專(zhuān)利名稱(chēng)：骨筋丸膠囊的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥品檢驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域，尤指骨筋丸膠囊的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
骨筋丸膠囊采用我國(guó)古代中醫(yī)經(jīng)典名方和現(xiàn)代劑型，因其全面的功能性，顯著的療效以及使用方便、經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn)，正廣泛用于各類(lèi)骨關(guān)節(jié)等疾病的治療。
然而，現(xiàn)有的骨筋丸法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)只涉及粉末顯微特征鑒別、生物總堿鑒別及膠囊劑檢測(cè)，定性檢測(cè)不全面，且不涉及定量檢測(cè)，無(wú)法保證藥品的質(zhì)量，進(jìn)而對(duì)藥品使用的安全性和有效性構(gòu)成威脅。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為解決上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一套全面有效的檢測(cè)方法，以彌補(bǔ)現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)的不足，嚴(yán)格控制骨筋丸膠囊的質(zhì)量穩(wěn)定性。
骨筋丸專(zhuān)為“頸痹”“筋傷”而設(shè)計(jì)用秦艽祛風(fēng)濕、止痹痛，舒筋解痙，以利關(guān)節(jié)，是治頸肩疼痛之要藥；獨(dú)活辛溫發(fā)散之力最強(qiáng)，助秦艽祛風(fēng)除濕、通痹止痛、舒筋活絡(luò)；瘀血停滯于經(jīng)絡(luò)，不通則痛，佐三七、沒(méi)藥、紅花、血竭等血分之藥，活血消腫定痛、祛瘀除痹生新；肝主筋、主藏血，筋為血所養(yǎng)，白芍乃肝經(jīng)要藥，滋陰養(yǎng)血、柔肝舒筋，使肝旺則氣血充盈、筋絡(luò)強(qiáng)勁、有力束骨使關(guān)節(jié)牢固；腎主骨、藏精、主生長(zhǎng)發(fā)育，五臟六腑之精氣全賴(lài)腎養(yǎng)，重用牛膝補(bǔ)腎強(qiáng)筋，使骨有所充、髓有所養(yǎng)，則頸有所主，且牛膝逐瘀之力頗彰，可引留滯之瘀下行，通利關(guān)節(jié)；桂枝中空，可助陽(yáng)化氣、溫通經(jīng)脈，升陽(yáng)發(fā)散，引諸藥上達(dá)頸部；延胡索，能行血中氣滯，氣中血滯，配乳香、沒(méi)藥，治跌打損傷；制馬錢(qián)子功專(zhuān)通痹止痛。諸藥合用，則風(fēng)濕得除、瘀血得去、氣血得養(yǎng)、肝腎得旺，而痹痛自消、關(guān)節(jié)自利、頸部諸癥皆可愈矣。
本方法在現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增加對(duì)秦艽、馬錢(qián)子、白芍、獨(dú)活、延胡索等關(guān)鍵藥效成分的定性、定量檢測(cè)，以達(dá)到全面保證質(zhì)量的目的。
本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的骨筋丸膠囊的檢測(cè)方法，步驟是a)延胡索、三七、馬錢(qián)子的粉末顯微特征鑒別；
b)生物堿類(lèi)藥材鑒別；c)薄層色譜法鑒別方中白芍藥材；d)薄層色譜法鑒別方中延胡索藥材；e)薄層色譜法鑒別方中獨(dú)活藥材；f)f)按《中國(guó)藥典》2000年版一部附錄制劑通則中膠囊劑項(xiàng)下規(guī)定進(jìn)行水分、裝量差異、崩解時(shí)限、重金屬檢查、砷鹽檢查、微生物限度檢查；g)高效液相色譜法法測(cè)定方中龍膽苦苷的含量；h)高效液相色譜法法測(cè)定方中士的寧的含量。


圖1白芍藥材薄層色譜圖；圖2延胡索乙素薄層色譜圖；圖3獨(dú)活藥材薄層色譜圖；圖4龍膽苦苷高效液相色譜圖；圖5士的寧高效液相色譜圖。
具體實(shí)施例方式
通過(guò)下面給出的本發(fā)明的具體實(shí)施例可以進(jìn)一步清楚地了解本發(fā)明，但它們不是對(duì)本發(fā)明的限定。
I鑒別1)薄層色譜法鑒別方中白芍藥材，如圖1所示。
取本品內(nèi)容物2g，加乙醇40ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，濾過(guò)，濾液用乙醚提取至乙醚層無(wú)色，棄去乙醚液，再用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇提取液，水洗滌3次，每次20ml，棄去水液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，拌入少許中性氧化鋁，水浴上攪拌干燥，裝入預(yù)先填好的中性氧化鋁小柱(200～300目，1g，內(nèi)徑10～15mm)頂部，以甲醇40ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖既芙馐钩?.5ml，作為供試品溶液。另取白芍對(duì)照藥材0.5g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10ul，對(duì)照藥材溶液8ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲醇-冰醋酸(5∶2∶1∶0.2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
2)薄層色譜法鑒別方中延胡索藥材，如圖2所示。
取本品內(nèi)容物2g，置具塞三角瓶中，加氨水適量攪拌潤(rùn)濕后，加乙醚60ml，密塞，時(shí)時(shí)振搖，放置過(guò)夜，濾取上清液，置分液漏斗中，用10％醋酸50ml分三次提取(20、20、10ml)，膈并醋酸層，用氨水調(diào)PH10～11，再以氯仿50ml分三次提取(20、20、10ml)，合并氯仿液，用水洗滌3次，每次30ml，加適量無(wú)水硫酸鈉，濾過(guò)，濾液蒸干，加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取延胡索對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸收上述三種溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙醚-醋酸乙酯(9∶2∶4)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，碘熏數(shù)秒后，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
3)薄層色譜法鑒別方中獨(dú)活藥材，如圖3所示。
取本品內(nèi)容物1g，加石油醚(60～90℃)5ml，密塞，超聲處理5分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。另取獨(dú)活對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯(5∶1.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
II含量測(cè)定1)龍膽苦苷照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附VI D)測(cè)定。如圖4所示。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相 甲醇-水(3∶7)；流速 1.0ml/min；柱溫 40℃；檢測(cè)波長(zhǎng) 254nm。
理論塔板數(shù)按龍膽苦苷(C16H2009)峰計(jì)算，應(yīng)不低于3000。
對(duì)照品溶液的制品精密稱(chēng)取龍膽苦苷對(duì)照品12.5mg，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得(每1ml中含龍膽苦苷0.05mg)。
供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下本品內(nèi)容物0.2g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理15分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，取上清液用濾膜(0.45um)濾過(guò)，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每粒含秦艽以龍膽苦苷(C16H2009)計(jì)，不得少于2.0mg。
2)士的寧照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定。如圖5所示。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用硅膠為填充劑；流動(dòng)相 乙醚-甲醇-二乙胺(80∶20∶1)；流速 1.0ml/min；柱溫 30℃；檢測(cè)波長(zhǎng) 254nm。理論塔板數(shù)以士的寧(C21H22N2O2)峰計(jì)，應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取的士寧對(duì)照品適量，加醋酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品30粒的內(nèi)容物，精密稱(chēng)定，混勻，取3.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加氯仿50ml與濃氨試液6ml，密塞，輕輕振搖，稱(chēng)定重量，放置24小時(shí)，再稱(chēng)定重量，用氯仿補(bǔ)足減失的重量，充分振搖，濾過(guò)，精密量取濾液10ml，置分液漏斗中，用硫酸溶液(3→100)提取5次，每次15ml，合并硫酸液，加濃氨試液調(diào)節(jié)PH值至9～10，用氯仿提取5次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴ト芙?，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用濾膜(0.45um)濾過(guò)，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5ul，注入液相色譜儀測(cè)定，即得。
本品每粒含馬錢(qián)子以士的寧(C21H22N2O2)計(jì)，應(yīng)為0.32～0.60mg。
綜上，本發(fā)明提供了骨筋丸膠囊的檢測(cè)方法，在原有標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上增加了針對(duì)方中主藥的定量、定性鑒別方法薄層色譜法鑒別方中白芍藥材；薄層色譜法鑒別方中延胡索藥材；薄層色譜法鑒別方中獨(dú)活藥材；高效液相色譜法法測(cè)定方中龍膽苦苷的含量；高效液相色譜法法測(cè)定方中士的寧的含量。有效保證了藥物的安全性有效性。
權(quán)利要求
1.骨筋丸膠囊的檢測(cè)方法，步驟是a)延胡索、三七、馬錢(qián)子的粉末顯微特征鑒別；b)生物堿類(lèi)藥材鑒別；c)薄層色譜法鑒別方中白芍藥材；d)薄層色譜法鑒別方中延胡索藥材；e)薄層色譜法鑒別方中獨(dú)活藥材；f)對(duì)膠囊劑進(jìn)行水分、裝量差異、崩解時(shí)限、重金屬檢查、砷鹽檢查、微生物限度檢查；g)高效液相色譜法法測(cè)定方中龍膽苦苷的含量；h)高效液相色譜法法測(cè)定方中士的寧的含量。
全文摘要
本發(fā)明屬于藥品檢驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域，尤指骨筋丸膠囊的檢測(cè)方法。在原有標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上增加了針對(duì)方中主藥的定量、定性鑒別方法薄層色譜法鑒別方中白芍藥材；薄層色譜法鑒別方中延胡索藥材；薄層色譜法鑒別方中獨(dú)活藥材；高效液相色譜法法測(cè)定方中龍膽苦苷的含量；高效液相色譜法法測(cè)定方中士的寧的含量。有效保證了藥物的安全性有效性。
文檔編號(hào)A61K36/56GK1951462SQ200510030619
公開(kāi)日2007年4月25日 申請(qǐng)日期2005年10月18日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月18日
發(fā)明者劉華 申請(qǐng)人:上海佰加壹醫(yī)藥有限公司