專利名稱：一種消滅核酸污染的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體是一種核酸污染的防范措施。
PCR(polymerase chain reaction，聚合酶鏈反應(yīng))及其衍生的RT-PCR(reverse transcription-PCR，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng))是極其靈敏的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)手段。理論上可以檢測(cè)到單個(gè)的核酸分子，而且成本低廉，其優(yōu)越性不言而寓。但與此同時(shí)，儀器、器皿、耗材、實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地等存在的極微小的核酸污染都可能造成假陽(yáng)性結(jié)果。而PCR、RT-PCR等本身又依賴于對(duì)目的核酸片段進(jìn)行數(shù)十億倍擴(kuò)增，這進(jìn)一步增加了污染的可能性。
現(xiàn)有消除核酸污染的方法主要是紫外線照射法、酸浸泡法和大量清水無(wú)限稀釋法。紫外線照射法的缺點(diǎn)是紫外線直線傳播注定了會(huì)留下大量死角。酸浸泡法的缺點(diǎn)是對(duì)金屬腐蝕嚴(yán)重；結(jié)束時(shí)必須輔以水洗，而水洗可能帶來(lái)新的核酸污染；廢水排放后會(huì)污染環(huán)境；整個(gè)過(guò)程難以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。大量清水無(wú)限稀釋法的缺點(diǎn)是浪費(fèi)水資源；且難以保證徹底清除核酸污染。目前，我國(guó)禁止將PCR方法用于臨床診斷，污染問(wèn)題難以解決是主要原因之一。
本發(fā)明的目的在于有效消滅核酸污染，從而保證PCR、RT-PCR、原位雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法的可靠性，為將來(lái)批準(zhǔn)PCR的臨床應(yīng)用打下基礎(chǔ)。
本發(fā)明的目的是采用下述技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的首先，利用揮發(fā)性酸(鹽酸、硝酸、醋酸等)的蒸氣在常壓、室溫或稍加熱(≤100℃)條件下熏蒸實(shí)驗(yàn)儀器、器皿、耗材、實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地等，徹底消滅污染的DNA和RNA。本人通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)常壓、室溫下37.5％鹽酸的飽合蒸氣作用15秒或65％硝酸的飽合蒸氣作用30秒或冰醋酸的飽和蒸氣作用4小時(shí)即可徹底消滅污染的DNA和RNA。
然后，吹入經(jīng)紫外線照射并過(guò)濾獲得的潔凈空氣或氮?dú)鈴氐讕ё咚嵫艉髮?shí)驗(yàn)儀器、器皿、耗材、實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地殘留的揮發(fā)性酸及其蒸氣。本步驟亦可在常壓、室溫或稍加熱(≤100℃)條件下進(jìn)行。
最后，利用水吸收法或堿吸收法(堿石灰等)處理帶酸的空氣，使其重復(fù)利用，或多次除酸，保證無(wú)酸后放空。
經(jīng)以上處理后的實(shí)驗(yàn)儀器、器皿、耗材、實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地等可直接投入使用，無(wú)須進(jìn)一步水洗。如有必要水洗時(shí)，可先進(jìn)行水洗然后利用本發(fā)明的步驟消滅核酸污染。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于1.酸可以到達(dá)每一個(gè)角落，不留死角。
2.消滅核酸污染效率高。
3.適用范圍廣，對(duì)于被熏蒸的物品耐高溫性、耐腐蝕性等要求不高。
4.適用于大型儀器、器皿、耗材、房間等核酸污染的清除，也適用于微型的生物芯片。
5.步驟簡(jiǎn)單、避免二次核酸污染。
6.易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。
7.成本低廉。
權(quán)利要求
1.一種消滅核酸污染的方法其特征是利用揮發(fā)性酸(鹽酸、硝酸、醋酸等)熏蒸實(shí)驗(yàn)儀器、器皿、耗材、實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地等，徹底消滅污染的DNA和RNA。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述熏蒸之后利用潔凈空氣或氮?dú)鈱]發(fā)性酸帶走。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的帶有揮發(fā)性酸的空氣或氮?dú)饨?jīng)除酸處理后循環(huán)使用或經(jīng)徹底除酸后放空。
全文摘要
一種消滅核酸污染的方法利用揮發(fā)性酸的蒸氣熏蒸實(shí)驗(yàn)儀器、器皿、耗材、實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地等，可以徹底消滅污染的DNA和RNA。然后利用潔凈空氣將揮發(fā)性酸帶走，酸吸收裝置將空氣凈化后循環(huán)使用。本方法可保證PCR、RT－PCR、原位雜交等不會(huì)因?qū)嶒?yàn)儀器、器皿、耗材、實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地等存在核酸污染而出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，亦可使生物芯片的重復(fù)使用成為可能。
文檔編號(hào)A61L2/20GK1415381SQ0213304
公開(kāi)日2003年5月7日 申請(qǐng)日期2002年9月26日 優(yōu)先權(quán)日2002年9月26日
發(fā)明者陳 光 申請(qǐng)人:陳 光