專(zhuān)利名稱(chēng)：新的谷氨酰胺?；h(huán)化酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及谷氨酰胺酰基環(huán)化酶(glutaminyl cyclase)(QC，EC2.3.2.5)，其催化N-末端谷氨酰胺殘基轉(zhuǎn)化為焦谷氨酸(5-氧代-脯氨酰，pGlu*)同時(shí)釋放氨的分子內(nèi)環(huán)化和N-末端谷氨酸殘基轉(zhuǎn)化為焦谷氨酸同時(shí)釋放水分子的分子內(nèi)環(huán)化。
背景技術(shù)：
谷氨酰胺?；h(huán)化酶(QC，EC 2.3.2.5)催化N-末端谷氨酰胺殘基轉(zhuǎn)化為焦谷氨酸(pGlu*)同時(shí)釋放氨的分子內(nèi)環(huán)化。1963年，Messer首次由熱帶植物番木瓜(Carica papaya)膠乳中分離得到QC(Messer，M.1963 Nature 4874，1299)。24年后，在動(dòng)物垂體中發(fā)現(xiàn)了一種相應(yīng)的酶活性(Busby，W.H.J.等，1987 J Biol Chem 262，8532-8536；Fischer；W.H.和Spiess，J.1987 Proc Natl Acad Sci USA 84，3628-3632)。對(duì)于哺乳動(dòng)物的QC，通過(guò)QC的Gln至pGlu的轉(zhuǎn)化可見(jiàn)于TRH和GnRH前體(Busby，W.H.J.等，1987 J Biol Chem 262，8532-8536；Fischer，W.H.和Spiess，J.1987 Proc Natl Acad Sci USA84，3628-3632)。此外，最初的QC定位試驗(yàn)顯示與其催化作用的推定的(putative)產(chǎn)物共存于牛垂體中，進(jìn)一步提高所提出的于肽激素合成中的功能(Bockers，T.M.等，1995 J Neuroendocrinol 7，445-453)。相反，植物QC的生理功能較不清楚。就來(lái)自番木瓜的酶而言，認(rèn)為其在植物防御病原微生物中具有一定作用(EI Moussaoui，A.等，2001Cell Mol Life Sci 58，556-570)。最近通過(guò)序列對(duì)比鑒定了來(lái)自其它植物的推定的QC(Dahl，S.W.等，2000 Protein Expr Purif 20，27-36)。然而，這些酶的生理功能仍然不明確。
來(lái)自植物和動(dòng)物的已知QC在底物的N-末端部位對(duì)L-谷氨酰胺有嚴(yán)格的特異性，并且發(fā)現(xiàn)它們的動(dòng)力學(xué)行為符合Michaelis-Menten方程(Pohl，T.等，1991 Proc Natl Acad Sci USA 88，10059-10063；Consalvo，A.P.等，1988 Anal Biochem 175，131-138；Gololobov，M.Y.等，1996Biol Chem Hoppe Seyler 377，395-398)。然而，對(duì)比來(lái)自番木瓜的QC和來(lái)自哺乳動(dòng)物的高度保守的QC的一級(jí)結(jié)構(gòu)卻并未發(fā)現(xiàn)任何序列同源性(Dahl，S.W.等，2000 Protein Expr Purif 20，27-36)。盡管植物的QC似乎屬于一類(lèi)新的酶家族(Dahl，S.W.等，2000Protein Expr Purif 20，27-36)，但發(fā)現(xiàn)哺乳動(dòng)物的QC與細(xì)菌氨肽酶具有顯著的序列同源性(Bateman，R.C.等，2001 Biochemistry 40，11246-11250)，從而得出植物和動(dòng)物的QC具有不同的進(jìn)化起源的結(jié)論。
最近的研究表明重組人QC和源自腦提取物的QC活性催化N-末端谷氨酰胺?；沫h(huán)化作用以及谷氨酸的環(huán)化作用。更驚人的發(fā)現(xiàn)是，環(huán)化酶催化的Glu1轉(zhuǎn)化在pH 6.0左右有利，而Gln1至pGlu-衍生物的轉(zhuǎn)化的最適pH在8.0左右。由于pGlu-Aβ相關(guān)肽的形成可通過(guò)抑制重組人QC及源自豬垂體提取物的QC活性而得以抑制，因此酶QC是開(kāi)發(fā)用于治療阿爾茨海默癥的藥物中的靶之一。
EP 02 011 349.4公開(kāi)了編碼昆蟲(chóng)谷氨酰胺?；h(huán)化酶的多核苷酸及其所編碼的多肽。該申請(qǐng)進(jìn)一步提供了包含表達(dá)載體的宿主細(xì)胞，所述表達(dá)載體包含該發(fā)明的多核苷酸。所分離的多肽和包含昆蟲(chóng)QC的宿主細(xì)胞可用于篩選降低谷氨酰胺?；h(huán)化酶活性的藥物的方法中。這些藥物可用作殺蟲(chóng)劑。
定義酶抑制劑可逆酶抑制劑包括競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑、非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑、緩慢結(jié)合或緊密結(jié)合抑制劑、過(guò)渡態(tài)類(lèi)似物和多底物類(lèi)似物。
競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑顯示i)與所述酶之間的非共價(jià)相互作用，ii)與底物競(jìng)爭(zhēng)所述酶的活性位點(diǎn)，可逆酶抑制劑的主要作用機(jī)理和解離常數(shù)的定義可以從下式中看出 KD=Kf=koffkon]]>酶-抑制劑[E-I]復(fù)合物的形成阻止底物的結(jié)合，因此反應(yīng)不能進(jìn)行至正常的生理產(chǎn)物P。抑制劑濃度[I]增高使[E-I]增加，則底物可以與之結(jié)合的游離酶就更少。
非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑i)與活性位點(diǎn)之外的位點(diǎn)(別構(gòu)結(jié)合位點(diǎn))結(jié)合，ii)引起酶的構(gòu)象變化，使其催化活性下降或消失。
緩慢結(jié)合或緊密結(jié)合抑制劑i)是其中抑制劑與酶之間緩緩達(dá)到平衡的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，ii)(kon緩慢)，可能是由于酶或抑制劑中必須發(fā)生的構(gòu)象變化a)通常是過(guò)渡態(tài)類(lèi)似物b)只有在與酶濃度相似的濃度下才有效c)由于koff值很低，這些類(lèi)型的抑制劑“幾乎”是不可逆的過(guò)渡態(tài)類(lèi)似物是模擬酶催化反應(yīng)過(guò)渡態(tài)的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。酶催化作用的發(fā)生是由于過(guò)渡態(tài)的能量降低，因此，過(guò)渡態(tài)結(jié)合比底物結(jié)合更為有利。
多底物類(lèi)似物對(duì)于涉及兩種或多種底物的反應(yīng)，競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑或過(guò)渡態(tài)類(lèi)似物可以設(shè)計(jì)為含有與底物中的兩種或多種具有相似結(jié)構(gòu)特征的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑或過(guò)渡態(tài)類(lèi)似物。
不可逆酶抑制劑通過(guò)共價(jià)鍵(～100kcal/mol)將未結(jié)合酶和抑制劑與酶抑制劑復(fù)合物之間的平衡(E+IE-I)總是推向右，使所述抑制不可逆。
親合標(biāo)記劑·活性位點(diǎn)定向的不可逆抑制劑(競(jìng)爭(zhēng)性不可逆抑制劑)被所述酶識(shí)別(可逆，特異性結(jié)合)，之后形成共價(jià)鍵，且i)與底物、過(guò)渡態(tài)或產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相似，使藥物與目標(biāo)酶之間能夠進(jìn)行特異性相互作用，ii)含有反應(yīng)性官能團(tuán)(例如親核體，-COCH2Br)，使能夠形成共價(jià)鍵。
下面的反應(yīng)路線(xiàn)描述了活性位點(diǎn)定向的試劑和它的目標(biāo)酶，其中KD是解離常數(shù)，而Kinactivation是共價(jià)鍵形成速率。
E+I↔KDE·I→KinactivationE-I]]>·基于機(jī)理的酶滅活劑(也稱(chēng)為自殺性抑制劑)是活性位點(diǎn)定向的試劑(無(wú)反應(yīng)性形式)，其與酶活性位點(diǎn)結(jié)合，在活性位點(diǎn)處被酶的催化能力轉(zhuǎn)化為反應(yīng)性形式(激活的)。一旦激活后，所述抑制劑與所述酶之間就形成共價(jià)鍵。
下面的反應(yīng)路線(xiàn)顯示基于機(jī)理的酶滅活劑的作用機(jī)理，其中KD是解離常數(shù)，k2是一旦與酶結(jié)合后抑制劑的激活速率，k3是激活的抑制劑P從所述酶上解離的速率(產(chǎn)物仍可能是反應(yīng)性的)，而k4是激活的抑制劑與所述酶之間共價(jià)鍵形成的速率。
滅活(共價(jià)鍵的形成，k4)必須在解離(k3)之前發(fā)生，否則當(dāng)前的活性抑制劑就會(huì)釋放至環(huán)境中。分配比率k3/k4釋放的產(chǎn)物與滅活之間的比率應(yīng)該最小化以使系統(tǒng)的滅活高效且不期望的副反應(yīng)降至最低。分配比率大(利于解離)則導(dǎo)致非特異性反應(yīng)。
反競(jìng)爭(zhēng)性酶抑制劑從反競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑的定義(只與ES復(fù)合物結(jié)合的抑制劑)可以寫(xiě)出以下方程 ES復(fù)合物解離底物的解離常數(shù)等于Ks，而ESI復(fù)合物不解離之(即Ks值等于0)。預(yù)計(jì)Michaelis-Menten型酶的Km會(huì)減小。底物濃度升高使ESI(不能進(jìn)行至反應(yīng)產(chǎn)物的復(fù)合物)濃度升高，因此無(wú)法移除抑制作用。
本發(fā)明優(yōu)選競(jìng)爭(zhēng)性酶抑制劑。最優(yōu)選的是競(jìng)爭(zhēng)性可逆酶抑制劑。
術(shù)語(yǔ)“ki”或“KI”和“KD”是結(jié)合常數(shù)，它們描述抑制劑與酶的結(jié)合以及隨后從酶中釋放。另一種量度是“IC50”值，它反映在給定的底物濃度使酶活性為50％的抑制劑濃度。
術(shù)語(yǔ)“DP IV抑制劑”或“二肽基肽酶IV抑制劑”是本領(lǐng)域技術(shù)人員通常已知的，它是指抑制DP IV或DP IV樣酶的催化活性的酶抑制劑。
“DP IV活性”的定義是二肽基肽酶IV(DP IV)和DP IV樣酶的催化活性。這些酶是脯氨酸后(在較小程度上為丙氨酸后、絲氨酸后或甘氨酸后)切割的絲氨酸蛋白酶，存在于哺乳動(dòng)物體內(nèi)各種組織包括腎、肝和腸中，當(dāng)脯氨酸或丙氨酸在序列中形成與N-末端氨基酸相鄰的殘基時(shí)，它們以高特異性將生物活性肽N-末端的二肽移除。
術(shù)語(yǔ)“PEP抑制劑”或“脯氨酰內(nèi)肽酶抑制劑”是本領(lǐng)域技術(shù)人員通常已知的，是指抑制脯氨酰內(nèi)肽酶(PEP，脯氨酰寡肽酶，POP)的催化活性的酶抑制劑。
“PEP活性”的定義是在其中從肽或蛋白質(zhì)底物的N-末端數(shù)脯氨酸位于氨基酸3位或更高位置的肽或蛋白質(zhì)中能夠水解脯氨酸后鍵的內(nèi)肽酶的催化活性。
本文所用術(shù)語(yǔ)“QC”包括谷氨酰胺?；h(huán)化酶(QC)和QC樣酶。QC和QC樣酶具有相同或相似的酶活性，另外定義為QC活性。在這方面，QC樣酶與QC的基本分子結(jié)構(gòu)可能不同。
本文所用術(shù)語(yǔ)“QC活性”的定義為N-末端谷氨酰胺殘基轉(zhuǎn)化為焦谷氨酸(pGlu*)或N-末端L-高谷氨酰胺或L-β-高谷氨酰胺轉(zhuǎn)化為環(huán)狀焦-高谷氨酰胺衍生物同時(shí)釋放氨的分子內(nèi)環(huán)化。參見(jiàn)路線(xiàn)1和2。
路線(xiàn)1通過(guò)QC進(jìn)行的谷氨酰胺環(huán)化
路線(xiàn)2通過(guò)QC進(jìn)行的L-高谷氨酰胺環(huán)化 本文所用術(shù)語(yǔ)“EC”包括QC和QC樣酶作為谷氨酸環(huán)化酶(EC)的副活性，進(jìn)一步定義為EC活性。
本文所用術(shù)語(yǔ)“EC活性”定義為N-末端谷氨酸殘基被QC轉(zhuǎn)化為焦谷氨酸(pGlu*)的分子內(nèi)環(huán)化。參見(jiàn)路線(xiàn)3。
路線(xiàn)3通過(guò)QC(EC)進(jìn)行的不帶電谷氨酰肽的N-末端環(huán)化 術(shù)語(yǔ)“QC抑制劑”或“谷氨酰胺酰基環(huán)化酶抑制劑”是本領(lǐng)域技術(shù)人員通常已知的，是指抑制谷氨酰胺?；h(huán)化酶(QC)催化活性或其谷氨?；h(huán)化酶(EC)活性的酶抑制劑。
QC抑制的效力考慮到與QC抑制的關(guān)聯(lián)，在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法和醫(yī)學(xué)用途使用QC抑制的Ki為10μM或更低，更優(yōu)選1μM或更低，更優(yōu)選0.1μM或更低或0.01μM或更低，最優(yōu)選0.01μM或更低的活性劑(agent)。事實(shí)上，考慮Kj值在較低的微摩爾，優(yōu)選納摩爾，更優(yōu)選皮摩爾范圍內(nèi)的抑制劑。因此，雖然為方便起見(jiàn)本文將活性劑(active agent)描述為“QC抑制劑”，但是應(yīng)理解這種名稱(chēng)無(wú)意將本發(fā)明的主題限制于特定的作用機(jī)理。
QC抑制劑的分子量一般而言，本發(fā)明的方法或醫(yī)學(xué)用途的QC抑制劑將是小分子，例如分子量為1000g/mol或更低，500g/mol或更低，優(yōu)選400g/mol或更低，更優(yōu)選350g/mol或更低，更優(yōu)選300g/mol或更低。
本文所用術(shù)語(yǔ)“個(gè)體”是指作為治療、觀察或?qū)嶒?yàn)對(duì)象的動(dòng)物，優(yōu)選哺乳動(dòng)物，最優(yōu)選人。
本文所用術(shù)語(yǔ)“治療有效量”是指研究者、獸醫(yī)、醫(yī)生或其它臨床醫(yī)師尋求的在組織系統(tǒng)、動(dòng)物或人中引起生物應(yīng)答或醫(yī)學(xué)應(yīng)答的活性化合物或藥學(xué)活性劑的量，所述生物應(yīng)答或醫(yī)學(xué)應(yīng)答包括所治療疾病或病癥的癥狀的緩解。
本文所用術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)可接受的”包括人用和獸用例如術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)可接受的”包括獸醫(yī)學(xué)可接受的化合物或在人醫(yī)療和保健中可接受的化合物。
在說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)的全文中，若非特別限定，表述“?；北硎綜1-20酰基殘基，優(yōu)選C1-8酰基殘基，且特別優(yōu)選C1-4?；鶜埢?。酰基的實(shí)例包括以下提及的烷?；捅郊柞；?。
“肽”選自二肽至十肽，優(yōu)選二肽、三肽、四肽和五肽。形成所述“肽”的氨基酸可以選自以下列出的氨基酸。
在說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)的全文中，若非特別限定，表述“烷基”表示C1-12烷基，優(yōu)選C1-6烷基。烷基可以是直鏈或支鏈的。合適的烷基包括例如甲基、乙基、丙基(如正丙基和異丙基)、(正丁基、叔丁基和仲丁基)、戊基、己基、庚基(如正庚基)和辛基(如正辛基)。表述“烷(alk)”，例如在“烷氧基”中的“烷”，以及表述“烷(alkan)”，例如在“烷?；敝械摹巴椤睉?yīng)該依照“烷基”的定義進(jìn)行解釋。烷氧基的實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、丁氧基(如正丁氧基)、庚氧基(如正庚氧基)和辛氧基(如正辛氧基)。烷酰基(如?；?的實(shí)例包括乙?；?如乙酰基)、丙酰基和丁?；?br> 若非特別限定，表述“烯基”表示C2-12烯基，優(yōu)選C2-6烯基，其在任何所需位置含有至少一個(gè)雙鍵。烯基可以是直鏈或支鏈的。烯基的實(shí)例包括乙烯基、丙烯基和丁烯基。
若非特別限定，表述“炔基”表示C2-12炔基，優(yōu)選C2-6炔基，其在任何所需位置含有至少一個(gè)三鍵。炔基可以是直鏈或支鏈的。炔基的實(shí)例包括乙炔基、丙炔基和丁炔基。
若非特別限定，表述“環(huán)烷基”表示C3-12環(huán)烷基，優(yōu)選C3-8環(huán)烷基。環(huán)烷基的實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)丙基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。環(huán)烷基可以是支鏈的，在這種情況下碳原子的數(shù)目指該基團(tuán)中碳原子的總數(shù)。
若非特別限定，表述“雜環(huán)”表示其中一個(gè)或多個(gè)(如1、2或3個(gè))環(huán)原子被選自N、S或O的雜原子替代的環(huán)烷基殘基。含有一個(gè)雜原子的雜環(huán)的實(shí)例包括吡咯烷、四氫呋喃和哌啶。這些基團(tuán)可以任選被例如烷基、氧代或羥基取代。
雜環(huán)基的實(shí)例包括取代或未取代的環(huán)氧乙烷基、氮丙定基、氧雜環(huán)丙基、氮雜環(huán)丙基、硫雜環(huán)丙烷基、氧雜環(huán)丁烷基、thietano、吡咯烷基、四氫呋喃基、thiolano、1，1-二氧代-thiolano、1，3-二氧戊環(huán)基、噻唑烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、吡唑烷基、四氫吡喃基、哌啶基、六亞甲基四胺基、哌嗪基、N-甲基-哌嗪基、(2-(N-甲基)-N-哌嗪基)乙基、(4N-(2’-羥基乙基)-1N-哌嗪基)、(2-(4N-(2’-羥基乙基)-1N-哌嗪基)乙氧基)、嗎啉基、2-(N-嗎啉基)乙基以及內(nèi)酰胺、內(nèi)酯、環(huán)二酰亞胺和環(huán)酸酐。
若非特別限定，表述“碳環(huán)”表示含有3-12個(gè)碳原子，更優(yōu)選3-8個(gè)碳原子的碳環(huán)基。本文使用的碳環(huán)基是指除芳基或環(huán)烷基之外的包含至少一個(gè)不含雜原子的碳原子環(huán)的基團(tuán)。碳環(huán)基的實(shí)例包括橋環(huán)系統(tǒng)(如二環(huán)[2.2.1]庚烯基)和部分不飽和的環(huán)系統(tǒng)。
若非特別限定，表述“芳基”表示C6-12芳基，優(yōu)選C6-8芳基。芳基將含有至少一個(gè)芳環(huán)(如一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)環(huán))，但也可以包含部分不飽和環(huán)或完全不飽和環(huán)。具有一個(gè)芳環(huán)的芳基的實(shí)例是苯基。具有兩個(gè)芳環(huán)的芳基的實(shí)例包括萘基。含有部分不飽和環(huán)或完全不飽和環(huán)的芳基的實(shí)例包括并環(huán)戊二烯和茚。如下所述，芳基可以任選被取代。芳基的其它實(shí)例包括4-氟苯基、3-氟苯基、五氟苯基、4-羥基苯基-、3-硝基苯基、4-(三氟甲基)苯基、4-苯胺基、2-聯(lián)苯基、3-聯(lián)苯基、4-聯(lián)苯基、茚基、1-萘基或2-萘基-、1-蒽基、2-蒽基、3-蒽基。
烷基芳基的實(shí)例包括苯甲基(芐基)和苯乙基、2-苯基乙-1-基、對(duì)甲苯基甲基、對(duì)甲苯基乙基、間甲苯基甲基、間甲苯基乙基、鄰甲苯基甲基、鄰甲苯基乙基、2-(4-乙基苯基)-乙-1-基-、2，3-二甲基苯基甲基、2，4-二甲基苯基甲基、2，5-二甲基苯基甲基-、2，6-二甲基苯基甲基、3，4-二甲基苯基甲基、3，5-二甲基苯基甲基、2，4，6-三甲基苯基甲基、2，3-二甲基苯基乙基、2，4-二甲基苯基乙基、2，5-二甲基苯基乙基、2，6-二甲基苯基乙基、3，4-二甲基苯基乙基、3，5-二甲基苯基乙基、2，4，6-三甲基苯基乙基、二苯甲基(＝二苯基甲基)、二苯甲基(＝二苯基乙基)、三苯甲基(＝三苯基甲基)、三苯甲基(＝三苯基乙基)、α-苯乙烯基、β-苯乙烯基、枯烯基、2-乙基苯基甲基、3-乙基苯基甲基、4-乙基苯基甲基、2-乙基苯基乙基、3-乙基苯基乙基、4-乙基苯基乙基、2-氟芐基、1-甲基-2-氟苯-6-基甲基、1-甲基-2-氟苯-4-基甲基、1-甲基-2-氟苯-6-基乙基、1-甲基-2-氟苯-4-基乙基、1H-茚基甲基-、2H-茚基甲基、1H-茚基乙基、2H-茚基乙基、茚滿(mǎn)基甲基、茚滿(mǎn)-1-酮-2-基甲基、茚滿(mǎn)-1-酮-2-基乙基、四氫化萘基甲基、四氫化萘基乙基、芴基甲基、芴基乙基、(3-苯基)環(huán)戊-1-基、二氫化萘基甲基、二氫化萘基乙基或(4-環(huán)己基)戊基甲基、(4-環(huán)己基)戊基乙基。
若非特別限定，表述“雜芳基”表示其中一個(gè)或多個(gè)(如1、2、3或4個(gè)，優(yōu)選1、2或3個(gè))環(huán)原子被選自N、S和O的雜原子替代的芳基殘基，或者含有一個(gè)或多個(gè)(如1、2、3或4個(gè)，優(yōu)選1、2或3個(gè))選自N、S和O的雜原子的5元芳環(huán)。如下所述，雜芳基可以任選被取代。雜芳基的實(shí)例包括吡啶(如2、3或4-吡啶)、嘧啶、喹啉、吡咯、呋喃、噻吩、噁唑、吡唑、苯并二氧戊環(huán)、苯并二噁烷、苯并噻吩、苯并二oxepine和噻唑基、1-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、3-苯基-1-吡咯基、異噁唑基、異噻唑基、3-吡唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、四唑基、噠嗪基、吡嗪基、吲唑基、6-吲哚基、苯并咪唑基、異喹啉基、嘌呤基、咔唑啉基(carbazolinyl)、吖啶基和2，3’-聯(lián)呋喃基。
烷基雜芳基的實(shí)例包括吡啶基甲基、N-甲基吡咯-2-甲基、N-甲基吡咯-2-乙基、N-甲基吡咯-3-甲基、N-甲基吡咯-3-乙基、2-甲基吡咯-1-甲基、2-甲基吡咯-1-乙基、3-甲基吡咯-1-甲基、3-甲基吡咯-1-乙基、4-吡啶基甲基、4-吡啶基乙基、2-(噻唑-2-基)乙基、四氫異喹啉基甲基、四氫異喹啉基乙基、2-乙基吲哚-1-甲基、2-乙基吲哚-1-乙基、3-乙基吲哚-1-甲基、3-乙基吲哚-1-乙基、4-甲基吡啶-2-甲基、4-甲基吡啶-2-基乙基、4-甲基吡啶-3-甲基、4-甲基吡啶-3-乙基。
前述芳基和雜芳基在合適時(shí)可以任選被取代。
表述“取代”或“被取代”包括被一個(gè)或多個(gè)(如1、2或3個(gè)，優(yōu)選1或2個(gè))單價(jià)或多價(jià)官能團(tuán)取代。合適的取代基包括烷基、環(huán)烷基、芳基(如苯基)、雜芳基(如呋喃基)、碳環(huán)、雜環(huán)、烷氧基、環(huán)烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、碳環(huán)氧基、雜環(huán)氧基、烯氧基、炔氧基、烯基、炔基、?；⑼轷；⑼檠趸轷；?、烷氧基烷基、雜芳基烷基、芳基烷基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、硝基、-S-烷基(如甲硫基)、鹵素(如氟、氯、溴和碘)、氰基、羥基、-SO2烷基、-SO2芳基、-SO2雜芳基、-SO2環(huán)烷基、-SO2雜環(huán)、-CO2H、-CO2烷基、-NH2、-NH烷基、-N(烷基)2(如二甲氨基)、-CO-N(烷基)2和-CO-NH(烷基)。
包括諸如烷氧基以及烯基、炔基和環(huán)烷基的衍生物在內(nèi)的烷基可以任選被鹵素取代，如被氟取代。例如，鹵素取代的烷基包括三氟甲基，而鹵素取代的烷氧基包括三氟甲氧基。
術(shù)語(yǔ)“鹵素”分別包括氟(-F)、氯(-Cl)、溴(-Br)和碘(-I)。
可用于本發(fā)明的氨基酸是L和D-氨基酸、N-烷基化氨基酸、N-甲基氨基酸、氮雜氨基酸；IIe和Thr的別形式和蘇型形式-，其可以例如是α-、β-或ω-氨基酸，其中優(yōu)選α-氨基酸。
氨基酸的實(shí)例為天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、精氨酸(Arg)、賴(lài)氨酸(Lys)、組氨酸(His)、甘氨酸(Gly)、絲氨酸(Ser)、半胱氨酸(Cys)、蘇氨酸(Thr)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酰胺(Gln)、酪氨酸(Tyr)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、纈氨酸(Val)、異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、甲硫氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)、羥脯氨酸(Hyp)、β-丙氨酸(β-Ala)、2-氨基辛酸(Aoa)、乙酸乙酯-(2)-羧酸(Ace)、2-哌啶酸(Pip)、3-氨基丙酸、4-氨基丁酸等，α-氨基異丁酸(Aib)、肌氨酸(Sar)、鳥(niǎo)氨酸(Orn)、瓜氨酸(Cit)、高精氨酸(Har)、叔丁基丙氨酸(叔丁基-Ala)、叔丁基甘氨酸(叔丁基-Gly)、N-甲基異亮氨酸(N-MeIle)、苯基甘氨酸(Phg)、環(huán)己基丙氨酸(Cha)、正亮氨酸(Nle)、磺基丙氨酸(Cya)和甲硫氨酸亞砜(MSO)、乙酰-Lys，修飾的氨基酸如磷酰-絲氨酸(Ser(P))、芐基-絲氨酸(Ser(Bzl))和磷酰-酪氨酸(Tyr(P))、2-氨基丁酸(Abu)、氨基乙基半胱氨酸(AECys)、羧甲基半胱氨酸(Cmc)、脫氫丙氨酸(Dha)、脫氫氨基-2-丁酸(Dhb)、羧基谷氨酸(Gla)、高絲氨酸(Hse)、羥基賴(lài)氨酸(Hyl)、順式-羥脯氨酸(cisHyp)、反式-羥脯氨酸(transHyp)、異纈氨酸(Iva)、焦谷氨酸(Pyr)、正纈氨酸(Nva)、2-氨基苯甲酸(2-Abz)、3-氨基苯甲酸(3-Abz)、4-氨基苯甲酸(4-Abz)、4-(氨基甲基)苯甲酸(Amb)、4-(氨基甲基)環(huán)己烷羧酸(4-Amc)、青霉胺(Pen)、2-氨基-4-氰基丁酸(Cba)、環(huán)烷-羧酸。ω-氨基酸的實(shí)例為例如5-Ara(氨基戊酸)、6-Ahx(氨基己酸)、8-Aoc(氨基辛酸)、9-Anc(氨基壬酸)、10-Adc(氨基癸酸)、11-Aun(氨基十一酸)、12-Ado(氨基十二酸)。其它氨基酸為茚滿(mǎn)基甘氨酸(Igl)、二氫吲哚-2-羧酸(Idc)、十氫吲哚-2-羧酸(Oic)、二氨基丙酸(Dpr)、二氨基丁酸(Dbu)、萘基丙氨酸(1-Nal)和(2-Nal)、4-氨基苯丙氨酸(Phe(4-NH2))、4-苯甲酰苯丙氨酸(Bpa)、二苯基丙氨酸(Dip)、4-溴苯丙氨酸(Phe(4-Br))、2-氯苯丙氨酸(Phe(2-Cl))、3-氯苯丙氨酸(Phe(3-Cl))、4-氯苯丙氨酸(Phe(4-Cl))、3，4-氯苯丙氨酸(Phe(3，4-Cl2))、3-氟苯丙氨酸(Phe(3-F))、4-氟苯丙氨酸(Phe(4-F))、3，4-氟苯丙氨酸(Phe(3，4-F2))、五氟苯丙氨酸(Phe(F5))、4-胍基苯丙氨酸(Phe(4-胍基))、高苯丙氨酸(hPhe)、3-jodo苯丙氨酸(Phe(3-J))、4-jodo苯丙氨酸(Phe(4-J))、4-甲基苯丙氨酸(Phe(4-Me))、4-硝基苯丙氨酸(Phe(4-NO2))、二苯基丙氨酸(Bip)、4-膦?；谆奖彼?Pmp)、環(huán)己基甘氨酸(Ghg)、3-吡啶基丙氨酸(3-Pal)、4-吡啶基丙氨酸(4-Pal)、3，4-脫氫脯氨酸(A-Pro)、4-酮基脯氨酸(Pro(4-酮基))、硫代脯氨酸(Thz)、異哌啶甲酸(isonipecotic acid，Inp)、1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸(Tic)、炔丙基甘氨酸(Pra)、6-羥基正亮氨酸(NU(6-OH))、高酪氨酸(hTyr)、3-jodo酪氨酸(Tyr(3-J))、3，5-二jodo酪氨酸(Tyr(3，5-J2))、甲基酪氨酸(Tyr(Me))、2’，6-二甲基酪氨酸(Dmt)、3-NO2-酪氨酸(Tyr(3-NO2))、磷酸酪氨酸(Tyr(PO3H2))、烷基甘氨酸、1-氨基茚滿(mǎn)-1-羧酸、2-氨基茚滿(mǎn)-2-羧酸(Aic)、4-氨基甲基吡咯-2-羧酸(Py)、4-氨基吡咯烷-2-羧酸(Abpc)、2-氨基四氫化萘-2-羧酸(Atc)、二氨基乙酸(Gly(NH2))、二氨基丁酸(Dab)、1，3-二氫-2H-isoinole-羧酸(Disc)、高環(huán)己基丙氨酸(hCha)、高苯丙氨酸(hPhe或Hof)、反式-3-苯基-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸、4-苯基-吡咯烷-2-羧酸、5-苯基-吡咯烷-2-羧酸、3-吡啶基丙氨酸(3-Pya)、4-吡啶基丙氨酸(4-Pya)、苯乙烯基丙氨酸、四氫異喹啉-1-羧酸(Tiq)、1，2，3，4-四氫去甲哈爾滿(mǎn)-3-羧酸(Tpi)、β-(2-噻吩基)丙氨酸(Tha)。
“肽”選自二肽至十肽，優(yōu)選二肽、三肽、四肽和五肽。形成所述“肽”的氨基酸可以選自以上列出的氨基酸。
“氮雜氨基酸”的定義為其中手性α-CH基團(tuán)被氮原子替代的氨基酸，而“氮雜肽”的定義是肽鏈中一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基的手性α-CH基團(tuán)被氮原子替代的肽。
遺傳密碼中編碼的氨基酸以外的其它氨基酸也可以包括在本發(fā)明范圍內(nèi)的肽化合物之內(nèi)，它們可以在這一總體方案中分類(lèi)。蛋白原氨基酸定義為源自天然蛋白質(zhì)的α-氨基酸。非蛋白原氨基酸定義為所有其它氨基酸，它們不是常規(guī)天然蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)單元。
“肽模擬物”本身是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。它們優(yōu)選定義為具有肽樣二級(jí)結(jié)構(gòu)且任選具有其它結(jié)構(gòu)特征的化合物；它們的作用方式與天然肽的作用方式十分相似或相同；但是與天然肽相比，特別是相對(duì)于受體或酶而言，它們的活性(如作為拮抗劑或抑制劑)可以被修飾。此外，它們可以模擬天然肽的作用(激動(dòng)劑)。肽模擬物的實(shí)例是骨架模擬物、非肽模擬物、類(lèi)胨(peptoide)、肽核酸、低聚吡咯啉酮(oligopyrrolinone)、插烯肽(vinylogpeptide)和低聚氨基甲酸酯(oligocarbamates)。這些肽模擬物的定義請(qǐng)參見(jiàn)Lexikon der Chemie，Spektrum Akademischer Verlag Heidelberg，Berlin，1999。
使用這些模擬物結(jié)構(gòu)的目的是提高活性，提高選擇性以降低副作用，保護(hù)化合物免受酶降解以延長(zhǎng)作用。
立體異構(gòu)體請(qǐng)求保護(hù)的化合物的所有可能的立體異構(gòu)體都包括在本發(fā)明之內(nèi)。
當(dāng)本發(fā)明的化合物具有至少一個(gè)手性中心時(shí)，則它們可以相應(yīng)地以對(duì)映體形式存在。當(dāng)所述化合物具有兩個(gè)或多個(gè)手性中心時(shí)，則它們還可以以非對(duì)映體形式存在。應(yīng)該理解，所有這些異構(gòu)體和它們的混合物都涵蓋于本發(fā)明的范圍內(nèi)。
立體異構(gòu)體的制備和分離當(dāng)制備本發(fā)明化合物的方法得到立體異構(gòu)體的混合物時(shí)，則可以通過(guò)常規(guī)技術(shù)如制備色譜法分離這些異構(gòu)體。這些化合物可以以外消旋形式制備，或者可以通過(guò)對(duì)映特異性合成或通過(guò)拆分來(lái)制備單獨(dú)的對(duì)映體。例如，可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)如通過(guò)與旋光酸如(-)-二對(duì)甲苯酰-d-酒石酸和/或(+)-二對(duì)甲苯酰-1-酒石酸成鹽而形成非對(duì)映體對(duì)，然后通過(guò)分步結(jié)晶和游離堿再生將這些化合物拆分為它們的對(duì)映體組分。所述化合物還可以通過(guò)形成非對(duì)映體酯或酰胺，然后經(jīng)色譜分離并除去手性助劑而得到分離?；蛘撸梢允褂檬中訦PLC柱拆分所述化合物。
藥學(xué)可接受的鹽由于游離化合物與它們的鹽形式或溶劑合物形式之間的關(guān)系密切，所以只要條件允許或適當(dāng)，在本文中提及的化合物也欲包括相應(yīng)的鹽或溶劑合物。
適于醫(yī)學(xué)用途的式(1)的化合物的鹽和溶劑合物及其生理功能性衍生物是其中抗衡離子或締合溶劑是藥學(xué)可接受的鹽和溶劑合物。但是，具有非藥學(xué)可接受抗衡離子或締合溶劑的鹽和溶劑合物也在本發(fā)明的范圍內(nèi)，例如，可用作制備其它化合物及其藥學(xué)可接受的鹽和溶劑合物的中間體。
本發(fā)明的合適的鹽包括與有機(jī)酸或堿和無(wú)機(jī)酸或堿形成的鹽。藥學(xué)可接受的酸加成鹽包括自鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、檸檬酸、酒石酸、磷酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、三氟乙酸、三苯基乙酸、氨基磺酸、對(duì)氨基苯磺酸、琥珀酸、草酸、富馬酸、馬來(lái)酸、蘋(píng)果酸、扁桃酸、谷氨酸、天冬氨酸、草酰乙酸、甲磺酸、乙磺酸、芳基磺酸(例如對(duì)甲苯磺酸、苯磺酸、萘磺酸或萘二磺酸)、水楊酸、戊二酸、葡糖酸、丙三羧酸、肉桂酸、取代的肉桂酸(如苯基、甲基、甲氧基或鹵素取代的肉桂酸，包括4-甲基和4-甲氧基肉桂酸)、抗壞血酸、油酸、萘甲酸、羥基萘甲酸(如1-或3-羥基-2-萘甲酸)、萘丙烯酸(如萘-2-丙烯酸)、苯甲酸、4-甲氧基苯甲酸、2-或4-羥基苯甲酸、4-氯苯甲酸、4-苯基苯甲酸、苯丙烯酸(如1，4-苯二丙烯酸)、羥乙磺酸、高氯酸、丙酸、羥基乙酸、羥基乙磺酸、雙羥萘酸、環(huán)己烷氨基磺酸、水楊酸、己糖酸和三氟乙酸形成的鹽。藥學(xué)可接受的堿鹽包括銨鹽、堿金屬鹽如鈉鹽和鉀鹽、堿土金屬鹽如鈣鹽和鎂鹽以及與有機(jī)堿如二環(huán)己胺和N-甲基-D-葡糖胺成的鹽。本發(fā)明化合物的所有藥學(xué)可接受的酸加成鹽形式都欲包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
溶劑合物的實(shí)例包括水合物。
多晶型晶體形式此外，所述化合物的一些晶體形式可能以多晶型存在，它們均欲包括在本發(fā)明之內(nèi)。另外，一些化合物可以與水形成溶劑合物(即水合物)或與常規(guī)有機(jī)溶劑形成溶劑合物，這些溶劑合物均欲涵蓋于本發(fā)明的范圍之內(nèi)。所述化合物，包括它們的鹽，還可以以它們的水合物形式獲得，或者包括用于它們的結(jié)晶的其它溶劑。
前藥本發(fā)明在其范圍內(nèi)還包括本發(fā)明化合物的前藥。一般而言，這些前藥是所述化合物的功能性衍生物，它們?cè)隗w內(nèi)可以容易地轉(zhuǎn)化為期望的治療活性化合物。因此，在這些情況下，本發(fā)明的治療方法，術(shù)語(yǔ)“給藥”應(yīng)涵蓋用請(qǐng)求保護(hù)的一種或多種化合物的前藥形式治療所描述的各種病癥，但這些前藥形式在給藥于個(gè)體后在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為上述的化合物。用于選擇和制備合適的前藥衍生物的常規(guī)方法在例如“Design of Prodrugs”，ed.H.Bundgaard，Elsevier，1985以及專(zhuān)利申請(qǐng)DE 198 28 113、DE 198 28 114、WO 99/67228和WO 99/67279中有描述，本文引入這些文獻(xiàn)作為參考。
保護(hù)基在制備本發(fā)明化合物的任何方法中都可能需要和/或期望保護(hù)任何相關(guān)分子上的敏感或反應(yīng)性基團(tuán)。這可以使用常規(guī)保護(hù)基實(shí)現(xiàn)，如Protective Groups in Organic Chemistry，ed.J.F.W.McOmie，PlenumPress，1973和T.W.Greene & P.G.M.Wuts，Protective Groups inOrganic Synthesis，John Wiley & Sons，1991中所描述的保護(hù)基，本文引入這些文獻(xiàn)作為參考。在方便的后續(xù)步驟中可以使用本領(lǐng)域已知的方法除去所述保護(hù)基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“組合物”欲涵蓋包含治療有效量的請(qǐng)求保護(hù)的化合物的產(chǎn)品，以及包含任何直接或間接地來(lái)自請(qǐng)求保護(hù)的化合物組合的產(chǎn)品的產(chǎn)品。
蓋侖制劑的載體和添加劑這樣，對(duì)于液體口服制劑如混懸劑、酏劑和溶液劑而言，合適的載體和添加劑可以有利地包括水、甘油、油、醇、調(diào)味劑、防腐劑、著色劑等；對(duì)于固體口服制劑如散劑、膠囊劑、凝膠帽(gelcap)和片劑而言，合適的載體和添加劑包括淀粉、糖、稀釋劑、制粒劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑、崩解劑等。
可以加入混合物中的載體包括必需的惰性藥用賦形劑，包括但不限于合適的粘合劑、助懸劑、潤(rùn)滑劑、食用香料、甜味劑、防腐劑、包衣劑、崩解劑、染料和著色劑。
作為靶向藥物載體的可溶性聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯酰胺苯酚、聚羥乙基天冬酰胺苯酚或棕櫚酰殘基取代的聚環(huán)氧乙烷聚賴(lài)氨酸。此外，本發(fā)明的化合物可以偶聯(lián)于一類(lèi)可以用于實(shí)現(xiàn)藥物控釋的可生物降解的聚合物如聚乳酸(polyactic acid)、聚ε己內(nèi)酯、聚羥基丁酸(polyhydroxy butyeric acid)、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯和交聯(lián)或兩性水凝膠嵌段共聚物。
合適的粘合劑包括但不限于淀粉、明膠、天然糖類(lèi)如葡萄糖或β乳糖、玉米甜味劑、天然橡膠和合成橡膠如阿拉伯膠、黃蓍膠或油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。
崩解劑包括但不限于淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤(rùn)土、黃原膠等。
肽序列本文提及和使用的肽具有如下序列Aβ(1-42)Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val-Ile-AlaAβ(1-40)Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-ValAβ(3-42)Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val-Ile-AlaAβ(3-40)Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-ValAβ(1-11)aAsp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-NH2Aβ(3-11)aGlu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-NH2
Aβ(1-21)aAsp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-NH2Aβ(3-21)aGlu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-NH2Gln3-Aβ(3-40)Gln-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-ValGln3-Aβ(3-21)aGln-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-NH2Gln3-Aβ(1-11)aAsp-Ala-Gln-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-NH2Gln3-Aβ(3-11)aGln-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-NH2發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供作為谷氨酰胺酰基環(huán)化酶(QC，EC 2.3.2.5)抑制劑的化合物。
哺乳動(dòng)物中QC的生理底物是例如[Glu3]淀粉樣β-蛋白(3-40/42)、[Gln3]淀粉樣β-蛋白(3-40/42)、胃泌素、神經(jīng)降壓肽、FPP、CCL 2、CCL 7、CCL 8、CCL 16、CCL 18、分形素(fractalkine)、阿立新A(OrexinA)、[Gln3]-胰高血糖素(3-29)和[Gln5]-P物質(zhì)(5-11)。本發(fā)明的化合物和包含至少一種本發(fā)明的化合物的藥物組合物可用于治療可以通過(guò)調(diào)節(jié)QC活性而治療的病癥。
通過(guò)給予哺乳動(dòng)物QC(EC)活性抑制劑可能預(yù)防或緩解或治療神經(jīng)病癥(阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、致病性精神病(pathogenic psychotic condition)、精神分裂癥、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙、體液調(diào)節(jié)障礙(impaired regulation，body fluid)、高血壓、發(fā)熱、睡眠失調(diào)、厭食癥、包括抑郁癥在內(nèi)的焦慮相關(guān)病癥、包括癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)作、停藥和酒精中毒、包括認(rèn)知障礙和癡呆在內(nèi)的神經(jīng)變性病癥)。
此外，通過(guò)給予哺乳動(dòng)物本發(fā)明的化合物可能刺激骨髓祖細(xì)胞增殖。
此外，給予本發(fā)明的QC抑制劑可能導(dǎo)致雄性能育性的抑制。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供QC(EC)活性抑制劑與其它活性劑組合的用途，特別是用于治療神經(jīng)病癥。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明提供式1的新的QC(EC)抑制劑， 式1其中A是烷基鏈、烯基鏈或炔基鏈；或者A是選自以下的基團(tuán)
其中R6、R7、R8、R9和R10獨(dú)立地是H或烷基鏈、烯基鏈、炔基鏈、環(huán)烷基、碳環(huán)、芳基、雜芳基或雜環(huán)；n和n1獨(dú)立地是1-5；m是1-5；o是0-4；且B是選自(VI)-(XIV)的基團(tuán)
其中D和E獨(dú)立地代表烷基鏈、烯基鏈、炔基鏈、環(huán)烷基、碳環(huán)、芳基、-烷基芳基、雜芳基、-烷基雜芳基、?；螂s環(huán)，X代表CR20R21、O、S、NR19，條件是對(duì)于式(VIII)和(IX)，若Z＝CH，則X是O或S；R19選自H、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、烷氧基、芳氧基、羰基、酰氨基、羥基、硝基、氨基、氰基；R20和R21獨(dú)立地選自H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)、芳基、雜芳基、烷氧基、芳氧基、羰基、酰氨基、硝基、氨基、氰基、三氟甲基；X1、X2和X3獨(dú)立地是O或S，條件是X2和X3不都是O；Y是O或S，條件是當(dāng)R17與R18形成的碳環(huán)是三元環(huán)時(shí)，則Y不能是O；Z是CH或N；R11、R12、R13和R14可以獨(dú)立地選自H、烷基鏈、烯基鏈、炔基鏈、環(huán)烷基、碳環(huán)、芳基、雜芳基、雜環(huán)、鹵素、烷氧基-、-硫烷基、羧基、羧酸酯、羰基、脲、碳酰亞胺、硫脲或硫代羰基、氨基、硝基；R15和R16彼此獨(dú)立地是H或支鏈或非支鏈烷基鏈，或者支鏈或非支鏈烯基鏈；R17和R18獨(dú)立地選自H或烷基鏈、烯基鏈、炔基鏈、碳環(huán)、芳基、雜芳基、雜烷基，或者可以連接形成至多6個(gè)環(huán)原子的碳環(huán)；n是0或1；條件是以下化合物排除在式1之外
若A選自烷基鏈、烯基鏈或炔基鏈，則優(yōu)選A是C1-C7烷基鏈、C1-C7烯基鏈或C1-C7炔基鏈。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，A是非支鏈C2-5烷基鏈，特別是非支鏈C3-4烷基鏈，特別是非支鏈C3烷基鏈。在本發(fā)明的第二個(gè)實(shí)施方案中，A是在2位被一個(gè)(即S或R構(gòu)象)或兩個(gè)甲基取代的C3烷基鏈。
若A選自式(I)-(V)，則優(yōu)選A選自式(I)-(IV)的基團(tuán)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，A代表式(IV)的基團(tuán)，其中n1各自等于1且m＝1-4，特別是m＝1。在本發(fā)明的第二個(gè)實(shí)施方案中，A是式(I)、(II)或(III)的基團(tuán)，其中n和n1各自等于1且R6、R7、R8、R9和R10代表H。
優(yōu)選R6、R7、R8、R9和R10代表氫或甲基。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，基團(tuán)B選自(VI)、(VIa)、(VIb)、(VII)、(X)、(XI)、(XII)、(XIII)和(XIV)。在本發(fā)明的第二個(gè)實(shí)施方案中，B代表式(VI)。在本發(fā)明的第三個(gè)實(shí)施方案中，B代表式(VIa)。在本發(fā)明的第四個(gè)實(shí)施方案中，B代表式(VIb)。在本發(fā)明的第五個(gè)實(shí)施方案中，B代表式(VII)。在本發(fā)明的第六個(gè)實(shí)施方案中，B代表式(X)。在本發(fā)明的第七個(gè)實(shí)施方案中，B代表式(XI)。在本發(fā)明的第八個(gè)實(shí)施方案中，B代表式(XII)。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，B代表式(XIII)。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，B代表式(XIV)。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，B代表式(VI)或(VII)。
若B代表式(IX)的基團(tuán)，則合適地，A不代表炔基。
優(yōu)選D和E獨(dú)立地代表芐基、芳基、雜芳基或雜環(huán)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，D和E代表芳基，特別是苯基或萘基，特別是取代的苯基。當(dāng)D代表苯基時(shí)，優(yōu)選的取代基包括烷氧基-、-硫烷基、鹵素或羧酸烷基或芳基酯。還優(yōu)選氟、氯、溴、碘、三氟甲基、三氟甲氧基、甲氧基、乙氧基、芐氧基、氰基、乙酰基、二甲氨基、甲基硫烷基、硝基、噁唑基、吡唑基、異丙基、乙基和甲氧羰基。當(dāng)苯基被單取代時(shí)，優(yōu)選取代在4位。D和E可以代表的其它合適的芳基包括二氫苯并二噁英、苯并二氧雜環(huán)戊二烯、苯并二硫雜環(huán)戊二烯、二氫苯并二硫雜環(huán)己二烯(dihydrobenzodithiine)、苯并氧硫雜環(huán)戊二烯(benzooxathiole)和二氫苯并氧硫雜環(huán)己二烯。D和E可以代表的特別優(yōu)選的基團(tuán)是3，4-(二甲氧基)苯基。
優(yōu)選R20和R21代表硝基、氰基、三氟甲基，或者，若R20是H，則R21是硝基、氰基、三氟甲基，或者，若R21是H，則R20是硝基、氰基、三氟甲基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，X或Y是S、O或NR1。優(yōu)選X或Y是S。
優(yōu)選Z代表N。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R11和R14是H。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R12和R13獨(dú)立地選自烷氧基或硫烷基、鹵素或羧酸烷基酯或苯基。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R15和R16中至少一個(gè)是H，更優(yōu)選R15和R16都是H。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R17和R18中一個(gè)是H，而另一個(gè)是甲基。還優(yōu)選其中R17和R18中一個(gè)是H而另一個(gè)是苯基的化合物。另外優(yōu)選其中R17與R18形成環(huán)原子至多6個(gè)的碳環(huán)的化合物。
優(yōu)選的化合物包括以下實(shí)施例13、119和125定義的化合物。
本發(fā)明提供用作藥物的式1的化合物，條件是以下化合物排除在式1之外 上述條件的化合物(a)在Ganellin等，(1995)J Med Chem 38(17)3342-3350中作為化合物7被公開(kāi)。該論文公開(kāi)所述化合物作為組胺H3受體的弱抑制劑。
上述條件的化合物(b)在Venkatachalam等，(2001)Bioorganic MedChem Lett 11，523-528中作為化合物7被公開(kāi)。其公開(kāi)所述化合物作為HIV1逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。
上述條件的化合物(c)在Moon等，(1991)J Med Chem 34，2314-2327中作為化合物19b被公開(kāi)。該論文公開(kāi)所述化合物作為膽堿能激動(dòng)劑，其在阿爾茨海默癥的治療中有潛在的用途。
上述條件的化合物(d)在Wright等，(1986)J Med Chem 29，523-530中作為化合物99、100和102-103被公開(kāi)。該論文公開(kāi)所述化合物作為血栓素合成酶抑制劑。
若不是因條件“X2和X3不都是O”，則會(huì)被式1包括的某些化合物在Wright等，(1987)J Med Chem 30，2277-2283中被公開(kāi)作為血栓素合成酶抑制劑。
若不是因條件“當(dāng)R17與R18形成的碳環(huán)是三元環(huán)時(shí)，則Y不能是O”，則會(huì)被式1包括的某些化合物在EP 0 117 462 A2中被公開(kāi)作為血栓素合成酶抑制劑。
此外，本發(fā)明提供式1的QC抑制劑用于制備治療選自阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、致病性精神病、精神分裂癥、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙、體液調(diào)節(jié)障礙、高血壓、發(fā)熱、睡眠失調(diào)、厭食癥、包括抑郁癥在內(nèi)的焦慮相關(guān)病癥、包括癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)作、停藥和酒精中毒、包括認(rèn)知障礙和癡呆在內(nèi)的神經(jīng)變性病癥的疾病的藥物的用途，并且不受排除化合物(a)-(d)的條件限制，不受X2和X3不都是O的條件限制，不受當(dāng)R17與R18形成的碳環(huán)是三元環(huán)時(shí)，則Y不能是O的條件限制。
本發(fā)明還提供式1的QC抑制劑，其不受排除化合物(a)-(d)的條件限制，不受X2和X3不都是O的條件限制，不受當(dāng)R17與R18形成的碳環(huán)是三元環(huán)時(shí)，則Y不能是O的條件限制，用于治療選自阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、致病性精神病、精神分裂癥、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙、體液調(diào)節(jié)障礙、高血壓、發(fā)熱、睡眠失調(diào)、厭食癥、包括抑郁癥在內(nèi)的焦慮相關(guān)病癥、包括癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)作、停藥和酒精中毒、包括認(rèn)知障礙和癡呆在內(nèi)的神經(jīng)變性病癥的疾病。
本發(fā)明還提供治療選自阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、致病性精神病、精神分裂癥、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙、體液調(diào)節(jié)障礙、高血壓、發(fā)熱、睡眠失調(diào)、厭食癥、包括抑郁癥在內(nèi)的焦慮相關(guān)病癥、包括癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)作、停藥和酒精中毒、包括認(rèn)知障礙和癡呆在內(nèi)的神經(jīng)變性病癥的疾病的方法，其包括給予哺乳動(dòng)物優(yōu)選人治療活性量的至少一種式1的化合物，并且不受排除化合物(a)-(d)的條件限制，不受X2和X3不都是O的條件限制，不受當(dāng)R17與R18形成的碳環(huán)是三元環(huán)時(shí)，則Y不能是O的條件限制。
最優(yōu)選地，本發(fā)明提供治療選自阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病和亨廷頓舞蹈癥的疾病的方法和相應(yīng)的用途，其包括給予哺乳動(dòng)物優(yōu)選人治療活性量的至少一種式1的化合物，并且不受排除化合物(a)-(d)的條件限制。
合適地，在上述方法和用途中，所述化合物不是條件的化合物(c)。
另一個(gè)化合物，即以下所示的式1*的化合物，也是新的QC抑制劑 式1*
式1*的化合物可以以上述與式1的化合物相似的方式用于本發(fā)明的方法和用途中。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式1a的新的QC(EC)抑制劑，

其中R如實(shí)施例1-53中定義。


在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式1b的新的QC(EC)抑制劑，

其中R1和R2如實(shí)施例54-95中定義。


在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式1c的新的QC(EC)抑制劑，

其中R3如實(shí)施例96-102中定義。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式1d的新的QC(EC)抑制劑，

其中環(huán)上的位置如實(shí)施例103-105中定義。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式1e的新的QC(EC)抑制劑，

其中R4和R5如實(shí)施例106-109中定義。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式1f的新的QC(EC)抑制劑，

其中R6如實(shí)施例110-112中定義。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式1g的新的QC(EC)抑制劑，

其中R7、R8和R9如實(shí)施例113-132中定義。


在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式1h的新的QC(EC)抑制劑，

其中n如實(shí)施例133-135中定義。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式1i的新的QC(EC)抑制劑，

其中m如實(shí)施例136和137中定義。

其它新的QC(EC)抑制劑是實(shí)施例138-141。
實(shí)施例的合成合成路線(xiàn)1實(shí)施例1-53、96-102、136-137的合成 試劑和條件(a)NaH，DMF，4h，rt.；(b)8h，100℃；(c)H2N-NH2，EtOH，8h，回流然后4N HCl，6h，回流；(d)R3-NCO，EtOH，6h，回流；(e)3，4-二甲氧基-苯基-異硫氰酸酯合成路線(xiàn)2實(shí)施例54-95的合成 試劑和條件(a)R-NCS，EtOH，6h，回流；(b)WSCD，1H-咪唑-1-丙胺，DMF，2h，r.t.
合成路線(xiàn)3實(shí)施例103-105的合成 試劑和條件(a)NaH，DMF，rt.，3h；(b)LiAlH4，二噁烷，回流，1h；(c)R-NCS，EtOH，回流6h合成路線(xiàn)4實(shí)施例106-109的合成 試劑和條件(a)EtOH，2h，回流合成路線(xiàn)5實(shí)施例110-112的合成 試劑和條件(a)1H-咪唑-1-丙胺，三乙胺，甲苯，12h，回流合成路線(xiàn)6實(shí)施例113-132的合成 試劑和條件(a)CAIBE，1H-咪唑-1-丙胺，二噁烷，0℃，12h；(b)Laweson試劑，EtOH，回流，8h合成路線(xiàn)7實(shí)施例133-135的合成 試劑和條件(a)1H-咪唑-1-丙酰氯，CH2Cl2，-10℃，1h；(b)Lawesson試劑，二噁烷，回流，8h合成路線(xiàn)8實(shí)施例138的合成 試劑和條件(a)EtOH，回流，8h合成路線(xiàn)9實(shí)施例139的合成 試劑和條件(a)75％濃度的H2SO4，4h合成路線(xiàn)10實(shí)施例140的合成 試劑和條件(a)乙腈，回流2h
合成路線(xiàn)11實(shí)施例141的合成 試劑和條件(a)NaH，DMF，4h，rt.；(b)，8h，100℃；(c)H2N-NH2，EtOH，8h，回流然后4N HCl，6h，回流；(d)3，4-二甲氧基-苯基-異硫氰酸酯，EtOH，6h，回流分析條件ESI-質(zhì)譜數(shù)據(jù)用SCIEX API 365波譜儀(PerKin Elmer)獲得。1H-NMR(500MHz)數(shù)據(jù)用BRUKER AC 500記錄，用DMSO-D6作為溶劑?；瘜W(xué)位移表示為從四甲基硅烷以下的每一百萬(wàn)的份數(shù)。分裂模式的記錄符號(hào)如下s(單峰)、d(雙峰)、dd(雙峰的雙峰)、t(三重峰)、m(多重峰)、br(寬信號(hào))。
合成詳述實(shí)施例1-12和14-53使1H-咪唑-1-丙胺與相應(yīng)的異硫氰酸酯在乙醇中回流反應(yīng)8h。除去溶劑后，將殘余油溶于二氯甲烷中。用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)層兩次，然后用硫酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥然后蒸發(fā)。將殘余固體從乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到實(shí)施例的硫脲，收率80-98％。
實(shí)施例131-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(3，4-二甲氧基苯基)硫脲將4.0mmol 3，4-二甲氧基苯基異硫氰酸酯和4.0mmol 3-(1H-咪唑-1-基)烷基-1-胺溶于10mL無(wú)水乙醇中?；亓鲾嚢?h后，蒸發(fā)溶劑，將所得固體從乙醇中重結(jié)晶。
收率0.66g(51.3％)；mp160.0-161.0℃1H NMR δ1.8-2.0(m，2H)，3.4-3.5(m，2H)，3.75(s，6H)，3.9-4.0(m，2H)，6.7-6.8(m，1H)，6.9(br m，2H)，6.95(s，1H)，7.15(s，1H)，7.55(br s，1H)，7.6(s，1H)，9.3(s，1H)；MS m/z 321.2(M+H)，253.3(M-C3H3N2·)實(shí)施例96-102使1H-咪唑-1-丙胺與相應(yīng)的異氰酸酯在乙醇中回流反應(yīng)8h。除去溶劑后，將殘余油溶于二氯甲烷中。用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)層兩次然后用硫酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥然后蒸發(fā)。將殘余固體從乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到實(shí)施例的脲，收率85-90％。
實(shí)施例136、137根據(jù)文獻(xiàn)，從ω-溴-烷基-鄰苯二甲酰亞胺和咪唑鎓鹽以及后續(xù)的肼解來(lái)制備1H-咪唑-1-烷基胺。根據(jù)實(shí)施例1-53將所得產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為硫脲，收率88％(實(shí)施例136)和95％(實(shí)施例137)。
實(shí)施例54-95所有實(shí)施例都自相應(yīng)的硫脲如下制備與水溶性碳二亞胺(WSCD)和1H-咪唑-1-丙胺在干燥二甲基甲酰胺中于室溫下反應(yīng)2h，得到三取代的胍，收率40-87％。
實(shí)施例103-105在室溫下，使咪唑與相應(yīng)的溴甲基苯基氰化物在DMF中反應(yīng)3h，使用1當(dāng)量的NaH，得到1H-咪唑-1-甲基苯基氰化物。除去溶劑，將所得油再溶解于二噁烷中。用1當(dāng)量LiAlH4將氰化物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的胺。加入硫酸氫鉀飽和溶液后，蒸發(fā)二噁烷，并用氯仿萃取水層。將有機(jī)層真空濃縮，并根據(jù)實(shí)施例1-53將胺轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的硫脲，收率78％(實(shí)施例103)、65％(實(shí)施例104)和81％(實(shí)施例105)。
實(shí)施例106-109從相應(yīng)的甲磺酸酯-2-甲基丙基-鄰苯二甲酰亞胺開(kāi)始，如實(shí)施例136-137中關(guān)于胺所述合成胺。根據(jù)實(shí)施例1-53將所得產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為硫脲，得到實(shí)施例106-109，總收率25-30％。
實(shí)施例110-112在130℃的溫度下，使1H-咪唑-1-丙胺與相應(yīng)的2-氯苯并[d]噻唑在甲苯中反應(yīng)24h。除去溶劑后，從甲醇中重結(jié)晶，得到實(shí)施例110-112，收率55-65％。
實(shí)施例113-118、120-124和126-132在0℃的溫度下，通過(guò)加入1當(dāng)量的CAIBE和N-甲基嗎啉，使1H-咪唑-1-丙胺與相應(yīng)的2-苯基乙酸在干燥二噁烷中反應(yīng)。2h后將混合物溫至室溫，并將混合物攪拌12h。除去溶劑后，將所得油再溶解于二氯甲烷中，用飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌有機(jī)層，干燥并蒸發(fā)溶劑。將所得油溶于二噁烷中，加入Laweson試劑。攪拌12h后，加入飽和碳酸氫鈉溶液。蒸發(fā)二噁烷，并用乙酸乙酯萃取水層。分離有機(jī)層，干燥并蒸發(fā)溶劑。將所得固體從乙酸乙酯/乙醚中結(jié)晶，得到113-118、120-124和126-132，總收率62-85％。
實(shí)施例119N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-2-(3，4-二甲氧基苯基)硫代乙酰胺將4.0mmol三乙胺和4.0mmol 3-(1H-咪唑-1-基)烷基-1-胺在20mL二噁烷中的混合物滴入冰冷的、攪拌中的4.0mmol 2-(3，4-二甲氧基苯基)乙酰氯在30mL二噁烷中的溶液中。將混合物溫至室溫，然后攪拌1h。減壓除去溶劑后，將殘余物再溶解于50mL二氯甲烷中。用30mL飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌有機(jī)層。干燥有機(jī)溶液，過(guò)濾并減壓除去溶劑。再溶解于50mL干燥二噁烷中后，加入2.2mmolLawesson試劑，將混合物加熱至90℃并攪拌8h。減壓除去溶劑，將殘余物再溶解于50mL二氯甲烷中。將有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌三次，然后用水洗滌三次，干燥，過(guò)濾，然后除去有機(jī)溶劑。化合物經(jīng)色譜法純化，用離心力色譜裝置(Harrison Research Ltd.)，使用層厚度為2mm的二氧化硅板和CHCl3/MeOH梯度洗脫系統(tǒng)。
收率0.14g(10.6％)；熔點(diǎn)148.0-150.0℃1H NMRδ2.0-2.15(br m，2H)，3.4-3.5(m，2H)，3.7(s，6H)，6.75-6.8(m，2H)，4.1-4.2(m，2H)，6.8-6.9(m，2H)，6.95-7.0(m，1H)，7.4(s，1H)，7.75-7.85(br m，1H)，8.6(s，1H)，10.2(s，1H)；MS m/z 320.2(M+H)，252.2(M-C3H3N2·)實(shí)施例125N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-1-(3，4-二甲氧基苯基)環(huán)丙烷硫代羧酸酰胺(N-(3-(1H-imidazol-1-yl)propyl)-1-(3，4-dimethoxyphenyl)cyclopropanecarbothioamide)將11.06mmol 3，4-二甲氧基苯基乙腈、34.8mmol 2-溴-1-氯乙醇和1.16mmol三乙基芐基銨鹽酸鹽溶于10mL KOH水溶液(60％)中。將混合物轉(zhuǎn)移至超聲波浴中，并在室溫下劇烈攪拌3h。用40mL水稀釋所得混懸液，并用20mL二氯甲烷萃取三次。合并有機(jī)層，用鹽酸水溶液(1N)洗滌，用硫酸鈉干燥并減壓除去溶劑。殘余油經(jīng)閃蒸色譜法用硅膠純化，用乙酸乙酯/庚烷作為洗脫系統(tǒng)，得到0.81g(34.4％)1-(3，4-二甲氧基苯基)環(huán)丙腈。將3.9mmol 1-(3，4-二甲氧基苯基)環(huán)丙腈和11.2mmol KOH懸浮于80mL乙二醇中。將混合物回流攪拌12h。然后加入80mL水，并將水層用乙醚萃取兩次。用HCl(1N)將pH調(diào)節(jié)至pH＝4-5后，用乙醚將水層萃取三次，然后合并有機(jī)層，用硫酸鈉干燥并除去溶劑，得到0.81g(93.5％)1-(3，4-二甲氧基苯基)環(huán)丙烷羧酸。
將3.44mmol 1-(3，4-二甲氧基苯基)環(huán)丙烷羧酸、3.5mmol N-甲基嗎啉和3.5mmol氯甲酸異丁酯溶于干燥四氫呋喃中，并在-15℃下攪拌15分鐘。然后加入3.5mmol 3-(1H-咪唑-1-基)烷基-1-胺，將混合物溫至0℃，并攪拌12h。減壓除去溶劑，并將殘余油再溶解于氯仿中。將有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次，然后用硫酸鈉干燥，并除去溶劑。用離心力色譜法進(jìn)行純化，使用chromatotron裝置(Harrison Research Ltd.)，用層厚度為2mm的硅膠板，并用CHCl3/MeOH作為梯度洗脫系統(tǒng)，得到0.671g(59.3％)N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-1-(3，4-二甲氧基苯基)環(huán)丙烷甲酰胺。
再溶解于30mL干燥二噁烷后，加入1.43mmol Lawesson試劑，將混合物加熱至90℃并攪拌8h。減壓除去溶劑，并將殘余物溶于50mL二氯甲烷中。將有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌三次，然后用水洗滌三次，干燥，過(guò)濾，然后除去有機(jī)溶劑?；衔锝?jīng)使用離心力色譜裝置(Harrison Research Ltd.)的色譜法純化，使用層厚度為2mm的硅膠板，并用CHCl3/MeOH作為梯度洗脫系統(tǒng)。
收率0.33g(46.2％)；熔點(diǎn)127.0-127.5℃1H NMRδ1.1-1.2(t，2H)，1.55-1.6(t，2H)，2.0-2.1(m，2H)，3.5-3.6(m，2H)，3.7-3.8(s，6H)，4.1-4.2(t，2H)，6.8-6.9(m，3H)，7.65(s，1H)，7.75(s，1H)，8.8(m，1H)，9.05(s，1H)；MS m/z 346.0(M+H)，278.2(M-C3H3N2·)，177.1(M-C6H8N3S·)實(shí)施例133-135在0℃下，將1當(dāng)量三乙胺和3，4-二甲氧基苯胺在二噁烷中的混合物加入攪拌中的相應(yīng)的ω-溴烷基酰氯溶液中。將溶液溫至室溫并攪拌2h。蒸發(fā)溶劑，將殘余油再溶解于二氯甲烷中。用水洗滌有機(jī)層，干燥，過(guò)濾，并減壓除去溶劑。
將咪唑和氫化鈉懸浮于其中，并將混合物在惰性條件和室溫下攪拌3h。加入ω-溴-N-(3，4-二甲氧基-苯基)烷基酰胺，將混合物加熱至100℃，并攪拌8h。然后蒸發(fā)溶劑，加入熱甲苯，并過(guò)濾溶液。然后減壓除去溶劑，如實(shí)施例113-132所述用Laweson試劑將其轉(zhuǎn)化為硫代酰胺，得到133-135，總收率13-20％。
根據(jù)上述的一般合成路線(xiàn)合成的其它實(shí)施例的分析數(shù)據(jù)如下實(shí)施例11-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-甲基硫脲熔點(diǎn)122-122.5℃1H NMRδ1.85-1.95(m，2H)，2.8(s，3H)，3.2-3.5(br d，2H)，3.8-3.9(m，2H)，6.85(d，1H)，7.15(d，1H)，7.3-7.5(br d，2H)，7.65(s，1H)；MSm/z 199.1(M+H)，221.3(M+Na)，131.0(M-C3H3N2·)實(shí)施例21-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-叔丁基硫脲熔點(diǎn)147.0-147.5℃1H NMRδ1.3-1.4(s，9H)，1.85-1.95(m，2H)，3.5(t，2H)，3.8(t，2H)，6.85(d，1H)，7.15(d，1H)，7.3-7.5(br d，2H)，7.65(s，1H)；MS m/z 241.1(M+H)，173.1(M-C3H3N2·)實(shí)施例31-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-芐基硫脲熔點(diǎn)127.0-128.0℃1H NMRδ1.85-1.95(m，2H)，3.2-3.5(br d，2H)，3.8-3.9(m，2H)，4.6(s，2H)，6.8(d，1H)，7.15(d，1H)，7.19-7.35(m，5H)，7.5-7.6(br d，2H)，7.85(s，1H)；MS m/z 275.3(M+H)，207.1(M-C3H3N2·)實(shí)施例51-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-苯基硫脲熔點(diǎn)166.5-167.0℃1H NMRδ1.95-2.05(m，2H)，3.3-3.5(br d，2H)，3.9-4.0(m，2H)，6.85(d，1H)，7.05(m，1H)，7.15(d，1H)，7.25(m，2H)，7.35(m，2H)，7.6(s，1H)，7.8(br s，1H)，9.5(br s，1H)；MS m/z 261.1(M+H)，193.2(M-C3H3N2·)實(shí)施例61-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(4-氟苯基)硫脲熔點(diǎn)147.0-148.0℃1H NMRδ1.95-2.05(m，2H)，3.3-3.5(br d，2H)，3.9-4.05(m，2H)，6.85(d，1H)，7.05-7.15(m，3H)，7.3-7.4(m，2H)，7.6(s，1H)，7.7-7.8(br s，1H)，9.4(br s，1H)；MS m/z 279.3(M+H)，211.2(M-C3H3N2·)實(shí)施例71-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(4-乙基苯基)硫脲熔點(diǎn)100.0-100.5℃1H NMRδ1.15-1.2(t，3H)，1.9-2.0(m，2H)，2.5-2.6(m，2H)，3.3-3.5(br d，2H)，3.9-4.05(m，2H)，6.85(d，1H)，7.1-7.2(m，3H)，7.25-7.3(m，2H)，7.6(s，1H)，7.7-7.8(br s，1H)，9.4(br s，1H)；MS m/z 289.3(M+H)，221.1(M-C3H3N2·)實(shí)施例81-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)硫脲熔點(diǎn)154.5-155.0℃1H NMRδ1.9-2.1(br m，2H)，3.4-3.6(br d，2H)，3.95-4.1(br m，2H)，6.85(d，1H)，7.2(d，1H)，7.6-7.8(m，5H)，8.2(br s，1H)，9.9(br s，1H)；MS m/z 329.3(M+H)，261.2(M-C3H3N2·)實(shí)施例101-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(4-乙?；交?硫脲熔點(diǎn)170.0-171.0℃1H NMRδ1.9-2.1(br m，2H)，2.4-2.5(s，3H)，3.2-3.5(br m，2H)，3.9-4.1(m，2H)，6.85(d，1H)，7.15(d，1H)，7.5-7.65(br m，3H)，7.8-7.9(m，2H)，8.1(m，2H)，9.8(br s，1H)；MS m/z 303.2(M+H)，235.1(M-C3H3N2·)實(shí)施例111-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(4-甲氧基苯基)硫脲熔點(diǎn)125.0-125.5℃1H NMRδ1.8-2.0(br m，2H)，3.2-3.5(br m，2H)，3.7(s，3H)，3.9-4.0(m，2H)，6.7-6.9(m，3H)，7.1-7.2(m，3H)，7.5(s，1H)，7.6(s，1H)，9.2(s，1H)；MS m/z 291.1(M+H)，223.2(M-C3H3N2·)實(shí)施例141-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(2，4-二甲氧基苯基)硫脲熔點(diǎn)120.0-120.5℃1H NMRδ1.8-2.0(br m，2H)，3.4-3.5(br m，2H)，3.75(s，6H)，3.9-4.0(m，2H)，6.5(d，1H)，6.6(s，1H)，6.9(s，1H)，7.15(s，1H)，7.3(d，1H)，7.5(br s，1H)，7.6(s，1H)，9.75(s，1H)；MS m/z 321.2(M+H)，253.3(M-C3H3N2·)實(shí)施例151-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(3，5-二甲氧基苯基)硫脲熔點(diǎn)142.0-143.0℃1H NMRδ1.8-2.0(br m，2H)，3.4-3.5(br m，2H)，3.6(s，6H)，3.95-4.0(m，2H)，6.25(m，1H)，6.6(m，2H)，6.9(s，1H)，7.2(s，1H)，7.6(s，1H)，7.8(s，1H)，9.5(s，1H)；MS m/z 321.2(M+H)，53.3(M-C3H3N2·)實(shí)施例231-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(2，3-二氫苯并[b][1，4]二噁英-7-基)硫脲熔點(diǎn)103.0-103.5℃1H NMRδ1.9-2.0(br m，2H)，3.3-3.5(br d，2H)，3.9-4.0(m，2H)，4.2-4.3(m，4H)，6.7(m，1H)，6.8-6.8(m，1H)，6.9(m，2H)，7.2(s，1H)，7.6(m，2H)，9.3(s，1H)；MS m/z 319.3(M+H)，251.3(M-C3H3N2·)實(shí)施例241-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(苯并[d][1，3]二氧雜環(huán)戊二烯-6-基)硫脲熔點(diǎn)115.0-115.6℃1H NMRδ1.9-2.1(br m，2H)，3.4-3.5(br d，2H)，4.05-4.15(m，2H)，6.0(s，2H)，6.7(m，1H)，6.8-6.85(m，1H)，6.95(d，1H)，7.25(s，1H)，7.45(s，1H)，7.7(br s，1H)，8.5(br s，1H)，9.4(br s，1H)；MS m/z 305.2(M+H)，237.2(M-C3H3N2·)實(shí)施例251-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)硫脲熔點(diǎn)124.5-125.5℃1H NMRδ1.8-2.0(m，2H)，3.4-3.5(br m，2H)，3.6(s，3H)，3.7(s，6H)，3.9-4.0(m，2H)，6.65(m，2H)，6.85(s，1H)，7.2(s，1H)，7.6(s，1H)，7.7(br s，1H)，9.4(s，1H)；MS m/z 351.3(M+H)，283.2(M-C3H3N2·)
實(shí)施例261-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(3-甲氧基苯基)硫脲熔點(diǎn)89.5-90.0℃1H NMRδ1.9-2.1(br m，2H)，3.4-3.5(br m，2H)，3.7(s，3H)，3.9-4.0(m，2H)，6.6-6.7(m，1H)，6.8-6.9(m，2H)，7.1(m，2H)，7.15-7.25(br m，1H)，7.6(s，1H)，7.8(br s，1H)，9.5(s，1H)；MS m/z 291.1(M+H)，223.2(M-C3H3N2·)實(shí)施例271-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(4-乙氧基苯基)硫脲熔點(diǎn)126.0-126.5℃1H NMRδ1.5(br m，3H)，1.9-2.0(br m，2H)，3.4-3.5(br m，2H)，3.9-4.0(br m，4H)，6.8-6.9(m，2H)，6.95(s，1H)，7.15-7.2(m，2H)，7.25(s，1H)，7.55-7.6(br s，1H)，7.8(s，1H)，9.3(s，1H)；MS m/z 305.2(M+H)，237.2(M-C3H3N2·)實(shí)施例331-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(4-(甲硫基)苯基)硫脲熔點(diǎn)140.0-140.5℃1H NMRδ1.8-2.05(br m，2H)，2.5(s，3H)，3.3-3.5(br m，2H)，3.9-4.1(m，2H)，6.9(m，1H)，7.1-7.3(br m，5H)，7.6(s，1H)，7.75(br s，1H)，9.4(s，1H)；MS m/z 307.2(M+H)，239.2(M-C3H3N2·)實(shí)施例421-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(4-硝基苯基)硫脲熔點(diǎn)165.0.166.0℃1H NMRδ1.9-2.05(m，2H)，3.3-3.5(br d，2H)，3.95-4.05(m，2H)，6.85(d，1H)，7.15(d，1H)，7.6(d，1H)，7.7(m，2H)，8.1(m，2H)，8.3(brs，1H)，10.1(brs，1H)；MS m/z 306.2(M+H)，237.9(M-C3H3N2·)實(shí)施例501-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(4-(二甲氨基)苯基)硫脲熔點(diǎn)146.5-147.0℃1H NMRδ1.9-2.0(m，2H)，2.9(s，6H)，3.4(m，2H)，3.9-4.0(m，2H)，6.7(m，2H)，6.9(s，1H)，7.05-7.1(m，2H)，7.15(s，1H)，7.4(br s，1H)，7.6(s，1H)，9.2(s，1H)；MS m/z 304.2(M+H)，236.0(M-C3H3N2·)
實(shí)施例1021-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-3-(3，4-二甲氧基苯基)脲熔點(diǎn)114.5-115.0℃1H NMRδ1.7-1.9(m，2H)，2.9-3.1(m，2H)，3.7(2s，6H)，3.9-4.0(m，2H)，6.1(t，1H)，6.7(s，2H)，6.8(s，1H)，7.15(d，2H)，7.6(s，1H)，8.2(s，1H)；MS m/z 321.2(M+H)，253.3(M-C3H3N2·)實(shí)施例1061-((S)-3-(1H-咪唑-1-基)-2-甲基丙基)-3-(3，4-二甲氧基苯基)硫脲熔點(diǎn)150.5-151.5℃1H NMRδ0.9(d，3H)，2.3-2.4(m，2H)，2.5(s，1H)，3.7(d，6H)，4.0-4.1(br m，1H)，4.15-4.25(br m，1H)，6.75-6.8(m，1H)，6.85(m，1H)，6.9-7.0(m，1H)，7.65(s，1H)，7.75(s，2H)，9.1(s，1H)，9.5(s，1H)；MSm/z 335.6(M+H)，267.1(M-C3H3N2·)實(shí)施例1071-((R)-3-(1H-咪唑-1-基)-2-甲基丙基)-3-(3，4-二甲氧基苯基)硫脲熔點(diǎn)155.0-157.5℃1H NMRδ0.9(d，3H)，2.3-2.4(m，2H)，2.5(s，1H)，3.7(d，6H)，4.0-4.1(br m，1H)，4.15-4.25(br m，1H)，6.75-6.8(m，1H)，6.85(m，1H)，6.9-7.0(m，1H)，7.65(s，1H)，7.75(s，2H)，9.1(s，1H)，9.5(s，1H)；MSm/z 335.4(M+H)，267.2(M-C3H3N2·)實(shí)施例1091-((1-((1H-咪唑-1-基)甲基)環(huán)丙基)甲基)-3-(3，4-二甲氧基苯基)硫脲熔點(diǎn)166.5-168.5℃1H NMRδ0.7-0.8(br m，2H)，1.85-1.9(m，1H)，2.15-2.2(m，1H)，2.2-2.3(m，1H)，3.4-3.5(m，1H)，3.7(d，6H)，4.2(s，1H)，4.95(s，1H)，6.75-6.8(br m，1H)，6.85-6.9(br m，1H)，7.0(s，1H)，7.5(m，1H)，7.6(m，1H)，7.7(s，0.5H)，7.8(s，0.5H)，8.85(s，0.5H)，9.1(s，0.5H)，9.35(s，0.5H)，9.45(s，0.5H)；MS m/z 347.2(M+H)，279.2(M-C3H3N2·)，137.5(M-C9H13N4S·)實(shí)施例110N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)苯并[d]噻唑-2-胺1H NMRδ1.95-2.15(m，2H)，3.25-3.35(m，2H)，4.0-4.1(t，2H)，6.9(s，1H)，6.95-7.05(t，1H)，7.15-7.2(m，2H)，7.35-7.4(d，1H)，7.60-7.70(m，2H)，8.0-8.1(br s，1H)；MS m/z 259.4(M+H)，191.3(M-C3H3N2·)實(shí)施例111N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-6-氯苯并[d]噻唑-2-胺1H NMRδ1.95-2.15(m，2H)，3.25-3.35(m，2H)，4.0-4.1(t，2H)，6.9(s，1H)，7.1-7.2(d，2H)，7.3-7.4(d，1H)，7.65(s，1H)，7.8(s，1H)，8.2(s，1H)；MS m/z 293.3(M+H)，225.3(M-C3H3N2·)實(shí)施例112N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-胺1H NMRδ1.9-2.05(m，2H)，3.2-3.3(m，2H)，3.7(s，3H)，4.0-4.1(t，2H)，6.7-6.8(d，1H)，6.9(s，1H)，7.15-7.2(s，1H)，7.2-7.3(m，2H)，7.65(s，1H)，7.8(s，1H)；MS m/z 289.1(M+H)，221.4(M-C3H3N2·)實(shí)施例115(R)-N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-2-苯基丙烷硫代酰胺熔點(diǎn)82.0-82.5℃1H NMRδ1.4-1.55(d，3H)，1.9-2.0(m，2H)，3.4-3.5(m，2H)，3.85-3.95(m，2H)，4.0-4.1(q，1H)，6.8-6.9(s，1H)，7.1(s，1H)，7.15-7.2(m，1H)，7.2-7.3(m，2H)，7.35-7.4(m，2H)，7.55(s，1H)，10.1(s，1H)；MSm/z 274.4(M+H)，206.3(M-C3H3N2·)實(shí)施例116(S)-N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-2-苯基丙烷硫代酰胺熔點(diǎn)82.5-83.5℃1H NMRδ1.4-1.55(d，3H)，1.9-2.0(m，2H)，3.4-3.5(m，2H)，3.85-3.95(m，2H)，4.0-4.1(q，1H)，6.8-6.9(s，1H)，7.1(s，1H)，7.15-7.2(m，1H)，7.2-7.3(m，2H)，7.35-7.4(m，2H)，7.55(s，1H)，10.1(s，1H)；MSm/z 274.4(M+H)，206.3(M-C3H3N2·)實(shí)施例121N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-1-(4-氯苯基)環(huán)丁烷硫代羧酸酰胺熔點(diǎn)137.5-139.0℃1H NMRδ1.55-1.75(br m，2H)，1.85-1.95(br m，2H)，2.4-2.5(br m，2H)，2.7-2.85(br m，2H)，3.3-3.5(br m，2H)，3.8(m，2H)，6.9(s，1H)，7.0(s，1H)，7.3(m，2H)，7.45(s，1H)，7.5(m，2H)，9.6(t，1H)；MS m/z 334.3(M+H)，266.1(M-C3H3N2·)實(shí)施例122N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-1-(4-氯苯基)環(huán)戊烷硫代羧酸酰胺熔點(diǎn)140.0-141.0℃1H NMRδ1.5-1.65(br m，4H)，1.8-1.9(m，2H)，2.0-2.1(m，2H)，2.6(m，2H)，3.4-3.5(m，2H)，3.7-3.8(m，2H)，6.85(s，1H)，7.0(s，1H)，7.35(m，2H)，7.4(m，2H)，7.5(s，1H)，9.4(t，1H)；MS m/z 348.2(M+H)，280.2(M-C3H3N2·)實(shí)施例123N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-1-(4-甲氧基苯基)環(huán)己烷硫代羧酸酰胺熔點(diǎn)162.5-164.0℃1H NMRδ1.2-1.3(m，1H)，1.35-1.5(br m，5H)，1.85-2.0(br m，4H)，2.4-2.6(br m，2H)，3.4-3.5(m，2H)，3.7(s，3H)，3.8(m，2H)，6.8(m，3H)，7.0(s，1H)，7.3(m，2H)，7.5(s，1H)，9.2(t，1H)；MS m/z 358.3(M+H)，290.3(M-C3H3N2·)實(shí)施例124N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-1-(4-甲氧基苯基)環(huán)丙烷硫代羧酸酰胺熔點(diǎn)129.0-129.5℃1H NMRδ1.0-1.1(m，2H)，1.5-1.6(m，2H)，1.9-2.0(br m，2H)，3.4-3.5(m，2H)，3.7(s，3H)，3.9(m，2H)，6.9(m，3H)，7.1(s，1H)，7.2-7.3(m，2H)，7.6(s，1H)，8.9(br s，1H)；MS m/z 316.0(M+H)，248.4(M-C3H3N2·)
實(shí)施例1345-(1H-咪唑-1-基)-N-(3，4-二甲氧基苯基)戊烷硫代酰胺熔點(diǎn)128.0-128.5℃1H NMRδ1.65-1.70(m，2H)，1.75-1.80(m，2H)，2.7-2.75(m，2H)，3.7(s，3H)，3.75(s，3H)，4.0-4.05(t，2H)，6.9-7.0(m，2H)，7.2(s，1H)，7.3(d，1H)，7.5(s，1H)，7.75(s，1H)，11.0(s，1H)；MS m/z 320.2(M+H)，252.2(M-C3H3N2·)實(shí)施例1361-(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)-3-(3，4-二甲氧基苯基)硫脲熔點(diǎn)157.5-159.0℃1H NMRδ3.7(2s，6H)，3.8(m，2H)，4.2(m，2H)，6.7(m，1H)，6.85(m，1H)，6.9(m，2H)，7.15(s，1H)，7.5(br s，1H)，7.6(s，1H)，9.5(s，1H)；MS m/z 307.2(M+H)，239.1(M-C3H3N2·)實(shí)施例1371-(4-(1H-咪唑-1-基)丁基)-3-(3，4-二甲氧基苯基)硫脲45熔點(diǎn)114.5-116.0℃1H NMRδ1.4-1.5(m，2H)，1.6-1.7(m，2H)，3.4-3.5(m，2H)，3.6-3.8(br s，6H)，3.9-4.0(m，2H)，6.7(m，1H)，6.9(m，2H)，6.95(s，1H)，7.2(s，1H)，7.6(br s，1H)，7.7(s，1H)，9.3(s，1H)；MS m/z 335.3(M+H)，267.1(M-C3H3N2·)哺乳動(dòng)物中QC(EC)的生理底物是例如[Glu3]淀粉樣β-蛋白(3-40/42)、[Gln3]淀粉樣β-蛋白(3-40/42)、胃泌素、神經(jīng)降壓肽、FPP、CCL 2、CCL 7、CCL 8、CCL 16、CCL 18、分形素、阿立新A、[Gln3]-胰高血糖素(3-29)和[Gln5]-P物質(zhì)(5-11)。關(guān)于進(jìn)一步的細(xì)節(jié)，參見(jiàn)表1。本發(fā)明的化合物和/或組合以及包含至少一種QC(EC)抑制劑的藥物組合物可用于治療可以通過(guò)調(diào)節(jié)QC活性而治療的病癥。
表1帶有已知被環(huán)化成為最終pGlu的N-末端谷氨酰胺殘基的生理活性肽的氨基酸序列


跨上皮轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞(transepithelial transducing cell)，尤其是胃泌素(G)細(xì)胞，在食物到達(dá)胃中后共同調(diào)節(jié)胃酸分泌。最近的工作表明，胃泌素前體產(chǎn)生多種活性產(chǎn)物，并且胃泌素生物合成中有多個(gè)控制點(diǎn)。生物合成的前體和中間體(前胃液素和Gly-胃泌素)是推定的生長(zhǎng)因子；其產(chǎn)物，酰胺化的胃泌素，調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞增殖、產(chǎn)酸壁細(xì)胞和分泌組胺的腸嗜鉻樣(ECL)細(xì)胞的分化以及與ECL細(xì)胞內(nèi)的組胺合成及貯存有關(guān)的基因表達(dá)，并且劇烈刺激酸分泌。胃泌素還刺激表皮生長(zhǎng)因子(EGF)家族成員的生成，其又抑制壁細(xì)胞功能但刺激表面表皮細(xì)胞的生長(zhǎng)。血漿胃泌素濃度在具有幽門(mén)螺桿菌(Helicobacter pylori)的患者中升高，已知這些患者有較高的患十二指腸潰瘍和胃癌的風(fēng)險(xiǎn)(Dockray，G.J.1999 J Physiol 15315-324)。
已知由胃竇G細(xì)胞釋放的肽激素胃泌素通過(guò)CCK-2受體刺激泌酸粘膜中合成并自ECL細(xì)胞釋放組胺。經(jīng)動(dòng)員的組胺通過(guò)結(jié)合位于壁細(xì)胞上的H(2)受體誘導(dǎo)酸分泌。最近的研究表明，胃泌素?zé)o論是完全酰胺化的形式還是加工較少的形式(前胃液素和甘氨酸延長(zhǎng)的胃泌素)，都還是胃腸道的生長(zhǎng)因子。已經(jīng)確定酰胺化的胃泌素的主要營(yíng)養(yǎng)作用針對(duì)胃的泌酸粘膜，其引起胃干細(xì)胞和ECL細(xì)胞增殖提高，導(dǎo)致壁細(xì)胞和ECL細(xì)胞質(zhì)量增加。另一方面，加工較少的胃泌素(例如甘氨酸延長(zhǎng)的胃泌素)的主要營(yíng)養(yǎng)靶標(biāo)似乎是結(jié)腸粘膜(Koh，T.J.和Chen，D.2000 Regul Pept 9337-44)。
神經(jīng)降壓肽(NT)是與精神分裂癥病理生理學(xué)相關(guān)的神經(jīng)肽，它特異性調(diào)節(jié)以前已證明在該病癥中被誤調(diào)整的神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)。其中測(cè)定了腦脊液(CSF)NT濃度的臨床研究表明，CSF NT濃度降低的一亞類(lèi)精神分裂癥患者通過(guò)有效的抗精神病藥物治療得以恢復(fù)。還存在大量證據(jù)表明在抗精神病藥物的作用機(jī)制中涉及NT系統(tǒng)。中樞給予NT與全身給予的抗精神病藥物的行為和生物化學(xué)作用方面上非常相似，并且抗精神病藥物提高NT神經(jīng)傳遞。這一連串的發(fā)現(xiàn)使得可假設(shè)NT起著內(nèi)源性抗精神病藥的作用。此外，典型和非典型的抗精神病藥物有差別地改變黑質(zhì)紋狀體和中腦邊緣(mesolimbic)多巴胺末端區(qū)域中的NT神經(jīng)傳遞，并且這些作用分別預(yù)示副反應(yīng)傾向及功效(Binder，E.B.等，2001 Biol Psychiatry 50 856-872)。
在精液漿中發(fā)現(xiàn)了一種與促甲狀腺素釋放激素(TRH)相關(guān)的三肽，受精促進(jìn)肽(FPP)。最近獲得的體外和體內(nèi)證據(jù)表明，F(xiàn)PP在調(diào)節(jié)精子能育性方面發(fā)揮重要作用。具體而言，F(xiàn)PP最初刺激無(wú)能育性(未獲能)精子“接通(switch on)”，使之更快地具有能育性，但之后獲能，因此精子不進(jìn)行自發(fā)頂體損失，從而不失去受精能力。通過(guò)已知調(diào)節(jié)腺苷?；h(huán)化酶(AC)/cAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的腺苷模擬且事實(shí)上放大這些應(yīng)答。已發(fā)現(xiàn)FPP和腺苷都刺激未獲能細(xì)胞中的cAMP生成，但在獲能細(xì)胞中抑制之，而FPP受體以某種方式與腺苷受體和G蛋白相互作用，實(shí)現(xiàn)AC的調(diào)節(jié)。這些事件影響各種蛋白的酪氨酸磷酸化狀況，其中一些在最初的“接通”中是重要的，另一些可能與頂體反應(yīng)本身有關(guān)。同樣是在精液漿中發(fā)現(xiàn)的降鈣素和血管緊張素II在體外對(duì)未獲能精子有相似的作用，并且可以放大對(duì)FPP的應(yīng)答。這些分子在體內(nèi)具有類(lèi)似的作用，通過(guò)刺激然后維持受精能力而影響能育性。FPP、腺苷、降鈣素和血管緊張素II的可用性降低或其受體的缺陷是男性不育癥的原因(Fraser，L.R.和Adeoya-Osiguwa，S.A.2001 Vitam Horm 63，1-28)。
CCL2、CCL7、CCL8、CCL16、CCL18和分形素在諸如骨髓祖細(xì)胞增殖抑制、瘤形成、炎癥宿主應(yīng)答、癌癥、銀屑病、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈粥樣硬化癥、血管炎、體液及細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答、內(nèi)皮中白細(xì)胞粘附及遷移過(guò)程、炎性腸病、再狹窄、肺纖維化、肺動(dòng)脈高血壓、肝纖維化、肝硬化、腎硬化、心室再塑、心力衰竭、器官移植后的動(dòng)脈病及靜脈移植物功能障礙等病理生理狀態(tài)中發(fā)揮重要作用。
最近在臨床試驗(yàn)中研究了幾種抗乙型肝炎、人免疫缺陷病毒和黑素瘤的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞肽基疫苗。令人感興趣的一種單獨(dú)的或與其它腫瘤抗原組合的候選黑素瘤疫苗為十肽ELA。該肽是具有N-末端谷氨酸的Melan-A/MART-1抗原免疫優(yōu)勢(shì)肽類(lèi)似物。已報(bào)道谷氨酸的氨基和γ-羧基以及谷氨酰胺的氨基和γ-甲酰胺基團(tuán)容易地縮合，形成焦谷氨酸衍生物。為克服這一穩(wěn)定性問(wèn)題，已開(kāi)發(fā)了幾種具有焦谷氨酸而非N-末端谷氨酰胺或谷氨酸而不損失藥理學(xué)性質(zhì)的有藥學(xué)意義的肽。不過(guò)，與ELA相比，焦谷氨酸衍生物(PyrELA)及N-末端乙?；舛说难苌?AcELA)不能引發(fā)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)活性。盡管在PyrELA和AcELA中引入貌似很小的修飾，但這兩種衍生物可能對(duì)特定的I類(lèi)主要組織相容性復(fù)合物(specific class I majorhistocompatibility complex)比ELA具有更低的親和力。因此，為保留ELA的完整活性，必須避免PyrELA的形成(Beck A.等2001，J PeptRes 57(6)528-38)。
阿立新A是一種可能通過(guò)協(xié)調(diào)這些互補(bǔ)的自身穩(wěn)定功能的復(fù)雜行為和生理應(yīng)答而在調(diào)節(jié)攝食和失眠中發(fā)揮重要作用的神經(jīng)肽。它還在能量代謝的恒穩(wěn)調(diào)節(jié)、自主功能、激素平衡以及體液調(diào)節(jié)中起更廣泛的作用。
通過(guò)給予哺乳動(dòng)物本發(fā)明的QC(EC)抑制劑和/或組合，可能預(yù)防或緩解或治療選自阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、潰瘍性疾病和伴有或不伴有幽門(mén)螺桿菌感染的胃癌、瘤形成、炎癥宿主反應(yīng)、癌癥、黑素瘤、惡性轉(zhuǎn)移、銀屑病、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈粥樣硬化癥、內(nèi)皮中的白細(xì)胞粘附及遷移過(guò)程、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙和體液調(diào)節(jié)障礙的病癥。
此外，通過(guò)給予哺乳動(dòng)物本發(fā)明的QC(EC)抑制劑和/或組合，可能刺激骨髓祖細(xì)胞的增殖。
此外，給予本發(fā)明的QC(EC)抑制劑和/或組合可能導(dǎo)致雄性能育性的抑制。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供組合物，優(yōu)選藥物組合物，其包含至少一種式1的QC(EC)抑制劑和任選的至少一種選自PEP抑制劑、LiCl、二肽基氨肽酶抑制劑、優(yōu)選DP IV或DP IV樣酶抑制劑、NPY受體的配體、NPY激動(dòng)劑、乙酰膽堿酯酶(ACE)抑制劑、PIMT增強(qiáng)劑、β分泌酶抑制劑、γ分泌酶抑制劑、中性?xún)?nèi)肽酶抑制劑、磷酸二酯酶4(PDE-4)抑制劑、單胺氧化酶(MAO)抑制劑、TNFα抑制劑、淀粉樣蛋白或淀粉樣肽沉積抑制劑、σ-1受體抑制劑和組胺H3拮抗劑的化合物。
此外，本發(fā)明提供藥物組合物，例如供胃腸外、腸內(nèi)或口服給藥的藥物組合物，其包含至少一種式1的QC抑制劑和任選的至少一種選自PEP抑制劑、LiCl、二肽基氨肽酶抑制劑、優(yōu)選DP IV或DP IV樣酶抑制劑、NPY受體的配體、NPY激動(dòng)劑、乙酰膽堿酯酶(ACE)抑制劑、蛋白質(zhì)異天冬氨酸羧甲基轉(zhuǎn)移酶(protein isoaspartatecarboxymethyl transferase，PIMT)增強(qiáng)劑、β分泌酶抑制劑、γ分泌酶抑制劑、中性?xún)?nèi)肽酶抑制劑、磷酸二酯酶-4(PDE-4)抑制劑、MAO抑制劑、TNFα抑制劑、淀粉樣蛋白或淀粉樣肽沉積抑制劑、σ-1受體抑制劑和組胺H3拮抗劑的化合物以及任選的常規(guī)載體和/或賦形劑。
這些組合對(duì)于行為病癥具有特別有益的效果，因此這種組合對(duì)神經(jīng)病癥有效并可用于治療神經(jīng)病癥，如選自阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、致病性精神病、精神分裂癥、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙、體液調(diào)節(jié)障礙、高血壓、發(fā)熱、睡眠失調(diào)、厭食癥、包括抑郁癥在內(nèi)的焦慮相關(guān)病癥、包括癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)作、停藥和酒精中毒、包括認(rèn)知障礙和癡呆在內(nèi)的神經(jīng)變性病癥的神經(jīng)疾病。
因此，本發(fā)明提供治療神經(jīng)病癥如選自阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、致病性精神病、精神分裂癥、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙、體液調(diào)節(jié)障礙、高血壓、發(fā)熱、睡眠失調(diào)、厭食癥、包括抑郁癥在內(nèi)的焦慮相關(guān)病癥、包括癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)作、停藥和酒精中毒、包括認(rèn)知障礙和癡呆在內(nèi)的神經(jīng)變性病癥的神經(jīng)疾病的方法，其包括給予哺乳動(dòng)物優(yōu)選人治療有效量的所述組合物或組合。
因此，本發(fā)明提供這些組合物或組合用于制備治療神經(jīng)病癥如選自阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、致病性精神病、精神分裂癥、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙、體液調(diào)節(jié)障礙、高血壓、發(fā)熱、睡眠失調(diào)、厭食癥、包括抑郁癥在內(nèi)的焦慮相關(guān)病癥、包括癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)作、停藥和酒精中毒、包括認(rèn)知障礙和癡呆在內(nèi)的神經(jīng)變性病癥的神經(jīng)疾病的藥物的用途。
所述方法包括至少一種式1的QC抑制劑與至少一種選自PEP抑制劑、LiCl、二肽基氨肽酶抑制劑、優(yōu)選DP IV或DP IV樣酶抑制劑、NPY受體的配體、NPY激動(dòng)劑、ACE抑制劑、PIMT增強(qiáng)劑、β分泌酶抑制劑、γ分泌酶抑制劑、中性?xún)?nèi)肽酶抑制劑、PDE-4抑制劑、MAO抑制劑、TNFα抑制劑、淀粉樣蛋白或淀粉樣肽沉積抑制劑、σ-1受體抑制劑和組胺H3拮抗劑的化合物的聯(lián)合給藥或順序給藥。
聯(lián)合給藥包括給予包含至少一種式1的QC抑制劑與至少一種選自PEP抑制劑、LiCl、二肽基氨肽酶抑制劑、優(yōu)選DP IV或DP IV樣酶抑制劑、NPY受體的配體、NPY激動(dòng)劑、ACE抑制劑、PIMT增強(qiáng)劑、β分泌酶抑制劑、γ分泌酶抑制劑、中性?xún)?nèi)肽酶抑制劑、PDE-4抑制劑、MAO抑制劑、TNFα抑制劑、淀粉樣蛋白或淀粉樣肽沉積抑制劑、σ-1受體抑制劑和組胺H3拮抗劑的化合物的制劑，或者基本上同時(shí)給予每種活性劑的單獨(dú)制劑。
合適的PIMT增強(qiáng)劑的實(shí)例是WO 98/15647和WO 03/057204中分別描述的以下通式的10-氨基脂族烴基-二苯并[b，f]oxepine
其中alk是二價(jià)脂族基團(tuán)，R是未取代的或被一價(jià)脂族和/或芳代脂族基團(tuán)一取代或被二價(jià)脂族基團(tuán)二取代的氨基，且R1、R2、R3和R4彼此獨(dú)立地是氫、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵素或三氟甲基。
其它根據(jù)本發(fā)明有用的是通式I-IV的PIMT活性調(diào)節(jié)劑 其中取代基R1-R5、(R3)p、(R6)p、X、Y和Z的定義見(jiàn)WO 2004/039773。
本文引入WO 98/15647、WO 03/057204和WO 2004/039773的全文，而且就本文所述化合物的合成和用途而言它們是本發(fā)明的一部分。
合適的β分泌酶抑制劑和/或γ分泌酶抑制劑及含有這些抑制劑的組合物在例如GB 2 385 124、GB 2 389 113、US 2002-115616、WO01/87293、WO 03/057165、WO 2004/052348和WO 2004/062652中有描述。本文引入這些文獻(xiàn)的全文，而且就本文所述化合物的合成、制備和用于抑制β分泌酶和/或γ分泌酶的用途而言它們是本發(fā)明的一部分。
強(qiáng)力的選擇性和細(xì)胞滲透性γ分泌酶抑制劑是下式的(5S)-(叔丁氧羰基氨基)-6-苯基-(4R)羥基-(2R)芐基己?；?-L-leu-L-phe-酰胺 強(qiáng)力的β分泌酶抑制劑是下式的PNU-33312 合適的PDE-4抑制劑是例如下表中所示的化合物

優(yōu)選的PDE-4抑制劑是咯利普蘭。
合適的MAO抑制劑是下式的化合物ladostigil 合適的組胺H3拮抗劑是例如下表中所示的化合物

合適的脯氨酰內(nèi)肽酶(PEP)抑制劑是例如脯氨酸的化學(xué)衍生物或含有末端脯氨酸的小肽。已證明芐氧羰基-脯氨酰-prolinal是該酶的特異性過(guò)渡態(tài)抑制劑(Wilk，S.和Orloeski，M.，J.Neurochem.，41，69(1983)，F(xiàn)riedman等，Neurochem.，42，237(1984))。作為脯氨?；鶅?nèi)肽酶抑制劑，已經(jīng)合成了N-末端取代的L-脯氨酸或L-脯氨酰吡咯烷(Atack等，Eur.J.of Pharm.，205，157-163(1991)，JP 0356,460，EP384,341)和在羧基末端含有prolinal的N-芐氧羰基(Z)二肽的變體(Nishikata等，Chem.Pharm.Bull.34(7)，2931-2936(1986)，Baker，A.等，Bioorganic & Medicinal Chem.Letts.，1(11)，585-590(1991))。已報(bào)導(dǎo)被硫代脯氨酸、噻唑烷和氧代吡咯烷取代的核心結(jié)構(gòu)抑制脯氨?；鶅?nèi)肽酶(Tsuru等，J.Biochem.，94，1179(1988)，Tsuru等，J.Biochem.，104，580-586(1988)，Saito等，J.Enz.Inhib.5，51-75(1991)，Uchida，I.等，PCT Int.Appl.WO 90 12,005，JP 03 56,461，JP 03 56,462)。類(lèi)似地，已進(jìn)行了羧基末端脯氨酸的各種修飾，包括各種氟化酮衍生物(Henning，EP 4,912,127)。已描述了氟化酮衍生物的一般合成(Angelastro，M.R.等，Tetrahedron Letters 33(23)，3265-3268(1992))。已表明其它化合物如?；彼峄蝓；?脯氨酸的氯甲基酮衍生物(Z-Gly-Pro-CH2Cl)通過(guò)將該酶的活性位點(diǎn)烷基化而抑制該酶(Yoshimoto，T.等，Biochemistry 16，2942(1977))。
EP-A-0 286 928公開(kāi)了2-?；量┩檠苌?，其可用作脯氨?；鶅?nèi)肽酶抑制劑。
根據(jù)本發(fā)明的其它合適的脯氨?；鶅?nèi)肽酶抑制劑是例如Fmoc-Ala-Pyrr-CN以及以下列出的化合物
根據(jù)本發(fā)明的其它合適的脯氨酰基內(nèi)肽酶抑制劑公開(kāi)于JP01042465、JP 03031298、JP 04208299、WO 0071144、US 5847155、JP 09040693、JP 10077300、JP 05331072、JP 05015314、WO 9515310、WO 9300361、EP 0556482、JP 06234693、JP 01068396、EP 0709373、US 5965556、US 5756763、US 6121311、JP 63264454、JP 64000069、JP 63162672、EP 0268190、EP 0277588、EP 0275482、US 4977180、US 5091406、US 4983624、US 5112847、US 5100904、US 5254550、US 5262431、US 5340832、US 4956380、EP 0303434、JP 03056486、JP 01143897、JP 1226880、EP 0280956、US 4857537、EP 0461677、EP 0345428、JP 02275858、US 5506256、JP 06192298、EP 0618193、JP 03255080、EP 0468469、US 5118811、JP 05025125、WO 9313065、JP 05201970、WO 9412474、EP 0670309、EP 0451547、JP 06339390、US 5073549、US 4999349、EP 0268281、US 4743616、EP 0232849、EP 0224272、JP 62114978、JP 62114957、US 4757083、US 4810721、US 5198458、US 4826870、EP 0201742、EP 0201741、US 4873342、EP 0172458、JP 61037764、EP 0201743、US 4772587、EP 0372484、US 5028604、WO 9118877、JP 04009367、JP 04235162、US 5407950、WO 9501352、JP 01250370、JP 02207070、US 5221752、EP 0468339、JP 04211648和WO 9946272，本文引入其全文的教導(dǎo)作為參考，特別是關(guān)于這些抑制劑、它們的定義、用途和它們的制備的教導(dǎo)。
最優(yōu)選的是下式的PEP抑制劑 根據(jù)本發(fā)明可以與QC抑制劑組合使用的其它合適的化合物是NPY、NPY模擬物或NPY激動(dòng)劑或拮抗劑或NPY受體的配體。
根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的是NPY受體的拮抗劑。
NPY受體的合適的配體或拮抗劑是如WO 00/68197中公開(kāi)的3a，4，5，9b-四氫-1h-苯并[e]吲哚-2-基胺衍生的化合物。
可以提及的NPY受體拮抗劑包括公開(kāi)于歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)EP 0 614911、EP 0 747 357、EP 0 747 356和EP 0 747 378、國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)WO9417035、WO 9719911、WO 9719913、WO 9612489、WO 9719914、WO 9622305、WO 9640660、WO 9612490、WO 9709308、WO 9720820、WO 9720821、WO 9720822、WO 9720823、WO 9719682、WO 9725041、WO 9734843、WO 9746250、WO 9803492、WO 9803493、WO 9803494和WO 9807420、WO 0030674、美國(guó)專(zhuān)利5552411、5663192和5567714、6114336、日本專(zhuān)利申請(qǐng)JP 09157253、國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)WO9400486、WO 9312139、WO 9500161和WO 9915498、美國(guó)專(zhuān)利5328899、德國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)DE 393 97 97、歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)EP 355 794和EP 355 793以及日本專(zhuān)利申請(qǐng)JP 06116284和JP 07267988中的那些，本文引入所有這些文件公開(kāi)的內(nèi)容作為參考。優(yōu)選的NPY拮抗劑包括在這些專(zhuān)利文件中具體公開(kāi)的那些化合物。更優(yōu)選的化合物包括氨基酸和非肽基NPY拮抗劑?？梢蕴峒暗陌被岷头请幕鵑PY拮抗劑包括公開(kāi)于歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)EP 0 614 911、EP 0 747 357、EP 0 747 356和EP 0 747 378、國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)WO 9417035、WO 9719911、WO9719913、WO 9612489、WO 9719914、WO 9622305、WO 9640660、WO 9612490、WO 9709308、WO 9720820、WO 9720821、WO 9720822、WO 9720823、WO 9719682、WO 9725041、WO 9734843、WO 9746250、WO 9803492、WO 9803493、WO 9803494、WO 9807420和WO9915498、美國(guó)專(zhuān)利5552411、5663192和5567714以及日本專(zhuān)利申請(qǐng)JP 09157253中的那些。優(yōu)選的氨基酸和非肽基NPY拮抗劑包括在這些專(zhuān)利文件中具體公開(kāi)的那些化合物。
特別優(yōu)選的化合物包括氨基酸基NPY拮抗劑。可以提及的氨基酸基化合物包括公開(kāi)于國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)WO 9417035、WO 9719911、WO 9719913、WO 9719914或優(yōu)選WO 9915498中的那些。優(yōu)選的氨基酸基NPY拮抗劑包括在這些專(zhuān)利文件中具體公開(kāi)的那些，例如BIBP3226，特別是(R)-N2-(二苯基乙?；?-(R)-N-[1-(4-羥基-苯基)乙基]精氨酸酰胺(國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)WO 9915498的實(shí)施例4)。
為避免疑惑，本文具體引入上述每篇出版物中公開(kāi)的實(shí)施例作為參考，如同單獨(dú)公開(kāi)的化合物，特別是關(guān)于它們的結(jié)構(gòu)、它們的定義、用途和它們的制備。
合適的DP IV抑制劑是例如公開(kāi)于US 6380398、US 6011155、US 6107317、US 6110949、US 6124305、US 6172081、WO 9515309、WO 9961431、WO 9967278、WO 9967279、DE 19834591、WO9740832、DE 196 16 486 C 2、WO 9819998、WO 0007617、WO9938501、WO 9946272、WO 9938501、WO 0168603、WO 0140180、WO 0181337、WO 0181304、WO 0155105、WO 0202560和WO0214271、WO 0204610、WO 02051836、WO 02068420、WO 02076450、WO 02083128、WO 0238541、WO 03000180、WO 03000181、WO03000250、WO 03002530、WO 03002531、WO 03002553、WO03002593、WO 03004496、WO 03004498、WO 03024965、WO03024942、WO 03035067、WO 03037327、WO 03035057、WO03045977、WO 03055881、WO 0368748、WO 0368757、WO 03057666、WO 03057144、WO 03040174、WO 03033524和WO 03074500中的那些，本文引入其全文的教導(dǎo)作為參考，特別是關(guān)于這些抑制劑、它們的定義、用途和它們的制備的教導(dǎo)。
其它合適的DP IV抑制劑如下表所示
為避免疑惑，本文具體引入本文公開(kāi)的文獻(xiàn)和實(shí)施例作為參考，或者如同單獨(dú)公開(kāi)的化合物，特別是關(guān)于它們的結(jié)構(gòu)、它們的定義、用途和它們的制備。
優(yōu)選的DP IV抑制劑是二肽樣化合物和由氨基酸與噻唑烷或吡咯烷基團(tuán)形成的與二肽化合物類(lèi)似的化合物以及它們的鹽，本文以下稱(chēng)為二肽樣化合物。優(yōu)選氨基酸和噻唑烷或吡咯烷基團(tuán)通過(guò)酰胺鍵鍵合。
特別適于本發(fā)明目的的是這樣的二肽樣化合物，其中氨基酸優(yōu)選選自天然氨基酸如亮氨酸、纈氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、脯氨酸、異亮氨酸、天冬酰胺和天冬氨酸。
根據(jù)本發(fā)明使用的二肽樣化合物在(二肽化合物)濃度為10μM時(shí)使血漿二肽基肽酶IV或DP IV類(lèi)似酶的活性降低至少10％，特別是降低至少40％。經(jīng)常還需要活性降低至少60％或至少70％。優(yōu)選的活性劑還可以使活性最多降低20％或30％。
優(yōu)選的二肽樣化合物是N-纈氨酰脯氨酰、O-苯甲酰羥胺、丙氨酰吡咯烷、異亮氨酰噻唑烷如L-別-異亮氨酰噻唑烷、L-蘇型-異亮氨酰吡咯烷及其鹽，特別是富馬酸鹽，以及L-別-異亮氨酰吡咯烷及其鹽。
其它優(yōu)選的化合物在表2中給出。
二肽樣化合物的鹽可以以二肽(-類(lèi)似物)組分與鹽組分的摩爾比為1∶1或2∶1存在。這樣的鹽是例如(Ile-Thia)2富馬酸。
表2其它優(yōu)選二肽化合物的結(jié)構(gòu)


在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式3化合物用于競(jìng)爭(zhēng)性調(diào)節(jié)二肽基肽酶IV催化的用途

其中A、B、C、D和E獨(dú)立地是任何氨基酸基團(tuán)，包括蛋白原氨基酸、非蛋白原氨基酸、L-氨基酸和-D氨基酸，其中E和/或D可以不存在。
根據(jù)優(yōu)選的實(shí)施方案，式(3)的殘基A、B、C、D和E獨(dú)立地如下定義A是除D氨基酸以外的氨基酸，B是選自Pro、Ala、Ser、Gly、Hyp、乙酸乙酯-(2)-羧酸和2-哌啶酸的氨基酸，C是除Pro、Hyp、乙酸乙酯-(2)-羧酸、2-哌啶酸、N-烷基化氨基酸如N-甲基纈氨酸和肌氨酸之外的任何氨基酸，D是任何氨基酸或缺失，且E是任何氨基酸或缺失，或者C是除Pro、Hyp、乙酸乙酯-(2)-羧酸、2-哌啶酸、N-烷基化氨基酸如N-甲基纈氨酸和肌氨酸、D-氨基酸之外的任何氨基酸，D是選自Pro、Ala、Ser、Gly、Hyp、乙酸乙酯-(2)-羧酸和2-哌啶酸的任何氨基酸，
E是除Pro、Hyp、乙酸乙酯-(2)-羧酸、2-哌啶酸、N-烷基化氨基酸如N-甲基纈氨酸和肌氨酸之外的任何氨基酸。
遺傳密碼中編碼的氨基酸以外的其它氨基酸也可以包括在本發(fā)明范圍內(nèi)的肽化合物之內(nèi)，并且它們可以在這一總體方案中分類(lèi)。
本文中將蛋白原氨基酸定義為源自天然蛋白質(zhì)的α-氨基酸。本文將非蛋白原氨基酸定義為所有其它氨基酸，它們不是常規(guī)天然蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)單元。
所得的肽可以合成為游離的C-末端酸或C-末端酰胺形式。游離酸肽或酰胺可能在側(cè)鏈修飾上有所不同。這種側(cè)鏈修飾包括例如但不限于高絲氨酸形成、焦谷氨酸形成、二硫鍵形成、天冬酰胺或谷氨酰胺殘基的脫酰氨基、甲基化、叔丁基化、叔丁氧羰基化、4-甲基芐基化、硫甲氧苯基化(thioanysilation)、硫甲苯基化(thiocresylation)、芐氧基甲基化、4-硝基苯基化、芐氧羰基化、2-硝基苯甲?；?-硝基硫苯基化(2-nitrosulphenylation)、4-甲苯磺?；?、五氟苯基化、二苯基甲基化、2-氯芐氧羰基化、2，4，5-三氯苯基化、2-溴芐氧羰基化、9-氟甲氧羰基化、三苯基甲基化、2，2，5，7，8-五甲基色原烷-6-磺?；?、羥基化、甲硫氨酸的氧化、甲酰化、乙酰化、甲氧苯基化、芐基化、苯甲?；?、三氟乙酰化、天冬氨酸或谷氨酸的羧基化、磷酸化、硫酸化、半胱氨酰化、用戊糖、脫氧己糖、己糖胺、己糖或N-乙酰己糖胺的糖基化、法尼基化、肉豆蔻酰化、生物素?；?、棕櫚?；?、硬脂?；?、香葉基香葉?；?geranylgeranylation)、谷胱甘肽?；?glutathionylation)、5’-腺苷化(5’-adenosylation)、ADP-核糖基化、用N-羥乙酰神經(jīng)氨酸、N-乙酰神經(jīng)氨酸、吡哆醛磷酸、硫辛酸、4’-磷酸泛酰巰基乙胺或N-羥基琥珀酰亞胺的修飾。
在式(3)的化合物中，氨基酸基團(tuán)A、B、C、D和E分別以標(biāo)準(zhǔn)命名法中通常的方式與相鄰的基團(tuán)通過(guò)酰胺鍵連接，因此氨基酸(肽)的氨基末端(N-末端)寫(xiě)在左邊而氨基酸(肽)的羧基末端(C末端)則寫(xiě)在右邊。
優(yōu)選的肽化合物列于表3中。
表3肽底物的實(shí)例

1[M+H+]由電噴霧質(zhì)譜法在正電離模式下測(cè)定。
叔丁基-Gly定義為
Ser(Bzl)和Ser(P)分別定義為芐基-絲氨酸和磷?；?絲氨酸。Tyr(P)定義為磷?；?酪氨酸。
可根據(jù)本發(fā)明使用的其它優(yōu)選的DP IV抑制劑是式4的肽基酮及其藥學(xué)可接受的鹽 其中A選自以下結(jié)構(gòu) 其中X1是H或?；蜓趸驶?oxycarbonyl)，包括氨基酸殘基、N-保護(hù)的氨基酸殘基、肽殘基或N-保護(hù)的肽殘基，X2是H、-(CH)m-NH-C5H3N-Y，其中m＝2-4或-C5H3N-Y(二價(jià)吡啶基殘基)，且Y選自H、Br、Cl、I、NO2或CN，X3是H或選自烷基、烷氧基、鹵素、硝基、氰基或羧基取代的苯基或選自烷基、烷氧基、鹵素、硝基、氰基或羧基取代的吡啶基殘基，X4是H或選自烷基、烷氧基、鹵素、硝基、氰基或羧基取代的苯基或選自烷基、烷氧基、鹵素、硝基、氰基或羧基取代的吡啶基殘基，X5是H或烷基、烷氧基或苯基殘基，X6是H或烷基殘基，對(duì)于n＝1，X選自H、OR2、SR2、NR2R3、N+R2R3R4，其中R2代表任選被烷基、環(huán)烷基、芳基或雜芳基殘基取代的酰基殘基或任選被烷基、環(huán)烷基、芳基或雜芳基殘基取代的氨基酸殘基或肽殘基或烷基殘基，R3代表烷基或?；鶜埢?，其中R2和R3可以是飽和或不飽和碳環(huán)或雜環(huán)的一部分，R4代表烷基殘基，其中R2和R4或R3和R4可以是飽和或不飽和碳環(huán)或雜環(huán)的一部分，對(duì)于n＝0，X選自 其中B代表O、S或NR5，其中R5是H、烷基或?；珻、D、E、F、G、Y、K、L、M、Q、T、U、V和W獨(dú)立地選自烷基和取代的烷基殘基、烷氧基、硫烷基、氨基烷基、羰基烷基、?；?、氨甲?；?、芳基和雜芳基殘基，且Z選自H或支鏈或直鏈C1-C9烷基殘基、支鏈或直鏈C2-C9烯基殘基、C3-C8環(huán)烷基殘基、C5-C7環(huán)烯基殘基、芳基或雜芳基殘基，或者選自所有天然氨基酸或其衍生物的所有側(cè)鏈的側(cè)鏈。
在式4的優(yōu)選化合物中，A是 其中X1是H或酰基或氧基羰基，包括氨基酸殘基、N-?；陌被釟埢?、從二肽至五肽的肽殘基，優(yōu)選二肽殘基，或者從二肽至五肽的N-保護(hù)的肽殘基，優(yōu)選N-保護(hù)的二肽殘基，X2是H、-(CH)m-NH-C5H3N-Y，其中m＝2-4或-C5H3N-Y(二價(jià)吡啶基殘基)，且Y選自H、Br、Cl、I、NO2或CN，對(duì)于n＝1，X優(yōu)選選自H、OR2、SR2、NR2R3，其中R2代表任選被烷基、環(huán)烷基、芳基或雜芳基殘基取代的酰基殘基或任選被烷基、環(huán)烷基、芳基或雜芳基殘基取代的氨基酸殘基或肽殘基或烷基殘基，R3代表烷基或酰基殘基，其中R2和R3可以是飽和或不飽和碳環(huán)或雜環(huán)的一部分，對(duì)于n＝0，X優(yōu)選選自 其中B代表O、S或NR5，其中R5是H、烷基或酰基，C、D、E、F、G、Y、K、L、M和Q獨(dú)立地選自烷基和取代的烷基殘基、烷氧基、硫烷基、氨基烷基、羰基烷基、?；?、氨甲酰基、芳基和雜芳基殘基，且Z選自H或支鏈或直鏈C1-C9、優(yōu)選C2-C6烷基殘基、支鏈或直鏈C2-C9烯基殘基、C3-C8環(huán)烷基殘基、C5-C7環(huán)烯基殘基、芳基或雜芳基殘基，或者選自所有天然氨基酸或其衍生物的所有側(cè)鏈的側(cè)鏈。
在更優(yōu)選的式4化合物中，A是 其中X1是H或?；蜓趸驶?，包括氨基酸殘基、N-酰化的氨基酸殘基或從二肽至五肽的肽殘基，優(yōu)選二肽殘基，或者從二肽至五肽的N-保護(hù)的肽殘基，優(yōu)選N-保護(hù)的二肽殘基對(duì)于n＝1，X優(yōu)選選自H、OR2、SR2，其中R2代表任選被烷基或芳基殘基取代的?；鶜埢?，對(duì)于n＝0，X優(yōu)選選自 其中B代表O、S或NR5，其中R5是H、烷基或?；?，C、D、E、F、G、Y、K、L、M和Q彼此獨(dú)立地選自烷基和取代的烷基殘基、烷氧基、硫烷基、氨基烷基、羰基烷基、酰基、氨甲?；⒎蓟碗s芳基殘基，且Z選自H或支鏈或直鏈C1-C9、優(yōu)選C2-C6烷基殘基、支鏈或直鏈C2-C9烯基殘基、C3-C8環(huán)烷基殘基、C5-C7環(huán)烯基殘基、芳基或雜芳基殘基，或者選自所有天然氨基酸或其衍生物的所有側(cè)鏈的側(cè)鏈。
在最優(yōu)選的式4化合物中，A是 其中X1是H或?；蜓趸驶?，包括氨基酸殘基、N-酰化的氨基酸殘基或在倒數(shù)第二位含有Pro或Ala的二肽殘基或在倒數(shù)第二位含有Pro或Ala的N-保護(hù)的二肽殘基，對(duì)于n＝1，X是H，對(duì)于n＝0，X優(yōu)選選自 其中B代表O或S，最優(yōu)選S，C、D、E、F、G、Y、K、L、M、Q是H，Z選自H或支鏈或直鏈C3-C5烷基殘基、支鏈或直鏈C2-C9烯基殘基、C5-C7環(huán)烷基殘基、C5-C7環(huán)烯基殘基、芳基或雜芳基殘基，或者選自所有天然氨基酸或其衍生物的所有側(cè)鏈的側(cè)鏈。
最優(yōu)選的Z是H。
根據(jù)優(yōu)選的實(shí)施方案，酰基是C1-C6?；?。
根據(jù)另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，烷(基)是C1-C6烷(基)，其可以是支鏈或非支鏈的。
根據(jù)再一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，烷氧基是C1-C6烷氧基。
根據(jù)再一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，芳基殘基是任選具有稠環(huán)的C5-C12芳基殘基。
根據(jù)再一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，環(huán)烷基殘基(碳環(huán))是C3-C8環(huán)烷基殘基。
根據(jù)另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，雜芳基是任選具有稠環(huán)的、在至少一個(gè)環(huán)中還含有1-4個(gè)優(yōu)選1或2個(gè)雜原子如O、N和/或S的C4-C11芳基殘基。
根據(jù)另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，肽殘基含有2-50個(gè)氨基酸。
根據(jù)另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，雜環(huán)是還含有1-4個(gè)優(yōu)選1個(gè)或2個(gè)雜原子如O、N和/或S的C2-C7環(huán)烷基。
根據(jù)再一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，羧基是C1-C6羧基，其可以是支鏈或非支鏈的。
根據(jù)再一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，氧基羰基是式-O-(CH2)1-6COOH的基團(tuán)。
氨基酸可以是任何天然氨基酸或合成氨基酸，優(yōu)選天然α氨基酸。
優(yōu)選的式(4)的化合物是2-甲基羰基-1-N-[(L)-丙氨酰-(L)-纈氨酰]-(2S)-吡咯烷氫溴酸鹽；2-甲基羰基-1-N-[(L)-纈氨酰-(L)-脯氨酰-(L)-纈氨酰]-(2S)-吡咯烷氫溴酸鹽；2-[(乙酰氧基-甲基)羰基]-1-N-[(L)-丙氨酰-(L)-纈氨酰]-(2S)-吡咯烷氫溴酸鹽；2-[苯甲酰氧基-甲基)羰基]-1-N-[{(L)-丙氨酰}-(L)-纈氨酰]-(2S)-吡咯烷氫溴酸鹽；2-{[(2，6-二氯芐基)硫甲基]羰基}-1-N-[{(L)-丙氨酰}-(L)-纈氨酰]-(2S)-吡咯烷；2-[苯甲酰氧基-甲基)羰基]-1-N-[甘氨酰-(L)-纈氨酰]-(2S)-吡咯烷氫溴酸鹽；2-[([1，3]-噻唑-2-基)羰基]-1-N-[{(L)-丙氨酰}-(L)-纈氨酰]-(2S)-吡咯烷三氟乙酸鹽；2-[(苯并噻唑-2-基)羰基]-1-N-[N-{(L)-丙氨酰}-(L)-纈氨酰]-(2S)-吡咯烷三氟乙酸鹽；2-[(-苯并噻唑-2-基)羰基]-1-N-[{(L)-丙氨酰}-甘氨酰]-(2S)-吡咯烷三氟乙酸鹽；2-[(吡啶-2-基)羰基]-1-N-[N-{(L)-丙氨酰}-(L)-纈氨酰]-(2S)-吡咯烷三氟乙酸鹽。
此外，根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的DP IV抑制劑是式(5)的化合物，包括所有的立體異構(gòu)體和藥學(xué)可接受的鹽B-(CH-R1)n-C(＝X2)-D (5)其中n是0或1，R1代表H、C1-C9支鏈或直鏈烷基、優(yōu)選H、正丁烷-2-基、正丙-2-基或異丁基、C2-C9支鏈或直鏈烯基、C3-C8環(huán)烷基、優(yōu)選環(huán)己基、C5-C7環(huán)烯基、芳基、雜芳基或天然氨基酸或其模擬物的側(cè)鏈，X2代表O、NR6、N+(R7)2或S，B選自以下基團(tuán) 其中X5是H或?；蜓趸驶ò被幔琑5是H、C1-C9支鏈或直鏈烷基、優(yōu)選H、正丁烷-2-基、正丙-2-基或異丁基、C2-C9支鏈或直鏈烯基、C3-C8環(huán)烷基、優(yōu)選環(huán)己基、3-羥基金剛烷-1-基、C5-C7環(huán)烯基、芳基、雜芳基或天然氨基酸或其衍生物的側(cè)鏈或式-(CH)m-NH-C5H3N-Y的基團(tuán)，其中m是2-4的整數(shù)，-C5H3N-Y是二價(jià)吡啶基，且Y是氫原子、鹵素原子、硝基或氰基，R6、R7和R8獨(dú)立地選自H、任選取代的C1-C9支鏈或直鏈烷基、優(yōu)選任選取代的C2-C5支鏈或直鏈烷基；或任選取代的C2-C9支鏈或直鏈烯基，優(yōu)選C2-C5支鏈或直鏈烯基；或任選取代的C3-C8環(huán)烷基，優(yōu)選任選取代的C4-C7環(huán)烷基；或任選取代的C5-C7環(huán)烯基或任選取代的芳基殘基，Z選自H、吡啶基或任選取代的苯基、任選取代的烷基、烷氧基、鹵素、硝基、氰基和羧基，W選自H、吡啶基或任選取代的苯基、任選取代的烷基、烷氧基、鹵素、硝基、氰基和羧基，W1是H或任選取代的烷基、烷氧基或任選取代的苯基，Z1是H或任選取代的烷基，R3和R4獨(dú)立地是H、羥基、烷基、烷氧基、芳烷氧基、硝基、氰基或鹵素，D是任選取代的下式的化合物 其可以是飽和的，或者可以含有一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)雙鍵，其中若是不飽和的，則X8-X11獨(dú)立地是CH、N、N+(R7)或CR8；或者若是飽和的，則X8-X11獨(dú)立地是CH2、NH、NH+(R7)、O或S；或者若是飽和的，則X12是CHA、NA、CH2、NH、NH+(R7)或CHR8；或者若是不飽和的，則X12是CA、NA+、CH、N、N+(R7)或CR8，A是H或羧酸的等同物(isoster)，如CN、SO3H、CONOH、PO3R5R6、四唑、酰胺、酯或酸酐。
在整個(gè)申請(qǐng)中，D在環(huán)中優(yōu)選含有至多兩個(gè)、更優(yōu)選至多一個(gè)雜原子。
根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，D代表任選取代的C4-C7環(huán)烷基、優(yōu)選C4-C6環(huán)烷基、任選取代的C4-C7環(huán)烯基或下式的任選取代的(雜)環(huán)烷基 其中的殘基如上定義，或 即環(huán)中含有一個(gè)或兩個(gè)雙鍵的五元環(huán)，其中的殘基如上定義，或 其中的殘基如上定義，或 其中的殘基如上定義，或
即環(huán)中含有一個(gè)或兩個(gè)雙鍵的六元環(huán)，其中的殘基如上定義，或 其中的殘基如上定義。
根據(jù)優(yōu)選的實(shí)施方案，B具有下式的結(jié)構(gòu) 其中的殘基如上定義。
根據(jù)另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，B具有下式的結(jié)構(gòu) 其中的殘基如上定義。
優(yōu)選的式(5)的化合物是氯化1-環(huán)戊基-3-甲基-1-氧代-2-戊銨氯化1-環(huán)戊基-3-甲基-1-氧代-2-丁銨氯化1-環(huán)戊基-3，3-二甲基-1-氧代-2-丁銨氯化1-環(huán)己基-3，3-二甲基-1-氧代-2-丁銨氯化3-(環(huán)戊基羰基)-1，2，3，4-四氫異喹啉鎓氯化N-(2-環(huán)戊基-2-氧代乙基)環(huán)己銨。
因?yàn)榈鞍自隗w內(nèi)的分布廣泛且涉及DP IV、DP IV活性和DPIV相關(guān)蛋白的機(jī)理也非常多樣，因此使用DP IV抑制劑進(jìn)行全身治療(腸內(nèi)或胃腸外給藥)可能會(huì)導(dǎo)致一系列不期望的副作用。
因此要解決的問(wèn)題還有提供可用于組合治療神經(jīng)疾病的DP IV抑制劑，以靶向影響限于局部的病理生理過(guò)程和生理過(guò)程。本發(fā)明的問(wèn)題尤其在于獲得限于局部的對(duì)DP IV或DP IV類(lèi)似活性的高特異性抑制，以達(dá)到在局部活性物質(zhì)活性的調(diào)節(jié)中進(jìn)行靶向干預(yù)的目的。
本發(fā)明的這一問(wèn)題通過(guò)使用通式(6)的DP IV抑制劑來(lái)解決 其中A是在側(cè)鏈中具有至少一個(gè)官能團(tuán)的氨基酸，B是與A側(cè)鏈的至少一個(gè)官能團(tuán)共價(jià)鍵合的化合物，C是與A以酰胺鍵鍵合的噻唑烷、吡咯烷、氰基吡咯烷、羥脯氨酸、脫氫脯氨酸或哌啶基團(tuán)。
根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，使用包含至少一種式(5)的化合物和至少一種適用于作用位點(diǎn)的常規(guī)輔劑的藥物組合物。
優(yōu)選A是α-氨基酸，特別是在側(cè)鏈中具有一個(gè)、兩個(gè)或多個(gè)官能團(tuán)的天然α-氨基酸，優(yōu)選蘇氨酸、酪氨酸、絲氨酸、精氨酸、賴(lài)氨酸、天冬氨酸、谷氨酸或半胱氨酸。
優(yōu)選B是鏈長(zhǎng)至多20個(gè)氨基酸的寡肽、摩爾質(zhì)量至多20000g/mol的聚乙二醇、具有8-50個(gè)碳原子的任選取代的有機(jī)胺、酰胺、醇、酸或芳族化合物。
盡管側(cè)鏈較長(zhǎng)，但式(6)的化合物還是能夠與酶二肽基肽酶IV及類(lèi)似酶的活性中心結(jié)合，但是不再被肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PepT1主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)。結(jié)果本發(fā)明化合物的可轉(zhuǎn)運(yùn)性降低或大幅受限，導(dǎo)致對(duì)DP IV和DPIV樣酶活性的局部抑制或定點(diǎn)抑制。
通過(guò)延長(zhǎng)/擴(kuò)大側(cè)鏈修飾，例如多于7個(gè)碳原子，就可能相應(yīng)地獲得可轉(zhuǎn)運(yùn)性的急劇降低。隨著側(cè)鏈空間尺寸的增加，物質(zhì)的可轉(zhuǎn)運(yùn)性降低。通過(guò)在空間上立體地?cái)U(kuò)大側(cè)鏈，例如原子基團(tuán)大小高于單取代苯基、羥氨基或氨基酸殘基，就可能根據(jù)本發(fā)明對(duì)目標(biāo)物質(zhì)的可轉(zhuǎn)運(yùn)性進(jìn)行修飾或抑制。
優(yōu)選的式(6)的化合物是這樣的化合物，其中寡肽鏈長(zhǎng)為3-15，特別是4-10個(gè)氨基酸，和/或聚乙二醇的摩爾質(zhì)量為至少250g/mol，優(yōu)選至少1500g/mol和至多15000g/mol，和/或任選取代的有機(jī)胺、酰胺、醇、酸或芳族化合物具有至少12個(gè)碳原子，優(yōu)選至多30個(gè)碳原子。
藥物組合物為制備本發(fā)明的藥物組合物，至少一種QC效應(yīng)物任選與至少一種PEP抑制劑和/或至少一種DP IV抑制劑和/或至少一種NPY-受體-配體和/或至少一種ACE抑制劑組合，用作活性成分。根據(jù)常規(guī)配藥技術(shù)，將活性成分與藥用載體充分混合，根據(jù)給藥所期望的劑型如口服或胃腸外劑型如肌內(nèi)劑型，載體可以采用多種形式。制備口服劑型的組合物時(shí)，可以采用任何常規(guī)的藥用介質(zhì)。因此，對(duì)于液體口服制劑如混懸劑、酏劑和溶液劑，合適的載體和添加劑包括水、甘油、油、醇、調(diào)味劑、防腐劑、著色劑等；對(duì)于固體口服制劑如散劑、膠囊劑、凝膠帽和片劑，合適的載體和添加劑包括淀粉、糖、稀釋劑、制粒劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑、崩解劑等。片劑和膠囊劑因其給藥方便而代表最有利的口服劑量單元形式，其中顯然要采用固體藥用載體。若期望，片劑可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)包糖衣或腸溶衣。對(duì)于胃腸外制劑，載體通常包括無(wú)菌水，但也可以包括其它成分如為輔助溶解或防腐目的的成分。
也可以制備注射用混懸劑，其中可以采用適當(dāng)?shù)囊后w載體、助懸劑等。本文的藥物組合物每個(gè)劑量單元如片劑、膠囊劑、散劑、注射劑、一茶匙容量(teaspoonful)等含有活性成分的量是遞送如上所述的有效劑量的量。本文的藥物組合物每個(gè)劑量單元如片劑、膠囊劑、散劑、注射劑、栓劑、一茶匙容量等將含有約0.03mg-100mg/kg(優(yōu)選0.1-30mg/kg)的每種活性成分或它們的組合，給藥劑量為每日約0.1-300mg/kg(優(yōu)選每日1-50mg/kg)。但是，劑量可能根據(jù)患者的需要、所治療病癥的嚴(yán)重程度和所用化合物而變化?？梢圆捎妹咳战o藥法或周期后增量法。
優(yōu)選這些組合物是單位劑量的形式，如片劑、丸劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑、胃腸外無(wú)菌溶液劑或混懸劑、計(jì)量氣溶膠或液體噴霧劑、滴劑、安瓿劑、自動(dòng)注射器或栓劑；用于口服、胃腸外、鼻內(nèi)、舌下或直腸給藥或通過(guò)吸入法或吹入法給藥?；蛘?，組合物可以是適于每周一次或每月一次給藥的形式；例如活性化合物的不溶性鹽如癸酸鹽可以制備為適于為肌內(nèi)注射提供長(zhǎng)效制劑的形式。制備固體組合物如片劑時(shí)，將主要活性成分與藥用載體如常規(guī)壓片成分如玉米淀粉、乳糖、蔗糖、山梨糖醇、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸鎂、磷酸二鈣或樹(shù)膠以及其它藥用稀釋劑如水混合，形成含有本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽的勻質(zhì)混合物的固體預(yù)制劑組合物。當(dāng)將這些預(yù)制劑組合物稱(chēng)為勻質(zhì)時(shí)，其意思是指活性成分均勻地分散于整個(gè)組合物中，因此可以容易地將組合物再分為效力相等的劑量形式如片劑、丸劑和膠囊劑。然后將這樣的固體預(yù)制劑組合物再分為上述類(lèi)型的單元?jiǎng)┝啃问?，其含?.1至約500mg本發(fā)明的每種活性成分或它們的組合。
本發(fā)明組合物的片劑或丸劑可以包衣或者配制以提供具有長(zhǎng)效作用優(yōu)點(diǎn)的劑量形式。例如，片劑或丸劑可以包含內(nèi)層劑量組分和外層劑量組分，后者以外殼的形式包裹前者。兩種組分可以用腸溶層分開(kāi)，腸溶層的功能是抵抗胃內(nèi)的崩解從而使得內(nèi)層組分完整地進(jìn)入十二指腸中或者延遲釋放。多種材料可以用于這種腸溶層或包衣，這種材料包括許多聚合酸如蟲(chóng)膠、鯨蠟醇和醋酸纖維素。
可以引入本發(fā)明的組合物用于口服給藥或注射給藥的液體形式包括水溶液、適當(dāng)調(diào)味的糖漿、水懸浮液或油懸浮液、含食用油如棉籽油、芝麻油、椰油或花生油以及酏劑和相似的藥用載體的調(diào)味乳劑。用于水混懸劑的合適的分散劑或助懸劑包括合成橡膠和天然橡膠如黃蓍膠、阿拉伯膠、藻酸鹽、葡聚糖、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮或明膠。
若制備本發(fā)明化合物的方法得到立體異構(gòu)體的混合物，則可以通過(guò)常規(guī)技術(shù)如制備色譜分離這些異構(gòu)體?；衔锟梢灾苽錇橥庀问剑蛘呖梢酝ㄟ^(guò)對(duì)映特異性合成或拆分來(lái)制備單獨(dú)的對(duì)映體。例如可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)如通過(guò)與旋光酸如(-)-二對(duì)甲苯?；?d-酒石酸和/或(+)-二對(duì)甲苯?；?1-酒石酸成鹽而形成非對(duì)映體對(duì)，然后分步結(jié)晶并再生游離堿的方法將化合物拆分為它們的對(duì)映體組分。還可以通過(guò)形成非對(duì)映體酯或酰胺，然后經(jīng)色譜分離并除去手性輔劑來(lái)拆分化合物?；蛘呖梢允褂檬中訦PLC柱拆分化合物。
在制備本發(fā)明化合物的任何方法中都可能需要和/或期望保護(hù)任何相關(guān)分子上敏感基團(tuán)或反應(yīng)性基團(tuán)。這可以用常規(guī)保護(hù)基如Protective Groups in Organic Chemistry，ed.J.F.W.McOmie，PlenumPress，1973；和T.W.Greene & P.G.M.Wuts，Protective Groups inOrganic Synthesis，John Wiley & Sons，1991中描述的保護(hù)基實(shí)現(xiàn)?？梢栽诜奖愕暮罄m(xù)階段使用本領(lǐng)域已知的常規(guī)方法除去保護(hù)基。
本發(fā)明中描述的治療神經(jīng)病癥的方法還可以使用藥物組合物進(jìn)行，所述藥物組合物包含至少一種QC效應(yīng)物以及任選的至少一種PEP抑制劑和/或至少一種DP IV抑制劑和/或至少一種NPY-受體-配體和/或至少一種ACE抑制劑或本文定義的任何其它化合物和藥學(xué)可接受的載體。藥物組合物可以含有約0.01mg-100mg，優(yōu)選約5-50mg的每種化合物，并且可以制備為適于所選擇的給藥方式的任何形式。載體包括必要的惰性藥用賦形劑，包括但不限于粘合劑、助懸劑、潤(rùn)滑劑、調(diào)味劑、甜味劑、防腐劑、染料和包衣劑。適于口服給藥的組合物包含固體形式如丸劑、片劑、囊片、膠囊劑(每種都包括速釋制劑、延遲釋放制劑和緩釋制劑)、顆粒劑和散劑以及液體形式如溶液劑、糖漿劑、酏劑、乳劑和混懸劑?？捎糜谖改c外給藥的形式包括無(wú)菌溶液劑、乳劑和混懸劑。
有利地，本發(fā)明的化合物可以以單次日劑量給藥，或者總?cè)談┝靠梢苑譃槊咳諆纱?、三次或四次劑量給藥。此外，通過(guò)局部使用合適的鼻內(nèi)載體，本發(fā)明的化合物可以以鼻內(nèi)形式給藥，或者通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的透皮貼給藥。為了以透皮遞送系統(tǒng)的形式給藥，給藥劑量當(dāng)然在整個(gè)給藥方案中是連續(xù)而不是間斷的。
例如，為了以片劑或膠囊劑的形式口服給藥，可將活性藥物組分與口服的無(wú)毒藥學(xué)可接受的惰性載體如乙醇、甘油、水等混合。此外，當(dāng)期望或需要時(shí)，可以向混合物中引入粘合劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑和著色劑。合適的粘合劑包括但不限于淀粉、明膠、天然糖如葡萄糖或β乳糖、玉米甜味劑、天然橡膠和合成橡膠如阿拉伯膠、黃蓍膠或油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括但不限于淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤(rùn)土、黃原膠等。
液體形式在適當(dāng)調(diào)味的助懸劑或分散劑如合成橡膠或天然橡膠如黃蓍膠、阿拉伯膠、甲基纖維素等中。對(duì)于胃腸外給藥，無(wú)菌混懸劑和溶液劑是期望的。當(dāng)期望靜脈內(nèi)給藥時(shí)，則采用通常含有合適的防腐劑的等滲制劑。
本發(fā)明的化合物或組合還可以以脂質(zhì)體遞送系統(tǒng)的形式如小的單層囊泡、大的單層囊泡或多層囊泡的形式給藥。脂質(zhì)體可以由各種磷脂如膽固醇、硬脂酰胺或磷脂酰膽堿制備。
還可以使用與化合物分子偶聯(lián)的單克隆抗體作為單獨(dú)的載體遞送本發(fā)明的化合物或組合。本發(fā)明的化合物還可以與作為靶向藥物載體的可溶性聚合物偶聯(lián)。這種聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯酰胺苯酚、聚羥乙基天冬酰胺苯酚或被棕櫚?；〈木郗h(huán)氧乙烷聚賴(lài)氨酸。此外，本發(fā)明的化合物可以與一類(lèi)可用于實(shí)現(xiàn)藥物控釋的可生物降解的聚合物例如聚乳酸、聚ε己內(nèi)酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯和交聯(lián)或兩性水凝膠嵌段共聚物偶聯(lián)。
當(dāng)需要治療所述病癥時(shí)，可以將本發(fā)明的化合物或組合根據(jù)本領(lǐng)域已建立的給藥方案，以上述任何一種組合物的形式給藥。
產(chǎn)品的每日劑量可以在每只哺乳動(dòng)物每日0.01-1.000mg的寬范圍內(nèi)變化。對(duì)于口服給藥，組合物優(yōu)選是片劑的形式，其含有0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100、150、200、250和500毫克的每種活性成分或它們的組合，以根據(jù)癥狀調(diào)整給予要治療的患者的劑量。藥物的有效量通常在約每日0.1mg/kg體重至約300mg/kg體重的劑量水平提供。優(yōu)選的范圍是約每日約1至約50mg/kg體重?；衔锘蚪M合的給藥方案可以是每日1-4次。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地確定給藥的最佳劑量，其會(huì)隨所用的具體化合物、給藥方式、制劑強(qiáng)度、給藥方式和疾病狀況的發(fā)展而變化。此外，與所治療的具體患者相關(guān)的因素包括患者年齡、體重、飲食和給藥時(shí)間也會(huì)產(chǎn)生調(diào)整劑量的需要。
合適地，由本發(fā)明的治療提供的特別有益的效果是，相對(duì)于組合中的一種化合物在以提供與本發(fā)明組合相等功效的劑量下單獨(dú)使用時(shí)的治療比率而言，本發(fā)明的組合的治療比率提高。
在優(yōu)選的方面，由本發(fā)明的治療提供的特別有益的效果是相對(duì)于自單獨(dú)的活性劑的效果預(yù)期的對(duì)照而言的協(xié)同作用。
在本發(fā)明的另一方面，將至少一種QC抑制劑與至少一種PEP抑制劑和/或至少一種DP IV抑制劑和/或至少一種NPY-受體-配體組合，與每種活性劑在為所述組合中該活性劑劑量?jī)杀兜膭┝肯聠为?dú)使用所實(shí)現(xiàn)的效果相比，將產(chǎn)生更大的有益效果。
在優(yōu)選的方面，對(duì)于神經(jīng)病癥而言，當(dāng)根據(jù)本發(fā)明的治療使用時(shí)，每種活性劑的劑量水平將低于純疊加效應(yīng)所需要的劑量水平。
還認(rèn)為本發(fā)明的治療相對(duì)于單獨(dú)的活性劑而言，在降低細(xì)胞內(nèi)pGlu-淀粉樣-β-肽沉積方面實(shí)現(xiàn)提高，從而使哺乳動(dòng)物優(yōu)選人的腦中斑塊形成大大減慢。
在另一方面，本發(fā)明還提供制備藥物組合物的方法，所述藥物組合物包含至少一種QC效應(yīng)物和任選的至少一種PEP抑制劑和/或至少一種DP IV抑制劑和/或至少一種NPY-受體-配體和/或至少一種ACE抑制劑和藥學(xué)可接受的載體，所述方法包括將QC效應(yīng)物和/或DP IV抑制劑和/或PEP抑制劑和/或NPY-受體-配體和/或ACE抑制劑和藥學(xué)可接受的載體混合。
組合物優(yōu)選是單位劑量的形式，其量對(duì)相關(guān)的日劑量而言合適。
QC抑制劑、PEP抑制劑、DP IV抑制劑和NPY-受體-配體的合適的劑量，特別包括單元?jiǎng)┝?，包括文獻(xiàn)如英國(guó)藥典和美國(guó)藥典，Remington′s Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Co.)，MartindaleThe Extra Pharmacopoeia(London，The Pharmaceutical Press)(實(shí)例請(qǐng)參見(jiàn)第31版第341頁(yè)以及其中引用的頁(yè))或以上提及的出版物中描述的這些化合物的已知?jiǎng)┝堪▎卧獎(jiǎng)┝俊?br> 本發(fā)明的實(shí)施例實(shí)施例1肽的固相合成本文使用的肽使用自動(dòng)化合成儀SYMPHONY(RAININ)用修改的Fmoc-方案合成。利用自肽C-末端第15個(gè)氨基酸的雙偶聯(lián)修改循環(huán)，使用五倍過(guò)量的Fmoc-氨基酸和偶聯(lián)試劑。通過(guò)TBTU/NMM-活化進(jìn)行肽偶聯(lián)，使用0.23mmol取代的NovaSyn TGR-樹(shù)脂或相應(yīng)的預(yù)先上樣的(preloaded)25μmol Wang-樹(shù)脂。通過(guò)由94.5％TFA、2.5％水、2.5％EDT和1％TIS組成的裂解混合物進(jìn)行從樹(shù)脂上的裂解。
用Merck-Hitachi的LiChrograph HPLC系統(tǒng)和不同梯度進(jìn)行分析和制備HPLC。梯度由兩種溶劑組成(A)在H2O中的0.1％TFA和(B)在乙腈中的0.1％TFA。分析HPLC在以下條件下進(jìn)行使溶劑通過(guò)(1ml/min)125-4Nucleosil RP18-柱，梯度為5％-50％B，時(shí)間為15分鐘，然后到20分鐘時(shí)達(dá)到95％B，進(jìn)行UV檢測(cè)(λ＝220nm)。肽的純化通過(guò)制備HPLC進(jìn)行，使用250-20Nucleosil 100 RP8-柱或250-10LiChrospher 300 RP18-柱(流速6ml/min，220nm)，根據(jù)肽鏈長(zhǎng)度選擇不同條件。
使用Hewlett-Packard的HP G2025 MALDI-TOF系統(tǒng)經(jīng)激光解吸質(zhì)譜鑒定肽和肽類(lèi)似物。
實(shí)施例2DP IV抑制劑IC50值的測(cè)定將100μl抑制劑儲(chǔ)備液與100μl緩沖液(HEPES pH 7.6)和50μl底物(Gly-Pro-pNA，終濃度0.4mM)混合，在30℃下預(yù)溫育。加入20μl純的豬DP IV使反應(yīng)開(kāi)始。用HTS 7000Plus讀板器(Perkin Elmer)在405nm處測(cè)量產(chǎn)物pNA的形成，測(cè)量10分鐘，并計(jì)算斜率。抑制劑終濃度在1mM-30nM之間。
用GraFit 4.0.13(Erithacus Software)計(jì)算IC50值。
實(shí)施例3DP IV抑制劑Ki值的測(cè)定為測(cè)定Ki值，以與實(shí)施例2中描述相同的方法測(cè)定DP IV活性，底物終濃度為0.05、0.1、0.2和0.4mM和其它7個(gè)覆蓋IC50濃度的抑制劑濃度。用GraFit軟件進(jìn)行計(jì)算。
實(shí)施例4脯氨酰基內(nèi)肽酶(PEP)酶活性測(cè)定如最近描述(Schulz等，2002，Modulation of inositol1，4，5-triphosphate concentration by prolyl endopeptidase inhibition.Eur JBiochem 2695813-5820)對(duì)PEP酶活性進(jìn)行定量。在熒光分光光度計(jì)SFM 25(激發(fā)波長(zhǎng)380nm，發(fā)射波長(zhǎng)460nm，Kontron，Neufahrn，Germany)上，用熒光底物Z-Gly-Pro-NHMec(10μM；Bachem，Heidelberg，Germany)在測(cè)定緩沖液中溫育上述細(xì)胞提取物，該熒光光度計(jì)裝有四池變換器，并由IBM兼容個(gè)人計(jì)算機(jī)控制。用FLUCOL軟件分析所得數(shù)據(jù)(Machleidt等，1995)。
實(shí)施例5谷氨酰胺酰基環(huán)化酶活性測(cè)定熒光測(cè)定法所有測(cè)量都用微量培養(yǎng)板BioAssay Reader HTS-7000Plus(PerkinElmer)在30℃下進(jìn)行。用H-Gln-βNA對(duì)QC活性進(jìn)行熒光評(píng)價(jià)。樣品由在含有20mM EDTA的0.2M Tris/HCl，pH 8.0中的0.2mM熒光底物、0.25U焦谷氨酰基氨肽酶(Unizyme，Horsholm，Denmark)和適當(dāng)稀釋的QC等分試樣組成，終體積為250μl。激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)為320/410nm。通過(guò)加入谷氨酰胺?；h(huán)化酶引發(fā)反應(yīng)。由測(cè)定條件下的β-萘胺標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)確定QC活性。一個(gè)單位定義為在所述條件下，每分鐘催化H-Gln-βNA形成1μmol pGlu-βNA的QC的量。
在第二個(gè)熒光測(cè)定中，用H-Gln-AMC作為底物，測(cè)定QC活性。反應(yīng)在30℃下進(jìn)行，使用微量培養(yǎng)板NOVOStar讀數(shù)器(BMGlabtechnologies)。樣品由在含有5mM EDTA的0.05M Tris/HCl，pH8.0中的各種濃度的熒光底物、0.1U焦谷氨?；彪拿?Qiagen)和適當(dāng)稀釋的的QC等分試樣組成，終體積為250μl。激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)為380/460nm。通過(guò)加入谷氨酰胺?；h(huán)化酶引發(fā)測(cè)定反應(yīng)。由測(cè)定條件下的7-氨基-4-甲基香豆素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)確定QC活性。用GraFit軟件評(píng)價(jià)動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)。
QC的分光光度測(cè)定這一新的測(cè)定法用于測(cè)定多數(shù)QC底物的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。使用谷氨酸脫氫酶作為輔助酶，用通過(guò)修改以前的不連續(xù)測(cè)定法(Bateman，R.C.J.1989 J Neurosci Methods 30，23-28)得到的連續(xù)法對(duì)QC活性進(jìn)行分光光度法分析。樣品由相應(yīng)的QC底物、0.3mM NADH、14mMα-酮戊二酸和30U/ml谷氨酸脫氫酶組成，終體積為250μl。通過(guò)加入QC使反應(yīng)開(kāi)始，并監(jiān)測(cè)340nm處吸收度的降低追蹤反應(yīng)8-15分鐘。
由測(cè)定條件下的氨標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)評(píng)價(jià)初速度并評(píng)價(jià)酶活性。所有樣品均在30℃下用微量培養(yǎng)板SPECTRAFluor Plus或Sunrise(均得自TECAN)讀數(shù)器測(cè)量。用GraFit軟件評(píng)價(jià)動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)。
抑制劑測(cè)定法對(duì)于抑制劑測(cè)試，除了加入推定的抑制劑化合物以外，樣品組成與上述相同。對(duì)于快速Q(mào)C抑制測(cè)試，樣品含有4mM相應(yīng)的抑制劑和1KM濃度的底物。為了詳細(xì)研究抑制作用和測(cè)定Ki值，首先研究抑制劑對(duì)輔助酶的影響。在每種情況下，對(duì)所測(cè)定的酶均沒(méi)有影響，因此能夠可靠地測(cè)定QC抑制。通過(guò)用GraFit軟件將整套進(jìn)展曲線(xiàn)(progress curve)擬合于競(jìng)爭(zhēng)性抑制的一般方程中來(lái)評(píng)價(jià)抑制常數(shù)。
實(shí)施例6MALDI-TOF質(zhì)譜測(cè)定法用具有線(xiàn)性飛行時(shí)間分析儀的Hewlett-Packard G2025 LD-TOF系統(tǒng)進(jìn)行基質(zhì)輔助激光解吸/離子化質(zhì)譜分析。該儀器裝有337nm氮激光、電勢(shì)加速源(5kV)和1.0m飛行管。檢測(cè)器在陽(yáng)離子模式運(yùn)行，信號(hào)用與個(gè)人計(jì)算機(jī)相連的LeCroy 9350M數(shù)字存儲(chǔ)示波器記錄并過(guò)濾。將樣品(5μl)與等體積基質(zhì)溶液混合。我們使用的基質(zhì)溶液是DHAP/DAHC，其通過(guò)將30mg 2′，6′-二羥基苯乙酮(Aldrich)和44mg檸檬酸氫二銨(Fluka)溶于1ml乙腈/0.1％TFA水溶液(1/1，v/v)中。將小體積(≈1μl)基質(zhì)-分析物-混合物轉(zhuǎn)移至探針尖上，并立即在真空室(Hewlett-Packard G2024A樣品準(zhǔn)備附件)內(nèi)蒸發(fā)，以保證均勻快速的樣品結(jié)晶。
為對(duì)Glu1-環(huán)化進(jìn)行長(zhǎng)期測(cè)試，在30℃下將Aβ-衍生的肽在100μl0.1M乙酸鈉緩沖液，pH 5.2或0.1M Bis-Tris緩沖液，pH 6.5中溫育。肽在0.5mM[Aβ(3-11)a]或0.15mM[Aβ(3-21)a]濃度下施用，24小時(shí)加入0.2U QC。對(duì)于Aβ(3-21)a，測(cè)定液含有1％DMSO。在不同的時(shí)間，將樣品從測(cè)定管中移出，根據(jù)制造商的推薦，用ZipTips(Millipore)提取肽，將其與基質(zhì)溶液混合(1∶1v/v)，然后記錄質(zhì)譜。陰性對(duì)照的確不含QC或熱滅活的酶。對(duì)于抑制劑研究，除了加入抑制化合物(5mM苯并咪唑或2mM 1，10-鄰二氮雜菲)以外，樣品組成與上述相同。
第一種QC抑制劑公開(kāi)于WO 200409859中。本領(lǐng)域中沒(méi)有其它已知的強(qiáng)力QC抑制劑。對(duì)于治療神經(jīng)疾病的包含QC抑制劑的組合和組合物也是如此。本發(fā)明的化合物和組合物可能具有如下優(yōu)勢(shì)，即例如它們更強(qiáng)力、選擇性更高、副作用更少、制劑和穩(wěn)定性性質(zhì)更好、藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)更佳、生物利用度更高、能夠通過(guò)血腦屏障并且在哺乳動(dòng)物腦內(nèi)更有效、與其它藥物組合更相容或更有效或者比現(xiàn)有技術(shù)中的其它化合物更容易合成。
在說(shuō)明書(shū)以及所附權(quán)利要求書(shū)的全文中，若非上下文要求，術(shù)語(yǔ)“包含”及其變體如“包括”和“含有”應(yīng)理解為包括所述的整數(shù)、步驟、整數(shù)組或步驟組，但不排除任何其它整數(shù)、步驟、整數(shù)組或步驟組。
本文引入以上提起的所有專(zhuān)利和專(zhuān)利申請(qǐng)的全文作為參考。
本發(fā)明包括優(yōu)選和更優(yōu)選基團(tuán)的所有組合以及上述基團(tuán)的實(shí)施方案。
權(quán)利要求
1.式1的化合物，包括其藥學(xué)可接受的鹽，包括所有立體異構(gòu)體和多晶型 式1其中A是烷基鏈、烯基鏈或炔基鏈；或者A是選自以下的基團(tuán) 其中R6、R7、R8、R9和R10獨(dú)立地是H或烷基鏈、烯基鏈、炔基鏈、環(huán)烷基、碳環(huán)、芳基、雜芳基或雜環(huán)；n和n1獨(dú)立地是1-5；m是1-5；o是0-4；且B是選自以下的基團(tuán) 其中D和E獨(dú)立地代表烷基鏈、烯基鏈、炔基鏈、環(huán)烷基、碳環(huán)、芳基、-烷基芳基、雜芳基、-烷基雜芳基、?；螂s環(huán)，Z是CH或N；X代表CR20R21、O、S、NR19，條件是對(duì)于式(VIII)和(IX)，若Z＝CH，則X是O或S；R19選自H、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、烷氧基、芳氧基、羰基、酰氨基、羥基、硝基、氨基、氰基；R20和R21獨(dú)立地選自H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)、芳基、雜芳基、烷氧基、芳氧基、羰基、酰氨基、硝基、氨基、氰基、三氟甲基；X1、X2和X3獨(dú)立地是O或S，條件是X2和X3不都是O；Y是O或S，條件是當(dāng)R17與R18形成的碳環(huán)是三元環(huán)時(shí)，則Y不能是O；Z是CH或N；R11、R12、R13和R14可以獨(dú)立地選自H、烷基鏈、烯基鏈、炔基鏈、環(huán)烷基、碳環(huán)、芳基、雜芳基、雜環(huán)、鹵素、烷氧基-、-硫烷基、羧基、羧酸酯、羰基、脲、碳酰亞胺、硫脲或硫代羰基、氨基、硝基；R15和R16彼此獨(dú)立地是H或支鏈或非支鏈烷基鏈，或者支鏈或非支鏈烯基鏈；R17和R18獨(dú)立地選自H或烷基鏈、烯基鏈、炔基鏈、碳環(huán)、芳基、雜芳基、雜烷基，或者連接形成至多6個(gè)環(huán)原子的碳環(huán)；n是0或1；條件是以下化合物排除在式1之外
2.權(quán)利要求1的化合物，其中A是非支鏈C3烷基鏈。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中A是基團(tuán)(I)、(II)、(III)，其中n和n1各自等于1。
4.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中B是基團(tuán)(VI)。
5.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中B是基團(tuán)(VIa)。
6.權(quán)利要求4或5的化合物，其中X代表S。
7.權(quán)利要求4或5的化合物，其中X代表NR19。
8.權(quán)利要求4或5的化合物，其中X代表O。
9.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中B是基團(tuán)(VII)。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中Y代表S。
11.權(quán)利要求9或10的化合物，其中R17與R18之一是H，而另一個(gè)是Me。
12.權(quán)利要求9或10的化合物，其中R17與R18之一是H，而另一個(gè)是苯基。
13.權(quán)利要求9或10的化合物，其中R17與R18連接形成至多6個(gè)環(huán)原子的碳環(huán)。
14.權(quán)利要求4-13之任一項(xiàng)的化合物，其中D代表取代的苯基。
15.權(quán)利要求11的化合物，其中D代表3，4-二甲氧基苯基。
16.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中B選自(X)-(XIV)，且R11和R14是H。
17.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中B選自(X)-(XIV)，且R15和R16中至少一個(gè)是H。
18.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中B選自(X)-(XIV)，且R15和R16都是H。
19.權(quán)利要求1的化合物或其藥用鹽、立體異構(gòu)體或多晶型，所述化合物相應(yīng)于實(shí)施例1-5、7、8、10-28、38-59、61-85、94、96-99、101、102、119、136和140之任一個(gè)。
20.權(quán)利要求1的化合物或其藥用鹽、立體異構(gòu)體或多晶型，所述化合物相應(yīng)于實(shí)施例29、30、34-37、86-93、95、100、106-113、115-118、120、123-127、130、132和134之任一個(gè)。
21.權(quán)利要求1的化合物或其藥用鹽、立體異構(gòu)體或多晶型，所述化合物相應(yīng)于實(shí)施例6、9、103-105、121-122和137之任一個(gè)。
22.權(quán)利要求1的化合物或其藥用鹽、立體異構(gòu)體或多晶型，所述化合物相應(yīng)于實(shí)施例31-33、60、114、128、129、131、133、135、138和139之任一個(gè)。
23.權(quán)利要求1的化合物或其藥用鹽、立體異構(gòu)體或多晶型，所述化合物相應(yīng)于實(shí)施例13。
24.權(quán)利要求1的化合物或其藥用鹽、立體異構(gòu)體或多晶型，所述化合物相應(yīng)于實(shí)施例119。
25.權(quán)利要求1的化合物或其藥用鹽、立體異構(gòu)體或多晶型，所述化合物相應(yīng)于實(shí)施例125。
26.權(quán)利要求1-23之任一項(xiàng)的化合物，其用作藥物。
27.藥物組合物，其包含至少一種權(quán)利要求1-26之任一項(xiàng)的化合物以及任選的治療可接受的載體和/或賦形劑。
28.權(quán)利要求27的藥物組合物，其用于胃腸外、腸內(nèi)或口服給藥。
29.權(quán)利要求27或28的藥物組合物，不受排除化合物(a)-(d)的條件限制，不受X2和X3不都是O的條件限制，不受當(dāng)R17與R18形成的碳環(huán)是三元環(huán)時(shí)，則Y不能是O的條件限制，所述藥物組合物還包含至少一種選自以下的化合物PEP抑制劑、LiCl、二肽基氨肽酶抑制劑、優(yōu)選DP IV或DP IV樣酶抑制劑、NPY受體的配體、NPY激動(dòng)劑、ACE抑制劑、PIMT增強(qiáng)劑、β分泌酶抑制劑、γ分泌酶抑制劑、中性?xún)?nèi)肽酶抑制劑、PDE-4抑制劑、MAO抑制劑、TNFα抑制劑、淀粉樣蛋白或淀粉樣肽沉積抑制劑、σ-1受體抑制劑和組胺H3拮抗劑。
30.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述DP IV/DP IV樣酶抑制劑選自L(fǎng)-蘇型-異亮氨酰pyrrolidide、L-別-異亮氨酰thiazolidide、L-別-異亮氨酰pyrrolidide及其鹽或纈氨酸pyrrolidide、BMS-477118、CP-867534-01、LAF-237、PHX-1004、SSR-162369、SYR-322、TSL-225、FE-999011、GW-229A、815541、K-579、MK-431、PT-100或以下化合物之一
31.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述NPY拮抗劑選自3a，4，5，9b-四氫-1h-苯并[e]吲哚-2-基胺、BIBP3226和(R)-N2-(二苯基乙?；?-(R)-N-[1-(4-羥基-苯基)乙基]精氨酸酰胺。
32.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述PEP抑制劑選自脯氨酸的化學(xué)衍生物或含有末端脯氨酸的小肽如芐氧羰基脯氨酰prolinal、N-末端取代的L-脯氨酸或L-脯氨?；量┩椤⒃隰然┒撕衟rolinal的取代的N-芐氧羰基(Z)二肽、取代的硫代脯氨酸、取代的噻唑烷、取代的氧代吡咯烷、包括氟化酮衍生物在內(nèi)的羧基末端修飾的脯氨酸、?；彼峄蝓；母彼岬穆燃谆苌?Z-Gly-Pro-CH2Cl)和2-?；量┩檠苌?。
33.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述PEP抑制劑選自Fmoc-Ala-Pyrr-CN、Z-321、ONO-1603、JTP-4819和S-17092。
34.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述PEP抑制劑是
35.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述ACE抑制劑是SDZENA 713(利凡斯的明(+)-(S)-N-乙基-3-[(1-二甲氨基)乙基]-N-甲基苯基氨基甲酸酯酒石酸氫鹽)。
36.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述PDE-4抑制劑選自咯利普蘭、CC-002、L-826141、Sch-351591(D-4396)、OS-0217、IBFB-130011、IBFB-150007、IBFB-130020、IBFB-140301、IC-485、VMX-554、VMX-565、MEM-1414、MEM-1018、MEM-1091、MEM-1145、CI-1044、BHN、ZK-117137和SB-207499及其類(lèi)似物。
37.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述PIMT增強(qiáng)劑是以下通式的10-氨基脂族烴基-二苯并[b，f]oxepine 其中“alk”是二價(jià)脂族基團(tuán)，R是未取代的或被一價(jià)脂族和/或芳代脂族基團(tuán)一取代或被二價(jià)脂族基團(tuán)二取代的氨基，且R1、R2、R3和R4彼此獨(dú)立地是氫、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵素或三氟甲基。
38.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述γ分泌酶抑制劑是
39.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述β分泌酶抑制劑是
40.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述MAO抑制劑是下式的ladostigil
41.權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述組胺H3拮抗劑是選自A-331440、A-349821、3874-H1、UCL-2173、UCL-1470、DWP-302、GSK-189254A、GSK-207040A、cipralisant、GT-2203、(1S，2S)-2-(2-氨基乙基)-1-(1H-咪唑-4-基)環(huán)丙烷、JNJ-5207852、NNC-0038-0000-1049、雙重H1/H3、Sch-79687的化合物或以下化合物之一
42.權(quán)利要求1-26之任一項(xiàng)的藥用化合物或權(quán)利要求27-41之任一項(xiàng)的組合物用于制備治療神經(jīng)病癥的藥物的用途，所述神經(jīng)病癥特別是阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、致病性精神病、精神分裂癥、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙、體液調(diào)節(jié)障礙、高血壓、發(fā)熱、睡眠失調(diào)、厭食癥、包括抑郁癥在內(nèi)的焦慮相關(guān)病癥、包括癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)作、停藥和酒精中毒、包括認(rèn)知障礙和癡呆在內(nèi)的神經(jīng)變性病癥，并且不受排除化合物(a)-(d)的條件限制，不受X2和X3不都是O的條件限制，不受當(dāng)R17與R18形成的碳環(huán)是三元環(huán)時(shí)，則Y不能是O的條件限制。
43.治療神經(jīng)病癥的方法，所述神經(jīng)病癥特別是阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、致病性精神病、精神分裂癥、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙、體液調(diào)節(jié)障礙、高血壓、發(fā)熱、睡眠失調(diào)、厭食癥、包括抑郁癥在內(nèi)的焦慮相關(guān)病癥、包括癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)作、停藥和酒精中毒、包括認(rèn)知障礙和癡呆在內(nèi)的神經(jīng)變性病癥，所述方法包括給予哺乳動(dòng)物有效量的權(quán)利要求1-25之任一項(xiàng)定義的式(1)的化合物，并且不受排除化合物(a)-(d)的條件限制，不受X2和X3不都是O的條件限制，不受當(dāng)R17與R18形成的碳環(huán)是三元環(huán)時(shí)，則Y不能是O的條件限制。
44.權(quán)利要求42或43的用途或方法，用于治療選自阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病和亨廷頓舞蹈癥的神經(jīng)疾病。
45.谷氨酰胺酰基環(huán)化酶抑制劑用于制備治療神經(jīng)病癥的藥物的用途，所述神經(jīng)病癥特別是阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、致病性精神病、精神分裂癥、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙、體液調(diào)節(jié)障礙、高血壓、發(fā)熱、睡眠失調(diào)、厭食癥、包括抑郁癥在內(nèi)的焦慮相關(guān)病癥、包括癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)作、停藥和酒精中毒、包括認(rèn)知障礙和癡呆在內(nèi)的神經(jīng)變性病癥，其中所述抑制劑抑制谷氨酰胺?；h(huán)化酶的Ki為10μM或更低。
46.治療神經(jīng)病癥的方法，所述神經(jīng)病癥特別是阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、致病性精神病、精神分裂癥、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙、體液調(diào)節(jié)障礙、高血壓、發(fā)熱、睡眠失調(diào)、厭食癥、包括抑郁癥在內(nèi)的焦慮相關(guān)病癥、包括癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)作、停藥和酒精中毒、包括認(rèn)知障礙和癡呆在內(nèi)的神經(jīng)變性病癥，所述方法包括給予哺乳動(dòng)物有效量的谷胺酰胺?；h(huán)化酶抑制劑，其中所述抑制劑抑制谷氨酰胺?；h(huán)化酶的Ki為10μM或更低。
47.權(quán)利要求42-46之任一項(xiàng)的用途或方法，其中所述抑制劑抑制谷氨酰胺酰基環(huán)化酶的Ki值為1μM或更低。
48.權(quán)利要求42-46之任一項(xiàng)的用途或方法，其中所述抑制劑抑制谷氨酰胺?；h(huán)化酶的Ki為0.1μM或更低。
49.權(quán)利要求42-46之任一項(xiàng)的用途或方法，其中所述抑制劑抑制谷氨酰胺?；h(huán)化酶的Ki值為0.01μM或更低。
50.權(quán)利要求42-49之任一項(xiàng)的用途或方法，其中所述谷氨酰胺?；h(huán)化酶抑制劑的分子量為1000g/mol或更低。
51.權(quán)利要求42-49之任一項(xiàng)的用途或方法，其中所述谷氨酰胺?；h(huán)化酶抑制劑的分子量為500g/mol或更低。
52.權(quán)利要求42-49之任一項(xiàng)的用途或方法，其中所述谷氨酰胺?；h(huán)化酶抑制劑的分子量為400g/mol或更低。
53.權(quán)利要求42-49之任一項(xiàng)的用途或方法，其中所述谷氨酰胺酰基環(huán)化酶抑制劑的分子量為350g/mol或更低。
54.權(quán)利要求42-53之任一項(xiàng)的用途或方法，其中所述谷氨酰胺?；h(huán)化酶抑制劑是競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。
55.權(quán)利要求42-54之任一項(xiàng)的用途或方法，其中所述谷氨酰胺酰基環(huán)化酶抑制劑是競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑。
56.權(quán)利要求42-55之任一項(xiàng)的用途或方法，其中所述谷氨酰胺?；h(huán)化酶抑制劑選自權(quán)利要求1-25之任一項(xiàng)的化合物。
57.權(quán)利要求56的用途或方法，其中將所述谷氨酰胺?；h(huán)化酶抑制劑任選地與選自PEP抑制劑、LiCl、二肽基氨肽酶抑制劑、優(yōu)選DP IV或DP IV樣酶抑制劑、NPY受體的配體、NPY激動(dòng)劑、ACE抑制劑、PIMT增強(qiáng)劑、β分泌酶抑制劑、γ分泌酶抑制劑、中性?xún)?nèi)肽酶抑制劑、PDE-4抑制劑、MAO抑制劑、TNFα抑制劑、淀粉樣蛋白或淀粉樣肽沉積抑制劑、σ-1受體抑制劑和組胺H3拮抗劑的化合物一起給予哺乳動(dòng)物。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的谷氨酰胺酰基環(huán)化酶抑制劑及其組合，它們用于治療神經(jīng)病癥，特別是阿爾茨海默癥、唐氏綜合征、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、致病性精神病、精神分裂癥、攝食障礙、失眠、能量代謝恒穩(wěn)調(diào)節(jié)障礙、自主功能障礙、激素平衡障礙、體液調(diào)節(jié)障礙、高血壓、發(fā)熱、睡眠失調(diào)、厭食癥、包括抑郁癥在內(nèi)的焦慮相關(guān)病癥、包括癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)作、停藥和酒精中毒、包括認(rèn)知障礙和癡呆在內(nèi)的神經(jīng)變性病癥。
文檔編號(hào)A61P25/28GK1918131SQ200580004289
公開(kāi)日2007年2月21日 申請(qǐng)日期2005年2月4日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月5日
發(fā)明者斯特凡·席林, 米爾科·布赫霍爾茨, 安德烈·約翰內(nèi)斯·尼斯特羅杰, 漢斯-烏爾里希·德穆特, 烏爾里?！ず?申請(qǐng)人:前體生物藥物股份公司