專利名稱：放射增敏劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新型放射增敏劑(radiosensitizer)。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及含有通式(1)代表的磺基吡喃糖基酰基甘油或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分的放射增敏劑。
背景技術(shù)：
目前，在日本，惡性腫瘤、心臟病和腦血管疾病構(gòu)成大約60％的死亡原因。其中，惡性腫瘤是首要的致死原因，并且有增加的趨勢(shì)。作為惡性腫瘤的治療，已知手術(shù)治療、化療和放射療法是三種主要療法。近年來(lái)，強(qiáng)調(diào)患者的生命質(zhì)量(QOL)，更多地關(guān)注放射療法。
目前，臨床上可應(yīng)用的放射增敏劑由化學(xué)或藥學(xué)物質(zhì)組成，在放射療法中與照射一起實(shí)施時(shí)可提高治療效果，其包括鹵化嘧啶和低氧細(xì)胞放射增敏劑(例如，參見《反射學(xué)工作者的放射生物學(xué)》(Radiobiology for the Radiologist)(第四版)，Eric J.Hall等，J.B.Lippincott Company(“Radiobiology for the Radiologist”，Muneyasu Urano譯，Shinohara shinsha Inc.))。作為鹵化嘧啶，已知5-碘代脫氧尿嘧啶核苷等。此外，作為低氧細(xì)胞放射增敏劑，已知misonidazol等。但是，這些已知的放射增敏劑存在有待解決的問題，例如胃腸道功能失調(diào)、外周神經(jīng)毒性和其它副作用問題，很少用于實(shí)踐中。

發(fā)明內(nèi)容
鑒于上述問題研究了本發(fā)明，本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供可用于實(shí)踐的放射增敏劑。
本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供使用該放射增敏劑的抗腫瘤放射療法。
為了解決上述問題，本發(fā)明的發(fā)明者們進(jìn)行了深入研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通式(1)代表的磺基吡喃糖基?；视脱苌锞哂袃?yōu)異的放射增敏作用，完成了本發(fā)明。就是說(shuō)，本發(fā)明提供了以下放射增敏劑。
一種放射增敏劑，它包含至少一種選自下組的化合物作為活性成分以下通式(1)所代表的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，[化學(xué)通式1] (其中，R101指高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢?，R102指氫原子或高級(jí)脂肪酸的酰基殘基)。
如[1]所述的放射增敏劑，其中，活性成分是至少一種選自下組的化合物以下通式(2)所代表的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，[化學(xué)通式2] (其中，R101指高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢?，R102指氫原子或高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢?。
如[2]所述的放射增敏劑，在通式(2)中，R101是R-CO-(其中，R是具有13-25個(gè)碳原子的烷基)，R102是氫原子或R-CO-(其中，R是具有13-25個(gè)碳原子的烷基)。
如[3]所述的放射增敏劑，在通式(2)中，R101是R-CO-(其中，R是具有13-25的奇數(shù)個(gè)碳原子的直鏈烷基)。
如[3]所述的放射增敏劑，在通式(2)中，R102是氫原子。
如[4]所述的放射增敏劑，在通式(2)中，R102是氫原子。
如[3]所述的放射增敏劑，在通式(2)中，R102是R-CO-(其中，R是具有13-25個(gè)碳原子的烷基)。
如[4]所述的放射增敏劑，在通式(2)中，R102是R-CO-(其中，R是具有13-25個(gè)碳原子的烷基)。
并且，本發(fā)明還提供了一種抗腫瘤放射治療方法，該方法包括將上述放射增敏劑與照射聯(lián)合使用。
通過與照射聯(lián)合使用，本發(fā)明放射增敏劑可實(shí)現(xiàn)超過預(yù)期的協(xié)同抗腫瘤治療效果。
附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明

圖1顯示了試驗(yàn)天數(shù)與腫瘤體積之間的關(guān)系。
圖2顯示了試驗(yàn)天數(shù)與腫瘤體積之間的關(guān)系。
圖3顯示了試驗(yàn)天數(shù)與腫瘤體積之間的關(guān)系。
圖4顯示了試驗(yàn)天數(shù)與腫瘤體積之間的關(guān)系。
圖5顯示了試驗(yàn)天數(shù)與腫瘤體積之間的關(guān)系。
圖6顯示了試驗(yàn)天數(shù)與腫瘤體積之間的關(guān)系。
圖7顯示了試驗(yàn)天數(shù)與腫瘤體積之間的關(guān)系。
圖8顯示了集落試驗(yàn)結(jié)果。
圖9顯示了集落試驗(yàn)結(jié)果。
圖10顯示了集落試驗(yàn)結(jié)果。
圖11顯示了集落試驗(yàn)結(jié)果。
圖12顯示了通過改變照射劑量和本發(fā)明放射增敏劑的濃度進(jìn)行的集落試驗(yàn)結(jié)果。
圖13顯示了集落試驗(yàn)結(jié)果。
圖14顯示了集落試驗(yàn)結(jié)果。
圖15顯示了集落試驗(yàn)結(jié)果。
圖16顯示了集落試驗(yàn)結(jié)果。
圖17顯示了集落試驗(yàn)結(jié)果。
圖18顯示了集落試驗(yàn)結(jié)果。
圖19顯示了集落試驗(yàn)結(jié)果。
圖20顯示了使用血管生成試劑盒的試驗(yàn)結(jié)果。
本發(fā)明的最佳實(shí)施方式在本說(shuō)明書中，放射增敏劑包括通過將該增敏劑與照射聯(lián)合使用，可實(shí)現(xiàn)超過單用照射的提高的抗腫瘤作用?？鼓[瘤效果包括腫瘤變小或根除的情況。此外，抗腫瘤作用包括延遲腫瘤生長(zhǎng)的情況，以及在較小的照射劑量或較少數(shù)量的劑量份數(shù)下實(shí)現(xiàn)相同的抗腫瘤作用的情況，但并非意圖限制本發(fā)明放射增敏劑的作用機(jī)制。
首先，將詳細(xì)描述通式(1)所代表的磺基吡喃糖基?；视脱苌颷化學(xué)通式3] (其中，R101指高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢琑102指氫原子或高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢?，它是本發(fā)明放射增敏劑的活性成分。
在通式(1)的磺基吡喃糖基酰基甘油衍生物中，構(gòu)成吡喃糖苷糖骨架的吡喃糖的例子包括α-D-葡萄糖、β-D-葡萄糖、α-D-半乳糖、β-D-半乳糖、α-D-甘露糖、β-D-甘露糖等。
吡喃糖苷的糖骨架可具有船形或椅形的任何構(gòu)型。但是，從穩(wěn)定性的角度來(lái)看，優(yōu)選椅形。
甘油部分2-位碳原子(不對(duì)稱碳)的絕對(duì)構(gòu)型可以是S型或R型中任一種。
在通式(1)中，R101表示高級(jí)脂肪酸的酰基殘基。形成R101所代表的高級(jí)脂肪酸?；鶜埢闹舅岬睦影ㄖ辨溁蛑ф湣柡突虿伙柡透呒?jí)脂肪酸。
R101所代表的直鏈或支鏈高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢≧-C(＝O)-所代表的基團(tuán)(其中，R指具有13或更多個(gè)碳原子的烷基或烯基)。在制造成本、放射增敏劑活性等的角度來(lái)看，酰基殘基R-C(＝O)-中R所代表的烷基或烯基的碳原子數(shù)量?jī)?yōu)選為13或以上到25或以下，更優(yōu)選為13到25的奇數(shù)。
在通式(1)中，R102表示氫原子或高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢?。R102所代表的高級(jí)脂肪酸的酰基殘基具有與上述R101所代表的高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢嗤囊饬x。
當(dāng)在通式(1)中R101和R102都是高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢鶗r(shí)，這些酰基殘基可相同或不同，從制造方便的角度來(lái)看，優(yōu)選相同。
通式(1)的磺基吡喃糖基?；视脱苌锏睦影撤N化合物，其中，作為構(gòu)成吡喃糖苷糖骨架的吡喃糖是α-D-葡萄糖、β-D-葡萄糖、α-D-半乳糖、β-D-半乳糖、α-D-甘露糖、β-D-甘露糖；R101是R-C(＝O)-所代表的基團(tuán)(其中，R指具有13-25的奇數(shù)個(gè)碳原子的烷基或烯基)；R102是氫原子或具有與R101相同意義的高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢?br> 通式(1)所代表的磺基吡喃糖基?；视脱苌锸且阎幕衔?，例如，可根據(jù)本申請(qǐng)人的專利申請(qǐng)(日本專利申請(qǐng)KOKAI公開第2000-143516號(hào)，國(guó)際公開第WO00/52020號(hào)、第WO00/52021號(hào)、第WO00/51622號(hào)等)中所述方法進(jìn)行制備。
通式(1)所代表的磺基吡喃糖基酰基甘油衍生物的藥學(xué)上可接受的鹽的例子包括但不限于單價(jià)陽(yáng)離子鹽，例如鈉鹽和鉀鹽。
本發(fā)明放射增敏劑包含一種或多種選自下組的化合物作為活性成分本發(fā)明通式(1)所代表的磺基吡喃糖基?；视脱苌锛捌渌帉W(xué)上可接受的鹽。如上所述，通式(1)所代表的磺基吡喃糖基?；视脱苌锏睦影ㄟ拎腔糠值牧Ⅲw異構(gòu)體，甘油酯基部分C2碳原子(不對(duì)稱碳)的異構(gòu)體，等等。本發(fā)明放射增敏劑可只包含這些異構(gòu)體，或是兩種或更多種異構(gòu)體的混合物，只要對(duì)放射增敏劑的活性沒有不良影響即可?；蛘撸景l(fā)明放射增敏劑可包含多種通式(1)中R101和/或R102為不同取代基的化合物。而且，本發(fā)明放射增敏劑可與其它放射增敏劑、抗癌藥或其它藥理學(xué)活性化合物聯(lián)用，只要對(duì)放射增敏劑的活性沒有不良影響即可。
在本文中，包含本發(fā)明通式(1)所代表的磺基吡喃糖基?；视脱苌锛捌渌帉W(xué)上可接受的鹽的化合物也可稱為“本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)”。
本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)可例如口服或胃腸外給藥。根據(jù)給藥途徑，通過與合適的藥學(xué)上可接受的賦形劑、稀釋劑等混合，可將本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)配制成藥物制劑。
適合口服給藥的劑型包括固體、半固體、液體、氣體等形式。具體地說(shuō)，這些劑型的例子包括但不限于片劑、膠囊劑、粉末劑、顆粒劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑、酏劑等。
為了將本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)配制成片劑、膠囊劑、粉末劑、顆粒劑、溶液劑、混懸劑等，根據(jù)本身已知方法，通過將本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)與粘合劑、片劑崩解劑、潤(rùn)滑劑等混合，需要時(shí)還可與稀釋劑、緩沖劑、潤(rùn)濕劑、防腐劑、矯味劑等化合物混合，進(jìn)行配制。舉例來(lái)說(shuō)，粘合劑包括結(jié)晶纖維素、纖維素衍生物、玉米淀粉、明膠等；片劑崩解劑包括玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、羧甲基纖維素鈉等；潤(rùn)滑劑包括滑石粉、硬脂酸鎂等。而且，也可使用其它常用的添加劑如乳糖、甘露醇等。
或者，通過將液體或細(xì)粉形式的物質(zhì)與氣態(tài)或液態(tài)噴霧劑，需要時(shí)還有已知的輔助劑如潤(rùn)濕劑一起填充入非壓力型容器如氣溶膠容器或霧化器中，以氣溶膠或吸入劑的形式給予本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)。作為噴霧劑，可使用加壓氣體如二氯氟代甲烷、丙烷、氮?dú)獾取?br> 但采用胃腸外方式給予本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)時(shí)，通過例如注射給藥、經(jīng)皮給藥、直腸給藥、眼內(nèi)給藥等方式給予該物質(zhì)。
注射給藥時(shí)，物質(zhì)可通過皮下、真皮內(nèi)、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)注射等途徑給藥。根據(jù)本身已知方法，通過將本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)溶解、混懸或乳化在水性或非水性溶劑如植物油、合成脂肪酸甘油酯、高級(jí)脂肪酸酯或丙二醇中，需要時(shí)還可將其與常規(guī)添加劑如增溶劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、乳化劑、穩(wěn)定劑或防腐劑一起配制成制劑，可獲得這些注射用制劑。
為了將本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)配制成溶液劑、混懸劑、糖漿劑、酏劑等形式，可使用藥學(xué)上可接受的溶劑如注射用無(wú)菌水和常規(guī)生理鹽水。
對(duì)于經(jīng)皮給藥，根據(jù)待給藥的皮膚的狀態(tài)，可以軟膏劑、乳劑、糊劑、泥罨劑、搽劑、洗劑、混懸劑等形式給予該物質(zhì)。
根據(jù)本身已知方法，通過將本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)與疏水基質(zhì)如凡士林或石蠟，或與親水基質(zhì)如親水凡士林或聚乙二醇一起捏合，配制軟膏劑。通過常規(guī)使用的方法可將乳劑和其它經(jīng)皮試劑配制成制劑。
對(duì)于直腸給藥，例如，該物質(zhì)可以栓劑形式給予。根據(jù)本身已知方法，通過將本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)與賦形劑如可可豆脂、碳蠟、或在體溫下熔化但在室溫下為固體的聚乙二醇混合在一起形成混合物，將栓劑配制成制劑。
對(duì)于眼內(nèi)給藥，可以眼用制劑的形式給予該物質(zhì)，例如滴眼劑或眼用軟膏劑。根據(jù)本身已知方法，通過將本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)溶解或混懸在水性溶劑如無(wú)菌純水中，需要時(shí)還可加入防腐劑、緩沖劑、表面活性劑等，將滴眼劑配制成制劑。
根據(jù)給藥形式、給藥途徑、靶腫瘤的條件(例如，腫瘤的類型、部位和進(jìn)程狀態(tài))、放射療法的條件(例如，放射線的類型、劑量和照射次數(shù))、如何與放射療法聯(lián)用(例如，放射療法的持續(xù)時(shí)間，以及給予本發(fā)明放射增敏劑的順序)等，適當(dāng)設(shè)定和調(diào)節(jié)本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)的給藥條件(例如，劑量、給藥次數(shù)和給藥間隔)。舉例來(lái)說(shuō)，在口服給藥的情況下，將放射增敏劑物質(zhì)的劑量設(shè)定為0.001-100毫克/公斤體重/天；在注射給藥的情況下，將放射增敏劑物質(zhì)的劑量設(shè)定為0.001-50毫克/公斤體重/天；在經(jīng)皮給藥的情況下，將放射增敏劑物質(zhì)的劑量設(shè)定為0.001-100毫克/公斤體重/天；在直腸給藥的情況下，將放射增敏劑物質(zhì)的劑量設(shè)定為0.001-50毫克/公斤體重/天；在眼內(nèi)給藥的情況下，通過將約0.001-3％的滴眼劑溶液分成每天幾次，以滴眼劑的形式給予放射增敏劑物質(zhì)，但給藥條件并不限于此。
另一方面，對(duì)于放射療法來(lái)說(shuō)，類型、劑量和劑量份數(shù)的數(shù)量可以是與常規(guī)進(jìn)行的放射療法相同的條件。用于人體的常規(guī)照射的例子包括醫(yī)學(xué)照射，例如，X-射線、γ-射線、電子束和β-射線，以及粒子束如π-介子、中子和其它重粒子等，照射劑量約為0.1-100Gy/份，1周到6個(gè)月的時(shí)間內(nèi)總的照射劑量約為10-500Gy。人體照射的代表性例子包括2Gy/份的X-射線照射，一周5次，大約6周的時(shí)間內(nèi)共60Gy，但照射條件并不限于此。例如，可降低照射劑量或減少照射次數(shù)。而且，可通過適形放射療法、靶向癌病變作為方位點(diǎn)的立體定向放射療法、或強(qiáng)度調(diào)節(jié)的放射療法進(jìn)行照射。此外，還可通過用封閉的小放射源、γ-射線遠(yuǎn)距離照射或用粒子束照射來(lái)進(jìn)行照射。內(nèi)照射使得可以增加每次照射劑量并縮短照射持續(xù)時(shí)間。
照射和給予本發(fā)明放射增敏劑可同時(shí)進(jìn)行，或以任意的順序進(jìn)行。這樣，預(yù)計(jì)本發(fā)明放射增敏劑可用作與照射聯(lián)合使用的抗腫瘤藥，或者用作與照射聯(lián)合使用的血管生成抑制劑。
根據(jù)放射源類型、照射方法、照射部位和照射持續(xù)時(shí)間；增敏劑的類型、給藥途和給藥持續(xù)時(shí)間；需治療的疾病和疾病嚴(yán)重性；需照射的對(duì)象的年齡、體重、健康狀態(tài)和病史，醫(yī)學(xué)從業(yè)人員或其它專業(yè)人員可適當(dāng)選擇上述放射的照射條件和上述本發(fā)明放射增敏劑的給藥條件，這是放射療法領(lǐng)域眾所周知的。
實(shí)施例下面將解釋本發(fā)明的實(shí)施例，但本發(fā)明并不限于這些實(shí)施例。
實(shí)施例1(動(dòng)物實(shí)驗(yàn))實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-1將裸鼠分成四組(對(duì)照組；單獨(dú)使用本發(fā)明放射增敏劑的組；單獨(dú)使用照射的組；以及聯(lián)合使用照射和本發(fā)明放射增敏劑的組；每組4只小鼠)。
將1.0×106人舌鱗癌細(xì)胞(SAS細(xì)胞)懸浮在PBS(-)中，將懸浮液皮下移植入每只小鼠的右股中。10-14天后，當(dāng)腫瘤體積達(dá)到所需的值，即約50-100立方毫米的范圍時(shí)，根據(jù)分配的各組處理每只小鼠。使用3-O-(6-脫氧-6-磺基-α-D-吡喃葡萄糖基)-1-O-硬脂酰基-甘油鈉鹽(在后文中，也稱為“α-SQMG C18:0”)作為放射增敏劑。對(duì)于單獨(dú)使用照射的組，在8Gy的劑量下進(jìn)行X-射線照射兩次(處理開始時(shí)(第0天)一次，處理開始后第6天一次)。對(duì)于單獨(dú)使用α-SQMGC18:0給藥的組，在1毫克/千克的濃度下，腹膜內(nèi)給予增敏劑兩次(第0天和第6天)。對(duì)于聯(lián)合使用的組，同時(shí)用照射和α-SQMG C18:0給藥來(lái)處理該組中的每只小鼠。對(duì)于對(duì)照組，既不進(jìn)行照射也不給予α-SQMG C18:0。然后，在16到23天的時(shí)間范圍內(nèi)，用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤的短徑和長(zhǎng)徑。通過以下方程計(jì)算腫瘤體積，并比較腫瘤生長(zhǎng)延遲作用。計(jì)算腫瘤體積的方程腫瘤體積(立方毫米)＝(短徑)2×(長(zhǎng)徑)×0.5所得結(jié)果如圖1所示。在圖1中，水平軸表示處理開始后的天數(shù)，垂直軸表示腫瘤體積。此外，空心箭頭表示照射X-射線的時(shí)間(天)，實(shí)心箭頭表示給予α-SQMG C18:0的時(shí)間(天)。在下面的圖2-7中，空心和實(shí)心箭頭具有相同的意義。
由圖1所示結(jié)果可知，通過將α-SQMG C18:0給藥與照射聯(lián)合使用，可獲得遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過照射所得抗腫瘤作用的抗腫瘤作用。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-2)
進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-1相同的實(shí)驗(yàn)，但是在處理開始時(shí)(第0天)和處理開始后的第4天進(jìn)行照射，并且僅在第0天給予α-SQMG C18:0，在26天的時(shí)間內(nèi)測(cè)量腫瘤大小。
所得結(jié)果如圖2所示。由圖2所示結(jié)果可知，通過將α-SQMG C18:0給藥與照射聯(lián)合使用，可獲得遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過照射所得抗腫瘤作用的抗腫瘤作用。
為了數(shù)字化地表示這種協(xié)同作用，通過以下方程計(jì)算ER(增強(qiáng)比)。ER是由文獻(xiàn)(Int.，J.Radiation Oncology Bio.Phys.第55卷，第3期，第713-723頁(yè)(2003))定義的值，下面將基于該定義解釋ER。
ER＝NGD÷僅用X-射線照射的情況下的TGD在該方程中，“TGD(腫瘤生長(zhǎng)延遲)”表示與對(duì)照組相比，各試驗(yàn)組中腫瘤體積達(dá)到預(yù)定尺寸所需的天數(shù)的延遲。就是說(shuō)，可由以下方程表示。在本發(fā)明實(shí)施例中，除非另有說(shuō)明，腫瘤體積的預(yù)定大小為500立方毫米。
TGD＝(試驗(yàn)組中腫瘤體積達(dá)到500立方毫米所需的天數(shù))-(對(duì)照組中腫瘤體積達(dá)到500立方毫米所需的天數(shù))“NGD(歸一化生長(zhǎng)延遲)”可由以下方程表示。
NGD＝(聯(lián)合使用情況下的TGD)-(單獨(dú)給予藥物情況下的TGD)根據(jù)上文所述的文獻(xiàn)，認(rèn)為當(dāng)上述方程所得增強(qiáng)比(ER)超過1.0時(shí)，抗腫瘤作用是協(xié)同的。
在實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-2的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，增強(qiáng)比(ER)為2.0，表明協(xié)同作用非常高。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-3)進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-1相同的實(shí)驗(yàn)，但是在處理開始時(shí)(第0天)和處理開始后的第3天進(jìn)行照射，并且從第0天到第4天每天一次給予α-SQMG C18:0，在35天的時(shí)間內(nèi)測(cè)量腫瘤大小。
所得結(jié)果如圖3所示。由圖3所示結(jié)果可知，通過將α-SQMG C18:0給藥與照射聯(lián)合使用，可獲得遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過照射所得抗腫瘤作用的抗腫瘤作用。
在實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-3的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，由實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-2中所述方程獲得的增強(qiáng)比(ER)為3.0，表明協(xié)同作用極高。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-4)在本實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例中，以與上述實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例相同的方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，但是從處理開始時(shí)(第0天)到第4天，每天在2Gy/份的劑量下進(jìn)行照射，并且從第0天到第4天每天給予α-SQMG C18:0。下面將詳細(xì)描述實(shí)驗(yàn)過程。
將四只裸鼠(8周齡)隨機(jī)分成四組。將1.0×106人舌鱗癌細(xì)胞(SAS細(xì)胞)懸浮在PBS(-)中，將懸浮液皮下移植入每只小鼠的右股中。10天后，當(dāng)腫瘤體積達(dá)到約50立方毫米時(shí)，根據(jù)分配的各組處理每只小鼠。如上述實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例中的那樣，使用α-SQMG C18:0作為放射增敏劑。對(duì)于單獨(dú)使用照射的組，在2Gy的劑量下每天一次進(jìn)行X-射線照射，從處理開始時(shí)(第0天)到第4天共5次。對(duì)于單獨(dú)使用α-SQMG C18:0給藥的組，在1毫克/千克的濃度下，每天一次腹膜內(nèi)給予增敏劑，從處理開始時(shí)(第0天)到第4天共5次。對(duì)于聯(lián)合使用的組，同時(shí)用照射和α-SQMG C18:0給藥來(lái)處理該組中的每只小鼠。對(duì)于對(duì)照組，既不進(jìn)行照射也不給予α-SQMG C18:0。然后，在30天的時(shí)間范圍內(nèi)，用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤的短徑和長(zhǎng)徑。通過以下方程計(jì)算腫瘤體積，并比較腫瘤生長(zhǎng)延遲作用。
計(jì)算腫瘤體積的方程腫瘤體積(立方毫米)＝(短徑)2×(長(zhǎng)徑)×0.5所得結(jié)果如圖4所示。由圖4所示結(jié)果可知，即使在與臨床上正常使用相同的劑量(每次2Gy)下照射5次，總照射劑量10Gy的情況下，發(fā)現(xiàn)存在超過單用照射所得抗腫瘤作用的抗腫瘤作用。
為了數(shù)字化地表示這種協(xié)同作用，根據(jù)實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-2中所述方法計(jì)算增強(qiáng)比(ER)。結(jié)果，ER為1.8，發(fā)現(xiàn)協(xié)同作用高。
將本實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-3(其中，每次照射劑量8Gy，進(jìn)行兩份的照射，總照射劑量為16Gy)進(jìn)行比較。雖然在本實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例中，每份照射劑量比實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-3的要小，總照射劑量較小，但證實(shí)具有協(xié)同抗腫瘤作用，如實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-3中那樣。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-5)
將5只裸鼠(8周齡)隨機(jī)分成四組。以與上述實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-1相同的方式，將人食管癌細(xì)胞(TE-8細(xì)胞)移植入各小鼠中。當(dāng)腫瘤體積達(dá)到約50立方毫米時(shí)，給予α-SQMG C18:0和進(jìn)行照射處理。對(duì)于單獨(dú)使用照射的組，在第0天和第4天以8Gy的劑量用X射線照射每只小鼠兩次。在單獨(dú)使用α-SQMG C18:0給藥的組中，以1毫克/千克的濃度每天一次腹膜內(nèi)給予增敏劑，從第0天到第4天共5次。對(duì)于聯(lián)合使用的組，同時(shí)用照射和α-SQMG C18:0給藥來(lái)處理該組中的每只小鼠。對(duì)于對(duì)照組，既不進(jìn)行照射也不給予α-SQMG C18:0。然后，以與上述實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-1相同的方式，在51天的時(shí)間范圍內(nèi)測(cè)量腫瘤體積。
所得結(jié)果如圖5所示。由圖5所示結(jié)果可知，同樣對(duì)于人食管癌來(lái)說(shuō)，通過將α-SQMG C18:0給藥與照射聯(lián)合使用，也可獲得遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過照射所得抗腫瘤作用的抗腫瘤作用。此外，根據(jù)實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-2所述方法獲得增強(qiáng)比(ER)。在本實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例中，抗腫瘤作用極高，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)聯(lián)合使用組中的腫瘤體積沒有達(dá)到500立方毫米。出于這個(gè)原因，由腫瘤體積達(dá)到400立方毫米的天數(shù)計(jì)算增強(qiáng)比。結(jié)果，ER為3.25，表明協(xié)同作用極高。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-6)以與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-5相同的方式準(zhǔn)備移植有人癌的小鼠，除了將人宮頸癌細(xì)胞(HeLa細(xì)胞)移植入裸鼠。當(dāng)腫瘤體積達(dá)到100立方毫米時(shí)，給予α-SQMGC18:0和進(jìn)行照射處理。對(duì)于單獨(dú)使用照射的組，在第0天和第4天以8Gy的劑量用X射線照射每只小鼠兩次。在單獨(dú)使用α-SQMG C18:0給藥的組中，在1毫克/千克的濃度下腹膜內(nèi)給予增敏劑，分兩個(gè)階段進(jìn)行，每個(gè)階段5次，共10次，即，從第0天到第4天每天一次，從第12天到第16天每天一次。對(duì)于聯(lián)合使用的組，同時(shí)用照射和α-SQMG C18:0給藥來(lái)處理該組中的每只小鼠。對(duì)于對(duì)照組，既不進(jìn)行照射也不給予α-SQMG C18:0。然后，以與上述實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-1相同的方式，在35天的時(shí)間范圍內(nèi)測(cè)量腫瘤體積。
所得結(jié)果如圖6所示。由圖6所示結(jié)果可知，對(duì)于人宮頸癌來(lái)說(shuō)，通過將α-SQMG C18:0給藥與照射聯(lián)合使用，也可獲得遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過照射所得抗腫瘤作用的抗腫瘤作用。此外，根據(jù)實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-2所述方法獲得增強(qiáng)比(ER)。結(jié)果，ER為2.71，表明協(xié)同作用極高。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例1-7)在本實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例中，以與上述實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例相同的方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，區(qū)別在于將人肺癌細(xì)胞(A549細(xì)胞)移植入裸鼠中。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)過程如下所述。
將四只裸鼠(8周齡)隨機(jī)分成四組。將2.0×106人肺癌細(xì)胞(A549細(xì)胞)懸浮在PBS(-)中，將懸浮液皮下移植入每只小鼠的右股中。45天后，當(dāng)腫瘤體積達(dá)到約50立方毫米時(shí)，根據(jù)分配的各組處理每只小鼠。如上述實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例中的那樣，使用α-SQMG C18:0作為放射增敏劑。對(duì)于單獨(dú)使用照射的組，在4Gy的劑量下進(jìn)行X-射線照射兩次(處理開始時(shí)(第0天)和處理開始后第3天)。對(duì)于單獨(dú)使用α-SQMG C18:0給藥的組，在1毫克/千克的濃度下，每天一次腹膜內(nèi)給予增敏劑，從處理開始(第0天)到第4天共5次。對(duì)于聯(lián)合使用的組，同時(shí)用照射和α-SQMG C18:0給藥來(lái)處理該組中的每只小鼠。對(duì)于對(duì)照組，既不進(jìn)行照射也不給予α-SQMG C18:0。然后，在20天的時(shí)間范圍內(nèi)，用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤的短徑和長(zhǎng)徑。通過以下方程計(jì)算腫瘤體積，并比較腫瘤生長(zhǎng)延遲作用。
計(jì)算腫瘤體積的方程腫瘤體積(立方毫米)＝(短徑)2×(長(zhǎng)徑)×0.5所得結(jié)果如圖7所示。由圖7所示結(jié)果可知，對(duì)于作為一種腺癌的肺癌來(lái)說(shuō)，通過將α-SQMG C18:0給藥與照射聯(lián)合使用，發(fā)現(xiàn)存在超過單用照射所得抗腫瘤作用的抗腫瘤作用。
在本實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例中，聯(lián)合實(shí)驗(yàn)組中的腫瘤生長(zhǎng)被抑制，并且腫瘤體積的增加幾乎不可見。出于這個(gè)原因，無(wú)法計(jì)算表示協(xié)同作用的增強(qiáng)比(ER)。換句話說(shuō)，本實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例的結(jié)果表明，α-SQMG C18:0給藥與照射的協(xié)同作用高到不能計(jì)算ER值的程度。
如上所述，本發(fā)明通式(1)所代表的放射增敏劑具有高的協(xié)同抗腫瘤作用。因此，表明本發(fā)明通式(1)所代表的放射增敏劑可在較小的劑量或較小的總照射量下，獲得相當(dāng)于單獨(dú)使用本發(fā)明放射增敏劑物質(zhì)或單獨(dú)使用照射所預(yù)期的作用的抗腫瘤作用。因此，預(yù)計(jì)通過使用本發(fā)明放射增敏劑可減少由化學(xué)治療藥物或照射通常所導(dǎo)致的副作用的發(fā)生。
此外，在所有上述實(shí)驗(yàn)中，各裸鼠的體重?zé)o變化。而且，當(dāng)將本發(fā)明放射增敏劑應(yīng)用于小鼠皮膚時(shí)，既無(wú)炎癥也無(wú)其它問題。而且，未發(fā)現(xiàn)由照射導(dǎo)致的皮膚炎癥。從上述結(jié)果還可推測(cè)，本發(fā)明放射增敏劑幾乎沒有副作用。
在上述實(shí)施例中，使用α-SQMG C18:0(3-O-(6-脫氧-6-磺基-α-D-吡喃葡萄糖基)-1-O-硬脂?；?甘油鈉鹽)作為本發(fā)明的放射增敏劑。但是，預(yù)期當(dāng)使用通式(1)所代表的其它化合物(例如，具有肉豆蔻?；蜃貦磅；蚱渌柡王；皇铅?SQMG C18:0中的硬脂酰基的飽和單?；视王?；具有CH3-(CH2)3-(CH＝CH-CH2)1-(CH2)6-CO-、CH3-(CH2)5-(CH＝CH-CH2)1-(CH2)6-CO-、CH3-(CH2)7-(CH＝CH-CH2)1-(CH2)6-CO-或其它不飽和酰基的不飽和單?；视王?；或具有任意一種或兩種選自上述六種酰基或其它?；娘柡?不飽和二?；视王?時(shí)，也可獲得相等或更強(qiáng)的抗腫瘤作用。在下面的實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-6到2-12中，證實(shí)了以下通式(1)的化合物作為放射增敏劑的作用通式(1)的化合物，其中，存在肉豆蔻?；⒆貦磅；蛴王；姒?SQMG C18:0中的硬脂?；?；通式(1)的化合物，其中，吡喃糖與甘油間的鍵是β鍵而不是α鍵；通式(1)的化合物，它是二?；苌锒皇菃熙；苌铮灰约巴ㄊ?1)的化合物，它具有除葡萄糖以外的糖骨架。因此，預(yù)計(jì)當(dāng)使用通式(1)所代表的其它化合物時(shí)，也可獲得相等或更強(qiáng)的抗腫瘤作用。
[在上述實(shí)施例中，證明了本發(fā)明增敏劑對(duì)舌鱗狀細(xì)胞癌、食管癌、宮頸癌和肺癌的作用。但是，預(yù)計(jì)在其它癌癥(例如，腺癌如前列腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、神經(jīng)膠質(zhì)癌和宮頸腺癌，實(shí)體癌如移行細(xì)胞癌、肉瘤和黑色素瘤，以及體液癌如淋巴癌)中，本發(fā)明增敏劑也可產(chǎn)生相等或更強(qiáng)的抗腫瘤作用。
而且，通過適當(dāng)改變本發(fā)明放射增敏劑的劑量和給藥數(shù)量；類型、照射劑量和劑量份量；以及照射與本發(fā)明放射增敏劑的實(shí)施順序，預(yù)計(jì)在除上述病癥以外的情況下也可產(chǎn)生相等或更強(qiáng)的抗腫瘤作用。由此，可根據(jù)醫(yī)生或其它醫(yī)學(xué)工作者通常進(jìn)行的程序來(lái)對(duì)癥治療。
實(shí)施例2(集落試驗(yàn))(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1)
將牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(BAEC)適當(dāng)接種在Petri培養(yǎng)皿中，2-3小時(shí)后證實(shí)細(xì)胞貼附。在單獨(dú)使用α-SQMG C18:0給藥的組和聯(lián)合使用組中，用10μMα-SQMG C18:0處理細(xì)胞。24小時(shí)后，更換所有試驗(yàn)組中的介質(zhì)，并在單獨(dú)使用照射的組和聯(lián)合使用組中照射4Gy的60Co γ-射線。在37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)細(xì)胞10-12天之后，用甲醛溶液固定成形集落，用結(jié)晶紫染色溶液染色。在每塊板上，對(duì)大約50或更多個(gè)細(xì)胞構(gòu)成的集落數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)，并根據(jù)以下方程計(jì)算細(xì)胞存活份數(shù)(SF)。
SF(細(xì)胞存活份數(shù))＝集落數(shù)量/細(xì)胞接種量×(PE/100)在這里，PE(平板接種效率)指對(duì)照板上的集落形成率(％)試驗(yàn)進(jìn)行三次，計(jì)算平均值。
作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果，單獨(dú)使用α-SQMG C18:0給藥的組和單獨(dú)使用4Gy照射的組的SF值分別為0.616和0.158。圖8顯示了由上述SF值計(jì)算的聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)(單獨(dú)使用α-SQMG C180給藥的組的SF值×單獨(dú)使用4Gy照射的組的SF值)，以及聯(lián)合使用組實(shí)際測(cè)得的SF值。
聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)為0.0974，而聯(lián)合使用組的實(shí)際測(cè)得SF值為0.0640，大大低于理論加合點(diǎn)。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-2)進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1相同的實(shí)驗(yàn)，但是照射劑量為6Gy而不是實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1中使用的4Gy。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果是，單獨(dú)使用α-SQMG C18:0給藥的組和單獨(dú)使用6Gy照射的組的SF值分別為0.616和0.0820。圖9顯示了由上述SF值計(jì)算的聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)(單獨(dú)使用α-SQMG C18:0給藥的組的SF值×單獨(dú)使用6Gy照射的組的SF值)，以及聯(lián)合使用組實(shí)際測(cè)得的SF值。
聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)為0.0505，而聯(lián)合使用組的實(shí)際測(cè)得SF值為0.0180，大大低于理論加合點(diǎn)。
與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1和2-2平行地在BAEC上進(jìn)行的集落試驗(yàn)同樣也在SAS細(xì)胞上進(jìn)行，但α-SQMG C18:0對(duì)SAS細(xì)胞不產(chǎn)生細(xì)胞增殖抑制作用。
實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1和2-2的結(jié)果表明，聯(lián)合使用α-SQMG C18:0和照射在抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖方面產(chǎn)生相當(dāng)大的協(xié)同作用。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-3)進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1相同的實(shí)驗(yàn)，但是照射劑量為2Gy而不是實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1中使用的4Gy。結(jié)果如圖10所示。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果是，單獨(dú)使用10μMα-SQMG C18:0給藥的組和單獨(dú)使用2Gy照射的組的SF值分別為0.9433和0.5957。由上述SF值計(jì)算的聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)為0.5620，而聯(lián)合使用α-SQMG C18:0和照射的情況下實(shí)際測(cè)得的SF值為0.0644，大大低于理論加合點(diǎn)。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-4)進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-3相同的實(shí)驗(yàn)，但是用5μMα-SQMG C18:0而不是實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-3中使用的10μMα-SQMG C18:0來(lái)處理細(xì)胞。結(jié)果如圖11所示。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果是，單獨(dú)使用5μMα-SQMG C18:0給藥的組和單獨(dú)使用2Gy照射的組的SF值分別為1.0094和0.5957。由上述SF值計(jì)算的聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)為0.6012，而聯(lián)合使用5μMα-SQMG C18:0和照射的情況下實(shí)際測(cè)得的SF值為0.1370，大大低于理論加合點(diǎn)。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-5)在本實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例中，以與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1到2-4相同的方式進(jìn)行各種集落試驗(yàn)。即，通過分別在0-25μM的范圍內(nèi)改變?chǔ)?SQMG C18:0的給藥濃度和在0-8Gy的范圍內(nèi)改變60Co γ-射線照射劑量來(lái)進(jìn)行集落試驗(yàn)。
結(jié)果總結(jié)如圖12所示。在圖12中，由“0Gy”、“2Gy”、“4Gy”、“6Gy”、“8Gy”表示的各組數(shù)據(jù)顯示了各實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，其中，在給定照射劑量下照射60Co γ-射線，α-SQMG C180的給藥濃度在0-25μM的范圍內(nèi)變化。從這些結(jié)果可見，單獨(dú)使用α-SQMG C18:0處理不能產(chǎn)生細(xì)胞增殖抑制作用，但是當(dāng)將α-SQMG C18:0給藥與照射聯(lián)合使用時(shí)，照射對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用增加。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-6)進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-2相同的實(shí)驗(yàn)，但是使用3-O-(6-脫氧-6-磺基-α-D-吡喃葡萄糖基)-1-O-肉豆蔻?；?甘油鈉鹽(在后文中，也稱為“α-SQMG C14:0”)而不是實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-2中使用的α-SQMG C18:0。結(jié)果如圖13所示。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果是，單獨(dú)使用α-SQMG C14:0給藥的組和單獨(dú)使用6Gy照射的組的SF值分別為1.0605和0.0674。由上述SF值計(jì)算的聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)為0.0715，而聯(lián)合使用α-SQMG C14:0和照射的情況下實(shí)際測(cè)得的SF值為0.0109，大大低于理論加合點(diǎn)。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-7)進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-2相同的實(shí)驗(yàn)，但是使用3-O-(6-脫氧-6-磺基-α-D-吡喃葡萄糖基)-1-O-棕櫚?；?甘油鈉鹽(在后文中，也稱為“α-SQMG C16:0”)而不是實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-2中使用的α-SQMG C18:0。結(jié)果如圖14所示。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果是，單獨(dú)使用α-SQMG C16:0給藥的組和單獨(dú)使用6Gy照射的組的SF值分別為0.9553和0.0674。由上述SF值計(jì)算的聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)為0.0644，而聯(lián)合使用α-SQMG C16:0和照射的情況下實(shí)際測(cè)得的SF值為0.0233，大大低于理論加合點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-6的結(jié)果表明，聯(lián)合使用α-SQMG C14:0和照射在抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖方面產(chǎn)生相當(dāng)大的協(xié)同作用。實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-7的結(jié)果表明，聯(lián)合使用α-SQMG C16:0和照射在抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖方面產(chǎn)生相當(dāng)大的協(xié)同作用。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-8)進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1相同的實(shí)驗(yàn)，但是使用3-O-(6-脫氧-6-磺基-α-D-吡喃葡萄糖基)-1-O-油?；?甘油鈉鹽(在后文中，也稱為“α-SQMG C18:1”)而不是實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1中使用的α-SQMG C18:0。結(jié)果如圖15所示。
作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果，單獨(dú)使用α-SQMG C18:1給藥的組和單獨(dú)使用4Gy照射的組的SF值分別為1.0392和0.1915。由上述SF值計(jì)算的聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)為0.1990，而聯(lián)合使用α-SQMG C18:1和照射的情況下實(shí)際測(cè)得的SF值為0.0843，大大低于理論加合點(diǎn)。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-9)進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1相同的實(shí)驗(yàn)，但是使用3-O-(6-脫氧-6-磺基-β-D-吡喃葡萄糖基)-1-O-硬脂?；?甘油鈉鹽(在后文中，也稱為“β-SQMG C18:0”)而不是實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1中使用的α-SQMG C18:0。結(jié)果如圖16所示。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果是，單獨(dú)使用β-SQMG C18:0給藥的組和單獨(dú)使用4Gy照射的組的SF值分別為0.8562和0.1915。由上述SF值計(jì)算的聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)為0.1640，而聯(lián)合使用β-SQMG C18:0和照射的情況下實(shí)際測(cè)得的SF值為0.0922，大大低于理論加合點(diǎn)。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-10)進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1相同的實(shí)驗(yàn)，但是使用3-O-(6-脫氧-6-磺基-β-D-吡喃葡萄糖基)-1，2-二-O-硬脂酰基-甘油鈉鹽(在后文中,也稱為“β-SQDGC18:0”)而不是實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1中使用的α-SQMG C18:0。結(jié)果如圖17所示。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果是，單獨(dú)使用β-SQDG C18:0給藥的組和單獨(dú)使用4Gy照射的組的SF值分別為0.7190和0.1915。由上述SF值計(jì)算的聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)為0.1377，而聯(lián)合使用β-SQDG C18:0和照射的情況下實(shí)際測(cè)得的SF值為0.0908，大大低于理論加合點(diǎn)。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-11)進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1相同的實(shí)驗(yàn)，但是使用3-O-(6-脫氧-6-磺基-α-D-吡喃葡萄糖基)-1，2-二-O-硬脂?；?甘油鈉鹽(在后文中，也稱為“α-SQDGC18:0”)而不是實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1中使用的α-SQMG C18:0。結(jié)果如圖18所示。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果是，單獨(dú)使用α-SQDG C18:0給藥的組和單獨(dú)使用4Gy照射的組的SF值分別為0.9216和0.1915。由上述SF值計(jì)算的聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)為0.1765，而聯(lián)合使用α-SQDG C18:0和照射的情況下實(shí)際測(cè)得的SF值為0.0822，大大低于理論加合點(diǎn)。
(實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-12)進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1相同的實(shí)驗(yàn)，但是使用3-O-(6-脫氧-6-磺基-α-D-吡喃甘露糖基)-1-O-硬脂?；?甘油鈉鹽(在后文中，也稱為“α-SRMG C18:0”)而不是實(shí)驗(yàn)性實(shí)施例2-1中使用的α-SQMG C18:0。結(jié)果如圖19所示。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果是，單獨(dú)使用α-SRMG C18:0給藥的組和單獨(dú)使用4Gy照射的組的SF值分別為0.8758和0.1915。由上述SF值計(jì)算的聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)為0.1677，而聯(lián)合使用α-SRMG C18:0和照射的情況下實(shí)際測(cè)得的SF值為0.0784，大大低于理論加合點(diǎn)。
上述實(shí)施例中使用的血管內(nèi)皮細(xì)胞是形成新的到達(dá)活體內(nèi)產(chǎn)生的腫瘤胞塊的新生血管的細(xì)胞。新生血管經(jīng)由血管給腫瘤細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)并供氧，從而導(dǎo)致腫瘤增殖。因此，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖與抗腫瘤作用緊密相關(guān)。這樣，上述集落試驗(yàn)的結(jié)果顯著支持了本發(fā)明放射增敏劑的抗腫瘤作用。
據(jù)說(shuō)具有抑制血管生成作用的血管生成抑制劑的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是幾乎不會(huì)發(fā)生耐藥性，這種均一作用與腫瘤類型無(wú)關(guān)，且副作用小。
實(shí)施例3(用血管生成試劑盒進(jìn)行的試驗(yàn))采用血管生成試劑盒(“Kurabo Industries Ltd.的“血管生成試劑盒KZ-1000”)研究聯(lián)合使用20μMα-SQMG C18:0給藥和4Gy 60Co γ-射線照射產(chǎn)生的抗血管生成作用。
用成像軟件量化使用血管生成試劑盒所得結(jié)果，如圖20所示。
稱為舒拉明(Suramin)的藥物是已知的抑制血管生成的藥物，已知其作用是抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)因子受體。在本實(shí)施例中，使用50μM的Suramin作為陽(yáng)性對(duì)照。
與單獨(dú)使用舒拉明(導(dǎo)管形成率0.3386)的情況相比，單獨(dú)使用α-SQMGC18:0(導(dǎo)管形成率0.7229)情況下的抗血管生成作用明顯較低。但是，當(dāng)將α-SQMG C18:0與照射聯(lián)合使用時(shí)，其作用高于聯(lián)合使用舒拉明和照射的情況。發(fā)現(xiàn)聯(lián)合使用α-SQMG C18:0和照射可協(xié)同抑制血管生成。
如上所述，通過乘法計(jì)算“聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)”，并將理論值與實(shí)際測(cè)量值進(jìn)行比較。
4Gy+舒拉明4Gy+α-SQMG理論值0.219 0.467實(shí)測(cè)值0.232 0.0762聯(lián)合使用照射和舒拉明情況下的導(dǎo)管形成率的實(shí)測(cè)值稍高于理論值。但是，照射和α-SQMG情況下導(dǎo)管形成率的實(shí)測(cè)值大大低于聯(lián)合使用的理論加合點(diǎn)。結(jié)果表明，聯(lián)合使用照射和α-SQMG所獲得的抗血管生成作用高于理論值。
活體內(nèi)產(chǎn)生的腫瘤增殖伴隨著形成新的血管，用于給腫瘤細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)和供氧。因此，抗血管生成作用與抗腫瘤作用緊密相關(guān)。這樣，實(shí)施例3的結(jié)果顯著支持了本發(fā)明放射增敏劑的抗腫瘤作用。
權(quán)利要求
1.一種放射增敏劑，它包含至少一種選自下組的化合物作為活性成分以下通式(1)所代表的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，[化學(xué)通式4] (其中，R101指高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢?，R102指氫原子或高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢?。
2.如權(quán)利要求1所述的放射增敏劑，其特征在于，所述活性成分是至少一種選自下組的化合物以下通式(2)所代表的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，[化學(xué)通式5] (其中，R101指高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢?，R102指氫原子或高級(jí)脂肪酸的?；鶜埢?。
3.如權(quán)利要求2所述的放射增敏劑，其特征在于，在通式(2)中，R101是R-CO-(其中，R是具有13-25個(gè)碳原子的烷基)，R102是氫原子或R-CO-(其中，R是具有13-25個(gè)碳原子的烷基)。
4.如權(quán)利要求3所述的放射增敏劑，其特征在于，在通式(2)中，R101是R-CO-(其中，R是具有13-25中奇數(shù)個(gè)碳原子的直鏈烷基)。
5.如權(quán)利要求3所述的放射增敏劑，其特征在于，在通式(2)中，R102是氫原子。
6.如權(quán)利要求4所述的放射增敏劑，其特征在于，在通式(2)中，R102是氫原子。
7.如權(quán)利要求3所述的放射增敏劑，其特征在于，在通式(2)中，R102是R-CO-(其中，R是具有13-25個(gè)碳原子的烷基)。
8.如權(quán)利要求4所述的放射增敏劑，其特征在于，在通式(2)中，R102是R-CO-(其中，R是具有13-25個(gè)碳原子的烷基)。
全文摘要
一種放射增敏劑，它包含至少一種選自下組的化合物作為活性成分以上通式(1)所代表的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，(其中，R
文檔編號(hào)A61P43/00GK1972955SQ200580020500
公開日2007年5月30日 申請(qǐng)日期2005年6月24日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月24日
發(fā)明者崎元一平, 三浦雅彥, 片岡啟子, 坂口謙吾, 菅原二三男, 太田慶祐, 山崎隆之 申請(qǐng)人:東洋水產(chǎn)株式會(huì)社