專利名稱：一種用于pcr擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種PCR擴(kuò)增儀反應(yīng)裝置，更具體的講是一種用于PCR擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱。
背景技術(shù)：
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction),簡稱PCR,是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段?？煽醋魃矬w外的特殊DNA復(fù)制。PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是利用DNA在體外攝氏 95度時(shí)解旋，55度時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至72度左右，DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5’-3’)的方向合成互補(bǔ)鏈。由PCR技術(shù)制造的PCR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備，能在95 °C，55°C，72 °C之間很好地進(jìn)行控制。PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性一退火一延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93°C左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55°C左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合；③引物的延伸:DNA模板一引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基互補(bǔ)配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈，重復(fù)循環(huán)變性一退火一延伸三過程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2 4分鐘，2 3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍，因此PCR技術(shù)具有特異、敏感、精準(zhǔn)、快速、簡捷等突出優(yōu)點(diǎn)。目前DNA擴(kuò)增儀主要有變溫加熱和恒溫浴熱兩種方式。其中最常用的為變溫加熱，其采用中硅加熱，可以直接進(jìn)行溫度的控制，速度快，但其采用金屬介質(zhì)，提高了導(dǎo)熱性，但是與反應(yīng)管無法做到無縫接觸，可能導(dǎo)致反應(yīng)管加熱不均勻。而恒溫浴熱以采用水浴和油浴為主，可以與反應(yīng)管無縫接觸，但是其進(jìn)行步驟轉(zhuǎn)變時(shí)，通過機(jī)械臂將試管快速的從一個(gè)恒溫槽移動到另一個(gè)恒溫槽，但是這個(gè)過程要準(zhǔn)確且快速，因?yàn)榭赡軐?dǎo)致酶失去活性，因此此種方法操作誤差大，操作程序多，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，設(shè)備容易出現(xiàn)故障。因此需要一種能夠解決上述問題的一種PCR擴(kuò)增儀用液體反應(yīng)恒溫箱。申請?zhí)枮?00420044241.8公開了一種用于PCR擴(kuò)增儀液體反應(yīng)恒溫箱，其包括恒溫槽、支撐住、反應(yīng)管和隔熱板，支撐住設(shè)置在恒溫反應(yīng)槽的中心，反應(yīng)管呈螺旋狀均勻的纏繞在支撐住的可隔熱柱面上；恒溫槽內(nèi)支撐住周圍的區(qū)域由三塊隔熱板均隔為三個(gè)呈不同溫度的恒溫反應(yīng)區(qū)，恒溫槽內(nèi)的隔熱板上對應(yīng)反應(yīng)管的位置處設(shè)有使反應(yīng)管通過的凹槽，反應(yīng)也可在反應(yīng)觀眾勻速流動，按反應(yīng)管繞支撐住面進(jìn)入的先后順序，上述三個(gè)反應(yīng)區(qū)分別為高溫變性恒溫反應(yīng)區(qū)，低溫退火恒溫反應(yīng)區(qū)和中溫延伸恒溫反應(yīng)區(qū)。[0008]上述專利有效解決了變溫加熱方式中不能與反應(yīng)管無縫接觸問題和恒溫浴熱方式中操作性差，誤差大的問題。但是上述專利中反應(yīng)管纏繞在支撐住的可隔熱柱面上，這樣就導(dǎo)致了反應(yīng)管無法完美的與液體進(jìn)行無縫接觸，而且設(shè)置一個(gè)支撐住，使得設(shè)備結(jié)構(gòu)復(fù)雜，而且成本增加。
發(fā)明內(nèi)容針對以上不足，本實(shí)用新型提供了一種可以使反應(yīng)管與恒溫室內(nèi)加熱液體完美無縫接觸、結(jié)構(gòu)簡單且制作成本低的PCR擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱。本實(shí)用新型是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:一種用于PCR擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱，包括筒體、反應(yīng)管和隔熱板，反應(yīng)管呈螺旋狀均勻的架設(shè)在筒體內(nèi)，隔熱板至少為3塊，隔熱板的一側(cè)邊與筒體內(nèi)壁密封連接，隔熱板的另一側(cè)邊與其他隔熱板的另一側(cè)邊密封相連，隔熱板與所述筒體組成若干恒溫室，隔熱板上設(shè)有與反應(yīng)管相配合的小孔。上述隔熱板為6塊，6塊隔熱板與筒體組成6個(gè)恒溫室，6個(gè)恒溫室可以根據(jù)每一步驟的反應(yīng)時(shí)間調(diào)整恒溫室的個(gè)數(shù)，一般為每一步2個(gè)恒溫室。上述隔熱板的小孔與反應(yīng)管之間設(shè)有密封圈，保證隔熱板之間的密封性。上述反應(yīng)管入口連接有無菌盒，用于盛放待反應(yīng)DNA。上述反應(yīng)管出口處設(shè)有控制閥，可以根據(jù)不同需要調(diào)整反應(yīng)管內(nèi)液體流動速度，控制反應(yīng)時(shí)間。
·[0017]上述恒溫室內(nèi)設(shè)有加熱器、溫度傳感器，對恒溫室內(nèi)溫度進(jìn)行監(jiān)控。本實(shí)用新型的有益效果是:本實(shí)用新型撤除了對比文件中的支撐柱，簡化了設(shè)備、節(jié)約了成本，同時(shí)本實(shí)用新型的反應(yīng)管為懸空放置，可以與恒溫液體進(jìn)行完美的無縫接觸，保證反應(yīng)質(zhì)量。

圖1為本實(shí)用新型側(cè)視圖；圖2為本實(shí)用新型俯視圖；圖中:1-筒體,2_反應(yīng)管,3_隔熱板,4_恒溫室,5_小孔,6_無菌盒,7_控制閥，8-加熱器，9-溫度傳感器。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對本實(shí)用新型做進(jìn)一步說明，以便本領(lǐng)域技術(shù)人員可以更好的了解本實(shí)用新型，但并不因此限制本實(shí)用新型。實(shí)施例1一種用于PCR擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱，包括筒體1、反應(yīng)管2和隔熱板3，反應(yīng)管2呈螺旋狀均勻的架設(shè)在筒體I內(nèi)，隔熱板3為6塊，隔熱板3的一側(cè)邊與筒體I內(nèi)壁密封連接，隔熱板3的另一側(cè)邊與其他隔熱板3的另一側(cè)邊密封相連，6塊隔熱板3與筒體I組成6恒溫室4，一般每一步反應(yīng)需要2個(gè)恒溫室4，但是特殊情況下可以根據(jù)每一步驟的反應(yīng)時(shí)間調(diào)整恒溫室4的個(gè)數(shù)，如使其中相鄰3個(gè)恒溫室4采用統(tǒng)一溫度。恒溫室4內(nèi)設(shè)有加熱器8、溫度傳感器9，對恒溫室4內(nèi)溫度進(jìn)行監(jiān)控，隔熱板3上設(shè)有與反應(yīng)管2相配合的小孔5，小孔5與反應(yīng)管2之間設(shè)有密封圈，保證隔熱板3之間的密封性，反應(yīng)管2入口連接有無菌盒6，用于盛放待反應(yīng)DNA，反應(yīng)管2出口處設(shè)有控制閥7，可以根據(jù)不同需要調(diào)整反應(yīng)管2內(nèi)液體流動速度，控制 反應(yīng)時(shí)間。
權(quán)利要求1.一種用于PCR擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱，包括筒體、反應(yīng)管和隔熱板，所述反應(yīng)管呈螺旋狀均勻的架設(shè)在筒體內(nèi)，其特征在于，所述隔熱板至少為3塊，所述隔熱板的一側(cè)邊與筒體內(nèi)壁密封連接，隔熱板的另一側(cè)邊與其他隔熱板的另一側(cè)邊密封相連，所述隔熱板與所述筒體組成若干恒溫室，所述隔熱板上設(shè)有與反應(yīng)管相配合的小孔。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于PCR擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱，其特征在于:所述隔熱板為6塊，6塊隔熱板與筒體組成6個(gè)恒溫室。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種用于PCR擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱，其特征在于:所述隔熱板的小孔與反應(yīng)管之間設(shè)有密封圈。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種用于PCR擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱，其特征在于:所述反應(yīng)管入口連接有無菌盒。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種用于PCR擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱，其特征在于:所述反應(yīng)管出口處設(shè)有控制閥。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種用于PCR擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱，其特征在于:所述恒溫室內(nèi)設(shè)有加熱器。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種用于PCR擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱，其特征在于:所述恒溫室內(nèi)設(shè)有溫度傳感器。
專利摘要本實(shí)用新型涉及一種PCR擴(kuò)增儀反應(yīng)裝置，更具體的講是一種用于PCR擴(kuò)增儀液體流動反應(yīng)恒溫箱，其包括筒體、反應(yīng)管和隔熱板，反應(yīng)管呈螺旋狀均勻的架設(shè)在筒體內(nèi)，隔熱板至少為3塊，隔熱板的一側(cè)邊與筒體內(nèi)壁密封連接，隔熱板的另一側(cè)邊與其他隔熱板的另一側(cè)邊密封相連，隔熱板與所述筒體組成若干恒溫室，隔熱板上設(shè)有與反應(yīng)管相配合的小孔。本實(shí)用新型的有益效果是本實(shí)用新型撤除了對比文件中的支撐柱，簡化了設(shè)備、節(jié)約了成本，同時(shí)本實(shí)用新型的反應(yīng)管為懸空放置，可以與恒溫液體進(jìn)行完美的無縫接觸，保證反應(yīng)質(zhì)量。
文檔編號C12M1/38GK203128581SQ20132026349
公開日2013年8月14日 申請日期2013年5月15日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月15日
發(fā)明者劉英姿, 李強(qiáng), 李玉梅, 葉春江 申請人:山東警察學(xué)院