專利名稱：干細(xì)胞多功能培養(yǎng)板的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及細(xì)胞培養(yǎng)板領(lǐng)域，具體為一種干細(xì)胞多功能培養(yǎng)板。
背景技術(shù)：
干細(xì)胞是一類具有自我更新的多潛能細(xì)胞，在一定條件下，它可以分化成多種功能細(xì)胞。根據(jù)干細(xì)胞的發(fā)育潛能分為三類全能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞和單能干細(xì)胞。干細(xì)胞為組織工程應(yīng)用提供種子細(xì)胞和為探索人類發(fā)育奧秘的有效工具，在基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用上都有著巨大的前景。在培養(yǎng)干細(xì)胞時(shí)，當(dāng)細(xì)胞增殖達(dá)到一定密度后，可以對(duì)其進(jìn)行凍存。細(xì)胞的及時(shí)凍存對(duì)于細(xì)胞運(yùn)輸和傳遞、保證細(xì)胞系的穩(wěn)定和細(xì)胞材料能被永久使用有重要的意義。常規(guī)凍存的方法是慢速凍存，即收集細(xì)胞后置于4°C預(yù)冷的冷凍液中，置于凍存盒內(nèi)-80°C約 12小時(shí)后，浸入液氮保存。慢速凍存因其方便、簡單而得廣泛的應(yīng)用。復(fù)蘇慢速凍存的細(xì)胞過程是37°C水浴解凍后，轉(zhuǎn)入新鮮培養(yǎng)基中，離心IOmin后重懸細(xì)胞接種于培養(yǎng)板。但是慢速凍存細(xì)胞在復(fù)蘇過程中存活的細(xì)胞比例偏低，尤其是在干細(xì)胞，如人胚胎干細(xì)胞，其復(fù)蘇效率低于30%。因此如何提高干細(xì)胞慢速凍存的復(fù)蘇效率是一個(gè)突出的問題。其中影響復(fù)蘇效率一個(gè)重要的因素就是細(xì)胞凍存液的毒性，因此改良凍存液的配方是降低細(xì)胞凍存液毒性的一個(gè)途徑，但是改良后的凍存液往往伴隨著成本的增加而且復(fù)蘇效率并沒有明顯的改善，對(duì)于一些稀少的細(xì)胞也很難滿足實(shí)驗(yàn)的需要。

實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型所解決的技術(shù)問題在于提供一種干細(xì)胞多功能培養(yǎng)板。該培養(yǎng)板可以快速縮短復(fù)蘇細(xì)胞的時(shí)間，并且可以同時(shí)復(fù)蘇多株細(xì)胞，并減少凍存細(xì)胞解凍后與細(xì)胞凍存液接觸的時(shí)間，提高復(fù)蘇效率，以解決上述背景技術(shù)中的問題。本實(shí)用新型所解決的技術(shù)問題采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)一種干細(xì)胞多功能培養(yǎng)板，包括上蓋、培養(yǎng)板和培養(yǎng)板孔，所述培養(yǎng)板上設(shè)培養(yǎng)板孔，所述培養(yǎng)板孔底面上設(shè)有一層濾膜，濾膜孔徑為0.4μπι;所述培養(yǎng)板右上角設(shè)有一直徑為13 18mm的取液孔，所述取液孔通過管道連接培養(yǎng)板孔底部，取液孔通過吸管接負(fù)壓抽吸器，可以輕易的將所有培養(yǎng)板孔的液體一次性快速吸走；所述培養(yǎng)板孔底部用極細(xì)九宮格(線條為壓跡，無顏色)劃分成九個(gè)區(qū)域，可以方便細(xì)胞克隆或細(xì)胞計(jì)數(shù)。有益效果本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡單，使用方便，能有效減少細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)步驟，不用再離心細(xì)胞就可以直接去除凍存液，添加新鮮培養(yǎng)基，從而大大縮短細(xì)胞復(fù)蘇操作的時(shí)間；由于可以設(shè)計(jì)多種規(guī)格，如單孔、4孔、6孔、12孔、24孔，達(dá)到同時(shí)復(fù)蘇相應(yīng)的細(xì)胞株數(shù)目的，適于大規(guī)模干細(xì)胞復(fù)蘇。同樣利用該板培養(yǎng)細(xì)胞，可以一次性給整板去除舊培養(yǎng)基，極大的節(jié)約了培養(yǎng)時(shí)換液的時(shí)間，不用為每個(gè)孔更換不同的吸管，節(jié)約了實(shí)驗(yàn)耗材，同時(shí)安全可靠。由于底部有九宮格，方便對(duì)細(xì)胞克隆或者細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，方便計(jì)算細(xì)胞復(fù)蘇效率。
圖I為本實(shí)用新型的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施方式
為了使本實(shí)用新型實(shí)現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體圖示，進(jìn)一步闡述本實(shí)用新型。參見圖1，一種干細(xì)胞多功能培養(yǎng)板，包括上蓋4、培養(yǎng)板I和培養(yǎng)板孔2,所述培養(yǎng)板I上設(shè)培養(yǎng)板孔2，所述培養(yǎng)板孔2底面上設(shè)有一層濾膜(圖中未示出)，濾膜孔徑為
O.4 μ m ;所述培養(yǎng)板I右上角設(shè)有一直徑為13 18_的取液孔3，所述取液孔3通過管道(圖中未示出)連接各個(gè)培養(yǎng)板孔2底部，取液孔3通過吸管接負(fù)壓抽吸器，可以輕易的將所有培養(yǎng)板孔2的液體一次性快速吸走；所述培養(yǎng)板孔2底部用極細(xì)九宮格(線條為壓跡，無顏色)劃分成九個(gè)區(qū)域，可以方便細(xì)胞克隆或細(xì)胞計(jì)數(shù)。使用時(shí)，37°C水浴解凍的細(xì)胞懸液加入每個(gè)培養(yǎng)板孔2后，吸管對(duì)準(zhǔn)取液孔3，連通負(fù)壓抽吸器，所有培養(yǎng)板孔 2的液體就可以一次性快速吸走，然后添加新鮮的培養(yǎng)基，輕輕混勻，即可置于37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)。以上顯示和描述了本實(shí)用新型的基本原理、主要特征和本實(shí)用新型的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本實(shí)用新型不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的只是說明本實(shí)用新型的原理，在不脫離本實(shí)用新型精神和范圍的前提下，本實(shí)用新型還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本實(shí)用新型范圍內(nèi)。本實(shí)用新型要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。
權(quán)利要求1.干細(xì)胞多功能培養(yǎng)板，包括上蓋、培養(yǎng)板和培養(yǎng)板孔，所述培養(yǎng)板上設(shè)培養(yǎng)板孔，其特征在于，所述培養(yǎng)板孔底面上設(shè)有一層濾膜，濾膜孔徑為0. 4 ym，所述培養(yǎng)板右上角設(shè)有一直徑為13 18mm的取液孔，所述取液孔通過管道連接培養(yǎng)板孔底部。
專利摘要干細(xì)胞多功能培養(yǎng)板，包括上蓋、培養(yǎng)板和培養(yǎng)板孔，所述培養(yǎng)板上設(shè)有培養(yǎng)板孔，所述培養(yǎng)板孔底面上設(shè)有一層濾膜，濾膜孔徑為0.4μm，所述培養(yǎng)板右上角設(shè)有一直徑為13~18mm的取液孔，所述取液孔通過管道連接培養(yǎng)板孔底部。本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡單，使用方便，能有效減少細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)步驟，不用再離心細(xì)胞就可以直接去除凍存液，添加新鮮培養(yǎng)基，從而大大縮短細(xì)胞復(fù)蘇操作的時(shí)間；同樣利用該板培養(yǎng)細(xì)胞，可以一次性給整板去除舊培養(yǎng)基，極大的節(jié)約了培養(yǎng)時(shí)換液的時(shí)間，不用為每個(gè)孔更換不同的吸管，節(jié)約了實(shí)驗(yàn)耗材，同時(shí)安全可靠。
文檔編號(hào)C12M3/00GK202465711SQ20122012479
公開日2012年10月3日 申請(qǐng)日期2012年3月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月29日
發(fā)明者盧光琇, 孫懿, 林戈 申請(qǐng)人:中南大學(xué)