專利名稱：一種治療心腦血管病的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療心腦血管疾病的中藥組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
根據(jù)我國流行病學(xué)調(diào)查，近五十年來不論在農(nóng)村或城市，心腦血管疾病的發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢。50～60年代我國人口死亡原因中心血管病和腦血管病分別居第五六位，1975年以后則分別上升至第二三位，心腦血管疾病死亡者已占全部疾病死因第一位。我國因心腦血管疾病死亡者占總死亡人口的百分比，已由1957年的12.07％上升到2001年的42.6％，每年死于心腦血管疾病者達(dá)200萬另有部分患者雖經(jīng)搶救而幸存，但多數(shù)留下殘疾，生活不能自理，給親屬及社會(huì)造成嚴(yán)重負(fù)擔(dān)。心腦血管疾病也是西方國家人群死亡的主要原因。根據(jù)目前已有的流行病學(xué)資料推測，疾病的發(fā)展趨勢是到2020年，人類疾病死因排列順序?qū)⒂兄卮笞兓枪谛牟『湍X卒中仍將是人類死因的第一位和第二位。到那時(shí)，估算全球冠心病死亡人數(shù)將自1990年的630萬增至1100萬；腦卒中自440萬增至770萬。30年中循環(huán)系統(tǒng)死因構(gòu)成將增高59.6％，冠心病和腦卒中分別增高74.6％和75％。這些資料充分說明，心腦血管疾病不僅是危害人類健康的主要疾病，更是目前和未來20年內(nèi)人類致死、致殘的“頭號(hào)殺手”。
在心腦血管疾病的治療藥物中，中西藥的應(yīng)用各有側(cè)重，中藥以其副作用小的優(yōu)勢也占據(jù)較大的市場份額。在目前眾多治療心腦血管疾病的中成藥中，復(fù)方丹參制劑占有重要的位置，另外以有效部位為主要活性成分如三七總皂苷、丹參總酚酸、葛根黃酮、絞股藍(lán)總苷等的中成藥也愈來愈受到人們的重視。治療心腦血管疾病的各種中藥有效部位的功效各有不同和側(cè)重，臨床上存在聯(lián)合用藥的巨大需求，因此，以有效部位制備的復(fù)方丹參制劑將具有劑量小、療效好、質(zhì)量穩(wěn)定等特點(diǎn)，有著廣闊的市場前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種量小高效的中藥組合物及其制劑。
本發(fā)明的另一目的是提供該組合物及其制劑的制備方法。
本發(fā)明通過下述技術(shù)方案予以實(shí)施。
本發(fā)明的中藥組合物，按重量百分比包括下列組分黃芪皂苷提取物35.0％～75％，丹參提取物15.0％～55.0％，三七皂苷提取物2.5％～15.0％，天然冰片或降香油 2.5％～15.0％；本發(fā)明的中藥組合物，更優(yōu)選為按重量百分比包括下列組分黃芪皂苷提取物45.0％～65.0％，丹參提取物25.0％～45.0％，三七皂苷提取物5.0％～10.0％，天然冰片或降香油 5.0％～10.0％；本發(fā)明的中藥組合物，最佳為按重量百分比包括下列組分黃芪皂苷提取物54％，丹參提取物32％，三七皂苷提取物7％，天然冰片或降香油 7％；上述中藥組合物中的黃芪皂苷提取物，可利用現(xiàn)有技術(shù)的制備方法獲得，例如可利用中國專利CN1096269C、余灝等(華西藥學(xué)雜志，1993，8(3)163)、滕興隆等(黑龍江醫(yī)藥，2002，15(5)340)、王志潔等(浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2001，25(5)43)的制備方法獲取黃芪提取物。也可以自行摸索制備工藝提取黃芪提取物。還可以直接從市場上購得黃芪提取物，例如含量為80～98％(UV測定)的黃芪提取物。本發(fā)明黃芪皂苷提取物中黃芪甲苷含量為5％～15％，其總皂苷含量為70％～98％，最好為80％～98％。無論是通過現(xiàn)有技術(shù)制備還是市場購買，如純度未達(dá)到上述含量標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)進(jìn)行精制，使之符合上述含量標(biāo)準(zhǔn)。
上述丹參提取物用下述方法獲得取丹參飲片或粉碎的丹參，加水煎煮或超聲提取2～3次，每次加藥材重量5～7倍量水，每次0.5～2小時(shí)；合并提取液，用酸調(diào)節(jié)pH為1.5～4，放冷，濾過；濾液上樹脂體積相當(dāng)于生藥2～4倍的大孔樹脂柱，先用1～1.5倍柱體積水沖洗，水洗液棄去，再用2～3倍柱體積的85～95％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液減壓濃縮，干燥，即得丹參提取物。該丹參提取物的丹參素含量為3％～10％，丹參總酚酸含量為50％～75％，丹酚酸B含量為20％～45％。
上述大孔樹脂為非極性或弱極性的大孔樹脂，優(yōu)選為D101、AB-8或ZTC型大孔樹脂，最佳為AB-8型大孔樹脂。
上述丹參素含量測定方法參見中國專利CN1520307A，丹參總酚酸含量測定及丹酚酸B含量測定參見中國專利CN1600318A。
上述三七皂苷提取物可用下述方法獲得取粉碎的三七，加水浸泡，用酸調(diào)pH3～5.5，以每克生藥加入5～15U的量加入纖維素酶，充分?jǐn)嚢?，?0～60℃水浴2～4小時(shí)，提取液備用；提取后殘?jiān)偌铀蛘呒?0％～90％乙醇加熱回流提取或超聲提取1～3次，合并前后提取液；提取液減壓濃縮至藥材1～3倍量體積，離心或?yàn)V過，取澄清液或?yàn)V液；澄清液或?yàn)V液上陰離子交換樹脂柱，用40％～70％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液上大孔樹脂柱，先用水沖洗，再用40～70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；洗脫液減壓濃縮，干燥，得含70％～98％總皂苷的三七皂苷提取物。上述三七皂苷提取物制備方法中的上柱順序可以調(diào)換，即三七皂苷提取物也可用下述方法獲得取粉碎的三七，加水浸泡，用酸調(diào)pH3～5.5，以每克生藥加入5～15U的量加入纖維素酶，充分?jǐn)嚢?，?0～60℃水浴2～4小時(shí)，提取液備用；提取后殘?jiān)偌铀蛘呒?0％～90％乙醇加熱回流提取或超聲提取1～3次，合并前后提取液；提取液減壓濃縮至藥材1～3倍量體積，離心或?yàn)V過，取澄清液或?yàn)V液；澄清液或?yàn)V液上大孔樹脂柱，先用水沖洗，再用40～70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；乙醇洗脫液上陰離子交換樹脂柱，用40％～70％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液減壓濃縮，干燥，得含70％～98％總皂苷的三七皂苷提取物。三七皂苷提取物中三七皂苷R1含量為2％～10％，人參皂苷Re含量為2％～6％，人參皂苷Rg1含量為15％～40％，人參皂苷Rb1含量為15％～40％，人參皂苷Rd含量為5％～12％。
上述大孔樹脂為非極性或弱極性的大孔樹脂，優(yōu)選為D101、AB-8或ZTC型大孔樹脂，最佳為AB-8型大孔樹脂。上述陰離子交換樹脂為弱堿性陰離子交換樹脂，最佳為D-941離子交換樹脂。
上述三七皂苷提取物含量(以人參皂苷Re計(jì))測定方法如下1.儀器與試劑1.1儀器紫外可見分光光度計(jì)。層析柱。
1.2標(biāo)準(zhǔn)品、供試品及試劑標(biāo)準(zhǔn)品人參皂苷Re中國藥品生物制品檢定所供試品三七皂苷提取物試劑AB-8大孔樹脂或G..D.X-101大孔樹脂(60～80目，天津化學(xué)試劑二廠)乙醇 分析純香草醛溶液 稱取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100ml。
高氯酸 分析純冰乙酸 分析純?nèi)藚⒃碥誖e標(biāo)準(zhǔn)溶液精密稱取人參皂苷Re標(biāo)準(zhǔn)品0.0100g，用甲醇溶解并定容至10ml，即每毫升含人參皂苷Re1.0mg。
2.實(shí)驗(yàn)2.1樣品處理取2mg三七皂苷，用一定量水稀釋(稀釋至50ml左右)。
2.2柱層析用10mL注射器作層析管，內(nèi)裝4cm AB-8大孔樹脂，先用20mL95％乙醇洗柱，棄去洗脫液，再用25mL水洗柱，棄去洗脫液。精密加入已處理好的樣品溶液(見2.1)，流速控制在1mL/min左右。先用15mL水洗柱，棄去洗脫液，再用20mL95％乙醇洗脫三七皂苷，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，置于75℃水浴揮干。以此作顯色用。
2.3空白樣品的制備在潔凈蒸發(fā)皿中準(zhǔn)確加入0.2mL5％香草醛冰乙酸溶液，轉(zhuǎn)動(dòng)蒸發(fā)皿，使殘?jiān)既芙猓偌?.8mL高氯酸，混勻后移入10mL帶塞刻度離心管中；蒸發(fā)皿中再加入0.2mL冰乙酸，轉(zhuǎn)動(dòng)蒸發(fā)皿，使殘液溶解，再移入上述離心管中，60℃水浴上加熱10min，取出，冰浴冷卻后，準(zhǔn)確加入冰乙酸5.0mL，搖勻后，即得空白樣品。
2.4顯色在上述已揮干的蒸發(fā)皿中準(zhǔn)確加入0.2mL5％香草醛冰乙酸溶液，轉(zhuǎn)動(dòng)蒸發(fā)皿，使殘?jiān)既芙猓偌?.8mL高氯酸，混勻后移入10mL帶塞刻度離心管中；蒸發(fā)皿中再加入0.2mL冰乙酸，轉(zhuǎn)動(dòng)蒸發(fā)皿，使殘液溶解，再移入上述離心管中，60℃水浴上加熱10min，取出，冰浴冷卻后，準(zhǔn)確加入冰乙酸5.0mL，搖勻后，以1cm比色池于560nm波長處與標(biāo)準(zhǔn)管一起進(jìn)行比色測定(以空白樣品對(duì)紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行回零后，再進(jìn)行測定)。
2.5標(biāo)準(zhǔn)管吸取人參皂苷Re標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/mL)0.1mL，用一定量水稀釋(10ml左右)，以下操作從“A2.2柱層析...”起，與樣品相同，測定吸光度值。
3計(jì)算C樣＝(A1×C標(biāo)×100)/(A2×6)式中C樣提取物中三七總皂苷的量(以人參皂苷Re計(jì))，mg/100mLA1被測液的吸光度值，A2標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度值，C標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)液的濃度，mg/mL計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。
上述三七皂苷提取物中人參皂苷Re、人參皂苷Rd、三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1的含量測定方法見中國專利CN1600318A。
上述中藥組合物中的天然冰片應(yīng)符合中國藥典標(biāo)準(zhǔn)。天然冰片可用符合中國藥典標(biāo)準(zhǔn)的冰片代替。
上述中藥組合物中的降香油為降香藥材經(jīng)蒸餾所得。
本發(fā)明的中藥組合物，可與任何一種或一種以上藥劑學(xué)上輔料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纖維素、羥丙甲基纖維素、聚乙二醇、硬脂酸鎂、微粉硅膠、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、甘氨酸等混合制成的各種劑型，例如，可制成水針劑、片劑、緩釋片、滴丸、顆粒劑、粉針劑、膠囊劑、微粒劑。優(yōu)選劑型為滴丸、粉針劑。
本發(fā)明的中藥組合物滴丸的制備按規(guī)定比例取上述黃芪皂苷提取物、丹參提取物、三七皂苷提取物和天然冰片(或降香油)，與藥物總重量2～4倍的聚乙二醇-6000或者聚乙二醇-4000或者兩者的混合物混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機(jī)滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟或甲基硅油中，除油，即得。
本發(fā)明的中藥組合物粉針劑的制備按規(guī)定比例取上述黃芪皂苷提取物、丹參提取物、三七皂苷提取物和天然冰片，加入適量的輔料和蒸餾水，混勻后冷凍干燥，即得。
本發(fā)明中藥組合物原料來源易得，易于產(chǎn)業(yè)化；可根據(jù)需要制成各種劑型，為臨床提供更加方便、更加有效、質(zhì)量更加可控的現(xiàn)代中藥，為患者帶來更多的利益，從而產(chǎn)生巨大的社會(huì)效益。
本發(fā)明采用三氯化鐵局部貼敷大腦中動(dòng)脈造成局灶性腦缺血損傷模型，通過對(duì)模型大鼠神經(jīng)癥狀和腦梗塞范圍的測定，比較了本發(fā)明中藥組合物、丹參提取物、三七皂苷提取物的抗腦缺血作用。結(jié)果顯示，本發(fā)明中藥組合物具有明顯的抗腦缺血作用，其療效優(yōu)于單獨(dú)使用丹參提取物或三七皂苷提取物，表明本發(fā)明中藥組合物具有較強(qiáng)的協(xié)同作用。
實(shí)驗(yàn)例1幾種中藥提取組合物對(duì)大鼠局灶性腦缺血的影響(一)實(shí)驗(yàn)材料1、動(dòng)物SD大鼠，雄性，體重180g～200g，合格證號(hào)SCXK(京)2002-0003，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。
2、藥品與試劑受試藥實(shí)施例一的中藥組合物，實(shí)施例二的中藥組合物，實(shí)施例一的丹參提取物，實(shí)施例一的三七皂苷提取物。
試劑紅四氮唑(TTC)，為淡黃色粉末，北京馬氏精細(xì)化學(xué)品有限公司產(chǎn)品，批號(hào)011102。
3、儀器XTT實(shí)體顯微鏡，云南光學(xué)儀器廠產(chǎn)品；AEG-220型電子分析天平，日本Shimadzu公司產(chǎn)品；307-6臺(tái)式牙科車，上海齒科醫(yī)械廠產(chǎn)品；HZQ-C空氣浴振蕩器，哈爾濱東明醫(yī)療儀器廠產(chǎn)品。
(二)實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果1、分組及給藥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按體重隨機(jī)分組。各組動(dòng)物均于術(shù)后30分鐘舌下靜脈給藥，術(shù)后2小時(shí)和23小時(shí)腹腔注射給藥二次。各藥物均以生理鹽水稀釋至所需濃度，注射劑量采用0.4ml/100g體重。
2、大腦中動(dòng)脈血栓模型制作大鼠腹腔注射10％水合氯醛溶液(350mg/kg)麻醉，右側(cè)臥位固定，在眼外眥和外耳道連線中點(diǎn)作一弧形切口，長約1.5cm，夾斷顳肌并切除，暴露顳骨，于實(shí)體顯微鏡下，用牙科鉆在顴骨與顳鱗骨接合處靠近口側(cè)1mm處作一直徑2.5mm的骨窗，清理殘?jiān)?，暴露大腦中動(dòng)脈(位于嗅束及大腦下靜脈之間)，置一小片塑料薄膜保護(hù)血管周圍組織。將吸有50％氯化鐵溶液10μL的小片定量濾紙敷在此段大腦中動(dòng)脈上，30min后取下濾紙，用生理鹽水沖洗局部組織，逐層縫合，回籠飼養(yǎng)。室溫控制在24℃。
3、神經(jīng)癥狀評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物在術(shù)后24h，進(jìn)行行為檢測。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)①提鼠尾觀察前肢屈曲情況，如雙前肢對(duì)稱前伸，記為0分；如手術(shù)對(duì)側(cè)前肢出現(xiàn)肩屈曲、肘屈曲、肩內(nèi)旋或兼具，記為1分。②將動(dòng)物置于平面上，分別推雙肩向?qū)?cè)移動(dòng)，檢查阻力。如雙側(cè)阻力對(duì)等且有力，記為0分；如手術(shù)對(duì)側(cè)阻力下降，記為1分。③將動(dòng)物兩前肢置一金屬網(wǎng)上，觀察肌張力。雙側(cè)肌張力對(duì)等且有力為0分；手術(shù)對(duì)側(cè)前肢肌張力下降記為1分。④提鼠尾，動(dòng)物有不停地向手術(shù)對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)者，記為1分。根據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分，滿分為4分，分?jǐn)?shù)越高，動(dòng)物的行為障礙越嚴(yán)重。
4、腦梗塞范圍的測定動(dòng)物經(jīng)行為評(píng)分后，斷頭取腦。去掉嗅球、小腦和低位腦干后的剩余部分在4℃以下冠狀切成5片，并迅速將腦片置于TTC染液中(每5ml染液中含4％TTC 1.5ml，1M K2HPO40.1ml，其余加蒸餾水至刻度)，37℃避光溫孵30分鐘，取出后置于10％甲醛液中避光保存24h。經(jīng)染色后非缺血區(qū)為玫瑰紅色，梗塞區(qū)為白色。將白色組織仔細(xì)挖下稱重，以梗塞組織重量占全腦重量及患側(cè)腦重量的百分比作為腦梗塞范圍。
5、結(jié)果上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果用x±s表示，統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)采用組間比較t檢驗(yàn)，結(jié)果見表1和表2。
表1 幾種中藥提取物對(duì)MCAO大鼠神經(jīng)癥狀的影響(x±s)

注與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01；與丹參提取物組相比，#P＜0.05，##P＜0.01；與三七皂苷提取物組相比，&P＜0.05，&&P＜0.01表2 幾種中藥提取物對(duì)MCAO大鼠腦梗塞范圍的影響(x±s)

注與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01；與丹參提取物組相比，#P＜0.05，##P＜0.01；與三七皂苷提取物組相比，&P＜0.05，&&P＜0.01以上表1及表2的結(jié)果顯示，各給藥組都具有明顯的抗腦缺血作用，而本發(fā)明組合物的療效最好。
本發(fā)明采用大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗死模型及體外灌流法，比較了本發(fā)明中藥組合物、丹參提取物、三七皂苷提取物的抗心肌缺血作用。結(jié)果顯示，本發(fā)明中藥組合物具有明顯的抗心肌缺血作用，其療效優(yōu)于單獨(dú)使用丹參提取物或三七皂苷提取物，表明本發(fā)明中藥組合物具有較強(qiáng)的協(xié)同作用。
實(shí)驗(yàn)例2幾種中藥提取物抗心肌缺血作用的實(shí)驗(yàn)研究1、分組及給藥Wister雄性大鼠70只，體重250.8±24.6，按體重隨機(jī)分為7組生理鹽水對(duì)照組；實(shí)施例二的丹參提取物組；實(shí)施例二的三七皂苷提取物組；實(shí)施例一中藥組合物；實(shí)施例二中藥組合物。各藥物均以生理鹽水稀釋至所需濃度，給藥量為4ml/kg，尾靜脈給藥。
2、方法(1)、大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗死模型動(dòng)物戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉(45mg/kg)，仰位固定。氣管插管，在胸骨左側(cè)作2cm的縱切口，近胸骨側(cè)剪斷第3、第4勒軟骨，打開胸腔后，連接人工呼吸機(jī)(通氣量2ml/100g，50次/min)。剪開心包膜，暴露心臟，冠狀動(dòng)脈左前降支根部穿線以備結(jié)扎，記錄標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)聯(lián)心電圖，穩(wěn)定10分鐘，結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支，關(guān)閉胸腔。用針筒吸出動(dòng)物喉部分泌物，使動(dòng)物恢復(fù)自主呼吸。結(jié)扎冠狀動(dòng)脈15min后，靜脈給藥。結(jié)扎冠狀動(dòng)脈4小時(shí)后，摘取心臟，在結(jié)扎線以下橫切5片，進(jìn)行氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)染色，計(jì)算心肌梗死區(qū)面積占心室及心臟面積的百分比，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(t檢驗(yàn))。
(2)、離體langendorff心臟灌流法參考藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)第三版進(jìn)行。
3、結(jié)果(1)、對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗塞范圍的影響，結(jié)果見表3。
表3 各種提取物對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗塞范圍的影響(x±s)

注與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01；與丹參提取物組相比，#P＜0.05，##P＜0.01；與三七皂苷提取物組相比，&P＜0.05，&&P＜0.01(2)、對(duì)離體豚鼠心臟冠脈流量及心率的影響，結(jié)果見表4。
表4 各種提取物對(duì)離體豚鼠心臟冠脈流量及心率的影響(x±s)


注與丹參提取物組相比，*P＜0.05，**P＜0.01；與三七皂苷提取物組相比，#P＜0.05，##P＜0.01。
以上表3及表4的結(jié)果顯示，各給藥組都具有明顯的抗心肌缺血作用，而本發(fā)明組合物的療效最好。
具體實(shí)施例方式
參考下列實(shí)施例將更易于理解本發(fā)明，給出實(shí)施例是為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例一丹參提取物的制備取丹參飲片或粉碎的丹參，加水煎煮2次，每次加藥材重量6.5倍量水，每次2小時(shí)；合并提取液，用酸調(diào)節(jié)pH為2，放冷，濾過；濾液上樹脂體積相當(dāng)于生藥3倍的AB-8型大孔樹脂(天津南開大學(xué)樹脂廠生產(chǎn))柱，先用1.5倍柱體積水沖洗，水洗液棄去，再用2.5倍柱體積的95％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液減壓濃縮至浸膏比重1.15，減壓干燥，即得丹參提取物。該丹參提取物的丹參素含量4.5％，總酚酸含量57.1％，丹酚酸B含量27.5％。
三七皂苷提取物的制備取三七飲片，粉碎，加生藥重量3倍量的水浸泡，用酸調(diào)pH4.0，以每克生藥加入10U的量加入纖維素酶，充分?jǐn)嚢?，?0℃水浴3小時(shí)，提取液備用；提取后殘?jiān)偌铀?0℃下回流提取兩次，第一次為生藥重量7倍量水，第二次為6倍量生藥重量水，每次2小時(shí)，合并前后提取液，棄去殘?jiān)?；提取液?0℃減壓濃縮至藥材1倍量體積，濾過；濾液加水稀釋至藥材2倍量體積，離心，取澄清液；澄清液上D-941離子交換樹脂(山東魯抗樹脂分廠)柱，用藥材2.5倍量體積50％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液再上AB-8型大孔樹脂(天津南開大學(xué)樹脂廠生產(chǎn))柱，先用藥材4倍量體積的水沖洗，棄去，再用藥材4倍量體積的50％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；洗脫液于70℃減壓濃縮至比重為1.15的浸膏，干燥，得三七提取物，其三七總皂苷含量為83.7％，三七皂苷R1含量為6.8％，人參皂苷Re含量為3.8％，人參皂苷Rg1含量為34.3％，人參皂苷Rb1含量為30.1％，人參皂苷Rd含量為8.8％。
黃芪皂苷提取物的制備從市場購得黃芪提取物，經(jīng)進(jìn)一步精制(滕興隆等，黑龍江醫(yī)藥，2002，15(5)340)，得黃芪皂苷提取物。該黃芪皂苷提取物中黃芪甲苷含量為9.5％，黃芪皂苷的含量為88.9％。
取上述黃芪皂苷提取物4.1g、上述丹參提取物2.4g、上述三七皂苷提取物0.5g、天然冰片0.5g，混合均勻，冷凍干燥，得中藥組合物。
實(shí)施例二丹參提取物的制備取丹參飲片或粉碎的丹參，加水超聲提取2次，每次加藥材重量6倍量水，每次40分鐘；合并提取液，用酸調(diào)節(jié)pH為2.5，放冷，濾過；濾液上樹脂體積相當(dāng)于生藥3倍的D101型大孔樹脂(天津南開大學(xué)樹脂廠生產(chǎn))柱，先用1.0倍柱體積水沖洗，水洗液棄去，再用3倍柱體積的95％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液減壓濃縮至浸膏比重1.15，減壓干燥，即得丹參提取物。該丹參提取物的丹參素含量4.6％，總酚酸含量54.6％，丹酚酸B含量26.4％。
三七皂苷提取物的制備取三七飲片，粉碎，加生藥重量3.5倍量的水浸泡，用酸調(diào)pH4.5，以每克生藥加入12U的量加入纖維素酶，充分?jǐn)嚢?，?0℃水浴3小時(shí)，提取液備用；提取后殘?jiān)偌?5％乙醇在90℃下回流提取兩次，第一次為生藥重量7倍量的75％乙醇，第二次為6倍量75％乙醇，每次2小時(shí)，合并前后提取液，棄去殘?jiān)?；提取液?0℃減壓濃縮至藥材2倍量體積，濾過；濾液上D-941離子交換樹脂(山東魯抗樹脂分廠)柱，用藥材2.5倍量體積60％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液再上D101型大孔樹脂(天津南開大學(xué)樹脂廠生產(chǎn))柱，先用藥材4倍量體積的水沖洗，棄去，再用藥材4倍量體積的60％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；洗脫液于70℃減壓濃縮至比重為1.15的浸膏，干燥，得三七提取物，其三七總皂苷含量為81.5％，三七皂苷R1含量為6.9％，人參皂苷Re含量為3.4％，人參皂苷Rg1含量為32.2％，人參皂苷Rb1含量為30.2％，人參皂苷Rd含量為8.7％。
黃芪皂苷提取物的制備同實(shí)施例一。
取上述黃芪皂苷提取物4.1g、上述丹參提取物2.4g、上述三七皂苷提取物0.5g、降香油0.5g，加9.0g聚乙二醇-6000混合均勻，熔融，冷卻后得中藥組合物。
實(shí)施例三丹參提取物的制備取丹參飲片或粉碎的丹參，加水煎煮2次，每次加藥材重量6.5倍量水，每次2小時(shí)；合并提取液，用酸調(diào)節(jié)pH為2，放冷，濾過；濾液上樹脂體積相當(dāng)于生藥3倍的ZTC型大孔樹脂(天津南開大學(xué)樹脂廠生產(chǎn))柱，先用1.5倍柱體積水沖洗，水洗液棄去，再用2.5倍柱體積的95％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液減壓濃縮至浸膏比重1.12，減壓干燥，即得丹參提取物。該丹參提取物的丹參素含量4.1％，總酚酸含量53.6％，丹酚酸B含量24.8％。
三七皂苷提取物的制備取三七飲片，粉碎，加生藥重量3.5倍量的水浸泡，用酸調(diào)pH4.5，以每克生藥加入10U的量加入纖維素酶，充分?jǐn)嚢?，?0℃水浴3.5小時(shí)，提取液備用；提取后殘?jiān)偌铀?0℃下超聲提取兩次，第一次為生藥重量7倍量水，第二次為6倍量水，每次30分鐘，合并前后提取液，棄去殘?jiān)?；提取液?0℃減壓濃縮至藥材2倍量體積，離心；澄清液上AB-8型大孔樹脂(天津南開大學(xué)樹脂廠生產(chǎn))柱，先用藥材4倍量體積的水沖洗，棄去，再用藥材4倍量體積的65％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；洗脫液再上D-941離子交換樹脂(山東魯抗樹脂分廠)柱，用藥材2.5倍量體積65％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液于70℃減壓濃縮至比重為1.15的浸膏，干燥，得三七提取物，其三七總皂苷含量為82.9％，三七皂苷R1含量為6.2％，人參皂苷Re含量為3.1％，人參皂苷Rg1含量為33.4％，人參皂苷Rb1含量為31.2％，人參皂苷Rd含量為8.9％。
黃芪皂苷提取物的制備同實(shí)施例一。
取上述黃芪皂苷提取物4.5g、上述丹參提取物2.1g、上述三七皂苷提取物0.6g、天然冰片0.5g，混合均勻，冷凍干燥，得中藥組合物。
實(shí)施例四取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物4.7g、實(shí)施例一的丹參提取物1.7g、實(shí)施例二的三七皂苷提取物0.7g、天然冰片0.5g，混合均勻，冷凍干燥，得中藥組合物。
實(shí)施例五取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物3.0g、實(shí)施例一的丹參提取物3.2g、實(shí)施例三的三七皂苷提取物0.9g、冰片0.4g，混合均勻，冷凍干燥，得中藥組合物。
實(shí)施例六取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物3.8g、實(shí)施例二的丹參提取物2.7g、實(shí)施例二的三七皂苷提取物0.6g、降香油0.5g，加12.0g聚乙二醇-6000混合均勻，熔融，冷卻后得中藥組合物。
實(shí)施例七取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物4.1g、實(shí)施例一的丹參提取物2.4g、實(shí)施例一的三七皂苷提取物0.5g、天然冰片0.5g，與18.5g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機(jī)滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸1000粒。
實(shí)施例八取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物3.2g、實(shí)施例二的丹參提取物3.0g、實(shí)施例二的三七皂苷提取物0.5g、天然冰片0.5g，與18.5g聚乙二醇-4000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機(jī)滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸1000粒。
實(shí)施例九取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物4.5g、實(shí)施例三的丹參提取物2.1g、實(shí)施例一的三七皂苷提取物0.6g、天然冰片0.5g，與18.0g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機(jī)滴罐中，藥液滴至6～8℃甲基硅油中，除油，制得滴丸1000粒。
實(shí)施例十取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物5.0g、實(shí)施例一的丹參提取物1.9g、實(shí)施例二的三七皂苷提取物0.4g、天然冰片0.5g，與4.0g聚乙二醇-4000和14.0g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機(jī)滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸1000粒。
實(shí)施例十一取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物4.3g、實(shí)施例三的丹參提取物2.2g、實(shí)施例一的三七皂苷提取物0.7g、天然冰片0.5g，與18.0g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機(jī)滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸1000粒。
實(shí)施例十二取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物3.4g、實(shí)施例三的丹參提取物2.8g、實(shí)施例二的三七皂苷提取物0.5g、冰片0.5g，與18.5g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機(jī)滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸1000粒。
實(shí)施例十三取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物4.3g、實(shí)施例一的丹參提取物2.4g、實(shí)施例一的三七皂苷提取物0.4g、降香油0.5g，與18.0g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機(jī)滴罐中，藥液滴至6～8℃甲基硅油中，除油，制得滴丸1000粒。
實(shí)施例十四取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物4.2g、實(shí)施例二的丹參提取物2.6g、實(shí)施例二的三七皂苷提取物0.6g、降香油0.5g，與3.5g聚乙二醇-4000和14.5g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機(jī)滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸1000粒。
實(shí)施例十五取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物13.6g、實(shí)施例一的丹參提取物8.4g、實(shí)施例一的三七皂苷提取物1.8g、天然冰片1.2g、甘露醇5.5g、依地酸鈣鈉0.9g和蒸餾水1ml，上述組分混勻后，冷凍干燥，分裝1000支，即得。
實(shí)施例十六取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物15.3g、實(shí)施例二的丹參提取物6.8g、實(shí)施例二的三七皂苷提取物1.7g、天然冰片1.2g、低分子右旋糖酐5.5g、依地酸鈣鈉0.9g和蒸餾水1ml，上述組分混勻后，冷凍干燥，分裝1000支，即得。
實(shí)施例十七取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物11.4g、實(shí)施例三的丹參提取物9.8g、實(shí)施例一的三七皂苷提取物2.6g、冰片1.2g、葡萄糖5.5g、硫代硫酸鈉0.9g和蒸餾水1ml，上述組分混勻后，冷凍干燥，分裝1000支，即得。
實(shí)施例十八取降香油1.5g，加入到13ml飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌溶解，濾過，濾液低溫干燥，得降香油和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。除上述降香油和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末外，再取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物13.5g、實(shí)施例一的丹參提取物8.2g、實(shí)施例一的三七皂苷提取物1.8g、甘露醇5.5g、依地酸鈣鈉0.9g和蒸餾水2ml，上述組分混勻后，冷凍干燥，分裝1000支，即得。
實(shí)施例十九取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物8.2g、實(shí)施例一的丹參提取物4.8g、實(shí)施例一的三七皂苷提取物1.2g、冰片0.8g，與210g微晶纖維素混合均勻，加3％聚維酮乙醇溶液制軟材，過18目篩制顆粒，60℃干燥30～45分鐘，整粒，加入25g滑石粉，混勻，充于1000粒膠囊中，即得。
實(shí)施例二十取實(shí)施例一的黃芪皂苷提取物8.2g、實(shí)施例一的丹參提取物4.8g、實(shí)施例二的三七皂苷提取物1.2g、天然冰片0.8g，與65g微晶纖維素和20g硬脂酸鎂混合均勻，壓制成1000片，即得。
權(quán)利要求
1.一種治療心腦血管疾病的中藥組合物，按重量百分比由下列組分組成黃芪皂苷提取物 35.0％～75％，丹參提取物 15.0％～55.0％，三七皂苷提取物 2.5％～15.0％，天然冰片或降香油2.5％～15.0％；其中丹參提取物的丹參素含量為3％～10％，丹參總酚酸含量為50％～75％，丹酚酸B含量為20％～45％；三七皂苷提取物的總皂苷含量為70％～98％；黃芪皂苷提取物的總皂苷含量為70％～98％，黃芪甲苷含量為5％～15％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述中藥組合物，其特征在于，所述各組分的重量百分比為黃芪皂苷提取物 45.0％～65.0％，丹參提取物 25.0％～45.0％，三七皂苷提取物 5.0％～10.0％，天然冰片或降香油5.0％～10.0％；其中丹參提取物的丹參素含量為3％～10％，丹參總酚酸含量為50％～75％，丹酚酸B含量為20％～45％；三七皂苷提取物的總皂苷含量為70％～98％；黃芪皂苷提取物的總皂苷含量為70％～98％，黃芪甲苷含量為5％～15％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述中藥組合物，其特征在于，所述各組分的重量百分比為黃芪皂苷提取物 54％，丹參提取物 32％，三七皂苷提取物 7％，天然冰片或降香油7％；其中丹參提取物的丹參素含量為3％～10％，丹參總酚酸含量為50％～75％，丹酚酸B含量為20％～45％；三七皂苷提取物的總皂苷含量為70％～98％；黃芪皂苷提取物的總皂苷含量為70％～98％，黃芪甲苷含量為5％～15％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一權(quán)利要求所述的中藥組合物，其特征在于，所述三七皂苷提取物中三七皂苷R1含量為2％～10％，人參皂苷Re含量為2％～6％，人參皂苷Rg1含量為15％～40％，人參皂苷Rb1含量為15％～40％，人參皂苷Rd含量為5％～12％，其總皂苷的含量在80％以上。
5.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一權(quán)利要求所述的中藥組合物，其特征在于，所述丹參提取物由下述方法制備取丹參飲片或粉碎的丹參，加水煎煮或超聲提取2～3次，每次加藥材重量5～7倍量水，每次0.5～2小時(shí)；合并提取液，用酸調(diào)節(jié)pH為1.5～4，放冷，濾過；濾液上樹脂體積相當(dāng)于生藥2～4倍的大孔樹脂柱，先用1～1.5倍柱體積水沖洗，水洗液棄去，再用2～3倍柱體積的85～95％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液減壓濃縮，干燥，即得。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的中藥組合物，其特征在于，所述大孔樹脂為D101、AB-8或ZTC型大孔樹脂。
7.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一權(quán)利要求所述的中藥組合物，其特征在于，所述三七皂苷提取物由下述方法制備取粉碎的三七，加水浸泡，用酸調(diào)pH3～5.5，以每克生藥加入5～15U的量加入纖維素酶，充分?jǐn)嚢瑁?0～60℃水浴2～4小時(shí)，提取液備用；提取后殘?jiān)偌铀蛘呒?0％～90％乙醇加熱回流提取或超聲提取1～3次，合并前后提取液；提取液減壓濃縮至藥材1～3倍量體積，離心或?yàn)V過，取澄清液或?yàn)V液；澄清液或?yàn)V液上陰離子交換樹脂柱，用40％～70％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液上大孔樹脂柱，先用水沖洗，再用40～70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；洗脫液減壓濃縮，干燥，即得。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的中藥組合物，其特征在于，所述陰離子交換樹脂為D-941離子交換樹脂；所述大孔樹脂為D101、AB-8或ZTC型大孔樹脂。
9.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一權(quán)利要求所述的中藥組合物為活性成分制成的滴丸，其特征在于，所述滴丸由如下方法制備而成按規(guī)定比例取上述黃芪皂苷提取物、丹參提取物、三七皂苷提取物和天然冰片或者降香油，與藥物總重量2～4倍的聚乙二醇-6000或者聚乙二醇-4000或者兩者的混合物混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機(jī)滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟或甲基硅油中，除油，即得。
10.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一權(quán)利要求所述的中藥組合物為活性成分制成的粉針劑。
全文摘要
本發(fā)明公開一種治療心腦血管疾病的中藥組合物，它由黃芪皂苷提取物35.0％～75％，丹參提取物15.0％～55.0％，三七皂苷提取物2.5％～15.0％，天然冰片或降香油2.5％～15.0％組成，其中丹參提取物的丹參素含量為3％～10％，丹參總酚酸含量為50％～75％，丹酚酸B含量為20％～45％；三七皂苷提取物的總皂苷含量為70％～98％；黃芪皂苷提取物的總皂苷含量為70％～98％，黃芪甲苷含量為5％～15％。該藥物具有明顯的抗腦缺血、心肌缺血作用，其療效優(yōu)于單獨(dú)使用丹參提取物或三七皂苷提取物，為臨床提供了一種療效更好、更加方便的中藥組合物及其制劑。
文檔編號(hào)A61K9/20GK1919238SQ20051001483
公開日2007年2月28日 申請(qǐng)日期2005年8月24日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月24日
發(fā)明者葉正良, 李旭, 張文生, 魏峰, 李德坤 申請(qǐng)人:天津天士力現(xiàn)代中藥研究開發(fā)有限公司