)取待測脈平片劑內(nèi)容物適量，加甲醇超聲處理，提取液作為供試品溶液。以大黃素、大黃素甲醚對照品分別制備對照品溶液。采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸(67∶33∶0.025)為流動相；檢測波長為288nm。在此條件下，樣品、大黃素、大黃素甲醚對照品均分離清晰，陰性無干擾。
實(shí)驗(yàn)中幾種洗脫系統(tǒng)的洗脫效果比較見下表片劑中大黃素、大黃素甲醚的高效液相色譜鑒別

(10)脈平顆粒劑中當(dāng)歸藥材、阿魏酸的薄層鑒別本實(shí)驗(yàn)的目的是為了突出當(dāng)歸藥材、阿魏酸的特征斑點(diǎn)，為排除制劑中當(dāng)歸藥材所含成分類似成分的干擾，試驗(yàn)者對樣品提取、展開系統(tǒng)、顯色方法等分別進(jìn)行了比較試驗(yàn)。經(jīng)過篩選，確定了最佳條件與參數(shù)取待測脈顆粒適量，加1％碳酸氫鈉溶液超聲提取，提取液用稀鹽酸調(diào)節(jié)PH值2～3，再用乙醚提取酸液，提取液揮干，殘?jiān)蛹状既芙?，作為供試品溶液；取?dāng)歸藥材，同法制成對照藥材溶液；取阿魏酸對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取以上溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸(4∶1∶0.1)展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。此條件下，樣品與當(dāng)歸藥材或阿魏酸均分離清晰，陰性無干擾。
取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加堿性溶液超聲處理，提取液用酸性溶液調(diào)節(jié)PH值2～3，再用乙醚或乙酸乙酯或三氯甲烷提取酸液，提取液揮干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖既芙猓鳛楣┰嚻啡芤?；取?dāng)歸藥材，同法制成對照藥材溶液；或取阿魏酸對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液與對照藥材溶液或?qū)φ掌啡芤?，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以苯或甲苯-乙酸乙酯或甲酸乙酯-甲酸或乙酸(4～20∶1～5∶0.1～1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材或?qū)φ掌飞V相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；實(shí)驗(yàn)中幾種展開系統(tǒng)的展開效果比較見下表脈平顆粒劑中當(dāng)歸藥材、阿魏酸的薄層鑒別

(11)顆粒劑中阿魏酸的高效液相色譜鑒別本實(shí)驗(yàn)的目的是為了突出當(dāng)歸中阿魏酸的特征，為排除制劑中與阿魏酸類似的其它成分的干擾，試驗(yàn)者對樣品提取、展開系統(tǒng)等分別進(jìn)行了比較試驗(yàn)。經(jīng)過篩選，確定了最佳實(shí)驗(yàn)條件與參數(shù)取待測脈平顆粒劑內(nèi)容物適量，加甲醇超聲處理，提取液作為供試品溶液。以阿魏酸對照品分別制備對照品溶液。采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-磷酸溶液(17∶83∶0.07)為流動相；檢測波長為316nm。在此條件下，樣品、阿魏酸對照品均分離清晰，陰性無干擾。
實(shí)驗(yàn)中幾種洗脫系統(tǒng)的洗脫效果比較見下表顆粒劑中阿魏酸的高效液相色譜鑒別

(12)膠囊中總黃酮醇苷的含量測定試驗(yàn)以槲皮素、山柰素、異鼠李素為對照品，用Alltech P426高效液相色譜儀，確立了脈平膠囊中總黃酮醇苷的含量測定的最佳方法色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸(50∶50∶0.2)為流動相；檢測波長為360nm。理論板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取槲皮素、山柰素、異鼠李素對照品適量，加甲醇制成每1ml分別含30、30、10μg的混合溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品10粒，取內(nèi)容物，混勻，從中取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加甲醇20ml，超聲處理(功率250W，頻率33KHz)20分鐘，取出，放至室溫，加甲醇補(bǔ)足重量，濾過，取續(xù)濾液10ml，加入甲醇10ml、25％鹽酸5ml量，水浴加熱回流30分鐘，冷卻，甲醇定容，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，分別計(jì)算槲皮素、山柰素、異鼠李素含量，按下式換算成總黃酮醇苷的含量。
總黃酮醇苷含量＝(槲皮素含量+山柰素含量+異鼠李素含量)*2.51本品按干燥品計(jì)算，一日用脈平膠囊中含總黃酮醇苷不得低于32mg。
該方法分別通過了以下1～10項(xiàng)方法學(xué)考察試驗(yàn)1檢測波長的選擇槲皮素、山柰素、異鼠李素的對照品溶液，分別在200～400nm波長范圍內(nèi)掃描。結(jié)果表明，三者均在360nm處有最大吸收，因此選擇360nm作為測定脈平制劑中蘆丁含量的檢測波長。
2系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)根據(jù)以上儀器條件，得到槲皮素、山柰素、異鼠李素對照品與樣品色譜圖。
理論塔板數(shù)以槲皮素計(jì)不低于2000。
3陰性干擾排除試驗(yàn)為考察其它藥材和輔料是否干擾總黃酮醇苷的測定，除銀杏葉提取物外，按處方比例稱取其它藥材和輔料同法制成陰性對照品溶液并測定。結(jié)果表明，陰性樣品對總黃酮醇苷的含量測定無干擾。
4線性關(guān)系的考察精密量取槲皮素、山柰素、異鼠李素不同濃度的溶液，注入液相色譜儀，依上述方法測定。以對照品進(jìn)樣量(ng)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)做圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。見下表。
槲皮素、山柰素、異鼠李素線性關(guān)系

結(jié)果表明，槲皮素在112.84ng～564.2ng范圍之內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程Y＝3.2104X-30.686，相關(guān)系數(shù)γ＝0.9997；山柰素在124.73ng～623.65ng范圍之內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程Y＝3.5571X-9.9099，相關(guān)系數(shù)γ＝0.9999；異鼠李素在60.24ng～301.2ng范圍之內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程Y＝3.2076X-11.437，相關(guān)系數(shù)γ＝0.9998。
5樣品提取時(shí)間的選擇平行精密取樣品內(nèi)容物共4份，每份約1g，加甲醇適量分別超聲處理(功率250W，頻率33KHz)10、20、30、40分鐘，提取液照中國藥典公開的高效液相色譜法測定。結(jié)果見下表。提取時(shí)間的選擇

結(jié)果表明，超聲處理20min即可提取完全，因此提取時(shí)間定為20分鐘。
6精密度試驗(yàn)分別精密吸取槲皮素、山柰素、異鼠李素對照品溶液10μl，注入液相色譜儀，每種對照品重復(fù)測定5次，峰面積測試結(jié)果見下表精密度試驗(yàn)

結(jié)果表明，儀器對槲皮素、山柰素、異鼠李素的測試精密度均良好。
7穩(wěn)定性試驗(yàn)7.1對照品穩(wěn)定性試驗(yàn)分別精密吸取同一槲皮素、山柰素、異鼠李素對照品溶液10μl，注入液相色譜儀，分別在0、4、8、16、24小時(shí)進(jìn)樣測定，峰面積測定結(jié)果見下表。
對照品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，槲皮素、山柰素、異鼠李素對照品溶液均在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。
7.2供試品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取同一供試品(030901批)溶液10μl，注入液相色譜儀，分別在0、4、8、16、24小時(shí)進(jìn)樣測定總黃酮醇苷，測定結(jié)果見下表。
供試品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，供試品溶液在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。
8重復(fù)性試驗(yàn)取本品(030901批)內(nèi)容物，混勻，從中取約1g(共5份)，精密稱定，按最佳方法測試。結(jié)果見下表。
重復(fù)性試驗(yàn)

結(jié)果表明，重復(fù)性良好。
9加樣回收試驗(yàn)取本品(030901批，總黃酮醇苷含量47.6mg/一日劑量，槲皮素含量22.3mg/一日劑量、山柰素含量15.1mg/一日劑量、異鼠李素含量10.2mg/一日劑量)內(nèi)容物，平行精密取樣共18份，6份分別精密加入槲皮素對照品，6份分別精密加入山柰素對照品，，6份分別精密加入異鼠李素對照品，依法測定。測定結(jié)果見下表。
總黃酮醇苷加樣回收率試驗(yàn)

結(jié)果表明，總黃酮醇苷回收率良好。
10樣品含量測定按正文供試品溶液的制備和測定法項(xiàng)下操作，測定十批樣品，結(jié)果見下表。
十批樣品含量測定結(jié)果

結(jié)論根據(jù)10批樣品含量測定結(jié)果，暫定本品按干燥品計(jì)算，一日劑量含總黃酮醇苷不得低于32mg。
(13)脈平片中萜類內(nèi)酯的含量測定試驗(yàn)以白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C為對照品，用Alltech P426高效液相色譜儀，確立了脈平膠囊中萜類內(nèi)酯的含量測定的最佳方法色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；正丙醇-四氫呋喃-水(1∶15∶84)為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測。理論板數(shù)按白果內(nèi)酯峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。
對照品溶液的制備精密稱取白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C對照品適量，加甲醇制成每1ml各含1mg、1mg、1mg、0.5mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品20片，除去包衣，研細(xì)，混勻，從中取相當(dāng)于萜類內(nèi)酯20mg粉末，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加甲醇50ml，超聲處理(功率250W，頻率33KHz)20分鐘，取出，放至室溫，加甲醇補(bǔ)足重量，濾過，取續(xù)濾液20ml，蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶散，加2％鹽酸2滴，用乙酸乙酯提取4次(15ml、10ml、10ml、10ml)，合并提取液，用5％的醋酸鈉溶液20ml洗滌，醋酸鈉洗滌液再用乙酸乙酯10ml洗滌。乙酸乙酯提取液與洗滌液合并，水洗兩次，每次20ml，合并水洗液，再用乙酸乙酯10ml洗滌，合并乙酸乙酯溶液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至5ml量瓶中定容，作為供試品溶液。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程分別計(jì)算四種內(nèi)酯的量。萜類內(nèi)酯以白果內(nèi)酯(C15H18O8)、銀杏內(nèi)酯A(C20H24O9)、銀杏內(nèi)酯B(C20H24O10)、銀杏內(nèi)酯C(C20H24O11)的總量計(jì)。
本品按干燥品計(jì)算，一日用脈平片中含萜類內(nèi)酯不得低于8mg。
該方法分別通過了以下1～10項(xiàng)方法學(xué)考察試驗(yàn)1檢測方法的選擇經(jīng)比較紫外檢測(UV)、蒸發(fā)光散射檢測(ELSD)、示差折光檢測(RID)等檢測方法，其中以ELSD分離度、穩(wěn)定性、精密度最為理想，方法可行。
2系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)根據(jù)以上儀器條件，得白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C對照品與樣品色譜圖。理論塔板數(shù)以白果內(nèi)酯計(jì)不低于2500。
3陰性干擾排除試驗(yàn)為考察其它藥材和輔料是否干擾萜類內(nèi)酯的測定，除銀杏葉提取物外，按處方比例稱取其它藥材和輔料同法制成陰性對照品溶液并測定。結(jié)果表明，陰性樣品對萜類內(nèi)酯的含量測定無干擾。
4線性關(guān)系的考察精密量取白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C不同濃度的溶液，注入液相色譜儀，依法測定。以對照品進(jìn)樣量(μg)的常用對數(shù)值為橫坐標(biāo)，峰面積的常用對數(shù)值為縱坐標(biāo)做圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果見下表。
白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C線性關(guān)系

結(jié)果表明，四種對照品均在表中所示范圍之內(nèi)線性關(guān)系良好。
5樣品提取時(shí)間的選擇平行精密取樣品內(nèi)容物共4份，每份約取相當(dāng)于萜類內(nèi)酯20mg，加甲醇適量分別超聲處理(功率250W，頻率33KHz)10、20、30、40分鐘，提取液照中國藥典公開的高效液相色譜法測定。結(jié)果見下表。
提取時(shí)間的選擇


結(jié)果表明，超聲處理20min即可提取完全，因此提取時(shí)間定為20分鐘。
6精密度試驗(yàn)分別精密吸取白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C對照品溶液10μl，注入液相色譜儀，每種對照品重復(fù)測定5次，峰面積測試結(jié)果見下表精密度試驗(yàn)

結(jié)果表明，儀器對白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C的測試精密度均良好。
7穩(wěn)定性試驗(yàn)7.1對照品穩(wěn)定性試驗(yàn)分別精密吸取同一白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C對照品溶液10μl，注入液相色譜儀，分別在0、4、8、16、24小時(shí)進(jìn)樣測定，峰面積測定結(jié)果見下表。
對照品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C對照品溶液均在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。
7.2供試品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取同一供試品(0301201批)溶液10μl，注入液相色譜儀，分別在0、4、8、16、24小時(shí)進(jìn)樣測定萜類內(nèi)酯，測定結(jié)果見下表。
供試品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，供試品溶液在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。
8重復(fù)性試驗(yàn)取本品(0301205批)內(nèi)容物5份，精密稱定，按最佳方法測試，結(jié)果見下表。
重復(fù)性試驗(yàn)

結(jié)果表明，重復(fù)性良好。
9加樣回收試驗(yàn)取本品(03012011批，萜類內(nèi)酯含量10.5mg/一日劑量，白果內(nèi)酯含量4.1mg/一日劑量、銀杏內(nèi)酯A含量2.1mg/一日劑量、銀杏內(nèi)酯B含量1.2mg/一日劑量，銀杏內(nèi)酯C含量3.1mg/一日劑量)內(nèi)容物，平行精密取樣共20份，5份分別精密加入銀杏內(nèi)酯對照品，5份分別精密加入銀杏內(nèi)酯A對照品，5份分別精密加入銀杏內(nèi)酯B對照品，5份分別精密加入銀杏內(nèi)酯C對照品，依法測定。測定結(jié)果見下表。
萜類內(nèi)酯加樣回收率試驗(yàn)

結(jié)果表明，萜類內(nèi)酯回收率良好。
10樣品含量測定按正文供試品溶液的制備和測定法項(xiàng)下操作，測定三批樣品，結(jié)果見下表。
十批樣品含量測定結(jié)果

結(jié)論根據(jù)10批樣品含量測定結(jié)果，暫定本品按干燥品計(jì)算，一日劑量含萜類內(nèi)酯不得低于8mg。
(14)膠囊中維生素C含量的滴定法測定本試驗(yàn)用滴定法建立了膠囊中維生素C的含量測定方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加新煮沸過的冷開水適量與稀醋酸適量，提取，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，加入淀粉指示劑適量，用碘滴定液滴定至終點(diǎn)(溶液顯藍(lán)色并30秒鐘內(nèi)不褪)。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于維生素C(C6H8O6)8.806mg。經(jīng)測定十批樣品，得維生素C含量以日用劑量計(jì)為135mg。
(15)顆粒中蘆丁的含量測定方法試驗(yàn)以蘆丁為對照品，用Alltech P426高效液相色譜儀，確立了脈平膠囊中蘆丁的含量測定的最佳方法色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-冰醋酸(37∶58∶5)為流動相；檢測波長為359nm。理論板數(shù)按蘆丁峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品適量，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品10粒，取內(nèi)容物，混勻，從中取約0.4g，精密稱定，置25ml量瓶中，加甲醇適量，超聲處理(功率250W，頻率33KHz)30分鐘，取出，放至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，精密量取續(xù)濾液2ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品按干燥品計(jì)算，每粒含蘆丁(C27H30O16)不得低于5.0mg。
該方法分別通過了以下1～10項(xiàng)方法學(xué)考察試驗(yàn)1檢測波長的選擇蘆丁對照品溶液，在200～400nm波長范圍內(nèi)掃描。結(jié)果表明，蘆丁在359nm處有最大吸收，因此選擇359nm作為測定脈平制劑中蘆丁含量的檢測波長。
2系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)根據(jù)以上儀器條件，得到蘆丁對照品、樣品色譜圖，其理論塔板數(shù)以蘆丁計(jì)不低于2000。
3陰性干擾排除試驗(yàn)為考察其它藥材和輔料是否干擾蘆丁的測定，除蘆丁外，按處方比例稱取其它藥材和輔料同法制成陰性對照品溶液并測定。結(jié)果表明，陰性樣品對蘆丁的含量測定無干擾。
4線性關(guān)系的考察精密量取蘆丁對照品不同濃度的溶液，注入液相色譜儀，提取液照中國藥典公開的高效液相色譜法測定。以蘆丁的進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)做圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。見下表。
蘆丁線性關(guān)系

回歸方程Y＝1065320.02X+309.48相關(guān)系數(shù)γ＝0.9999結(jié)果表明，蘆丁在0.06528μg～0.58752μg范圍之內(nèi)線性關(guān)系良好。
5樣品提取時(shí)間的選擇平行精密取樣品內(nèi)容物共4份，每份約0.4g，加甲醇適量分別超聲處理(功率250W，頻率33KHz)10、20、30、40分鐘，提取液照中國藥典公開的高效液相色譜法測定。結(jié)果見下表。
提取時(shí)間的選擇

結(jié)果表明，超聲處理30min即可提取完全，因此提取時(shí)間定為30分鐘。
6精密度試驗(yàn)精密吸取蘆丁對照品溶液10μl，注入液相色譜儀，重復(fù)測定5次，結(jié)果見下表精密度試驗(yàn)

結(jié)果表明，儀器精密度良好。
7穩(wěn)定性試驗(yàn)7.1對照品穩(wěn)定性試驗(yàn)精精密吸取同一蘆丁對照品溶液10μl，注入液相色譜儀，分別在0、2、6、10、24小時(shí)進(jìn)樣測定，測定結(jié)果見下表。
對照品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，對照品溶液在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。
7.2供試品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取同一供試品(030901批)溶液10μl，注入液相色譜儀，分別在0、2、6、10、24小時(shí)進(jìn)樣測定，測定結(jié)果見下表。
供試品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，供試品溶液在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。
8重復(fù)性試驗(yàn)取本品(030901批)內(nèi)容物，混勻，從中取約0.4g(共5份)，精密稱定，按正文供試品溶液制備和測定項(xiàng)下進(jìn)行操作。結(jié)果見下表。
重復(fù)性試驗(yàn)

結(jié)果表明，重復(fù)性良好。
9加樣回收率試驗(yàn)取本品(030901批，蘆丁含量1.6062％)內(nèi)容物，平行精密取樣共6份，分別精密加入蘆丁對照品，依法測定。測定結(jié)果見下表。
蘆丁加樣回收率試驗(yàn)

蘆丁平均回收率＝97.43％，RSD＝0.80％；結(jié)果表明，蘆丁回收率良好。
10樣品含量測定按確立的最佳方法操作，測定十批樣品，結(jié)果見下表。
十批樣品含量測定結(jié)果

結(jié)論根據(jù)10批樣品含量測定結(jié)果暫定，本品按干燥品計(jì)算，每粒含蘆丁(C27H30O16)不得低于5.0mg。
(16)顆粒劑中阿魏酸的含量測定試驗(yàn)以阿魏酸為對照品，用Alltech P426高效液相色譜儀，確立了脈平膠囊中阿魏酸的含量測定的最佳方法色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-磷酸(17∶83∶0.07)為流動相；檢測波長為316nm。柱溫℃。理論板數(shù)按阿魏酸峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。
對照品溶液的制備精密稱取阿魏酸對照品適量，加70％甲醇制成每1ml含10μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品約1g，精密稱定，置25ml量瓶中，加70％甲醇適量，超聲處理(功率250W，頻率33KHz)30分鐘，取出，放至室溫，加70％甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品按干燥品計(jì)算，一日用劑量含阿魏酸(C10H10O4)不得低于1.6mg。
該方法分別通過了以下1～10項(xiàng)方法學(xué)考察試驗(yàn)1檢測波長的選擇阿魏酸對照品溶液，在200～400nm波長范圍內(nèi)掃描。結(jié)果表明，阿魏酸在316nm處有最大吸收，因此選擇316nm作為測定脈平制劑中蘆丁含量的檢測波長。
2系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)根據(jù)以上儀器條件，得到阿魏酸對照品、樣品色譜圖，其理論塔板數(shù)以阿魏酸計(jì)不低于5000。
3陰性干擾排除試驗(yàn)為考察其它藥材和輔料是否干擾阿魏酸的測定，除阿魏酸外，按處方比例稱取其它藥材和輔料同法制成陰性對照品溶液并測定。結(jié)果表明，陰性樣品對阿魏酸的含量測定無干擾。
4線性關(guān)系的考察精密量取阿魏酸對照品不同濃度的溶液，注入液相色譜儀，提取液照中國藥典公開的高效液相色譜法測定。以阿魏酸的進(jìn)樣量(ng)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)做圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。見下表。
阿魏酸線性關(guān)系

回歸方程Y＝1196.1X-1770.01相關(guān)系數(shù)γ＝0.9999結(jié)果表明，阿魏酸在16.67ng～150.03ng范圍之內(nèi)線性關(guān)系良好。
5樣品提取時(shí)間的選擇平行精密取樣品內(nèi)容物共4份，每份約0.5g，加甲醇適量分別超聲處理(功率250W，頻率33KHz)10、20、30、40分鐘，提取液照中國藥典公開的高效液相色譜法測定。結(jié)果見下表。
提取時(shí)間的選擇

結(jié)果表明，超聲處理30min即可提取完全，因此提取時(shí)間定為30分鐘。
6精密度試驗(yàn)精密吸取阿魏酸對照品溶液10μl，注入液相色譜儀，重復(fù)測定5次，結(jié)果見下表精密度試驗(yàn)

結(jié)果表明，儀器精密度良好。
7穩(wěn)定性試驗(yàn)7.1對照品穩(wěn)定性試驗(yàn)精精密吸取同一阿魏酸對照品溶液10μl，注入液相色譜儀，分別在0、4、8、16、24小時(shí)進(jìn)樣測定，測定結(jié)果見下表。
對照品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，對照品溶液在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。
7.2供試品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取同一供試品(040501批)溶液10μl，注入液相色譜儀，分別在0、4、8、16、24小時(shí)進(jìn)樣測定，測定結(jié)果見下表。
供試品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，供試品溶液在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。
8重復(fù)性試驗(yàn)取本品(040505批)內(nèi)容物，混勻，從中取約0.5g(共5份)，精密稱定，按正文供試品溶液制備和測定項(xiàng)下進(jìn)行操作。結(jié)果見下表。
重復(fù)性試驗(yàn)

結(jié)果表明，重復(fù)性良好。
9加樣回收率試驗(yàn)取本品(040505批，阿魏酸含量2.65mg/一日劑量)內(nèi)容物，平行精密取樣共5份，分別精密加入阿魏酸對照品，依法測定。測定結(jié)果見下表。
阿魏酸加樣回收率試驗(yàn)


結(jié)果表明，阿魏酸回收率良好。
10樣品含量測定按最佳方法操作，測定三批樣品，結(jié)果見下表。
三批樣品含量測定結(jié)果

結(jié)論根據(jù)10批樣品含量測定結(jié)果暫定，本品按干燥品計(jì)算，一日用劑量含阿魏酸(C10H10O4)不得低于1.6mg。
(17)顆粒劑中總黃酮的含量測定試驗(yàn)以蘆丁為對照品，采用分光光度法，考察了顆粒中總黃酮的含量測定方法。
經(jīng)試驗(yàn)，確立了最佳方法對照品溶液的制備精密稱取蘆丁對照品，用加50％甲醇配制成每1ml含0.2mg的溶液。
標(biāo)準(zhǔn)曲的制備精密量取對照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，置10ml的量瓶中，加50％甲醇至5ml，分別加入5％的亞硝酸鈉溶液0.3ml，混勻，放置6分鐘，再加入10％的硝酸鋁溶液0.3ml，混勻，放置6分鐘，各加入氫氧化鈉試液4ml，再加50％甲醇至刻度，混勻。以相應(yīng)的溶液為空白。照中國藥典公開的分光光度法，在510nm處測定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
測定法取待測脈平顆粒劑適量，置錐形瓶中，加50％甲醇超聲20分鐘，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。量取供試品溶液，自標(biāo)準(zhǔn)曲線法“加50％甲醇至5ml，”做起，測試吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出相當(dāng)于蘆丁的重量，計(jì)算，即得。
本品一日用劑量含總黃酮以蘆丁(C27H30O16)計(jì)不得低于70mg。
該條件分別通過了以下方法考察試驗(yàn)線性關(guān)系考察試驗(yàn)，結(jié)果表明蘆丁在4～2000mg/ml范圍內(nèi)與吸光度相關(guān)性良好，γ＝0.999；精密度試驗(yàn)，重復(fù)測定5次，結(jié)果RSD＝1.04％；供試品溶液的制備，3份樣品分別加50％甲醇適量，分別超聲處理(功率250W，頻率33KHz)10、20、30分鐘，依法測定，結(jié)果表明，超聲處理20分鐘即可提取完全，因此提取時(shí)間定為20分鐘；穩(wěn)定性試驗(yàn)，結(jié)果表明，對照品溶液與樣品溶液均在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定；重復(fù)性試驗(yàn)，平行測試5份樣品，結(jié)果RSD＝1.65％；結(jié)果平均回收率＝97.56％，RSD＝1.59％；加樣回收試驗(yàn)，5份樣品平行加入蘆丁對照品，結(jié)果平均回收率＝97.9％，RSD＝1.84％；樣品含量測定，按以上條件與供試品溶液制備方法，測定三批樣品，結(jié)果總黃酮平均含量以日用劑量計(jì)為91mg。


附圖1是本發(fā)明的平衡吸濕曲線圖。
具體的實(shí)施方式本發(fā)明的實(shí)施例1銀杏葉提取物12.5g、維生素C12.5g、蘆丁5g、何首烏1000g、當(dāng)歸500g取何首烏、當(dāng)歸，加6倍水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加2倍量乙醇沉淀48小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至50℃時(shí)相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入銀杏提取物、維生素C、蘆丁及淀粉，混勻，裝入膠囊，分裝時(shí)應(yīng)控制相對濕度在60％以下，本產(chǎn)品口服、一次4粒，一日3次。
本發(fā)明的實(shí)施例2銀杏葉提取物12.5g、維生素C12.5g、蘆丁5g、何首烏1000g、當(dāng)歸500g取何首烏、當(dāng)歸，加6倍水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加2倍量乙醇沉淀48小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至50℃時(shí)相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入銀杏提取物、維生素C、蘆丁，混勻，真空干燥，然后加入與藥物比例為1∶1.5的MCC作為賦形劑，以95％乙醇為潤濕劑，2％HPMC粘合，用離心造粒法制粒，主機(jī)轉(zhuǎn)速為150r/min，粘合劑加入速度為15.0mL/min。然后干燥、滅菌，即得微丸劑。
本發(fā)明的實(shí)施例3銀杏葉提取物12.5g、維生素C12.5g、蘆丁5g、何首烏1000g、當(dāng)歸500g取何首烏、當(dāng)歸，加6倍水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加2倍量乙醇沉淀48小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至50℃時(shí)相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入銀杏提取物、維生素C、蘆丁，混勻，真空干燥，按藥物量∶基質(zhì)量＝1∶1.2加入大豆油，混勻；膠皮的配方為明膠∶甘油∶水∶二氧化鈦＝100g∶44g∶100g∶2g，配料化膠條件為稱量配料，投入化膠罐中，冷浸30分鐘后逐漸升溫至65±5℃，攪拌5小時(shí)并同時(shí)抽真空除氣泡，待膠料均勻后放料，濾過后裝入膠囊機(jī)之膠料桶中；調(diào)試壓丸機(jī)，明膠盒溫控65℃，噴體溫控40℃，滾模轉(zhuǎn)速2.0，膠皮厚度0.6mm，室內(nèi)溫度18～25℃，相對濕度＜40％，壓丸；干燥采用滾動定型干燥與托盤干燥兩步結(jié)合，滾動定型干燥2小時(shí)，干燥溫度22℃，干燥相對濕度應(yīng)低于40％，干燥時(shí)間在24～48小時(shí)，即得軟膠囊劑。
本發(fā)明的實(shí)施例4銀杏葉提取物12.5g、維生素C12.5g、蘆丁5g、何首烏1000g、當(dāng)歸500g
取何首烏、當(dāng)歸，加6倍水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加2倍量乙醇沉淀48小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至50℃時(shí)相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入銀杏提取物、維生素C、蘆丁、蒸餾水，即得口服液。
本發(fā)明的實(shí)施例5膠囊中銀杏葉提取物的薄層鑒別取待測膠囊內(nèi)容物適量，加丙酮15ml，超聲提取10分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取銀杏葉提取物0.2g，同法制成對照提取物溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液3μl，對照提取物溶液3μl，分別點(diǎn)于同一以含0.4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以甲酸乙酯-丙酮-甲醇-水(6∶4∶1.5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鋁溶液，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照提取物色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
本發(fā)明的實(shí)施例6顆粒中銀杏葉提取物的薄層鑒別取待測顆粒適量，加正丁醇20ml，在水浴中溫浸15分鐘并時(shí)時(shí)振搖，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取銀杏葉提取物0.2g，同法制成對照提取物溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品與對照提取物溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一以含0.4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以乙酸乙酯-丙酮乙醇-水(15∶3∶2∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3％三氯化鋁溶液，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照提取物色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
本發(fā)明的實(shí)施例7片劑中銀杏葉提取物與白果內(nèi)酯的薄層鑒別取待測脈平片劑內(nèi)容物適量，加甲醇回流提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉〈姿崾谷芙猓萌燃淄樘崛?，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙猓鳛楣┰嚻啡芤?。取銀杏葉提取物制成對照提取物溶液。另取白果內(nèi)酯對照品制成對照品溶液。照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取以上溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一以含0.4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯-丁酮-甲醇(13∶5∶6∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，用醋酐蒸氣熏15分鐘，在140～160℃加熱30分鐘，放冷，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照提取物與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
本發(fā)明的實(shí)施例8膠囊中白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C的薄層鑒別取待測脈平膠囊內(nèi)容物適量，加95％乙醇超聲提取，提取液作為供試品溶液。取銀杏葉提取物制成對照提取物溶液。另取白果內(nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品分別制成對照品溶液。照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取以上溶液各3μl，分別點(diǎn)于同一以含0.4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-乙醇(15∶10∶6∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，用醋酐蒸氣熏15分鐘，在140～160℃加熱30分鐘，放冷，置紫外燈(254或365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照提取物與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
本發(fā)明的實(shí)施例9膠囊中白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C的高效液相色譜鑒別取待測脈平膠囊內(nèi)容物適量，加乙醇超聲提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉×姿崾谷芙?，用三氯甲烷提取，提取液蒸干，殘?jiān)右掖既芙猓鳛楣┰嚻啡芤?。另取白果?nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品分別制成對照品溶液。采用高效液相色譜法，色譜柱用二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；正丙醇-四氫呋喃-水(0.5∶17.5∶82)為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
本發(fā)明的實(shí)施例10顆粒中白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C的高效液相色譜鑒別取待測脈平膠囊內(nèi)容物適量，加甲醇溫浸振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉←}酸使溶解，用二氯甲烷提取，提取液蒸干，殘?jiān)右掖既芙?，作為供試品溶液。另取白果?nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品分別制成對照品溶液。采用高效液相色譜法，色譜柱用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；正丙醇-四氫呋喃-水(3∶20∶77)為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
本發(fā)明的實(shí)施例11片劑中維生素C的化學(xué)鑒別取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加新煮沸過的冷開水適量稀磷酸適量，提取，濾過，取續(xù)濾液加入活性炭，加熱至沸，濾過，濾液作為供試品溶液。一份供試品溶液中滴加數(shù)滴二氯靛粉鈉試液，試液顏色消失；另一份供試液中加入硝酸銀試液數(shù)滴，生成黑色沉淀。
本發(fā)明的實(shí)施例12片劑中蘆丁的薄層色譜鑒別方法取待測脈平片劑內(nèi)容物適量，加乙醇超聲提取，提取液作為供試品溶液。再取蘆丁對照品，制備對照品溶液。照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和蘆丁對照品溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以甲酸乙酯-甲酸-水(8∶1∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3％三氯化鋁試液，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
本發(fā)明的實(shí)施例13片劑中蘆丁的薄層色譜鑒別方法取待測脈平片劑內(nèi)容物適量，加甲醇溫浸提取，提取液作為供試品溶液。再取蘆丁對照品，制備對照品溶液。照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和蘆丁對照品溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲酸-水(20∶3∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鋁試液，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
本發(fā)明的實(shí)施例14膠囊劑中蘆丁的高效液相色譜鑒別取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇超聲處理，提取液作為供試品溶液。以蘆丁對照品的甲醇溶液為對照。采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸(15∶84.5∶0.05)為流動相；檢測波長為272nm；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
本發(fā)明的實(shí)施例15顆粒劑中蘆丁的高效液相色譜鑒別取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加乙醇超聲處理，提取液作為供試品溶液。以蘆丁對照品的乙醇溶液為對照。采用高效液相色譜法，色譜柱用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-醋酸(41∶64∶5)為流動相；檢測波長為361nm；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
本發(fā)明的實(shí)施例16片劑中何首烏藥材的薄層色譜鑒別取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加乙醇溫浸提取，提取液作為供試品溶液。再取何首烏對照藥材，制備對照藥材溶液。照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和何首烏藥材溶液各30μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上使成條狀，以苯-乙醇(5∶1)展開約5cm，取出，晾干，再以苯∶乙醇(10∶1)展開約10cm，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的條狀斑點(diǎn)。再噴以磷鉬酸溶液，稍加熱，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的條狀斑點(diǎn)。
本發(fā)明的實(shí)施例17膠囊劑中何首烏藥材的薄層色譜鑒別取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加乙醇超聲提取，提取液作為供試品溶液。再取何首烏對照藥材，制備對照藥材溶液。照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和何首烏藥材溶液各30μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上使成條狀，以苯-乙醇(2∶1)展開約5cm，取出，晾干，再以苯∶乙醇(4∶1)展開約10cm，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的條狀斑點(diǎn)。再噴以磷鉬酸溶液，稍加熱，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的條狀斑點(diǎn)。
本發(fā)明的實(shí)施例18膠囊中大黃素、大黃素甲醚的薄層鑒別取待測制劑內(nèi)容物適量，加8％鹽酸溶液10ml，超聲處理2分鐘，再加三氯甲烷10ml，加熱回流1小時(shí)，立即冷卻，離心，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取2次，每次10ml，合并三氯甲烷液，室溫?fù)]干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。再取大黃素、大黃素甲醚對照品，加乙醇分別制成每1ml各含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對照品溶液各1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶6∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，氨蒸汽中顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
本發(fā)明的實(shí)施例19片劑中大黃素、大黃素甲醚的薄層鑒別取待測片劑內(nèi)容物適量，加5％磷酸溶液10ml，超聲處理2分鐘，再加二氯甲烷10ml，加熱回流1小時(shí)，立即冷卻，離心，分取二氯甲烷層，酸液再用二氯甲烷提取2次，每次10ml，合并二氯甲烷液，室溫?fù)]干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。再取大黃素、大黃素甲醚對照品，加甲醇分別制成每1ml各含0.1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對照品溶液各30μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以乙醚-甲酸乙酯-乙酸(30∶5∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，氨蒸汽中顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
本發(fā)明的實(shí)施例20顆粒劑中大黃素、大黃素甲醚的薄層鑒別取待測顆粒劑內(nèi)容物適量，加6％鹽酸溶液10ml，超聲處理2分鐘，再加三氯甲烷10ml，加熱回流1小時(shí)，立即冷卻，離心，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取2次，每次10ml，合并二氯甲烷液，室溫?fù)]干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。再取大黃素、大黃素甲醚對照品，加乙醇分別制成每1ml各含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對照品溶液各1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以乙醚-乙酸乙酯-乙酸(16∶10∶3)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，氨蒸汽中顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
實(shí)施例21顆粒劑中大黃素、大黃素甲醚的高效液相色譜鑒別取待測脈平顆粒適量，置錐形瓶中，加甲醇超聲提取，提取液作為供試品溶液。以大黃素對照品、大黃素甲醚對照品的甲醇溶液為對照。采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-醋酸溶液(40∶55∶5)為流動相；檢測波長為220nm；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
本發(fā)明的實(shí)施例22片劑中大黃素、大黃素甲醚的高效液相色譜鑒別取待測脈平片劑適量，置錐形瓶中，加乙醇超聲提取，提取液作為供試品溶液。以大黃素對照品、大黃素甲醚對照品的乙醇溶液為對照。采用高效液相色譜法，色譜柱用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-鹽酸溶液(81∶17.9∶0.1)為流動相；檢測波長為265nm；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
本發(fā)明的實(shí)施例23膠囊劑中當(dāng)歸藥材、阿魏酸的薄層色譜鑒別取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加1％醋酸鈉溶液超聲處理，提取液用磷酸調(diào)節(jié)PH值2～3，再用乙酸乙酯提取酸液，提取液揮干，殘?jiān)右掖既芙?，作為供試品溶液。取?dāng)歸藥材，同法制成對照藥材溶液。再取阿魏酸對照品，制備對照品溶液。照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取以上溶液各1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-甲酸乙酯-甲酸(10∶10∶1)展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
本發(fā)明的實(shí)施例24片劑中當(dāng)歸藥材、阿魏酸的薄層色譜鑒別取待測脈平片劑內(nèi)容物適量，加1％碳酸氫鉀溶液超聲處理，提取液用鹽酸調(diào)節(jié)PH值2～3，再用氯仿提取酸液，提取液揮干，殘?jiān)蛹状既芙猓鳛楣┰嚻啡芤?。取?dāng)歸藥材，同法制成對照藥材溶液。再取阿魏酸對照品，制備對照品溶液。照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取以上溶液各30μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-乙酸(4∶5∶0.1)展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
本發(fā)明的實(shí)施例25片劑中阿魏酸的高效液相色譜鑒別取待測脈平片劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇超聲處理，提取液作為供試品溶液。以阿魏酸對照品制備對照品溶液。采用高效液相色譜法，色譜柱用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-醋酸(45∶50∶5)為流動相；檢測波長為280nm；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
本發(fā)明的實(shí)施例26顆粒劑中阿魏酸的高效液相色譜鑒別取待測脈平顆粒劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加乙醇溫浸處理，提取液作為供試品溶液。以阿魏酸對照品制備對照品溶液。采用高效液相色譜法，色譜柱用二八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-磷酸溶液(10∶90∶0.2)為流動相；檢測波長為320nm；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
本發(fā)明的實(shí)施例27顆粒劑中總黃酮醇苷含量的高效液相色譜法測定取待測脈平顆粒內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加乙醇適量，超聲處理，取出，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液加入25％的鹽酸溶液，回流30分鐘，放冷，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。分別以槲皮素對照品、山柰素對照品、異鼠李素對照品的甲醇溶液為對照。采用高效液相色譜法，色譜柱用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-醋酸(50∶50∶2)為流動相；檢測波長為280nm；以外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算，總黃酮苷含量＝(槲皮素含量+山柰素含量+異鼠李素含量)*2.51，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為日用劑量含總黃酮苷不得低于32mg。
本發(fā)明的實(shí)施例28片劑中總黃酮醇苷含量的高效液相色譜法測定取待測脈平片劑，除去包衣，研細(xì)混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加甲醇適量，超聲處理，取出，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液加入15％的硫酸溶液，回流30分鐘，放冷，用甲醇定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。分別以槲皮素對照品、山柰素對照品、異鼠李素對照品的甲醇溶液為對照。采用高效液相色譜法，色譜柱用二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-磷酸(12∶88∶0.5)為流動相；檢測波長為365nm；以外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算，總黃酮苷含量＝(槲皮素含量+山柰素含量+異鼠李素含量)*2.51，測得脈平制劑含量日用劑量含總黃酮醇苷高于32mg。
本發(fā)明的實(shí)施例29膠囊中萜類內(nèi)酯含量的高效液相色譜法測定取待測脈平膠囊內(nèi)容物適量，加甲醇回流提取30分鐘，提取液蒸干，殘?jiān)酉〈姿崾谷芙?，用乙酸乙酯提?次，提取液用3％的碳酸氫鈉溶液洗滌，洗滌液再用乙酸乙酯洗滌，乙酸乙酯提取液與洗滌液合并，水洗兩次，合并水洗液，再用乙酸乙酯洗滌，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，作為供試品溶液。另取白果?nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品分別制成對照品溶液。采用高效液相色譜法，色譜柱用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；正丙醇-四氫呋喃-水(0.5∶22∶78)為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程分別計(jì)算四種內(nèi)酯的量?？傒祁悆?nèi)酯的含量以白果內(nèi)酯(C15H18O8)、銀杏內(nèi)酯A(C20H24O9)、銀杏內(nèi)酯B(C20H24O10)、銀杏內(nèi)酯C(C20H24O11)的總量計(jì)，測得脈平制劑含量日用劑量含萜類內(nèi)酯高于8mg。
本發(fā)明的實(shí)施例30顆粒中萜類內(nèi)酯含量的高效液相色譜法測定取待測脈平膠囊內(nèi)容物適量，加乙醇超聲提取，提取液蒸干，殘?jiān)?.2％磷酸使溶解，用氯仿提取4次，提取液用5％的醋酸鈉溶液洗滌，洗滌液再用氯仿洗滌，氯仿提取液與洗滌液合并，水洗兩次，合并水洗液，再用氯仿洗滌，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)右掖既芙?，作為供試品溶液。另取白果?nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品分別制成對照品溶液。采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；正丙醇-四氫呋喃-水(3∶25∶72)為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程分別計(jì)算四種內(nèi)酯的量。總萜類內(nèi)酯的含量以白果內(nèi)酯(C15H18O8)、銀杏內(nèi)酯A(C20H24O9)、銀杏內(nèi)酯B(C20H24O10)、銀杏內(nèi)酯C(C20H24O11)的總量計(jì)，測得脈平制劑含量日用劑量含萜類內(nèi)酯高于8mg。
本發(fā)明的實(shí)施例31片劑中維生素C含量的滴定法測定取待測脈平片劑，除去包衣，研細(xì)混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加新煮沸過的冷開水適量與稀鹽酸適量，提取，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，加入淀粉指示劑適量，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定至終點(diǎn)(溶液顯藍(lán)色并30秒鐘內(nèi)不褪)。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于維生素C(C6H8O6)8.806mg。測得脈平片劑含量一日用劑量含維生素C(C6H8O6)高于135mg。
本發(fā)明的實(shí)施例32片劑中蘆丁含量的高效液相色譜法測定取待測脈平片劑，除去包衣，研細(xì)混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加乙醇超聲提取，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液適當(dāng)稀適，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。以蘆丁對照品的乙醇溶液為對照。采用高效液相色譜法，色譜柱用二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸(10∶89∶0.1)為流動相；檢測波長為365nm；以外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算，測得平脈片劑含量一日用劑量含蘆丁(C27H30O16)高于54mg。
本發(fā)明的實(shí)施例33顆粒中蘆丁含量的高效液相色譜法測定取待測脈平顆粒，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加甲醇回流提取，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液適當(dāng)稀適，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。以蘆丁對照品的甲醇溶液為對照。采用高效液相色譜法，色譜柱用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-冰醋酸(35∶64∶1)為流動相；檢測波長為288nm；以外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算，測得脈平脈顆粒含量一日用劑量含蘆丁(C27H30O16)高于54mg。
本發(fā)明的實(shí)施例34片劑中阿魏酸含量的高效液相色譜法測定取待測脈平片劑，除去包衣，研細(xì)混勻，置錐形瓶中，加70％甲醇超聲提取，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。以阿魏酸對照品的70％溶液為對照。采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸(8∶92∶0.02)為流動相；檢測波長為288nm；柱溫30℃；以外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算，測得脈平制劑含量一日用劑量含阿魏酸(C10H10O4)高于1.6mg。
本發(fā)明的實(shí)施例35膠囊中阿魏酸含量的高效液相色譜法測定取待測脈平膠囊內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加50％乙醇加熱回流30分鐘，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。以阿魏酸對照品的50％乙醇溶液為對照。采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-冰醋酸(37∶61∶2)為流動相；檢測波長為320nm；柱溫45℃；以外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算，測得脈平膠囊含量限度應(yīng)為一日用劑量含阿魏酸(C10H10O4)高于1.6mg。
本發(fā)明的實(shí)施例36膠囊中總黃酮含量的分光光度法測定精密稱取蘆丁對照品，用加70％乙醇配制成每1ml含0.08mg的溶液；精密量取對照品溶液3ml，置10ml的量瓶中，分別加入0.1mol/L三氯化鋁溶液2ml，1mol/L的醋酸鉀溶液3ml，加70％乙醇定容，混勻，放置30分鐘；以相應(yīng)的溶液為空白；照中國藥典公開的分光光度法，在420nm處測定吸收度；取待測脈平膠囊內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加70％乙醇回流30分鐘，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。量取供試品溶液3ml，按對照品溶液顯色方法顯色，測試吸光度，用外標(biāo)一點(diǎn)法計(jì)算，即得。測得脈平膠囊含量限度應(yīng)為一日用劑量含總黃酮以蘆丁(C27H30O16)計(jì)高于70mg。
權(quán)利要求
1.一種治療冠心病的脈平藥物制劑，其特征在于按照重量組分計(jì)算，它主要由銀杏葉提取物12.5g、維生素C12.5g、蘆丁5g、何首烏1000g、當(dāng)歸500g或用相應(yīng)重量份它們的提取物制作而成的注射液、粉針、凍干粉針、凝膠劑、分散片、膠囊劑、軟膠囊劑、微囊劑、顆粒劑、丸劑、微丸、散劑、滴丸劑、緩釋制劑、控釋制劑、凝膠劑、口服液體制劑、煎膏劑、浸膏劑或膜劑。
2.如權(quán)利要求1所述治療冠心病的脈平藥物制劑的制備方法，其特征在于取何首烏、當(dāng)歸，加6倍水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加2倍量乙醇沉淀48小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至50℃時(shí)相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入銀杏葉提取物、維生素C、蘆丁，然后分別制成膠囊劑、微丸劑或軟膠囊劑。
3.按照權(quán)利要求2所述治療冠心病的脈平藥物制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的膠囊劑這樣制備取何首烏、當(dāng)歸，加6倍水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加2倍量乙醇沉淀48小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至50℃時(shí)相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入銀杏葉提取物、維生素C、蘆丁及淀粉，混勻，裝入膠囊，分裝時(shí)應(yīng)控制相對濕度在60％以下，即得。
4.按照權(quán)利要求2所述治療冠心病的脈平藥物制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的微丸劑這樣制備取何首烏、當(dāng)歸，加6倍水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加2倍量乙醇沉淀48小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度50℃時(shí)為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入銀杏葉提取物、維生素C、蘆丁，混勻，真空干燥，然后加入與藥物比例為1∶1.5的MCC作為賦形劑，以95％乙醇為潤濕劑，2％HPMC粘合，用離心造粒法制粒，主機(jī)轉(zhuǎn)速為150r/min，粘合劑加入速度為15.0mL/min，然后干燥、滅菌，即得。
5.按照權(quán)利要求2所述治療冠心病的脈平藥物制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的軟膠囊劑這樣制備取何首烏、當(dāng)歸，加6倍水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加2倍量乙醇沉淀48小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度50℃時(shí)為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入銀杏葉提取物、維生素C、蘆丁，混勻，真空干燥，按藥物量∶基質(zhì)量＝1∶1.2加入大豆油，混勻；膠皮的配方為明膠∶甘油∶水∶二氧化鈦＝100g∶44g∶100g∶2g，配料化膠條件為稱量配料，投入化膠罐中，冷浸30分鐘后逐漸升溫至65±5℃，攪拌5小時(shí)并同時(shí)抽真空除氣泡，待膠料均勻后放料，濾過后裝入膠囊機(jī)之膠料桶中；調(diào)試壓丸機(jī)，明膠盒溫控65℃，噴體溫控40℃，滾模轉(zhuǎn)速2.0，膠皮厚度0.6mm，室內(nèi)溫度18～25℃，相對濕度＜40％，壓丸；干燥采用滾動定型干燥與托盤干燥兩步結(jié)合，滾動定型干燥2小時(shí)，干燥溫度22℃，干燥相對濕度應(yīng)低于40％，干燥時(shí)間在24～48小時(shí)，即得。
6.如權(quán)利要求1或2所述治療冠心病的脈平藥物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法包括以下全部或部分內(nèi)容(1)銀杏葉提取物、白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C、維生素C、蘆丁、何首烏藥材、大黃素、大黃素甲醚、當(dāng)歸藥材、阿魏酸中全部或部分成分的鑒別測試方法；(2)總黃酮醇苷、萜類內(nèi)酯、維生素C、蘆丁、阿魏酸、總黃酮中全部或部分成分的含量測試方法。
7.按照權(quán)利要求6所述治療冠心病的脈平藥物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述制劑的鑒別方法包括以下全部或部分內(nèi)容a.制劑中銀杏葉提取物的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加正丁醇或丙酮提取，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖蓟蚣状际谷芙?，作為供試品溶液；另取銀杏葉提取物適量，加乙醇或甲醇使溶解，作為對照提取物溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液，分別點(diǎn)于同一塊硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯或甲酸乙酯-丁酮或丙酮-甲醇或乙醇-水＝5～50∶3～30∶1～10∶1～10為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3～30％的三氯化鋁溶液，置紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照提取物色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；b.制劑中銀杏葉提取物、白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇提取，作為供試品溶液；或?qū)⒓状继崛∫赫舾?，殘?jiān)酉∷崾谷芙猓靡宜嵋阴セ蛉燃淄榛蚨燃淄樘崛?，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖既芙?，作為供試品溶液；取銀杏葉提取物，同法制成對照提取物溶液；或另取白果內(nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品中的一種或幾種制成對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液中的一種與對照溶液中的一種或幾種，分別點(diǎn)于同一塊硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以甲苯或苯-乙酸乙酯或甲酸乙酯-丙酮或丁酮-甲醇或乙醇＝10～50∶5～25∶5～25∶0.6～3為展開劑，展開，取出，晾干，用醋酐蒸氣熏后在140～160℃加熱，放冷，置紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照提取物或?qū)φ掌飞V相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；c.制劑中白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C中一種或幾種的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇或乙醇提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉∷崛芤菏谷芙?，用乙酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖既芙?，作為供試品溶液；另取白果?nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品中的一種或幾種，制成對照品溶液；采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；正丙醇-四氫呋喃-水＝0.2～5∶15～55∶84～95為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰；d.制劑中維生素C的化學(xué)鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加新煮沸過的冷開水適量與稀酸溶液適量，提取，濾過，取續(xù)濾液加入活性炭，加熱至沸，濾過，濾液作為供試品溶液；供試品溶液中滴加數(shù)滴二氯靛粉鈉試液，試液顏色消失；或供試液中加入硝酸銀試液數(shù)滴，生成黑色沉淀；e.制劑中蘆丁的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇或乙醇提取，提取液作為供試品溶液。另取蘆丁對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和蘆丁對照品溶液，分別點(diǎn)于同一塊硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以乙酸乙酯或甲酸乙酯-甲酸或乙酸-水＝8～40∶1～5∶1～5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；f.制劑中蘆丁的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇處理，提取液作為供試品溶液；另取蘆丁對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水-冰醋酸或磷酸或鹽酸＝8～65∶58～80∶0.05～5為流動相，檢測波長為為190～410nm中的一個或幾個；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰；g.制劑中何首烏藥材的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇或乙醇提取，提取液作為供試品溶液；取何首烏對照藥材，同法制備對照藥材溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和蘆丁對照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠6F254薄層板上，以苯-乙醇＝1～5∶1展開約5cm，取出，晾干，再以苯-乙醇＝2～10∶1展開約10cm，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，或噴以磷鋁酸溶液，稍加熱，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；h.制劑中大黃素、大黃素甲醚中一種或兩種的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加一定酸性溶液超聲提取，再加入三氯甲烷或二氯甲烷提取，合并三氯甲烷或二氯甲烷液，揮干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖际谷芙猓鳛楣┰嚻啡芤?；再取大黃素對照品或大黃素甲醚對照品的一種或兩種，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液與對照品溶液中一種或兩種，分別點(diǎn)于同一塊硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以30～60℃的石油醚或60～90℃的石油醚或乙醚-甲酸乙酯或乙酸乙酯-甲酸或乙酸＝15～150∶3～30∶1～10的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，氨蒸汽中顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；i.制劑中大黃素、大黃素甲醚的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇處理，提取液作為供試品溶液。以大黃素對照品、大黃素甲醚對照品制備對照品溶液。照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇或乙腈-水-磷酸或醋酸或鹽酸溶液＝55～95∶33～60∶0.01～5為流動相；檢測波長為為190～410nm中的一個或幾個；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰；j.制劑中當(dāng)歸藥材、阿魏酸的薄層鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加堿性溶液超聲處理，提取液用酸性溶液調(diào)節(jié)PH值2～3，再用乙醚或乙酸乙酯或三氯甲烷提取酸液，提取液揮干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖既芙?，作為供試品溶液；取?dāng)歸藥材，同法制成對照藥材溶液；或取阿魏酸對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液與對照藥材溶液或?qū)φ掌啡芤?，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以苯或甲苯-乙酸乙酯或甲酸乙酯-甲酸或乙酸＝4～20∶1～5∶0.1～1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材或?qū)φ掌飞V相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；k.制劑中阿魏酸的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇處理，提取液作為供試品溶液；以阿魏酸對照品配制對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈或甲醇-水-磷酸或醋酸或鹽酸溶液＝6～50∶60～95∶0.07～5為流動相，檢測波長為為190～410nm中的一個或幾個；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
8.按照權(quán)利要求7所述治療冠心病的脈平藥物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述制劑的鑒別方法包括以下全部或部分內(nèi)容a.制劑中銀杏葉提取物的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加正丁醇在水浴中溫浸提取，提取液蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；另取銀杏葉提取物，同法制備對照提取物溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以含0.4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲醇-水＝5∶3∶1∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3％三氯化鋁溶液，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照提取物色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；b.制劑中銀杏葉提取物、白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C中一種幾種的薄層色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇超聲提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉←}酸使溶解，用乙酸乙酯提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙猓鳛楣┰嚻啡芤?；取銀杏葉提取物，同法制成對照提取物溶液；另取白果內(nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品制成對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以含0.4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇＝10∶5∶5∶0.6為展開劑，展開，取出，晾干，用醋酐蒸氣熏15分鐘，在140～160℃加熱30分鐘，放冷，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照提取物與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；c.制劑中白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C中一種或幾種的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇超聲提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉←}酸使溶解，用乙酸乙酯提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，作為供試品溶液。另取白果?nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品中的一種或幾種，分別制成對照品溶液。照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；正丙醇-四氫呋喃-水＝1∶15∶84為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰；d.制劑中維生素C的鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加新煮沸過的冷開水適量與稀醋酸溶液適量，提取，濾過，取續(xù)濾液加入活性炭，加熱至沸，濾過，濾液作為供試品溶液；供試品溶液中滴加數(shù)滴二氯靛粉鈉試液，試液顏色消失；供試液中加入硝酸銀試液數(shù)滴，生成黑色沉淀；e.制劑中蘆丁的薄層鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇超聲提取，提取液作為供試品溶液。再取蘆丁對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和蘆丁對照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水＝8∶1∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3％三氯化鋁試液，置365nm紫外燈下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；f.制劑中蘆丁的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇超聲提取，提取液作為供試品溶液；以蘆丁對照品的甲醇溶液為對照；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-冰醋酸＝37∶58∶5為流動相；檢測波長為359nm；供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰；g.制劑中何首烏藥材的薄層鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇超聲提取，提取液作為供試品溶液。再取何首烏對照藥材，同法制備對照藥材溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和何首烏藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上使成條狀，以苯-乙醇＝2∶1展開約5cm，取出，晾干，再以苯∶乙醇＝4∶1展開約10cm，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的條狀斑點(diǎn)；再噴以磷鉬酸溶液，稍加熱，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的條狀斑點(diǎn)；h.制劑中大黃素、大黃素甲醚的薄層鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加8％鹽酸溶液超聲提取，再加三氯甲烷加熱回流，冷卻，離心，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取2次，合并三氯甲烷液，室溫?fù)]干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，作為供試品溶液；再取大黃素、大黃素甲醚對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶液各5μl，大黃素對照品溶液3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃的石油醚-甲酸乙酯-甲酸＝15∶3∶1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，氨蒸汽中顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；i.制劑中大黃素、大黃素甲醚的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇超聲提取，提取液作為供試品溶液；以大黃素對照品、大黃素甲醚對照品的甲醇溶液為對照；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)；色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸＝67∶33∶0.25為流動相；檢測波長為288nm.供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。j.制劑中當(dāng)歸藥材、阿魏酸的薄層鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加1％碳酸氫鈉溶液超聲提取，提取液用稀鹽酸調(diào)節(jié)PH值2～3，再用乙醚提取酸液，提取液揮干，殘?jiān)蛹状既芙?，作為供試品溶液；取?dāng)歸藥材，同法制成對照藥材溶液；取阿魏酸對照品，制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取以上溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯一乙酸乙酯-甲酸＝4∶1∶0.1展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；k.制劑中阿魏酸的高效液相色譜鑒別方法取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇超聲提取，提取液作為供試品溶液；以阿魏酸對照品制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)；色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-磷酸溶液＝17∶83∶0.07為流動相；檢測波長為316nm.供試品色譜中，具有與對照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。
9.按照權(quán)利要求6所述治療冠心病的脈平藥物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述制劑的含量測定方法包括以下全部或部分內(nèi)容a.制劑中總黃酮醇苷含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇適量，超聲處理，取出，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液加入酸性溶液，回流，放冷，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；分別以槲皮素對照品、山柰素對照品、異鼠李素對照品制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水-磷酸或鹽酸或醋酸溶液＝50～90∶50～90∶0.02～5為流動相，檢測波長為190～410nm中的一個或幾個；以外標(biāo)一點(diǎn)法或標(biāo)準(zhǔn)曲線法，按照總黃酮苷含量＝[槲皮素含量+山柰素含量+異鼠李素含量]*2.51計(jì)算，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含總黃酮苷不得低于16mg；b.制劑中萜類內(nèi)酯含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇或乙醇提取，提取液蒸干，殘?jiān)酉∷崛芤菏谷芙?，用乙酸乙酯或氯仿提取，反?fù)洗滌，合并乙酸乙酯或氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖既芙?，作為供試品溶液；取白果?nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品分別制成對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，正丙醇-四氫呋喃-水＝0.1～5∶10～55∶50～95為流動相，用蒸發(fā)光散射檢測器或紫外檢測器或示差折光檢測器檢測；以外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算，總萜類內(nèi)酯的含量以白果內(nèi)酯-C15H18O8、銀杏內(nèi)酯A-C20H24O9、銀杏內(nèi)酯B-C20H24O10、銀杏內(nèi)酯C-C20H24O11的總量計(jì)，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含萜類內(nèi)酯不得低于4.0mg；c.制劑中維生素C含量的滴定法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加新煮沸過的冷開水適量與稀酸溶液適量，提取，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，加入淀粉指示劑適量，用碘滴定液滴定至溶液顯藍(lán)色并30秒鐘內(nèi)不褪；每1ml的0.1mol/L碘滴定液相當(dāng)于維生素C-C6H8O68.806mg；待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含維生素C-C6H8O6不得低于68mg；d.制劑中蘆丁含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇提取，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液適當(dāng)稀適，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；以蘆丁對照品制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水-冰醋酸或磷酸或甲酸＝7～57∶38～90∶0～5為流動相，檢測波長為190～410nm中的一個或幾個；以外標(biāo)一點(diǎn)法或標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算，待測平脈制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含蘆丁C27H30O16不得低于27mg；e.制劑中阿魏酸含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇提取，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液；以阿魏酸對照品制備對照品溶液；照中國藥典附錄公開的高效液相色譜法試驗(yàn)，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈或甲醇-水-磷酸或鹽酸或冰醋酸＝7～50∶50～90∶0.02～5為流動相；檢測波長為190～410nm中的一個或幾個；柱溫20～50℃；以外標(biāo)一點(diǎn)法或標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含阿魏酸C10H10O4不得低于0.8mg；f.制劑中總黃酮含量的分光光度法測定用蘆丁對照品配制對照品溶液，并稀釋成5或6個有梯度差別的濃度，取這些不同濃度的溶液各等份，以亞硝酸溶液-硝酸鋁溶液-氫氧化鈉溶液顯色，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液；或以三氯化鋁溶液-醋酸鋁溶液-乙醇溶液顯色，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液；以相應(yīng)的溶液為空白；照中國藥典公開的分光光度法試驗(yàn)，在300～600nm某一波長處測試標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)、蘆丁濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加甲醇或乙醇或甲醇溶液或乙醇溶液提取，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液，量取供試品溶液，照蘆丁對照品溶液顯色方法顯色，測試吸光度；用標(biāo)準(zhǔn)曲線法或外標(biāo)一點(diǎn)或二點(diǎn)法計(jì)算，即得；待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑含總黃酮以蘆丁C27H30O16計(jì)不得低于35mg。
10.按照權(quán)利要求9所述治療冠心病的脈平藥物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述制劑的含量測定方法包括以下全部或部分內(nèi)容a.制劑中總黃酮醇苷含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加甲醇適量，超聲處理，取出，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液加入25％的鹽酸溶液，回流30分鐘，放冷，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；分別以槲皮素對照品、山柰素對照品、異鼠李素對照品的甲醇溶液為對照；采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸＝50∶50∶0.2為流動相；檢測波長為360nm以外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算，總黃酮苷含量＝[槲皮素含量+山柰素含量+異鼠李素含量]*2.51，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含總黃酮苷不得低于32mg。b.制劑中萜類內(nèi)酯含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，加甲醇提取，提取液蒸干，殘?jiān)?％鹽酸使溶解，用乙酸乙酯提取數(shù)次，提取液用5％的醋酸鈉溶液洗滌，洗滌液再用乙酸乙酯洗滌，乙酸乙酯提取液與洗滌液合并，水洗兩次，合并水洗液，再用乙酸乙酯洗滌，合并乙酸乙酯溶液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，作為供試品溶液；另取白果?nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品、銀杏內(nèi)酯C對照品分別制成對照品溶液；采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；正丙醇-四氫呋喃-水＝1∶15∶84為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；以外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算，總萜類內(nèi)酯的含量以白果內(nèi)酯C15H1808、銀杏內(nèi)酯AC20H24O9、銀杏內(nèi)酯B C20H24O10、銀杏內(nèi)酯C C20H24O11的總量計(jì)，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用脈平制劑中含萜類內(nèi)酯不得低于8mg；c.制劑中維生素C含量的滴定法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加新煮沸過的冷開水適量與稀醋酸適量，提取，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，加入淀粉指示劑適量，用0.1mol/L碘滴定液滴定至終點(diǎn)，溶液顯藍(lán)色并30秒鐘內(nèi)不褪；每1ml碘滴定液0.1mol/L相當(dāng)于維生素C C6H8O68.806mg，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為日用劑量含維生素C C6H8O6不得低于135mg；d.制劑中蘆丁含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，混勻，從中取一部分精密稱定，置錐形瓶中，加甲醇提取，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液適當(dāng)稀適，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液，以蘆丁對照品的甲醇溶液為對照，采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-冰醋酸＝32∶67∶1為流動相；檢測波長為359nm；以外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算，待測平脈制劑含量限度應(yīng)為日用劑量含蘆丁C27H30O16不得低于54mg；e.制劑中阿魏酸含量的高效液相色譜法測定取待測脈平制劑內(nèi)容物適量，置錐形瓶中，加70％甲醇加熱回流30分鐘，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液，以阿魏酸對照品的甲醇溶液為對照，采用高效液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-磷酸＝17∶83∶0.07為流動相；檢測波長為316nm；柱溫35℃；以外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算，待測脈平制劑含量限度應(yīng)為一日用劑量含阿魏酸C10H10O4不得低于1.6mg；f.制劑中總黃酮含量的分光光度法測定精密稱取蘆丁對照品，用加50％甲醇配制成每1ml含0.2mg的溶液；精密量取對照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，置10ml的量瓶中，加50％甲醇至5ml，分別加入5％的亞硝酸鈉溶液0.3ml，混勻，放置6分鐘，再加入10％的硝酸鋁溶液0.3ml，混勻，放置6分鐘，各加入氫氧化鈉試液4ml，再加50％甲醇至刻度，混勻；以相應(yīng)的溶液為空白；照中國藥典公開的分光光度法，在510nm處測定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；取待測脈平顆粒劑適量，置錐形瓶中，加50％甲醇超聲20分鐘，放至室溫，補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。量取供試品溶液，自標(biāo)準(zhǔn)曲線法“加50％甲醇至5ml，”做起，測試吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出相當(dāng)于蘆丁的重量，計(jì)算，即得；本品一日用劑量含總黃酮以蘆丁C27H30O16計(jì)不得低于70mg。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種治療冠心病的脈平藥物制劑及其制備方法和質(zhì)量控制方法，按照重量組分計(jì)算，它主要由銀杏葉提取物12.5g、維生素C 12.5g、蘆丁5g、何首烏1000g、當(dāng)歸500g或用相應(yīng)重量份它們的提取物制作而成。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明制劑對于冠心病、心絞痛等疾病具有顯著的治療效果；所提供的膠囊抗?jié)裥阅芰?qiáng)，取消了糖粉，更有利于老年人和糖尿病患者的服用，生物利用度高；所提供的微丸吸收均勻而有規(guī)則，可以提高藥物與胃腸道的接觸面積，使藥物吸收完全，提高生物利用度，同時(shí)外形美觀、流動性好、釋藥穩(wěn)定、局部刺激性小，不易吸濕，所提供的軟膠囊，生物利用度高，有效成分起效快。
文檔編號A61K9/00GK1876028SQ20061020042
公開日2006年12月13日 申請日期2006年5月8日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月12日
發(fā)明者周霞 申請人:貴陽云巖西創(chuàng)藥物科技開發(fā)有限公司